桂枝加芍药汤颗粒指纹图谱及多指标成分含量测定方法研究
桂枝芍药知母汤方剂配方

桂枝芍药知母汤方剂配方桂枝芍药知母汤【方剂名】桂枝芍药知母汤,出自汉·《金匮要略》。
【组成】桂枝四两(12克)、芍药三两(9克)、甘草二两(6克)、麻黄二两(6克)、知母三两(9克)、生姜五两(9克)、白术五两(9克)、防风四两(9克)、附子两枚(6克)。
【用法】水煎服,每日1剂。
【功效】通阳行痹,祛风逐湿。
【主治】主治肢节疼痛,身体赢弱,脚肿如脱,头眩短气,温温欲吐,舌偏红苔白,脉濡数。
【临床医案】临床主要用于治疗类风湿关节炎、风湿关节炎、风湿多肌痛、纤维肌痛症、坐骨神经痛、股骨头坏死、腱鞘炎等病症,也可用于麻疹并发肺炎、气管炎、肺源性心脏病伴心力衰竭、深部组织炎等病症。
1.类风湿关节炎:以桂枝芍药知母汤加减配合云克及甲氨蝶呤治疗30例,与甲氨蝶呤治疗30例对照,疗程3个月。
结果:治疗组中临床治愈8铡,显效16例,有效4例,无效2例,总有效率为93.3%;对照组中临床治愈4例,显效10例,有效7例,无效9例,总有效率为70%,治疗组的总有效率显著高于对照组。
(《湖南中区药大学学报》2013年第8期)2.股骨头坏死:以桂枝芍药知母汤加味治疗股骨头坏死42例,随访时间6~29个月。
结果:采用1994年全国股骨头坏死专题会议髋关节功能评定标准,Ficai Ⅰ-Ⅱ期优良率为86.2%,Ficat Ⅲ~Ⅳ缓解率为6t)%,优良率为20%,患者股骨头坏死情况明显改善。
(《现代中西医结合杂志》2002年第17期)3.原发性坐骨神经痛:以桂枝芍药知母汤加味治疗原发性坐骨神经痛300例,随访半年以上。
结果:治愈:痛、酸、重、木消失,能参加一般重体力劳动,经半年以上随访无复发264例占88%,显效:痛、酸、重、木基本消失,但劳累后稍有轻度酸痛感觉30例占10%;无效:诸症无改善6例占2%,总有效率为98%,患者坐骨神经痛显著改善。
(《辽宁中医杂志》1997年第12期)4.风温性多肌痛:治疗组以桂枝白芍知母汤合小剂量泼尼松治疗35例,对照组单纯予小剂量泼尼松治疗35例,疗程3个月:结果:治疗组中临床治愈9例,显效16例,有效7例,无效3例,总有效率为91. 14%;对照组中临床治愈3例,显效14例,有效8例,无效10例,总有效率为71.13%,治疗组的总有效率显著高于对照组。
HPLC同时测定桂枝颗粒中桂皮酸、芍药苷、甘草酸含量

HPLC同时测定桂枝颗粒中桂皮酸、芍药苷、甘草酸含量蒋晔;郝福;李艳荣;任淑萌
【期刊名称】《中国中药杂志》
【年(卷),期】2008(33)2
【总页数】3页(P204-206)
【关键词】甘草酸含量;同时测定;桂枝汤;桂皮酸;芍药苷;HPLC;中药制剂;指标成分【作者】蒋晔;郝福;李艳荣;任淑萌
【作者单位】河北医科大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1;R289.5
【相关文献】
1.HPLC 法同时测定少腹逐瘀丸中芍药苷、阿魏酸、桂皮醛和异鼠李素-3-0-新橙皮苷含量 [J], 史宪海;杨艳;杜娟
2.HPLC 法测定柴胡桂枝颗粒中桂皮醛和桂皮酸的含量 [J], 范广建;张坚
3.HPLC同时测定归芍疏肝散中芍药苷阿魏酸和甘草酸铵的含量 [J], 荀秀彪; 张顺平
4.HPLC法测定甘草附子汤中甘草酸和桂皮酸的含量 [J], 高秋涛;毕开顺
5.HPLC-DAD法同时测定慢前康合剂中芍药苷、丹酚酸B、川续断皂苷Ⅵ、甘草酸的含量 [J], 施惠埙;童晓东;李松
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在线二维液相色谱法快速测定桂枝茯苓胶囊中芍药苷、丹皮酚、苦杏仁苷和肉桂酸的含量

在线二维液相色谱法快速测定桂枝茯苓胶囊中芍药苷、丹皮酚、苦杏仁苷和肉桂酸的含量高效液相色谱已成为中药复杂体系研究的重要技术,随着新型色谱柱填料和键合技术的发展,为中药中各类成分的分离提供了多种选择,然而中药的复杂性已远远超出了人们的设想,Davis 等[1] 曾经指出用一维分离方法对含有100 个随机组分的样品进行分离,完全分离82个组分,至少需要400 万的理论板数,且当色谱峰的数量超过峰容量的37%时,系统的分离度会大大降低,所以在现有技术条件下,期望如此高的柱效和峰容量是不切实际的。
