实验十五血清睾酮和皮质醇(TC)测定和应用
血睾酮皮质醇在马拉松运动训练监控中的应用
血睾酮/皮质醇在马拉松运动训练监控中的应用睾酮、皮质醇的生理机制及其与运动的关系一直是运动科学界研究的重点。
大量的研究结果表明，血睾酮、皮质醇对运动的应答比较敏感，二者可以动态地反应机体同化作用与异化作用的状态，不同的运动负荷会对机体血睾酮、皮质醇产生不同的影响，因此可以利用体内血睾酮、皮质醇的变化来监控运动员的机体情况从而指导运动训练。
本文将从睾酮、皮质醇的生理功能及其与运动的关系，血睾酮、皮质醇在运动训练中的监控和实例分析等方面阐述血睾酮与皮质醇在运动训练监控中的应用。
一、睾酮、皮质醇的生理功能睾酮是雄激素的一种，因其在雄激素中起主导作用，因此常作为雄激素的代表。
男子睾酮90%来自睾丸间质细胞，其余由肾上腺皮质和其他组织分泌；女性体内的睾酮主要由卵巢间质细胞和门细胞与肾上腺皮质网状带合成，其余主要由雄烯二酮在肝脏、脂肪、皮肤等组织转换而来。
正常成年男性每天约产生6- 24睾酮，血中睾酮浓度为10- 45 ；女性血中睾酮水平大约是男子的 1 /10。
体内约98%的睾酮以结合形式存在，游离部分仅占2%左右，目前认为，有活性的睾酮是游离睾酮和与白蛋白结合的睾酮。
正常情况下，男性体内睾酮的分泌在下丘脑—垂体—性腺轴的负反馈调节作用下进行；而在女性体内，睾酮的分泌不具有轴的反馈调节，一定程度上是通过性激素结合球蛋白的合成量与激素代谢率来调节。
睾酮是人体内的主要同化激素之一，它的主要生理功能包括：（1）刺激雄性附性器官发育并维持其功能，维持雄性第二性征；（2）刺激体内蛋白质合成增加，氨基酸的分解代谢减弱；（3）促进骨骼的生长；（4）增加促红细胞生成素的生成，进骨髓造血；（5）减少尿肌酸量，使肌酸与三磷酸腺苷作用合成磷酸肌酸；（6）调节运动后肌糖原的超量恢复，增加糖原储备；（7）维持雄性进攻意识，使运动员训练更刻苦，竞赛时更富有进取心；（8）减少体脂, 增大肌肉体积和力量等。
皮质醇是一种21 个碳原子的固醇类激素，它是由肾上腺皮质的束状带和网状带分泌的。
血清总胆固醇TC测定操作规程
血清总胆固醇TC测定操作规程.docx血清总胆固醇（TC）测定操作规程1. 目的本操作规程旨在规范血清总胆固醇（TC）的测定过程，确保检测结果的准确性和重复性。
2. 原理血清总胆固醇（TC）测定通常采用酶法，通过胆固醇酯酶将胆固醇酯水解为游离胆固醇，然后利用胆固醇氧化酶将游离胆固醇氧化为胆甾酮和H2O2，最后利用过氧化物酶将H2O2分解为2H2O和O2，同时产生颜色变化。
颜色的深浅与血清中胆固醇含量成正比，可通过比色法测定。
3. 试剂和材料酶试剂盒（含胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶等）校准品和质控品血清样本蒸馏水移液枪及吸头比色杯恒温水浴箱自动生化分析仪或分光光度计4. 操作步骤4.1 准备工作确保所有试剂和样本均已在室温下平衡至25°C。
校准生化分析仪或分光光度计至适当的波长（通常为500-550nm）。
4.2 试剂准备根据试剂盒说明书，将酶试剂混合均匀，并预热至25°C。
4.3 样本处理取适量的血清样本，避免溶血和脂血样本。
如有必要，对样本进行离心，去除沉淀物。
4.4 加样使用移液枪准确取样，将血清样本加入比色杯中。
按照试剂盒说明书，加入等量的酶试剂至每个比色杯中。
4.5 反应将比色杯放入恒温水浴箱中，保持37°C反应一定时间（通常为5-10分钟）。
4.6 比色测定将反应后的比色杯放入自动生化分析仪或分光光度计中。
读取吸光度值，并根据标准曲线计算血清总胆固醇浓度。
5. 质量控制每次测定前，使用校准品进行仪器校准。
定期使用质控品进行质量控制，确保结果的准确性和稳定性。
6. 结果记录与报告记录所有测定结果，包括吸光度值、胆固醇浓度等。
根据医院或实验室的标准操作程序，编写并发布检测报告。
7. 安全注意事项操作时应穿戴适当的个人防护装备，如手套和实验服。
避免接触试剂和样本，尤其是避免吸入和摄入。
按照当地法规处理废弃物。
8. 维护和校准定期对生化分析仪或分光光度计进行维护和校准，确保仪器的准确性。
运动负荷时血睾酮、皮质醇及其比值变化
运动负荷时血睾酮、皮质醇及其比值变化
叶展红
【期刊名称】《中国组织工程研究》
【年(卷),期】2000(004)007
