水质粪大肠菌群检验纸片的详细资料
水质粪大肠菌群检验纸片的详细资料
BD105Ⅰ水质（粪）大肠菌群快速检验纸片1份/包适用于湖水、水源水中大肠菌群的快速检测。
BD105Ⅱ水质（粪）大肠菌群快速检验纸片1份/包适用于河水、生活用水、医疗机构处理后排污水、禽畜养殖业等排放废水中大肠菌群的快速检测。
分BD105Ⅰ和BD105Ⅱ两个型号，请注意选择型号。
1、适用范围水质（粪）大肠菌群的测定纸片快速法
本标准适用于地表水、生活污水、医疗机构及禽畜养殖业等其他行业排放的废水中（粪）大肠菌群的快速筛查。
本方法的检出限为20MPN/L。
2、规范性引用文件
本标准内容引用了下列文件或其中的条款。
凡是不注明日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
HJ/T91地表水和污水监测技术规范
3、术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1总大肠菌群（total coliforms）
在37℃培养，24h内能发酵乳糖酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
3.2 粪大肠菌群（fecal coliforms）
44.5℃培养，24h内能发酵乳糖产酸气的总大肠菌群，属粪行来源，称为粪大肠菌群。
4、方法原理
将一定量的乳糖、指示剂（溴甲酚紫和2，3, 5-氯化三苯基四氮唑即TTC）以及营养成分等吸附于一定面积的无菌滤纸上，当细菌生长繁殖时，产酸使PH值降低，溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色。
同时，产气过程相应的脱氢酶在适宜的PH范围内，催化底物脱氢还原TTC 形成红色的不溶性三苯甲臜（TTF），即可在产酸后的黄色背景下显示出红色斑点（或红晕）。
通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断，从而确定是否有（粪）大肠菌群存在，再通过查MPN表就可得出相应（粪）大肠菌群的浓度值。
5、试剂和材料
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂。
5.1市售水质总大肠菌群、粪大肠菌群测试片：10ml水样量纸片按附录A的方法进行质量鉴定，达到要求后方可使用。
5.2无菌水
用新制备的去离子水或蒸馏水，按无菌操作要求，121℃高压蒸汽灭菌20min，备用。
5.3硫代硫酸钠溶液：ρ(Na2S2O3)=0.10g/ml
称取硫代硫酸钠10g，溶于适量蒸馏水（或去离子）中，稀释至100ml，现配。
5.4乙二胺四乙酸二钠（EDTA- Na2）溶液：ρ(C10H14N2O8Na2。
2H2O)=0.15g/ml
称取EDTA-Na2 15g,溶于适量蒸馏水（或去离子水）中，稀释至100ml，此溶液保质期为30d。
6、仪器和设备
6.1 恒温培养箱：37℃±1℃。
6.2 恒温培养箱：44℃±0.5℃。
6.3 高压蒸汽灭菌器：121℃、101.3kpa。
6.4 冰箱：0-4℃
6.5 移液管：1±0.01ml、10±0.1ml。
6.6 试管：φ15mm×150mm.
6.7 采样瓶：500ml。
注1：移液器、试管、采样瓶等玻璃器皿实验前要按无菌操作要求包扎，121℃高压蒸汽灭菌20min，烘干，备用。
7、样品
用灭菌器具，按照HJ/T 91的规定及无菌操作的要求，采集水样400ml放入已灭菌的采样瓶中。
如果是经加氯处理的废水，需在采样瓶灭菌前加入乙二胺四乙酸二钠（EDTA- Na2）溶液（5.4）1.2ml，以消除干扰。
酸性样品，需调节胖胖的PH值至7.0-8.0。
采样后2h内检测，否则，需10℃以下冷藏并6h内送检，实验室接样后，应将样品放入0-4℃冰箱并2h内测定。
注2:10mg硫代硫酸钠可保证去除水样中1.5mg余氯，硫代硫酸钠用量克根据水样实际余氯量调整。
8、分析步骤
8.1接种量
每个样品按三个不同的接种量接种，每个接种量分别接种5张纸片，共接种15张纸片。
根据水样的污染程度确定接种量，应尽可能使5个接种量最大的纸片为阳性、5个接种量最小的纸片为阴性。