多维液相色谱分离是液相色谱发展的一个重要方向,它是将多种不同分离机制的色谱体系进行联用,增加了色谱系统的分离能力,扩大了分离空间,提高了系统的峰容量,可以满足复杂样品的分离要求。
在多维色谱分离手段中,二维分离最为常见。
二维色谱根据一维组分是否直接进入到第二维进行分离可分为离线[2-4] 和在线[5-6]2 类,其中在线方法具有自动化程度高、避免人为误差及加快样品分析效率等优点,二维液相色谱分离技术已被越来越多的应用到中药的研究中[7-9] 。
桂枝茯苓胶囊系汉代张仲景《金匮要略》古方桂枝茯苓丸的改进剂型,经现代制造工艺精制而成为纯中药制剂,由桂枝、牡丹皮、桃仁、赤芍和茯苓组成。
在2010 年版《中国药典》中收载的桂枝茯苓胶囊含量测定项下分别采用3 种高效液相色谱法测定丹皮酚、芍药苷和苦杏仁苷的含量[10] ,不仅实际样品的分析效率较低,且缺乏来自桂枝中的指标性成分。
本文利用双梯度高效液相系统(dual gradient liquid chromatography ,DGLC)在线二维色谱分离技术,样品提取后,溶液直接进样分析,并同时测定了肉桂酸的含量,含量测定结果与原方法基本一致,且样品分析效率大大提升,可用于桂枝茯苓胶囊的质量分析。
1材料双三元液相色谱RS系统(美国赛默飞世尔公司),配置6 通道真空脱气机SRD36O0双梯度分析型色谱泵DGP3600RS自动进样器WPS3000TSL柱温箱TCC-3000 (配有1个六通阀和1 个十通阀),二极管阵列检测器DAD3000RS变色龙色谱管理软件Chromeleon 6.8 SR11; Acclaim PAH (4.6 mnh< 150 mm 3 卩m, 美国赛默飞世尔公司,批号063191) ; Acclaim C18色谱柱(3.0 mm< 150 mm 3 a m,美国赛默飞世尔公司,批号063691 )。
加味桂枝芍药知母汤两种不同配伍法治疗风湿痹证的临床观察的开题报告

加味桂枝芍药知母汤两种不同配伍法治疗风湿痹证的临床观察的开题报告一、研究背景风湿痹证是一种常见的风湿类疾病,现代医学认为其主要表现为筋骨肌肉的炎症反应,同时伴随着关节疼痛、肿胀、活动障碍等症状。
中医传统观点认为,风湿痹证是由于风寒湿邪所致,导致气血不畅,从而形成的病证。
中医治疗风湿痹证一般采用加味桂枝芍药知母汤为基本处方。
该方具有温经散寒、活血化瘀、祛风散痹、益气和阴等功效。
但是,由于风湿痹证的复杂性和病情的差异性,通常需要根据患者病情的不同而进行相应的配伍和调整,以达到更好的治疗效果。
二、研究目的本研究旨在探讨加味桂枝芍药知母汤两种不同的配伍方法治疗风湿痹证的临床疗效,并比较其优劣之处,为临床应用提供指导。
三、研究方法1. 研究对象:本研究选取具有风湿痹证的患者作为研究对象,共计50例。
2. 研究设计:本研究采用随机分组试验的方法,将50例患者随机分为两组,每组25例。
第一组采用加味桂枝芍药知母汤配伍治疗,第二组采用另一种加味桂枝芍药知母汤配伍治疗。
3. 研究方法:(1)第一组治疗方案:加味桂枝芍药知母汤配伍,包括桂枝、芍药、生姜、甘草、白术、茯苓、炙草。
(2)第二组治疗方案:加味桂枝芍药知母汤另一种配伍方案,包括桂枝、芍药、生姜、甘草、大黄、蒲公英、川芎。
(3)疗程:两组患者采用连续治疗4周的方案。
(4)疗效评估:采用中医辨证标准,以风湿痹证症状的减轻程度、关节功能的恢复程度、生活质量的改善程度等指标来评估疗效。
四、预期结果及意义通过对加味桂枝芍药知母汤两种不同配伍方法治疗风湿痹证的临床观察,预期在患者病情改善程度方面,两种配伍方法均有一定的疗效。
但是,预计第二组的治疗效果可能更加显著,因为针对风湿痹证的病因和病机,川芎和大黄都有一定的治疗效果,能够有效改善患者的症状和生活质量。
此外,通过本研究的开展,可以更好地探究中药方剂的配伍规律,为中医临床疗效提供指导意义。
HPLC法测定桂枝颗粒中肉桂酸的含量

HPLC法测定桂枝颗粒中肉桂酸的含量目的:建立高效液相色谱法测定桂枝颗粒中肉桂酸的含量。
