花青素检测方法(花色素苷)
原花青素、花青素与花色苷
原花青素（OPC）、花青素（VMA）与花色苷区别一：结构不同花青素是自然界中广泛存在于植物中的类黄酮化合物，由苯基丙酸类合成路径和类黄酮合成途径生成。
原花青素是黄烷-3-醇单体及其聚合体缩合而成的聚多酚类化合物，通常由儿茶素和表儿茶素这两类原花青素单体组成。
区别二：存在的物质不同原花青素广泛存在于植物的皮、壳、籽中，比如葡萄籽、苹果皮、松树皮、银杏叶、黑米种皮中；但是近年来，发现黑果枸杞是自然界中原花青素含量最高的植物。
花青素广泛存在于如蓝莓、樱桃、草莓、葡萄、黑豆、紫薯等水果和蔬菜中，其中以紫红色的矢车菊色素，橘红色的天竺葵色素，及蓝紫色的飞燕草色素等三种为自然界常见。
区别三：功效不同虽然花青素与原花青素都有抗氧化去除自由基的作用，但是原花青素抗氧化的作用比花青素要大得多。
OPC具有强大的抗氧化和清除自由基能力和对人体微循环具有特殊改善的双重功效，以高效、高生物利用而著称。
数据表明，原花青素具有很强的清除氧离子的能力,其抑制邻苯三酚自氧化率可高达91.5%。
区别四：颜色不同花青素是一种水溶性色素，是构成花瓣和果实颜色的主要色素之一，可以随着细胞液的酸碱改变颜色。
细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝。
除绿色外，花瓣及果实表现出来的颜色都是花青素作用的结果。
影响花青素呈色的因子包括花青素的构造、pH值、共色作用等。
原花青素高度提纯粉末为红棕色。
它根据浸泡溶液的PH值发生变化。
当溶液为酸性时，呈紫色；溶液为碱性时，呈蓝色。
区别五：物质转化原花青素在酸性介质中加热可产生花青素，所以叫“原花青素”。
但是花青素不能转化成原花青素，此过程不能逆转。
花色苷是花青素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物。
植物中，花青素多以花色苷的形式存在。
ph示差法花青素 计算问题
ph示差法花青素计算问题
Ph示差法是一种测定花青素含量的方法，这种方法利用花青素在不同pH
值下的颜色变化来计算花青素的浓度。
首先，你需要准备一些实验材料，包括含有花青素的样品、缓冲液（通常为pH 和pH 的磷酸盐缓冲液）、以及标准的花青素溶液。
实验步骤如下：
1. 将样品与pH 的缓冲液混合，用分光光度计在595nm处测定吸光度A1。
2. 将样品与pH 的缓冲液混合，再次测定吸光度A2。
3. 将标准花青素溶液与pH 的缓冲液混合，测定吸光度A3。
4. 将标准花青素溶液与pH 的缓冲液混合，测定吸光度A4。
通过以下公式计算花青素的浓度：
花青素浓度（mg/L）= [(A3×V3) - (A4×V3)] / [(A1×V1) - (A2×V1)] × [(V2/V1) - 1] / V3
其中，A1、A2、A3和A4分别是样品在pH 和pH 缓冲液中以及标准花青素溶液在pH 和pH 缓冲液中的吸光度。
V1和V2分别是样品和标准花青素溶液的体积，V3是缓冲液的体积。
请注意，这只是一个基本的计算方法，实际操作中可能需要根据具体情况进行适当的调整。
另外，为了保证实验结果的准确性，建议进行多次测量并取平均值。
花青素检测内容和方法
花青素检测内容和方法花青素检测是一项重要的化学分析技术，用于测定植物和食品中的花青素含量。
花青素是一类常见的天然色素，具有抗氧化和抗炎作用，因此对其含量进行快速和准确的测定具有重要的科学和应用意义。
以下为50条关于花青素检测内容和方法的详细描述：1. 花青素是一类具有紫、蓝、红等颜色的天然色素，主要存在于植物的花朵、果实和叶子中。
2. 花青素的主要类型包括花色素苷、原花青素和异花青素等，它们在植物中起着色素和抗氧化作用。
3. 花青素检测的方法包括分光光度法、高效液相色谱法、质谱法等，常用的是分光光度法和高效液相色谱法。
4. 分光光度法是利用物质吸收特定波长的光线进行测定，通过比色法或比浊法来测定花青素的含量。
