串联质谱技术在儿童有机酸代谢疾病鉴别诊断中的应用
应用串联质谱筛查法诊断遗传代谢病8例分析
应用串联质谱筛查法诊断遗传代谢病8例分析王福顺;赵立明;王红芳;张立荣【摘要】@@ 遗传代谢病也称先天性代谢异常,包括氨基酸、有机酸、糖、脂肪、激素等多种代谢缺陷,系由于遗传性代谢途径缺陷,导致异常代谢物蓄积或生理必需物质的缺乏,从而出现一系列临床症状与体征[1].早期诊断存在一定困难,导致许多患儿不明原因死亡或漏诊误诊.近年来,随着新生儿筛查工作不断完善,特别是串联质谱分析在临床中的应用,使遗传代谢病早发现,早诊断,早干预成为可能.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2011(032)010【总页数】2页(P1224-1225)【关键词】代谢综合征X;串联质谱法;诊断【作者】王福顺;赵立明;王红芳;张立荣【作者单位】河北省迁西县人民医院儿科,河北,迁西,064300;河北省迁西县人民医院儿科,河北,迁西,064300;河北省迁西县人民医院儿科,河北,迁西,064300;河北省迁西县人民医院儿科,河北,迁西,064300【正文语种】中文【中图分类】R589遗传代谢病也称先天性代谢异常，包括氨基酸、有机酸、糖、脂肪、激素等多种代谢缺陷，系由于遗传性代谢途径缺陷，导致异常代谢物蓄积或生理必需物质的缺乏，从而出现一系列临床症状与体征［1］。
早期诊断存在一定困难，导致许多患儿不明原因死亡或漏诊误诊。
近年来，随着新生儿筛查工作不断完善，特别是串联质谱分析在临床中的应用，使遗传代谢病早发现，早诊断，早干预成为可能。
我县地处冀东北部山区，长期处于交通闭塞、经济落后状态，人口流动性差，近亲、区域内小范围婚姻繁衍后代现象较为严重，使得遗传代谢性疾病发病率高于平原地区。
本文拟通过近年来在我院就诊过的遗传代谢病8例阳性患者进行总结，以期为基层儿科医生在遗传代谢病诊治方面提供参考。
1.1 一般资料：2008年10月至今在我院就诊并诊断为遗传代谢性疾病患儿8例，男性6例，女性2例。
首次诊断时间最早为生后5d，最迟3岁。
串联质谱联合气相质谱在新生儿重症监护病房遗传代谢病筛查诊断中的应用价值
串联质谱联合气相质谱在新生儿重症监护病房遗传代谢病筛查诊断中的应用价值闫磊;张万巧;张玉佩;陈雨晗;梅亚波【期刊名称】《发育医学电子杂志》【年(卷),期】2024(12)1【摘要】目的探讨串联质谱(tandem mass spectrometry,MS/MS)联合气相质谱(gas phase mass spectrometry,GC-MS)在新生儿重症监护病房(neonatal intensive care unit,NICU)遗传代谢病(inherited metabolic disorders,IMD)筛查诊断中的应用价值。
方法选取2020年1月至2021年12月解放军总医院第七医学中心NICU收治的3682例新生儿(其中足月儿1794例,早产儿1888例)为观察对象,采集干血斑行MS/MS遗传代谢病筛查。
初次筛查阳性者重新采样复查并行尿液GC-MS检测。
根据患儿代谢谱结合临床表现进行生化诊断。
统计学方法采用χ^(2)检验。
结果3682例NICU患儿中初筛阳性率为5.65%(208/3682),复筛阳性率为1.33%(49/3682),共生化诊断IMD患儿14例,总检出率为0.38%(14/3682),其中足月儿检出率高于早产儿[0.67%(12/1794)与0.11%(2/1888),χ^(2)=7.697,P=0.006]。
14例IMD中,有机酸代谢异常11例,包括甲基丙二酸血症8例(57.1%)、戊二酸血症2例(14.3%)、3-甲基戊二烯酸尿症1例(7.1%);氨基酸代谢异常3例,包括尿素循环障碍2例(14.3%)、高苯丙氨酸血症1例(7.1%)。
MS/MS初筛假阳性率为5.29%(194/3668),阳性预测值为6.73%(14/208)。
召回复查后,二次MS/MS复测,假阳性率为0.95%(35/3668),阳性预测值为28.57%(14/49)。
在各类MS/MS指标异常中,丙酰肉碱及其比值增高、戊二酰肉碱增高的阳性预测值高于氨基酸类代谢异常。
串联质谱技术在新生儿疾病筛查中的应用分析
串联质谱技术在新生儿疾病筛查中的应用分析摘要：旨在探究串联质谱技术在新生儿遗传代谢疾病中的应用价值。
方法收集我院实验室2015年1月-2016年10月期间接收的56330例新生儿样本作为本次研究对象，分别采取串联质谱技术进行遗传代谢性疾病的筛查工作，并结合随访分析新生儿的综合情况。
