百里醌对小鼠辐射防护作用
Mucin—4在百里醌抑制肝癌生长中的作用
Mucin—4在百里醌抑制肝癌生长中的作用目的探討百里醌对体内外肝癌生长的影响，并对其机制进行初步探讨。
方法不同浓度百里醌作用人肝癌细胞株SMMC-7721后，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测其对细胞生长的抑制作用；Hoechst染色后荧光显微镜下观察细胞形态学变化；RT-PCR检测Mucin-4 mRNA在SMMC-7721细胞中的表达；Western blotting检测肝癌细胞中Mucin-4蛋白表达；建立裸鼠肝癌皮下移植模型，完全随机法分为对照组和低（10 μmol/L）、中（20 μmol/L）、高剂量（40 μmol/L）百里醌组，观察不同剂量百里醌对裸鼠肝癌皮下移植瘤生长的影响；免疫组织化学法检测肿瘤组织中Mucin-4的阳性表达。
结果不同浓度（10、20、40 μmol/L）百里醌作用人肝癌SMMC-7721 24 h后，细胞存活率分别为（80.14±9.84）%、（71.68±6.51）%和（64.58±5.24）%；百里醌作用后，SMMC-7721细胞出现典型凋亡形态学改变；百里醌干预后SMMC-7721细胞中Mucin-4蛋白和mRNA 的表达均明显下调，呈浓度依赖性；实验结束后，对照组和低、中、高剂量百里醌组肿瘤体积分别为（1056.3±236.3）、（672.3±178.8）、（529.4±165.7）、（473.1±141.5）mm2，各百里醌组肿瘤体积明显低于对照组（P＜0.05），低、中、高剂量百里醌组抑瘤率分别为36.5%、49.9%和30.3%；百里醌可明显降低肿瘤组织中Mucin-4的阳性表达。
结论百里醌可显著抑制体内外肝癌生长，该作用可能通过抑制Mucin-4的表达而实现。
[Abstract] Objective To investigate the effect and the mechanism of thymoquinone in the growth inhibition of liver cancer.Methods The human liver cancer cell line SMMC-7721 was treated with different concentrations of thymoquinone，the cellular proliferation was assessed by methyl thiazolyl tetrazolium （MTT）method.SMMC-7721 cells morphological changes were observed under the fluorescence microscopy after Hoechst staining.The expression of Mucin-4 mRNA was detected by RT-PCR.Western blotting was used to detect the expression of Mucin-4 in liver cancer cells.Furthermore，human liver cancer model was set up by using SMMC-7721 cells.While the tumors grew with diameter of approximate 3 mm，mice were randomized into the control group，low dose thymoquinone group，middle dose thymoquinone group，high dose thymoquinone group.All treatment lasted for three weeks，thrice per week.Six weeks after implantation，tumor weight and inhibition rate was evaluated respectively after the mice were sacrificed.Immunohistochemistry was used to detect the positive expression of Mucin-4 in the tumors.Results The survival rate of cells after different dose （10，20，40 μmol/L）of human liver cancer cell line SMMC-7721 was （80.14±9.84）%，（71.68±6.51）% and （64.58±5.24）% respectively.Thymoquinone caused nuclear condensation and chromatin margination in SMMC-7721 cells.The expression of Mucin-4 protein and mRNA was down-regulated in SMMC-7721 cells after treatment of thymoquinone.After the study，the tumor volume of the control group，low dose thymoquinone group，middle dose thymoquinone group and high dose thymoquinone group was （1056.3±236.3），（672.3±178.8），（529.4±165.7），（473.1±141.5）mm2 respectively，the thymoquinone group was less than that of the control groupobviously （P＜0.05），the tumor inhibitory rate was 36.5% in the low dose thymoquinone group，49.9% in the middle dose thymoquinone group and 30.3% in the high dose thymoquinone group.Furthermore，the positive expression of Mucin-4 was decreased in tumors after treatment of thymoquinone.Conclusion Thymoquinone exerts anti-tumor activity on liver cancer both in vitro and in vivo，which may be related to down-regulation of Mucin-4.[Key words] Liver cancer；Thymoquinone；Mucin-4肝癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一，全球癌死亡率排第3位，预后差，死亡率高，严重危害人类的健康和生命[1]。
