秋水仙素诱导菊花脑多倍体的研究
上海农业学报２００２，１８（１）：４６－－５０ Ａｃｔａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ Ｓｈａｒｆ ａｉ
文章编号：１ ０００。３９２４（２００２）０ ｌ－４６．０５
秋水仙素诱导菊花脑多倍体的研究
陈发棣 蒋甲福 房伟民
ｆ南京农业大学园艺学院．南京２１００９５）
摘要利用秋水仙素对菊花脑进行浸种诱导多倍体，比较了不同处理浓度和时间的效果。
结果表明，０ ５ Ｌ浓度处理４８ｈ可以获得较好的效果，植株形态变异率为８３ １％；ｌ Ｏ Ｌ、２ ０ Ｌ
浓度处理１２ｈ 上变异率虽然升高，但由于生长抑制严重，后期死亡率明显升高；诱变株结实率和
种子发芽率明显低于对照。对４个形态变异株进行了叶片气孔保卫细胞太小、叶绿粒数测定和根
尖细胞染色体观察．鉴定出四倍体菊花脑ｌ株（２ｎ＝３６），嵌台体ｌ株
关键词菊花脑；秋水仙素；诱变；多倍体育种
中国分类号：Ｓ５—０３５＋２；￥６３６ ９ 文献标识码：Ａ
菊花脑［Ｄｅｎｄｒａｎｔｈｅｍａ ｎａｎｋｉｎｇｅｎｓｅ（Ｈａｎｄ—Ｍａｚｅ）ｘ Ｄ Ｃｕｉ］是菊科菊属多年生草本植物
（２ｎ＝２ｘ＝１８），菊花脑或其近缘种是尖叶野菊（４×）染色体组之一的供体，菊属的系统演化是
一个从低倍到高倍异源多倍体化的过程．野生菊染色体数目接近或相同的物种阈杂交较易实
现，二倍体物种与四倍体物种间分化程度高于四倍体物种与六倍体物种问分化程度，杂交更难
成功 ’ ，因此，四倍体菊花脑可能成为中国菊花起源演化研究的重要遗传学材料。菊花脑亦
是一种传统野生蔬菜，具有浓郁的菊香味，能清凉明目，调中开胃，也有解毒、降血压之功效 Ｊ，
四倍体菊花脑的获得有望进一步提高菊花脑的产量和品质。
由于种子休眠和萌发及化学诱变的的生理和生化机理尚在争论和研究当中，导致化学诱
变方法和观点不同。有人认为只有正在萌发的种子才能加倍 。由于诱发突变是一个发生在
单细胞中的事件，所以体细胞突变是一个边缘嵌台体的开端，营养体顶端可以从一个单细胞发
育而来。因此，为了减少二倍体选择和得到较大而易于识别的突变扇形体，当芽原基由少数未
分化的细胞组成时，就应当进行处理。种子和芽可以在休眠状态或代谢及合成的旺盛阶段进
行处理 但生长点处理愈早愈好，获得的多倍体数目就愈多，处理时间愈晚，则大多是嵌
合体。运用秋水仙素水溶液直接浸泡种子的方法成功地在君子兰 、金鱼草 、悬铃术 Ｊ、小
白菜… 等园艺植物上诱导出了多倍体。本研究即采用了种子直接浸泡的方法。
１材料与方法
１．１材料
试验于１９９９年３月～２０００年６月在南京农业大学园艺学院观赏园艺系进行。供试材料
收稿日期：２００１—０３—２６韧稿；２００１—１２—１０二改稿 江苏省ｆＩ然科学基金（ＢＫ９７１０１ｊ项１４和上海市农委科技兴农重点攻关项目ｌ编号：农科攻字（９９）第６－－７号］ｊ资助 作者简介：陈发樟，男，１９７０年６月出生，博士，副教授，在《植物学报》、《周艺学报》等学术期刊已发表论文２０泉篇。
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菊花脑种子采自校园内野生植株。
１．２方法
１．２．１种子处理种子用０．１，０．２，０．５，１ ０，２ ０ｇ／１ 秋水仙素水溶液各分别进行６，１２，２４，
４８ｈ浸泡处理，以蒸馏水浸泡作对照。每处理ｉ００粒种子。药物处理结束后用蒸馏水冲洗６
遍，然后将种子播于平底式育苗盘中，进行正常管理。
１．２．２形态变异率统计ｌＯｄ后，以根颈部位明显变短、膨大作为形态变异指标，统计变异株
占总苗数的百分率。
１．２．３叶片气孔保卫细胞测定３５ｄ后，用尖嘴镊子仔细撕取植株基部向上第２～３叶片的
