质粒载体名词解释
质粒载体的特点及应用
三、质粒载体的构建及特点
1．天然质粒用作克隆载体的局限性
天然质粒，一般是指那些没有经过以基因克隆为目标的体外修饰改造 的质粒。在大肠杆菌中，常见的要用于基因克隆的天然质粒有ColE1 、pSC101等。 鉴于天然质粒用作基因克隆载体存在着不同程度的局限性，科学工作 者便在其基础上进行了修饰改造，发展出了一批低分子量、高拷贝、 多选择记号的质粒载体。 现行通用的基因克隆载体，绝大多数就是以质粒为基础改建而成的。
③质粒对宿主生存并不是必需的 质粒也往往有其表型，其表现不是宿主生存所必需的，但也不妨碍宿 主的生存。某些质粒携带的基因功能有利于宿主细胞在特定条件下生 存，例如，细菌中许多天然的质粒带有抗药性基因，如编码合成能分 解破坏四环素、氯霉素、氨芐表霉素等的酶基因，这种质粒称为抗药 性质粒，又称R质粒，带有R质粒的细菌就能在相应的抗生素存在生存 繁殖。所以质粒对宿主不是寄生的，而是共生的。
4、质粒载体不稳定性
分离的不稳定性
DNA的缺失、插入和重排都是造成质粒载体结构不稳定性 的原因。
结构的不稳定性
在细胞分裂过程中发生的质粒不平均的分配，也是导致质 粒不稳定性的重要原因。
影响质粒载体稳定性的主要因素
(1)新陈代谢载体稳定性的影响 (3)寄主重组体系对质粒载体稳定性的效应
都能便利的加以检测
如载体的药物抗性基因，多是抗生素抗性基因。将受体细胞放在含有 该抗生素培养板上培养生长时，只有携带这些抗性基因的载体分子的 受体细胞才能存活。
基因工程载体名词解释
基因工程载体是指能将分离或合成的基因导入细胞DNA分子，并在其中得以维持的DNA分子。
这些载体通常具有特定的结构和功能，以便能够将基因导入细胞并保持其稳定性和表达。
基因工程载体的类型包括质粒DNA、病毒DNA和科斯质粒等。
其中，质粒是一种小型环状DNA分子，可以自我复制，并能够在细菌细胞中稳定存在。
病毒DNA则是一种感染细胞的病毒，其基因组可以插入外源基因并携带其进入细胞。
科斯质粒则是一种人工合成的质粒，具有特定的结构和功能，以便能够将基因导入细胞并维持其稳定性和表达。
在基因工程操作中，载体被用来将外源基因导入受体细胞，并在其中表达。
通过使用载体，研究人员可以更容易地操作和调控基因的表达，从而更好地了解基因的功能和作用机制，为疾病治疗、药物研发等提供重要的支持。
质粒名词解释生物化学
质粒名词解释生物化学
质粒是一种环状或线性的DNA分子，在细胞质中自主复制的一种细胞器。
它
们通常存在于原核生物（如细菌）和真核生物（如酵母、植物和动物）的细胞内。
质粒可以携带多种基因，包括对细胞生存和繁殖有利的基因，如抗生素抗性基因和代谢途径基因等。
质粒通常是由几千个碱基对组成的DNA分子，具有自身的复制和表达机制。
质粒的复制一般是依赖于宿主细胞的DNA复制机制进行的，质粒复制时会形成新
的质粒拷贝，这些新质粒可以被传递给后代细胞。
质粒的存在对细胞具有重要的生物学意义。
首先，质粒可以作为基因工程的载体，用于在细胞内引入外源基因，实现基因的表达和功能研究。
其次，质粒在细菌的遗传进化和环境适应中扮演重要角色，通过携带不同的基因，细菌可以在不同的环境中生存和繁殖。
总的来说，质粒是细胞内的一种重要DNA分子，具有自主复制和传递的能力，对细胞的生存和遗传具有重要作用。
在生物学和基因工程研究中，质粒的研究和应用具有重要的意义。
基因工程复习资料
第一章一．名词解释1、基因工程：按工程学原理，将外源基因切割，及载体结合，导入受体细胞，使其稳定表达的过程。