鲜皇浆的抗辐射损伤作用研究
鲜皇浆的抗辐射损伤作用研究陈玉满;陈江;吴惠岭;傅剑云;徐彩菊【期刊名称】《中国卫生检验杂志》【年(卷),期】2005(15)7【摘要】目的:探讨鲜皇浆对小鼠辐射损伤的保护作用。
方法:将160只小鼠随机分为3个试验组,剂量分别为0.80、1.78、5.00g/kg,另设一个辐射对照组,每天灌胃1次,连续30d后,各组均以60Co射线进行一次全身照射,并继续给样品,根据检测指标选择不同的照射剂量。
辐照前、辐照后第3和14天进行外周血细胞计数;辐照后第3天进行骨髓有核细胞计数和骨髓细胞微核试验;辐照后第7天进行超氧化物歧化酶(SOD)活力测定;辐照后第14天测定血清溶血素。
结果:3个试验组小鼠外周血白细胞数、骨髓有核细胞数和血清溶血素含量明显高于辐射对照组(P<0.05),骨髓微核率明显低于辐射对照组(P<0.05),血清SOD活力高于辐射对照组,但无显著性差异(P>0.05)。
结论:鲜皇浆对辐射损伤具有一定的防护作用。
【总页数】3页(P795-797)【关键词】鲜皇浆;辐射损伤;外周白细胞;骨髓有核细胞数;微核;超氧化物歧化酶;溶血素【作者】陈玉满;陈江;吴惠岭;傅剑云;徐彩菊【作者单位】浙江省疾病预防控制中心【正文语种】中文【中图分类】R818.74【相关文献】1.鲜皇浆蜂胶混合物抗辐射作用的实验观察 [J], 陈玉满;傅剑云2.蚁皇浆口服液抗衰老作用的实验研究 [J], 张效云;赵铁军;董明纲;闫志宏3.中药抗电离辐射损伤作用的研究概况 [J], 王承; 黄月英; 唐大海4.补肾解毒方抗核辐射损伤作用机制研究 [J], 杨云霜;赵雪;杜磊;李延晖;石鹏展;SABUR Sanzhar;张蓉5.人参抗辐射损伤作用与研究进展 [J], 廖小立;陶宏婷;何谋海;张红艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
藤茶提取液对电离辐射损伤造血系统的防护作用研究
㊀第44卷㊀第2期2024年㊀3月㊀辐㊀射㊀防㊀护Radiation㊀ProtectionVol.44㊀No.2㊀㊀Mar.2024㊃辐射生物影响㊃藤茶提取液对电离辐射损伤造血系统的防护作用研究王志允1,勾文峰2,郭江红2,许飞飞2,李祎亮2,侯文彬2(1.天津中医药大学,天津301617;2.中国医学科学院放射医学研究所,天津市放射医学与分子核医学重点实验室,天津300192)㊀摘㊀要:采用1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH )和总抗氧化能力检测(ABTS )两种方法体外检测藤茶提取液的抗氧化能力;然后进行生存率实验,将40只雄性C57BL /6J 小鼠随机分为照射组㊁照射+藤茶提取液低㊁中㊁高剂量组(0.8g /kg ㊁1.6g /kg ㊁2.4g /kg ),所有小鼠均进行致死剂量7.2Gy 照射,检测藤茶提取液对照射后小鼠的生存影响;随后在电离辐射损伤造血系统实验中将50只雄性C57BL /6J 小鼠随机分为5组:空白对照组㊁照射组㊁照射+藤茶提取液低㊁中㊁高剂量组,经4Gy 全身照射后,观察藤茶提取液对电离辐射后小鼠脏器指数㊁造血指标等的影响,并测定肝脏中总超氧化物歧化酶(T-SOD )和谷胱甘肽(GSH )的变化㊂实验结果表明,藤茶提取液对DPPH 自由基清除率为74.35%,对ABTS 自由基清除率为93.14%,能够提高7.2Gy 照射下小鼠的生存率(照射组生存率为30%,低剂量组生存率为100%,中剂量组生存率为90%,高剂量组生存率为90%),并改善4Gy 全身照射所导致造血系统损伤小鼠的脏器指数和造血指标,还能升高照射小鼠肝脏中T-SOD 活力以及GSH 的含量㊂藤茶提取液具有较强的抗氧化能力,能提高电离辐射后小鼠的生存率,并改善其引起的造血系统损伤,有望成为电离辐射导致造血系统损伤的中药防护剂㊂关键词:藤茶提取液;抗氧化能力;造血损伤;电离辐射防护中图分类号:R818文献标识码:A㊀㊀收稿日期:2023-08-11基金项目:国家自然科学基金项目资助(82104012);中国医学科学院医学与健康科技创新工程重大协同创新项目资助(2021-I2M -1-042)㊂作者简介:王志允(1997 ),男,2019年毕业于西安医学院中药学专业,现为天津中医药大学中药学硕士研究生㊂E -mail:w1352579865@通信作者:侯文彬㊂E -mail:houwenbin@㊀㊀电离辐射损伤的防护是支撑国家公共安全体系建设的重要内容之一,随着电离辐射在医疗㊁工业㊁农业等多个领域的广泛应用,电离辐射损伤的防护越来越受到关注和重视㊂电离辐射往往会诱导产生大量自由基,尤其是活性氧(Reactive oxygen species,ROS),这会导致机体的抗氧化系统失衡,产生急性损伤㊁免疫功能衰退等现象,然而相应的防护却仍缺乏行之有效的手段[1]㊂造血系统对于电离辐射尤为敏感,造血系统的损伤常常是导致死亡的重要原因,而照射后造血功能的恢复与否则是电离辐射防护的关键所在[2]㊂目前所应用的电离辐射防护药物往往存在如毒副作用大㊁功效单一等限制,难以有效的恢复机体功能,因此,寻找安全㊁有效的辐射防护剂已成为目前辐射领域研究的热点及难点[3]㊂中医药具有整体治疗的特点,在现代中医药发展进程中发现,中药能够对辐射引起的多器官损伤具有广泛保护作用[4];中医认为,辐射乃火热之邪,基本病机表现为伤阳耗气,不仅能干扰脏器功能,还能使机体气血亏虚,阴阳失调㊂目前,已发现清热类中药能清解热毒,对于电离辐射导致的损伤具有较好的保护作用[5-8]㊂藤茶(Ampelopsis grossedentata )为葡萄科蛇葡萄属显齿蛇葡萄的干燥叶,其性凉,味甘㊁酸;能入脾㊁胃㊁肺经;分布于我国长江流域以南,在湖南㊁广东等地多作为茶饮,有清热解毒㊁润肺生津㊁健㊃281㊃王志允等:藤茶提取液对电离辐射损伤造血系统的防护作用研究㊀脾和胃等功效[9-10];现代研究表明藤茶具有抗氧化㊁抗炎等作用㊂藤茶提取物可通过升高小鼠体内超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)㊁还原型谷胱甘肽(Reduced