银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、baX的检测

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细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2和bax在胚胎停止发育绒毛组织中的表达

细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2和bax在胚胎停止发育绒毛组织中的表达

・ 33 ・ 9
从 糖 皮 质激 素 膜 受 体 的 甾体 特 异性 来 看 , 与 它
醛 固酮 的 亲 和 力 最 高 、 地 塞 米 松 的 亲 和 力 较 低 。 与 其结 合常 数 与胞 内 的 肾 上 腺 皮 质 激 素 受 体 相 差 较 大, 因而 是一 种新 型受体 。
l 4 9. 9
[ ] Svr M,C bl 6 aa t aii Y.Seicbni fdxm taoet pam lc pc i n o ea e sn o l a i f dg h s
eoe o na eba tm J . erl y 9 1 1:0 . vkdpt tl i t rns [] N uo g,16 ,1 19 e is n h i e o
胚 胎 停 止 发 育 绒 毛组 织 中 bl 表 达低 于正 常 早 孕 绒 毛 组 织 , bx表 达 高 于 正 常 早 孕 绒 毛组 织 , 者 均 有 显 著 性 c2 一 而 a 两 差 异 ( < .5 。 结 论 P 00 )
B o h m , 1 8 , 8: 3 ie e 9 3 1 1 5.
[] Symt T, e a aH. pcf id gse f a r uoot 5 ue iu Tmym Seicb i is o nt a g cer- s i n n t r u l l i
ci lm e r e fr ie[ ] nor o,17 ,6 o si p a m m a so a l r J .E dci l 95 9 : d n a s b n t v n
[ ] Twe C, z Y.Se i b d gt snpi p s am m rn : i 4 ot A Se P trd i i at l m e bae df o n n oy c a -

Bcl-2和Bax在牵张应变诱导HPDLCs凋亡中的表达研究

Bcl-2和Bax在牵张应变诱导HPDLCs凋亡中的表达研究

关 键 词 :牵 张 应 变 ;B l 2 a ; 牙 周 膜 细 胞 c- ;B x 人
[ 中国图书分 类号】R7 14 8 .
[ 文献标识码】A
[ 文献编号】10 —36 (000— 13 0 0 9 7 12 1)4 0 9 — 4
Th t y h xpr si n fap e sud on t e e e so o opt ssr l t d neBc-2 a o i ea e ge l nd x n sr t h ngf c — nd e HPDLCsa Ba i t e c i or e i uc pop oss t i
[ src| Obet e T ep roeo i s d vsg t terl o o ts e tdgn c 2adB xi Abtat jci : h up s fhs t yi t i et a e f p poi rl e eeB l n a v t u so n i eh o a s a 一 n
达 变 化 情 况 。方 法 :体 外 培 养 HP C , 利 用 动 态 机 械 应 变 细 胞 加 载 装 置 对 HP L s 载 2 %动 态 牵 张 应 变 DL s D C 加 0
2 h,通 过 ra- i C 检 测 B 2和 B x在 mR 4 e lt P R me d一 a NA 水 平 上 的 表 达 差 异 。 结 果 :HP L s 载 后 ,呈 现 栅 栏 D C 加 状 相 互 平 行 排 列 趋 势 ,排 列 方 向 垂 直 于 牵张 力 方 向 。B l 2和 B x基 因 表 达 显 著 增 加 ,B l 2 B x 比值 显著 下 c- a c- / a 降 ,有 明 显 统 计 学 意 义 (< O 0 ) P .5。结 论 :牵张 应 变 诱 导 人 牙 周膜 细 胞 凋 亡 过 程 中 , B l2家 族 起 到 了重 要 作 用 。 c -