2、目的基因：开发人们特殊需要的基因产物或及优良性状相关的基因。
3、工具酶：体外进行合成、切割、连接、修饰等过程需要的酶。
4、药物：在受体细胞内表达产物有药理作用或通过定位整合直接抑制致病基因的。
二．基因工程理论依据（1）基因具有相同的物质基础（2）基因可以切割（3）基因可以转移（4）基因及多肽有对应关系（5）基因的密码是通用的（6）基因可以通过复制遗传给下一代三．基因工程研究内容（1）克隆载体的研究（2）受体的研究（3）工具酶的研究（4）目的基因的研究（5）新技术的研究第二章一．名词解释1、变性：在较高温下，双链间氢键断开，形成单链的过程。
2、复性：变性的，降温时恢复为双链的过程。
3、解链温度：让达到50%变性的温度。
4、复制子：从复制起点开始复制出一个分子或片段的核苷酸序列。
5、启动子：不转录，是聚合酶的识别结合位点。
6、转录区：能转录相应，包括编码区和终止子。
7、操纵子：原核生物中两个以上基共用一个启动子。
8、内含子：真核生物转录区中的非编码间隔序列。
9、限制性核酸内切酶：使一个磷酸二酯键断开的脱氧核糖核酸酶。
10、稀切酶：有较长的识别序列和富含或的识别序列的限制性核酸内切酶。
11、同裂酶：不同的酶有相同的识别序列。
12、同尾酶：切割不同识别序列产生相同末端的不同酶。
13、黏性末端：两条链断开位置是交错的，叫黏性末端。
14、平末端：两条链断开位置是平齐的，叫平末端。
15、位点偏爱：某些限制酶对同一介质中的有些位点表现出偏爱性切割，即对不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率的现象称作位点偏爱。
16、酶活单位：限制酶最适条件下60分钟切割1所需的酶活性。
17、容积活性：1酶活单位所具有的酶活性。
18、限制酶的活性：一些特定条件下，可以切断及原来识别序列不同的碱基序列，这个现象叫活性。
穿梭载体的名词解释
穿梭载体的名词解释
穿梭载体是指含有两个亲缘关系不同的复制子，能在两种不同的生物中复制的。
一、概念：母质粒载体是基因表达载体的一种，既可以在大肠杆菌中、又可以在酵母系统中进行复制与扩增，所以也称为穿梭载体。
它分为整合载体和自我复制载体两类。
（1）整合载体：它带有一个酵母URA3标志基因和大肠杆菌的复制和报告基因。
（2）自我复制载体：该类载体在酵母中可以自我复制。
二、特点：
1、酵母质粒载体既可以在大肠杆菌复制与扩增、又可以在酵母系统中复制与扩增，故此类载体又称为穿梭载体（shuttlevector）。
2、在基因工程中，应用上述病毒表达载体在哺乳动物细胞中进行中、小规模的表达是十分实际的。
还要有对组织培养技术十分熟悉的前提。
但病毒载体的运用仍然存在技术较难、耗时间和不经济的问题．难以大规模地进行表达。
3、介于细菌质粒和动物病毒载体之闻的酵母质粒载体，从技术和经济角度而占，可能更适合当前国内大多数研究室的需要。
三、根据转化细胞中的复制机制，可将酵母质粒载体分为两个基本类型即整合载体和自我复制载体。
选择酵母载体的必须慎重考虑以下几个标准：
1、大肠杆菌和酵母均有适当的遗传标志。
2、结合实际需要，考虑在酵母中的复制方式。
3、在酵母和大肠杆菌中的拷贝数
4、要有简单易行的筛选插入物的方式。
名词解释质粒
名词解释质粒质粒是细菌、酵母或其他生物体内一种存在的独立的小环状DNA分子。
质粒通常较小，其大小一般为1-200 kb（千碱基对）左右。
