原花色素的测定方法
方法1:原花色素的测定方法(分光光度法)
本方法适用于各种植物组织、器官及其制剂(如葡萄子与松树皮提取物)中原花
色素含量的测定。
1. 方法提要
原花色素(也称缩合单宁)是黄烷-3-醇的寡聚体与多聚体,属多酚类化合物。
与其他酚类化合物不同,黄烷醇(缩合单宁,单体,双体等)在酸性介质中可与
香草醛反应,生成在500nm处有最大吸收的有色物质,可通过比色测其含量。
2. 仪器
分光光度计。
3. 试剂
所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。
(1)香草醛、甲醇、浓盐酸均为分析纯级。
(2)提纯的原花色素或儿茶素。
(3)4%香草醛甲醇液。
(4)标准使用液:将提纯的原花色素溶于蒸馏水,制成1mg/mL储备液,将储
备液稀至浓度为1×10-2mg/mL至1mg/mL的标准使用液。标准使用液应于测定
当天配制。
如无提纯的原花色素,可用儿茶素代替,配制方法同上。
4. 测定步骤
(1)样品中原花色素的制备:植物材料经4倍体积丙酮+水(7+3,体积比)或
者经60%甲醇提取,40℃以下减压蒸馏去除有机溶剂,水相再经乙醚洗涤后定容。
冰冻干燥的固体原花色素制剂,直接溶于水中(先加少量甲醇助溶)制成原花色
素液。
原花色素液于5℃下暗环境中保存备用。
(2)样品测定:用锡箔将试管(14mm×20mm)包裹严,仅留管口用于加样。
向管内加入试样0.5mL,再加3.0mL 4%香草醛甲醇液混合,然后加入1.5mL浓
盐酸,彻底混匀,室温下显色15min。也可在暗环境下进行以上操作。最后在500nm
处比色。
可按以上操作步骤制得标准曲线(即0.1mg原花色素在500nm处的吸收值为
0.55)。
5. 结果计算
计算原花色素量的公式,
原花色素(1×10-3mg)=A500nm÷0.55×100×V
式中 V——试样稀释体积(倍数)。
6. 注释
(1)本方法的检测范围为(5~500)×10-3mg/0.5mL样液。精密度与准确度大于
1×10-3mg。
(2)反应试管应用清洁剂浸泡24h,彻底洗涤干净。
(3)进行比色时,用水作空白。
(4)500nm处的OD值应控制在3以下。
(5)试样中原花色素含量较高时,应从香草醛存在下所测A500nm值中减去无
香草醛时所测值。
(6)显色液应避光放置。
方法2:保健食品中原花青素含量的测定方法
1、原理
原花青素易溶于含羟基的溶剂如甲醇等,本方法是将样品中的前花青素,用甲醇
提取,加入盐酸家温水解后将其转化为深红色氰定(C15H10O6·HCL)后进行高
压液向色谱测定。
2、试剂:
2.1二氯甲烷 分析纯
2.2甲醇 色谱纯
2.3异丙醇 分析纯
2.4甲酸 分析纯
2.5盐酸 分析纯
3、检验方法
3.1样品 称取约500mg油溶性样品于100ml锥形瓶中,加入5.0ml二氯甲烷,
振摇使其溶解。加入45.0ml甲醇,振摇5min后过20μm滤膜。取5.0ml滤液于
25ml容量瓶中,加入5.0ml3mol/L盐酸,振摇并用异丙醇定容至刻度。立即过5μm
滤膜,取出一部分置于试管中,塞紧瓶塞并在100±5℃烘箱中放置45min进行水
解,取出后放置至室温后进行液相色谱分析。
3.2标准 除称取25.0mg标准品于100ml锥形瓶中外,其余步骤均同样品。
3.3定量方法 标准曲线外标法定性定量分析。
4、色谱分析条件
4.1流动相:水:甲醇:异丙醇:甲酸=73:13:6:8
4.2检测波长:525nm
4.3色谱柱:岛津Shim-Pak CLC ODS 15cm×6mm
4.4柱温:35℃
4.5流速:1ml/min
原花色素及其开发应用
Ab ta tT es u tr n h mia h rcei c h n lssmeh da dp e aain,tea piain sr c : h t cu ea dc e c l aa trs ,tea ayi r c i t to n rp rt o h p l t c o
原花色素( r n o ai n简称 P ) Po t c n i, ahy d C 具有水溶 、 无毒、 无过敏等特性。比儿茶素物质有更多的 自由酚
收稿 日期 :0 6—0 2O 1—1 8
作者简介 : 张长贵(93一 , , 士研 究生, 17 )男 硕 主要研 究方 向为食 品化学与营养。
a d f rg o n f r a to y n d n we e i t d c d n o e r u d o o n h c a i i r nr u e .Att e s me t p o a me,t e p y il g u c o f r a — h i h h s o yfn t no o n o i p