5. 高效液相色谱法是利用高效液相色谱仪进行测定，通过分离和检测样品中的花青素成分来计算含量。
6. 质谱法是利用质谱仪进行测定，通过记录花青素分子的质荷比来确定其含量。
7. 花青素检测常用的标准曲线方法是通过不同浓度的标准品制备标准曲线，再根据待测样品吸光度的测定值来计算含量。
8. 花青素的提取方法包括有机溶剂提取、酸碱水提取、超声波提取等，不同样品可选择合适的提取方法。
9. 有机溶剂提取是利用乙醇、丙酮等有机溶剂将花青素从植物组织中提取出来，然后通过浓缩和干燥得到提取物。
10. 酸碱水提取是利用酸性或碱性水溶液将花青素从植物组织中提取出来，可以有效保留花青素的天然结构。
11. 超声波提取是利用超声波功率促使样品中的花青素溶解在有机溶剂或水中，提高了提取效率。
12. 花青素的测定结果可根据测定方法的不同而有所差异，因此需要在同一实验条件下进行多次重复测定来确保结果的准确性。
13. 在花青素检测过程中，可能会受到样品中其他化合物的干扰，因此需要进行干扰检查和修正。
14. 花青素检测结果可以用于评价植物的品质、食品的营养价值和天然色素的应用价值。
15. 花青素检测在食品工业中具有重要的应用，如在果汁、酒类、饮料等产品中进行质量控制。
花青素的生产工艺
花青素的生产工艺花青素是一种天然色素，广泛应用于食品、医药、化妆品等行业。
它具有良好的色彩稳定性和抗氧化性能，被认为是一种安全、健康的食品添加剂。
花青素的生产工艺可以分为以下几个步骤：1. 原料准备：花青素的主要原料是植物中的花青苷，可以从紫色或蓝色植物中提取获得。
这些植物包括紫菜、蓝莓、黑莓等。
首先，需要对原料进行筛选、清洗等预处理工作，确保原料的质量和纯度。
2. 溶剂提取：将经过预处理的原料与适当的溶剂（如乙醇、甲醇等）混合，进行溶剂提取。
这一步骤的目的是将花青苷从植物中分离出来，得到溶剂中的花青素溶液。
3. 浓缩和分离：将花青素溶液进行浓缩，使其浓度增加。
随后，通过蒸馏、萃取等方法，将其它杂质和溶剂从花青素中分离出来，得到纯净的花青素提取物。
4. 结晶和干燥：将花青素提取物进行结晶处理，使其形成结晶体。
这一步骤有助于提高花青素的纯度和稳定性。
结晶后，将花青素进行干燥，去除结晶体中的残余水分，得到稳定的花青素产品。
5. 精制和包装：对花青素进行进一步的精制处理，使其达到所需的规格和质量标准。
然后，将花青素产品进行包装，以便运输和销售。
在整个生产工艺中，需要注意以下几个关键因素：1. 原料的选择和处理：选择高品质的原料，并进行适当的预处理，以确保花青素的质量和纯度。
2. 溶剂选择和提取条件：选择适当的溶剂，并控制提取条件，使得溶剂提取过程高效、稳定。
3. 结晶和干燥条件：控制结晶和干燥的温度、湿度等条件，确保花青素的纯度和稳定性。
4. 精制和包装过程：注意处理过程中的卫生和质量控制，确保最终产品的质量和安全性。
总的来说，花青素的生产工艺是一个较为复杂的过程，需要仔细控制各个环节，以保证产品的质量和稳定性。
随着技术的进步，对花青素的生产工艺也将不断改进和完善，使其更好地满足人们对天然食品添加剂的需求。
花青素的提取_分离以及纯化方法研究进展_孙建霞
2008年第34卷第8期(总第248期)111花青素的提取、分离以及纯化方法研究进展*孙建霞,张 燕,胡小松,吴继红,廖小军(中国农业大学,教育部果蔬加工工程研究中心,北京,100083)摘 要 花青素是一种存在于自然界的水溶性多酚类化合物,现已发现其具有多种功能。
有关花青素的提取、分离和纯化研究报道很多,文中就近年来国内外相关方面的研究进展进行了分析。
关键词 花青素,提取,分离,纯化花青素(anthocyanins)又称花色素,是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素,多以糖苷的形式存在,也称花色苷。
最早而最丰富的花青素是从红葡萄渣中提取的葡萄皮红,它于1879年在意大利上市。