细胞凋亡相关基因Bcl-2,Bax在膀胱移行细胞癌中的表达

细胞凋亡相关基因Bcl-2,Bax在膀胱移行细胞癌中的表达
性, 以及该手段与现有 的其他检测手段 的优劣性等 问题 尚有 待进一步进行分析研究 。
参 考 文 献
[ ] 王梅 , 1 骆荣 江综 述. 学相 干断层 成像 术及 其在 眼科 中的应 光
用 . 科 学 报 ,9 8 1 161 8 眼 19 ,4:1 —1 .
igo tc o ee c o ga h Am hh moo ,0 n pia c h rn etmorp y, l JOp ta lg 2 05,3 l y 1 9:
t i k e si a c ma d t ce sn h ei a h c n s n ye . h c n s n u 0 e e td u i g t er t l ik e sa a z r n t l
t amoo y, 9 8, 5: 5 - 5 h l lg 1 8 9 3 7 3 8.
( 稿 1期 :0 81 -5 收 3 20 —20 )
Op tamoo y,0 4, 1 2 5 ̄7 hh l lg 2 0 1 1:6 5.
短篇论著 ・ 细胞 凋 亡 相关 基 因 B l , a 在 膀 胱 移 行 细胞 癌 c一 B x 2 中 的 表 达

陈鑫
周贺
何朝 宏
【 摘要 】 目的 探讨细胞 凋亡相关基 因 bl ,a c- bx在膀胱移行 细胞癌 中的表 达及其相关性 和在膀 2
5 9- 1 0 5 7.
[ ] Mee sF Zn wl L B w a a. vlao fr n l 7 di A, ag i M, a d C,t1 E a tn o、 t a e r l ui e i
n r e fb rly r Op i e eh a a d ma u a ik e smo re- e e a e . tcn r e d, n c l t c n s asu v i v r h

辐照血液凋亡相关蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的检测及意义

辐照血液凋亡相关蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的检测及意义
[ sr c] Obe t e Toiv siaet ee p e so so a / a l Abta t jci v n etg t h x rs in fF s F s—Bc 2 B x o h y h c t fbo dirdae y l / a n teL mp o yeo lo ra itdb 。Cs
DOI1 . 9 9 j is . 7 1 O 2 1 . 7 0 7 : 0 3 6 /.s n 1 3 4 3 . 0 0 0 . 2 6
中图 分 类 号 : 3 2 1 R 9.2
文献标识码 : A
文 章 编 号 :6 34 3 ( 0 00 ~6 30 1 7 10 2 1 )70 8 —2
a dFaI nt eL mp o y eo lo ra itd b 5 。C 7 ry weei r v d sg iia t ( n s o h y h c t fbo d irdae y 2 Gy s a r mpo e inf n l 尸< O 0 ) b tt eo d fF s c y . 5 , u h d so a / F s wa fn inf a c ( aI so osg ii n e P> 0 0 ) c . 5 .Ex r sin fB l Ba n h d so c一 / xwe ed ce sd( p eso so c一 2, xa dt eo d fB l2 Ba r e rae P< O 0 ) b t h a— . 5 , u elt t
床 意 义 。方 法
利 用 F s 硫 氰 酸荧 光 素 ( I C 、 aIF I B l I a一 异 F T ) F s Y' c 2FTC、 a I C荧 光 标 记 抗 体 , 用 单 色 流 式 细 胞 术 检 测 C、 ~ B xF T 应

克银Ⅰ号方对银屑病患者促细胞凋亡相关基因Fas、bax表达的影响

克银Ⅰ号方对银屑病患者促细胞凋亡相关基因Fas、bax表达的影响

9202. 2012. 07. 027 〔文章编号〕 10059202 ( 2012 ) 07138502 ;doi:10. 3969 / j. issn. 1005-
银屑病是一种临床常见的皮肤病 , 发病率高、 易复发, 目前 尚无从根本上治疗本病的方法 。 随着对该病发病机制研究的 逐渐深入, 已证实银屑病患者除了具有多基因遗传背景外 , 异 常 T 细胞导致的免疫失调与本病也高度相关 , 尤其与细胞凋亡 的关系极为密切
bax 的表达变化。 结果 组( 克银Ⅰ号方组) 和对照组( 阿维 A 胶囊组) , 比较两组临床疗效及治疗前后患处蜡块包埋表皮中促凋亡基因 Fas、 bax 的转阴率比较有显著性差异 ( P < 0. 05 ) 。 结论 床治疗的总有效率比较无统计学意义 ( P > 0. 05 ) , 两组治疗后促凋亡相关基因 Fas、 bax 的表达。 对银屑病治疗有效; 可影响银屑病患者促细胞凋亡相关基因 Fas、 〔关键词〕 银屑病; 克银Ⅰ号方; 细胞凋亡; Fas; bax 〔中图分类号〕 R758. 63 〔文献标识码〕 A
bax 表达的影响 克银 Ⅰ 号方对银屑病患者促细胞凋亡相关基因 Fas、
马学伟
〔摘
孙国强
要〕 目的


