微生物限度标准
药品微生物限度标准
非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的给药途径和对患者健康潜在的危害以及药品的特殊性而制订的。
药品生产、贮存、销售过程中的检验，化学药品原料药、中药提取物及辅料的检验，新药标准制订，进口药品标准复核，考察药品质量及仲裁等，除另有规定外，其微生物限度均以本标准为依据。
非无菌制剂的总需氧菌数、总霉菌及酵母菌数测定照附录×××检查；非无菌制剂的控制菌检查照附录×××检查。
本限度标准解释如下：
101CFU：最大可接受限值＝20；
102CFU：最大可接受限值＝200；
103CFU：最大可接受限值＝2000。
以此类推。
1.制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂应符合无菌检查法规定。
2.口服给药制剂
2.1 不含药材原粉的口服给药制剂
需氧菌总数每1g不得过103cfu。
每1ml不得过102cfu。
霉菌及酵母菌总数每1g不得过102cfu。
每1ml不得过101cfu。
大肠埃希菌每1g或1ml不得检出。
沙门菌含脏器提取物的口服给药制剂每10g或10ml不得检出。
2.2含药材原粉的口服制剂
2.2.1不含豆豉、神曲等发酵原粉的口服给药制剂
需氧菌总数每1g不得过10000cfu。
每1ml不得过100cfu。
霉菌及酵母菌总数每1g或1ml不得过100cfu。
大肠埃希菌每1g或1ml不得检出。
沙门菌每10g或10ml不得检出。
耐胆盐革兰阴性菌每1g应小于102个。
每1ml应小于101个。
2.2.2 含豆豉、神曲等发酵原粉的口服制剂
需氧菌总数每1g不得过100000cfu。
每1ml不得过1000cfu。
霉菌和酵母菌总数每1g不得过500cfu。
每1ml不得过100cfu。
大肠埃希菌每1g或1ml不得检出。
沙门菌每10g或10ml不得检出。
耐胆盐革兰阴性菌每1g应小于102个。
每1ml应小于101个。
3.局部给药制剂
3.1 用于手术、烧伤或严重创伤的局部给药制剂应符合无菌检查法规定。
3.2 黏膜、齿龈、鼻及呼吸道吸入给药制剂
需氧菌总数每1g、1ml或10cm2不得过102cfu。
霉菌和酵母菌总数每1g、1ml或10cm2不得过101cfu。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、1ml或10cm2不得检出。
大肠埃希菌每1g或1ml或10cm2不得检出。
耐胆盐革兰阴性菌呼吸道吸入给药制剂，每1g或1ml不得检出。
3.3 耳、皮肤给药制剂
需氧菌总数每1g、1ml或10cm2不得过102cfu。
霉菌和酵母菌总数每1g、1ml或10cm2不得过101cfu。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、1ml或10cm2不得检出。
3.4 阴道、尿道给药制剂
需氧菌总数每1g、1ml或10cm2不得过102cfu。
霉菌和酵母菌总数每1g、1ml或10cm2应小于10cfu。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌每1g、1ml或10cm2不得检出。
梭菌中药制剂每1g、1ml或10cm2不得检出。
3.5 直肠给药制剂
需氧菌总数每1g不得过103cfu。
每1ml不得过102cfu。
霉菌和酵母菌总数每1g或1ml不得过102cfu。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g 或1ml不得检出。
3.6其他局部给药制剂
3.6.1不含药材原粉的其他局部给药制剂
需氧菌总数每1g、1ml或10cm2不得过102cfu。
霉菌和酵母菌总数每1g、1ml或10cm2不得过102cfu。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、1ml或10cm2不得检出。
3.6.2含药材原粉的其他局部给药制剂