花青素的结构母核是22苯基苯并吡喃阳离子,属于类黄酮化合物。
自然界已知的花青素有22大类,食品中重要的有6类,即矢车菊色素(cyanindin,Cy)、天竺葵色素(pelar gonidin,Pg)、飞燕草色素(delphin 2idin,Dp)、芍药色素(peonidin,Pn)、牵牛色素(petu 2nidin,Pt)和锦葵色素(malvidin,Mv)[1],其结构如图1所示。
它们在植物可食部分的分布比例分别为50%、12%、12%、12%、7%和7%。
花青素广泛存在于开花植物(被子植物)的花、果实、茎、叶、根器官的细胞液中,分布于27个科,72个属的植物中[2]。
其中尤以葡萄皮、阿龙尼亚苦味果、黑醋栗、草莓、树莓、越橘等含量最为丰富。
图1 食品中几种重要的花青素结构第一作者:博士研究生(廖小军教授为通讯作者)。
*国家自然科学基金项目(30771511),国家/十一五0支撑计划(2006BAD27B03),国家863计划(2007AA100405)资助 收稿日期:2008-04-24,改回日期:2008-06-13自然条件下游离的花青素极少见,常与一个或多个葡萄糖(glucose)、鼠李糖(rhamnose)、半乳糖(ga 2lactose)、木糖(xylose)、阿拉伯糖(arabinose)等通过糖苷键连接形成花青素,花青素中的糖苷基和羟基还可以与一个或几个分子的香豆酸、阿魏酸、咖啡酸、对羟基苯甲酸等芳香酸和脂肪酸通过酯键形成酰基化的花青素[1]。
紫甘蓝中花青素提取实验报告
紫甘蓝中花青素的提取（安徽农业大学 12青年农场主班）花青素具有很强的抗氧化作用，具有清除体内自由基、过敏、保护胃粘膜等多种功能，引起了国内外学者广泛关注。
目前抗变异、抗肿瘤、抗，对花青素的研究主要集中于花青素的提取、分离纯化、热稳定性、抗氧化性及其生理功能等方面。
1、实验原理紫甘蓝花青素或花色素属于黄酮类化合物，极性较高，可溶于水或甲醇乙醇等有机溶剂中。
根据相似相溶的原则，本实验选用乙醇作为紫甘蓝花色素的浸提剂，采用大孔吸附树脂法分离提纯。
大孔吸附树脂具有吸附性能和分子筛的作用，使相对分子质量和吸附能力不同的混合物的不同成分得到分离。
紫甘蓝叶片与60%乙醇混合在组织捣碎机中破坏紫甘蓝细胞，使花色素尽可能多的溶解。
为了防止花色素的降解以提高其溶出率，可在其中加入1%盐酸。
八层纱布过滤后，留一小烧杯备用，剩余的用大孔树脂除杂，加入200ml 15%的乙醇溶液除去其他可溶性杂质，让树脂吸附花色素，再用60%乙醇洗脱，解析得到乙醇和花色素的混合液。
将过柱的溶液以HCl：混合液=1:4的比例混合至烧杯中，在90。
C的水浴锅中水解一小时，以破坏花色素的糖苷键，使花色素均以花青素的形式存在。
此时，用20ml纯水除杂，用无水乙醇洗脱，得到较为单一的花青素与乙醇混合液。
在旋转蒸发仪上蒸干。
2、材料、药品与仪器新鲜紫甘蓝15%乙醇、60%乙醇+1%HCl混合液、弄HCl、无水乙醇、AB-8打孔吸附树脂电子天平、组织捣碎机、交换柱、玻璃棒、50ml量筒漏斗、烧杯、圆底烧瓶、纱布、比色皿、分光光度计、旋转蒸发仪3、实验步骤●配制60%+1%HCl混合液与15%乙醇溶液备用●称取100.0g新鲜紫甘蓝叶片，量取60%+1%HCl混合液300ml（浸提剂），同时放入组织捣碎机中捣碎，浸提●所得固液混合物用8层纱布过滤，取一点滤液备用，剩余滤液1：5加水稀释得色素原液●将备用滤液再用滤纸过滤，用浸提剂做空白，测定其对520nm光的吸光度，并作标准曲线。
花青素和花色素苷
花青素和花色素苷
花青素和花色素苷是两种不同的物质。
花青素是一种广泛存在于植物细胞液中的水溶性色素，也被称为花色素苷。
其主要有以下几种功效：
- 抗氧化功效：花青素是一种水溶性的氧化剂，具有清除体内自由基的功效，可防止细胞衰老及癌症的发生。
