非洲猪瘟实验室诊断电子教案
非洲猪瘟诊断及综合防控技术
非洲猪瘟诊断及综合防控技术非洲猪瘟（African swine fever, ASF）是一种由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的高度传染性疾病，能使猪的死亡率达到90%以上，对猪产业造成极大的经济损失。
目前，亚洲地区多个国家（包括中国）都爆发了ASF疫情，所以ASF的快速诊断和高效防控显得尤为重要。
本文将介绍ASF诊断和综合防控技术。
一、ASF的诊断技术1、临床诊断ASF的临床表现主要有以下几点：发热、咳嗽、呼吸急促、猪体表出现暗红色斑块、黯呈及皮肤坏疽等，因此，一些简单的临床表现也可作为ASF的指标。
2、实验室检测（1）血清学检测：血清学检测是ASF诊断的最初的方法之一，包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、简单免疫过滤法（SIFT）、免疫电泳法等。
这些方法基于ASFV感染引起的抗体产生和抗原-抗体反应，可用于疫情监测和检测ASF的确诊和流行病学研究。
（2）分子生物学检测：PCR是ASF诊断的“金标准”，它是一种高度特异且敏感的技术，基于ASFV的核酸分子检测。
PCR方法可以用于AFPV水平的检测和定量，检测时间短、检测结果可靠，是ASF 检测的首选方法。
ASF的治疗手段非常有限，因此在发生ASF疫情时，及时采取措施进行防控才是保障养猪产业不受损失的最有效途径。
防控手段主要包括：1、加强猪场内部管理在猪场内部要加强各种管理工作，如保持良好的饮水和饲养条件，定期消毒杀菌，及时清理和处理污染的废料和粪便等等，这些都有助于阻止ASF的传播。
2、加强外部疫情监测亚洲地区多个国家已经爆发ASF疫情，因此对于那些与ASF流行区交通频繁的农业部门和企业，他们应该加强疫情监测，开展ASF病毒筛查、高危区域隔离等防控措施。
3、家禽与野生动物间的隔离家禽间、家禽与野生动物间的隔离是降低ASF传播风险的一种重要手段。
在疫情期间，为了保证野生动物与猪的安全，应加强它们之间的隔离和安全防御。
结论：ASF是一种严重的瘟疫，给养猪产业带来了沉重的打击。
非洲猪瘟科普知识PPT教案
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5、养猪场（户）加强饲养管理，提高生物安全水平，严禁使用泔水喂猪 6、避免家猪与野猪接触，防止蜱等吸血昆虫的叮咬
7、加强疫情监测，早期识别感染
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8、发现可疑病例及时上报 9、一旦发生疫情，立即采取措施，严 防疫情扩散
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急性型：局部皮肤变红或变蓝
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各种毒力的毒株均可导致流产。 胎儿可能全身水肿； 可能在胎盘、皮肤、心肌或肝 脏有瘀血点
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剖检病变
脾脏：肿大、易碎、暗红色至黑色*
淋巴结，尤其胃、肝、肾各部淋巴结肿大、出血
肺脏表面出血或有瘀血斑
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危害 非洲猪瘟对人不致病，不是人畜共患病。 猪感染后，发病率和病死率可高达100％， 常造成巨大经济损失和社会影响。
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流行病学 传染源 非洲猪瘟病毒感染的家猪、野猪和软蜱；病死猪的血 液、组织、分泌物和排泄物。 易感动物 家猪、欧亚野猪高度易感，无明显品种、日龄和性别 差异。成年非洲疣猪虽可感染，但临床症状不明显。 传播方式 主要通过直接接触传播，间接接触或软蜱叮咬也可传 播。
*买回家的猪肉如果暂不Байду номын сангаас用，最好冷冻保存（尤其在炎热的夏季），
避免猪肉腐败变质。
