医疗器械生物学评价第五部分体外细胞毒性试验
医疗器械包装检验参考
标题：医疗器械包装检验参考1. 引言医疗器械包装是医疗器械的重要组成部分，其质量直接关系到医疗器械的安全性和有效性。
因此，医疗器械包装检验在医疗器械生产过程中具有重要意义。
本文将详细介绍医疗器械包装检验的参考标准、检验项目及方法，以期为相关企业和机构提供参考。
2. 医疗器械包装检验参考标准2.1 我国医疗器械包装检验标准我国医疗器械包装检验主要参照以下标准：- GB/T 19633-2005《医用包装、容器和材料环氧乙烷灭菌过程的验证》- YY/T 0681.1-2008《医用包装材料与容器第1部分：通用要求》- YY/T 0681.2-2008《医用包装材料与容器第2部分：可重复使用灭菌容器》- YY/T 0681.3-2008《医用包装材料与容器第3部分：一次性使用无菌容器》- YY/T 0681.4-2008《医用包装材料与容器第4部分：纸制无菌包装》- YY/T 0681.5-2008《医用包装材料与容器第5部分：塑料制无菌包装》2.2 国际医疗器械包装检验标准国际医疗器械包装检验主要参照以下标准：- ISO 11607-1：2006《医疗器械包装第1部分：通用要求》- ISO 11607-2：2006《医疗器械包装第2部分：最终灭菌医疗器械包装的验证》- ASTM D 4169-2004《运输包装件的振动、冲击和堆码压力试验》3. 医疗器械包装检验项目及方法3.1 物理性能检验3.1.1 拉伸强度与断裂伸长率检测方法：参照GB/T 1040.3-2006《塑料拉伸性能的测定第3部分：薄膜和薄板》进行测试。
3.1.2 热封强度检测方法：参照GB/T 8807-1988《塑料薄膜热封强度测定方法》进行测试。
3.1.3 抗摆锤冲击性能检测方法：参照GB/T 8809-1988《塑料薄膜抗摆锤冲击性能试验方法》进行测试。
3.2 阻隔性能检验3.2.1 水蒸气透过率检测方法：参照GB/T 1037-1988《塑料薄膜和薄片水蒸气透过率的测定》进行测试。
医疗器械生物学试验审评规范（2010版）
医疗器械生物学试验审评规范（2010版）医疗器械生物学试验审评规范（2010版）一、目的本规范的目的是为了正确、有效地实施GB/T16886医疗器械生物学评价系列标准。
本规范提出了医疗器械生物学试验中试验资料方面的要求，指导检测机构和北京市生产企业进行医疗器械生物学试验。
二、医疗器械生物学试验的基本要求医疗器械生物学试验的目的是确定与人体直接或间接接触的医疗器械/材料是否引起潜在的毒性。
医疗器械/材料不应直接或通过释放材料中的成分引起：（1）局部或全身不良反应；（2）致畸、致突变、致癌性；（3）生殖和发育毒性。
医疗器械生物学评价是在系统试验数据基础上的评价，是为了确保最终产品的受益超过器械材料产生的潜在风险。
当选择适宜的医疗器械生物学评价试验时，应考虑器械所用材料的化学特性，以及和人体接触的性质、程度、频率和时间。
通常这些试验包括：急性毒性、亚慢性和慢性毒性；对皮肤、眼睛和黏膜的刺激；致敏性；血液相容性；遗传毒性；致癌性；以及发育和生殖毒性等。
然而，根据器械的特性、用途以及与人体接触的特性，这些试验也不能充分表明某些特殊器械的安全性。
对于特殊靶器官毒性的附加试验，例如神经毒性和免疫毒性，对某些器械是必须的。
（例如，直接和脑实质以及脑脊液接触的神经器械，应要求动物植入试验，评价对脑实质的影响、癫痫易感性、以及对脉络丛和蛛网膜绒毛分泌和吸收功能机理的影响。
）对于特殊用途和改变用途的医疗器械/材料，应确定哪些试验是适宜的。
对于不同材料构成的多部件医疗器械，宜对所用的每种材料或部件根据临床使用的情况分别进行生物学试验和评价。
