噬菌体侵染细菌的实验(课堂PPT)
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噬菌体侵染大肠细菌的实验详细版
课堂练习
3、噬菌体侵染细菌的正确顺序是 ：
A、注入---吸附---释放---组装---复制 B、复制---组装---释放---吸附---注入 C、吸附---注入---复制---组装---释放 D、吸附---注入---组装---复制---释放
寄主细菌内
（大肠杆菌）
无35S标记蛋白质
无32P标记DNA
子代噬菌体
实验结论
外壳蛋白质无35S DNA有32P标记
DNA 是遗传物质
动画
噬菌体侵染细菌的动态过程
吸附 注入 合成 组装 释放
侵入别的细菌
有两位同学同时做噬菌体侵染细菌
的实验
• 同学甲用35S标记的噬菌体
侵染细菌。做到第三步骤时，
• 同学乙用32P标记的噬菌体
如 何标记噬菌பைடு நூலகம்？
❖在分别含有放射性同位素32P 和35S的培养基中 培养细菌 ❖分别用上述细菌培养T2噬菌体，制备含32P的 噬菌体和含35S的噬菌体
T2噬菌体侵染大肠杆 菌实验过程及结果
第一步：标记大肠杆菌
细菌+含35S的培养基
含35S的细菌
细菌+含32P 的培养基
含32P的细菌
第二步：标记噬菌体
噬菌体+含35S的细菌 噬菌体+含32P的细菌
含35S的噬菌体 含32P的噬菌体
实验思路： 1.标记大肠杆菌：
2.标记噬菌体：
3. 标记的噬菌体分别侵染未标记的大肠杆菌：
4. 搅拌离心培养液：上清液（培养液）
5.观察放射性
沉淀物（大肠杆菌含子代噬菌体）
离心
离心
实验结果
亲代噬菌体
35S 标记蛋白质 32 P 标记DNA
公开课噬菌体侵染细菌实验[精编文档]
![公开课噬菌体侵染细菌实验[精编文档]](https://360docs-1393072327.cos.ap-beijing.myqcloud.com/bd8c2b5d366baf1ffc4ffe4733687e21af45fff7.webp)
课堂练习
2浸标1AC.、．．染 记用噬 DD细 物放NN菌AA菌 质射是 是体，进性主遗侵当行同传要染噬测位物的细菌试素遗质菌体 发标传的在 现记物D实细 ，噬质．验菌 细菌D能N体 菌体BA．证能内 细的蛋明产大 胞外白的生量内壳质是可增无蛋是遗殖放白遗传时射质传的，性，物变对。用异质被下其 列关于这一现象的解释，哪一项是不正确的 A．被标的噬菌体的外壳没有进入细菌细胞中 B．噬菌体DNA核心进入了细菌细胞内 C．噬菌体在细菌细胞中增殖是受噬菌体DNA控制 D．噬菌体在细菌细胞中增殖受细胞外的噬菌体外 壳蛋白质控制
噬菌体侵染细菌的实验
——赫尔希和蔡斯
（7）实验讨论：
2、为什么在操作的第三步中，我们要用标记的 噬菌体去侵染没带标记的大肠杆菌？
噬菌体侵染细菌的实验
——赫尔希和蔡斯
（7）实验讨论：
3、这个实验能否说明DNA是噬菌体的主要的遗 传物质？
噬菌体侵染细菌的实验
——赫尔希和蔡斯
（7）实验讨论：
4、这个实验能否证明蛋白质不是噬菌体的遗传 物质？
课堂练习
3、噬菌体浸染细菌的正确顺序是 A．注入→吸附→释放→组装→复制 B．复制→组装→释放→吸附→注入 C．吸附→注入→复制→组装→释放 D．吸附→注入→组装→复制→释放
4.噬菌体在繁殖过程中利用的原料是 A.自己的核苷酸和氨基酸 B.自己的核苷酸和细菌的氨基酸 C.细菌的核苷酸和氨基酸 D.自己的氨基酸和细菌的核苷酸