质粒是细菌、酵母等细胞外染色体的一部分，能够在细胞分裂的过程中被复制自身并传递给子细胞。
质粒具有自主复制的功能，能够独立地进行DNA复制。
通常，质粒含有一个特定的DNA序列，称为起始位点，该序列作为复制起始的位置。
在DNA复制开始时，一个复制起始蛋白会与起始位点结合，启动质粒DNA的复制。
同时，质粒还含有终止位点，用于停止复制过程。
由于质粒具有相对较小的大小和独立的复制系统，它们能够更快地复制和传递基因信息。
质粒广泛存在于许多细菌和酵母中，可以携带各种不同的功能基因。
其中一些质粒携带了抗生素抗性基因，使得细菌对抗生素的抵抗力增强。
这些抗生素抗性质粒可以通过水平基因转移的方式被传递给其他细菌，从而导致细菌变得耐药。
此外，质粒还可以携带其他诸如代谢途径、毒力因子、金属耐受性等功能基因。
这些质粒上的功能基因可以通过转移给接受者细胞，使得接受者细菌获得额外的功能。
质粒的传递方式可以通过共轭转移、转化或者噬菌体介导的转导等方式进行。
质粒在科学研究和应用中具有重要的作用。
在分子生物学实验中，科研人员常常使用质粒作为DNA载体，将感兴趣的基因克隆进入质粒中进行表达和研究。
质粒可以通过转化技术将外源基因导入宿主细胞中，从而实现对基因功能和调控机制的研究。
此外，质粒还被广泛应用于生物工程领域，如生产重组蛋白、改良植物和微生物等。
总之，质粒是一种重要的细胞组成部分，它具有自主复制的功能并能够携带不同的功能基因。
通过传递和表达这些基因，质粒在细菌、酵母等生物体内发挥着重要的生物学功能，对于基因工程、抗生素耐药性等领域的研究和应用具有重要的意义。
第2章 基因克隆的载体——质粒和噬菌体
第2章基因克隆的载体——质粒和噬菌体载体：携带外源DNA进入宿主细胞的工具。
一、载体的功能：1.运送外源基因高效转入受体细胞2.为外源基因提供复制能力或整合能力3.为外源基因的扩增或表达提供条件二、载体应具备的条件：1.具有对受体细胞的可转移性2.具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点3.长度尽可能小，以提高其载装能力4.具有多种单一的酶切位点5.具有合适的选择性标记附图：图 3-1 自主复制型载体和附加载体的扩增方式2.1 质粒质粒是存在于细菌细胞质中独立于染色体而自主复制的共价、封闭、环状双链DNA分子（Covalently closed Circular DNA, ccc DNA），并不是细菌生长所必需的，但可以赋予细菌某些抵御外界环境因素不利影响的能力。
分子量在1-200kb之间。
一、质粒的基本特性：（一）自主复制性质粒DNA携带有自己的复制起始区（ori）以及一个控制质粒拷贝数的基因，因此它能独立于宿主细胞的染色体DNA而自主复制。
不同的质粒在宿主细胞内的拷贝数也不同，少则几个多则几百个不等，当然由于质粒上并没有复制酶的基因，所以其复制需要使用宿主细胞复制染色体DNA的多种酶群。
（二）不相容性利用同一复制系统的不同质粒（RNAI RNAII Rop因子）如果被导入同一细胞中，它们在复制及随后分配到子细胞的过程中，就会彼此竞争，它们在单细胞中的拷贝数也会有差异，拷贝多的复制更快，结果在细菌繁殖几代之后，细菌的子细胞中绝大多数都含有占优势的质粒，因而这两种质粒中只能有一种长期稳定地留在细胞中，这就是所谓的质粒不相容性。
（三）可扩增性质粒就其复制方式而言分为两类：松弛型复制及严谨型复制。