张培红
云雅卿
1
王家颖
2
( 河北省中医药研究院, 河北
石家庄 050031 )
bax 表达的影响。 方法 观察克银Ⅰ号方对银屑病患者促细胞凋亡相关基因 Fas、
将 40 例寻常型银屑病患者随机分为治疗 两组临 克银 Ⅰ 号方
· 1386·
中国老年学杂志 2012 年 4 月第 32 卷
一系列凋亡信息的传递 , 最终到达细胞表面受体 , 使细胞存活 日期缩短

2018年凋亡相关基因-Bax在不同细胞中表达产物差异检测-文档资料

2018年凋亡相关基因-Bax在不同细胞中表达产物差异检测-文档资料
购试剂盒时注意厂家批号,其差异很大,会影响 稳定性。
告知
实验(四)
细胞内微核的检测 家系分析
注意事项
一、二抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、 背景有直接关系。
染色背景过高,在DAB显色之前,用含0.01-0.02 %TWEEN20的PBS洗涤标本4次,再PBS洗2次, 然后DAB显色。 DAB有毒性(小心)
SABC试剂盒保存在4 ℃为佳(2年),而-20 ℃短期 内生物活性则被破坏 。
25µl,37 ℃,1h PBS洗,5min X 3次
实验步骤
加0.3% H2O2-PBS(甲醇),37 ℃,30min PBS洗,5min X 3次 SABC工作液(1ml PBS加入SABC 10µl,混匀)20-
30µl,37 ℃,1h PBS洗,5min X 3次 DAB显色:
器材与试剂
仪器:移液枪、枪头、滴管、显微镜 材料:培养细胞 试剂:甲醇、PBS、封闭液、一 抗、 二抗、
SABC、DAB 、0.3%H2O2-PBS、
试剂说明
PBS: 磷酸盐缓冲液( 0.01M pH7.4 ) 封闭液: 山羊血清(或BSA),用时PBS稀释 一 抗: 小鼠IgG,用时PBS稀释 二抗: 生物素标记的羊抗小鼠IgG 0.3% H2O2-PBS(甲醇)
DAB显色工作液配制(现配):1ml蒸馏水,加试 剂盒中A、B、C试剂各一滴,混匀后加至细胞孔 板,镜下控制,以蒸馏水终止反应。
观察结果
实验结果
缺糖前 Hela 细胞
缺糖 24h Hela细胞
缺糖 48h Hela 细胞
缺糖前 PC 12细胞
缺糖 24 h PC 12细胞
ห้องสมุดไป่ตู้
缺糖 48 h PC 12细胞

cin及宫颈癌组织中凋亡相关基因bcl-2、bax及caspase-3蛋白的表达

cin及宫颈癌组织中凋亡相关基因bcl-2、bax及caspase-3蛋白的表达

中文摘要目的近年来人们对研究cirq(宫颈上皮内瘤样病变)中细胞凋亡所扮演的角色很感兴趣,并认识到启动及调节凋亡的机制在决定何种CIN病变有可能进展为浸润癌时的重要价值。

目前了解比较深入,较为公认的是bcl一2基因及其相关蛋白与凋亡的关系。

本实验通过免疫组化的方法检测bcl一2、box、caspase一3蛋白在正常宫颈上皮、CIN以及宫颈癌中的表达情况来研究bcl一2家族基因对凋亡的调节情况以及他们三者与疾病进展的关系。

方法检测对象为中国医科大学附属第一医院2000—2003年手术及宫颈活检组织、LEEP刀手术标本蜡块79例,患者年龄2l一56岁,平均年龄41.64±2.86岁,其中正常宫颈组织(NE)17例,宫颈上皮内瘤样病变—低度(CIN—L)21例,宫颈上皮内瘤样病变一高度(CIN—H)19例,宫颈浸润鳞癌组织(SCC)22例。