3.6.2.1用于表皮或黏膜不完整的含药材原粉的其他局部给药制剂
需氧菌总数每1g或10cm2不得过103cfu。
每1ml不得过102cfu。
霉菌和酵母菌总数每1g、1ml或10cm2不得过102cfu。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、1ml或10cm2不得检出。
3.6.2.2 用于表皮或黏膜完整的含药材原粉的其他局部给药制剂
需氧菌总数每1g或10cm2不得过10000cfu。
每1ml不得过100cfu。
霉菌和酵母菌总数每1g、1ml或10cm2不得过100cfu。
金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、1ml或10cm2不得检出。
4. 化学药品原料及辅料
需氧菌总数每1g或每1ml不得过103cfu。
霉菌及酵母菌总数每1g或每1ml不得过102cfu。
5. 中药提取物
需氧菌总数每1g或每1ml不得过103cfu。
霉菌及酵母菌总数每1g或每1ml不得过102cfu。
6．中药饮片
耐胆盐革兰阴性菌每1g应小于104个。
沙门菌每10g不得检出。
7.有兼用途径的制剂应符合各给药途径的标准。
8.霉变、长螨者以不合格论。
本限度标准所列的控制菌对某些产品可能并不全面，因此，对于某些特定的制剂，根据原材料和生产工艺的特性，可能还需检查其他具有潜在危害的微生物。
除了本限度标准所列的控制菌，其他被检出的重要微生物应从以下方面评估其潜在的危害:
产品的给药途径：给药途径不同，其危害不同（眼、鼻或呼吸道给药）；
产品的特性：产品是否适合微生物生长，或者产品是否有足够的抑制微生物生长能力；
产品的使用方法；
用药对象：用药对象不同，如新生儿、婴幼儿及体弱者，其危害性不同；
患者免疫抑制剂和甾体类固醇激素的使用情况；
患者的疾病、伤残和器官损伤的情况，等等。
药品的微生物限度检查
24～48h
紫红胆盐葡 萄糖平板
10-1
无菌落
18～24h
有菌落
报告未检出
10g/10ml/ 100cm2供试品
3.耐胆盐革兰阴性菌定量检查操作示意图
以TSB为稀释液制供试液
一定量 肠道增菌肉汤
20～25℃, 2h预增菌
1ml
24～48h
紫红胆盐 葡萄糖平板
报告结果
10-1
18～24h
（六）梭菌的检查
梭菌 增菌 培养 基
供试液的制备
书写检 验记录
哥伦比亚琼脂培养基分离
1.梭菌检查程序
无菌落生长
过氧化氢 酶试验
配培养基和稀释液
最终结果判断
有 菌 落
确证 试验
10g/10ml/ 100cm2供试品
2.供试品梭菌检查操作示意图
各10ml
分别接种
一份80℃保温10min后迅速冷却
10-2
10-31ml10-110-210-3
各管加1ml
查可能菌数表
9ml 稀 释 液
有/无菌落
（二）大肠埃希菌检查
大肠埃希菌作为检验供试品是否受粪便污染的指示菌。
2015年版《中国药典》规定经口及呼吸道服给药的制剂，每1g、1ml或10cm2不得检出大肠埃希菌。
TSB 增菌 培养
30℃～35℃
3～5d
1.平皿法
（1）基本程序：
数据 处理
结果观察与计数
书写检 验记录
平板 接种
需氧菌 的培养
供试液 的制备
配培养基和稀释液
倒置 培养 3～5d
30～35℃
TSA
不少于 0.1ml
微生物限度要求标准
微生物限度要求标准嘿，朋友们！今天咱来聊聊微生物限度要求标准这个事儿。
你说这微生物啊，看不见摸不着的，可别小瞧了它们，它们就像一群调皮的小精灵，在我们身边到处蹦跶呢！咱就说食品吧，要是微生物限度超标了，那可不得了！你想想，你开开心心吃个面包，结果里面一堆超标了的微生物，那不得闹肚子呀！这就好比你走在路上，突然窜出一群捣乱的小孩，把你的好心情全给破坏了。
所以啊，对于食品中的微生物限度，那可得严格把控。
再看看药品，这可是关乎咱健康的重要东西啊！要是药品里的微生物限度没控制好，那吃下去能有效果吗？说不定还会带来其他问题呢！就好像你本来想找个医生治好病，结果医生不靠谱，那不是更糟糕啦！所以对药品的微生物限度要求，那绝对得高标准、严要求。