pMB1或ColEI 类质粒复制子的复制完全依靠宿主细胞提供的半衰期较长的复制酶及蛋白因子（DNA聚合酶I，III，RNA聚合酶以及dnaB、dnaC、dnaD、dnaZ的产物），因此在蛋白质合成中断时，质粒复制能持续合成，这样当用氯霉素抑制蛋白质合成并阻断细菌染色体复制时，带有pMB1或ColEI复制子的质粒将利用丰富的原料大量复制，最后每个细胞可以积聚2000-3000个拷贝，这叫做氯霉素扩增。
厦门大学基因工程课后思考题
第一章核酸的制备1.名词解释：脱氧核糖核酸：核糖核酸：ccc-DNA：当两条多核苷酸链均保持着完整的环形结构时，称为共价闭合环形DNA（cccDNA）oc-DNA：如果两条核苷酸链中只有一条保持着完整的环形结构，另一条链出现一至数个缺口时，称为开环DNA（ocDNA）l-DNA,：发生双链断裂而形成线性分子（L—DNA），L构型DNA变性：双联变成单链DNA复性：单链又变成双链PCR, 模板，引物2.分别阐述用CTAB裂解法，SDS裂解法，碘化钠裂解法以及蛋白酶K裂解法和溶菌酶裂解法裂解细胞的依据。
溶菌酶：破坏细胞的细胞壁肽聚糖骨架，在内部渗透压的作用下使得细胞胀破。
CTAB裂解法：CTAB作为离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚SDS裂解法：利用中性去污剂NP-40破坏全血的红细胞膜，离心弃去溶血液，收集白细胞沉淀，加入去污剂SDS以破坏白细胞核膜，并使核蛋白解离，再加入高浓度的NaCl使DNA溶解，同时使蛋白盐析。
通过离心收集水相，加2——2.5倍体积的无水乙醇，沉淀DNA碘化钠裂解法：低渗破坏细胞，碘化钠破坏核膜蛋白酶K裂解法：蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解3.用于检测样品纯度和浓度的方法有哪些？简述个各方法的基本原理。
电泳、OD值、荧光定量法第二章基因工程工具酶1.名词解释：限制性内切核酸酶：在DNA上核苷酸的特定连接处以特定的方式把DNA双链切开DNA连接酶：催化DNA上裂口两侧(相邻)核苷酸裸露的3＇羟基和5＇磷酸之间形成共价结合的磷酸二酯键，使断开的DNA•裂口连接起来逆转录酶：依赖于RNA的DNA聚合酶DNA聚合酶：是一类催化DNA合成的酶类，酶的作用需要DNA或RNA作为模板，合成DNA链的序列与模板的序列互补Klenow片段（Klenow酶）：大肠杆菌DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶处理,获得N端三分之二的大肽段,即Klenow 酶限制性图谱（物理图谱）：描述染色体上限制性内切酶切割位点之间距离和顺序的图谱，通常以DNA的长度来代表距离，因此为遗传物质提供了物理图谱。
名词解释
名词解释：1.质粒（Plasmid）：质粒是细菌的染色体外能够自我复制的环状DNA分子。
它能够和细胞核中的染色体明显地区别开来，而且并不是细胞生存的必要物质。
一些质粒适宜于引入到宿主细胞中去，并利用宿主细胞的DNA大量繁殖，因此我们常常采用质粒作为外源DNA的载体，外源DNA借助于质粒在宿主细胞中大量繁殖。
2.2.启动子（Promoter）：一段能被宿主ＲＮＡ聚合酶特异性识别和结合并指导目的基因转录的ＤＮＡ序列，是基因表达调控的重要元件。
位于基因的上游，一般长40-60bp3.限制性内切酶（Restriction enzyme， endonuclease）：这种酶能够识别出DNA上特定的碱基序列，并在这个位点将DNA酶切。