下表皮，撕取部位尽量均匀，置于载玻片上，加１～２滴１％碘一碘化钾，盖』 盖玻片，在１６×４０
倍显微镜下用测微尺随机测量１０个气孔保卫细胞的长、宽度，并统计保卫细胞中的叶绿粒数，
求平均值。
１ ２ ４细胞学观察 于２０００年春天取单株幼嫩枝条扦插，晴天中午取新生根根尖，冰水处理
２４ｈ，卡诺氏固定液（３份９５％酒精：１份冰醋酸）固定，３～４ｄ后用醋酸洋红染色，在Ｏｌｙｍｐｕｓ
显微镜下观察染色体数目并拍照。
２结果与分析
２．１秋水仙素的诱变效应 由变异率可知，虽然１ ０ｇ／Ｌ、２ ０ｇ］Ｌ的浓度处理１２ｈ以上变异率
都在８４ ０％以上，但由于死亡率都太于５０％，甚至达到１００％，效果欠佳。而０．５ｇ／Ｌ浓度处理
４８ｈ的变异率为８３ １％，死亡率为３２．４％，整体效果为佳。
由表１可见，秋水仙素浓度与时间有累积效应，０ ｌｇ］Ｌ、０ ２ｇ／Ｌ浓度处理４８ｈ的变异率与
裹１不同秋水仙素浓度和处理时间对菊花脑的诱导效果 Ｔａｂｌｅ １ ＩＩｌｄ眦ｔ ｎ ｅｒ ｂ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｒ￣ｏｆ￣ｌｃｈｉｃｉｎｅｓ ０ｎ Ｄ ｎａｎｋ／ｎ￣ｅ
￣ｅ 维普资讯 http://www.cqvip.com ４８ 上 海 农 业 学 报 ｌ８卷
１ Ｏｇ／ｔ 处理６ｈ的变异率及０ ５ｇ／Ｌ处理４８ｈ与１ ０ｇｌ＇ｌ…２ ０ｇ／Ｌ处理１２ｈ的变异率几乎双双一
致；在时间相同的条件下，０ １～２．０ｇ／Ｌ的变异率依次升高；在相同浓度条件下，处理时间越
长，变异率也依次升高。
２．２秋水仙素的抑制效应对照播后第２天开始出苗，且出苗整齐一致，约４ｄ出齐，而各个
处理则相应推迟，０．１ Ｌ浓度处理６ｈ到第８天才出齐，２ ０ｇ／Ｌ浓度处理４８ｈ的到第５天才开
始出苗，约１０ｄ后出齐。刚长出的幼根短而粗，根尖钝圆，呈乳突状，处理苗的前期真叶生长明
显受到抑制，变异的幼苗不仅第一对真叶出现较迟，也较对照的小，且多呈畸形，抑制程度随浓
度的增加而愈加明显，自第２～３对真叶起，叶片不再表现畸形，２０ｄ后无真叶的幼苗全部死
亡。１ ０ｇ／Ｌ与２．０ｇ／Ｌ浓度处理后，真叶抑制最为严重，２ ０ｇ／Ｌ浓度处理４８ｈ，所有植株全部
没有真叶【表２）。０．５ｇ／Ｌ以下的秋水仙索浓度对菊花脑的出苗率影响不大，对照的出苗率为
８０％，Ｏ ５ｇ／Ｌ浓度处理４８ｈ出苗率为７１％；而较高浓度处理则对出苗有明显抑制作用，２．０ｇ／Ｌ
的浓度处理４８ｈ．出苗率降为５７％，且后期死亡率达到１００％，而０．５ｇｌＩ 处理４８ｈ，后期死亡率
仅为３２ ４％。
表２不同秋木仙素浓度和址理时间对真叶生长的影响 Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｌｌ＇ｅｅｌｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｌｒａｔｉｏｒｉｓ ｏｆ ｃｏｌｃｌｄｃｉｎｅｓ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｔｉｍｅ ｏｉｌ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｎ Ｉ ｌｅａｆ
处理苗的植株生长也明显受到抑制，３５ｄ时，对照平均高度为４ ４ｃｍ，而经秋水仙素不同
处理的，最高的平均值为２．４ｅｒａ，最矮的仅为１ ｌｃｍ。
２．３叶片保卫细胞和叶绿粒数观察对４个变异株的保卫细胞大小和叶绿粒数进行观察统
计。变异株的气孔保卫细胞长度和宽度均明显大于对照，对照保卫细胞平均长度为３２．２ ｍ，
变异株最小的为４１．４ｔｉｎ１，最大的为５１ １ ｍ。对照保卫细胞平均宽度为２２ ６ ，变异株最小