三、医疗器械生物学评价标准目前，医疗器械生物学试验主要参考以下国家标准和行业标准：GB/T 16886.1-2001医疗器械生物学评价——第1部分：生物学评价和试验GB/T 16886.2-2000医疗器械生物学评价——第2部分：动物保护要求GB/T 16886.3-2008医疗器械生物学评价——第3部分：遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验GB/T 16886.4-2003医疗器械生物学评价——第4部分：和血液相互作用试验选择（DIS）GB/T 16886.5-2003医疗器械生物学评价——第5部分：体外细胞毒性试验GB/T 16886.6-1997医疗器械生物学评价——第6部分：植入后局部反应试验GB/T 16886.7-2001医疗器械生物学评价——第7部分：环氧乙烷灭菌残留量GB/T 16886.9-2001医疗器械生物学评价——第9部分：潜在降解产物的定性和定量框架GB/T 16886.10-2005医疗器械生物学评价——第10部分：刺激和迟发型超敏试验（DIS）GB/T 16886.11-1997医疗器械生物学评价——第11部分：全身毒性试验GB/T 16886.12-2000医疗器械生物平价第12部分：样品制备与参照样品GB/T 16886.13-2001医疗器械生物学评价第13部分：聚合物医疗器械的降解产物的定性与定量GB/T 16886.14-2003医疗器械生物学评价第14部分：陶瓷降解产物的定性与定量GB/T 16886.15-2003医疗器械生物学评价第15部分：金属与合金降解产物的定性与定量GB/T 16886.16-2003医疗器械生物学评价第16部分：降解产物和可溶出物的毒代动力学研究设计GB/T 16886.17-2005医疗器械生物学评价第17部分：可沥滤物允许限量的建立YY/T 0268-2008牙科学口腔医疗器械生物学评价第1单元：评价与试验YY/T 0127.1-1993口腔材料生物试验方法：溶血试验YY/T 0127.2-1993口腔材料生物试验方法：静脉注射急性全身毒性试验YY/T 0127.3-1998口腔材料生物评价第2单元：口腔材料生物试验方法根管内应用试验YY/T 0127.4-1998口腔材料生物评价第2单元：口腔材料生物试验方法骨埋植试验YY/T 0127.5-1999口腔材料生物评价第2单元：口腔材料生物试验方法吸入毒性试验YY/T 0127.6-1999口腔材料生物评价第2单元：口腔材料生物试验方法显性致死试验YY/T 0127.7-2001口腔材料生物评价第2单元：口腔材料生物试验方法牙髓牙本质应用试验YY/T 0127.8-2001口腔材料生物评价第2单元：口腔材料生物试验方法皮下植入试验YY/T 0127.9-2001口腔材料生物评价第2单元：口腔材料生物试验方法细胞毒性试验：琼脂覆盖法及分子滤过法YY/T 0127.10-2001口腔材料生物评价第2单元：口腔材料生物试验方法鼠伤寒沙门氏杆菌回复突变试验（Ames试验） YY/T 0127.11-2001牙科学用于口腔的医疗器械生物相容性临床前评价2单元：口腔材料生物试验方法盖髓试验医疗器械生物学评价标准GB/T16886.1给出了生物学评价试验及生物学评价流程，但是对于某些新的高风险医疗器械可能还需要补充其它的试验项目。
医疗器械生物学评价第五部分体外细胞毒性试验
医疗器械生物学评价第 5 局部：体外细胞毒性试验1范围GB/T 16886 的本局部阐述了评价医疗器械体外细胞毒性的试验方法。
这些方法规定了以下供试品以直接或通过集中的方式与培育细胞接触和进展孵育；a〕用器械的浸提液，和／或b〕与器械接触。
这些方法是用相应的生物参数测定哺乳动物细胞的体外生物学反响。
2标准性引用文件以下文件中的条款通过GB/T 16886 的本局部的引用而成为本局部的条款。
但凡注日期的引用文件，其随后全部的修改单〔不包括订正的内容〕或均不适用于本局部，然而，鼓舞依据本局部达成协议的各方争论是否可使用这些文件的最版本。
但凡不注日期的引用文件，其最版本适用于本局部。