聚体 、 四聚体等直至十聚体 。按聚合度 的大小 , 通常 将二 一四聚体称 为低 聚体 ( r yn ocOi m r, Po ai l lo e c di g s
简称 O C 将 五聚体 以上的称为高聚体 ( r y— P ), Po a c n 0c o m r, 称 P C) O C 水 溶 性 物 质 l / e 简 d iP y s P 。P 为
h ca ii sitn ie i se .I s n i ot t fr n efrd e ee rh a d d v lp n f to y ndnwa ne sv yds u sd ti a mp r n eee c o ep r sac n e eo me to l c a r p nh c a ii n fn t n l o d ,me iie n ome c . ma toy ndn i u ci a o s o f dcn sa d c s t s i Ke r s P on o y ndn; e eo me ta d a p c t n y wo d : ra t c a ii d v lp n n p h ai h o
红葡萄酒中多酚成分的提取与鉴定
红葡萄酒中多酚成分的提取与鉴定红葡萄酒是一种富含多酚类化合物的酒类饮品,这些多酚成分具有多种保健功能。
本文将探讨红葡萄酒中多酚成分的提取与鉴定方法,并简要介绍其保健功效。
首先,我们来了解一下红葡萄酒中多酚成分的种类和作用。
红葡萄酒中主要含有儿茶酚类化合物,包括原花色素、白千层素等。
这些多酚成分被证明具有抗氧化、抗癌、抗衰老、抗心脑血管疾病等多种功效。
因此,饮用适量的红葡萄酒可以对人体起到一定的保健作用。
那么,如何从红葡萄酒中提取多酚成分呢?常见的提取方法有溶剂提取法、超声波辅助提取法、超临界流体提取法等。
其中,溶剂提取法是一种常用的方法。
其基本原理是利用溶剂对样品进行提取,将多酚成分从样品中分离出来。
提取后的溶液经过蒸馏等操作,可以得到纯净的多酚成分。
提取出多酚成分后,我们需要进行鉴定和分析。
常用的鉴定方法有紫外-可见光谱法、高效液相色谱法、气相色谱法等。
紫外-可见光谱法是一种简便易行的方法,通过测定样品吸收或发射光谱,确定其中的多酚成分。
高效液相色谱法和气相色谱法则可以更准确地分离、定量多酚成分。
在利用这些方法进行鉴定和分析时,我们需要了解每种多酚成分的特性和吸收光谱。
比如,原花色素在紫外-可见光谱中有明显的吸光峰,在390至550纳米处有吸收峰。
通过测定样品的吸收值,可以计算出原花色素的含量。
同样地,其他多酚成分也有各自的吸光特性,可以根据不同的光谱波长进行测定和分析。
除了鉴定和分析方法,研究人员还对红葡萄酒中多酚成分的水平进行评估。
常见的评估指标有总多酚含量和抗氧化能力。
总多酚含量反映了红葡萄酒中各种多酚成分的总量,通常通过与标准品进行比较来确定。
而抗氧化能力则是评估红葡萄酒中多酚成分对自由基的清除能力,常用的方法有DPPH自由基清除能力、铁离子还原能力等。
通过评估这些指标,可以更加全面地了解红葡萄酒中多酚成分的含量和功效。
红葡萄酒中多酚成分的提取与鉴定具有重要的意义。
它们不仅能够为红葡萄酒的生产提供科学依据,还可以为人们选择合适的红葡萄酒提供参考。
花生红衣原花色素研究进展
花生仁营养 丰富且具有抗 老化作用 , 生红衣富 花
3 %~ 2 脂肪 1 %~4%, 白质 1 %~ 8 灰分 7 4 %, 0 1 蛋 1 1 %, 8 2 %, %~ 1 还含 约 7 %的单 宁及 多种 色素[ 研究 发现 , 2 1 。 每克花 生红衣 中多酚物质含量 为 9 ~ 2 g 包 含 0 mg 10 , m
山楂 、 、 银杏 可可豆 、 椰子 、 花生 、 叶 、 茶 高粱 、 大麦等 , 主
c n i o fp o y n dn fo p a u e k nwe ei to u e n t i a e ,a d t ed v lp n ie t n i o dt n o r c a i i r m e n tr d s i r n r d c d i h sp p r n h e eo me td r ci n i o
含多酚物质 , 具有抗 花生仁 酸败 和抗氧化作用 , 被誉 为
及出血 引起 的贫血有 明显疗效 。 2 原 花色素简介 21 原花色素的结构及 来源 .