- 保持健康的视力：花青素能促进视网膜中视紫质的合成，促进眼部血液循环，减轻眼睫状肌僵硬，保持正常的眼压，减轻眼睛疲劳，有助防止近视、干眼、白内障及其它眼部疾病的发生。
- 抑制肿瘤细胞的生长：花青素对肿瘤细胞的生长有抑制作用，对肿瘤细胞的生长有诱导作用。
此外，花青素还是形成花瓣颜色的主要来源，现在亦用来从各种植物中提取以达到需要的植物颜色。
1 花青素层析纯化及组分鉴定
THE END
花青素的层析纯化方法
• 1.4 凝胶过滤柱层析 • 凝胶过滤柱层析是根据被分离物质分子大小不同来进行分 离。其特点为条件温和，操作简便，无需有机溶剂，回收 率高，层析柱可反复使用。对于分子结构不同但分子质量 相近的物质，则无法通过凝胶过滤层析完全分离纯化。 • 1.5 离子交换树脂柱层析 • 离子交换树脂包括阳离子交换树脂和阴离子交换树脂。其 特点为处理量大，应用范围广，回收率高，价格便宜，但 是操作参数多，影响因素复杂。
花青素的层析纯化方法
• 2 纸层析法 • 纸层析法是一类以滤纸为载体的色谱法，其特点为操 作简单，分离效率高，所需仪器设备价廉，应用范围 广，但不适于挥发性物质分离，且定性、定量不便。
花青素的层析纯化方法
• 3 薄层层析 • 薄层层析又叫薄层色谱，它兼备了柱层析和纸层析的 优点，适用于少量样品分离，可在制作薄层板时把吸 附层加厚加大达到精制样品目的，此法特别适用于挥 发性小和高温易发生变化而不能用气相色谱分析的物 质。
花青素的层析纯化方法
• 1.1 大孔树脂柱层析 • 预处理后的大孔树脂对花青素具有吸附作用，经洗脱与回收， 能将花青素中杂质去除，从而达到纯化精制目的。该方法易于 控制，操作简单，并且树脂洗脱后可反复使用，节约成本。但 由于对被吸附物选择性不强，提取物纯度不高。 • 1.2 硅胶柱层析 • 根据混合物中不同成分在硅胶柱中吸附保留时间不同，可依次 被分离，一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附。该技术热 稳定性和化学稳定性好，提取物纯度高，安全性好。 • 1.3 聚酰胺柱层析 • 聚酰胺是一类纤维树脂，主要用于黄酮类化合物分离纯化，其 特点为灵敏度高，分辨率强，操作简单。
花青素的组分鉴定方法
• 1 HPLC-UV-Vis • 色谱法是样品组分分离鉴定的重要分离手段，并在 多种物质的鉴定方面已经大规模应用。Kerio等采用 SPE 方法纯化 kenya 茶花青素后，利用HPLC-UV-Vis 在 520nm 测定了花青素组分，在发酵和未发酵茶叶中 鉴定出天竺葵素、矢车菊素、飞燕草色素、芍药素和 锦葵色素，其中最主要的是锦葵色素。
中国农业大学食品化学实验实验六 花青素色素稳定性实验
实验材料 几种色彩不同的花 含有花青素的蔬菜、水果
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试剂
1mol/LNaOH溶液、冰乙酸、亚硫酸氢 钠、
2%抗坏血酸溶液、三氯化铝、三氯化铁、 盐酸、果糖等
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实验过程
提取：将几种花用沸水浸泡，取溶液实验 将鲜样匀浆，纱布过滤后取汁液实验
实验内容： 1、pH值对花青素颜色的影响 2、亚硫酸盐对花青素颜色的影响 3、抗坏血酸对花青素颜色的影响 4、金属离子对花青素色泽的影响 5、温度对花青素的影响 6、糖对花青素的影响
实验六 花青素色素的稳定性试验
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实验目的
了解花青素色素的变色原理，通过实验， 学会分析产生变化的原因。
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实验原理
花青素属黄酮类化合物，是植物中主 要的水溶性色素之一。