glutathione,GSH)等相关抗氧化物的活性来阻止小鼠体内脂质的过氧化从而调节机体抗氧化系统平衡[11];同时藤茶提取物能够过抑制NF-κB和MAPK等信号通路抑制炎症反应来发挥抗炎作用[12]㊂本研究采用137Csγ射线对小鼠进行全身照射建立电离辐射损伤造血系统模型,研究藤茶提取液对辐射损伤小鼠造血系统的防护作用,为藤茶在电离辐射防护等方面的应用提供实验依据㊂1㊀材料与方法1.1㊀动物㊀㊀90只C57BL/6J小鼠,雄性,SPF级,体重(20ʃ2)g(购自北京华阜康生物科技股份有限公司,生产批号:SCXK(京)2019-0008),饲养在中国医学科学院放射医学研究所的无特定病原体级实验动物中心,动物许可证号:SYXK(津)2019-0002,相对湿度40%~60%,饲养温度18~25ħ,光明和黑暗每12小时交替一次㊂1.2㊀药物与试剂㊀㊀藤茶(购自湖南省郴州市永兴县湘阴渡街道石塘村,由天津市药物研究院周福军老师鉴定为葡萄科蛇葡萄属显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata的干燥叶,生产批号为20200512);1, 1-二苯基-2-苦基肼自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)购自梯希爱(上海)化成工业发展有限公司;奎诺二甲基丙烯酸酯(Trolox),为维生素E类似物,购自上海阿拉丁生化科技股份有限公司;总抗氧化能力检测试剂盒(Total Antioxidant Capacity Assay Kit with ABTS method, ABTS法)以及BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)均购自上海碧云天生物技术有限公司;总超氧化物歧化酶(Total-superoxide dismutase,T-SOD)测试盒(羟胺法)㊁还原型谷胱甘肽(Glutathione, GSH)测定试剂盒(微板法)均购自南京建成生物工程研究所㊂1.3㊀照射条件㊀㊀应用Gammacell 40Exactor137Csγ射线照射源(加拿大Best Theratronics公司)对照射组以及照射+藤茶提取液低㊁中㊁高各剂量组小鼠进行全身照射,剂量率0.99Gy/min㊂1.4㊀藤茶提取液的制备㊀㊀应用加热回流法进行提取,精密称取藤茶50.000g(万分之一天平,美国奥豪斯公司),加入纯水1000mL(超纯水系统,Millipore公司),煮沸提取半小时,过滤,将滤液放入烧杯中静置放凉,滤渣中再加入纯水1000mL,提取半小时,合并滤液,静置放凉后进行离心,5000r/min离心20 min,上清液即为藤茶水提液㊂1.5㊀DPPH法测定藤茶提取液抗氧化能力㊀㊀精密称取1.97mg DPPH,加入25mL无水乙醇配制成浓度为200μmol/L的DPPH储备液,并避光保存㊂在96孔板上按照浓度梯度顺序每孔加入20μL不同浓度的藤茶提取液(以无水乙醇配制,最终浓度分别为0㊁0.25㊁0.5㊁1㊁2㊁4㊁6㊁8μg/mL),每个浓度设置3个平行实验组,以等量的无水乙醇作为空白对照㊂以上每孔各加入180μL浓度为200μmol/L的DPPH储备液,室温下避光静置孵育30min,使用酶标仪(Infinite F Plex 酶标仪,瑞士Tecan公司)测定各孔在517nm波长处的吸光度值,并计算藤茶提取液对DPPH自由基的清除率:DPPH自由基的清除率=A0-A1Aˑ100%式中,A1为藤茶提取液的吸光度值;A0为空白对照的吸光度值㊂1.6㊀ABTS法测定藤茶提取液抗氧化能力㊀㊀按照ABTS法总抗氧化能力检测试剂盒说明书操作,室温条件下,提前12~16h预先配制ABTS工作母液(将ABTS溶液与氧化剂溶液1ʒ1等体积混匀),使用前用80%乙醇50倍稀释配置成ABTS工作液㊂于96孔板按照浓度梯度顺序依次在每孔中加入10μL不同浓度的藤茶提取液(以80%乙醇配制,最终浓度分别为0㊁0.25㊁0.5㊁1㊁2㊁4㊁6㊁8μg/mL),每个浓度设置3个平行实验组,以等量的80%乙醇作为空白对照㊂以上每孔各加入200μL ABTS工作液,室温下避光静置5 min,使用酶标仪测定其在405nm波长处的吸光度值,并计算藤茶提取液对ABTS自由基的清除率:㊃381㊃㊀辐射防护第44卷㊀第2期ABTS自由基的清除率=A0-A1A0ˑ100%式中,A1为藤茶提取液的吸光度值;A0为空白对照的吸光度值㊂1.7㊀动物的分组及处理㊀㊀生存率实验分组:40只小鼠随机分为4组,分别为照射组㊁照射加藤茶提取液低剂量组(0.8g/ kg)㊁照射加藤茶提取液中剂量组(1.6g/kg)㊁照射加藤茶提取液高剂量组(2.4g/kg),每组10只㊂辐射损伤造血系统实验分组:50只小鼠随机分为5组,分别为空白对照组㊁照射组㊁照射+藤茶提取液低剂量组(0.8g/kg)㊁照射+藤茶提取液中剂量组(1.6g/kg)㊁照射+藤茶提取液高剂量组(2.4g/kg),每组10只㊂1.8㊀给药与照射㊀㊀生存率实验:灌胃给药,按照小鼠体重以10 mL/kg的剂量分别对藤茶提取液低剂量组(0.8g/ kg)㊁中剂量组(1.6g/kg)㊁高剂量组(2.4g/kg)进行给药,同时照射组给予等量的水㊂在连续给药5天后,对照射组以及藤茶提取液低㊁中㊁高三个剂量给药组进行全身7.2Gy的致死剂量照射㊂照射后,再连续给药7天,期间记录小鼠的存活数量和存活天数,并进行分析㊂辐射损伤造血系统实验:灌胃给药,按照小鼠体重以10mL/kg的剂量分别对藤茶提取液低剂量组(0.8g/kg)㊁中剂量组(1.6g/kg)㊁高剂量组(2.4g/kg)进行给药,同时空白对照组与照射组每天给予等量的水㊂给药5天后,对照射组以及藤茶提取液低㊁中㊁高三个剂量给药组进行全身4 