常见实验动物疾病及控制.
No4第四章实验动物微生物控制
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第四章 实验动物微生物及寄生虫控制
Zhang Bing
4、悉生动物及应用
又称已知菌动物（Animal with Bacteric Flora ）
特点 ：悉生动物和无菌动物一样，实验结果排除了动 物体内不明确的微生物对实验结果的干扰 用途
单一微生物与机体的互相关系
观察多种微生物之间及其与机体之间的互相关系和菌群 失调现象
动物饲养和实验设施要符合最基本的要求
动物仅供作教学、或预备实验时使用。
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第四章 实验动物微生物及寄生虫控制
Zhang Bing
（二）清洁级动物(clean animal CL
除普通动物应排除的病原体外，不携带对动物危害大
和对科学研究干扰大的病原。
如：清洁级小鼠 排除8种细菌、5种病毒、7种寄生虫; 清洁级大鼠
悉生动物:(gnotobiotic animal GN)
在无菌动物中人为地植入已知的一种或数种微生 物的动物被称为悉生动物。
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第四章 实验动物微生物及寄生虫控制
VET实验动物疾病
⏹实验动物疾病⏹参考资料⏹实验动物医学(美)J.G.福克斯等编农业出版社1991⏹实验动物病毒性疾病军事医学科学院实验动物中心主编中国农业出版社1992⏹啮齿类实验动物疾病学陈德威主编北京农业大学出版社1993⏹实验动物学何诚主编中国农业大学出版社⏹参考资料⏹Handbook of Laboratory Animal Bacteriology / by Axel Kornerup Hansen. CRC Press, c2000.⏹Laboratory animal medicine / edited by James G. Fox, Bennett J. Cohen, Franklin M. Loew. Academic Press,c1984.⏹Parasites of laboratory animals [by] Robert J. Flynn. Iowa State University Press [1973]⏹Laboratory animal medicine :principles and procedures / Margi Sirois. Elsevier Mosby, 2005.⏹第一章绪论⏹第一节实验动物等级⏹第二节实验动物疾病的危害性⏹第三节实验动物的健康观察⏹第四节实验动物的卫生防疫制度⏹第一节实验动物等级⏹1988年10月《实验动物管理条例》第12条⏹1994年颁布的《实验动物微生物学寄生虫学等级及监测国家标准》（GB 14922-94）规定：普通动物清洁动物无特定病原体（SPF）动物无菌动物⏹2001年版国家标准对实验动物等级的设定：⏹实验小鼠和大鼠的微生物学等级：清洁级SPF级无菌级⏹豚鼠、地鼠和兔仍保留四级⏹犬和猴：普通级和SPF级。
⏹普通动物指不携带主要人兽共患病病原和动物烈性传染病病原的动物。
⏹清洁动物指除普通级动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原的动物。
五种实验动物管理过程中常见的生物危险因素
五种实验动物管理过程中常见的生物危险因素实验动物管理过程中常见的生物危险因素主要包括以下五种：1.疾病传播：实验动物室内环境相对封闭，一旦有病原体传播，将对试验动物的健康造成威胁。
常见的传染病包括细菌感染、病毒感染和寄生虫感染等。
例如，细菌性感染如巴氏杆菌感染、沙门氏菌感染等，可导致动物发热、呕吐、腹泻等；病毒感染如大鼠传染性肝炎病毒、白血病病毒等，可引起免疫系统受损，导致动物疾病甚至死亡。
2.动物伤害：实验动物可能会出现咬伤、爪划伤等情况，对人和其他动物都存在风险。
例如，大鼠可能会为争夺食物、领地或性伴侣而发生攻击行为，导致人被咬伤；而猴子有时可能会因压力、恐惧等原因产生攻击行为，造成人身伤害。
3.过敏反应：实验动物散发的尘螨、皮屑、尿液、排泄物等可能引发过敏反应。
对于某些过敏体质的人而言，与实验动物接触可能导致哮喘、鼻塞、皮肤瘙痒等过敏症状。
4.动物过度繁殖：实验动物繁殖能力强，若繁殖得不到控制，可能会引起过多动物的出现，增加实验动物室管理的困难程度，甚至过度繁殖还可能导致实验动物的生活环境不足，产生压力、疾病和疾病的传播。
5.动物脱逃：实验动物管理中，动物的脱逃是一个比较常见的情况。
若实验动物脱逃，有可能对人类和环境带来危害。
例如，某些实验动物携带疾病，一旦脱逃，可能通过接触传染给人类；此外，某些实验动物在异地环境下可能对现有生态系统产生破坏。
针对以上生物危险因素，实验动物管理过程中可以采取以下措施：1.严格的动物源控制：选择健康的实验动物，并定期进行健康状态检查，确保动物无疾病感染。
2.做好个体动物管理：尽量减少实验动物之间的压力和攻击行为，为动物提供舒适的环境，以减少伤害。
3.建立完善的实验动物房间清洁程序：定期清洁和消毒实验动物房间、设备和用品，确保动物环境的清洁卫生，减少病原体的传播。
