花色素苷含量表达方式
ph示差法测花色苷原理
ph示差法测花色苷原理花色苷，听名字就感觉高大上，是吧？它们就是植物中的一种天然色素，通常藏在水果和花朵里，给我们带来那些迷人的色彩。
说到测量这些花色苷，大家听过“pH示差法”吗？这可是一种挺有意思的方法，像个小魔法一样，能让我们了解这些色素的秘密。
今天就来聊聊这个方法，轻松点，咱们不用专业术语，像聊天一样。
先来点背景知识。
花色苷其实是种有趣的东西，主要存在于植物中，负责色彩的传递。
你看到那些鲜艳的蓝莓、红葡萄，这些颜色可都是它们的功劳。
好吧，别光想着吃的，咱们得说说怎么测它们。
pH示差法可真是个神奇的工具，简单又有效。
它依靠植物色素对酸碱环境的反应，来判断花色苷的含量。
听起来像在做化学实验，但其实就像是在调饮料一样，酸酸甜甜的。
这个方法怎么操作呢？想象一下，你拿着一杯饮料，慢慢加入柠檬汁，颜色会变化，对吧？花色苷也是一样，pH值不同，它们的颜色就会出现大变脸。
比如在酸性环境下，颜色可能偏红；而在碱性环境下，颜色可能变成蓝色，甚至绿色。
是不是很神奇？就像小丑变魔术，令人目不暇接。
科学家们就利用这个变化来测量花色苷的含量，简单又直接。
使用这个方法，咱们需要一些仪器和试剂，像酸碱指示剂这些小家伙。
没啥复杂的，只要把样品调和后加点指示剂，就能看到颜色变化。
然后，再用比较的方法，把结果和标准样本对比，便能得出结果。
其实整个过程就像在玩颜色游戏，轻松又有趣。
只不过，这个游戏可以帮助我们了解植物的营养成分，对农业、药学都有很大的帮助。
很多人会问，为什么选择pH示差法呢？嘿，答案简单。
这个方法不需要高深的仪器，普通的实验室就能搞定。
结果精准，误差小。
它能快速出结果，像快餐一样，省时省力。
想想看，咱们做实验时，等个几天的感觉，真是让人抓狂。
用pH示差法，立马就能看到颜色变化，心里乐开了花。
大家可能想问，这个方法有没有局限性呢？当然有！就像一把双刃剑，既有优点，也有不足。
比如，对于某些复杂的植物样品，可能会出现干扰，导致结果不那么准确。
蓝莓花色苷含量分析及定量方法的比较——以贵州麻江引种蓝莓为例
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贵 州 科 学 ３ ３ （ ２ ） ： ２ ０ － ２ ４ ， ２ ０ １ ５
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蓝 莓 花 色 苷 含 量 分 析 及 定 量 方 法 的 比较
以贵 州麻 江 引种 蓝 莓 为例
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， 高 效 液 相 色谱 法 ， ｐ Ｈ示差法 ， 比 色法 中图分 类号 Ｏ ６ ５ ７ ． ３ １ 文献标 识码 Ａ 文章 编 号 １ ０ ０ ３ — ６ ５ ６ ３ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ２ 一 ｆ ） ２ ０ － ￣
花色素苷分子式(一)
花色素苷分子式(一)花色素苷分子式1. 花色素苷的概念花色素苷是一类天然有机化合物，广泛存在于植物中，尤其是花朵和水果中。
它们通常具有鲜艳的颜色，为植物提供吸引传粉媒介和抵御外界损害的作用。
花色素苷的分子式由多个组成部分构成，其中包括糖分子和色素分子。
2. 常见花色素苷分子式及解释以下是常见的花色素苷分子式及其解释：•Cyanidin-3-glucoside（氰化3-葡糖苷）：C21H21O11 这是一种常见的花色素苷，存在于许多水果和蔬菜中，特别是红色和紫色的食物中。
它具有强烈的抗氧化活性，有助于减少炎症和预防心血管疾病。
•Delphinidin-3-rutinoside（瞿明苷）：C27H31O15 瞿明苷是可以在植物和植物的花朵中找到的一种花色素苷。
它具有丰富的紫蓝色，被用作食品和药物添加剂，具有抗氧化和抗癌的潜力。
•Anthocyanin-3-galactoside（花青素3-半乳糖苷）：C21H21O10 这种花色素苷存在于许多水果和蔬菜中，特别是红酒中含有高浓度的花青素。
它具有抗炎症、抗氧化和抗癌的特性，对减少心血管疾病的风险也有益处。