的为２９ ２ ｍ，最大的为３０ ９ ｍ。对照的叶绿粒数平均为１０ ６个，变异株的叶绿粒数最少的
为１４ ５个，最多的达２９．０个，都达到显著差异（表３，图版１，２）。
２．４细胞学观察通过对四株形态变异株根尖细胞染色体镜检观察，发现Ｃ３ ２植株为四倍
体（２ｎ＝３６）（图版３，４），Ａ２ ２为二倍体和四倍体的嵌合体植株 维普资讯 http://www.cqvip.com ｜ ｌ期 陈发棣等：秋水仙素诱导菊花脑多倍体的研究
表３对照与形态变异株叶片气孔保卫细胞和叶绿粒数 Ｔａｂｌｅ ３ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｃｓ ｏｆ ｎｍｎｂｔｒ ｏｆ ｃｈｌｏｒｏｐｌ￣ａｎｄ ｃｅｌｌｓ ｓｉｚｅ ｏｆ ｌｅａｆ ｓｔｏｍａｔａ ｂｅｔｗｅｅｎ ｏｍｌｒｏｌ ａｎｄ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｐｌａｎｔｓ
注：每材料观测５株．每耩气孔随机观剥１０十 ￡测验．－ ：Ｐ＜０ ｃ｝１极显著水平 ｔ ：Ｆｗｅ ｐ】ａｎ Ｗｅ ｏＩ】—ｄ ｅ．￣ｃｈ ｔ…ｔ，ｔｅｎ㈣”】 】）】 … ｍｎ＆ａ￣Ｉｙ…ｔ ＊：ｓｉ￣ｉＳｉｃａｎｔ ａｃＰ＜０ ０
∞一２变异株种子千粒重比对照高，其中ｃ３—２的种子千粒重约为对照的２倍（表４）。
表４对厢与变异株的结实率 种子发芽率和种于千粒重 Ｔａｂｌｅ ４ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｏｆ ｓｅｔｔｉｎ￣ｒａｌｅ，ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｌａｔｅ ａｎｄ １０００－ｇｒａｉｎ ｗｅｉｇｈｔ ｂｅｌｗｅｅｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ ｍｕｔａｔｉｍ ｐｌａｎｔｓ
往：母株随机胞５０个花序统仆结宴牢；取１００粒种子统 ｌ发芽宰。 洲验 ＊：Ｐ＜ｌｌ ０５显著水平；＊＊：Ｐ＜０ ０１桎｝显著水平。 ｉ ｆ ｔｙ．ｉ ～一： ？ … ；ｏｎｅｈ＇Ｊｓｉｇｎｉｆｉｅｒ ０５ ｆｉ￣ｎｔ ａｔ ０ ０Ｉ … ㈣ … …。哪 ． ： ｎＰ＜Ｏ 一
Ｐ＜ 维普资讯 http://www.cqvip.com 上 海 农 业 学 报 １８卷
３讨论
３．１ 一般植物如君子兰 、金鱼草 等种子秋水仙素诱导多倍体处理浓度都大于０ ５ｇ／Ｌ，处
理时间在６ｈ以上，而菊花脑种子用０ ｌｇ／Ｌ的浓度处理６ｈ就可出现大量的形态变异植株。
１．Ｏｇ，／Ｌ的浓度就造成种子期、幼苗期大量死亡，２ ＯｇｊＬ为致死浓度。因此菊花脑种子对秋水
仙素较一般植物敏感，在诱导多倍体时以０ ５ｄＬ以下为佳。
３ ２气 Ｌ的保卫细胞大小，叶绿粒数的观察是选择菊花脑多倍体的一种间接有效方法 。
在４株保卫细胞大小和叶绿粒数与对照有明显差异的变异株中，进一步通过染色体镜检，鉴定
出四倍体和嵌台体各一株。
３．３化学诱变还可以改良作物品质 ，四倍体菊花脑与对照相比，生长势旺，主茎增粗，叶片
加厚，加宽。作为野菜有望明显提高产量和改善品质，但有关其营养价值及在菊花新品种选育
和起源进化中的应用尚有待于进一步研究。
参考文献
陈发持，陈佩度，李鸿渐几种中国野生菊的染色体组分析皿亲缘关系初步研究园艺学报，１９９６．２３（１）：６７～７２