含32P的培养基 培养大肠杆菌
32P大肠杆菌
32P的噬菌体
噬菌体侵染细菌的实验
——赫尔希和蔡斯
（3）实验步骤：
噬菌体侵染细菌的实验
——赫尔希和蔡斯
（4）实验预期：
实验结果
噬菌体侵染细菌的实验
感染 烟草
实验 结果
出现病斑
结论：RNA是烟草花叶病毒的遗传物质
重组 分离 感 染
产生 哪种 病毒？
新的病毒
分离 重组
作为遗传物质所必须具备的特点:
1、肺炎双球菌转化实验中，对S菌加热处理，DNA仍具有生物 具有相对稳定的结构 活性——DNA分子结构具有相对稳定性。 2、肺炎双球菌转化实验中，R型细菌可以转化生成S型细菌— 能产生可遗传变异 —DNA可以发生可遗传的变异。 3、噬菌体侵染细菌的实验中，DNA在亲代与子代噬菌体中具 能自我复制,使亲子代具有一定的连续性 有连续性——DNA可以发生复制，由亲代传递给子代。 4、噬菌体侵染细菌的实验中，在细菌内合成子代噬 ④菌体蛋白质外壳——DNA可以指导蛋白质的合成。 能指导蛋白质合成，从而控制生物的性状
经典实验
1928年 格里菲思 ——体内转化实验
1944年 艾弗里2年 赫尔希、蔡斯——噬菌体侵染细菌实验
DNA是唯一的遗传物质吗？
［敢于质疑］
下面这些生物的遗传物质是什么？
流感病毒
SARS病毒
烟草花叶病毒
［课堂延伸］
如果你是科学家，请设计实验证明烟草花 叶病毒的遗传物质是什么？
⑤能贮存大量的遗传信息
某科学家做“噬菌体侵染细菌实验”时，分别用同位素 32P和35 S 做了标记(见下表)： 噬菌体成分 核苷酸标记 32P 氨基酸
32S标记
细菌成分 31P
35S
此实验所得结果是子噬菌体和母噬菌体的外形及侵染细菌的特性 均相同。请分析： (1)子噬菌体的DNA分子中含有的上述元素是 ； (2)子噬菌体的蛋白质分子中含有的上述元素是 ； (3)此实验说明了 。
背景知识：烟草花 叶病毒TMV是由 RNA和蛋白质组成 的，在感染烟草时， 会出现致病斑。
噬菌体侵染细菌实验
DNA是遗传物质，下列关于该实验的叙述正确的是( )
• A．实验中可用15N代替32P标记DNA
C
• B．噬菌体外壳蛋白是大肠杆菌编码的
• C．噬菌体DNA的合成原料来自大肠杆菌
• D．实验证明了大肠杆菌的遗传物质是DNA
答案
• 题型二 子代噬菌体被标记情况分析
检
• 2．若1个35S标记的大肠杆菌被1个32P标记的噬菌体侵染，裂解后释放的 所有噬菌体( )
第19讲 DNA是主要的遗传物质
第2节 噬菌体的侵染实验
知识回顾
导
肺炎双球菌体内转化实验结论：S型细菌中存在某种转化
因子，将R型细菌转化为S型细菌。
肺炎双球菌体外转化实验结论：转化因子是DNA，DNA
真正的遗传物质。
议 1.T2噬菌体和大肠杆菌什么关系？ T2噬菌体的繁殖过程？
2.赫尔希和蔡斯用的什么方法单独、直接地追踪它们的去向？ 3.分别用什么元素标记噬菌体的蛋白质和DNA？为什么？如何标记？ 4.描述赫尔希和蔡斯的实验的过程，分析保温、搅拌和离心的作用？ 5.上清液、沉淀物中分别是什么物质？分析检测到的放射性情况？ 6.用35S（32P）标记的噬菌体侵染大肠杆菌，理论上沉淀物（上清液） 中不含放射性，但实验中含有少量放射性的原因是什么？ 7.实验结论？
含35S的大肠杆菌
35S标记蛋白质的
噬菌体