清洁水样的参考接种量分别为10 ml、1 ml、0.1 ml，受污染水样参考接种量根据污染程度可接种1 ml、0.1ml、0.01 ml或0.1 ml、0.01 ml、0.001 ml等。
接种量小于1ml时，水样应制成稀释样品后使用。
接种量为0.1ml、0.01 ml时，分别制成1:10稀释样品、1:100稀释样品。
其它接种量的稀释样品依次类推。
1:10稀释样品的制作方法为：吸取1ml水样，注入盛有9 ml无菌水的试管中，混匀，制成1:10稀释样品。
其它稀释度的稀释样品同法制作。
8.2接种、培养
水样充分混匀，按无菌操作制作稀释水样及接种水样。
清洁水样，接种水样总量为55.5ml，10 ml水样量纸片5张，每张接种水样10ml，1 ml水样量纸片10张，其中5张各接种水样1ml，另5张各接种1:10的稀释水样1ml。
受污染水样，接种3个不同稀释度的1ml稀释水样各5张。
接种水样应均匀涂布于纸片上，纸片充分侵润、吸收水样，用手轻轻压平，做好标记。
测总大肠菌群时，在37±1℃的条件下培养18-24h后观察结果；测粪大肠菌群时，在44.5±0.5℃的条件下培养18-24h后观察结果。
注3：
1、检测粪大肠菌群时，纸片接种后应立即放置于44.5±0.5℃的恒温培养箱中培养，在常温下放置过久将影响检测结果的准确性。
2、纸片加入水样后，短时间内变黄或退色，表明水样存在酸性物质活氧化剂干扰，需按“7样品”一节方法去除相应干扰。
9、结果判定
（1）纸片上出现红斑或红晕且周围变黄，为阳性。
（2）纸片全片变黄，无红斑或红晕，为阳性。
（3）纸片部分变黄，无红斑或红晕，为阴性。
（4）纸片的紫色背景上出现红斑或红晕，而周围不变黄，为阴性。
（5）纸片无变化，为阴性。
水质粪大肠菌群的测定（多管发酵法和滤膜法）HJ347-2017.pdf
水质 粪大肠菌群的测定粪大肠菌群是总大肠菌群中的一部分，主要来自粪便。
在44.5℃温度下能生长并发酵乳糖产酸产气的大肠菌群称为粪大肠菌群。
用提高培养温度的方法，造成不利于来自自然环境的大肠菌群生长的条件，使培养出来的菌主要为来自粪便中的大肠菌群，从而更准确地反映出水质受粪便污染的情况。
粪大肠菌群的测定可以用多管发酵法和滤膜法。
第一篇 多管发酵法1 适用范围本标准适用于地表水、地下水及废水中粪大肠菌群的测定。
2原理多管发酵法是以最可能数（most probable number）简称MPN来表示试验结果的。
实际上它是根据统计学理论，估计水体中的大肠杆菌密度和卫生质量的一种方法。
如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。
不过只要每一稀释度试管重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取决于那些既显示阳性又显示阴性的稀释度。
因此在实验设计上，水样检验所要求重复的数目，要根据所要求数据的准确度而定。
3 培养基和试剂本标准所用试剂除另有注明外，均为符合国家标准的分析纯化学试剂；实验用水为新制备的去离子水。
3.1单倍乳糖蛋白胨培养液：成分：蛋白胨10g牛肉浸膏3g乳糖5g氯化钠5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL蒸馏水1000mL制法：将蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，调节pH为7.2～7.4，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于含有倒置的小玻璃管的试管中，于高压蒸汽灭菌器中，在115℃灭菌20min，贮存于暗处备用。
3.2 三倍乳糖蛋白胨培养液：按上述配方比例三倍（除蒸馏水外），配成三倍浓缩的乳糖蛋白胨培养液，制法同上。
3.3 EC培养液：成分：胰胨20g乳糖5g胆盐三号 1.5g磷酸氢二钾（K2HPO4）4g磷酸二氢钾（KH2PO4） 1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mL制法：将上述成分加热溶解，然后分装于含有玻璃倒管的试管中。
食品微生物检验之纸片法
食品微生物检验之纸片法摘要：纸片法在食品检测的实际应用中表现出操作简便、灵敏度高、速度快等特点，为食品检测技术的发展提供了有力的技术支持。
