羊水培养基

(word完整版)羊水培养基

羊水细胞和绒毛膜组织专用培养基使用说明书一。

产品介绍体外的羊水细胞与绒毛膜培养是每一个细胞遗传学实验室的重点工作，因为核型分析所需的中期（metaphase)染色体有赖于获得处于分裂状态下的细胞。

羊水穿刺与绒毛膜取样是现今主要的侵入性手段用于胎儿染色体异常的诊断.BIOAMF-2 是一种改良的培养基，专门用于培养原代(primary culture)羊水细胞与绒毛膜组织以用于产前诊断。

本培养基处于冷冻状态并已添加谷氨酰胺（glutamine)和各种抗生素,开瓶即可使用。

注意事项和声明1。

体外诊断用.本培养基不可用于治疗。

2。

如发现有任何沈淀物则请勿使用。

3。

使用本公司产品并不保证一定能取得任何有效的产前诊断结论.4. 如超过瓶上的使用期限则请勿使用。

二。

贮存和有效期BIOAMF—2培养基应保存于—20℃，有效期为18个月.溶解后应存放于2—8℃,并于1周内使用. 存放时注意避光。

使用方法三.使用范围BIOAMF-2培养基可用于:——初级羊水细胞培养-—传代羊水细胞培养-- 绒毛膜细胞培养本培养基适用于开放与封闭式培养条件.建议每片盖玻片上用2。

5ml羊水细胞.四。

操作流程仅供参考注：所有操作均因应在无菌环境下进行1）盖玻片培养法1。

将20ml羊水离心220g， 10分钟。

2. 小心的将上清羊水吸出，留0.5ml。

..。

开放式培养1. 将20ml羊水离心220g， 10分钟。

2。

小心的将上清羊水吸出，留2ml.。

..五.质量控制所有BIOAMF—2培养基均通过微生物、pH、渗透压和内毒素测试。

每个批次BIOAMF-2培养基均在一流的临床细胞遗传学实验室通过原代（primary culture)羊水细胞测试细胞增殖情况。

关于羊水细胞培养的几点总结：1. 羊水细胞培养的失败率约在0。

5%。

.。

注：需要完整说明书请联系本公司:。

羊水细胞原位培养法

［］Ｓｅ，Ｗ．ＪＷ．Ｂｅ：６ＬｎｔＩ４ｔｌＭ．，ｅｅｒ．Ｒｒ１．ｃ，．ｇ９６ａｅ：
３３３５８－８．
［］ＷａＩｏ，，ｓｔＢｒｃ：０ＬｎｅＩ５ｈｔＪＡＢｓＦ，ｔｈ１７．ｃｔｓｍ．ｒｅ．ａｓ９ｏａＩ：
产前诊断之后，此项技术已成为产前诊断的一个重要手段。然而，羊水细胞是胎儿皮肤等的脱落细胞，大部分是固缩的，死亡的，只有一部分是活细胞，且随着妊娠周数而变化［，［不同妊ｓ１
培养箱时将盖拧松，ｃ，使ｏ容易通人。３培养过程．羊水抽出后，立即送往实验室，８０分离心５０转／分钟，吸弃上清液，留２ｌｍ上清液与细胞沉淀物混合，使呈均匀的细胞悬浮液。一般１ｍ羊水可以培养２５１个塑料培养瓶（ｌ每ｍ悬浮液内约含１７Ｘ１＇５Ｘ０－２１＇０的细胞数）每瓶内加混合培养基４ｌ，ｍ，羊水
（甲醇：冰醋酸为３１：）混匀，预固定５分钟。预固定后再吸弃２又加人等量固定液，ｍｌ，固定５分钟后，将瓶内液体全弃尽，加人新鲜固定液５，固定２分钟，ｍ１０最后将固定液全倒掉，立即
１ｍ，分装二个离心管内备用。一般在取材后５１２小时内进行培养，４效果较好。（二）羊水细胞培养１培养基．为混合培养基，其中含Ｆ培ｌｏ养液７，小牛血清３，在每ｍ混合培养００ｌ掖中，１０加０单位青霉素和１０ｇ０／链霉素。培ｚ养基的ｐＨ为７－７０．．０２
遗传
ＨＥＫＥＤＩＡＳＴ
（ｅｉｇ５３：２４１８Ｂｉｎ）（）４－；９３ｊ