4. 赫尔希和蔡斯的实验的过程，保温、搅拌和离心的作用？
★度保温：为噬菌体侵入大短搅肠时拌间杆、保菌离温心进后 行繁殖提供适宜温 被（标35S记标蛋记★白的质噬搅）菌拌体 ：使吸与附未标在记的细细菌菌混上合的噬菌体离与心细后菌分离
★离心：让上清液中析出重量较轻的噬菌体颗粒，而
实 验 结 论 ： DNA才是真正的遗传物质。
噬菌体侵染大肠细菌的实验
事，匆匆做完实验，发
步骤时有事离开实验室，
现底层检测到较强的放 2.标记噬菌体：
良久才回来继续实验操作
射性。
发现上清液中检测到较强
你能分析原因么？ (1)“搅拌”要充分——
如果搅拌不充分，35S
3. 标记的噬菌体分别
的放射性。
侵染未标记的大肠杆菌：• 你能帮他分析这是为什么
4. 搅拌离心培养液：
么？ (2)侵染时间要合适—
“二看法”判断子代噬菌体标记情况
被35S标记的噬菌 体与细菌混合
保温 搅拌 离心
放射性很高
放射性 很低
说明35S标记蛋白质外壳 并没有进入到细菌内
放射性很低
被32P标记 的噬菌体 被32P标记的噬菌
体与细菌混合
放射性很高
说明32P标记DNA进入到细菌 内去了
谢谢聆听
我是遗传物质， 我是控制者。
我是蛋白质， 我听命于遗传
物质。
助学巧记
组部分噬菌体与大肠
上清液（培养液） —若保温时间过短或
杆菌没有分离，噬菌 体与细菌共存于沉淀
5.观察放射性
沉淀物（大肠杆菌 过长会使32P组的上清
） 含子代噬菌体 液中出现放射性。原
因是部分噬菌体未侵
物中，这样造成沉淀 两个关键环节——
染或子代噬菌体被释
物中出现放射性
“保温”与“搅拌”
放出来。
被35S标记 的噬菌体
同位素标记法
DNA 的组成元素： C、H、O、N、P 蛋白质 的组成元素：C、H、O、N 、S
标记 32P
DNA
35S
标记
蛋白质
实验思路：
将DNA和蛋白质区分
开,
噬 菌 体
噬菌体侵染细菌实验
细胞内，是否是误差的来源呢？_____是_______理由呢？
没有侵入大肠杆菌的噬菌体经离心后分布于上清液中，
使上清液出现。放射性
在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中，用32P标 记的噬菌体侵染大肠杆菌，在理论上，上清液中不含放 射性，下层沉淀物中具有很高的放射性；而实验的实际 最终结果显示：在离心上层液体中，也具有一定的放射 性，而下层的放射性强度比理论值略低。
（4）噬菌体侵染细菌实验证明
了 DNA是遗传物质
。
（5）请设计一个方法，来大量制备用35S标记的噬
菌体（简要ห้องสมุดไป่ตู้明）
先用35S的培养基培养标记大肠杆菌，再用噬菌体
去感染被35S标记的大肠杆菌，大量获得被35S标
记的噬菌体
。
在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中，用32P标 记的噬菌体侵染大肠杆菌，在理论上，上清液中不含放 射性，下层沉淀物中具有很高的放射性；而实验的实际 最终结果显示：在离心上层液体中，也具有一定的放射 性，而下层的放射性强度比理论值略低。
（1）在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中，用32P
标记噬菌体的DNA所体现的实验方法
是
同位素标记法（同位素示踪法）
。
（2）在理论上，上层液放射性应该为0，其原因是 噬菌体已将将含32P的DNA全部注入到大肠杆菌内。
在赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌实验中，用32P标 记的噬菌体侵染大肠杆菌，在理论上，上清液中不含放 射性，下层沉淀物中具有很高的放射性；而实验的实际 最终结果显示：在离心上层液体中，也具有一定的放射 性，而下层的放射性强度比理论值略低。
（3）由于实验数据和理论数据之间有较大的误差，由
此对实验过程进行误差分析：
a.在实验中，从噬菌体和大肠杆菌混合培养，到用离心
噬菌体侵染细菌的实验方法
噬菌体侵染细菌的实验方法一、实验前准备1.1 噬菌体的制备噬菌体可以通过多种方法制备，其中最常用的是双层琼脂法。
首先需要选择适合的宿主细菌，并在培养基中培养至对数生长期。
然后将噬菌体接种到宿主细菌中，使其进行感染，待细胞溶解后收集上清液即可。
1.2 细胞培养选择合适的宿主细菌进行培养，通常使用营养丰富的LB培养基或M9最小盐基础培养基等。
二、实验步骤2.1 噬菌体感染实验将目标宿主细菌接种于含有适量培养基的试管中，并在37℃下恒温摇床振荡培养至对数生长期。
将适量噬菌体加入到含有目标细胞的试管中，使其进行感染。
根据不同实验目的和要求，可以调整噬菌体和目标细胞的比例以及感染时间等因素。
2.2 病毒滴度测定病毒滴度测定是评估噬菌体感染效果的重要方法。
将一定量的目标细胞接种于含有适量培养基的96孔板中，并在37℃下恒温摇床振荡培养至对数生长期。
将适量的噬菌体加入到每个孔中，使其进行感染。
根据不同实验目的和要求，可以调整噬菌体和目标细胞的比例以及感染时间等因素。
最后通过滴度计算得出病毒滴度。
2.3 病毒扩增实验病毒扩增实验是将噬菌体在宿主细胞中进行复制和扩增的过程。
首先需要选择合适的宿主细胞，并在含有适量培养基的试管中进行培养。
然后将一定量噬菌体加入到试管中，使其进行感染。
根据不同实验目的和要求，可以调整噬菌体和宿主细胞的比例以及培养时间等因素。
2.4 病毒纯化实验病毒纯化实验是将混合物中的噬菌体分离出来，得到纯净的病毒制品。
首先需要收集感染后的上清液，并将其离心去除细胞碎片和杂质。
然后通过超速离心等方法将病毒分离出来，并进行洗涤和浓缩等步骤，最终得到纯净的病毒制品。
三、实验注意事项3.1 安全操作在进行噬菌体实验时需要注意安全操作，避免病毒泄漏和污染。
应该在生物安全柜中进行实验操作，并采取相应的个人防护措施，如戴手套、口罩等。
3.2 实验设计在进行噬菌体实验时需要合理设计实验方案，根据不同的实验目的和要求选择合适的宿主细菌和噬菌体品系，并根据需要调整感染时间、感染剂量等因素。
噬菌体侵染大肠杆菌实验
噬菌体侵染大肠杆菌 实验
目录
CONTENTS
• 实验背景 • 实验材料与方法 • 实验结果与分析 • 结论与讨论 • 参考文献 • 附录
01 实验背景
噬菌体的概述
01
02
03
噬菌体的定义
噬菌体是一类感染细菌的 病毒，具有高度的宿主特 异性，只感染特定的细菌 种类。
噬菌体的形态
噬菌体通常呈蝌蚪形、棒 状或微球形，其核心部分 为核酸（DNA或RNA）， 外面由蛋白质外壳包裹。
对照实验
设置对照组，即未加噬菌体的培养基，以排除培养基变化对实验 结果的影响。
数据处理
采用统计软件对实验数据进行处理和分析，以确保结果的准确性 和可靠性。
04 结论与讨论
结论总结
1