细菌中有400中限制性内切酶，能够识别出100中DNA序列4.载体：基因载体是一类能自我复制的DNA分子，其中的一段DNA被切除而不影响其复制，可用以置换或插入外源(目的) DNA而将目的DNA带入宿主细胞。
常用的载体有质粒、噬菌体、病毒5.核糖体结合位点（SD序列，shine-dalgarno ）：原核基因转录起始位点下游的一段DNA序列，与核糖体16SrRNA特异配对而与宿主核糖体结合，对mRNA 的翻译起决定性作用。
将RNA定位于核糖体上，从而启动翻译6.质粒的不亲和性：两种亲缘关系密切的不同质粒，不能够在同一个寄主细胞系中稳定地共存的现象。
7.穿梭质粒载体（shuttle vector)：是指一类由人工构建的载体，含有两种不同复制起点和选择标记，可以携带外源DNA在不同物种的宿主细胞中复制、表达的质粒载体。
8.定向克隆：DNA用两种不同的限制性内切酶消化时，产生带有非互补粘性末端的片断，此种片段只能以一个方向插入用相同的两种酶消化的载体中。
9.非定向克隆：是指目的DNA通过一个限制性内切酶酶切形成的片断，或两个形成平端的内切酶形成的片断，此种片段可能以两个方向插入相同酶切处理的载体DNA中。
质粒名词解释微生物学
质粒名词解释微生物学
在微生物学中，质粒（plasmid）是一种小型、环状的DNA分子，存在于细菌、古菌和一些真核微生物中。
与细胞染色体不同，质粒一般存在于细胞质中，并独立于细胞核。
质粒通常含有一些基因，这些基因可以提供细胞一些额外的功能或特性。
质粒可以自主复制和传递给其他细胞，这使得它们在基因工程和遗传研究中非常有用。
质粒的大小可以从几千到数百万碱基对不等。
它们可以携带多种类型的基因，包括抗生素抗性基因、代谢途径基因、毒素基因等。
质粒可以通过转化、转导和共轭等方式在细菌中传递。
这种水平的基因转移可以导致细菌在适应环境、抵抗抗生素和其他应激因素方面的变化。
在实验室中，质粒在基因工程和生物技术研究中起到重要作用。
研究人员可以利用质粒将特定基因导入细菌中，从而使细菌产生特定蛋白质或表现出特定性状。
质粒也可以用作基因克隆的载体，在转基因植物和转基因动物的研究中发挥作用。
总而言之，质粒在微生物学中是一种重要的DNA分子，它们具有自主复制和传递基因的能力，为细菌和其他微生物提供了额外的功能和特性。
它们在基因工程和生物技术研究中被广泛应用。
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质粒载体名词解释
染色体质粒载体是一种由染色质蛋白和一种DNA组成的载体，它
们主要存在于真核生物细胞中。染色体质粒载体负责存储和传递细胞
的遗传信息，以便维持细胞的性质和繁殖行为，同时它还为细胞细胞
生命周期和细胞信号传导提供了平衡和稳定的环境平台。
染色体质粒载体直径通常在2纳米到4纳米之间，是细胞内非真
核元素之一，它们负责细胞内各种功能非常重要，其中离子通道、糖
转运表达子、细胞膜蛋白、细胞信号转导、响应外部环境刺激等现象
就是染色体质粒存在的重要考虑因素。
此外，染色体质粒的另一个重要功能就是控制细胞的进化，通过
几种不同的方式，会促使从一个基因突变到另一个，使细胞能够应对
早期的环境变化，不仅可以分布更好地适应环境，还可以获得更强的
适应性。
染色体质粒载体能够把遗传物质传递到细胞的各个部分，而且它
们也存在着相应的防御机制，这些防御机制可以帮助细胞内的遗传物
质存储安全，从而维持细胞的功能和生存。同时，染色体质粒载体还
为细胞的繁殖、复制、突变提供了基础条件，这是它独特的功能。