红曲菌的培养和红曲制备
实验8-3红曲液体菌种的制备
实验8-3 红曲液体菌种的制备
一、实验目的
1. 了解红曲霉液体菌种的制备方法。
2. 为下一步实验准备足够的红曲种子。
二、实验原理
红曲霉是一种好氧性微生物，种子的制备除了可用三角瓶固体培养基外，还可以用液体摇瓶培养的方法来获得。
液体摇瓶培育法制备种曲快速方便，作为种子与固体培养基（饭粒）的接触比较均匀，但因含水量大，接种时接种量不能太高，否则因湿度太大而容易导致细菌污染。
三、实验器材
1. 豆芽汁培养基
2. 器材三角瓶、恒温摇床、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅等。
四、实验步骤
1. 配制豆芽汁培养基（或其他合适的培养基）。
2. 500 mL三角瓶中装豆芽汁培养基100 mL，以8层纱布封口，加牛皮纸包扎后0.08 MPa 灭菌30 min。
3. 冷却后，每瓶豆芽汁中接入1/2支红曲斜面菌苔。
4. 30℃恒温摇床中180 r/min摇瓶培养3～5 d，至培养液深红色即可。
5. 4℃冰箱保存备用。
五、注意事项
1. 注意无菌操作。
2. 夏季若室温高于30℃，应打开摇瓶机的门，后则，温度过高影响种子质量。
最好用带制冷设备的摇瓶机或在空调房间内培养。
3. 三角瓶中液体培养基的装量不能太多，否则摇瓶时容易晃出，而且会造成液体中溶解氧含量的不足；另外摇床转速不能太慢，否则菌丝体会结成大球。
摇床转速快，结成的球数量多，体积小，有利于接种时分布均匀。
六、思考题
1. 比较液体种子与固体种子的优缺点。
2. 为什么摇瓶培养时摇床转速快，结成的球数量多而体积小，摇床转速慢，结成的球数量少而体积大？。
一种高产型红曲霉菌株培养基及制备方法
⼀种⾼产型红曲霉菌株培养基及制备⽅法（19）中华⼈民共和国国家知识产权局
（12）发明专利申请
（10）申请公布号
CN110468158A
（43）申请公布⽇ 2019.11.19（21）申请号CN201910840024.0
（22）申请⽇2019.09.06
（71）申请⼈武汉华康⾂⽣物科技有限公司
地址430056 湖北省武汉市武汉经济技术开发区全⼒⼆路101号经开智造2045创新⾕D217（72）发明⼈何毅;刘志伟;李明;杨宁;何丽丽
（74）专利代理机构
代理⼈
（51）Int.CI
权利要求说明书说明书幅图
（54）发明名称
⼀种⾼产型红曲霉菌株培养基及制备⽅法
（57）摘要
本发明⽬的是提供⼀种可提⾼红曲⾊素的
红曲菌株培养⽅法。
本发明以红曲菌Mr△lig4菌
株为研究菌株，将通过对发酵培养基碳源，发酵
培养基pH，液态发酵培养时间和液态发酵培养温
度四个影响因素进⾏优化，进⽽确定该菌株的最
佳液态发酵条件，提⾼了本菌株产红曲⾊素的产
率，从⽽为本菌株⽇后的应⽤提供了强有⼒的数
据⽀持。
红曲菌的培养和红曲制备
红曲菌的保存及红曲的制备斜面菌种培养1.PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸0.5h，纱布过滤，再加15g葡萄糖和15-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
2.麦芽汁琼脂培养基麦芽汁的制备：干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。
太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度），按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37oC左右浸泡1小时，然后缓缓加温至55~63℃（在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温4~6小时（用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。
在糖化过程中，应每小时搅拌一次。
取过滤后的清液，加1.8%琼脂，分装试管，每试管约5-10ml （视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