结果通过串联质谱技术的筛查得出，本次研究对象中有572例阳性新生儿，其中包括38例确诊为新生儿遗传代谢疾病的患儿，确诊率为6.64%，11例有机酸代谢异常（4例甲基丙二酸血症，5例3-甲基巴豆酰辅酶羧化酶缺乏症，1例异戊酸血症、1例2-甲基丁酰甘氨酸尿症）；20例氨基酸代谢异常（11例苯丙酮尿症、2例同型半胱氨酸缺乏症、1例精氨酸血症、5例高甲硫氨酸血症、1例希特林缺乏症）；7例脂肪酸代谢异常（1例极链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、3例短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症、3例原发性肉碱吸收障碍），并结合5-10个月的随访治疗，诊治率高达100%。
结论采用串联质谱技术干预新生儿遗传代谢疾病筛查临床效果显著，使用便捷，敏感度和准确率高，获得了患者家属的一致好评，值得临床的推广和应用。
关键词：串联质谱技术；新生儿疾病；遗传代谢疾病；筛查；应用分析质谱是指根据提供样品离子的质量电荷比进行专业定性和定量分析的一种研究技术，而串联质谱指将2个及其以上的质谱信号串联在一起产生的多级质谱形式，临床主要应用于对新生儿遗传代谢疾病筛查的主要技术手段，随着医疗水平的不断发展，串联质谱技术能够在几分钟之内准确有效的检测出氨基酸代谢异常、脂肪酸代谢及有机酸代谢异常等40多种遗传代谢疾病，对于早期发现预防和及时治疗新生儿遗传代谢疾病有十分重要的临床意义。
本研究在使用串联质谱技术进行干预新生儿遗传代谢疾病的筛查临床效果显著，现报道如下。
1资料与方法1.1一般资料收集泰安市妇幼保健院2015年1月-2016年10月期间接收的56330例新生儿样本作为本次研究对象，其中男30437例，女25893例，出生时间为70h-8d，平均4.8±2.7d，包括32036例体重正常儿，694例巨大儿，571例低重儿；22193例足月儿，492例早产儿，344例过期儿，所有新生儿均无明显其他疾病或外在缺陷。
串联质谱技术在新生儿疾病筛查中的价值分析
串联质谱技术在新生儿疾病筛查中的价值分析【摘要】目的：分析串联质谱技术在新生儿疾病筛查中的价值。
方法：该研究总共纳入135例实验对象，均是2021.08月至2023.08月在医院进行新生儿疾病筛查的新生儿，所有入选对象均实施串联质谱技术检查，观察检查结果。
结果：135例新生儿实施串联质谱技术检查后，初筛阳性率为3.70%（5例），阳性召回率为3.70%（5例），最终确诊阳性率为2.22%（3例），其中甲基丙二酸血症1例，苯丙酮尿症1例，原发性肉碱缺乏症1例。
结论：串联质谱技术用于新生儿疾病筛查的效果良好，有利于尽早筛查新生儿遗传代谢病，临床可进一步推广应用。
【关键词】新生儿疾病筛查；串联质谱技术；应用价值随着社会经济的快速发展、生活质量水平的提升、医疗保健意识的增强，人口出生质量引起人民群众的广泛关注和重视，推动新生儿筛查工作的发展。
遗传代谢性疾病是新生儿筛查的主要疾病，通常是由于基因突变致机体的生化反应及代谢功能出现异常现象，已成为影响出生人口质量的重要原因，故需重视新生儿遗传代谢性疾病的筛查工作[1]。
鉴于此，该研究以135例实施新生儿疾病筛查的新生儿为实验对象，探讨串联质谱技术的具体应用及医学价值，具体报告如下。
1资料与方法1.1一般资料该研究将实施新生儿疾病筛查的新生儿作为实验对象，研究时段在2021.08-2023.08，总共有135例新生儿入选该研究，其中男70例、女65例；日龄区间范围在2天-8天，平均（5.12±1.34）天；体重2.06kg~5.12kg，平均（3.45±0.23）kg；妊娠数量：单胎125例，多胎10例；新生儿类型：早产28例，足月分娩107例。
新生儿家属对拟采取的研究方案知情并签署同意书。
135例新生儿均实施串联质谱技术检查，详细方法为：（1）样本采集：在新生儿连续喂养3天后方可进行检查，利用新生儿筛查专用滤纸片放在足底接近足跟的位置，沿着内侧部位采集血液，注意采集的血斑数量为3个，血斑直径应＞8mm。
串联质谱的原理及应用
串联质谱的原理及应用一、原理概述串联质谱（Tandem Mass Spectrometry）是一种高灵敏度、高分辨率的质谱技术，被广泛应用于化学、生物学、医学等领域。
其基本原理是利用离子源将样品离子化，然后在电场或磁场的作用下，将离子进行分离和检测。
串联质谱技术的主要优势在于其高选择性、高灵敏度、高分辨率以及快速分析能力。