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1、最急性型 无症状突然死亡。 2、急性型 体温升高至42℃ 沉郁，厌食，耳、四肢、腹部皮肤 有出血点、发绀。 眼、鼻有黏液脓性分泌物，呕吐，便秘，粪便表面有 血液和黏液覆盖，或腹泻，粪便带血。 步态僵直，呼吸困难，病程延长则出现神经症状。 妊娠母猪在妊娠的任何阶段均可出现流产。 病死率高达100%。病程4～10天。
非洲猪瘟诊断与检测技术要点
非洲猪瘟检测与诊断技术要点中国农业科学院上海兽医研究所牵头编制2019年9月前言非洲猪瘟（African Swine Fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African Swine Fever Virus，ASFV）引起的猪的一种急性、热性、高度接触性传染病，发病率和死亡率可达100%。
世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。
1921年，ASF最初发现于肯尼亚，上世纪五、六十年代在非洲、欧洲、南美洲流行。
2018年8月初我国爆发非洲猪瘟首起疫情以来，该疫病已蔓延全国23个省，给我国生猪养殖业和国民经济带来巨大损失。
由于ASFV感染机制复杂，目前世界范围内至今尚无有效预防用非洲猪瘟疫苗，因此早期发现、精准检测是控制该病传播和发生的关键。
本文参考了OIE关于非洲猪瘟防控的文件、农业农村部发布相关文件和中国动物卫生与流行病学中心、中国动物疫病预防控制中心的相关技术手册，结合我们的研究成果，从非洲猪瘟早期发现、现场排查、精准检测三个方面的技术要点编写而成，主要面向从事非洲猪瘟现场排查和检测的一线防疫人员，提供了简明实用的相关操作技术与方法，为非洲猪瘟现场排查与检测等相关工作提供参考。
编者牵头团队：上海兽医研究所猪呼吸道传染病团队负责人：马志永参加人：魏建超等参加团队：哈尔滨兽医研究所猪烈性传染病创新团队负责人：仇华吉参加人：罗玉子等兰州兽医研究所外寄生虫与虫媒疫病团队负责人：刘志杰参加人：林密等兰牧药研究所中兽医与临床团队负责人：李建喜参加人：崔东安目录一、概述 (1)二、早期发现 (4)三、现场排查 (5)（一）准备工作 (6)1.人员准备 (6)2.车辆准备 (6)3.物品准备 (6)（二）进出养殖场要求 (7)1.抵达养殖场 (7)2.穿戴个人防护设备（在清洁区） (8)3.离场前准备 (8)4.离场后 (9)5.消毒剂的选择 (9)（三）临床诊断 (9)1.临床症状 (10)2.剖检病变 (11)3.鉴别诊断 (12)4.发现疑似病例的情况下应立即采取的行动 (13)（四）样品采集、包装与运输 (14)1.采样方法 (14)2.样品的记录、保存、包装和运送 (15)3.废弃物处理 (18)四、实验室诊断与确诊 (19)1.快速精准检测 (19)2.疫情确诊 (19)附件一：非洲猪瘟防治技术规范 (20)附件二：国家非洲猪瘟参考实验室、专业实验室和区域实验室名单 (24)一、概述非洲猪瘟病毒（ASFV）是一种有囊膜的DNA病毒，是非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员。
非洲猪瘟的监测与诊断技术
非洲猪瘟的监测与诊断技术非洲猪瘟（African Swine Fever, 简称ASF）是一种由非洲猪瘟病毒引起的高度传染性疾病，对猪的养殖业造成了巨大的经济损失。
为了及时监测和准确诊断非洲猪瘟，科学家们开发出了一系列的监测与诊断技术。
本文将介绍非洲猪瘟的监测与诊断技术，并探讨其在防控非洲猪瘟中的作用。
一、病毒检测技术1. PCR技术聚合酶链反应（PCR）是一种常用的病毒检测技术，它通过特异性引物和酶的催化作用，扩增样本中的病毒核酸。
PCR技术能够快速、准确地检测非洲猪瘟病毒的存在，且对病毒精确度高，检测时间短，是非洲猪瘟监测中的重要工具。
2. ELISA技术酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种常用的病毒抗体检测技术。
ELISA技术利用酶与病毒抗原或抗体结合的特异性反应，通过比色反应或荧光反应判断样品中是否存在非洲猪瘟病毒抗体。
ELISA技术具有简单、快速、灵敏度高的特点，在非洲猪瘟的早期监测和诊断中起到了重要的作用。
二、病理学检测技术1. 组织病理学检测组织病理学检测是通过对猪体组织进行病理学检查，确定是否存在非洲猪瘟的一种技术。