4.采取个体防护措施：在直接接触实验动物时，应佩戴适当的防护装备，如手套、口罩、防护眼镜等，以减少过敏反应的发生。
实验动物微生物学控制
三、应用 目前国际上公认SPF动物适用于所有科研
实验，是国际标准级别的实验动物。它的应 用价值在于它无人畜共患病，无主要传染病， 无对实验研究可能产生干扰的微生物。
第四节 无菌动物
一、无菌动物（Germfree animals ,GF） 是指不能检出一切生命体的动物。即用
现有的检验技术在动物体内外的任何部位均 检不出任何活的微生物和寄生虫。
3.饲养管理
SPF动物必须饲养在温湿度恒定的万级空 气净化的屏障系统中，实行严格的微生物控 制。
屏障系统：
主要是用于SPF级动物的饲育。有正压屏障构造、负压屏 障构造（生物安全屏障系统）也有用层流架（正压/负压）或 隔离器作SPF级屏障系统。空气经三级过滤净化后才进入屏障 设施之内，空气洁净度为1万级。出风口设有防空气倒流装置。 屏障系统设有清洁和污染走廊，进入系统的笼具、饲料、饮水、 垫料、器械等一切物品都要经过严格的消毒灭菌，人员进入要 经淋浴、更衣，使用专用的服装，进入的动物要有专用包装， 也经严格的消毒处理。系统内的人员、物品和空气等采用单向 固定的流通路线，有呼吸系统疾病和皮肤病的人员不能进入系 统内。结构要求和进入系统内的人、动物和物品的运行等与亚 屏障系统基本相同，但要求更为严格。
二、特点 1、微生物学特点
要求不携带所规定的人兽共患病原体和动物烈性传染 病的病原。
2、饲养管理 为了预防人和动物共理中必须采取一定的防护措施。 如饲料、垫料要消毒；饮水要符合城市饮用水卫生标准； 青饲料应经清洗干净晾干后再喂；外来动物必须严格隔离 检疫；房屋要有防野鼠、防昆虫的设施；要坚持经常性的 环境卫生及笼器具的清洗消毒，严格处理淘汰及死亡动物 以及限制无关人员进入动物室。
进入清洁区的人员、动物和物品要分别遵循一 定的运行路线： 1. 人员：更衣--淋浴--更衣--清洁走廊--饲养室或动物 实验室--污染走廊--洗刷消毒室--更衣--外部区域。
dai实验动物质量控制与动物福利-D
普通级动物 （Conventional Animal，CV）
• 微生物控制的要求：最低，外观健康，饮 食排泄正常，无异常分泌物，无明显临床 症状，但微生物状况不明确。
• 饲养管理：开放系统—空气未经过净化。 有一定的防护措施—饲、垫料消毒、环境 消毒、严格处理淘汰死亡动物、严格控制 人员进出、防止野鼠的污染等。
屏障系统照片
2020/2/7
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物品进出明细表
途径
高压灭菌 121℃ 30min
适用物品
金属类：各类金属手术器械、容器、饲料铲等可以高
压的金属制品。
玻璃类：试管、玻片、烧杯、量筒、培养皿等可以高
压的玻璃器皿。
耐高压塑料制品：笼盒、EP管、移液枪枪头，小鼠运
输盒等耐高压塑料制品。
棉、纱类、纸制品：净化服、抹（拖）布、棉花、
培养，生化反应 血清学 分子生物学（如PCR）
血清学（如ELISA） 分子生物学（如PCR）
病理
返回
肉眼病变，组织病理学，尸检
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血清学检查
检测频率
• 普通级、清洁级、SPF级动物房每三个月检 测一次，
• 无菌动物每年检测一次
取样要求： 群体小于100只，取样不少于5只 100～500只，取样不少于10只 大于500只，取样不少于20只
纱布、包装用纸盒、口罩、小鼠信息卡片。
小鼠饲养用品：饮用水瓶、垫料、瓜子。
传递窗过氧乙酸喷 实验记录纸制品；
洒+紫外灯照射灭菌：
不可高压的塑料和橡胶制品：文具，手套，果冻，
饲料。
紫外灯照射20min。紫外灯穿 不可高压的仪器设备：天平、接线板、血糖仪、环
透力很弱，仅限于表面消毒，请 尽量将物品摊开来。
实验动物的微生物学及寄生虫学控制
第四节 清洁动物（Clean animal，简称CL动物）
定义：除普通动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和 对科学研究干扰大的病原。
饲养条件：屏障系统大规模生产 来源：SPF动物扩群 应用：各种科研、教学用大小鼠
清洁级动物特点：
1、微生物特点 清洁级动物比普通级动物要求排除的微生
物和寄生虫多，但比SPF动物少。清洁级动 物除肉眼观察无病外，尸体解剖时，主要 脏器、组织无论是肉眼观看还是病理组织 切片均应无病变。
(1)盲肠肥大，比普通动物要大5-6倍。 (2)肠道肌层薄，肠绒毛变细变短。 (3)肝脏重量下降。
无菌动物特点
• 循环系统
(1)心脏变小 (2)白细胞数变少，且数量波动范围小
• 免疫系统 免疫机能基本处于原始状态。
(1)胸腺，淋巴组织，网状内皮系统发育不良
(2)脾脏小，无二级滤泡，网状内皮细胞功能下降
• 3、免疫学研究中的应用
无菌动物体内既无抗原也无特异性抗体，处于 一种“原始状态”，很适合用于各种免疫功能 的研究。 如，无菌动物暴露于微生物，先产生α球蛋白，
再产生β球蛋白，最后产生γ球蛋白。