GB/T 16886. 1 医疗器械生物学评价第1 局部：评价与试验〔GB/T 16886.1-2023,idt ISO 10993- 1:1997〕CB/ T 16886. 12-2023 医疗器械生物学评价第12 局部：样品制备和参照材料〔idt ISO 10993-12 :1996〕3术语与定义GB/ T 16886. 1/ ISO 1993-1 中确立的以及以下术语和定义适用于本局部。
3.13.2 阴性比照材料negative control material依据本局部试验时不产生细胞毒性反响的材料。
注：阴性比照的目的是验证背景反响，例如高密度聚乙烯1〕牙科材料的阴性比照物。
阳性比照材料 pos itive control material依据本局部试验时可重现细胞毒性反响的材料。
已作为合成聚合物的阴性比照材料，氧化陶瓷棒则用作注：阳性比照的白目的是验证相应试验系统的反响，例如用有机锡作稳定剂的聚氯乙烯的阳性比照，酚的稀释液用于浸提液的阳性比照。
2）已用作固体材料和浸提液1)高密度聚乙烯可从美国药典委员会〔Rockvillie, Maryland, USA〕和Hatano 争论所食品和药品安全中心〔Ochiai 729-5 ,Hanagawa.257-Japan〕获得。
临床评价报告
临床评价报告文件编号：XXX产品医疗器械临床评价报告编制/日期：审核/日期：批准/日期：XXX21年X月X日第1页共9页产品名称：XXX产品产品型号：申请者：临床评价单位：临床评价类别：列入《免于进行临床试验的医疗器械目录》产品临床对比评价临床评价负责人（签字）：日期2015年1月11日第2页共9页临床评价报告一、概述我公司（XXXXXXXX）研制开发的XXX产品供临床使用。
根据《医疗器械分类目录》的规定，XXX产品为第二类注射穿刺器械，类别代号为：6815.目前国内已有多个同类产品注册上市，广泛应用多年，其临床上的安全性、有效性早已得到确认。
二、产品设计本产品的设计XXXXXXXX。
三、工作原理XXX产品的工作原理是按无菌操作要求，撕开注射器单包装，去掉注射器保护套，抽取、溶解或配制药液用。
四、市场概况现在市场销售的同类产品主要有XXX等。
这些产品在使用过程未发生过任何意外事故的报道；其中本公司的XXX产品与国内厂家工作原理基本相同。
XXX产品为列入《免于进行临床试验的医疗器械目录》产品，现将申报产品与《目录》所述内容进行对比以判定申报产品是否为列入《目录》产品。
第3页共9页申报产品与《目录》产品的对比表比较项目目录产品申报产品差异性支持性资料名称符合医疗器产品技术要求和产品说产品名称一次性使用配药用注射器 XXXXXXXXXXX械命名规则，二者实质明书等同一次性使用配药用注射器采用符合YY 0242的聚丙烯或对人体无毒副作用的其他高分子材料制成，可由护帽、配药针、外套、干规格，可配侧孔或斜面配药针；产品以无菌形式提供；产品性能指标采用下列参考标准中的适用部分，如：YY/T 0821一次性使用配药用注射器。
描述效果等同，二者实明书产品技术要求和产品说适用范围供抽取或配制药液用。
二者实质等同产品说明书注：支持性资料是指申报产品与《目录》产品的差异性对申报产品的安全有效性不产生影响的理由和依据，可以附件的形式提供。
医疗器械产品技术审评规范(2009版)之
（十二）YY0466-2003 医疗器械 用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号
注：以上标准适用最新版本。
六、产品的预期用途
预期用途至少包含：适用人群、测量参数、使用环境三个方面。
（一）适用人群
如成人、小儿、新生儿、早产儿（或者按照体重划分的）。
8.进入人体自然腔道的呼吸、体温等传感器、电缆破损产生电击的危害。
八、产品的主要技术指标
本部分给出至少需要考虑的产品主要技术性能指标，部分性能指标给出定量要求，其他性能指标因要求不统一或不是强制要求而未给出定量要求。国家标准、行业标准中如有不适用条款，在标准的编制说明中应说明理由。
（一）心电监护部分性能要求
1.企业选用测量部件的型号或编号；