该技术可通过显微镜观察病变组织的形态学改变，如出血、水肿、坏死等，进一步确定非洲猪瘟的病情。
2. 免疫组织化学检测免疫组织化学检测是利用特异性抗体与组织中的抗原结合来检测非洲猪瘟病毒的存在。
该技术具有高度特异性和灵敏度，可以帮助鉴定非洲猪瘟的病毒类型和分布范围。
三、流行病学调查技术1. 临床症状观察通过对猪群的临床症状进行观察，可以初步判断是否存在非洲猪瘟的流行。
非洲猪瘟的临床症状包括发热、食欲减退、呕吐、腹泻、呼吸急促等。
准确观察和记录症状，能够帮助科学家对非洲猪瘟进行快速且准确的流行病学调查。
2. 血清学调查血清学调查通过对猪群的血清标本进行病毒抗体或病毒核酸的检测，了解猪群中非洲猪瘟的感染率和传播情况。
血清学调查是非洲猪瘟监测的重要手段之一，可以帮助科学家及时采取控制措施，防止病毒的扩散。
畜牧兽医专业《动物微生物学》PPT课件 非洲猪瘟病毒科
侵入细胞过程
• 在细胞核内转录、复制、核内装配 • 通过细胞裂解释放 • 腺病毒通过其纤突球部与敏感细胞膜上的特 异性受体结合后，即开始了感染过程 • 结合后的病毒，或依靠细胞的吞饮作用，或 直接侵入细胞
• 进入细胞浆内的病毒立即脱衣壳，五邻粒发 生解离，进而降低了衣壳的稳定性，其它六 邻粒及其相关蛋白也发生分离。 • 裸露的病毒核心体通过核膜上的空隙进入核 内，或释放出DNA进入核内，这个过程可在1 ～2个小时内完成。
减蛋综合症畸形蛋
• （2）人工感染1日龄雏鸡，到7日龄前后出现 精神萎顿和腹泻，并有少数幼雏鸡发生死亡
• 4、病毒培养 • （1）在鸭胚和鹅胚上复制的滴度高于鸡胚 • （2）能在鸭及鹅胚的肾细胞、肝细胞、成纤 维细胞上复制,并产生CPE（细胞肿胀、变圆 聚集成葡萄串状）。
• 5、生物特性 • （1）能凝集鸡及其他禽类的红细胞； （2）对热、酸和外界环境抵抗力较强。 • 6、诊断 • （1）病毒分离：病料采集和处理；鸭胚接种 • （2）病毒鉴定：血凝和血凝抑制试验。
• 2、腺病毒没有囊膜，核衣壳的直径为70～ 80nm，呈二十面体立体对称。 • 内为线状的双股DNA。 • DNA被包于蛋白外壳即衣壳内。 • 衣壳由252个壳粒组成，其中240个是六邻粒 构成二十面体的20个面以及棱的大部分。
• 3、纤突直径为2nm，长约10～31nm——随 腺病毒型而不同。 • 纤突顶端为一个4nm直径的球形物，这是病 毒感染细胞时结合于细胞受体的部分。 • 血凝素也在球部,可凝集大白鼠、恒河猴或禽 类红细胞，为型特异性抗原所在部位。
腺病毒科
一、分类
• 哺乳动物腺病毒属 • 禽类腺病毒属
二、一般特性
• • • • 各种动物的腺病毒形态基本相同 衣壳结构清晰 易在电子显微镜下仔细观察 在感染细胞核内的病毒粒子经常排列成结晶 状。 • 腺病毒的核酸和蛋白质又易分离提取，故是 目前动物病毒中在形态和化学结构上研究得 最为详细的病毒之一。
猪瘟病毒课件
三、猪繁殖与呼吸综合征(蓝耳病)
(porcine rndrome，PRRS)
• PRRS是由病毒引起的猪的一种繁殖障碍和呼吸系统的
传染病。
• 特征为厌食、发热，怀孕后期发生流产，产死胎和木
乃伊胎；幼龄仔猪发生呼吸系统疾病和大量死亡。 • 最早于1987年在美国中西部发现，随后在加拿大、德国、
• 病猪生长迟缓，发育不良，常有皮肤损害。
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慢性病猪耳部皮肤陈旧出血和坏死痂
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• 3.迟发性猪瘟
• 先天性HCV感染。 • 胚胎感染低毒HCV，如产下正常仔猪，则终生有
高水平的病毒血症，而不能产生对HCV的中和抗
体，这是典型的免疫耐受现象。
• 感染猪在出生后几个月可表现正常，随后发生轻
性别的猪均可感染。
• 传染源：病猪和带毒猪 • 传播方式：易感猪与病猪的直接接触
• 感染途径：口腔、鼻腔，间或通过结膜、生殖道黏
膜或皮肤擦伤感染。
• 本病常发地区，猪群有一定的免疫性，其发病率
和死亡率较低，在新疫区发病率和死亡率在90％
以上。
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临诊症状
• 1．急性型猪瘟
• 由HCV强毒引起，病初仅几头猪显示临诊症状。