方法:采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液(35:65)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长285 nm,柱温:25 ℃。
结果:肉桂酸在0.245 μg~1.225 μg之间峰面积与质量呈良好线性关系(r2=0.9997),且肉桂酸的提取以在水为提取溶剂的条件下超声30 min为最佳。
结论:该法精密度、稳定性和重复性良好,简便易行,可有效地测定桂枝中有效活性成分肉桂酸的含量,为中药材桂枝的质量考察提供可靠的依据。
标签:桂枝;肉桂酸;高效液相色谱一、引言中药材桂枝采自樟科樟属植物肉桂(Cinnamomum cassia Presl)的干燥嫩枝[1]。
桂枝含挥发油较高,有效成分为肉桂酸、桂皮醛、桂皮醇、香豆素及原儿茶酸,其主要活性成分为桂皮醛和肉桂酸[2]。
桂枝有很强的疏肌、清热的作用,在中医上常被作为解表药使用;桂枝中含有丰富的挥发油,亦有疏通筋骨、活血化瘀及舒缓疼痛的作用[3~5]。
本文建立了测定桂枝中有效成分肉桂酸含量的方法,该法简便、准确,可为桂枝的质量控制研究提供有效的依据。
二、仪器与药品2.1 仪器大连依利特分析仪器有限公司EC2000色谱数据处理工作站,P230高压恒流泵,Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);KQ-300DE数控超声清洗器;DZF-1B电热恒温真空干燥箱。
2.2 药品肉桂酸对照品(上海源叶生物科技有限公司);乙腈(色谱纯);其余试剂为分析纯;桂枝饮片(市售)。
三、方法与结果3.1 色谱条件Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);乙腈-0.1%磷酸溶液(35:65)为流动相,流速1.0 mL·min-1;检测波长:285 nm;柱温:25 ℃,进样量:5 μL。
HPLC测定桂枝汤不同配伍中桂皮酸和桂皮醛的含量(一)

HPLC测定桂枝汤不同配伍中桂皮酸和桂皮醛的含量(一)【摘要】建立HPLC法测定桂枝汤中桂皮酸和桂皮醛含量的分析方法,研究配伍对桂枝汤中桂皮酸和桂皮醛含量的影响。
〔方法〕采用L16(215)正交设计,以HPLC法测定桂皮酸和桂皮醛含量。
〔结果〕不同配伍对桂枝汤中桂皮酸、桂皮醛含量有影响。
〔结论〕该方法测定样品成分含量方法准确,敏捷,数据可靠,为药效学提供了科学定量依据。
【关键词】桂枝汤;桂皮酸;桂皮醛;配伍;HPLC法本研究引入正交设计,合理安排方中甘草、芍药、大枣、生姜与桂枝配伍,采用HPLC法,测定了桂枝与方中其它药物配伍后,其主要成分的含量变化,为进一步研究桂枝汤的含量测定、配伍规律、作用机制等提供参考。
1药品与材料1.1仪器Agilent1100Series高效液相色谱仪;METTLERAE240电子分析天平;SB3200超声波清洗器。
1.2试剂流动相乙腈为色谱纯;水为重蒸馏水;其它试剂均为分析纯。
桂皮酸、桂皮醛对照品由昆明海升林科技有限公司提供(批号分别为,,供含量测定)。
1.3中药材桂枝、芍药、甘草、生姜、大枣由宜昌市众生药业有限公司提供(经宜昌市药品检验所魏俊德主任药师鉴定上述药材符合2005年同家药典)。
2方法与结果2.1色谱条件色谱柱为NVCLEOSILC18(10μm,4.6mm×250mm),流动相为乙晴醋酸水溶液(33∶67),检测波长为285nm,柱温为35℃,流速为1.0ml·min,进样量为10μl〔2〕。
在此条件下,对照品和样品色谱图见图1和图2。
2.2对照品及供试品溶液的制备2.2.1对照品溶液的配制精密称取桂皮酸、桂皮醛对照品适量,分别置于100ml容量瓶中,加甲醇溶解并稀释到刻度,摇匀,放置,滤过,作为贮备液。
另取贮备液5ml,加甲醇稀释至100ml,制成每1ml含桂皮酸44μg的对照品溶液。
2.2.2供试品溶液的制备按桂枝汤配方比例,精密称取桂枝9g,芍药9g,炙甘草6g,生姜9g,大枣4枚,加药材5倍水,加热回流2h,四层纱布过滤,精密量取2ml,置10ml容量瓶中,加甲醇定容至10ml,滤液放冷后过0.45μm微孔滤膜,得供试品溶液。