戴思兰．陈俊愉菊属７十种的种问杂交试验北京林业大学学报．１９９６，增（４）：１６－－２２ 汤庚 ，李湘萍江苏野菜资源的利用与开发植物资源与环境 １９９５，４（３）：３３～３７ 西北农学院主编作物育种学北京：农业出版杜，１９８１，１１６ 黄济明编著花卉育种知识 北京：中国林业出版杜，１９８６，６１ 柳学余编著农作物化学诱变育种南京：东南大学出版杜 １９９２，３９～４１｝ 牛维和，徐玉眯，刘继红诱导君子兰多倍体的初步研究园艺学报，１９８６，１３（１）：６１～６３ 张教方，岳桦诱导金鱼草多倍体的韧步研究园艺学报 １９９０，Ｉ７（１）：７６～鲫 周业恒，江守和 鲁润龙等悬钟木无球果育种的研究园艺学报，１９９３．２０（３）：２９５～２９８ 杜先明，郑素秋小白菜多倍体的诱变试验湖南农学院学报．１９９５，２１（１）：２５～２９ 季道藩主编遗传学实验北京：农业出版社，１９９０ ３８－－４１ 王淋清主编诱发突变与作物改良北京：原子能出版社，１ ９９５．２５３～２５８
2021近十年秋水仙素离体诱导植物多倍体的研究进展范文2
2021近十年秋水仙素离体诱导植物多倍
体的研究进展范文
多倍体植物在自然界中普遍存在，目前在农业生产中，主要农作物都是多倍体，
如小麦为异源六倍体、棉花和油菜为异源四倍体、甘薯为同源六倍体，而水稻和玉米
为二倍体化的古多倍体。多倍化研究已经成为当前进化生物学、遗传学和基因组学领
域的研究热点[1]. 多倍体通过自然加倍获得，但数量稀少，频率低，甚至在自然条件下不能正常生
长而死亡，难以应用于生产实践中[2],因此，20世纪初育种家们开始对人工诱导多倍
体进行探索。起初，人工加倍的方法是通过物理的手段获得多倍体，如高温、辐射，
但诱变率低下，常发生嵌合体[3].1937 年，Blakeslee 等[4]用秋水仙碱加倍曼陀罗
等植物的染色体数获得了成功。秋水仙素被广泛应用于培育植物新品种。秋水仙素，
即秋水仙碱，纯秋水仙碱呈黄色针状结晶，熔点 157℃，易溶于水、乙醇和氯仿，味
苦，有毒。秋水仙素通过作用于有丝分裂中期使染色体加倍。其原理是秋水仙素可以
与α - 微管蛋白和 β - 微管蛋白形成的二聚体特异性结合，减少了微管二聚体装配
在微管上的数量，结果使微管拆卸的速度大于装配的速度，最终使形成的微管解聚，
染色体加倍但细胞质不分裂，因此染色体数目加倍。 最初秋水仙素诱导多倍体是活体进行。通过适当的操作，如点滴、注射、涂抹等
诱导植株的顶芽、腋芽等位置，但活体操作时细胞的分裂不能同步，活体诱导较难得
到纯合四倍体植株，大多为嵌合体，诱导率低。随着生物技术的发展，离体诱导多倍
体的条件已经十分成熟。离体诱变育种有诸多优势：诱导率高； 试验易于重复进行；
嵌合体发生率低，方便纯化； 时效快、操作方便； 节省空间、人力物力； 便于控制
室温、光照等条件等。张蜀宁等[5]利用秋水仙素离体诱导青花菜，得到变异植株 20
株，其中纯合植株有 19 株。秋水仙素离体诱导同源多倍体在种质创新和新品种选育
上发挥了重要作用，诱导产生的同源多倍体常伴随植物形态、解剖、生理、栽培特性
植物的多倍体诱导及其观察实验报告
植物多倍体的诱导及其鉴定
一、实验目的
1、通过实验，掌握化学诱导植物多倍体的原理以及方法，学习利用秋水仙素诱
导植物多倍体的一般方法及多倍体诱导在植物育种上的意义。
2.学习利用细胞学方法观察鉴定多倍体的特点以及诱导染色体加倍后的细胞学表现，利用染色体分析的方法对多倍体的细胞做出准确判断。
二、实验原理
生物体的细胞核中都有相对稳定的染色体数目，这是物种的基本特征之一。多倍体是细胞中具有3个或3个以上的染色体组的生物体。在植物育种上，利用多倍体可以改良作物的经济性状，同时还可以利用多倍体克服远缘杂交过程中的障碍。
利用一些化学因素诱导植物产生多倍体，秋水仙素是诱导多倍体形成最有效和常用的药品之一，利用秋水仙素处理正在进行有丝分裂的细胞，可以抑制纺锤丝的形成，使细胞有丝分裂中期纺锤丝断裂或纺锤体形成受抑制，有丝分裂后期，复制的染色体无法移向两级，细胞内的染色体加倍，形成多倍体。因此在适宜浓度的秋水仙素作用下，它既可以有效的阻止纺锤体的形成，又不至于对细胞发生较大的毒害，因此，细胞经一定时期后仍可恢复正常，继续分裂，只是染色体数目加倍成为多倍性细胞，并在此基础上进一步发育成为多倍体植物。将秋水仙素处理的植物根尖，制成临时装片，利用显微镜观察根尖分生区细胞中的染色体数目而确定是否形成染色体。