Gy的照射以建立辐射损伤造血系统模型㊂照射后连续给药7天,期间观察小鼠状态变化,7天后,处死小鼠并测定相关指标㊂1.9㊀生存率分析㊀㊀照射后,每天记录各组实验小鼠的存活情况㊂照射后第30天处死全部存活小鼠,并对实验小鼠的存活率和存活天数进行数据分析㊂1.10㊀外周血指标检测㊀㊀照射后第7天,经眼球摘除法收集小鼠血液于含有乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)的抗凝管中,应用全自动血液分析仪(BC-2800vet全自动血液分析仪,深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)对血样进行检测,记录包括血液红细胞数㊁白细胞数㊁血小板数㊁中性粒细胞数以及淋巴细胞数等各项指标的变化㊂1.11㊀股骨骨髓有核细胞数目检测㊀㊀取小鼠单侧股骨,用无菌注射器抽取1mL预冷的PBS液,并轻轻插入股骨的骨髓腔,缓慢冲出骨髓细胞(骨内的软红色组织)并收集,直到所有的红色骨髓被移除,观察到骨骼颜色为白色为止㊂将收集到的骨髓细胞悬液置于冰上并摇匀,经200目筛网过滤后,应用全自动血液分析仪,检测股骨骨髓有核细胞数目㊂1.12㊀脏器指数计算㊀㊀于照射后第7天,取血前称量各组小鼠体重,脱颈处死后摘取各组的胸腺㊁性腺㊁胰腺㊁脾㊁肺㊁肾等脏器并称重而后计算脏器指数:脏器指数=脏器质量(g)/小鼠质量(g)1.13㊀T-SOD活力和GSH含量检测㊀㊀照射后7天,摘取各组小鼠的新鲜肝脏,并从中准确称取40mg,按照重量体积比(gʒmL)= 1ʒ9的比例加入预冷的生理盐水(0.9%)360μL,在冰水浴的条件下,进行机械匀浆,制备成10%的匀浆液,3000r/min离心10min,取上清液分装待测㊂并应用BCA的方法测定肝脏组织中的蛋白浓度,按照试剂盒说明书进行T-SOD活力与GSH 含量的测定㊂1.14㊀统计学处理㊀㊀实验数据采用Graphpad Prism8.0.1统计分析软件进行数据处理与分析,对数据结果进行组间两两比较,采用t检验或方差分析进行统计学分析,其中p<0.05表示有显著性差异,p<0.01表示有非常显著性差异㊂2㊀结果2.1㊀藤茶提取液的体外抗氧化能力检测㊀㊀DPPH和ABTS是常见的评价亲脂性和亲水性物质抗氧化能力的检测方法,因此我们运用这两种方法对藤茶提取液的抗氧化能力展开检测,结果示于图1㊂在DPPH检测藤茶提取液的抗氧化能力实验中,随着藤茶提取液浓度的增加,其对DPPH自由基的清除率也随之升高,并在1μg/mL 的浓度下趋于稳定,此时的自由基清除率为69.7%,而对照Trolox对应的自由基清除率为83.87%㊂结果表明,藤茶对DPPH自由基的清除㊃481㊃王志允等:藤茶提取液对电离辐射损伤造血系统的防护作用研究㊀率在相同浓度下虽然不如阳性对照Trolox,但仍具备一定的自由基清除能力(图1A)㊂为了验证藤茶的抗氧化能力,我们又采用了ABTS 法测定藤茶的抗氧化能力,随着藤茶提取液浓度的增加,其对ABTS 自由基的清除能力逐渐增加直至整体趋势最终趋于平缓,呈现出了较为明显的量效关系(图1B)㊂和DPPH 自由基清除率相比,藤茶提取液对ABTS 自由基的清除率更强,当样品浓度为4μg /mL 及以上时,藤茶提取液的清除率逐渐趋于稳定,达到了90.9%,此时,对照Trolox 的清除率为96.9%㊂通过DPPH 和ABTS 两种方法测定藤茶提取液的抗氧化能力,可以发现,相比之下,藤茶提取液对水溶性自由基ABTS 的清除率更好,而对脂溶性的自由基DPPH 的清除率较低,说明藤茶提取液在体外具有着较强的水溶性自由基清除能力来发挥抗氧化作用㊂A:不同浓度藤茶提取液对DPPH 自由基的清除能力;B:不同浓度藤茶提取液对ABTS 自由基的清除能力㊂图1㊀藤茶提取液对DPPH 和ABTS 自由基的清除能力Fig.1㊀Scavenging ability of DPPH and ABTS free radicals from the Ampelopsis grossedentata extract2.2㊀藤茶提取液对致死剂量照射下小鼠生存率的影响㊀㊀在致死剂量(7.2Gy)照射后,可以观察到小鼠出现了皮毛干枯㊁食欲减退㊁行动迟缓等表现,从照射后第11天开始,照射组小鼠开始出现了死亡,并在随后的几天内出现了死亡持续(见图2);与照射组相比,照射+藤茶提取液低剂量组㊁中剂量组㊁高剂量组的小鼠死亡数目均有所减少,其中低剂量组的生存率为100%(图2A,p <0.01),中剂量组和高剂量组的生存率为90%(图2B 和C,p <0.01),而照射组的生存率最终为30%,相比之下,藤茶提取液低㊁中㊁高剂量组的生存率均明显提高且差异非常显著㊂Kaplan Meier 生存分析(图2A~C 中虚线)显示,照射组的中位生存时间为16天,低中高各个剂量组的中位生存时间为30天,由此可见藤茶提取液能够显著延长致死剂量照射下小鼠的存活时间,提高生存率㊂2.3㊀藤茶提取液对照射后小鼠外周血指标的影响㊀㊀造血系统对辐射极为敏感,我们对照射后各组小鼠外周血的血常规指标展开检测,结果如图3所示㊂由图3可见,与空白对照组相比,经4Gy137Cs γ射线全身照射后,照射组的小鼠外周血中的红细胞计数㊁白细胞计数㊁血红蛋白含量㊁淋巴细胞百分比以及血小板计数显著减少(图3A ~E,p <0.01),而中性粒细胞百分比增加非常显著(图3F,p <0.01);与照射组相比较,照射后,藤茶提取液各剂量组的小鼠外周血中的红细胞计数㊁白细胞计数以及血红蛋白含量相比之下均有了明显的增加(图3A ~C,p <0.05),但是藤茶提取液各剂量组小鼠外周血中的淋巴细胞百分比以及血小板计数没有明显的改变(图3D ~E)㊂与照射组比较,中性粒细胞的百分比在藤茶提取液低剂量给药的情况下没有显著性的降低,但随着给药剂量的增加,中㊁高剂量组的中性粒细胞百分比下降明显,且差异显著(图3F,p <0.01)㊂综合外周血指标的变化,发现藤茶提取液能够显著改善照射后外周血的红细胞计数㊁白细胞计数㊁血红蛋白含量以及中性粒细胞百分比,但对于外周血中的淋巴细胞百分比与血小板计数没有㊃581㊃㊀辐射防护第44卷㊀第2期A:低剂量组(0.8g /kg)藤茶提取液对照射后小鼠生存率的影响;B:中剂量组(1.6g /kg)藤茶提取液对照射后小鼠生存率的影响;C:高剂量组(2.4g /kg)藤茶提取液对照射后小鼠生存率的影响;图中虚线为各组小鼠的中位生存时间㊂∗∗代表与照射组相比,p <0.01㊂图2㊀不同剂量的藤茶提取液对7.2Gy 剂量照射下小鼠生存率的影响Fig.2㊀Different dose of Ampelopsis grossedentata extract effect on survival rate of mice irradiated at 7.2GyA:红细胞计数;B:白细胞计数;C:血红蛋白含量;D:淋巴细胞百分比;E:血小板计数;F:中性粒细胞百分比㊂#代表与空白对照组相比,p <0.05;##代表与空白对照组相比,p <0.01;∗代表与照射组相比,p <0.05;∗∗代表与照射组相比,p <0.01㊂图3㊀藤茶提取液对照射后小鼠外周血的各项指标的影响Fig.3㊀Effect of Ampelopsis grossedentata extract on peripheral blood indexes of irradiated