二、技术原理串联质谱技术的主要原理是，通过第一级质谱仪选择性地分离出某种特定质量的离子，然后将其传递到第二级质谱仪进行进一步的分离和检测。
第二级质谱仪通常具有更高的分辨率和更精细的分离能力，可以提供关于离子结构的更多信息。
在串联质谱中，两个或多个质量分析器串联在一起，使得离子可以在不同的质量分析器之间进行多次分离和检测，从而获得更丰富的信息。
三、串联质谱的应用串联质谱的应用范围非常广泛，包括但不限于以下几个方面：1. 新生儿代谢病筛查：串联质谱技术已被广泛应用于新生儿代谢病筛查中，通过对新生儿血液或尿液中的代谢产物进行分析，能够早期发现并诊断出多种遗传代谢病，如氨基酸代谢病、有机酸代谢病等。
2. 药物代谢研究：串联质谱技术在药物代谢研究中也有重要应用，通过对药物及其代谢产物的分析，可以了解药物的吸收、分布、代谢和排泄等过程，为新药研发提供重要信息。
3. 生物标志物检测：串联质谱技术可以用于检测生物体中的生物标志物，如肿瘤标志物、心血管疾病标志物等，对于疾病预防、诊断和治疗具有重要意义。
4. 蛋白质组学研究：串联质谱技术在蛋白质组学研究中也有重要应用，通过对蛋白质的鉴定和定量分析，可以了解蛋白质的结构、功能和相互作用等，为生物医学研究提供重要信息。
四、串联质谱在新生儿代谢病筛查中的实际操作在新生儿代谢病筛查中，串联质谱技术通常被用来检测新生儿血液中的氨基酸、有机酸和酰基肉碱等代谢产物。
通过对这些代谢产物的定量分析，可以早期发现并诊断出多种遗传代谢病，如氨基酸代谢病、有机酸代谢病等。
新生儿甲基丙二酸血症筛查中串联质谱技术研究
新生儿甲基丙二酸血症筛查中串联质谱技术研究【摘要】目的：探讨串联质谱技术进行新生儿甲基丙二酸血症的筛查价值。
方法：选取2017年1月～2018年12月我市具有助产资质的医疗机构所分娩的117595例进行串联质谱检测的新生儿作为研究对象，对其中确诊的甲基丙二酸血症患儿资料进行分析。
结果：本研究117595例新生儿进行串联质谱技术筛查后，共确诊甲基丙二酸血症23例，占比0.19‰，患病率为1/5113。
对确诊的患儿临床一般资料进行统计分析，结果显示性别、采血时间均无统计学差异（P＞0.05），而在胎龄、出生体重、出生季节等因素上差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论：临床利用串联质谱技术对新生儿甲基丙二酸血症的诊断具有较高的筛查价值。
【关键词】新生儿；甲基丙二酸血症；串联质谱技术引言甲基丙二酸血症（methylmalonic aciduria，MMA）是常染色体隐性遗传代谢病，常见于新生儿或婴幼儿，青少年及成人少见，因其临床表现及相关辅助检查缺乏特异性，极易被误诊为病毒性脑炎、线粒体脑肌病、脊髓亚急性联合变性等。
MMA 是一种具有特殊临床及影像学特点的代谢性疾病。
及时给予足量的甲钴胺治疗，可不同程度减轻或缓解患者的症状。
本病如及时诊治，预后较好。
新生儿甲基丙二酸血症属于新生儿代谢性常见疾病，由于发病早期缺乏显著的临床特异性表现，因此极易造成漏诊或误诊，对新生儿出生人口质量、家庭和谐以及社会负担都造成极为严重的影响和制约。
本文对此加强了研究分析。
1 资料与方法1.1 一般资料选取2017年1月～2018年12月间我市具有助产资质的医疗机构所分娩的117595例进行串联质谱检测的新生儿作为研究对象，其中男性61855例，占比52.6%；女性55740，占比47.4%。
1.2 方法标本采集与制作：所有研究对象均在出生72h后进行充分哺乳后，采集3滴足跟血，将血滴滴在SS903滤纸形成3个直径大于8mm的血斑，自然干燥后放入标记的封口袋中并置于4℃冰箱中保存待检。
12 岛津串联质谱技术在新生儿筛查中的应用
1.2 岛津串联质谱技术在新生儿筛查中的应用摘要： 新生儿疾病筛查是母婴保健技术的重要内容之一。
本文介绍新生儿筛查的测试内容，衍生法和非衍生法样品前处理流程， 液相色谱串联质谱检测原理。
并介绍了岛津液相色谱串 联质谱进行新生儿筛查的检测结果及数据处理流程。
关键词：新生儿筛查 液相色谱串联质谱 遗传代谢疾病筛查新生儿筛查是指在新生儿群体中，用快速、敏感的实验室方法对新生儿的遗传代谢病、 先天性内分泌异常以及某些危害严重的遗传性疾病进行筛查的总称， 其目的是对那些患病的 新生儿在临床症状尚未表现之前或表现轻微时通过筛查，得以早期诊断、早期治疗，防止机 体组织器官发生不可逆的损伤，避免患儿发生智力低下、严重的疾病或死亡。
新生儿筛查一常见的新生儿筛查疾病涉及氨基酸代谢病、有机酸代谢病、内分泌疾病、血红素疾病、 脂肪酸代谢病等几大类。