【摘要】目的:探讨利用运动员血睾酮(T)、皮质醇(C)及T/C的动态变化作机能评定可行性的研究.方法:进行2级负荷训练,以放免法对T、C进行测定分析.结果:(1)T 值:最高为降低强度训练后值,最小为实验前值;与受试前比,男降低强度训练后值,P＜0.05,女P＜0.01;SD值较大.(2)T/C值:最高为降低强度训练后值,最小为实验前值;与受试前比,降低强度训练后值,P＜0.01;SD值较大.(3)C值:2级负荷后的数值都有变化P＞0.05.结论:T,C,T/C值对负荷反应灵敏,数值变化有随强度变化的趋势,可作为运动员机能评定的指标;由于T、T/C的SD值较大,运用该指标进行机能评定时,需区别对待.
【总页数】1页(P1081)
【作者】叶展红
【作者单位】广州市体育科学研究所广东广州 510620
【正文语种】中文
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提高铁人三项运动员血睾酮水平的药物效果实验研究.
提高铁人三项运动员血睾酮水平的药物效果实验研究[ 07-06-21 15:39:00 ] 作者：邓运龙， 张海忠 编辑：studa20【摘要】 目的 通过双盲对分组对比实验对提高铁人三项运动员血清睾酮的市售补肾口服液（简称营养品A ）和生力君口服液（简称营养品B ）进行了人体实验研究。
方法 采用双盲交叉对比实验设计。
实验1组每日给予A ，实验2组每日给予营养品B ，空白对照组按B 的口服方法给予同等剂量的淀粉安慰剂。
在实验4周时，实验1组服用安慰剂，对照组服用A ，再进行4周实验。
结果 营养品A 和营养品B 对人体运动训练过程中的低血睾酮现象都具有明显的抑制作用，而且在效果方面，营养品B 要明显好于营养品A ；营养品A 和营养品B 在实验过程中，血皮质醇都表现了先下降后回升的变化趋势，而且变化明显（P<0.05）；营养品A 可以在运动训练中抑制血色素的降低，对身体机能恢复具有一定积极影响。
在效果方面，实验营养品B 药效与营养品A 一致，但营养品B 效果更明显；营养品A 和营养品B 都能够提高超氧化物歧化酶的浓度，实验1组与实验2组没有组间差异；营养品A 能够使体内MDA 浓度降低，可以减少运动后自由基对机体的损伤。
营养品B 则是在实验后2周时，丙二醛明显降低，而后又出现显著回升。
结论 营养品A 和营养品B 都对提高铁人三项运动员血清睾酮有显著作用。
【关键词】 铁人三项运动；血睾酮；实验研究Experimental research of nutriments effect to enhance testosterone level in serum for triathlon athletes【Abstract 】 Objective Through the methods of double-blind ， physical experimental research has been taken on oral liquid for reinforcing kidney in sale （nutriment A ） and ShengLiJun oral liquid （nutriment B ） to enhance triathlon’s testosterone level in serum.Methods Through the experimental design of double-blind ， chiasm and comparison. Group 1 were given A every day ， Group 2 were given B every day ， the control group were given starch placebo with the same dosage and same oral ways. At the fourth week ， group 1 were given placebo ， the control group were given A ， and the next four weeks experiment was taken sequentially.Results Nutriment A and nutriment B both have obviously inhibited effect to the low testosterone phenomenon in the course of training. Furthermore ， nutriment B’s effect is better than A marked ly. Cortisol in serum occurs the tendency of firstly descent and then elevation for both A and B in the experiment ， and the change is very obvious （P<0.05）. Nutriment A can inhibit hemoglobin’s reducing in the training; it has positive effect to body’s eng inery comeback. In the effect ， nutriment B’s function is the same as A， and B’s function is moreobvious. Both A and B can enhance the concentration of superoxide dismutase（SOD）. There is no difference between group 1 and 2. Nutriment A can reduce the concentration of malondialdehyde（MDA），and can alleviate body’s damage from free radical after exercise. For the nutriment B， at the second week of the experiment，MDA’s level reduces evidently， and then ascends evidently.Conclusion Nutriment A and B both have obviously effect to enhance testosterone level in serum for triathlon athletes.【Key words】 triathlon; testosterone; experimental research铁三运动员身体的消耗巨大，属于典型的力竭型运动，当然，耗尽的不仅仅是三大能量源，而且影响到身体各器官、组织的功能水平，包括体内的激素水平。
血清总胆固醇测定实验报告
1. 掌握血清总胆固醇测定的原理和方法。
2. 了解血清总胆固醇测定的临床意义。
3. 培养实验操作技能，提高实验分析能力。
二、实验原理血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）是指血液中所有胆固醇的总和，包括游离胆固醇和胆固醇酯。
血清总胆固醇测定是临床诊断和预防动脉粥样硬化、冠心病等疾病的重要指标。
测定血清总胆固醇的方法主要有酶法、化学比色法、荧光法等。
本实验采用酶法测定血清总胆固醇，利用胆固醇氧化酶（COD）和过氧化物酶（POD）催化反应，将胆固醇氧化生成胆烷4烯3酮，再与4-氨基安替比林和酚在过氧化物酶的作用下生成红色醌亚胺，通过比色法测定吸光度，从而计算出血清总胆固醇含量。
三、实验材料1. 试剂：胆固醇氧化酶试剂、过氧化物酶试剂、4-氨基安替比林试剂、酚试剂、胆固醇标准液、血清样本、蒸馏水、721型分光光度计等。
2. 仪器：恒温水浴箱、移液器、试管、试管架等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制：取一系列已知浓度的胆固醇标准液，分别加入胆固醇氧化酶试剂、过氧化物酶试剂、4-氨基安替比林试剂和酚试剂，混匀后置于37℃水浴箱中保温15分钟。
以蒸馏水为空白对照，在510nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，胆固醇浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 样本测定：取血清样本，按照与标准曲线绘制相同的步骤，测定吸光度。
3. 结果计算：根据标准曲线，计算血清总胆固醇含量。
五、实验结果1. 标准曲线绘制：以吸光度为纵坐标，胆固醇浓度为横坐标，绘制标准曲线，相关系数R²=0.997。
2. 样本测定：测定血清总胆固醇含量，结果显示：血清总胆固醇为5.8mmol/L。
1. 本实验采用酶法测定血清总胆固醇，操作简便、准确度高，适合临床应用。
2. 标准曲线绘制过程中，应注意标准液的浓度范围，以保证标准曲线的线性关系。
3. 在实验操作过程中，应注意试剂的配制、仪器的校准等，以保证实验结果的准确性。
4. 血清总胆固醇测定结果对临床诊断和预防动脉粥样硬化、冠心病等疾病具有重要意义。
皮质醇测定完整版
皮质醇测定集团标准化办公室：[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]皮质醇测定人肾上腺皮质分泌类固醇激素以皮质醇（氢化考的松）为主，血浆皮质醇分为游离与结合两种形式。
测定其血浆皮质醇浓度，是直接了解垂体肾上腺皮质系统功能的方法。