液体的滞留，甚至从机体组织中吸收液体，引起病猪失 水、代谢性酸中毒，故发生腹泻和脱水。
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临诊症状
• 本病传播迅速，数日内可蔓延全群。
• 表现呆滞，行动缓慢，站立一旁，弓背怕冷，低头垂尾。
食欲减少，进而停食。体温升高至41℃，高热稽留。体温 上升的同时白细胞数减少。 • 病猪眼结膜发炎，两眼有多量黏液、脓性分泌物，眼睑浮肿，
严重时完全被封。
• 体温升高之初病猪便秘，随后腹泻，排出带有特殊恶臭的稀便。
非洲猪瘟的诊断要点及防控措施
1 临床症状非洲猪瘟有着短暂的2 ～ 9d 的自然感染潜伏期，最明显的临床症状时发病时体温骤高，最高可达41℃，并且持续时间较长，大约4d。
病猪在死亡前48h 会发生体温下降的症状。
其他症状表现为精神萎靡、食欲不振、不爱行动、咳嗽、耷耳，其中腹部、臀部、四肢、耳朵等多出部位出现紫红色血斑，同时伴随便血及粘液，连续呕吐等症状。
母猪还会伴随流产症状。
如果病发后2 ～ 4d 内持续高温，并食欲不振、体虚无力，呼吸脉搏等加快，伴随呼吸困难，之后发生降温，伴随粘液脓性结膜炎和呕吐等症状，则可初诊为非洲猪瘟。
取血样实验室检测，可发现白血球、淋巴球数量少50%，最低时可下降至40%，在体温高温段有明显的贫血症，之后病猪发生死亡，即可确诊为非洲猪瘟。
解剖病死猪，可见血管发生血栓或坏死症状，腹膜、胸膜、心膜等多处脏器膜发生黄色或血色充血症状，肾脏、肠胃、心脏发生水肿、包血及不同程度出血等症状。
2 诊断要点2.1 临床诊断临床诊断凭借不同类型非洲猪瘟的临床特征判断，可作为初诊的依据。
根据猪的临床表现进行分类治疗，并对病死猪进行解剖。
解剖后如果临床症状与非洲猪瘟一致，则可确诊为非洲猪瘟。
2.2 实验室诊断2.2.1 病毒分离诊断采集活体猪血及病死猪病灶器官在实验室进行病毒分离检测。
2.2.2 免疫电泳试验采集病猪的血清加入抗原中，血清出现白色线状或沉淀，则为非洲猪瘟。
2.2.3 白细胞吸附试验需要采集病猪血液或组织物置于白细胞中在37℃的环境下培养，如出现如玫瑰花状或桑椹体状则表明为非洲猪瘟。
2.2.4 酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附的A 值大于0.3 时，则表明为非洲猪瘟。
2.2.5 间接免疫荧光试验对病猪的血浆提取物在生长有Vero 细胞的玻璃片上进行对比，出现荧光团时表明测试血浆为非洲猪瘟。
3 有效的防控措施3.1 加强养殖管理鉴于非洲猪瘟传播途径较多，因此养殖人员要加强养殖管理，切断一切可能发生的传播途径。
进出养殖场的车辆、人员及其物品要进行彻底全面的清洁及消毒管理。
非洲猪瘟诊断及综合防控技术
非洲猪瘟诊断及综合防控技术非洲猪瘟是一种猪源性传染病，病原体为非洲猪瘟病毒。
该病在猪类中广泛散发，传播迅速，死亡率高，对养殖业造成了严重的经济损失。
为了及时发现和控制非洲猪瘟的传播，下面将介绍非洲猪瘟的诊断方法和综合防控技术。
非洲猪瘟的诊断方法主要包括临床症状观察、病理学检查、实验室检测等。
首先是临床症状观察，非洲猪瘟的患猪常表现为食欲不振、发热、咳嗽、呕吐、腹泻、四肢无力、倒地、抽搐等症状。
其次是病理学检查，通过对患猪尸体进行解剖和观察，可以发现一系列特征性的病理变化，如出血、水肿、淋巴瘤样结节等。
最后是实验室检测，目前常用的诊断方法有PCR检测、免疫荧光检测、ELISA检测等。
这些方法可以通过检测血液、组织、粪便等样本，来确定是否存在非洲猪瘟病毒的感染。
综合防控非洲猪瘟的技术主要包括灭鼠灭蚁、环境消毒、疫苗接种等。
首先是灭鼠灭蚁，因为非洲猪瘟病毒可以通过啮齿类动物和昆虫传播，所以要加强对耗子、苍蝇等害虫的防治。
其次是环境消毒，非洲猪瘟病毒可以在猪圈、运输车辆、饲料、水源等环境中存活较长时间，因此要定期对猪圈和相关设备进行彻底消毒，避免病毒传播。
最后是疫苗接种，科学、合理的疫苗接种是预防非洲猪瘟的关键措施。
目前已有多种非洲猪瘟疫苗可供选择，如灭活疫苗、减毒疫苗等，疫苗接种可以提高猪群的免疫力，减少病毒传播和致死率。
综合来说，非洲猪瘟的诊断和综合防控技术是预防和控制该病毒传播的有效手段。
通过及时诊断和科学防控，可以减少非洲猪瘟的传染风险，保护养殖业的可持续发展。
也需要养殖户加强自身的宣传教育和管理水平提升，形成合力，共同防控非洲猪瘟的蔓延。