羊水细胞等贴壁细胞培养及其染色体制作

3
2
AF细胞在再培养中一开始就长得很好，染色体分析大多用这类细胞。
E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长，所以在培养过程中的生长期最短。
通常在培养后3—4天（可能更早些）即出现E细胞的集落，它们不适合再培养作染色体分析。大约在第7天出现的AF细胞可被用于染色体制备。如果在培养后第10天还未见长出新的细胞，就应考虑第二次羊膜穿刺。
STEP1
STEP2
STEP3
选择培养基没有一定的标准，有几点建议可供参考：
(1 ）建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。
其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。
细胞培养基应用选择
根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。
羊水细胞
人
羊水
F10培养基、胎牛血清
绒毛细胞
人
绒毛枝
F10培养基、胎牛血清
细胞培养环境
实验室设计细胞培养是一种无菌操作技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响，要求工作环境清洁、空气清新，干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧，常规操作和封闭培养于一室，而洗刷消毒在另一室。
无菌操作工作区域应保持清洁与宽敞，必要物品，如试管架、移液器或吸管头等可以暂时放置，其它实验用品用完后应及时移出，以利气体流通。实验用品要用70%酒精擦拭后才能带入无菌操作台内。实验操作应在操作台中央无菌区域内进行，勿在边缘非无菌区域操作。
小心取出无菌实验用品，避免造成污染。切勿碰触吸管与吸头头部或容器瓶口，不要在打开的容器正上方操作实验。容器打开后，用手夾住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放在台面上。

羊水细胞培养质量标准

羊水细胞培养质量标准一、前言羊水细胞培养是一种用于产前诊断的技术，通过对孕妇羊水中的胎儿细胞进行培养和分析，可以帮助医生对胎儿进行健康状况的评估。

制定羊水细胞培养质量标准对于保障诊断结果的准确性和临床应用的安全性至关重要。

本文将从羊水细胞培养的流程、关键步骤、培养质量检测指标等方面，提出一份关于羊水细胞培养质量标准的建议。

二、羊水细胞培养的流程1. 采集羊水羊水细胞培养的第一步是采集孕妇羊水，采集过程需要严格按照规范操作，以避免污染和对胎儿的伤害。

2. 分离和培养细胞经过采集后，羊水中的胎儿细胞需要进行分离和培养，以保证细胞的纯度和活力。

3. 染色体分析对培养后的羊水细胞进行染色体分析，通过观察细胞的染色体数目和结构，来评估胎儿的遗传健康状况。

三、羊水细胞培养的关键步骤1. 细胞培养条件的控制在进行羊水细胞的培养过程中，需要严格控制培养基的成分、PH值、温度、湿度等环境条件，以保证细胞的正常生长和分裂。

2. 细胞分离的技术羊水中包含多种细胞类型，需要采用适当的技术来分离目标细胞，保证分离的细胞为纯种，避免杂质的干扰。

3. 细胞培养的时间控制羊水细胞的培养时间需要严格控制，避免过长或者过短的培养时间影响细胞的生长状态和形态。

四、羊水细胞培养质量标准的建议1. 细胞纯度对于羊水细胞培养而言，细胞的纯度是一个重要的指标。

建议在培养结束后，通过显微镜观察细胞形态并进行染色染料标记，以评估细胞的纯度。

2. 细胞活力活力是衡量细胞健康状态的重要指标，建议采用活细胞染色法或细胞膜透过性染色法，通过显微镜观察或流式细胞术分析来评估细胞的活力。

3. 染色体分析结果染色体分析结果是羊水细胞培养的关键检测内容，建议对分析结果进行严格的质控和质量评估，确保结果的准确和可靠性。

4. 培养条件及实验操作的规范对于羊水细胞培养的培养条件、实验操作等方面，建议引入严格的规范及操作流程，包括但不限于环境清洁、培养基配制、细胞传代等细胞培养的关键步骤进行规范，保证培养过程中的稳定性与一致性。