常用无菌动物进行免疫抑制剂试验研究。
4、肿瘤学研究 （1）制备人体肿瘤模型需要免疫抑制
动物，而普通动物给予免疫抑制剂后常 继发感染死亡，所以可以应用无菌动物。
SPF动物 屏障系统 确知不带有的微生物
清洁动物 屏障系统 确知不带有的微生物
普通动物 开放系统 微生物情况不明确
二、对科染病 无
无
无 未知
寄生虫 无
无
无 未知
试验结果 明确 明确 明确 有疑问
用动物数 少 少
较少 多或大量
统计价值 很好 可能好 较好 不准确
实验动物的微生物控制
in the contamination process.
Food and bedding can become contaminated
by wild rodents at times of production, harvesting and storage.
Microorganisms may be carried in the
hair, on the hands and on the clothing of personnel who have been in contact with infected animals.
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Materials and equipment
1. 体外寄生虫（节肢动物） 病原：Ectoparasites（虱子、 跳蚤、螨）
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2. 弓形虫病
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1.感染弓形虫多数为隐性感染。
2.主要危害眼和N系统 3.孕妇常有流产，早产，死胎或畸胎。 4.幼龄大鼠常导致致死性肺炎。
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第三章实验动物的微生物控制
第一节 微生物对实验动物的影响
第二节
Water, air, cages, and surgical equipment can
also become contaminated source for animals.
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Biological materials
The use of biological materials
such as cells, serum, ES cells, and
microorganisms.
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实验动物微生物质量与动物实验
• 仙台病毒
• Mouse Hepatitis Virus
• 小鼠肺炎病毒
• Sendai Virus
• 呼肠孤病毒III型 • 小鼠细小病毒 • 小鼠脑脊髓炎病毒
• Pneumonia Virus of
Mice
• Reovirus type III • Minute Virus of mice 29
隔离环境
GF动物 植入 GN动物 污染 GF动物
植入
污染
屏障环境
SPF动物
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普通级动物 清洁级动物 SPF级动物
无菌动物 悉生动物
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不同微生物学等级的实验动物比较
项目 传染病 寄生虫 实验结果 应用动物数 长期实验效果 死亡率
长期实验存活率
实验标准设计 统计价值
实验结果的价值
GF 无 无 准确 少量 可能好 很低 约100％ 可能 很好 很高
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• 小鼠肝炎病毒(MHV)
属冠状病毒科，冠状病毒 属，与人冠状病毒 (普通感冒，或 肺炎)，大鼠冠状病毒 (新生大鼠 肺炎)，大鼠唾液腺病毒(唾液腺， 泪腺炎)同属。有多种毒株。
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• 消瘦肝炎病毒是实验小鼠重要的病
毒感染之一。呈现世界范围分布， 无明显的季节性。临床表现为肝炎， 脑炎和肠炎。
发育阶段分为五型：
• 滋养体和包囊出现在中间宿主体内， • 裂殖体，配子体和卵囊只出现在终
宿主－－猫体内。
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• 传播途径
• 任何动物食入弓形虫的包囊，卵囊或活体，
都能受到感染而患弓形虫病。猫科动物的粪 便中，常带有卵囊。可以污染草原、牧场、 蔬菜、水果等。猫的身上和口腔内常常有弓 形虫包囊和活体。直接接触猫易受感染。狗 的身上和口腔内常有包囊或活体，养狗的人 不小心可能感染。其他家畜、家禽，如：鸡、 鸭、鹅、猪、牛、马、羊等动物体内有时带 弓形虫包囊和活体。所以食用肉、蛋奶也可 能感染，鱼肉体内有时也有弓形虫包囊或活