那怎么来判断微生物限度是不是符合标准呢？这就得靠专业的检测啦！检测人员就像是侦探一样，仔细寻找着那些隐藏的微生物。
他们用各种方法、各种仪器，把这些小家伙一个一个给揪出来，看看数量对不对。
这可不是个简单的活儿，得细心、得专业！咱平常生活中也得注意啊！比如家里的食物要储存好，别给微生物太多生长的机会。
你说你把食物随便扔在那里，不就等于给微生物建了个乐园嘛！还有啊，个人卫生也很重要，勤洗手，别让那些坏家伙跟着你到处跑。
你说这微生物限度要求标准是不是特别重要？它就像是一道防线，保护着我们的健康和安全。
如果没有它，那我们的生活还不知道会变成啥样呢！说不定到处都是生病的人，食品也都不敢吃了。
所以啊，大家一定要重视这个微生物限度要求标准。
不管是生产食品、药品的厂家，还是我们每个人，都得为了自己和他人的健康负责。
别觉得这事儿离你很远，其实它就在我们身边，和我们的生活息息相关呢！让我们一起努力，把这些微生物小精灵管得服服帖帖的，让我们的生活更加美好、更加健康！这难道不是我们都应该去做的吗？。
微生物限度标准
微生物限度检查结果判断
微生物限度标准
另外：
1．含原药材粉的制剂细菌数每1g不得过10000个(丸剂每1g不得过30000个)、每1ml不得过500；霉菌和酵母每1g、1ml不得过100个；每1g、1ml不得检出大肠埃希菌；大肠菌群每1g应小于100个、每1ml应小于10个。
2．含豆豉、神曲等发酵成分的制剂细菌数每1g不得过100000个、每1ml不得过1000；霉菌和酵母每1g不得过500个、1ml不得过100个，每1g、1ml不得检出大肠埃希菌，大肠菌群每1g
应小于100个、每1ml应小于10个。
3．用于表皮或黏膜不完整的含原药粉的局部给药制剂：细菌数每1g或10cm2不得过1000个、每1ml不得过100个；霉菌和酵母每1g、1ml或10cm2不得过100个；每1g、1ml不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌。
4．用于表皮或黏膜完整的含原药粉的局部给药制剂：细菌数每1g或10cm2不得过10000个、每1ml不得过100个；霉菌和酵母每1g、1ml或10cm2不得过100个；每1g、1ml不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌。
微生物限度标准2010版
二、微生物限度标准（2010版药典二部附录P115，一部P88）（一）致病菌•口服制剂每g或每ml不得检出大肠埃希菌，含动物药及脏器的药品同时不得检出沙门菌•含中药原生药粉还不得检出大肠菌群（大肠杆菌）•外用每g或每ml不得检出铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、金黄色葡萄球菌；梭菌；大肠埃希菌（眼、鼻、呼吸）•阴道、创伤、溃疡用制剂同时不得检出破伤风杆菌。
一次为准，检出以不合格处理（二）活螨不得检出（三）细菌与霉菌1、要求无菌或标示无菌的制剂：应符合无菌检查规定3、局部给药制剂1）用于手术、烧伤或严重创伤的：应符合无菌检查规定2）用于表皮或粘膜不完整、含药材原粉的：•细菌数：≤1000 cfu /g或10cm2，≤100 cfu /ml•霉菌和酵母菌数：≤100 cfu /g、ml或10cm2•金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：不得检出/g、ml或10cm2 （各外用制剂均同）3）用于表皮或粘膜完整、含药材原粉的：细菌数：≤10 000 cfu /g或10cm2，≤100 cfu/ml霉菌和酵母菌数：≤100 cfu /g、ml或10cm2金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：不得检出/g、ml或10cm2 （各外用制剂均同）4）眼部给药制剂已全提升为无菌制剂原：细菌数：≤10 cfu /g或ml霉菌和酵母菌数：每1g或1ml不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌：每1g或1ml不得检出5）耳、鼻及呼吸道给药制剂细菌数：≤100 