2.选用测量部件的监护仪产品的临床试验报告复印件，并加盖公章；
3.选用测量部件的监护仪产品的医疗器械产品注册证书复印件，并加盖公章。如企业提供的医疗器械产品注册证书不能体现测量部件的相关信息，则应由供方提供取得医疗器械产品注册证书的产品使用选用测量部件的证明材料。
（二）如企业选用非本企业经过临床试验，且已取得医疗器械产品注册证的测量部件，则企业提供以下资料，作为临床评价资料
呼吸率监护部分（热敏电阻法）：采用负温度系数的热敏电阻作为温度传感器，检测随呼吸气体温度变化的电阻值，计算出呼吸率参数。
温度监护部分（热敏电阻法）：采用负温度系数的热敏电阻作为温度传感器，检测随体温变化的电阻值，换算出体温值。
五、产品适用的相关标准
多参数监护仪根据产品自身特点适用以下相关标准：
（一）GB/T 191-2008包装储运图示标志
性能要求至少应包括血氧饱和度测量精度，无创血压测量精度，呼吸率测量精度，体温测量精度等。
无菌医疗器械的生物性能检验
199 7 GB/T 16886.16-2003（采用1997版）
200 2 GB/T 16886.17-2005（采用2002版）
200 5
200 6
200 6
200 0
试验/评价项目的选择
GB/T 16886.1 医疗器械生物学 评价 第1部分：评价与试验
反应分级为无刺激
皮内反应试验
将浸提液（极性和非极性）注射到动物 皮内，观察浸提液对动物的刺激作用 常见的产品：透析器、氧合器、管路、过滤器、 输血输液、注射器具、经皮椎体成型手术器械等
GB/T 14233.2-2005 GB/T 16175-2008 GB/T 16886.10-2005
试验流程
无菌医疗器械的生物性能检验
为什么要进行医疗器械生物性能检验？
• 医疗器械与人体接触、介入或植入体内后会与
人体发生非常复杂的反应过程：
• 组织反应、血液、免疫反应，以及这三种反应
所引起的全身反应
以上三种生物反应在临床上的表现：
渗出物反应； 感染； 钙化； 血栓栓塞； 肿瘤
因此，临床前的生物学试验或生物安全 性评价是必要的！
结果观察（24h和48h）
检验所需时间：至少35d！
结果判定
阴性－－无致敏
阳性： －－对照组动物等级小于1而试验组动物中等
级大于1或等于1 －－对照组动物等级大于1或等于1时，试验
组动物反应超过对照动物中最严重的
刺激试验
用材料或其浸提液做试验，评价生物材料和 医疗器械的潜在刺激原。根据生物材料和医疗器 械的具体使用部位，可选择进行皮肤刺激试验、 皮内刺激试验或粘膜刺激试验等。常使用兔子做 试验
医疗器械工程导论5细胞毒性评价
细胞形态学的检测方法
直接观察
光镜 电镜检测技术
• 透射电镜 • 扫描电镜
组织学染色 免疫细胞化学染色
免疫荧光染色方法 ABC免疫染色方法
细胞活力的检测方法 细胞遗传学的检测方法 有关分子生物学技术
生物学评价
直接观察
相差倒置显微镜
无需制样
体外细胞培养评价技术
细胞形态学的检测方法
直接观察
光镜 电镜检测技术
• 透射电镜 • 扫描电镜
组织学染色 免疫细胞化学染色
免疫荧光染色方法 ABC免疫染色方法
细胞活力的检测方法 细胞遗传学的检测方法 有关分子生物学技术
生物学评价
免疫细胞化学染色
将细胞培养技术与免疫学技术结合
Color Cell/Tissue
Substr. Color
P1成骨细胞(6d)免疫细胞化学染色.× 200
P1成骨细胞(6d)免疫细胞化学染色.× 40
cytotoxicity of Si-substituted HA composite
Immunofluorescence Stain
多光子激光共聚焦显微镜观察结果 正常成骨细胞（细胞骨架） HA/TCP材料表面结构
体外细胞培养评价技术
细胞形态学的检测方法
直接观察
光镜 电镜检测技术
• 透射电镜 • 扫描电镜
组织学染色 免疫细胞化学染色
免疫荧光染色方法 ABC免疫染色方法
细胞活力的检测方法 细胞遗传学的检测方法 有关分子生物学技术