目前氨基酸代谢病、有机酸代谢病、脂肪酸代谢病等可使用 LC-MS/MS 方法进行检测。
LC-MS/MS 法整体分析过程极为简便并可实现自动化，可在一 次分析中检测多种目标组分，为多种不同类型先天性疾病的诊断提供依据。
在新生儿筛查中 LC-MS/MS 法主要应用于血液中氨基酸、 酰基肉碱两类化合物的检测。
进行新生儿遗传代谢病筛查的血片经过相应的前处理后置于 96 孔板中直接在液相色谱串联 质谱仪中分析得到检测结果。
基于不同的前处理方法，针对氨基酸、酰肉碱的新生儿筛查检Dr 测定方法检测目标 氨基酸 酰基肉碱 测有衍生 LC-MS/MS 法和非衍生 LC-MS/MS 法。
目前使用 LCMSMS 技术主要检测的氨基酸及酰基肉碱，可分别作为氨基酸代谢异常、脂肪酸代谢异常和有机酸代谢异常等疾病的判断指征。
表 1. LCMSMS 的检测目标及对应代谢疾病的列表 对应代谢疾病类型 氨基酸代谢异常 脂肪酸代谢异常 有机酸代谢异常表 2 及表 3 总结了市售常见新生儿筛查用试剂盒或标准品公司提供的常见氨基酸及酰基 肉碱，还可根据实际检测需求添加表 2、表 3 以外其它相关检测项目，例如半胱氨酸等。
质谱分析在遗传代谢性疾病临床检验诊断中的应用
质谱分析在遗传代谢性疾病临床检验诊断中的应用张春花【摘要】质谱分析技术已被公认为是代谢性疾病化学诊断的有用手段。
气相色谱质谱联用法可以对130余种代谢疾病进行筛查和化学诊断，串联质谱法可同时筛查30余种脂肪酸代谢异常疾患和部分氨基酸代谢异常，因而被世界各国广泛用于新生儿先天性代谢疾病的筛查。
应用质谱分析技术分析诊断遗传代谢疾病的实验室逐年递增，但其实验操作较为繁杂。
临床实验室国际标准化管理是保证质谱分析技术为临床检验服务的前提。
网络化实验室体系可以简化实验室的操作，保证良好的实验室管理。
%For the clinical diagnosis of inborn error of metabolism, the technique of mass spectrometry is considered to be an important tool.Gas chromatography/mass spectrometry can be used in the screening and diagnosis of more than 130 inborn errors of metabolism.Tandem mass spectrometery can screen about 30 fatty acid disorders and amino acid disorders, so it is applied into neonatal screening around the world.The number of laboratories using mass spectrometry for the diagnosis of inborn error of metabolism is increasing, but the organization of mass spectrometry analysis is very difficult.Internationalization management is the precondition for the quality control of inborn error of metabolism determination in clinic.The on-line mass spectrometry network system can overcome difficult procedure and keep high quality for laboratory management.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】6页(P410-415)【关键词】质谱;代谢性疾病;气相色谱质谱联用;串联质谱【作者】张春花【作者单位】日本国际松本生命科学研究所，日本金泽 921-8105【正文语种】中文【中图分类】R446.1自1902年英国Garrod教授发现尿黑酸尿症以来，先天性代谢性疾病逐渐被认知。
梅州市新生儿遗传代谢病串联质谱筛查及随访结果分析
梅州市新生儿遗传代谢病串联质谱筛查及随访结果分析作者：刘小瑜，吴维，石玲来源：《右江医学》2021年第11期【摘要】目的研究串聯质谱技术在梅州地区新生儿遗传代谢病筛查的应用情况，初步掌握本地区新生儿遗传代谢病发病率及病种分布情况，为建立该地区新生儿遗传代谢病串联质谱筛查体系和临床综合干预模式提供参考。