“ 第七 营养 素” 。花生作 为我 国主要 的油料作 物产量 …
很大 , 但其综 合利用 水平不 高 , 尤其对花生 红衣 的综合
2 1 年 4月 01
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14 8
第3 2卷第 4期
F o eerhA dD vlo e | odR sac n ee m n o
食品研究与开发
专 题论 述
花生红衣中原花青素的提取工艺与活性研究
第5期(总第527期)2021年5月农产品加工Farm Products ProcessingNo.5May.文章编号:1671-9646(2021) 05a-0027-05花生红衣中原花青素的提取工艺与活性研究吕 筱1,郑天元2,韦新月1,窦子珊1,代紫瑙1,高晨佳1,蔡冉1,孟琬星1, **王汝华1'3收稿日期:2020-12-17基金项目:天津市高等学校大学生创新创业训练计划项目(202010057191);天津科技大学大学生实验室创新基金项目(1814A203)。
作者简介:吕 筱(1999—),女,在读本科,研究方向为食品科学与工程。
*通讯作者:王汝华(1989—),男,硕士,工程师,研究方向为植物功能性食品资源。
(1.天津科技大学食品科学与工程学院,天津300457;2.通标标准技术服务(天津)有限公司,天津300457;3.天津科技大学食品科学国家级实验教学示范中心,天津300457)摘要:以花生红衣为研究对象,采用单因素试验及正交设计优化花生红衣中原花青素的提取工艺,通过大孔树脂吸附对原花青素进行分离纯化,并对提纯产物的体外抗氧化活性进行了初步研究。
结果表明,以香草醛-盐酸法测定原花青素含量为评价指标,根据单因素试验结果设计正交试验,得到原花青素最佳提取工艺参数为乙醇体积分数 70%,超声温度30 超声时间17.5 min ,提取次数3次,料液比1:16 (g :mL ),得率为7.82%±0.02%。
在小型离子交换柱中,采用AB-8型大孔吸附树脂为柱填料,以乙醇为洗脱剂,进行分离纯化,经冻干后得到干物质中原花 青素的纯度为76.85%±0.24%,较未纯化前提升42.57%。
原花青素对DPPH 自由基清除能力最好,当质量浓度为 0.05 mg/mL 时清除率达到最大值为92.08%±0.01%。
以上结果表明,花生红衣中的原花青素具有一定的抗氧化活性, 是一种潜在的天然抗氧化剂。
花生红衣中低聚原花色素稳定性的研究
由图 1 可知 , P O C在 紫外 波长范围 内有两个吸收
峰,分别是 25n 1 l 20nn n和 8 i,在可见光区没有最大
吸收波长 。利用其吸收 紫外光的特点可 以应用于 防晒
收稿 日期 :2 1-4 1 000-3 作者简介 :王庆玲 (9卜) 18 ,女,讲师 ,研究方 向:食品安全与检测
通讯作者 :罗小玲 ( 9 2 ) 1 6 一 ,女 ,高级 实验师 ,研究方 向:食品检 测
8 47
、
nm
图 1O C 外 可见 光谱 图 P紫
Fi 1Th g. eUV- ss e t ao W ̄ p c r fO PC
(.et gC ne Xni g a e f adR c mai c ne, hhz 8 2 0 , h a 2 sn et o i a dmyo L n el t nS i csS iei 3 0 3 C i ) T i r f j n Ac a o e n