三、实验材料、器具及试剂
1、实验材料：发芽的蚕豆，蚕豆幼苗
2、实验器具：显微镜、解剖针、小试管、刀片、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、试管、培养皿、烧杯。
3、实验试剂：秋水仙素： 0.1%浓度。
卡诺固定液：3份95％酒精与1份冰醋酸配制而成。
1mol/l盐酸，45%醋酸，改良苯酚品红，70%酒精。
四、实验步骤
1、取材： 将种子消毒，并于无菌水中浸泡24小时后，将蚕豆种子（2n=16）培养在培养皿内的湿滤纸上，室温或28℃发芽，待胚根长达1~2cm时，取出萌发的种子，用自来水洗2~3次，备用。
秋水仙素诱导产生多倍体的重要作用...
秋水仙素诱导产生多倍体的重要作用是（ ）
①抑制细胞有丝分裂时形成纺锤体
②加速细胞染色体复制
③使染色体联会紊乱，不能形成成熟的性细胞
A、① B、② C、③ D、①②③
考点：低温诱导染色体加倍实验
专题：
分析：生物学实验中，常用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗来诱导多倍体形成，也可以用低温处理诱导多倍体形成．它们的作用原理相同，都是抑制有丝分裂前期纺锤体的形成，使子染色体不能移向两极，进而导致染色体数目加倍，形成多倍体．
解答： 解：①秋水仙素的作用是抑制纺锤体的形成，导致子染色体不能移向两级，①正确；
②秋水仙素不能加速细胞染色体复制，②错误；
③秋水仙素不会使染色体联会紊乱，只有染色体组数为奇数时，染色体才会联会紊乱，不能形成成熟的性细胞，③错误．
故选：A．
点评：本题考查秋水仙素的作用原理，需要识记课本的相关知识点，并且能与有丝分裂联系起来，理解秋水仙素的作用原理、作用时间及结果．至于③中染色体联会紊乱，要理解其原因是染色体组数为奇数导致的，而不是秋水仙素作用的结果．
低浓度秋水仙素离体诱导甜叶菊多倍体技术体系的建立
龙源期刊网
低浓度秋水仙素离体诱导甜叶菊多倍体技术体系的建立
作者：彭程等
来源：《热带作物学报》2014年第04期
摘 要 以甜叶菊茎段为外植体，采用不同低浓度秋水仙素在甜叶菊试管苗茎段再生苗初期进行长时间持续处理，以探讨低浓度秋水仙素诱导甜叶菊多倍体的优势及适合长时间诱导甜叶菊的秋水仙素浓度，简化甜叶菊离体诱导多倍体技术环节。结果表明：0.025%的秋水仙素浓度适合于甜叶菊多倍体离体诱导的持续诱变，直至试管苗再生而无需清洗外植体和更换培养基，简化了诱导技术环节，提高了甜叶菊多倍体离体诱导效率；多倍体植株田间农艺性状表现为叶片大而厚实、开花延迟、花蕾较大等特征。旨在建立低浓度秋水仙素离体诱导甜叶菊多倍体技术体系。
关键词 甜叶菊；低浓度秋水仙素；多倍体
中图分类号 Q949.783.5 文献标识码 A
Establishment of the Technique System of Polyploidy
Induction for Stevia rebaudiana Bertoni by Low
Concentration of Colchicines in vitro
PENG Cheng， ZHANG Lulu*， YE Chao， SHE Qingmei， YANG Chenglin，
ZHOU Mingliang， MA Xiangxiang， ZHAO Yang， CUI Guangrong**
Plant Science School/Anhui Science and Technology University， Fengyang， Anhui 233100，