凋亡相关基因bcl一2、bax及caspase一3蛋白的表达采用单克隆抗体免疫组化法。

所有标本均经10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,连续切片厚3—5¨m,主要试剂兔抗人bcl一2、bax、caspase一3蛋白单克隆抗体。

bcl一2、box、caspase一3蛋白表达均定位于细胞浆,阳性细胞数兰10%判定为蛋白表达阳性。

采用SPSS软件中卡方检验方法进行统计学分析。

结果1、Bel一2在正常宫颈上皮中无表达.其在CIN—L及CIN—H中的阳性率分别为28.57%和68.42%,随着CIN病变的进展bcl-2基因蛋白的表达率呈明显的上升趋势(P<O.05)。

在宫颈癌中bcl—2的阳性表达率仅为22.73%,与CIN—H相比明显降低(P<O.05)。

2.box在正常宫颈上皮中少量表达,表达率为5.88%。

其在CIN—L及CIN—H中的阳性率分别为80.95%和63.16%,随着CIN病变的进展bax基因蛋白的表达率未呈明显的下降趋势(P>0.05)。

在宫颈癌中bax的阳性表达率为31.82%,与CIN—H相比有显著降低(P<0.05)。

诱导细胞凋亡的相关基因

诱导细胞凋亡的相关基因

诱导细胞凋亡的相关基因
1. P53基因:作为肿瘤抑制基因的重要代表之一,P53可以诱导细胞凋亡,并调节DNA修复、细胞周期和细胞老化等生物学过程。

2. BCL-2家族基因:BCL-2家族基因包括促凋亡成员和抑制凋亡成员,其中促凋亡成员如BAX、BAK等可促进细胞凋亡,抑制凋亡成员如BCL-2、BCL-XL等则可以抑制细胞凋亡。

3. CASPASE基因:CASPASE基因编码半胱氨酸蛋白酶,可以参与细胞凋亡的信号转导和执行阶段。

4. TNF家族基因:TNF家族基因包括TNF-α、FasL等,其编码的蛋白质可以引发细胞凋亡信号,因此常用于肿瘤治疗。

5. PI3K/Akt/mTOR信号通路基因:该信号通路在多种肿瘤中异常活化,与凋亡抵抗相关,因此相关基因可作为肿瘤治疗靶点。

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银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、baX的检测
银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、baX的检测
银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、bax的检测
摘要为了探讨细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、bax在银屑病发病中的意义,采用免疫组化ABC法、SABC法检测了这几种基因在15例银屑病组织中的表达。

结果发现银屑病的角质形成细胞中抑凋亡基因bcl-2几乎不表达,促凋亡基因Fas、bax阳性表达。

提示促凋亡基因Fas、bax在银屑病中发病起重要作用,而抑凋亡基因bcl-2作用可能不大。

关键词银屑病、cl-2基因、Fas基因、ax基因。

银屑病的发病机理尚不明确,角质形成细胞异常增生和角化不全是银屑病的主要病理改变,以往对这方面的研究主要集中在免疫学和生化学方面。

近年来银屑病与细胞凋亡的关系逐渐受到越来越多学者的重视。

国外有学者报道银屑病表皮中角质形成细胞凋亡异常增多。

抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因Fas、bax是现今研究较多、较重要的几个细胞凋亡相关基因。

为了探讨这几种基因在银屑病发病中的意义,我们采用免疫组化方法检测了银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas及bax。