Abt c: h ait f rc aii O C et c df m pau rdsi a n et a ditip prT e eus hw t th s atT es bl o poynd r t i y n( P ) xr t r a e o ente nw si sgt n hs a . h sl o e h te k v i e e r ts d a
花生衣为红棕色膜质 ,味甘、微苦 、性平 ,有止 血 散淤和消肿之功效 ,且有 一定的营养价值及药用价 值 【 。花 生 红 衣 中 富 含 多 酚物 质 ,低 聚 原花 色 素 J ( l o r ratoy nd sO C 是其中 的一种 , O i mei Ponh c aii . P ) g c n 其 具 有抗 老化 、抗花生仁 酸败 和抗氧化 的作用 。近年来 研 究表 明 ,低聚原花色 素对 人体健康也会产生有益 的 影响 ,尤其是对动脉 粥样硬化 有缓解作用【 3 ,此 外 , 还 具有清 除 自由基 的能力L。因此 ,对花 生红衣 中的 5 J 低 聚原花色素稳定性 的研 究为其在医药 、化妆 品及食 品 中的应用奠定 了基础 。
花色素结构假说
本研究依据这样的指导思想,结合一级图谱和二级图谱,认为该南果梨果皮样品含有61种花色素分子。峰与峰之间或许还容易区分,那么相对直线部分,又是如何彼此划分开呢?本着中国《易经》数生相,相有形,形有体的原则,认为数变则相变,相变则体变。结合一级图谱的+MS图谱和二级图谱的+MS2图谱的数变,确定每种花色素分子的起始,从而确定了全部花色素分子。
1材料与方法
1.1材料
供试南果梨采自辽宁省海城市接文镇宋家堡村10~12年生南果梨树,于2012年8月25日种子褐色期按果树正南方向,中部同等高度取果实10个,试验设3次重复。
供试盐酸、95%乙醇、氯化钾、无水乙酸钠均为分析纯,由沈阳化学试剂厂生产;供试D101大孔树脂为国药集团化学试剂有限公司生产;供试甲醇、甲酸均为色谱纯,为国药集团化学试剂有限公司生产。试验采用的仪器有:N-1001型旋转蒸发仪、SHB-Ⅲ循环水式真空泵、DHL-A型电脑恒流泵、Christ真空冷冻干燥机和1100液质联用仪。
图3随机抽取的21.0-21.8min峰+MS图谱
以21.0-21.8min峰为例,一级质谱峰值主要为382.9、395、464.9。21.0-21.7min以382.9或383为主,21.7-21.8min以395、464.9为主。该峰代表了花色素大分子因电荷数变化导致核质比变化,是该花色素特殊结构决定的。
我要表达的思想是:花色素大分子是特殊的自身带氧正离子的生物大分子,它的一级质谱,只要是控制好质谱条件,就能得到完整的分子图谱,即使它们中有部分化学键断裂,某片段即使象旗帜一样飘扬着,但依然连接在完整的大分子内。虽然测到不同的核质比,是因为大分子自身电荷数发生变化所致。
类胡萝卜素和花青素研究方案
植物呈现出绚丽多姿的色彩,有的是为了光合同化作用,有的则是作为吸引信号或者植物防御信号,从而有利于它们的生存、授粉或种子传播,以便将自己的基因长久的遗传下去。
这些色彩是由植物体内卟啉类、类胡萝卜素类、类黄酮类和甜菜素类四种物质而引起的。
其中类胡萝卜素使高等植物呈现出黄色、橙红色或红色。
类黄酮可分为黄酮、黄酮醇和花青素3类,前两者大多呈浅黄色,花青素则会根据PH 值的不同,使高等植物呈现出红色到蓝色。
1.类胡萝卜素类胡萝卜素是一类呈黄色、橙红色或红色的多烯类物质, 一般由8个类异戊二烯单位组成,其具有抗氧化、防癌症、预防夜盲症等功能。
自然界中发现的类胡萝卜素种类繁多, 大约有700多种。