China
Abstract The stem sections of S. rebaudiana Bertoni were used as explants for polyploidy
秋水仙素诱导菊花脑多倍体的研究
上海农业学报２００２，１８（１）：４６－－５０ Ａｃｔａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ Ｓｈａｒｆ ａｉ
文章编号：１ ０００。３９２４（２００２）０ ｌ－４６．０５
秋水仙素诱导菊花脑多倍体的研究
陈发棣 蒋甲福 房伟民
ｆ南京农业大学园艺学院．南京２１００９５）
摘要利用秋水仙素对菊花脑进行浸种诱导多倍体，比较了不同处理浓度和时间的效果。
结果表明，０ ５ Ｌ浓度处理４８ｈ可以获得较好的效果，植株形态变异率为８３ １％；ｌ Ｏ Ｌ、２ ０ Ｌ
浓度处理１２ｈ 上变异率虽然升高，但由于生长抑制严重，后期死亡率明显升高；诱变株结实率和
种子发芽率明显低于对照。对４个形态变异株进行了叶片气孔保卫细胞太小、叶绿粒数测定和根
尖细胞染色体观察．鉴定出四倍体菊花脑ｌ株（２ｎ＝３６），嵌台体ｌ株
关键词菊花脑；秋水仙素；诱变；多倍体育种
中国分类号：Ｓ５—０３５＋２；￥６３６ ９ 文献标识码：Ａ
菊花脑［Ｄｅｎｄｒａｎｔｈｅｍａ ｎａｎｋｉｎｇｅｎｓｅ（Ｈａｎｄ—Ｍａｚｅ）ｘ Ｄ Ｃｕｉ］是菊科菊属多年生草本植物
（２ｎ＝２ｘ＝１８），菊花脑或其近缘种是尖叶野菊（４×）染色体组之一的供体，菊属的系统演化是
一个从低倍到高倍异源多倍体化的过程．野生菊染色体数目接近或相同的物种阈杂交较易实
现，二倍体物种与四倍体物种间分化程度高于四倍体物种与六倍体物种问分化程度，杂交更难
成功 ’ ，因此，四倍体菊花脑可能成为中国菊花起源演化研究的重要遗传学材料。菊花脑亦
是一种传统野生蔬菜，具有浓郁的菊香味，能清凉明目，调中开胃，也有解毒、降血压之功效 Ｊ，
四倍体菊花脑的获得有望进一步提高菊花脑的产量和品质。
由于种子休眠和萌发及化学诱变的的生理和生化机理尚在争论和研究当中，导致化学诱
变方法和观点不同。有人认为只有正在萌发的种子才能加倍 。由于诱发突变是一个发生在
单细胞中的事件，所以体细胞突变是一个边缘嵌台体的开端，营养体顶端可以从一个单细胞发
秋水仙素诱导多倍体形成探究性实验
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秋水仙素诱导多倍体形成探究性实验
时间：2004-3-26 20:37:54 来源：生物天地 作者：韩用平 胡建华 阅读224次
湖北省大冶一中 (435100) 韩用平 胡建华
实验目的：探究秋水仙素诱导多倍体的形成。
实验原理：秋水仙素能引起有丝分裂过程中纺锤丝断裂或抑制纺锤体的形成，但不影响染色体的复制和着丝
粒的分裂。
材料用具：0.1∽0.3%的秋水仙素溶液、清水、10%的盐酸溶液、固定液（用冰醋酸和95%的酒精按1：3比
例配制而成）、醋酸洋红溶液、洋葱、载玻片、盖玻片、烧杯、剪刀、镊子、显微镜。
方法步骤： 1. 根尖培养：
①取烧杯10个分别装满清水。②取度过休眠期的洋葱鳞茎，先剪去洋葱底部的老根，分别放在10个烧杯上，
在室温下培养，注意烧杯每天换一次水。③待2∽3天后洋葱鳞茎上长出不定根，剪去细长、弱小的根，留下粗
壮的根作为染色体加倍处理的材料。④把已生根的洋葱分成A、B两组，每组各五个洋葱。⑤把A组烧杯中的
清水倒掉，换上0.1∽0.3%的秋水仙素溶液；B组烧杯的清水换上新鲜的清水，让A、B两组洋葱继续在室温下
培养24小时。对A组的洋葱根尖作非离体浸泡处理，处理时要避免阳光直射，以免改变药性。⑥当看到A组