羊水穿刺羊水细胞的培养及染色体核型分析

羊水穿刺：羊水细胞的培养及染色体核型分析谢雨琪羊水穿刺，全称“羊膜腔穿刺”，是我国目前最常用的一种有创产前诊断技术，是指在超声引导下经腹羊膜腔穿刺抽取羊水后，取出羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞进行培养，抽取其中细胞分析胎儿染色体核型的检查，主要涉及的生物技术是羊水细胞的培养及染色体核型分析。

·技术原理1）羊水细胞羊水是指怀孕时子宫羊膜腔内的液体。

在整个怀孕过程中，它是维持胎儿生命所不可缺少的重要成分。

在胎儿的不同发育阶段，羊水的来源也各不相同。

在妊娠第一个三月期，羊水主要来自胚胎的血浆成分。

之后，随着胚胎的器官开始成熟发育，其他诸如胎儿的尿液、呼吸系统、胃肠道、脐带、胎盘表面等等，也都成为了羊水的来源。

因此，羊水中会含有来自胎儿的脱落细胞，羊水细胞具有相同的遗传信息，可用于检查胎儿染色体核型。

2）分析染色体核型不同物种的染色体都有各自特定的形态结构（包括染色体的数目、长度、着丝点位置、臂比、随体大小等）特征，而且这种形态特征是相对稳定的。

经染色或荧光标记的染色体，通过一定的光学或电化学显色设备就可以清晰而直观的观察到染色体的具体形态结构，再与正常核型进行对比寻找差异，进而确定染色体的缺失、重复和倒置等现象。

通过染色体核型分析，可以根据染色体结构和数目的变异情况来判断生物是否患有某种因染色体片段缺失、重复或倒置等引起的遗传病。

如产前21三体综合征的诊断，通过核型分析可以在遗传基础上确定该疾病。

染色体结构异常核型（图片来自实用医学杂志2012年第28卷第11期第1857页）·技术应用一般是在妊娠中期约16周至24周，在超声实时监护下，用细针经腹部穿刺进针，穿过子宫壁，进入羊膜腔后抽取20ml羊水，将羊水中的胎儿细胞收集起来，培养2周后经过特殊处理，得到胎儿染色体并进行核型分析，以获取有关胎儿健康和发育情况的信息。

羊水穿刺属非强制性产前检查，主要适用于以下人群：①所有希望获得胎儿染色体明确诊断、无穿刺禁忌症的中孕期孕妇；②孕早、中期血清筛查高危的孕妇；③≥35岁的高龄孕妇；④夫妇一方为染色体病患者，或曾妊娠、生育过染色体病患儿的孕妇；⑤超声畸形筛查发现异常的孕妇；⑥无创产前DNA检测（NIPT）发现异常的孕妇。

羊水细胞培养基说明书

羊水细胞培养基CHANG Medium In Situ 目录号：T104用于体外诊断符号词汇表*：目录号批号使用无菌工艺技术（过滤）灭菌有效期至：年-月-日注意，请参阅随附文件请参阅使用说明贮存温度低于-10℃不可重复灭菌。

如果包装损坏，切勿使用生产商CE 标志Emergo Europe - Prinsessegracht20，2514 AP The Hague，TheNetherlands*符号参考-EN ISO 15223-1，符号用于医疗器械-医疗器械标签和贴标。

FUJIFILM Irvine Scientific, Inc.2511 Daimler Street，Santa Ana，California 92705 USA电话：19492617800•180****5706传真： 1 949 261 6522 • PN 40280-CH Rev.01预期用途本产品可用于以下应用：1. 羊水细胞的原代培养2. 羊水细胞的传代培养3. 固体羊膜组织绒毛取样该培养基设计用于CO2培养箱（培养物用5％-8％CO2气体环境平衡）。