噬菌体侵染大肠杆菌实验证明了DNA是遗传物质。
2
该实验表明，噬菌体通过将其DNA注入大肠杆菌， 利用大肠杆菌的合成机制复制自身，并最终释放 出大量的噬菌体粒子。
参考文献
噬菌体是一种侵染细菌的病毒， 能够利用细菌的物质来合成自 身的组成成分，最终繁殖出许 多噬菌体后代。
噬菌体侵染大肠杆菌的过程可 以分为吸附、注入、合成、组 装和释放五个阶段。
噬菌体侵染大肠杆菌实验是生 物学领域中经典的实验之一， 具有重要的理论和实践意义。
06 附录
实验材料
噬菌体
用于侵染大肠杆菌的病毒。
大肠杆菌
作为宿主细胞，用杆菌。
显微镜和载玻片
用于观察噬菌体侵染大肠杆菌的 过程。
离心管和离心机
用于分离和纯化噬菌体和大肠杆 菌。
缓冲液
用于调节pH值和保持实验过程中 溶液的稳定性。
实验步骤
1. 准备噬菌体和大肠杆菌
目录
CONTENTS
• 实验背景 • 实验材料与方法 • 实验结果与分析 • 结论与讨论 • 参考文献 • 附录
01 实验背景
噬菌体的概述
01
02
03
噬菌体的定义
噬菌体是一类感染细菌的 病毒，具有高度的宿主特 异性，只感染特定的细菌 种类。
噬菌体的形态
噬菌体通常呈蝌蚪形、棒 状或微球形，其核心部分 为核酸（DNA或RNA）， 外面由蛋白质外壳包裹。
对照实验
设置对照组，即未加噬菌体的培养基，以排除培养基变化对实验 结果的影响。
数据处理
采用统计软件对实验数据进行处理和分析，以确保结果的准确性 和可靠性。
04 结论与讨论
结论总结
1
噬菌体侵染大肠杆菌实验证明了DNA是遗传物质。
2
该实验表明，噬菌体通过将其DNA注入大肠杆菌， 利用大肠杆菌的合成机制复制自身，并最终释放 出大量的噬菌体粒子。
参考文献
噬菌体是一种侵染细菌的病毒， 能够利用细菌的物质来合成自 身的组成成分，最终繁殖出许 多噬菌体后代。
噬菌体侵染大肠杆菌的过程可 以分为吸附、注入、合成、组 装和释放五个阶段。
噬菌体侵染大肠杆菌实验是生 物学领域中经典的实验之一， 具有重要的理论和实践意义。
06 附录
实验材料
噬菌体
用于侵染大肠杆菌的病毒。
大肠杆菌
作为宿主细胞，用杆菌。
显微镜和载玻片
用于观察噬菌体侵染大肠杆菌的 过程。
离心管和离心机
用于分离和纯化噬菌体和大肠杆 菌。
缓冲液
用于调节pH值和保持实验过程中 溶液的稳定性。
实验步骤
1. 准备噬菌体和大肠杆菌
噬菌体侵染细菌的试验赫尔希和蔡斯
4.噬菌体在细菌体中合成自己的蛋白质 需要:( B ) A.噬菌体的DNA和氨基酸 B.噬菌体的DNA和细菌的氨基酸 C.细菌的DNA和氨基酸 D.细菌的DNA和噬菌体的氨基酸
5.一切生物的遗传物质是:( A )
A.核酸 B.DNA C.RNA D.蛋白质
在杀死加的热S杀型死细的菌S型中细含菌有哪些物质？
DNA是唯一的遗传物质吗？
有些病毒（如烟草花叶病毒），不含有DNA, 只含有RNA。 在这种情况下，RNA就起着遗 传物质的作用。
目前，已有充分的科学研究资料证明， 绝大多数生物的遗传物质是DNA，
所以DNA是主要的遗传物质。
课外提升：
如何验证烟草花叶病毒的遗传物质是RNA。
烟草花叶病毒
RNA 蛋白质
第六章 遗传和变异
第一节 遗传的物质基础
父本
减数 分裂
精子
受精 作用
有
受精卵
丝 分
子 代
母本 减数 卵细胞
裂
分裂
染色体在生物的遗传中起着 重要作用。
染色体
• DNA • 蛋白质
是遗传物质?