洋葱根尖分生区膨大时，可判断洋葱根尖分生区的细胞中染色体可能加倍；B组洋葱根尖仍然是清水培养，根
尖分生区没有出现膨大现象。 2.取材和固定：
把A组洋葱根尖用流水冲洗，取2∽3mm的根尖放在固定液中固定待用；将B组洋葱根尖2∽3mm的根尖直接
放在另一固定液中固定备用。 3.制片：
①解离：把已固定好的A、B两组洋葱根尖分别放在盛有10%的盐酸的溶液的培养皿中进行解离10分钟，然后
用流水冲洗（又快又好，节省时间）。
②染色：把已冲洗好的两种根尖分别放在醋酸洋红溶液中染色5分钟。
③制片：取两块洁净的载玻片分别编为1、2号，把已染色的A组根尖放在1号载玻片上；把已染色的B组根
多倍体实验报告(3篇)
第1篇
一、实验目的
1. 掌握利用秋水仙素诱导植物多倍体的原理和方法。
2. 学习观察和鉴定多倍体植物的特点。
3. 了解多倍体在植物育种中的应用价值。
二、实验原理
植物多倍体是指细胞中含有三个或三个以上染色体组的生物体。多倍体在植物育种中具有重要作用，如提高作物产量、改善品质、增强抗病性等。秋水仙素是一种常用的化学诱导剂，可以抑制纺锤体的形成，导致染色体加倍，从而形成多倍体。
三、实验材料
1. 植物材料：小麦、玉米、水稻等种子。
2. 试剂：秋水仙素、盐酸、酒精、碘液等。
3. 仪器：显微镜、离心机、恒温培养箱等。
四、实验步骤
1. 种子浸泡：将种子浸泡在温水中，使其充分吸水膨胀。
2. 播种：将浸泡好的种子播种在培养皿中，放入恒温培养箱中培养。
3. 诱导处理：在植物幼苗生长到一定阶段时，用一定浓度的秋水仙素溶液处理幼苗。
4. 染色体观察：将处理后的幼苗放入盐酸和酒精混合液中固定，制作成玻片，用显微镜观察染色体数目。
5. 数据记录：记录观察到的染色体数目，分析多倍体形成情况。
五、实验结果与分析
1. 实验结果
通过观察显微镜下的染色体，发现处理后的植物幼苗染色体数目发生了变化。其中，部分幼苗染色体数目加倍，形成了多倍体。 2. 结果分析
（1）秋水仙素浓度对多倍体形成的影响：实验结果表明，在一定浓度范围内，秋水仙素浓度越高，多倍体形成率越高。但过高的浓度会导致幼苗生长不良，甚至死亡。
（2）处理时间对多倍体形成的影响：实验发现，处理时间过长或过短都会影响多倍体形成率。适当延长处理时间，可以提高多倍体形成率。
（3）不同植物种类对多倍体形成的影响：不同植物种类对秋水仙素的敏感程度不同，实验中观察到的多倍体形成率存在差异。
六、实验结论
1. 利用秋水仙素可以有效地诱导植物形成多倍体。
2. 秋水仙素浓度、处理时间和植物种类等因素对多倍体形成率有显著影响。
3. 多倍体在植物育种中具有重要作用，可以为培育优良品种提供材料。
秋水仙素离体诱导多倍体研究进展
秋水仙素离体诱导多倍体研究进展
周慧文;冯斗;严华兵
【期刊名称】《核农学报》
【年(卷),期】2015(0)7
【摘 要】本文总结了近十年来秋水仙素离体诱导植物多倍体的研究进展,对影响诱导效率的因素如外植体类型、处理方法及其他因素进行了综述,并探讨了倍性嵌合体的分离方法、同源多倍化效应及其分子机理研究。该综述旨在为植物多倍体育种研究提供参考。
【总页数】9页(P1307-1315)
【关键词】秋水仙素(碱);离体;多倍体;嵌合体分离;同源多倍化效应
【作 者】周慧文;冯斗;严华兵
【作者单位】广西农业科学院经济作物研究所;广西大学农学院
【正文语种】中 文
【中图分类】S63
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非洲菊试管苗的多倍体诱导技术研究
南京林业大学成人高等教育
本科毕业设计（论文）
题 目： 非洲菊试管苗多倍体诱导技术研究
学 院： 继 续 教 育 学 院
专 业： 园 林 技 术