mice明显的改善作用,说明藤茶提取液能够有效的改善且部分恢复辐射对于造血系统的损伤,具有一定的辐射防护作用㊂2.4㊀藤茶提取液对照射后小鼠脏器指数的影响㊀㊀组织的变化往往一定程度上反映着辐射对机体的损伤程度,所以我们对照射后小鼠体内各部位脏器的脏器指数展开研究,结果如图4所示㊂图4结果显示:与空白对照组相比,经4Gy 全身照射后,照射组小鼠的脏器均有不同程度的损伤,小鼠的脾脏指数和胸腺指数有了非常显著性的降低(图4A,4D,p <0.01),说明照射对发挥造血功能的主要脏器造成了较为明显的损伤;同时,小鼠的肾和性腺等脏器在照射后也有一定程度的损伤㊂与照射组相比,藤茶提取液给药的各个剂量组当中,中剂量组给药的脾脏指数和胸腺指数有显著升高(图4A,4D,p <0.05),说明藤茶提取液㊃681㊃王志允等:藤茶提取液对电离辐射损伤造血系统的防护作用研究㊀A:脾脏器指数;B:肺脏器指数;C:肾脏器指数;D:胸腺脏器指数;E:性腺脏器指数;F:胰腺脏器指数㊂#代表与空白对照组相比,p <0.05;##代表与空白对照组相比,p <0.01;∗代表与照射组相比,p <0.05;∗∗代表与照射组相比,p <0.01㊂图4㊀藤茶提取液对照射后小鼠脏器指数的影响Fig.4㊀Effect of Ampelopsis grossedentata extract on viscera index of irradiated mice对辐射损伤的主要造血脏器如脾脏㊁胸腺有一定的保护作用,但对其他脏器如肺㊁肾㊁性腺㊁胰腺等,无明显的保护作用(图4B㊁C,E㊁F)㊂2.5㊀藤茶提取液对照射后小鼠股骨骨髓有核细胞数的影响㊀㊀辐射往往会造成骨髓造血细胞的凋亡和坏死,因此我们对照射后小鼠的股骨有核细胞数进行检测,结果如图5所示㊂图5结果显示:与空白对照组相比,照射组的股骨骨髓有核细胞数显著降低(p <0.05),说明照射对于小鼠的股骨骨髓有核细胞造成了严重的损伤㊂与照射组相比,藤茶提取液各个剂量组的股骨骨髓有核细胞数均有一定的增长,其中高剂量的增加具有显著性(p <0.05),证明了藤茶提取液能够缓解照射导致的小鼠骨髓造血细胞损伤,具有一定的辐射防护作用㊂2.6㊀藤茶提取液对照射后小鼠肝脏中T-SOD 活力和GSH 含量的影响㊀㊀为验证藤茶提取液是否在体内也能发挥抗氧化能力,清除辐射产生的自由基以达到辐射防护的效果,首先检测了小鼠肝脏中T-SOD 活力,结果示于图6A㊂由图6A 可见,与空白对照组相比,照#代表与空白对照组相比,p <0.05;∗代表与照射组相比,p <0.05㊂图5㊀藤茶提取液对照射后小鼠股骨骨髓有核细胞数影响Fig.5㊀Effect of Ampelopsis grossedentata extract onthe number of BMNC in the irradiated mice射组小鼠肝脏中的T-SOD 含量显著性下降(p <0.01),说明照射后,由于水在小鼠体内电离产生了大量自由基导致小鼠体内抗氧化酶的含量下降明显,损害了机体的氧化还原平衡,进而导致机体损伤严重㊂与照射组相比,藤茶提取液的各个剂㊃781㊃㊀辐射防护第44卷㊀第2期量组均能够显著升高小鼠肝脏中T-SOD 的活力,其中低剂量组的恢复效果最为显著(p <0.01)㊂随后,又对小鼠肝脏中的GSH 含量进行了检测,结果示于图6B㊂由图6B 可见,与空白对照组相比,照射组的小鼠肝脏中GSH 含量下降显著(p <0.01),说明了照射后,小鼠肝脏中的非酶性抗氧化物含量也受到了严重影响,而与照射组相比,藤茶提取液的各个剂量组均能升高小鼠肝脏中的GSH 含量,其中中剂量组小鼠肝脏中的GSH 含量恢复最为明显(p <0.05),具有显著性差异㊂上述实验结果说明,藤茶提取液能够提高机体的T-SOD 活力与GSH 含量,增强机体的抗氧化能力,从而清除辐射产生的大量自由基,有效减弱辐射所导致的肝脏损伤㊂A:肝脏中T-SOD 的活力变化;B:肝脏中GSH 的含量变化㊂#代表与空白对照组相比,p <0.05;##代表与空白对照组相比,p <0.01;∗代表与照射组相比,p <0.05;∗∗代表与照射组相比,p <0.01㊂图6㊀藤茶提取液对照射后小鼠肝脏中T-SOD 活力和GSH 含量的影响Fig.6㊀Effect of Ampelopsis grossedentata extract on T-SOD activity and GSH content in liver of irradiated mice3㊀讨论电离辐射的本质是一种能量[13],由射线(X射线/γ射线)或者粒子组成,当生物机体受到电离辐射后往往会导致急性放射损伤,这是一种由短时间内高剂量照射全身或部分机体而引起的疾病,造血系统损伤就是其中的代表性疾病之一[14-16]㊂针对当前电离辐射的应用前景以及可能带来的辐射损伤,目前对于急性放射损伤的药物很少,这其中最具代表性的就是氨磷汀(WR2721)[17-18],但这类药物往往具有较大的毒副作用(呕吐㊁恶心和低血压等)[14,19],严重影响了临床应用,所以寻找新的辐射防护药物的要求已经越来越迫切㊂中药是以中国传统医药理论来指导采集㊁炮制㊁制剂,说明作用机理,并指导临床应用的药物,具备药源广㊁毒性低㊁多靶点㊁多层次治疗的优点,因此越来越多的科研工作者将目光转向这一领域,并发现了中药在辐射防护这一领域的广大应用前景[8,20-21]㊂研究发现,许多清热类中药在辐射损伤的研究中具有显著的防护效果,如白鲜皮[5]㊁芦荟[6]㊁黄杞叶[7]等等㊂藤茶能清热解毒㊁润肺生津㊁健脾和胃,且具有着一定的抗氧化作用,体外抗氧化实验证明[22],藤茶能够有效的清除自由基,因此,我们推断藤茶能够清除体内电离辐射所产生的大量自由基,发挥一定的保护作用㊂本实验对小鼠进行致死剂量照射(7.2Gy),生存率实验证实藤茶提取液能显著延长小鼠存活时间,表现出了良好的辐射防护效果㊂众所周知,造血系统对辐射极为敏感,当机体遭受电离辐射时,最先发生变化的就是血液学改变[23]㊂为了验证藤茶提取液能否对造血系统发挥辐射防护作用,我们采用4Gy 