花青素和花色苷的化学性质不稳定， 常因环境条件的变化而改变颜色，影响变 色的条件主要包括pH值、氧化剂、酶、金 属离子、糖、温度和阳光种处理对花青素颜色的变化， 并分析原因，得出结论。
实验说明
实验中可自行选择带有花青素的样品，影 响因素及实验条件也可以自己设计。
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思考题
1、在pH值的影响中，如果先加酸为什么不 易
变色，而加碱却很容易变色？
2、在若干影响因素中，哪一种因素对花青素
影响最大？
3、通过实验，你对花青素的性质有何理解？
对在加工中含花青素样品的护色你有什么
想法？
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类胡萝卜素和花青素研究方案
植物呈现出绚丽多姿的色彩，有的是为了光合同化作用，有的则是作为吸引信号或者植物防御信号，从而有利于它们的生存、授粉或种子传播，以便将自己的基因长久的遗传下去。
这些色彩是由植物体内卟啉类、类胡萝卜素类、类黄酮类和甜菜素类四种物质而引起的。
其中类胡萝卜素使高等植物呈现出黄色、橙红色或红色。
类黄酮可分为黄酮、黄酮醇和花青素3类，前两者大多呈浅黄色，花青素则会根据PH 值的不同，使高等植物呈现出红色到蓝色。
1.类胡萝卜素类胡萝卜素是一类呈黄色、橙红色或红色的多烯类物质, 一般由8个类异戊二烯单位组成，其具有抗氧化、防癌症、预防夜盲症等功能。
自然界中发现的类胡萝卜素种类繁多, 大约有700多种。
近10年来，每年大约有3000多篇类胡萝卜素相关的文献产出。
（1）类胡萝卜素在高等植物中的分布类胡萝卜素作为光合色素的辅助色素，广泛存在于高等植物中，主要是以光合色素-蛋白质复合体的形式存在于高等植物的叶绿体中，几乎所有有叶绿素的地方就有类胡萝卜素。
如许多黄色或橙色的高等植物花瓣和果实的颜色均源于存在于其组织细胞之中的类胡萝卜素化合物，如番茄、柑橘、辣椒、胡萝卜、玉米等。
（2）类胡萝卜素的分析检测方法类胡萝卜素的分离、定性、定量分析是从事类胡萝卜素研究工作的基本方法。
类胡萝卜素的共轭双键对热、光、氧和酸都是比较敏感的，所以在分析操作过程中要尽量减少氧的破坏、较大可能的避免光和热引起的变化。
分析试剂不要含过氧化物、酸和游离氧。
色谱质谱技术和光谱技术是类胡萝卜素研究工作中重要的分析方法，在定性、定量分析和分离、制备方面起着重要的作用。
（3）类胡萝卜素的功能类胡萝卜素在叶绿体光合作用中扮演着重要角色，一方面可帮助叶绿素接收光能，另一方面高温、强光下可通过叶黄素循环，耗散多余能量，此外类胡萝卜素还是ABA的前体。
高等植物的叶、花、果及根因富含类胡萝卜素，而呈现出黄色、橙红色或红色，因此胡萝卜素是决定园艺植物观赏价值的重要指标。
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A1 花青素的测定方法
A1.1 方法来源：企业内控方法
A1.2 方法原理：
A1.3 试剂：
A1.3.1 甲醇（AR）
A1.3.2 盐酸（AR）
A1.3.3 2%盐酸甲醇：盐酸：甲醇=2：100（V/V）A1.4 仪器和用具：
A1.4.1 电子天平（1/100000）
A1.4.2 玻璃仪器：容量瓶
A1.4.3 超声波清洗器
A1.4.4 紫外分光光度计
A1.4.5 比色皿（1cm）
A1.5 步骤
精密称取样品20mg，加60ml 2%盐酸甲醇超声溶解，取出冷却，定容至100ml，摇匀，过滤，待测。
A1.6 测定
用 1cm 玻璃比色皿在540nm 波长下测定其吸光度A，用2％盐酸甲醇溶液作空白对照。
（吸光度应控制在0.3～0.7之间，否则应调整试样液浓度，再重新测定吸光度。
）
A1.7 计算
A × V
X = × 100%
1020 × W × 100
其中： X：花青素含量，%；
A：样品在波长为540nm处的吸光度值；
V：样品稀释体积，mL；
W：样品的称样量，g；
1020：飞燕草素的比吸光值。