柴胡-白芍药对配方颗粒指纹图谱的建立及多指标性成分含量测定

柴胡-白芍药对配方颗粒指纹图谱的建立及多指标性成分含量测定杨新雪;梁进京;董蕊【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2024(36)4【摘要】建立柴胡-白芍药对配方颗粒的HPLC指纹图谱、化学模式识别及多指标成分含量测定方法。
采用COSMOSIL 5C_(18)-MS-Ⅱ(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱;乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长分别为210、230 nm;柱温30℃。
建立HPLC指纹图谱,利用相似度评价、聚类分析(clustering analysis, CA)以及主成分分析(principal component analysis, PCA)对15批柴胡-白芍药对配方颗粒指纹图谱进行研究,同时测定4种指标性成分含量。
本研究建立的指纹图谱共确定15个共有峰,并指认了其中的4种成分;15批柴胡-白芍药对配方颗粒指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均>0.90;CA和PCA均可将15批柴胡-白芍药对配方颗粒大致分为2类;多指标成分含量测定方法符合方法学考察要求,4种成分的含量均有不同程度的差异。
所建方法简单易行,可为柴胡-白芍药对配方颗粒的质量控制和临床用药提供参考。
【总页数】9页(P572-580)【作者】杨新雪;梁进京;董蕊【作者单位】吉林农业大学中药材学院【正文语种】中文【中图分类】R283.6【相关文献】1.桂枝加芍药汤颗粒指纹图谱及多指标成分含量测定方法研究2.郁金配方颗粒HPLC指纹图谱及指标成分含量测定研究3.冬凌草配方颗粒超高效液相色谱指纹图谱及多指标成分含量测定方法的建立4.金银花-连翘药对配方颗粒的HPLC指纹图谱建立及多指标成分含量测定研究5.麻黄-桂枝药对配方颗粒指纹图谱建立及指标成分含量测定研究因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
【推荐下载】浅谈高效液相色谱法检测加味芍药甘草颗粒中芍药苷、甘草酸的含量

浅谈高效液相色谱法检测加味芍药甘草颗粒中芍药苷、甘草酸的含量 2012-12-06 【编者按】:护理论文是科技论文的一种是用来进行护理科学研究和描述研究成果的论说性文章。
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【摘要】【目的】建立加味芍药甘草颗粒中芍药苷及甘草酸的含量测定方法。
【方法】采用反相高效液相色谱法,色谱条件:乙腈(A)-10g/L冰醋酸水溶液(B)(调pH3?5),流速1?0mL/min;检测波长250nm,柱温为室温,进样量20 L。
梯度洗脱程序:体积分数18%A、0~5min,体积分数19%~29%A、6~10min,体积分数30%~45%A、11~25min(A+B=100%)。
【结果】芍药苷及甘草酸分别在1?916~122?6、2?625~168g/mL范围内成良好线性关系,平均回收率芍药苷为101?12%,甘草酸为99?68%。
【结论】本测定方法简便可行、重复性好,可用于加味芍药甘草颗粒中有效成分芍药苷和甘草酸的含量测定。
【关键词】加味芍药甘草颗粒/化学;芍药苷/分析;甘草酸/分析;色谱法,高压液相 芍药甘草汤系《伤寒论》著名方剂,由芍药、甘草等份组成。
该方为仲景为伤寒误汗亡阳、阳复后脚挛急证而设,奏柔肝舒筋、缓急止痛之效,具有明显的镇痛、抗炎、解痉、止咳、平喘、抗变态反应作用,广泛应用于呼吸系统、消化系统、神经肌肉系统、泌尿系统及外科和妇科等方面的疾病[1]。
研究表明,芍药苷及甘草酸为芍药与甘草中的主要有效成分[2-3]。
而以芍药、甘草为主的衍化方较多,该类制剂的指标成分主要是芍药苷、甘草酸,有关单独测定这两类成分方法的文献报道较多,目前尚未见到同时测定芍药甘草汤颗粒中芍药苷与甘草酸含量的报道。