本文主要介绍了纸片法的原理和纸片法在食品中微生物检测中的方法应用以及与平板计数法进行了对比研究。
关键词：食品检验纸片法平板计数法微生物检测前言：食品安全问题越来越受到人们的重视，微生物对食品的污染问题也相应地备受关注。
在食品生产、加工、储存、运输、销售等各个环节中都有污染微生物的可能。
一旦污染，微生物将大量繁殖而引起食品腐败变质，或导致食源性感染和食物中毒，食品的检测与分析工作已经提高到一个极其重要的地位。
特别是为了保证食品的标准品质，开展食品科学技术研究，寻找食品污染的根源，人们更需要对食品进行各种有效营养物质和对人体有害、有毒物质的检验和分析。
自20世纪70年代起，各种食品检测不断出现，主要包生物化学技术、纸片法等，目前这些技术在食品检测和分析等方面已经得到了较好的应用，特别是纸片法。
纸片法以其操作简便、灵敏度高、速度快等优势在食品检测领域得到愈来愈广泛的应用[1，2]。
一、纸片法的原理纸片法，即以纸片、纸膜、胶片等作为培养基载体，将特定的培养基和显色物质附着在上面，通过微生物在上面的生长、显色来测定微生物的方法[3]。
快速测试片法有以滤纸为载体的测试片，这种测试片是一种水合物干膜，由上下两层薄膜组成，上层是聚丙烯薄膜，下层是上印有网格的聚乙烯薄膜，通过一种冷水可溶性的凝胶剂附着在培养基上。
培养基上有微生物生长所需的营养物质、特异性显色物质和抗生素。
纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成一种浓度梯度。
在药物扩散的同时，纸片周围抑菌浓度范围内的测试菌不能生长，而抑菌浓度范围外的菌株则继续生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。
不同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而可能不同，抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度（mic）呈负相关，即抑菌圈越大，mic越小。
粪大肠菌群测定的多管发酵法与纸片快速法比对分析
1引言
粪大肠菌群是总大肠菌群中的一部分，主要来自粪 便，在44.5 °C温度下能生长并发酵乳糖产酸产气切。 六盘水生态环境监测中心一直采用多管发酵法进行水 质中粪大肠菌群的测定,此方法精度高 ，但操做时间长, 步骤较为繁琐，需验证实验⑷，如果发酵管中存在其他 种类的产气菌，会致使检测结果偏离⑷。本次实验是对 多管发酵法与纸片快速法进行实验比对,对相同的实验 样品分别用此两种方法进行检测和结果评价 ，比较两种 方法的有效性和可比性。
<20 3.3X102
<20 1. 1X102
40 2. 4X103
2.4X103 2. 4X103
1.4X103 2. 1X101 1.6X104 1.4X104
表2粪大肠菌群实验结果判定
多管发酵法
95%置信限值
下限
上限
浓度 /(MPN/L)
/ 1. 1X102
/ 9.3X102
<20 2. 3X102
表3 粪大肠菌群平行双样实验结果判定
多管发酵法
95%置信限值
下限
上限
浓度 /(MPN/L)
纸片快速法
95%置信限值
下限
上限
1. 1X102
9.3X102
2. 3X102
70
7. 0X102
70 3. 7X102
7.0X102 3.4X103
1. 3X102 7. 9X102
30 2.5X102
3. 1X102 1. 9X103
2实验概况
2.1材料与方法 多管发酵法:乳糖蛋白培养基、EC肉汤培养基。 纸片快速法:BD105 I水质(粪)大肠菌群快速检验
纸片、BD105 H水质(粪)大肠菌群快速检验纸片。 2.2仪器和设备
水质粪大肠菌群的测定
检测报告B&C（2017）字054号标准名称水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法标准号HJ/T347-2007编制日期2017年9月5日编制人：校核人：审核人：签发人：一、检测依据及设备表1检测方法标准及设备一览表检测类别检测项目方法名称及编号仪器设备名称及型号仪器设备编号水质粪大肠菌群水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法HJ/T347-2007超净台（）恒温培养箱（）水浴锅（）/二、试剂和材料（1）检测试剂：同HJ/T347-2007中多管发酵法“试剂和材料”配制。