方法对2019年4月～2021年7月在梅州市出生的47 145例新生儿应用串联质谱技术进行遗传代谢病筛查，对可疑阳性患儿召回复查，辅助生化检查、家系基因检测，明确诊断，随访治疗。
结果共筛查47 145例新生儿，初筛阳性1489例（3.16%）。
确诊患儿11例，总发病率1/4286。
筛查出7种遗传代谢病，分别是高苯丙氨酸血症4例，原发性肉碱缺乏症2例，母源性肉碱缺乏症、甲基丙二酸血症、丙酸血症、异丁酰辅酶A脱氢酶缺乏症、希特林蛋白缺乏症各1例。
结论通过串联质谱技术进行新生儿遗传代谢病筛查、及早诊疗可有效保障患儿健康，是预防出生缺陷的重要手段，对提高人口质量意义重大。
【关键词】新生儿疾病筛查;串联质谱;遗传代谢病中图分类号：R722文献标志码：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.11.006Analysis of tandem mass spectrometry screening and follow-up results ofneonatal genetic metabolic disorders in MeizhouLIU Xiaoyua， WU Weib， SHI Lingb（a.Child Healthcare Department， b. Medical Heredity Center， Maternal and Child Health Care and Family PlanningService Center of Meizhou—Meizhou Women' s and Children's Hospital， Meizhou 514021，Guangdong， China）【Abstract】ObjectiveTo study the application of tandem mass spectrometry for the screening of neonatal genetic metabolic disorders in Meizhou， and to gain a preliminary understanding of the incidence and distribution of genetic metabolic disorders in neonates in the region， so as to provide a reference for the establishment of a tandem mass spectrometry screening system and a comprehensive clinical intervention model for neonatal genetic metabolic diseases in the region. MethodsTandem mass spectrometry was applied to screen 47 145 newborns born in Meizhou City from April 2019 to July 2021 for genetic metabolic diseases， and children with suspected positive cases were recalled for review， adjuvant biochemical tests and family genetic tests were carried out to clarify the diagnosis and follow up treatment. ResultsA total of 47 145 newborns were screened and 1489（3.16%） were initially screened positive. There were 11 confirmed cases， with a total incidence of 1/4286. 