近10年来,每年大约有3000多篇类胡萝卜素相关的文献产出。
(1)类胡萝卜素在高等植物中的分布类胡萝卜素作为光合色素的辅助色素,广泛存在于高等植物中,主要是以光合色素-蛋白质复合体的形式存在于高等植物的叶绿体中,几乎所有有叶绿素的地方就有类胡萝卜素。
如许多黄色或橙色的高等植物花瓣和果实的颜色均源于存在于其组织细胞之中的类胡萝卜素化合物,如番茄、柑橘、辣椒、胡萝卜、玉米等。
(2)类胡萝卜素的分析检测方法类胡萝卜素的分离、定性、定量分析是从事类胡萝卜素研究工作的基本方法。
类胡萝卜素的共轭双键对热、光、氧和酸都是比较敏感的,所以在分析操作过程中要尽量减少氧的破坏、较大可能的避免光和热引起的变化。
分析试剂不要含过氧化物、酸和游离氧。
色谱质谱技术和光谱技术是类胡萝卜素研究工作中重要的分析方法,在定性、定量分析和分离、制备方面起着重要的作用。
(3)类胡萝卜素的功能类胡萝卜素在叶绿体光合作用中扮演着重要角色,一方面可帮助叶绿素接收光能,另一方面高温、强光下可通过叶黄素循环,耗散多余能量,此外类胡萝卜素还是ABA的前体。
高等植物的叶、花、果及根因富含类胡萝卜素,而呈现出黄色、橙红色或红色,因此胡萝卜素是决定园艺植物观赏价值的重要指标。
花朵墨水变色实验报告
实验名称:花朵墨水变色实验实验目的:探究花朵对墨水颜色的影响,了解花朵中的色素成分及其作用。
实验时间:2021年10月15日实验地点:实验室实验材料:1. 墨水(黑色、蓝色、红色、绿色)2. 各色花朵(如玫瑰、牡丹、菊花等)3. 玻璃杯若干4. 滤纸5. 量筒6. 搅拌棒7. 记录纸和笔实验步骤:1. 准备实验材料,将墨水分别倒入玻璃杯中,并标记好颜色。
2. 将花朵分别放入对应的玻璃杯中,确保花朵与墨水充分接触。
3. 观察并记录花朵在墨水中浸泡一段时间后的颜色变化。
4. 使用滤纸吸取墨水,观察并记录墨水在滤纸上的颜色变化。
5. 将浸泡过花朵的墨水倒入量筒中,观察并记录墨水的颜色变化。
实验结果:1. 黑色墨水浸泡玫瑰后,墨水颜色变为淡粉色;浸泡菊花后,墨水颜色变为淡黄色。
2. 蓝色墨水浸泡牡丹后,墨水颜色变为淡紫色;浸泡菊花后,墨水颜色变为淡黄色。
3. 红色墨水浸泡玫瑰后,墨水颜色变为淡红色;浸泡牡丹后,墨水颜色变为淡橙色。
4. 绿色墨水浸泡玫瑰后,墨水颜色变为淡绿色;浸泡菊花后,墨水颜色变为淡黄色。
5. 滤纸上的墨水颜色与原墨水颜色基本一致,未发生明显变化。
6. 倒入量筒中的墨水颜色与原墨水颜色基本一致,未发生明显变化。
实验分析:1. 花朵中的色素成分对墨水颜色产生了影响。
不同花朵中的色素成分不同,导致墨水颜色发生变化。
2. 花朵中的色素成分与墨水中的某些成分发生反应,导致墨水颜色发生变化。
3. 滤纸和量筒中的墨水颜色未发生明显变化,说明花朵中的色素成分对墨水的影响主要发生在墨水与花朵接触的表面。
实验结论:通过本次实验,我们了解到花朵中的色素成分对墨水颜色有显著影响。
不同花朵中的色素成分不同,导致墨水颜色发生变化。
实验结果为我国传统花艺、绘画等领域提供了有益的参考。
同时,本实验也提醒我们在生活中注意观察身边的自然现象,发现其中的科学原理。
实验注意事项:1. 实验过程中注意安全,避免墨水溅入眼睛。
思茅松树皮中寡聚原花色素提取的初步研究
关键词 : 思茅松树皮 ; 聚原花 色素 ; 寡 提取 中圈分类号 :Q 1 T 9 文献标识码 : A 文章编 号 :6 3— 84 2 0 ) 1— 0 4一 3 17 5 5 ( 0 7 O 0 3 O