产品描述本产品用于羊水细胞的原代培养，培养后的细胞用于核型分析和其他产前基因检测。

该配方已针对原位培养方法进行了优化。

质量保证无菌性用于生产本产品的血清已经根据CFR第9章，第113.53部分进行了病毒污染测试。

同时也进行了支原体污染的筛查。

本产品使用0.1微米滤膜过滤除菌。

根据现行USP<71>无菌试验中描述的无菌试验方案对本产品进行可能的细菌污染检测。

使用准备1. 在37℃水浴中轻轻晃动试剂瓶来快速解冻本产品2. 如果需要，可以添加抗生素本产品的分装1. 根据说明书的方法解冻本产品2. 在无菌条件下分装到合适大小的等分试样并再次冷冻。

3. 使用前，在37℃水浴中解冻等分试样。

使用说明用于培养的培养基pH值必须在6.8-7.2之间（即培养基必须是略带黄色的鲑鱼色）通过将培养基置于5％-8％CO2培养箱中，稍微拧松瓶盖约30分钟，可以很容易地调节pH值。

羊水穿刺羊水细胞的培养及染色体核型分析

羊水穿刺：羊水细胞的培养及染色体核型分析谢雨琪羊水穿刺，全称“羊膜腔穿刺”，是我国目前最常用的一种有创产前诊断技术，是指在超声引导下经腹羊膜腔穿刺抽取羊水后，取出羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞进行培养，抽取其中细胞分析胎儿染色体核型的检查，主要涉及的生物技术是羊水细胞的培养及染色体核型分析。

·技术原理1）羊水细胞羊水是指怀孕时子宫羊膜腔内的液体。

在整个怀孕过程中，它是维持胎儿生命所不可缺少的重要成分。

在胎儿的不同发育阶段，羊水的来源也各不相同。

在妊娠第一个三月期，羊水主要来自胚胎的血浆成分。

之后，随着胚胎的器官开始成熟发育，其他诸如胎儿的尿液、呼吸系统、胃肠道、脐带、胎盘表面等等，也都成为了羊水的来源。

因此，羊水中会含有来自胎儿的脱落细胞，羊水细胞具有相同的遗传信息，可用于检查胎儿染色体核型。

2）分析染色体核型不同物种的染色体都有各自特定的形态结构（包括染色体的数目、长度、着丝点位置、臂比、随体大小等）特征，而且这种形态特征是相对稳定的。

经染色或荧光标记的染色体，通过一定的光学或电化学显色设备就可以清晰而直观的观察到染色体的具体形态结构，再与正常核型进行对比寻找差异，进而确定染色体的缺失、重复和倒置等现象。

通过染色体核型分析，可以根据染色体结构和数目的变异情况来判断生物是否患有某种因染色体片段缺失、重复或倒置等引起的遗传病。

如产前21三体综合征的诊断，通过核型分析可以在遗传基础上确定该疾病。

染色体结构异常核型（图片来自实用医学杂志2012年第28卷第11期第1857页）·技术应用一般是在妊娠中期约16周至24周，在超声实时监护下，用细针经腹部穿刺进针，穿过子宫壁，进入羊膜腔后抽取20ml羊水，将羊水中的胎儿细胞收集起来，培养2周后经过特殊处理，得到胎儿染色体并进行核型分析，以获取有关胎儿健康和发育情况的信息。

羊水穿刺属非强制性产前检查，主要适用于以下人群：①所有希望获得胎儿染色体明确诊断、无穿刺禁忌症的中孕期孕妇；②孕早、中期血清筛查高危的孕妇；③≥35岁的高龄孕妇；④夫妇一方为染色体病患者，或曾妊娠、生育过染色体病患儿的孕妇；⑤超声畸形筛查发现异常的孕妇；⑥无创产前DNA检测（NIPT）发现异常的孕妇。

人类羊水细胞培养基BIOAMF系列：重庆市华雅干细胞技术有限公司羊水细胞完全培养基(BIOAMF-2)是最新改良的培养基，专门用于培养原代(primary culture)羊水细胞与绒毛膜组织以用于产前诊断。