加味芍药甘草颗粒是以芍药甘草汤为基本方的中成药,本文采用高效液相色谱法(HPLC)同时检测该方中芍药苷和甘草酸的含量,结果报道如下。
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实验研究CHINESE COMMUNITY DOCTORS中国社区医师2018年第34卷第18期桂枝加芍药汤出自《伤寒论》,常用于施治脾阴亏损、肠道失润所致便秘、腹胀满、口唇干燥的老年习惯性便秘患者[1]。
本方由桂枝、白芍、生姜、大枣、炙甘草组成。
方中重用阴柔之芍药滋养脾阴,复用味甘之炙甘草、大枣佐芍药补益脾阴[2]。
方中用桂枝、生姜等阳药是为脾阴不足、运化失职、气机壅遏所致之腹胀满而设。
如此配伍,动静结合,共奏滋养脾阴、调畅气机之功,则斯症愈矣。
桂枝加芍药汤作为中药传统经典方已经经过了长期的临床使用,不仅具有疗效确切以及不良反应较少的优势,而且来源于传统,更突出了中医药特色。
但是通过检索文献发现,未能检索到对桂枝加芍药汤质量控制的方法。
桂枝加芍汤中活性成分复杂多样,为弥补质量评价的不足,本实验采用高效液相色谱法建立了桂枝加芍汤颗粒的指纹图谱,并同时对其中3种活性成分进行控制,从而为深入研究桂枝加芍汤颗粒的药效物质基础、配伍基础提供了有效的分析手段,为经典名方的开发提供参考依据。
材料仪器:岛津高效液相色谱仪(LC-2010A),KQ-3000DB 超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司);Mettler Toledo AL104电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司,精度:0.001g),Mettler Toledo XP26电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司,精密度:0.01mg)。
试药:乙腈(色谱纯,4L/瓶飞世尔批号:146971),水为屈臣氏蒸馏水(4.5L/瓶,广州屈臣氏食品饮料有限公司北京饮料分公司),磷酸为分析纯(500mL/瓶,国药集团化学试剂有限公司,批号:20141104)。
桂枝加芍药汤颗粒由北京康仁堂药业有限公司自制[3-5];芍药苷对照品(批号:110736-201640,购于中国食品药品检定研究院);甘草苷(批号:111610-201106购于中国食品药品检定研究院);甘草酸铵对照品(批号:110731-201116,购于中国食品药品检定研究院)。
方法与结果色谱条件:①色谱柱:美国安捷伦科技有限公司Agilent C18(4.6mm×250mm,5μm);检测波长267nm ,流速1mL/min;②柱温:25℃;进样量10μL;③流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸(B)采用下表梯度洗脱[6]。
见表1,进样量10μL,色谱图,见图1。
供试品溶液的制备:取桂枝加芍药汤颗粒约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加蒸馏水50mL,称定重量,超声处理15min,使溶解,放冷,再称定重量,用蒸馏水补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
阴性样品制备:制备缺白芍、缺炙甘草阴性样品,按供试品溶液制备方法桂枝加芍药汤颗粒指纹图谱及多指标成分含量测定方法研究李明1李蕊2张佳诺1付静2100000北京中医药大学东直门医院1100000北京康仁堂药业有限公司2doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2018.18.002摘要目的:探讨桂枝加芍药汤颗粒指纹图谱及多指标成分含量测定方法。
方法:采用岛津高效液相色谱仪(LC-2010A),以乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,对标志性成分进行测定。