7 genetic metabolic disorders were screened： hyperphenylalaninemia （4 cases），primary carnitine deficiency （2 cases ）， maternal carnitine deficiency（1 case），methylmalonic acidemia（1 case）， propionic acidemia （1 case）， isobutyryl coenzyme A dehydrogenase deficiency （1 case）， and citrin deficiency （1 case）. ConclusionTandem mass spectrometry for the screening of neonatal genetic metabolic disorders and early diagnosis and treatment can effectively protect the health of patients. It is an important means of preventing birth defects， and is of great significance for improving the quality of population.【Key words】newborn screening; tandem mass spectrometry; inherited metabolic diseases遗传代谢病（inherited metabolic diseases，IMD）是因遗传基因突变导致体内生化物质在合成、代谢、转运和储存等方面出现各种异常产生的一系列疾病，包括氨基酸、有机酸、脂肪酸、激素等代谢混乱。
串联质谱遗传代谢病筛查意义及诊断价值 福州
疾病
GA-I IVA
BKT MCC HMG
有机酸血症检测的相应参数
串联质谱检测 异常参数
C5DC C5 C5/C2
C5-OH C5:1
C5-OH C5-OH
气相质谱检测 异常参数
戊二酸 异戊酰甘氨酸
酮体
3-甲基巴豆酰甘氨酸 3-羟-3-甲基戊二酸
GA：戊二酸血症；IVA：异戊酸血症；BKT：B-酮硫解酶缺乏
串联质谱（MSMS）技术
• 串联质谱（MSMS）新技术扩大筛查疾病谱 • 干血滤纸片一滴血检测氨基酸谱和酰基肉碱谱，进行40
余种遗传代谢病的筛查 • 2002年新华医院在国内建立串联质谱技术平台及协作网 • 传统疾病诊断方法：
一滴血片，一种试剂，一次试验，一项参数，一种疾病 • 串联质谱遗传代谢病筛查
• 干滤纸血片：串联质谱(MS/MS)分析(IEM筛查诊断)，17OHP • 尿液或尿片：气相色谱质谱(GC/MS)分析，尿酮体等 • 影象学检查：头颅CT、MRI，肝肾B超、骨骼X线片 • 家系DNA标本：基因检测和酶活性测定，确诊 对于怀疑遗传代谢病濒临死亡的婴儿 ：
• 有条件留取皮肤，肝组织、尸体解剖以备酶学诊断
有机酸血症检测的相应参数
疾病 MMA PA
串联质谱检测
异常参数
C3 C3/C0
C3/C2
C3 C3/C0 C3/C2
气相质谱检测
异常参数
甲基丙二酸 3-羟基丙酸
甲基枸橼酸
3-羟基丙酸 甲基枸橼酸
MCD
C5-OH C3
甲基巴豆酰甘氨酸 甲基枸橼酸
MMA：甲基丙二酸血症；PA：丙酸血症；MCD：多种辅酶A羧化酶缺乏
(Thr)(继发肝损），Arg增高,半乳糖血症 尿GC/MS分析：大量4-羟基苯丙酮酸、 4-羟基苯乳酸等排出，半
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
串联质谱技术在儿童有机酸代谢疾病鉴别诊断中的应用摘要】目的探讨串联质谱技术在儿童有机酸代谢疾病鉴别诊断中的应用。
方法对1200例遗传性代谢疾病高危儿童的干血滤纸片进行串联质谱分析比较。
结果确诊患有有机酸血症的儿童患者有64例（占5.3%），其中甲基丙二酸尿症（MMA）26例，丙酸血症（PA）11例，生物素酶缺乏症5例，全羧化酶合成酶缺乏症10例；3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症（MCC）2例，3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A裂解酶缺乏症（HMG）2例，β-酮硫解酶缺乏症（BKT）3例，异戊酸血症（IVA）1例，戊二酸血症（）GA-I型3例，戊二酸血症GA-II型1例。
结论串联质谱技术在诊断儿童有机酸代谢疾病、早期干预与预防遗传性代谢疾病的发生具有重要的作用。