cfu /g、ml或10cm2霉菌和酵母菌数：≤10 cfu /g、ml或10cm2金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌:不得检出/g、ml或10cm2大肠埃希菌：鼻及呼吸道给药制剂, 不得检出/ g、ml或10cm26）阴道、尿道给药制剂细菌数：≤100 cfu /g或ml霉菌和酵母菌数：≤10 cfu /g或ml金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌：不得检出/g、ml或10cm27）直肠给药制剂细菌数：≤1000 cfu /g，≤100 cfu /ml霉菌和酵母菌数：≤100 cfu /g或ml金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：不得检出/g或ml8）其它局部给药制剂细菌数：≤100 cfu /g、ml或10 cm2霉菌和酵母菌数：≤100 cfu/g、ml或10cm2金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌：不得检出/g、ml或10cm24、含动物组织及动物类原药材粉（蜂蜜、王浆、动物角、阿胶除外）的口服制剂：每10g或10ml还不得检出沙门氏菌5、有兼用途径制剂：应符合合途径的标准6、霉变、长螨者：以不合格论。
洁净服微生物限度标准
洁净服微生物限度标准主要根据国家和地区的法规和条例制定，同时考虑以下因素：空气中的微生物限值：根据洁净区的级别，空气中微生物的限值也有所不同。
例如，一级洁净区的空气中微生物总菌落数限制在每立方米不超过10个。
表面微生物限值：洁净区内的表面微生物菌落数也需要监测，通常要求每平方厘米不超过100个菌落。
微生物检测时，通常按照SOP要求进行培养，根据不同的洁净级别和表面类型，确定取样点和取样量，以及培养基的类型和培养时间。
一般来说，洁净服在清洗后或灭菌后的保存时间应按照规定进行，已确定清洗后或者灭菌后的保存时间。
微生物限度检查法标准操作规程完整
3、计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性检查 供试品微生物计数中 所使用的培养基应进行适用性检查。供试品的微生物计数方法应进行方法适用性 试验，以确定采用的方法适合于该产品的微生物计数。
4、菌种及菌液的制备
试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0袋），并采用适宜的菌种保藏技术进行保藏。计数培养基适用性检查和计数方法 适用性试验。
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)[CMCC(B) 10104]
大肠埃希菌(Escherichia coli)[CMCC(B) 44102])
乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B)[CMCC(B) 50094]
白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F) 98001]
薄膜过滤法采用的滤膜孔径不大于。滤膜直径一般为50mm。滤器及滤膜使用 前应采用适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。水溶性供 试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。为发挥滤膜的最大过滤效率，应 注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需要 用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量不超过100ml，总冲洗量不得超过1000m1；以免滤膜上的微生物受损伤。取照上述“供试液的制备”和“接种和 稀释”制备的供试液适量（一般取相当于1g、1ml、10cm2的供试品，若供试品 中所含菌数校对，供试液可酌情减量），加至适量的稀释液总，混匀，过滤，用 适量的冲洗液冲洗滤膜。测定需氧菌总数，转移滤膜菌面朝上贴于胰酪大豆胨 琼脂培养基平板上；测定霉菌和酵母菌总数，转移滤膜菌面朝上贴于沙氏葡萄糖 琼脂培养基平板上，按规定条件培养、技术。每株试验菌每种培养基至少制备1张滤膜。同法测定供试品对照组和菌液对照组菌数。