红曲的制备1、菌种培养1）在250ml三角瓶中装入50g大米，洗净后浸泡2h，将水倒出并沥净多余的水，0.08MPa压力下灭菌20min，冷却后用无菌竹筷将米团轻轻打散，接斜面菌种，于28℃培养，待米粒开始发红后每天摇动三角瓶，将瓶壁上的水珠滚到米上，如此培养12天。
2）扩大培养菌种用500ml三角瓶，每瓶装大米100g，洗净后浸2h，将水倒出并沥净多余的水，0.08MPa压力下灭菌20min，冷却后接种1）中的种子（研碎后加0.3%醋酸液××ml制成悬浮液）。
每100g灭菌后的米接种子液10ml，用无菌竹筷搅拌均匀，于26℃下培养14天，培养期间每天需摇动三角瓶，将瓶壁上的水珠滚到米上。
3）将扩大培养种子用3%醋酸液制备成悬浮液。
2、泡米蒸饭例如250kg米浸泡5h，洗净后置于箩筐中沥净多余水分，入甑蒸饭10min，以米透心为度。
摊平降温至35到40℃，拌种，250kg 米饭需要300g三角瓶培养的种子，加3%醋酸溶液12.5L，混合均匀后为拌饭的种子，拌种时应将饭团弄碎拌均匀。
红曲酒制作方法及步骤 -回复
红曲酒制作方法及步骤-回复红曲酒是一种以红曲米为原料发酵制作而成的传统中国米酒。
它得名于红曲菌的存在，红曲菌是一种草菌，可以赋予酒类颜色、味道和特殊的保健功效。
红曲酒制作过程繁琐，但是制作出来的红曲酒香醇美味，深受人们喜爱。
下面，就让我们一步一步来了解红曲酒的制作方法及步骤。
第一步：准备原料制作红曲酒的主要原料有红曲米、糯米、蒸锅、发酵罐、红曲菌和清水。
首先，你需要选择新鲜的红曲米，并将其洗净，晾干备用。
糯米也需要提前准备好，并洗净晾干备用。
第二步：蒸煮红曲米和糯米将红曲米和糯米按照一定比例混合，然后放入蒸锅中蒸煮。
蒸煮的时间要根据具体情况进行调整，一般需要蒸煮1-2个小时，直到米饭变得熟透。
第三步：晾干米饭将蒸煮好的米饭倒出来，晾干一段时间，一般需要晾干2-3个小时。
这个过程是为了米饭与空气接触，迅速降低其温度，并为红曲菌的发酵提供良好的环境。
第四步：培养红曲菌将红曲菌培养在薄布上，然后将其铺在米饭上，以红曲菌的培养温度为准，一般在25-35摄氏度之间。
培养的时间根据红曲菌的繁殖速度来判断，一般需要1-3天。
第五步：发酵将培养好的红曲菌铺在晾干的米饭上，然后放入发酵罐中。
为了保证发酵的效果，可以在发酵罐中加入适量的清水，将发酵罐封闭好，以确保发酵过程中的温湿度。
发酵的过程一般需要7-10天，期间需要每天进行适量的搅拌，以保证红曲菌均匀发酵。
第六步：过滤待发酵完全后的红曲米酒需要进行过滤，将其中残留的固体物质过滤掉，只保留液体部分。
你可以使用纱布或者纱袋来过滤，确保过滤出来的酒液清澈透明。
第七步：陈酿过滤好的红曲米酒需要进行陈酿。
将其倒入干净无味的容器中，封闭好，放置在阴凉干燥的地方进行陈酿。
陈酿的时间根据个人口感来定，一般需要3-6个月，可以根据适当调整。
第八步：装瓶陈酿完成后，将红曲米酒进行装瓶保存。
选择干净的玻璃容器或酒瓶，将其倒入，并封闭好，避免酒液的氧化和变质。
红曲酒制作虽然麻烦，但是品尝到自己亲手制作的酒的滋味无疑是一种特别的享受。
家庭自制红曲方法
家庭自制红曲方法红曲被医学界认为是珍贵的保健品，含有珍贵的天然他汀类药物，能全面调节血脂，降低胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白，升高高密度脂蛋白。
还有说有清除血管废物，保护血管内皮，一级预防，二级预防各种心脑血管疾病的作用。
红曲，古称曲丹，药食两用。
其制备方法是在大米上接种红曲霉并发酵。
它的生产和应用已有一千多年的历史。
像我这位血脂异常的朋友，不妨在家尝试做一些红曲食品。
比如红曲米酒糟就是个不错的选择。
一、原料：大米（糯米），红曲米，酒曲，水二、步骤准备：作醪糟用糯米最好，考虑到常吃常用，用大米也可。
但凡制作红曲醪糟者，都以食用该“保健品”来干预身体状态为目的，一般都不成顿吃，且是天天吃，故应该准备两个以上的器皿，轮换制作，细水长流，连绵不断。
大米（糯米）和红曲米的比例大概是10:1。
家庭常用一斤大米（糯米）、一两红曲米、3～4克酒曲和适量水，与作普通醪糟很相似。
具体做法如下：①淘米：一般做饭都不主张把米洗得太净，以免流失营养。
但作醪糟则不同，要淘洗多遍，直到水清为止。
之后浸泡数小时，到到可用手捻碎即可。
红曲米用水快速漂洗一遍即可，之后用冷开水（或无菌水矿泉水等）浸泡三、五小时均可。
②作熟：一般的做法是把浸泡好的米上锅蒸熟。
其实，用锅焖熟更简单。
像平时做饭一样，只是少放些水，比平时的干饭再干一点就可。