【关键词】串联质谱有机酸酰基肉碱鉴别诊断Application of Tandem Mass Spectrometry in Organic Acid Metabolism in Children with Differential Diagnosis of Diseases【Abstract】Obbjective: Discussion on Application of tandem mass spectrometry in organic acid metabolism in children with differential diagnosis of diseases. Methods: Tandem mass spectrometry was used for comparative analysis in dry blood filter paper 1200 cases of hereditary metabolic disease in high-risk children. Results: Diagnosed with organic acidemia children patients 64 cases (5.3%), wherein the methylmalonic aciduria (MMA) in 26 cases, propionic acidemia (PA) in 11 cases, biotinidase deficiency in 5 cases, holocarboxylase synthetase deficiency in 10 cases; 3- tiglyl coenzyme A carboxylase deficiency disease (MCC) in 2 cases, 3- hydroxy -3- methyl amyl two acyl coenzyme A lyase deficiency (HMG) in 2 cases, beta ketothiolase deficiency (BKT) in 3 cases, isovaleric acidemia (IVA) in 1 cases, glutaric acidemia (GA-I) in 3 cases, 1 cases of glutaric acidemia type GA-II.Conclusion: Tandem mass spectrometry technology plays an important role in diagnosisof children's organic acid metabolism disease, early intervention and prevention of inherited metabolic diseases.【keywords】]Tandem mass spectrometry organic acid acyl carnitine differential diagnosis 串联质谱技术（tandem mass spectrometry，MS/MS）是一种高效、快速和准确检测物质含量的技术。
它在医学领域方面已经被广泛应用，主要用于新生儿有机酸血症的鉴别与诊断中。
串联质谱技术原理是对干血滤纸片进行检测分析不同氨基酸、有机酸、酰基肉碱和脂肪酸的水平来判断代谢疾病[1]。
本文主要对近三年来我院确诊为有机酸血症的64例儿童病例进行串联质谱分析，研究串联质谱技术在儿童有机酸代谢疾病鉴别诊断中的应用，为更好地预防与治疗遗传性代谢疾病提供理论依据和技术支撑。
1 对象与方法1.1 对象：来自全国的1200例疑似患有遗传性代谢疾病的儿童病例。
这些儿童患者的年龄在0周岁到16周岁不等，其中，男性患儿456例，女性患儿744例，对照组为1600例健康儿童。
在这些儿童中，男女比例57/93，平均年龄为4.2周岁。
从儿童患者的手指或者静脉取血制成干血滤纸片之后送检。
1.2 方法：使用串联质谱技术对干血滤纸片中的氨基酸和酰基肉碱进行分析参考文献报道的方法，将干血滤纸片通过含酰基肉碱和氨基酸内标的甲醇萃取，盐酸正丁醇衍生之后，可以用于上样检测。
用于质控检测的样品来自美国疾病控制和预防中心（CDC）新生儿疾病筛查的质控部门所提供的酰基肉碱串联质谱分析的血滤纸片。
1.3 统计学处理：使用SPSS13.0软件进行数据处理，对不同类型的有机酸血症分析其经过串联质谱技术检测所呈现的参数差异。
2 结果2.1 串联质谱检测结果共确诊64例有机酸血症(5.3%),其中男女比例29/35，其中有26例是甲基丙二酸尿症（MMA），有11例是丙酸血症（PA），5例生物素酶缺乏症和10例全羧化酶合成酶缺乏症；3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症（MCC）2例，3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A裂解酶缺乏症（HMG）2例，β-酮硫解酶缺乏症（BKT）3例，异戊酸血症（IVA）1例，戊二酸血症GA-I型3例，戊二酸血症GA-II型1例。