的全身照射来构建辐射损伤造血系统模型,研究结果显示,在照射后,照射组小鼠外周血的血常规指标有着显著的变化[7,23-27],而与照射组相比,藤茶提取液的给药组具有较为明显的改善㊂此外,我们还统计了小鼠的脏器指数,发现在照射后,除了小鼠的主要造血脏器如脾脏和胸腺的脏器指数发生了显著性的下降[24],其余脏器指数如肺㊁肾㊁性腺㊁胰腺等脏器指数没有明显变化,说明只有小鼠的造血系统㊃881㊃王志允等:藤茶提取液对电离辐射损伤造血系统的防护作用研究㊀相关的脏器受到了严重损害,其余脏器目前表现还不明显;但是藤茶提取液的给药组的脾脏和胸腺脏器指数相对于照射组来说,是有明显的升高的,说明藤茶提取液能够恢复照射后小鼠的造血脏器的功能,缓解照射对造血脏器的损伤㊂骨髓是机体最主要的造血器官,在照射后,小鼠股骨骨髓有核细胞数明显减少[7,25-26],说明照射已经严重损坏了机体的造血功能,相比之下,藤茶给药组能够升高照射后的股骨骨髓有核细胞数,恢复机体的造血功能㊂T-SOD与GSH是机体中重要的还原剂,多在肝脏中参与机体的代谢进程,能够在一定程度上反映机体抗氧化体系的功能状态㊂T-SOD可减轻由辐射产生的大量自由基引起的氧化损伤,提高机体抗氧化能力[27-28];而GSH能够还原体内有害的过氧化物来保护机体[22,27]㊂研究结果显示,藤茶给药组能够缓解照射后小鼠肝脏中T-SOD与GSH含量的下降,说明藤茶提取液能够发挥抗氧化作用,清除辐射所产生的自由基来发挥防护的能力[22,29]㊂综上所述,藤茶提取液具备一定的抗氧化能力,能够提高致死剂量照射下小鼠的生存率与中位生存时间,并能够缓解辐射导致的造血系统损伤,表现出一定的辐射防护能力,为中药在辐射防护领域的开发与应用提供实验依据,促进中药的现代化应用与发展;但是由于辐射损伤造血系统的机制复杂,影响因素繁多,所以藤茶具体发挥辐射防护作用的有效成分以及相关的作用机制,还有待进一步深入研究㊂参考文献:[1]㊀陈军,张李栋,陈乐如,等.电离辐射损伤医学防护剂研究进展[J].中华放射医学与防护杂志,2020,40(7):554-558.CHEN Jun,ZHANG Lidong,CHEN Leru,et al.Research progress of medical protective agents against ionizing radiation damage[J].Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection,2020,40(7):554-558.[2]㊀Avecilla S T,Hattori K,Heissig B,et al.Chemokine-mediated interaction of hematopoietic progenitors with the bonemarrow vascular niche is required for thrombopoiesis[J].Nature Medicine,2004,10(1):64-71.[3]㊀徐小静,许小琴,张杏兰.氨磷汀治疗鼻咽癌患者的不良反应观察与护理[J].当代护士(下旬刊),2016(9):84-86.XU Xiaojing,XU Xiaoqin,ZHANG Xinglan.Observation and nursing of adverse reactions in patients with nasopharyngeal carcinoma treated with amifostine[J].Contemporary Nurses(The Next Ten-day Issue),2016(9):84-86. [4]㊀程晓妮,潘亚磊,唐志书,等.中药抗辐射及机制研究新进展[J].中南药学,2020,18(11):1846-1851.CHENG Xiaoni,PAN Yalei,TANG Zhishu,et al.New progress in the research of anti-radiation and its mechanism of traditional Chinese medicine[J].Central South Pharmacy,2020,18(11):1846-1851.[5]㊀兰玉艳,李岩.白鲜皮提取物对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用[J].北华大学学报(自然科学版),2018,19(2):201-204.LAN Yuyan,LI Yan.Protective effect of extract from Root-bark of densefruit pittany on hematopoietic function in radiation injured mice[J].Journal of Beihua University(Natural Science),2018,19(2):201-204.[6]㊀马宏伟,王宗伟,吴庆光.芦荟多糖对肿瘤细胞生产周期的影响[J].医药论坛杂志,2006,27(1):37-40.MA Hongwe,WANG Zongwei,WU Qingguang.Effect of Aloe Polysaccharides on the production cycle of tumor cells[J].Journal of Medical Forum,2006,27(1):37-40.[7]㊀吴少华,常华杰,勾文峰,等.黄杞叶提取物对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用[J].国际放射医学核医学杂志,2022,46(2):92-102.WU Shaohua,CHANG Huajie,GOU Wenfeng,et al.Protective effects of Engelhardia Roxburghiana Wall.leaf extract on radiation injury of the hematopoietic system in mice[J].International Journal of Radiation Medicine and Nuclear Medicine,2022,46(2):92-102.[8]㊀崔国宁,刘喜平,虎峻瑞,等.中医药防护辐射研究进展[J].中国中医基础医学杂志,2019,25(12):1773-1776.㊃981㊃。
苦豆子总碱对辐射损伤小鼠的防治作用研究
苦豆子总碱对辐射损伤小鼠的防治作用研究
梁莉;李新芳
【期刊名称】《中药药理与临床》
【年(卷),期】2001(017)006
【摘要】目的:研究苦豆子总碱对60Coγ射线照射小鼠辐射损伤的防护作用.方法:给予小鼠腹腔注射不同剂量的苦豆子总碱,用60Coγ射线全身均匀照射小鼠,剂量为5.0Gy、7.0Gy,检测30d存活率、外周血象、免疫器官脏器指数及骨髓嗜多染红细胞微核率.结果:辐射损伤后小鼠外周血白细胞、血小板、网织红细胞数降低,30天存活率下降,脾体比及胸体比下降,骨髓细胞微核率增加.苦豆子总碱可促进上述造血指标恢复,提高30天存活率和免疫器官脏器指数,降低骨髓嗜多染红细胞微核率.结论:苦豆子总碱对受照损伤小鼠具有一定的保护作用.