结果:建立了桂枝加芍药汤指纹图谱、标定了5个共有峰,指认其中3个峰并对其进行含量测定。
结论:本研究所建立的指纹图谱及多指标含量测定方法能较好地评价桂枝加芍药汤颗粒的质量,并可提高该制剂的质量标准,为保证产品质量奠定基础。
关键词桂枝加芍药汤;HPLC 指纹图谱;芍药苷Study on the fingerprint and determination method of multi index component content of Guizhi and Shaoyao decoctiongranuleLi Ming 1,Li Rui 2,Zhang Jianuo 1,Fu Jing 2Dongzhimen Hospital of Beijing University of Chinese Medicine 1000001Beijing Kangrentang Pharmaceutical Limited Company 1000002Abstract Objective:To explore the fingerprint and determination method of multi index component content of Guizhi and Shaoyao decoction granule.Methods:The Daojin high performance liquid chromatograph(LC-2010A)was used,gradient elution was carried out with acetonitrile-0.1%phosphoric acid as the mobile phase,we measured the markers.Results:We had established the fingerprint of Guizhi and Shaoyao decoction,calibrated 5common peaks,and identified three peaks and measured them.Conclusion:The fingerprint and multi index determination method established in this study can better evaluate the quality of Guizhi and Shaoyao decoction granule.It can improve the quality standard of the preparation and guarantee the quality of the product.Key words Guizhi and Shaoyao decoction;HPLCfingerprint;Paeoniflorin7CHINESE COMMUNITY DOCTORS实验研究中国社区医师2018年第34卷第18期制备阴性溶液。
对照品溶液的制备:精密称取芍药苷适量,加甲醇制成每1mL 含芍药苷60μg;精密称取甘草苷、甘草酸铵对照品适量,加70%乙醇制成每1mL 含甘草苷20μg、含甘草酸铵0.2mg 的混合对照品,即得。
方法学考察[7,8]:①精密度试验:取同一供试品溶液,在2.1项下的色谱条件下重复进样6次,测得各共有峰相对保留时间和相对峰面积(参比峰为甘草苷)的RSD 均<3%,表明仪器精密度良好,符合指纹图谱的技术要求。
②稳定性试验:取同一供试品溶液,在2.1项下的色谱条件下,分别在0、2、4、8、12、24h 进样,测得各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD 均<3%,表明供试品溶液在24h 稳定。
③重复性试验:取同一批桂枝加芍药汤颗粒6份,按2.2项下制备供试品溶液,在2.1项下的色谱条件下,测得各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD 均<3%表明该方法重复性良好,符合指纹图谱的技术要求。