•Malvidin-3-glucoside（马尔维丁3-葡糖苷）：C17H19O10 马尔维丁是一种存在于许多水果和蔬菜中的花色素苷。
它可以帮助减少炎症，并具有抗氧化和抗癌的特性。
马尔维丁对血液循环和心血管健康也有积极的影响。
•Pelargonidin-3-arabinoside（天竺葵3-阿拉伯糖苷）：C18H23O10 天竺葵是一种常见的植物，其花朵中含有丰富的花色素苷。
这种花色素苷具有抗氧化和抗炎症的特性，对降低肿瘤的风险有一定的作用。
3. 总结花色素苷是植物中常见的有机化合物，具有鲜艳的颜色和多种保健功效。
它们的分子式由多个组成部分组成，其中糖分子和色素分子是常见的组成部分。
通过研究花色素苷的分子式和性质，我们可以更好地理解植物中的营养特性和药理作用，为健康饮食和药物研发提供指导。
HPLC法测定果实中花色素苷含量
（ 上海市农业科学院林木果树研究所 ． 上海 ２ １０ ； ０ １６ 上海市农产品质量标准与检测技术研究所 ． 上海 ２ １０ ） ０ ６ １
摘
要： 建立了果实 中花色素苷的 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ测定方法 ， 采用 ＯＤ － １ （５ ｒ ＳＣ ８柱 ２０ｎｎ×４ ６ｎｎ ， 动相 Ａ：． ％ ． ｒ）流 １６
收稿 日期： ０ ５ ０ ９ ２０ —１ —１ 初稿 ； ０ ６ Ｏ — １ ２ ０ 一 ６ ２ 二改稿 作者简介：骆 军（９ １ ． ． １７ 一）男 大学本科 ． 副研究员． 研究方向 ： 果树裁培与育种 Ｔｄ：０ １５ ２ ５ ７ ：Ｅｍａｌｌ （２ ）２ ３ ４ ３ － ｉ ：
＠ｖｈ０ ∞ｍ． ａ０． ∞
１２ 方 ． 法
从大石早生李和藤稔葡萄果实赤道部位取 ０２ｇ ． 果皮 ， 液氮研磨 ， ３ 用 ０ｍＬ含 １６ ． ％甲酸 的甲 醇 溶 液 在 ４℃ 下 浸 提 过 夜 ， 声 波 处 理 超
０ ００ ．１ ０８
０ ０５ ・１ ０３
１ ｉ， ．２ ５ｍ ｎ用０ ２ ｍ滤膜过滤后 Ｗａ ｒ 液相色 ｔｓ ｅ 谱测定花色素苷含量。 《。 。。 ・ｏ ｏ９ ＯＳ １ Ｄ － ８柱 （ ５ ｍ ×４ ６ｎ ， Ｃ ２０ｎ ． ｍ） 流动相 Ａ：．％甲酸水溶 液； ：． ％甲酸 甲醇溶液 ， １６ Ｂ １６ 梯度 洗脱 为 ０ ｉ， ５ ～５ ｍ ｎ ８ ％Ａ＋１ ％Ｂ ５ ５ ；～
学院果树试验园。试验仪器为 Ｗａ ｒ 液相色谱 ， ｔｓ ｅ 双波长检测器 ， 色谱纯的矢车菊素一一 ３葡萄糖苷（ ｙｎ 一 Ｃ ａｉ ３ ｎ一 ｇ ｃ ｉ ）矢车菊素一一 ｌ ｏｄ 、 ｕ ｓｅ ３ 芸香糖苷 （ ｙｎ －一 ｔ ｏｉ ） ２ Ｃ ａｉ ３ ｕｉ ｓ ｅ ， 种标样均购 自Ａ ｉ Ｃ ｅ ｉ ｌ公 司。甲酸为分 ｎ ｒ ｎ ｄ ｐ ｈｍｃ ｓ ｎ ａ 析纯 ， 甲醇为色谱纯 ， 水为 ０ ２ ＿ ．２／ ｔ ｍ过滤的纯水。
PH示差法测量花青素含量
PH示差法测定火棘果花青素含量原理：花青素是具有2-苯基苯并吡喃阳离子结构的衍生物，广泛存在于植物中的水溶性天然色素。
花青素在自然状态下常与各种单糖形成糖苷，称为花色苷。
溶液PH不同，花色苷的存在形式也不同。
对于一个给定的PH值，在花色苷的4种结构之间存在着平衡：蓝色的醌式（脱水）碱，红色的花烊正离子，无色的甲醇假碱和查尔酮。
花色苷在PH值很低时，其溶液呈现最强的红色。
随着PH值的增大，花色苷的颜色将褪至无色，最后在高PH值时变成紫色或蓝色。
PH示差法测定花色苷含量的依据是花色苷发色团的结构转换是PH的函数，起干扰作用的褐色降解物的特性不随PH变化。
因此在花青素最大吸收波长下确定两个对花青苷吸光度差别最大但是对花色苷稳定的PH值。
原料与仪器原料：火棘果花青素提取液，乙醇95%（AR），盐酸仪器：PHs-3B型酸度计，紫外分光光度计实验步骤：1，火棘果的定性分析取提取液稀释至一定的体积，用稀氢氧化钠和稀盐酸调节PH，观察提取液在不同PH下的颜色变化。
对提取液进行200~800nm全波长扫描，绘制光谱图2，测定波长的选择取火棘果花青素提取液用5%HCL-EtOH（15:85）溶液稀释至一定体积，进行光谱扫描，确定最大吸收波长。