20世纪中叶 激烈争论 实验
1928年
格里菲思 肺炎双球菌的转化实验
1944年 艾弗里
(一)格里菲思的肺炎双球菌转化实验 1、实验材料：肺炎双球菌
2、实验技术：
同位素标记法
蛋白质的组成元素： C、H、O、N、S （标记35S ） DNA的组成元素： C、H、O、N 、P （标记32P）
（2）实验过程：
①用放射性同位素35S标记噬菌体外壳蛋白质
蛋白质含35S +细菌 离心
的噬菌体 (未标记)
上清液(含T2噬菌体颗 粒) --含放射性物质35S
噬菌体侵染大肠杆菌实验
主讲人：
噬菌体侵染大肠杆菌实验
.
1
实验背景
由于艾弗里试验中提取出的DNA，纯度最高时也还有0.02%的蛋白 质，因此，仍有人对实验结论表示怀疑。
赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为实验材料，作出了更具有说服力的实验。
.
2
实验材料
T2噬菌体
为什么利用噬菌体作为实验材料？
噬菌体在侵染大肠杆菌的时候将一部分物质留在外面 猜测：一种机制能够把自己的遗传物质和非遗传物质分开。 不知道进入大肠杆菌的是DNA还是蛋白质 同时他们也知道噬菌体的组成物质只有蛋白质和DNA 具有繁殖快的优点 所以噬菌体理所应当地能够成为科学家最佳的选择材料。
原宿主细菌 内
无32P标记 DNA
子一代噬菌 体
DNA有32P 标记
35S标记 蛋白质
无35S标记 外壳蛋白无
蛋白质
35S标记
实验结论
DNA是遗 传物质
.
11
噬菌体侵染大行杆菌的具体过程 是怎样的呢？
.
12
感谢您的聆听 欢迎批评指正
.
13
.
3
实验材料
大肠杆菌：原核生物，作为 噬菌体的寄主细胞，其体积 重量都远大于噬菌体。
大肠杆菌（电镜下观察）
.
4
实验过程
DNA和蛋白质到底是哪种物质进入了大肠杆菌？ 如何观察DNA和蛋白质的行踪？
DNA的组成元素：C、H、O、N、P 蛋白质的组成元素:C、H、O、N、S
放射性同位素 标记法
分别标记
.
8
实验过程
含有放射性同位素 35S培养基中培养
大肠杆菌
培养T2噬菌体
侵染未被标记的 大肠杆菌
短时间的保温
得到蛋白
噬菌体侵染大肠杆菌实验
.
1
实验背景
由于艾弗里试验中提取出的DNA，纯度最高时也还有0.02%的蛋白 质，因此，仍有人对实验结论表示怀疑。
赫尔希和蔡斯以T2噬菌体为实验材料，作出了更具有说服力的实验。
.
2
实验材料
T2噬菌体
为什么利用噬菌体作为实验材料？
噬菌体在侵染大肠杆菌的时候将一部分物质留在外面 猜测：一种机制能够把自己的遗传物质和非遗传物质分开。 不知道进入大肠杆菌的是DNA还是蛋白质 同时他们也知道噬菌体的组成物质只有蛋白质和DNA 具有繁殖快的优点 所以噬菌体理所应当地能够成为科学家最佳的选择材料。
原宿主细菌 内
无32P标记 DNA
子一代噬菌 体
DNA有32P 标记
35S标记 蛋白质
无35S标记 外壳蛋白无
蛋白质
35S标记
实验结论
DNA是遗 传物质
.
11
噬菌体侵染大行杆菌的具体过程 是怎样的呢？
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12
感谢您的聆听 欢迎批评指正
.
13
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3
实验材料
大肠杆菌：原核生物，作为 噬菌体的寄主细胞，其体积 重量都远大于噬菌体。
大肠杆菌（电镜下观察）
.
4
实验过程
DNA和蛋白质到底是哪种物质进入了大肠杆菌？ 如何观察DNA和蛋白质的行踪？
DNA的组成元素：C、H、O、N、P 蛋白质的组成元素:C、H、O、N、S
放射性同位素 标记法
分别标记
.
8
实验过程
含有放射性同位素 35S培养基中培养
大肠杆菌
培养T2噬菌体
侵染未被标记的 大肠杆菌
短时间的保温
得到蛋白