本培养基处于冷冻状态并已添加谷氨酰胺(L-Glutamine)和各种抗生素。

羊水细胞完全培养基(BIOAMF-3)是BIOAMF-2的改进型，具有更清晰的染色体形态和更多的中期分裂相细胞。

产品优势增强的缓冲效果更适用于开放式(5% CO2)和封闭式培养条件缩短培养时间、用量少，更节省时间与成本专一性的增殖胎儿成纤维细胞（Fibroblast），可获得更多的中期细胞核型分析条带更清晰超长的保质期，在2～8℃保存稳定性更久，可达14天；在-20℃可保存24个月细胞核型分析培养基外周血核型分析培养基5ml /支（01-201-1H）适用于短期外周血培养，染色体分析。

采用RPMI-1640为基础培养基，并添加血清、L-谷氨酰胺、抗生素和植物血球凝集素(PHA)。

产品优势即用型，从培养到离心一次性完成，节约您的工作时间并免除换管麻烦和成本。

促进生长明显无需任何添加物附赠培养用试管架，方便您培养使用另有细胞核型分析相关其他产品，可用于各种急慢性白血病核型分析。

?外周血核型分析培养基（01-198-1）骨髓核型分析培养基（01-199-1）造血细胞核型分析培养基（01-200-1）秋水仙酰胺10ug/ml 溶液（12-004-1）01-194-1B羊水细胞完全培养基BIOAMF-2100 mlBiologicalIndustries01-194-1A500 ml01-196-1B羊水细胞完全培养基BIOAMF-3100 ml01-196-1A500 ml01-201-1H外周血核型分析培养基5ml/支On saleRMB20/支。

羊水培养基 EKAMG200 650 100ML

Chromosome FBS Chromosome FBS Amniodish Amniodish Amnioslide Amnioslide Amnioslide SuperFrost® Amnioslide SuperFrost®
适用于羊水和绒毛的胎牛血清适用于羊水和绒毛的胎牛血清适用于羊水和绒毛的无菌培养皿适用于羊水和绒毛的无菌培养皿适用于羊水和绒毛的无菌培养玻片适用于羊水和绒毛的无菌培养玻片适用于羊水和绒毛的急冻无菌培养玻片适用于羊水和绒毛的急冻无菌培养玻片
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香港华创贸易国际有限公司作为意大利 EuroClone 的中国区总代理，热诚欢迎广大客户来电咨询。香港华创公司北京办事处：咨询电话 010-64484022 64484033，全国免费服务热线 400-699-7909，邮箱 info@
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WITL2010-03-8 香港华创贸易国际有限公司制作
上图为使用 Amniomed®Plus 培养基的羊水染色体(左)和绒毛膜染色体(右)
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即用型，并且液态和冻结形式均可适用于开放（5% CO2）或密闭培养系统较短的周转时间：在理想状态下，保证细胞在 7-9 天内生长保质期长：–20 ± 2°C 温度下保存 24 个月 IVD CE 标记：根据体外诊断的团体指示生产
滋养细胞生长 Amniomed® Plus 羊水培养基
针对羊膜和绒毛膜衍生细胞的完全培养基
细胞遗传产前分析是对胎儿或胚胎出生前的遗传病早期检测，目的是检测先天缺陷，如神经管缺陷、唐氏综合症、染色体异常、遗传病和其他情况。它同时也能用来确定未出生婴儿的性别。产前细胞遗传诊断的一般程序包括羊膜穿刺和绒毛膜取样以及为随后的染色体核型分析做准备的衍生细胞长期培养。 Amniomed®Plus 是一种培养基，针对胎儿染色体核型分析的羊水细胞原代培养而特别研发的。该培养基促进了最优的羊膜细胞体外粘附和生长，缩短了产前细胞遗传诊断的时间，此外，它还使原位和培养瓶培养得到了优化。由于其特殊配方，它也适用于绒毛膜、胎儿组织和纤维母细胞的培养。Amniomed®Plus 是一种完全培养基（不需要其他添加物），无菌并且随时可用。 Amniomed®Plus 以冻结的液体形式提供，能在–20 ± 2°C 的温度下存储两年。