紫外可见吸收光谱3，PH示差法中PH的选择在选定PH时应考虑以下因素：在此两个PH处测定的花青素的吸收值差异应是最显著的；单一PH的轻微变动，对花青素吸光值的影响是极小的；花青素在所处的两个PH下，应是相当稳定的。
由于花青素只有在酸性介质中是稳定的，因此只测定PH小于7条件下花青素吸光值的变化。
PH为1.0时，花青素以红色的2-苯基苯并吡喃的形式存在PH为4.5时，花青素以无色的甲醇假碱的形式存在。
因此选择PH为1.0和4.5。
4，平衡时间的确定因为花青素在溶液介质中存在4种结构形式，这4种结构形式在某一PH下处于动态平衡，当PH改变时，动态平衡发生转移，总的趋势是PH降低时，平衡向红色的2-苯基苯并吡喃阳离子移动；PH 升高时平衡向蓝色醌式移动。
花青素检测方法（花色素苷）
花青素检测方法（花色素苷）
A1 花青素的测定方法
A1.1 方法来源：企业内控方法
A1.2 方法原理：
A1.3 试剂：
A1.3.1 甲醇（AR）
A1.3.2 盐酸（AR）
A1.3.3 2%盐酸甲醇：盐酸：甲醇=2：100（V/V）A1.4 仪器和用具：
A1.4.1 电子天平（1/100000）
A1.4.2 玻璃仪器：容量瓶
A1.4.3 超声波清洗器
A1.4.4 紫外分光光度计
A1.4.5 比色皿（1cm）
A1.5 步骤
精密称取样品20mg，加60ml 2%盐酸甲醇超声溶解，取出冷却，定容至100ml，摇匀，过滤，待测。
A1.6 测定
用1cm 玻璃比色皿在540nm 波长下测定其吸光度A，用2％盐酸甲醇溶液作空白对照。
（吸光度应控制在0.3～0.7之间，否则应调整试样液浓度，再重新测定吸光度。
）
A1.7 计算
A × V
X = × 100%
1020 × W × 100
其中： X：花青素含量，%；
A：样品在波长为540nm处的吸光度值；
V：样品稀释体积，mL；
W：样品的称样量，g；
1020：飞燕草素的比吸光值。
植物花色苷含量试剂盒说明书
货号：QS1515 规格：50管/48样植物花色苷含量试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：花色苷是一类易溶于极性溶剂的天然色素，属黄酮类化合物。
花色苷广泛存在于植物的根、茎、叶、花和果实中，使其呈现由红到紫等不同颜色，是植物主要的呈色物质。
测定原理：采用pH示差法测定花色苷含量，当pH为1.0时花色苷在530nm处有最大吸收峰,而当pH 为4.5时,花色苷转变为无色查尔酮形式,在530处无吸收峰, 利用此特性分别测定在不同pH 下的530nm和700nm处的吸光度值。
pH示差法减少了溶液pH和溶剂差异的影响，排除了其他非花色苷类物质对检测结果的干扰。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。
试剂的组成和配制：提取液：液体50 mL× 1瓶，4℃保存；试剂一：液体50 mL× 1瓶，4℃保存；试剂二：液体50 mL × 1瓶，4℃保存；花色苷的提取：按照烘干样品质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g烘干样品，加入1mL提取液），充分匀浆后转移到EP管中，提取液定容至1 mL，盖紧后4℃浸提24 h，8000 g，25℃离心10 min，取上清液待测。
测定步骤：1、分光光度计预热30min以上；试剂一和试剂二预热10min以上。
2、取100 µL上清液和900 µL试剂一（相当于稀释10倍），40℃水浴20min，分别测定530nm和700nm处的吸光值，分别记为A1和A2。
3、取100 µL上清液和900 µL试剂二（相当于稀释10倍），40℃水浴20min，分别测定530nm和700nm处的吸光值，分别记为A3和A4。
4、计算△A=（A1-A2）-(A3-A4)注意：如果A1大于1，可以适当加大稀释倍数，保证总体积1mL不变，如50 µL上清液和950 µL 试剂一（相当于稀释20倍）；如果A1小于0.1，可以适当缩小稀释倍数，保证总体积不变，如200 µL上清液和800 µL试剂一（相当于稀释5倍），使A1保持在0.1~1范围内，可提高检测灵敏度；同样调整上清液和试剂二体积比例；计算时以实际稀释倍数代入下述公式中。