2.2 对全羧化酶合成酶缺乏症和生物素酶缺乏症、MMA、PA的患者血样进行串联质谱分析的结果比较见表1。
患有以上疾病的儿童比健康儿童的丙酰肉碱（C3）浓度的上限值（4.0μmol/L）还要高。
C3浓度PA患儿比MMA患儿的均值高，差异具有统计学意义（t=3.812，P<0.05），比较C3/C0和C3/C2比值，两者的差异没有统计学意义，PA患儿同时表现为甘氨酸升高，MMA患儿甘氨酸水平无明显变化，两组数据比较差异具有统计学意义（t =8.182，P<0.001）。
3-羟基-异戊酰肉碱（C5-OH）在生物素酶缺乏症和全羧化酶合成酶缺乏症的患儿中浓度升高表现明显，其C3水平比PA患儿要低（t分别为2.413和2.537，P<0.05），与MMA患儿的差异比较没有统计学意义。
另外C3/C0和C3/C2的比值低于MMA 患儿与PA患儿，差异具有统计学意义。
表1 PA、MMA、生物素酶缺乏症和全羧化酶合成酶缺乏症患儿串联质谱检测结果比较（x-±s,μmol/L）病种 n C3 C3/C0 C3/C2 C5-OH Gly正常上限值 5.0 0.3 0.4 0.6 410.0PA 11 30.7±21.0 1.2±0.6 2.0±0.7 0.5±0.3 601.0±180.5MMA 26 12.5±5.6 0.9±0.7 1.4±1.0 0.3±0.2 243.3±102.2生物素酶缺乏症 5 9.0±3.9 0.3±0.2 0.4±0.2 4.2±3.2 206.8±92.1全羧化酶合成酶缺乏症 10 9.4±7.1 0.6±0.4 0.6±0.2 11.7±3.8 288.9±39.53 讨论有机酸血症属于遗传性代谢疾病，由于一般的生化检查和临床表现结果相似，很难对其进行鉴别诊断。
串联质谱技术可以根据有机酸血症患儿的干血滤纸片中检测到不同的有机酸和多种酰基肉碱的水平以及多种酰基辅酶A的浓度来对有机酸血症有效地判断和鉴别。
对于酰基肉碱谱只有C3水平升高的患儿，第一步要分析C3/C0或C3/C2比值是否有升高然后再确定甘氨酸是否有升高，如果伴有高甘氨酸水平则可能是PA，如果没有甘氨酸水平升高则可能是MMA[2]。
而MMA患儿的甲基丙二酰肉碱没有升高可能是跟该类型的酰基肉碱不容易离子化这一特点有关[3]。
目前有报道称可以对血浆中的甲基丙二酸水平直接通过改变方法用串联质谱进行检测诊断MMA。
目前还有相关用串联质谱技术对孕妇羊水进行MMA检测来判断产前胎儿是否患病。
串联质谱图也显示了C3升高，所以在C3的绝对值不高时，但是C3/C0或C3/C2比值升高的时候，必须结合串联质谱图来诊断MMA。
那些C3与C5-OH同时升高的患儿可以判断为多种羧化酶缺乏症，但无法分辨是全羧化酶合成酶缺乏症还是生物素酶缺乏症，要通过测定生物素酶活性来进行鉴别。
综上所述，可以使用串联质谱技术对干血滤纸片的氨基酸和酰基肉碱水平进行检测分析，加上各种酰基肉碱的比值情况能够对PA、MMA、BKT、IVA、GA-I和GA-II进行诊断，同时结合尿GC-MS有机酸分析可以进一步对HMG、MCC、生物素酶缺乏症和全羧化酶合成酶缺乏症进行鉴别诊断。
参考文献[1] Sumner LW，Mendes P，Dixon RA.Plant metabolomics: large-scale phytochemistry in the functional genomics era. Phytochemistry 2003，62（6）:817-836.[2] Villas-Boas SG， Mas S， Akesson M， Smedsgaard J， Nielsen J.Mass spectrometry in metabolome analysis. Mass Spectrom Rev 2010， 24（5）:613–646.[3] Halket JM，Waterman D，Przyborowska AM， Patel RK，Fraser PD，Bramley PM.Chemical derivatization and mass spectral libraries in metabolic profiling by GC/MS and LC/MS/MS. J Exp Bot 2011， 56（410）:219–243.。