洁净服微生物限度标准
洁净服微生物限度标准
摘要：
1.洁净室设备表面微生物限度标准
2.人员手部微生物限度标准
3.相关规定及标准来源
正文：
洁净室设备表面微生物限度标准：
洁净室设备表面微生物限度标准是指在洁净室环境中，设备表面允许存在的微生物数量的最高限度。
这一标准旨在确保洁净室设备表面不会对洁净室环境产生污染，从而保证洁净室环境的洁净度。
在洁净室设备表面微生物限度标准中，通常会包括以下几类微生物：细菌、真菌、酵母菌和霉菌。
针对这些微生物，标准会规定它们在设备表面上的最大允许数量。
人员手部微生物限度标准：
人员手部微生物限度标准是指在洁净室环境中，人员手部允许存在的微生物数量的最高限度。
这一标准旨在确保洁净室人员手部不会对洁净室环境产生污染，从而保证洁净室环境的洁净度。
在人员手部微生物限度标准中，通常会包括以下几类微生物：细菌、真菌、酵母菌和霉菌。
针对这些微生物，标准会规定它们在手部皮肤上的最大允许数量。
相关规定及标准来源：
洁净室设备表面微生物限度标准和人员手部微生物限度标准通常由国家和行业的相关机构或组织制定。
在我国，这些标准主要由国家质量监督检验检疫总局（AQSIQ）和国家标准化管理委员会（SAC）制定。
具体而言，洁净室设备表面微生物限度标准主要参照《洁净室设备表面微生物限度》（GB/T 16292-2010）这一国家标准；人员手部微生物限度标准主要参照《洁净室人员手部微生物限度》（GB/T 16293-2010）这一国家标准。
综上所述，洁净室设备表面微生物限度标准和人员手部微生物限度标准是确保洁净室环境洁净度的重要措施。
微生物限度标准
微生物限度检查结果判断
微生物限度标准
另外：
1．含原药材粉的制剂细菌数每1g不得过10000个(丸剂每1g不得过30000个)、每1ml不得过500；霉菌和酵母每1g、1ml不得过100个；每1g、1ml不得检出大肠埃希菌；大肠菌群每1g应小于100个、每1ml应小于10个。
2．含豆豉、神曲等发酵成分的制剂细菌数每1g不得过100000个、每1ml不得过1000；霉菌和酵母每1g不得过500个、1ml不得过100个，每1g、1ml不得检出大肠埃希菌，大肠菌群每1g
应小于100个、每1ml应小于10个。
3．用于表皮或黏膜不完整的含原药粉的局部给药制剂：细菌数每1g或10cm2不得过1000个、每1ml不得过100个；霉菌和酵母每1g、1ml或10cm2不得过100个；每1g、1ml不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌。
4．用于表皮或黏膜完整的含原药粉的局部给药制剂：细菌数每1g或10cm2不得过10000个、每1ml不得过100个；霉菌和酵母每1g、1ml或10cm2不得过100个；每1g、1ml不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢菌。
2015版中国药典微生物限度
1.4.2供试品检查
• 供试液制备
– ⑵ 水不溶性非油脂类供试品
• 取供试品， 用 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨 缓冲液，或 pH7.2 磷酸盐缓冲液，或胰酪 大豆胨液体培养基制备成 1:10 供试液。 分散力较差的供试品，可在稀释液中加入 表面活性剂如 0.1%的聚山梨酯 80，使供 试品分散均匀。若需要，调节供试液 pH 值至 6～8。必要时，用同一稀释液将供 试液进一步 10倍系列稀释。
1.3.3计数方法适用性试验