实验四 葡萄果实中花色苷提取与测定
实验四葡萄果实中花色苷提取与测定一、实验目的1、了解并掌握葡萄果皮中花色苷提取的原理和操作；2、掌握葡萄果皮重花色苷含量的测定方法和步骤。
二、实验原理花色苷是红色葡萄果实中一类非常重要的呈色物质，并且多数情况下主要存在于果皮当中，只有极少数染色品种的果肉中存在花色苷。
花色苷主要有花色素（包括花翠素、花青素、甲基花青素、甲基花翠素及二甲花翠素）经过羟基化后以单体糖苷的形式存在。
三、实验材料红色葡萄果实、吸水纸、研钵、研杵、液氮、分光光度计等四、主要项目和方法1、果皮花色苷提取把每个样本（20粒）的葡萄果皮取下，然后用蒸馏水冲洗果皮，除去果皮粘连的部分果肉与糖分等并用吸水纸吸干，进行称重（M），然后再液氮中将果皮研磨成粉末，准确称取3.0000g粉末放入50ml离心管中，加入30ml酸化甲醇溶液（1mol/L HCl/MOH/水，1/80/19，v/v/v），在100%功率条件下超声辅助提取30min，温度控制在25摄氏度，然后将其只置于低温离心机中离心（8000r/min）15min，收集上清液。
向残渣中继续加入30ml酸化甲醇溶液，在此按照上述步骤进行提取，重复4次，合并所有上清液（120ml）于细口瓶中，-20摄氏度避光保存。
2、花色苷含量测定和计算采用pH示差法，提取液分别用pH值为1.0盐酸-氯化钠缓冲液稀释20倍。
然后分别在510nm与700nm下测定两种稀释液的吸光度。
吸光度A为：A=(A510nm-A700nm)pH1.0 - (A510nm-A700nm)pH4.5花色苷含量用矢车菊素-3葡萄糖苷（R CGE , mg/g）表示，即R CGE=（A × MW × DF × Ve × 1000）/（ε× 1 × M）式中 MW-矢车菊素-3葡萄糖苷相对分子量，取449DF-稀释倍数Ve-提取液总体积M-葡萄皮质量ε–摩尔吸光系数，取29600五、实验结果A=0.9007-0.0087-(0.0813-0.0065)=0.8172nmR CGE=因此该葡萄果实中，花色苷含量为 mg/g。
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花色素苷含量表达方式
一、以质量浓度为表达方式
质量浓度是描述花色素苷含量的常用方式之一，它表示单位体积或单位质量中所含的花色素苷的质量。
常见的质量浓度单位有毫克/升、微克/克等。
通过测定花色素苷在植物样品中的质量浓度，可以客观地反映出不同植物中花色素苷的含量差异，为进一步研究其生理功能和药用价值提供了参考。
二、以百分比为表达方式
百分比是另一种常见的花色素苷含量表达方式，它表示花色素苷在总质量中所占的比例。
百分比可以通过质量浓度与总质量的比值得到。
以百分比为表达方式，可以直观地了解不同植物中花色素苷的相对含量，比较它们的差异和变化趋势。
三、以单一物质含量为表达方式
花色素苷是由糖苷和花色素组成的复合物，可以根据其中一部分的质量或百分比来表达花色素苷的含量。
例如，可以通过测定花色素的质量或百分比，来反映花色素苷的含量。
这种表达方式更加具体和直接，能够更好地了解花色素苷中不同组分的含量差异。
四、以药用价值为表达方式
花色素苷具有多种药理作用，可以用来治疗心脑血管疾病、抗氧化、抗炎等。
因此，以花色素苷的药用价值来表达其含量也是一种常见
的方式。
可以根据花色素苷的药用效果和用量，来评估不同植物中花色素苷的含量，为合理利用植物资源提供科学依据。
五、以颜色深浅为表达方式
花色素苷是植物中赋予花朵颜色的重要物质，因此可以通过花朵颜色的深浅来初步判断花色素苷的含量。
一般来说，颜色越深的花朵含有更多的花色素苷。
虽然这种表达方式不够精确，但可以作为初步筛选植物花色素苷含量的指标。
花色素苷含量可以以质量浓度、百分比、单一物质含量、药用价值和颜色深浅等方式进行表达。
不同的表达方式各有特点，可以根据具体研究目的和需要选择合适的方式。
通过合理选择和运用表达方式，可以更好地了解和评估不同植物中花色素苷的含量差异，为深入研究其生理功能和药用价值提供科学依据。