（2）检测样品：2009年9月1日取自遗爱湖1L水样。
三、检测步骤同HJ/T347-2007中多管发酵法“检测步骤”测定。
四、实验结果4.1样品测定根据不同接种量的发酵管所出现阳性结果数目，从表3中查得每升水样中的粪大肠菌群。
4.2实验结果表2多管发酵法测定粪大肠菌群的结果初发酵实验2017年9月1日至2017年9月2日将0.1mL、0.01mL和0.001mL水样分别接种到盛有乳糖蛋白胨培养液的5个10mL发酵管中。
在恒温培养箱中37℃±0.5℃下培养24h±2h。
产酸和产气的发酵管表明试验阳性。
如在倒管内产气不明显，可轻拍试管，有小气泡升起的为阳性。
接种量0.1mL 0.01mL 0.001mL阳性试管数量 4 3 3复发酵实验2017年9月2日至2017年9月3日轻微振荡初发酵试验阳性结果的发酵管，用3mm接种环或灭菌棒将培养物转接到EC培养液中。
在44.5℃±0.5℃温度下培养24h±2h（水浴锅的水面应高于试管中培养基液面）。
接种后所有发酵管必须在30min内放进水浴中。
培养后立即观察，发酵管产气则证实为粪大肠菌群阳性。
阳性试管数量 1 1 0实验结果根据不同接种量的发酵管所出现阳性结果的数目从表3中查得MPN值，由于接种量是0.1mL、0.01mL和0.001mL，所以MPN数应乘以100。
方法验证水质的粪大肠菌群
方法验证报告测试方法：HJ 347.2-2018测试项目：水质粪大肠菌群编写：日期：审核：日期：批准：日期：水质粪大肠菌群的方法验证1.目的确认所采用的方法适合于在本实验室进行对水质的粪大肠菌群的测定，照此方法检测和检验条件进行水样的粪大肠菌群检测，能保证检验结果的准确、可靠。
2.原理和范围2.1原理将样品加入含乳糖蛋白胨培养基的试管中，37℃初发酵富集培养，大肠菌群在培养基中生长繁殖分解乳糖产酸产气，产生的酸使溴甲酚紫指示剂由紫色变为黄色，产生的气体进入倒管中，指示产气。
44℃复发酵培养，培养基中的胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长，最后产气的细菌确定为是粪大肠菌群。
通过查MPN表，得出粪大肠菌群浓度值。
2.2范围本法适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。
3.主要仪器3.1 净化工作台。
3.2 立式高压蒸汽灭菌器。
3.3恒温恒湿培养箱。
3.4电热恒温鼓风干燥箱。
3.5电子天平。
3.6酒精灯、试管架、试管（带塞子）、平皿、小倒管、三角烧瓶（带塞子）、刻度吸管、采样瓶、接种环。
4.主要试剂乳糖蛋白胨培养液、EC培养液。
5.检验步骤5.1样品稀释与接种5.1.1 15管法将样品充分混匀后，在5支装有已灭菌5ml三倍乳糖蛋白胨培养液的大试管中（内有小倒管），按无菌操作要求各加入样品10ml，在5支装有已灭菌的10ml单倍乳糖蛋白胨培养液中（内有小倒管），按无菌操作要求各加入样品1ml，在5支装有已灭菌的10ml单倍乳糖蛋白胨培养液中（内有小倒管），按无菌操作要求各加入样品0.1ml。
对于受到污染的样品，先将样品稀释后再按照上述操作接种，以生活污水为例，先将样品稀释104倍，然后按照上述操作步骤分别接种10ml 、1ml 、0.1ml 。
当样品接种量小于1ml 时，应将样品制成稀释样品后使用。
按无菌操作要求方式吸取10ml 充分混匀的样品，注入盛有90ml 无菌水的三角烧瓶中，混匀成1：10稀释样品。
湿式餐具大肠菌群检验纸片说明书
广东环凯微生物科技有限公司网址： 地址：广州市黄埔区科学城神舟路788号邮编：510663传真：860288778876产品说明书Product Manual【产品名称】通用名称：湿式餐具大肠菌群检验纸片【产品编号与包装规格】产品编号产品类型包装规格060061纸片100份/盒（2连袋装）【产品用途】用于餐（炊）器具消毒卫生中大肠菌群的检测。
【检验原理】将乳糖胆盐选择性培养基和TTC 显色剂加载在纸片上，经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性。