若用高压锅则可大大缩短浸泡米的时间。
③拌曲：作熟的米饭晾凉到30～35℃，用筷子打散，拌入浸泡好的红曲米和酒曲即可。
注意，一定要把浸泡红曲米的水一并倒入；如果米饭还是粘连，就和普通作醪糟一样，再加些冷开水搅散。
④装坛：装坛（或装瓶等）方式和作普通醪糟相同，不要装满（三分之二或四分之三），要压实，中间用筷子扒一个洞眼。
然后放到30～40℃的地方发酵既成。
⑤食用：装坛几天后，可见中间洞眼里有液体浸出，基本上就发酵可食了（时间与发酵温度有关）。
红曲醪糟的食用方法很多，这里就不再赘述，就按普通醪糟食用就可，比较长久。
红曲的大致工艺流程
红曲的大致工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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2. 浸泡，用清水将糯米浸泡12-24小时，使其吸水涨发。
千年奇药——红曲
红曲和高血脂
1999年洛山矶分校医学中心发表在美国临床营养期 刊上的一项红曲米降低血胆固醇的临床试验: 83位平均年龄62岁受试者，服用红曲8周后的体检 报告： 总胆固醇明显下降13-16﹪ (203 31mg/dl：245 36 mg/dl) 坏胆固醇LDL减少12-19﹪ 好胆固醇HDL增加7-14﹪ 三酸甘油酯减少17-23﹪
清正红曲与其他红曲的区别
1、采用有机大米为原料，通过欧美、日本、 中国有机认证；
2、开环比高达90%以上； 3、水溶性红曲发明专利； 4、千岛湖得天独厚的资源。
红曲的制作工艺
优质的成熟稻米Premium Grown Rice 第一次杀菌 1st Sterilization 植入菌种 Inoculation 固态发酵 Solid State Fermentation 二次杀菌过程2nd Sterilization 干燥 Drying 研磨 Grinding 置入红酵母Red Yeast added
中国古田红曲制造技艺传承人；非物质文化遗产保护 项目代表性传承人。从事红曲研究生产40余年。
清正生物——院士工作站
• （一）开展产业及企业发展战 略咨询和技术指导； • （二）围绕企业发展急需解决 的重大关键技术难题，组织院 士及其创新团队与企业研发人 员开展联合攻关 • （三）引进院士及其创新团队 的技术成果，在企业共同开展 转化和产业化，培育自主知识 产权和自主品牌； • （四）与院士及其创新团队共 建研究生培养基地，联合培养 企业创新人才。
日本、韩国、中国台湾等 专家各种有关红曲功能的学术著作
红曲近代研究发现纪实
• • • • • • • • 1986年 日本学者发现红曲能调节血脂和胆固醇，降低血压 1997年 日本发现红曲中降血压成分GABA和胆碱 2000年 中国发现红曲具有抗氧化作用。 2002年 日本发现其抗氧化物质Dimerumic acid 2004年 中国发现红曲预防改善骨质疏松的麦角固醇，改善骨折 2004年 中国台湾学者发现红曲抗疲劳功效 2005年 台湾学者发现红曲可以预防老年痴呆和阿兹海默症 2006年 中国学者发现红曲在治疗类风湿关节炎、脊柱关节病（强 直性脊柱炎、银屑病关节炎，反应性关节炎，未分化的脊柱关节病 ，红斑狼疮，干燥综合征，成人斯蒂尔并，骨关节炎等具有慢性炎 症关节炎的疾病方面的具有的良好功效 • 2007年 美国学者发现红曲在抑制结肠癌增生方面有良好效果具有 抗癌作用。
红曲传统制作技艺
红曲传统制作技艺一、红曲的概述红曲是一种传统的食用发酵菌，它是由糯米、小麦和红曲菌共同发酵而成的。
红曲在中国已经有着悠久的历史，它被广泛应用于食品加工和中药制作。
红曲具有美味可口、营养丰富、药用价值高等特点，因此备受人们喜爱。
二、红曲的制作方法1. 糯米的处理首先需要将糯米进行清洗，然后将其浸泡在水中约2小时左右，使其吸足水分后再进行蒸煮。
蒸煮时间需视糯米的品质而定，大约需要30-40分钟左右。
2. 红曲菌的培养将干净无菌的小麦淀粉放入培养皿中加入适量水后进行灭菌处理，然后将红曲菌接种到培养皿中，在恒温条件下进行培养。
通常情况下，培养时间为7-10天左右。
3. 发酵过程将蒸好的糯米晾凉后与适量的红曲菌混合均匀，然后将其放入发酵室内进行发酵。
发酵过程需要注意温度和湿度的控制，通常情况下，温度控制在25-30℃之间，湿度控制在80%左右。