生物学评价
细胞活力检测
染料 克隆（集落）形成试验 四唑盐（MTT）比色试验 Alamar Blue比色试验 碱性磷酸酶测定（ALP） 乳酸脱氢酶测定（LDH） 细胞蛋白质含量测定法 细胞蛋白质合成测定法
35生物学评价控制程序-CE
1、目的为满足MDD93/42/EEC的要求以及适用的法规规定，依据ISO10993（GB/T16886）《医疗器材生物性评估》对公司体系覆盖的医疗器械产品进行生物相容性测试，特制订本控制程序。
2、适用范围适用于带有CE标志产品的生物相容性评价测试。
3、术语、缩略语3.1设计开发小组负责生物相容性的送检和管理。
3.2管理者代表或企业负责人负责委外检测合同的商谈和签订。
4、工作程序4.1材料和器械生物学评价的基本原则4.1.1在选择制造器械所用材料时，应首先考虑材料的特点和性能，包括化学、物理学、电学、形态学和力学等性能。
器械总体生物的评价应考虑以下几个方面:1）生产所用材料；2）助剂、工艺污染和残留；3）可沥滤物质；4）降解产物；5）其他成分以及它们在最终产品上的相互作用；6）最终产品的性能和特点。
4.1.2用于生物学评价的试验与解释应考虑材料的化学成分，包括接触状况和器械及其成份与人体接触的性质、程度、次数和周期，为简化试验选择，根据以下原则对器械分类来指导对材料和最终产品试验。
潜在危害范围很广，可能包括：1）短期作用(如急性毒性，对皮肤、眼和结膜表面刺激、致敏、溶血和血栓形式)；2）长期或特异性毒性作用(如亚慢性或慢性毒性作用、致敏遗传毒性、致癌和对生殖的影响)。
4.1.3每种材料和最终产品都考虑所有潜在的生物危害,但这并不意味着所有已潜在危害的试验都必须进恩施金凰新材料有限公司行。
在下列任何一种情况下，应考虑材料和最终产品重新进行生物评价。
1）制造产品所用的原材料改变时；2）产品配方、特殊工艺改变时；3）贮存期内最终产品中的任何变化；4）产品用途改变时；5）有迹象表明产品用于人体时会产生副作用。
4.2试验1）细胞毒性按标准ISO10993-5要求进行测试；2）迟发性超敏反应按标准ISO10993-10要求进行测试；3）皮肤刺激（皮内）反应按标准ISO10993-10要求进行测试；4）热原反应按标准ISO 10993-11要求进行测试；5）急性毒性按标准ISO 10993-11要求进行测试；5、支持性文件1）ISO10993-5《医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验》2）ISO10993-10《医疗器械生物学评价第10部分：刺激与迟发型超敏反应试验》2）ISO10993-11《医疗器械生物学评价第11部分全身毒性试验验》恩施金凰新材料有限公司。
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精心整理
医疗器械生物学评价
第5部分：体外细胞毒性试验
1范围
GB/T16886的本部分阐述了评价医疗器械体外细胞毒性的试验方法。
这些方法规定了下列供试品以直接或通过扩散的方式与培养细胞接触和进行孵
育；
a）用器械的浸提液，和／或
b）与器械接触。
这些方法是用相应的生物参数测定哺乳动物细胞的体外生物学反应。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过GB/T16886的本部分的引用而成为本部分的条款。
凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用
于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。
GB/T16886.1医疗器械生物学评价第1部分：评价与试验
（GB/T16886.1-2001,idtISO10993-1:1997）
CB/T16886.12-2000医疗器械生物学评价第12部分：样品制备和参照材料
（idtISO10993-
12:1996）。