【使用方法】1采样方法：筷子：以5根筷子为一件样品，将筷子下段（进口端）（约5cm）涂抹置无菌塑料袋内的湿纸片，每件样品涂抹两张快速检验纸片，。
其他餐（饮）具：用无菌镊子夹取湿纸片后，立即贴于餐（饮）具通常与食物或口唇接触的内壁表面或与口唇接触处，每件贴两张快速检验纸片，30S 后取下，置无菌塑料袋内。
2检验方法：将装有已采样纸片的塑料袋放置于35℃~37℃培养16～18h。
3结果判断：观察每片颜色变化，若纸片变黄并在变黄背景上呈现红色斑点或片状红晕为大肠菌群阳性，若纸片保持紫色不变或在紫色背景上呈现红色斑点，但周围没有黄色均为大肠菌群阴性。
【质量控制】1.理化指标：加水后，纸片PH值6.9±0.2。
2.本品接种下列菌株，置于36±1℃温箱中培养24-48h,结果如下：2-8℃避光贮存，保质期一年，如发现纸片变为粉红色即为失败。
【注意事项】1、夹取湿纸片时应用无菌镊子从纸片一端先掀起，再慢慢取出纸片，避免纸片取出时被扯烂。
2、质检报告可以登录环凯网站，打开“下载中心”页面，输入产品批号下载。
【废物处理】检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。
【执行标准】Q/HK0706广东环凯微生物科技有限公司企业标准微生物检验卡【说明版本】2022年08月23日【参考文献】广东环凯微生物科技有限公司网址：地址：广州市黄埔区科学城神舟路788号邮编：510663传真：************-8619 ************8602************88778876。
大肠菌群检验方法及操作方法
大肠菌群检验方法及操作方法1、什么是大肠菌群：指一群需氧及兼性厌氧，在37℃能分解乳糖产酸、产气的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌。
2、大肠菌群的组成：大肠埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、产气克雷伯氏菌属和阴沟肠杆菌。
3、大肠菌群的测定意义◆粪便污染的指标菌：大肠菌群或粪大肠菌群◆以大肠菌群作为粪便指标菌原因：1)在粪便中数量最大；2)在外环境中存活的时间与致病菌大体相同；3)检测方法简便容易。
◆大肠菌群的测定意义：1)判断食品中否受到粪便污染。
2)有利于控制肠道传染病的发生和流行。
3)有利于控制食品在生产加工、运输、保存等过程中的卫生状况。
4、大肠菌群的生物学特性1 形态与染色：革兰氏染色阴性，无芽胞杆菌。
2 发酵乳糖产酸产气3 培养特性：在EMB琼脂上的典型菌落:呈深紫黑色或中心深紫色，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑，常有金属光泽；4 在麦康凯琼脂上的典型菌落：呈桃红色或中心桃红、圆形，扁平，光滑湿润。
5、大肠菌群检验方法及操作方法◆国家标准：◆三步法：乳糖胆盐发酵试验→分离培养→证实试验(乳糖发酵试验)◆行业标准：◆两步法：推测试验→证实试验表1 大肠菌群在几种常用分离培养上的菌落特征MPN法简介Most Probable Number Method最大可能数•对样品进行连续系列进行稀释，加入培养基进行培养，从规定的反应呈阳性管数的出现率，用概率论来推算样品中菌数最近似的数值。
•MPN检索表只给了三个稀释度，如改用不同的稀释度，则表内数字应相应降低或增加10倍。
6、粪大肠菌群的检验•粪大肠菌群：系一群需氧及兼性厌氧，在44.5℃培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
•于LST中36℃培养48h内产气，并于EC内培养44℃24h产气的一群细菌；在胰蛋白胨肉汤中于44.5℃，24h 内产生吲哚的耐热大肠菌群。
检验方法：7、检验注意事项1）从制备样品匀液至稀释完毕,全过程不得超过15min。
餐具大肠菌群快速检验纸片安全操作及保养规程
餐具大肠菌群快速检验纸片安全操作及保养规程在餐饮行业中，餐具的卫生安全问题备受关注。
为了确保消费者的身体健康，餐具大肠菌群的快速检测成为了餐饮企业不可或缺的一项任务。
本文将介绍餐具大肠菌群快速检验纸片的安全操作及保养规程，保障餐具卫生安全问题。