【总页数】2页(P18-19)
【作者】梁莉;李新芳
【作者单位】兰州医学院附一院药剂科,兰州,730000;兰州医学院药理学教研室,兰州,730000
【正文语种】中文
【中图分类】R28
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5.苦豆子总碱作用于小鼠脾滤泡辅助性T细胞的实验研究 [J], 姜昊; 任光进; 曹干; 张艳丽
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银杏叶提取物辐射防护作用的研究
银杏叶提取物辐射防护作用的研究施雨露;刘照轩;陈强;张小楠;徐效义【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2013(017)011【摘要】目的利用深部x射线照射小鼠,形成辐射损伤,研究银杏叶提取物对小鼠抗辐射功能的影响.方法通过计算小鼠骨髓细胞的微核率和染色体畸变率来考察银杏叶提取物的辐射防护作用.实验组剂量为5 mgL/kg,10 mg/kg,20 mg/kg,阳性对照组给予生理盐水.结果三种不同剂量的银杏叶提取物均使小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率及骨髓细胞染色体畸变率有明显的降低( P<0.01).结论银杏叶制剂可能通过清除自由基对骨髓细胞产生一定程度的保护作用,而且这种保护作用达到了平台期,呈现相同程度的辐射抗性.【总页数】2页(P1973-1974)【作者】施雨露;刘照轩;陈强;张小楠;徐效义【作者单位】吉林大学基础医学院病原,免疫细胞遗传实验中心,吉林,长春130021;吉林大学药学院,再生医学系;吉林大学公共卫生学院;吉林大学基础医学院病原,免疫细胞遗传实验中心,吉林,长春130021;吉林大学第一医院,肿瘤中心【正文语种】中文【中图分类】R818.05【相关文献】1.银杏叶提取物对早期中耳放射性损伤防护作用的实验研究 [J],2.关于银杏叶提取物对早期中耳放射性损伤防护作用的实验研究 [J], 徐艳3.多糖的辐射防护作用机制研究 [J], 拜思琼;黎晨;何俊霞;肖文媛;郭淼;郭忠4.白藜芦醇对IEC-6细胞辐射损伤的防护作用及机制研究 [J], 秦浩人;孙婉君;张恒;阎皓;张诗武;朱思伟;王辉5.基于代谢组学研究补肾解毒方对辐射损伤大鼠的防护作用机制 [J], 曹惠敏;刘冬书;雷宁;李延晖;张蓉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
甘草甜素镁对小鼠辐射损伤的防护作用
ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ （Ｇｌｙ－Ｍｇ）ｏｎ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ａｎｄ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ．ＩＣＲ（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ａ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ （ｎｏｒｍａｌ ｓａｌｉｎｅ），ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ （ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｅｘｐｅｎｏｒ ｍ ａｌ ｓａｌｉｎｅ＋７．２ Ｇｙ），ａｎｄ Ｇｌｙ—Ｍｇ ｇｒｏｕｐ（ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：５０ ｍｇ／ｋｇ＋６．０ Ｇｙ，７５ ｍｇ／ｋｇ＋６．０ Ｇｙ；ｃｏｍｅｔ ｔｅｓｔ：５０ ｍｇ／ｋｇ＋７．２ Ｇｙ，７５ ｍｇ／ｋｇ＋７．２ Ｇｙ）．Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕｔａｓｅ（ＳＯＤ）ａｎｄ ｃａｔａｌａｓｅ（ＣＡＴ），ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ（ＧＳＨ）ａｎｄ ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ ｄｉｏｘｙａｍｐｈｅｔａｍｉｎｅ（ＭＤＡ）ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ，ｌｉｖｅｒ，
第 ３６卷 第 ３期 ２０１８年 ６月
辐 射 研 究 与 辐 射 工 艺 学 报 Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．Ｒａｄｉａｔ．Ｐｒｏｃｅｓｓ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｊ．ｓｉｎａｐ．ａｃ．ｃｎ／ｆｕｓｈｅ／ＣＮ／ｖｏｌｕｍｎ／ｈｏｍｅ．ｓｈｔｍｌ
Ｖｌ ０１－３６．Ｎ ｏ．３ Ｊｕｎｅ ２０１８
Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ （Ｇｌｙ－Ｍ ｇ）ｏｎ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｉｎｊ ｕｒｙ ｉｎ ｍｉｃｅ
盐酸小檗胺对辐射小鼠的免疫防护作用的实验研究
盐酸小檗胺对辐射小鼠的免疫防护作用的实验研究
葛明珠;刘昕;张勇
【期刊名称】《免疫学杂志》
【年(卷),期】1998(14)4
【摘要】实验观察了盐酸小壁胺对射损伤小鼠免疫系统夜用并对体内脂质过氧化反应进行检测。
结果显示：电镜观察预防用药照射组小鼠胸腺，脾淋巴细胞损伤显著轻于盐水照射组；胸腺及脾指数、体内淋巴细胞转及外周血白细胞计数减少速度与与盐水照射组有明显差异。
体内脂质过氧化反应边实验表明：盐酸小壁胺对辐射引起的免疫损伤有良好的防护作用而有延长射小３０ｄ存活率的功效。
【总页数】3页(P238-240)
【关键词】盐酸小檗胺;辐射;免疫防护;抗氧化;药物疗法
【作者】葛明珠;刘昕;张勇
【作者单位】兰州医学院病理生理教研室;北京医科大学病理生理教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R967 R818.051
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1.盐酸小檗胺对实验性脑缺血保护作用的研究 [J], 周虹;王玲;高云瑞;姜玉泉;王建柱
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灵芝口服液对辐射危害的辅助保护功能研究
灵芝 口服液灌 胃小鼠 ３ ， Ｏｄ后 给予一次性 全身 ７射线照射 ， 观察小 鼠辐照后外周血 白细胞数 、 骨髓 细