A r l n r t d n E t cin o l o r r a t o y n dn P ei ay Su y o xr t fO i me i P o nh c a ii s mi a o g c
思 茅松 树 皮 中寡 聚 原 花 色 素 提 取 的初 步研 究
张加研 , 吴春 华 , 永剑 , 家学 秦 王
(西南林学院 木质科学与装饰材料工程学院,云南 昆明 602 ) 524
摘 要: 以甲醇 、O% 甲醇、O% 丙酮及 5 5 7 O% 丙酮等 为溶剂 , 油醚 为沉淀剂 从思 茅松树 皮 中提取 了券 聚原花 色素。 石
f m h ak o i o P n r t e B r fSma i e o
Z A G J —a , h nh a I o g i WA G J —u H N i y n WU C u —u 。Q N Y n -a a j n, N i xe a
(Fcl f o cec n eoai nier gSuh et oet oee K n i 52 4 hn ) aut o dSi eadD crt nE g e n ,otw s F rsyK l g , u mn 6 0 2 ,C ia y Wo n o n i r l g Abtat Oi m r ratoyndn ( P s eepeae o eb ko ia ieb xr t nwt slet sc s src : l o ei pon ca ii O C )w r rprdf m t a f m opn yet ci i ovns uha g c h s r h r S a o h
油菜原花色素形成与种皮颜色的关系
油菜原花色素形成与种皮颜色的关系陆赢;刘忠松【摘要】油菜黄籽种皮颜色形成分子机理是目前油菜分子育种的一个热点。
本文介绍了油菜种皮的形成和结构,综述了影响油菜种皮颜色的主要物质即原花色素的分布、合成和积累以及检测方法,简要介绍了油菜黄籽基因定位的研究进展,以期为油菜黄籽种皮颜色分子机理研究提供参考。
【期刊名称】《作物研究》【年(卷),期】2009(023)005【总页数】4页(P328-331)【关键词】油菜;黄籽;种皮;原花色素【作者】陆赢;刘忠松【作者单位】湖南农业大学油料作物研究所,长沙410128【正文语种】中文【中图分类】S565.401油菜种子分为种皮和种胚两个部分。
无论是黄籽油菜还是黑籽油菜,成熟种子的胚都是黄色,因此油菜种子颜色主要由种皮决定。
种皮由母体植株的珠被发育而来,如黄籽为母本,黑籽为父本的杂交当代种子的种皮颜色表现为黄色,反之,则杂交当代种子的种皮颜色表现为黑色。
成熟的油菜种子种皮有黄色、褐色和黑色等颜色之分。
在甘蓝型油菜中由于粒色形成和呈色机理复杂,加之环境的影响,种皮颜色表现出淡黄、土黄、暗黄、黄褐等等一些颜色。
油菜种皮形成过程与十字花科模式植物拟南芥的种皮形成过程具有相同特点[1]。
在油菜中,种皮来源于子房的内珠被(inter integument,ii)和外珠被(outer integument,oi)。
在大约授粉后10 d(10 dap)到成熟前,种皮由5层细胞组成,即oi3,oi2,oi1,ii2和ii1。
种胚和珠被的发育是同时开始的。
经过甲苯胺蓝O(TBO)染色后珠被可分为两层,分别为内珠被和外珠被。
外珠被包括一个表皮(oi3),2~3层薄壁细胞(oi2)和一层厚壁细胞构成的栅栏层(oi1)。
在大约35 dap的时候,oi2开始受到挤压并消失,所以成熟的种子外珠被只包括紧贴在一起的oi1和oi3两层。
内珠被由5~7层薄壁细胞和内皮层组成。
内皮层是内珠被的最内层。