1. 供试液制备 2. 接种和稀释 3. 抗菌活性的去除与灭活 4. 供试品中微生物的回收
– 平皿法 – 薄膜过滤法 – 最可能数法（MPN 法）
5. 结果判断
1.4 供试品检查
• 1.4.1检验量
– 检验量即一次试验所用的供试品量（g、ml
或cm²）。
– 除另有规定外,一般供试品的检验量为10g 或
• 需氧菌总数是指胰酪大豆胨琼脂培养基上生长的 总菌落数（包括真菌菌落数）；
• 霉菌和酵母菌总数是指沙氏葡萄糖琼脂培养基上 生长的总菌落数（包括细菌菌落数）。
• 若因沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的细菌使霉菌 和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求，可 使用含抗生素（如氯霉素、庆大霉素）的沙氏葡 萄糖琼脂培养基或其他选择性培养基（如玫瑰红 钠琼脂培养基）进行霉菌和酵母菌总数测定。
1.4.2供试品检查
• 供试液制备
– ⑷需用特殊方法制备供试液的供试品
• 膜剂供试品 • 肠溶及结肠溶制剂供试品 • 气雾剂、喷雾剂供试品 • 贴膏剂供试品
1.4.2供试品检查
1. 平皿法
– 平皿法包括倾注法和涂布法。 – 除另有规定外，取规定量供试品，按方法适用性
试验确认的方法进行供试液制备和菌数测定，每 稀释级每种培养基至少制备2个平皿。 – 培养和计数 除另有规定外，胰酪大豆胨琼脂培养 基平板在30～35℃培养3~5天，沙氏葡萄糖琼脂 培养基平板在20～25℃培养5 ~7天， 观察菌落 生长情况,点计平板上生长的所有菌落数，必要时 可适当延长培养时间至7 天进行菌落计数并报告 。菌落蔓延生长成片的平皿不宜计数。点计菌落 数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌 数报告规则报告菌数。 – 若同稀释级两个平皿的菌落数平均值不小于15， 则两个平皿的菌落数不能相差1 倍或以上。
药品微生物限度标准
药品微生物限度标准非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的给药途径和对患者健康潜在的危害以及药品的特殊性而制订的。
药品生产、贮存、销售过程中的检验，化学药品原料药、中药提取物及辅料的检验，新药标准制订，进口药品标准复核，考察药品质量及仲裁等，除另有规定外，其微生物限度均以本标准为依据。
非无菌制剂的总需氧菌数、总霉菌及酵母菌数测定照附录×××检查；非无菌制剂的控制菌检查照附录×××检查。
本限度标准解释如下：101CFU：最大可接受限值＝20；102CFU：最大可接受限值＝200；103CFU：最大可接受限值＝2000。
以此类推。
1.制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂应符合无菌检查法规定。
2.口服给药制剂2.1 不含药材原粉的口服给药制剂需氧菌总数每1g不得过103cfu。
每1ml不得过102cfu。
霉菌及酵母菌总数每1g不得过102cfu。
每1ml不得过101cfu。
大肠埃希菌每1g或1ml不得检出。
沙门菌含脏器提取物的口服给药制剂每10g或10ml不得检出。
2.2含药材原粉的口服制剂2.2.1不含豆豉、神曲等发酵原粉的口服给药制剂需氧菌总数每1g不得过10000cfu。
每1ml不得过100cfu。
霉菌及酵母菌总数每1g或1ml不得过100cfu。
大肠埃希菌每1g或1ml不得检出。
沙门菌每10g或10ml不得检出。
耐胆盐革兰阴性菌每1g应小于102个。
每1ml应小于101个。
2.2.2 含豆豉、神曲等发酵原粉的口服制剂需氧菌总数每1g不得过100000cfu。
每1ml不得过1000cfu。
霉菌和酵母菌总数每1g不得过500cfu。
每1ml不得过100cfu。
大肠埃希菌每1g或1ml不得检出。
沙门菌每10g或10ml不得检出。
耐胆盐革兰阴性菌每1g应小于102个。
每1ml应小于101个。
3.局部给药制剂3.1 用于手术、烧伤或严重创伤的局部给药制剂应符合无菌检查法规定。