1材料和方法
1.1标本来源:采用1994-1997年我院保存的石蜡包埋组织块。

寻常型银屑病15例,其中男8例,女例;年龄11-68岁,平均年龄
29.13岁;均为进行期银屑病。

6名正常人皮肤组织,皆取自皮肤外科行重睑术、面部美容切除术者的皮肤,石蜡包埋作为对照组。

测定前先将石蜡包埋组织块作常规组织切片及HE染色,在光镜下核对诊断,证实其病理诊断无误方采用。

1.2试剂:鼠抗人bcl-2单克隆抗体购自Dako公司,生物素化羊抗鼠单克隆抗体系华美生物制品公司产品。

兔抗人Fas多抗、兔抗人bax多抗及链酶亲和素-生物素-过氧化酶复合物免疫组化试剂盒(简称SABC试剂盒)均购自武汉博士德生物工程公司。

1.3方法:载玻片用APES处理后干燥备用,切取4-5μm厚的石蜡切片,常规脱蜡水化。

Bcl-2基因的检测参照ABC法稍加改进,阳性对照为正常淋巴结,阴性对照为不加一抗。

Fas、bax基因的检测采用SABC法,阳性对照分别为武汉博士德生物工程公司提供的Fas、bax基因阳性对照片,阴性对照为不加一抗。

1.4判断:显微镜下观察,棕黄色为阳性结果。

阳性强度判断标准如下:强阳性()指50以上细胞阳性染色;中等强度阳性()指25-50细胞阳性染色;弱阳性()指25以下细胞阳性染色;阴性(-)指细胞均无任何阳性染色。

2结果6例正常人皮肤组织中:bcl-2基因除部分基底细胞呈阳性反应外,余阴性。

、Fas和bax基因为阴性表达。

15例银屑病组织中:bcl-2基因在15例表皮增生的角质形成细胞中均呈阴性表达,但14例部分基底细胞和浸润的淋巴细胞呈阳性染色;Fas基因在12例银屑病组织中呈阳性表达;bax基因在13例中呈阳性,阳性染色遍布表
皮各层角质形成细胞中及真皮浅层浸润的淋巴细胞上。

在缺少一抗的对照反应中结果均为阴性,而作为阳性对照的正常淋巴结及Fas、bax 基因阳性对照片则呈广泛强阳性染色。

3讨论cl-2基因最早是1984年Tsujimoto等从滤泡性淋巴瘤中分离出来的一种癌基因,位于18q21位点的bcl-2基因移至免疫球蛋白重链基因14q32位点附近,造成bcl-2蛋白的异常表达。

bcl-2基因可抑制许多因素引起的细胞凋亡,故称为:“细胞凋亡抑制基因”。

Fas 抗原又称Apo-1或CD95,Fas分子是个典型的Ⅰ型膜蛋白,属肿瘤环死因子(TNF)/神经生长因子(NGF)受体家族中的一员。

研究发现Fas单克隆抗体在体内体处与Fas结合后均能导致表达Fas的细胞发生凋亡,从而证明Fas是一种识别Fas配体,并将凋亡信息传递给细胞的细胞表面受体,故Fas基因又称“凋亡基因”。

Bax基因属于bcl-2基因家族成员,其功能与bcl-2基因相反,为促凋亡基因,bax 蛋白可与bcl-2蛋白形成异源二聚体,从而抑制bcl-2基因的抗凋亡作用。

我们的实验中正常的皮肤组织部分基底细胞bcl-2基因呈阳性反应,这与国外学者的报道相符合,有文献报道这些阳性细胞为黑素细胞,正常表皮中黑素细胞与基底角质形成细胞的比例为1:30,提示黑素细胞死亡和再生的控制是非常严格的。

黑素细胞bcl-2基因强阳性表达,这可能与保护它们避免受内外环境的影响如紫外线的照射,减少凋亡有很大关系。

在银屑病中除黑素细胞和浸润的淋巴细胞为阳性外,表皮增生的角质形成细胞均为阴性,这提示bcl-2基因可能在银屑病中所起的作用不大。

目前认为在这类丘疹鳞屑性疾病中主要是
bcl-X基因起作用。

Wrone-Smith等及Foreman等发现银bcl-X1基因在增生的角质形成细胞上呈强阳性表达,认为bcl-X1基因可能通过抑制表皮细胞上呈强阳性表达,认为bcl-X1基因可能通过抑制表皮细胞凋亡,从而延长细胞的存活期。

而本实验中银屑病组织促凋亡基因Fas、bax均为广泛性表达,这与国外学者的结论一致。

因此,我们认为在银屑病中促凋亡基因Fas、bax起重要作用,而抑凋亡基因bcl-2作用可能不大。

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