皮质醇是由肾上腺皮质束状带合成分泌的一种糖皮质类固醇激素，每日约分泌10～35mg，半衰期约100min。
皮质醇的分泌有明显的昼夜节律，以清晨6～8时最高（50～250μg／L），晚上10时至零晨2时为最低（20～100μg／L）。
皮质醇的主要功能是增加糖异生，对蛋白质和脂肪代谢的影响亦非常显着。
皮质醇分泌人血后绝大部分与血循环中皮质类固醇结合球蛋白（CBG）结合。
真正具有生物活性的只是游离皮质醇，它只占总皮质醇的1％～3％，亦只有游离的皮质醇才能从肾小球滤过，从尿中排出。
故测定尿皮质醇，可排除CBG变化的影响，反映血浆游离皮质醇水平。
参考值：上午8∶00：（127±55）μg／L下午4∶00：（47±19）μg／L午夜：（3．4±12）μg／L新生儿脐带血浆：85～550μg／L临床意义：（1）血浆总皮质醇升高见于下列情况：皮质醇增多症（库欣病），肾上腺肿瘤、妊娠、口服避孕药，异位ACTH综合征、垂体前叶功能亢进症，单纯性肥胖。
应激状态（手术、创伤、心肌梗死等）。
（2）血浆总皮质醇降低见于：肾上腺皮质功能降低，垂体前叶功能低下，全身消耗性疾病，口服苯妥钠、水杨酸钠等药物。
先天性肾上腺皮质功能低下症，席汉综合征。
皮质醇功能减退者，分泌节律基本正常；而血浓度明显降低。
血清总胆固醇测定实验报告
血清总胆固醇测定实验报告一、实验目的血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）测定是临床生化检验中的常见项目之一，本实验旨在掌握血清总胆固醇测定的原理、方法和操作步骤，熟悉实验过程中的注意事项，并对实验结果进行准确分析和判断。
二、实验原理目前，血清总胆固醇测定常用的方法是酶法。
其原理是胆固醇酯酶（CE）将胆固醇酯水解为游离胆固醇（FC）和脂肪酸，胆固醇氧化酶（COD）将 FC 氧化为胆甾烯酮和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的催化下与 4-氨基安替比林（4-AAP）和酚反应生成红色醌亚胺。
在一定波长下，通过比色法测定吸光度，从而计算出血清总胆固醇的含量。
三、实验材料与设备1、材料血清样本：新鲜无溶血、无脂浊的血清。
试剂盒：包含胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、酚等试剂。
2、设备分光光度计移液器恒温水浴箱离心机四、实验步骤1、样本处理空腹采集静脉血，置于干燥无抗凝剂的试管中，室温下静置 30 分钟使其凝固。
以 3000 转/分钟离心 10 分钟，分离血清，备用。
2、试剂准备按照试剂盒说明书的要求，将试剂 R1 和试剂 R2 分别配制好，并放置于恒温水浴箱中预热至规定温度。
3、测定操作取两支干净的比色管，分别标记为空白管和测定管。
空白管中加入蒸馏水20μL 和试剂R1 1000μL，混匀，置于 37℃恒温水浴箱中保温 5 分钟。
测定管中加入血清样本20μL 和试剂R1 1000μL，混匀，置于 37℃恒温水浴箱中保温 5 分钟。
然后，向空白管和测定管中分别加入试剂R2 500μL，混匀，置于37℃恒温水浴箱中保温 10 分钟。
4、比色测定以空白管调零，在分光光度计 500nm 波长处读取测定管的吸光度值（A）。
五、实验结果计算血清总胆固醇（mmol/L）＝（测定管吸光度空白管吸光度）×校准品浓度÷校准管吸光度六、实验结果本次实验测定的血清总胆固醇结果为_____mmol/L。
胆固醇测定实验报告
本次实验旨在通过学习血清总胆固醇（Total Cholesterol，TC）的测定方法，掌握酶法测定胆固醇的原理和操作步骤，并了解血清总胆固醇在临床诊断中的应用。
二、实验原理血清总胆固醇的测定采用酶法，利用胆固醇酯酶将胆固醇酯水解为胆固醇和脂肪酸，再利用胆固醇氧化酶将胆固醇氧化为胆汁酸，同时生成过氧化氢。
在过氧化氢的作用下，加入的4-氨基安替比林和酚酞在酸性条件下生成红色化合物，其颜色深浅与胆固醇含量成正比。
通过比色法测定吸光度，即可计算出血清中胆固醇的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 血清样品- 胆固醇酯酶试剂- 胆固醇氧化酶试剂- 4-氨基安替比林试剂- 酚酞试剂- 磷酸缓冲液- 96孔微孔板- 吸量器- 酶标仪2. 实验仪器：- 恒温水浴锅- 离心机- 移液器- 烧杯- 移液管1. 准备工作- 将所有试剂和器材准备好，并确保其清洁、干燥。
- 将血清样品进行编号，并在实验过程中注意避免交叉污染。
2. 样品处理- 取一定量的血清样品，按照实验要求进行稀释。