学 号： 123311203075
学生姓名： 王 艺 程
指导老师： 余 乐
职 称： 助 教
二 0 一 三 年 五 月 九 日
2 摘 要
以非洲菊自育品种‘新太阳黑子’试管苗为供实材料，用秋水仙素对丛生芽进行多倍体诱导。秋水仙素处理的浓度分别为0.02％、0.05％、0.1％、0.2％。实验结果表明，以0.05％的秋水仙素诱导效果最佳。经气孔鉴定和形态学观察，与二倍体相比，变异材料相同面积内的气孔数量减少，气孔面积增大，叶色变深，叶尖变钝圆，叶片质感变厚，叶梗直径变粗。
关键词:非洲菊；秋水仙素；多倍体；诱变
Abstract：Gerbera varieties ‘new sunspot’ test-tube seedlings as experimental
material, the bud of polyploid induction with colchicines. The concentration of
colchicines treatment were 0.02%, 0.05%, 0.1%, 0.2%. Experimental results show
that, with 0.05% of the best effect induced by colchicines. The stomatal identification
and morphological observation, compared with the diploid, stomatal number variation
秋水仙碱离体诱导半枝莲多倍体的研究
一１９８一 江苏农业科学２０１３年第４１卷第３期
赵晓潘，瞿大枞，陈崇顺．秋水仙碱离体诱导半枝莲多倍体的研究［Ｊ］．江苏农业科学，２０１３，４１（３）：１９８—２０１
秋水仙碱离体诱导半枝莲多倍体的研究
赵晓潘，瞿大枞，陈崇顺
（南京师范大学生命科学学院／江苏省生物多样性与生物技术重点实验室，江苏南京２１００４６）
摘要：本研究以秋水仙碱为染色体加倍剂，采用液体浸泡法对半枝莲茎尖进行离体诱导。结果表明，以０．２％的
秋水仙碱浸泡４ ｈ的诱导效果最佳，外植体存活率为１５．０％，多倍体诱导率达到５０．０％。形态学观测结果表明，与对
照植株相比，变异植株形态特征变化明显，植株高度降低，节间变短，叶型发生改变。变异植株的气孔变大，气孔密度
降低，保卫细胞中叶绿体数增加。根尖染色体计数结果表明，对照植株的染色体数目为２ｎ＝２ｘ＝２６，变异植株的染色
体数目为２ｎ＝４ｘ：５２。流式细胞仪检测结果表明，获得的变异株为二倍体和四倍体的嵌合体。
关键词：半枝莲；秋水仙碱；离体诱导；多倍体
中图分类号：ｓ３３５．１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２—１３０２（２０１３）０３—０１９８—０４
半枝莲（Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ ｂａｒｂａｒａ Ｄ．Ｄｏｎ．）为唇形科黄芩属植
物，主要分布于我国浙江、江苏、广东、福建等地，是多年生草 本药用植物。其全草皆可人药，主要化学成分为黄酮类化合
物、生物碱及糖类 。半枝莲具有清热解毒、活血化淤、消
肿止痛等功效，被广泛应用于肝癌、肺癌、消化道癌等的治疗，
对咽喉肿痛、跌打伤痛、水肿、黄疸等也有较好的疗效 。
多倍体药用植物一般具有根茎叶等器官增大、抗逆性增
强等特点。在植物多倍体诱导中，秋水仙碱是使用最为广泛
的诱导剂 。用秋水仙碱进行多倍体诱导成功的药用植物 有黄芩、杭白芷、丹参、白术、当归和菊花脑等 Ｊ。多倍体植
物能大幅度提高药用成分的含量。盾叶薯蓣四倍体植株薯蓣 皂苷元的含量显著高于二倍体，比二倍体原种高２７％ ；白