餐具大肠菌群快速检验纸片的原理餐具大肠菌群快速检验纸片是通过检测餐具表面所沉积的大肠菌群来判定餐具是否安全可用。
纸片表面上存在着特殊的培养基，通常采用液体培养基。
当纸片接触到含有大肠菌的样品时，菌落会在纸片上生长，这时就需要通过颜色检测观察餐具是否存在大肠菌群。
餐具大肠菌群快速检验纸片的使用方法1.取出检验纸片，观察包装是否有瑕疵、破损等问题，确保检验纸片完好无损。
2.将检验纸片放于餐具表面，轻轻按压几秒钟后取下。
如果需要检测双面，可以分别检测每个面。
3.将检验纸片放入培养皿中，并且倒入液体培养基至培养皿内，将培养皿密封（一定要密封），并且按照说明书中所示的指导我们进行培养。
4.培养期一般为24-48小时，视情况而定。
5.观察纸片的颜色变化。
琼脂液变颜色就会说明是否没有被污染（通常而言，紫色或透明是代表底色，像是变黄或绿色，就说明餐具存在问题）。
餐具大肠菌群快速检验纸片的保养规程为了确保检验结果的准确性及纸片的卫生安全，需要注意以下几点：1.存放：检验纸片应存放在阴凉干燥的地方，远离阳光直射及高温高湿环境，以免影响纸片质量。
2.使用：使用前应检查纸片的包装是否完好，如发现破损，变色等情况，应及时更换。
3.清洁：纸片使用完毕后，在取下前应该先用酒精进行消毒清洁，防止污染其他表面。
4.丢弃：使用后的纸片应当直接丢弃，避免二次污染和误用的发生。
同时，在丢弃纸片时应当注意安全，避免造成餐饮环境的污染。
结论餐具大肠菌群的快速检测纸片已成为餐饮行业中必不可少的一项技术。
通过快速、便捷的检测方式，可以有效地保障消费者的身体健康。
餐具大肠菌群快速检验纸片的安全操作及保养规程是餐饮企业保障餐具卫生安全的重要一步。
餐饮具大肠菌群快速测定（纸片法）
餐饮具大肠菌群快速测定（纸片法）
现场采样实验室培养按照国标GB 14934-94操作
1、采样方法
随机抽取消毒后准备使用的各类食具(碗、盘、杯等)，取样量可根据大、中、小不同饮食行业每次采样6～10件，每件贴纸片两张，每张纸片面积25cm2(5cm╳5cm)用无菌生理盐水湿润大肠菌群检测用纸片后，立即贴于食具内侧表面，30s后取下，置于无菌塑料袋内。
筷子以5只为一件样品，用毛细吸管吸取无菌生理盐水湿润纸片后，立即将筷子进口端约5cm)抹试纸片，每件样品抹拭两张，放入无菌塑料袋内。
2、检验方法
将已采样的纸片置37℃培养16～18h，若纸片保持紫蓝色不变或有红色斑点但斑点周围无黄晕为大肠菌群阴性，在红色斑点周围有黄晕或纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。
3、卫生指标
在50cm2的纸片上，不得有大肠菌群阳性结果出现。
地表水粪大肠菌群检测用纸片快速法和多管发酵法比较
法 （第 四 版 ）》中 的 推 荐 方 法 （ C 类 方 法 ）[7]，在 实 际 水 质 监 测 工 作 中 得 到 应 用 ，使 用 频 次 逐 年 增 多 。
韩 桂 春 [8]使 用 纸 片 法 对 抚 顺 市 生 活 污 水 处 理 厂 加 氯 消 毒 排 放 污 水 进 行 粪 大 肠 菌 群 检 测 ，并 与 发 酵 法 对 照 ，结 果 表 明 纸 片 法 与 发 酵 法 获 得 结 果 基 本 一 致 ，纸 片 法 可 以 替 代 发 酵 法 检 测 生 活 污 水 中 粪 大 肠 菌 群 。赵凌宇[9]用 纸 片 法 对 苏 州 的 阳 澄 湖 、太 湖 、京 杭 运 河 苏 州 段 的 粪 大 肠 菌 群 进 行 检 测 ，发 现 两 种 方法结果无显著性差异。
1955 年 ， Foerg 建立了 纸 片 法 [Laboratory Practice(1956 )5 (12)439〕，随后制订了 IS09308-1:2000的 检 测 方 法 [3]。该方法 在 操 作 时 间 上 较 现 行 的 多 管 发 酵 法 有 所 减 少 ，培养时间减为 18〜24h ，携 带 方 便 ，操 作 简 单 ，便 于 掌 握 ，不 需 要 进 行 复 发 酵 试 验 。 随 后 ，纸 片 法 传 人 国 内 ，目 前 在 水 质 食 品 ⑴ 及 饮 餐 具 卫 生 学 w检 测 中 得 到 广 泛 应 用 。 它 也 作 为 《水 和 废 水 监 测 分 析 方