- 将稀释后的血清样品加入微孔板中，每孔加入一定量的胆固醇酯酶试剂。
3. 酶反应- 将微孔板放入恒温水浴锅中，在37℃下孵育一定时间，使胆固醇酯酶与胆固醇发生反应。
4. 洗板- 将微孔板取出，用去离子水冲洗3次，以去除未反应的酶和底物。
5. 添加试剂- 向每个微孔中加入一定量的胆固醇氧化酶试剂、4-氨基安替比林试剂和酚酞试剂。
- 加入磷酸缓冲液，使溶液pH值保持在酸性范围内。
6. 比色- 将微孔板放入酶标仪中，在特定波长下测定吸光度。
- 将吸光度值与标准曲线进行对比，计算出血清中胆固醇的含量。
7. 结果分析- 根据实验结果，分析血清总胆固醇水平与临床诊断的关系。
五、实验结果与分析1. 实验结果- 根据实验数据，绘制标准曲线，并计算出样品中胆固醇的含量。
2. 结果分析- 通过实验结果，了解血清总胆固醇水平与临床诊断的关系，为临床诊断提供依据。
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➢ 其分析的基础是标记抗原（*Ag）和被测抗原即非标记抗原 （Ag）限量的特异性抗体（Ab）的竞争性抑制反应，是结合 分析中的一类方法。则于标记原和非标记抗原的免疫活性完 全相同，因此与特异性抗体具有相同的亲和能力。
➢ 通常以下列方式表示：在标记抗原和特异性抗体量恒定时， 由于标记原抗体复合物的形成受非标记抗原（待测浓度的物 质）的含量限制，所以当样品中非标记抗原含量高时，非标 记抗原对特异性抗体的竞争能力强，非标志抗原抗体复合物 的形成量就多，实验结果所计量到的标记性抗原抗体复合物 放射活性就低；相反，样品中非标记抗原含量低时，非标记 抗原对特异性抗体的竞争能力弱，非标记抗体复合物形成就 少，实验结果所计量到的标记性抗原抗体复合物放射活性就 高。其之间形成一定的逆相关函数关系。
双管标准曲线以保证测试数据的准确。 ③ 取样品血清50ul，直接滴入包被试管底部。 ④ 将1.0ml125I睾酮碘标记加入每个已加入了标准品或测试
样品的试管中。在振荡器上振混匀1min。 ⑤ 将加入1251标记的试管置于37℃水浴箱中，温育3h。 ⑥ 将温育后的溶液全部倒出，在吸水纸上击试管，将管内
⑵血清皮质醇的测定原理： 放射免疫法（Radioimmunoassay，RIA）测定血清皮 质醇浓度的实验方法，测试原理同血清睾酮的测定。
4 实验方法与步骤
㈠ 血睾酮的测定 ① 将包被试管、125 I睾酮标记液用标准品处于室温状态，
并充分混合标准品，碘标记液（轻轻翻转）。 ② 分取标准液A、B、C、D、E、F各50ul于包被试管中，做
⑴血睾酮的测定 ①采集1ml全血，避免溶血，静置析出或离心后得到澄清的血清，
血清量不少于100μl。 ②向包被试管中加入样品时，吸头不要触及管底部的药膜。 ③温育时可用小盖子或塑料薄膜纸盖住试管，以防止蒸气形成的
水滴掉入试管中。 ⑵血清皮质醇的测定 ①血样收服最好为晨静脉血，离心后应达到血清澄清进行测定。 ②向包被试管中加入样品时，吸头不要触及管底部的药膜。 ③温育时可用小盖子或塑料薄膜纸盖住试管，以防止蒸气形成的
实验十五 血清睾酮与皮质醇（T/C）测定及应用
1 实验目的
⑴通过实验使学生掌握人体激素血皮质醇和睾酮测 定方法及意义，为体育教学和运动训练提供指导。
⑵进一步巩固离心机、可调微量移液器、振荡器等 仪器的基本操作。
2 实验器材与试剂
⑴仪器：芬兰产1470γ计数器、恒温水浴箱等。 ⑵试剂 ①血睾酮的测定：使用包被-抗体-计数放射免疫试剂盒，
其中包括总睾酮抗体包被试管、125I标记溶液、睾酮 溶液和睾酮标准品。 ②皮质醇的测定：使用包被-抗体-计数放射免疫试剂盒， 其中包括总皮质醇抗体包被试管、125I标记皮质醇溶 液和皮质醇溶液和皮质醇标准品。 ③材料：人体静脉血等
3 实验原理
⑴ 血 睾 酮 的 测定原 理
⑴血睾酮的测定原理
➢ 放射免疫分析中应用放射性同位素标记物进行检测。
溶液尽力甩出。 ⑦ 按标准管、样品管的顺序依次将试管放入测试架，在γ
计数器上进行计数测定。
㈡ 皮质醇的测定
①将包被试管、125I皮质醇碘标记液及标准品于室温状态 下，并充分混合标准品、碘标记液（轻轻翻转）。
②分取标准液A、B、C、D、E、F各25μl于包被试管中， 做单管标准曲线。
③取样品血清25μl，直接滴试管பைடு நூலகம்部。
④将1.0 ml 125I皮质醇碘标记液加入了标准品或样品的 试管中，在振荡器上振荡混合1 min。
⑤将加好碘标记液的试管置于37℃水育箱中，温育45min。
⑥将温育后的溶液全部倒出，在吸水纸上叩击试管，将溶 液尽力甩干。
⑦ 按标准管-样品管的顺序依次将试管放入测试架，在γ 计数器进行测定。
5 注意事项