4. 红曲的晾干当红曲的颜色变为暗红色时，即可停止发酵。
此时需要将红曲晾干，一般采用阳光照射或者烘干的方式进行晾干。
三、红曲的应用1. 食品加工红曲可以用于米酒、黄酒、豆腐乳、臭豆腐等食品的加工中。
其中最为著名的是米酒和黄酒，这两种饮品都具有一定的保健作用。
2. 中药制作红曲被广泛应用于中药制作中，主要是因为它具有活血化瘀、降血脂等功效。
目前市场上常见的红曲制剂包括红曲素、柿霜片等。
四、红曲传统制作技艺1. 选料传统制作技艺要求选用优质的糯米和小麦，这样可以保证红曲的品质。
2. 发酵传统制作技艺强调发酵过程中的温度和湿度的控制，需要根据天气、气候等因素进行调整。
3. 晾干传统制作技艺通常采用阳光晒干或者烘干的方式进行晾干，这样可以保证红曲的品质和口感。
4. 保存传统制作技艺要求将红曲保存在阴凉干燥处，避免阳光直射和潮湿环境。
同时需要定期检查红曲是否有异味或变质现象。
五、结语红曲是一种具有悠久历史和丰富营养价值的发酵食品，它被广泛应用于食品加工和中药制作中。
传统制作技艺要求选料精细、发酵过程精准、晾干方式合理、保存环境卫生等方面都有着严格要求。
红曲生产工艺
红曲生产工艺红曲是一种传统的中国发酵食品加工工艺，主要用于制作红曲米酒、红豆豆腐乳和红曲米线等。
它是通过将红曲菌（学名：曲霉）接种于糯米或大豆等食材上，经过发酵和长时间的储存而制成的。
红曲菌是一种微生物，属于分枝杆菌门（Ascomycota），青霉目（Eurotiales）。
它的特点是能够产生红色的色素，因此得名为红曲。
红曲菌是广泛存在于自然界中的一种微生物，可以在大米、小麦、玉米、高梁等多种粮食上找到。
红曲的生产工艺可以分为材料准备、接种发酵和后期处理三个主要步骤。
首先是材料准备。
糯米是制作红曲的主要原料，它需要选择质地好的高粱米。
这些米要先进行洗净，然后浸泡在清水中。
浸泡的时间一般为6至8小时，以便使米粒充分吸水。
接着，将米粒蒸熟，熟米温度控制在55至60摄氏度，蒸煮时间为40至50分钟。
蒸熟的糯米需要散热，以便接种红曲菌。
接种发酵是红曲生产的核心步骤。
将蒸熟的糯米放入一个干净的容器中，然后将红曲菌粉末均匀撒在米饭上，覆盖在上面。
接种时要注意将红曲菌均匀地分布在糯米上，以避免菌群不均衡。
然后，将容器密封，并放置在适宜的温度下进行发酵。
红曲菌的适宜发酵温度为25至30摄氏度，湿度控制在60%至80%之间。
发酵的过程需要持续时间较长，一般为7至10天。
在发酵的过程中，红曲菌会分解米中的淀粉，产生一系列酶类和活性物质，进而使米中的蛋白质、脂肪和糖分解，从而形成有特殊香味和口感的红曲。
发酵完成后，接下来就是后期处理。
首先，将发酵好的红曲糯米晾凉，晾干后研磨成粉末状。
然后，将红曲粉末放入一个容器中，并与水混合搅拌均匀，形成红曲汁。
接着，将红曲汁进行煮沸，杀死红曲菌，防止它们继续生长。
最后，将红曲汁过滤，除去固体颗粒，得到纯净的红曲汁。
通过以上的工艺步骤，红曲的生产过程就完成了。
制成的红曲可以用于制作红曲米酒，或者加工成红豆豆腐乳等食品。
红曲米酒是一种中国传统的酒类产品，具有独特的香气和口感。
它是通过将红曲和糯米一起发酵、储存一段时间而制成的。
千年奇药红曲
红曲和高血脂
1999年洛山矶分校医学中心发表在美国临床营养期 刊上的一项红曲米降低血胆固醇的临床试验: 83位平均年龄62岁受试者，服用红曲8周后的体检 报告： 总胆固醇明显下降13-16﹪ (203 31mg/dl：245 36 mg/dl) 坏胆固醇LDL减少12-19﹪ 好胆固醇HDL增加7-14﹪ 三酸甘油酯减少17-23﹪
日本、韩国、中国台湾等 专家各种有关红曲功能的学术著作
红曲近代研究发现纪实
• 1986年 日本学者发现红曲能调节血脂和胆固醇，降低血压 • 1997年 日本发现红曲中降血压成分GABA和胆碱 • 2000年 中国发现红曲具有抗氧化作用。 • 2002年 日本发现其抗氧化物质Dimerumic acid • 2004年 中国发现红曲预防改善骨质疏松的麦角固醇，改善骨折 • 2004年 中国台湾学者发现红曲抗疲劳功效 • 2005年 台湾学者发现红曲可以预防老年痴呆和阿兹海默症 • 2006年 中国学者发现红曲在治疗类风湿关节炎、脊柱关节病（强
红曲取之于米而高于米，因此药食两用。 红曲是我国的磈宝,它是横跨药品到食品的一种 无副作用且具有极好保健价值的天然发酵产品.