指纹图谱建立及相似度分析:桂枝加芍药汤颗粒的HPLC 指纹图谱的建立:取10批桂枝加芍药汤颗粒样品,分别按供试品溶液的制备和检测方法进行检测,记录指纹图谱。
因甘草苷峰面积相对加大且稳定,故以其为参照峰,计算各共有峰相对保留时间,10批样品共有峰相对保留时间的RSD 均<0.5%符合指纹图谱的要求。
运用中国药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版”对10批样品的指纹图谱进行分析,设定样品1为参照图谱。
选取9个特征峰进行多点校正,自动匹配,生成对照指纹图谱,见图2。
匹配后的10批样品谱图见图3,然后进行各样品相似度评价,样品1~10的相似度分别为0.987、0.978、0.987、0.988、0.994、0.978、0.979、0.981、0.979、0.971。
10批桂枝加芍药汤颗粒指纹图谱相似度均>0.90,符合指纹图谱要求。
含量测定方法与结果[9]色谱条件:按2.1项下色谱条件进行检测,以3种对照品计算理论塔板数>5000,分离度>1.5。
对照品溶液的制备:精密称取芍药苷适量,加甲醇制成每1mL 含芍药苷60μg;精密称取甘草苷、甘草酸铵对照品适量,加70%乙醇制成没1mL 含甘草苷20μg、含甘草酸铵0.2mg 的混合对照品,即得。
对照品溶液的制备:取桂枝加芍药汤颗粒约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加蒸馏水50mL,称定重量,超声处理15min,使溶解,放冷,再称定重量,用蒸馏水补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
线性范围的考察:精密称取芍药苷对照品12.18mg,置于100mL 容量瓶中,加甲醇使溶解,定溶至刻度,摇匀。
分别吸取1mL、3mL、5mL、7mL、9mL、10mL 溶液置10mL 容量瓶中,加甲醇定溶至刻度,即得。
取芍药苷对照品溶液10μL 注入液相色谱仪,按2.1项下色谱条件测定,记录峰面积,以色谱峰的峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,绘制标准曲线,求得芍药苷的回归方程y=14011x +14883(R 2=0.9999)(R 2=0.9999),表明芍药苷0.122~1.218μg 范围内线性关系良好。
精密称取甘草苷、10.08mg 甘草酸铵对照品10.27mg,置50mL 容量瓶中,加70%乙醇使溶解,定容至刻度,摇匀。
分别吸取1mL 、3mL、5mL、7mL、9mL、10mL 溶液置10mL 容量瓶中,加70%乙醇定容至刻度,即得。
取甘草苷、甘草酸铵混合对照品溶液10μL 注入液相色谱仪,按2.1项下色谱条件测定,记录峰面积,以色谱峰的峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,绘制标准曲线,求得甘草苷的回归方程为y=2E +06x-3975.9(R 2=0.9999),表明甘草苷在0.202~4.032μg 范围内线性关系良好。
求得甘草酸铵的回归方程y=533487x +8668.2(R 2=5.010.015.020.025.030.035.040.045.050.0min8.07.06.05.04.03.02.01.00.0mV(×10)图1供试品HPLC 指纹图谱图2桂枝加芍药汤颗粒的对照指纹图谱图310批桂枝加芍药汤颗粒的HPLC 指纹图谱图4芍药苷对照品标准曲线23456789101112131415161718192021222324252627282930313233343536373839404142434445464748495051525354552345678910111213141516171819202122232425262728293031323334353637383940414243444546474849505152535455时间(min)8实验研究CHINESE COMMUNITY DOCTORS0.9995),表明甘草酸铵在0.201~4.025μg范围内线性关系良好。