重视红曲研究
• 上世纪七十年代，日本学者远藤章根据《 本草纲目》上记载红曲的“活血”功效的 启示，从红曲霉菌的次生级代谢产物中发 现了能够降低人体血清胆固醇的物质莫纳 可 林 K （ Monacolin-K ） ， 从 而 引 起 世 界 的 关注。此后30多年来，各国的研究人员， 尤其是中国和日本的研究人员对红曲进行 了大量的研究和开发
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红曲菌的保存及红曲的制备斜面菌种培养
1.PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）
称取200g马铃薯，洗净去皮切碎，加水1000ml煮沸0.5h，纱布过滤，再加15g葡萄糖和15-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
2.麦芽汁琼脂培养基
麦芽汁的制备：干麦芽首先进行粉碎（不能太粗，也不必太细。
太粗影响糖化效率，过细影响过滤速度），按麦芽重量的3~4倍加水，搅拌均匀后，37oC左右浸泡1小时，然后缓缓加温至55~63℃（在升温过程中应不断搅拌使温度均匀），保温4~6小时（用0.02摩尔/升碘液测定为黄色至无色时），糖化结束。
在糖化过程中，应每小时搅拌一次。
取过滤后的清液，加1.8%琼脂，分装试管，每试管约5-10ml （视试管大小而定），121℃灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
红曲的制备
1、菌种培养
1）在250ml三角瓶中装入50g大米，洗净后浸泡2h，将
水倒出并沥净多余的水，0.08MPa压力下灭菌20min，冷却后
用无菌竹筷将米团轻轻打散，接斜面菌种，于28℃培养，待
米粒开始发红后每天摇动三角瓶，将瓶壁上的水珠滚到米上，如此培养12天。
2）扩大培养菌种用500ml三角瓶，每瓶装大米100g，洗净后浸2h，将水倒出并沥净多余的水，0.08MPa压力下灭
菌20min，冷却后接种1）中的种子（研碎后加0.3%醋酸
液××ml制成悬浮液）。
每100g灭菌后的米接种子液10ml，
用无菌竹筷搅拌均匀，于26℃下培养14天，培养期间每天
需摇动三角瓶，将瓶壁上的水珠滚到米上。
3）将扩大培养种子用3%醋酸液制备成悬浮液。
2、泡米蒸饭
例如250kg米浸泡5h，洗净后置于箩筐中沥净多余水分，入甑蒸饭10min，以米透心为度。
摊平降温至35到40℃，拌种，250kg 米饭需要300g三角瓶培养的种子，加3%醋酸溶液12.5L，混合均匀后为拌饭的种子，拌种时应将饭团弄碎拌均匀。
3、装入麻袋，置于通风池上保温，24h后米粒开始有红斑，打开麻袋。
将米饭摊开，待红斑布满所有饭粒，将其平摊于尼龙布上。
4、如温度上升至45℃时，则打开鼓风机通风降温，保持温度在35~40℃
5、待全部米粒都呈深红色，约3天洗曲一次，所谓洗曲，就是向去上喷水，并用手拌匀，然后再保温培养。
6、第4天再洗曲一次。
7、每批曲5~6天可得，用鼓风机吹干，得成曲。