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百里醌对小鼠辐射防护作用 侯沁莲;董银萍;董辉;李德冠;杜利清 【摘 要】Objective To observe the protective effects of thymoquinone (TQ) against radiation injuries in mice.Methods C57BL/6J mice were randomly divided into three group (n=5):control group,irradiation group and irradiation + TQ group.The mice in the irradiation group and the irradiation + TQ group were accepted 7.5 Gy total body irradiation,and the mice in the control group was received sham irradiation.The irradiation + TQ group was administered orally the day before exposure (10 mg/kg),sustained administration for 3 days.The same volume normal saline was given to the mice in the control and irradiation group.Three days after irradiation,the samples were taken,and the indexes of spleen,lung,kidney,testes and liver of the mice were observed,and the contents of GSH,SOD and MDA in serum and liver tissues of each group were detected.Results Compared with the irradiation group,the GSH content in the liver tissues and SOD value in the serum in the irradiation + TQ group were increased,and the MDA level in the serum was decreased,with statistically significant difference (P ＜ 0.05).Conclusion TQ can reduce radiation oxidation damage in the radiation mice,and it has certain protective effect on the radiation injury in mice.%目的 探讨百里醌对辐射小鼠损伤的防护作用.方法 C57BL/6J小鼠按体重随机分为3组(n=5):空白对照组、单纯照射组和照射给药组.其中单纯照射组和照射给药组给予7.5 Gy全身照射,空白对照组给予假照射.照射给药组在照射前1d灌胃给药(10 mg/kg),持续给药3d,空白对照组和单纯照射组给予相同体积的生理盐水.照射3d后取材,观察各组小鼠脾、肺、肾、睾丸、肝脏等脏器指数变化,检测各组小鼠血清和肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二酮(MDA)含量.结果 与单纯照射组比较,照射给药组肝组织中GSH含量和血清中SOD值升高,血清中MDA水平降低,差异均有统计学意义(P＜ 0.05).结论 百里醌可降低辐射小鼠中氧化损伤,对小鼠辐射损伤有一定的防护作用.
【期刊名称】《中国医药导报》 【年(卷),期】2018(015)003 【总页数】4页(P4-7) 【关键词】百里醌;辐射防护;氧化损伤 【作 者】侯沁莲;董银萍;董辉;李德冠;杜利清 【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所,天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所,天津300192
【正文语种】中 文 【中图分类】R979.6
随着核技术的应用及推广，人们接触各种射线的机会越来越多，遭受辐射损伤的可能性也越来越大。辐射暴露是公共卫生关注的问题[1]，辐射可引起多种类型的急、慢性放射病。若未及时就医，后果不堪设想。故加强对放射引起的疾病防治是一大热点。目前有多种辐射防护药物，但大多存在毒副作用大，防护效价低等缺点[2-5]。 黑种草（Nigella sative）是毛茛科一年生草本植物，主要分布在我国新疆、西藏、云南等地区，其种子常用于传统治疗，如胃肠道疾病等多地[6]。百里醌是从黑种草植物油中分离出来的主要有效单体[7]，有抗氧化、抗炎和抗肿瘤作用[8-11]。化学名为2-异丙基-5-甲基-1，4-苯并醌，分子式C10H12O2（图1）。有研究提示百里醌可在葡萄糖酸钠（DSS）小鼠结肠炎模型中，下调结肠组织中丙二酮（MDA）水平，上调还原型谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）水平[12]。目前人们普遍认为，肝脏是放射较敏感的器官之一，其放射敏感性仅次于骨髓、淋巴组织、小肠、性腺、胚胎和肾[13]。电离辐射对肝细胞造成损伤，从而影响肝功能的变化[14]。本研究为探究百里醌对辐射损伤小鼠的防护作用，检测了其肝脏匀浆组织及血清中的GSH、SOD和MDA水平。 图1 百里醌的分子结构式 1 材料与方法 1.1 实验动物 以C57BL/6J雄性小鼠（SPF级）为实验对象，其初始体重为23～24 g，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供。饲养于中国医学科学院放射医学研究所动物实验中心SPF级动物房[饲养设施合格证号：SYXK（京）2015-0035]。 1.2 分组、照射及给药 实验中小鼠按体重随机分为空白对照组、单纯照射组及照射给药组，每组5只，共15只。其中空白对照组给予假照射（0 Gy），单纯照射组和照射给药组给予7.5 Gy全身照射。Cammacell-40137Cs放射源为加拿大原子能公司产品，剂量率约为1.0 Gy/min。所有小鼠在照射前1 d灌胃给药，照射后每天给药1次，连续3 d腹腔注射给药，共给药4次。百里醌给药剂量为10 mg/kg。空白对照组和单纯照射组的小鼠给予同等体积的生理盐水。照射3 d后取材进行相关体内指标检测。指标检测方式为取材后称量脏器重量，求得脏器与体重比值得脏器指数。肝脏组织匀浆获取蛋白。 1.3 试剂和仪器 百里醌购自美国Cayman Chemical company；GSH测定试剂盒（分光光度法）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）测试盒（羟胺法）、MDA 测定试剂盒（TBA法）、总蛋白定量测定试剂盒（带标准：BCA法）（比色法）均购自南京建成生物工程研究所；北京鼎昊源科技有限公司的高通量组织研磨仪，美国Thermo CO2培养箱，美国Thermo Fisher离心机。 1.4 统计学方法 采用统计学软件SPSS 15.0进行数据分析，计量资料数据用均数±标准差表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 百里醌对辐射损伤小鼠脏器指数的影响 单纯照射组脏器指数均明显低于空白对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。与单纯照射组比较，照射给药组脏器指数有所提高，但只有肾指数差异有统计意义（P ＜ 0.05）。 见表1。 表1 百里醌对辐射小鼠脏器指数的影响（mg/kg，x±s，n=5）注：与空白对照组比较，#P＜0.05；与单纯照射组比较，*P＜0.05组别 脾指数 肺指数 肾指数 睾丸指数 肝脏指数空白对照组单纯照射组照射给药组4.167±0.610 1.560±0.059#1.816±0.246 7.279±0.806 6.768±0.507#7.175±0.658 13.114±0.840 12.479±0.948#14.154±1.660*8.277±0.547 7.300±0.340#8.027±0.826 53.757±3.765 46.862±2.517#44.780±6.496 2.2 百里醌对辐射小鼠肝脏及血清中GSH表达的防护作用 单纯照射组肝组织中GSH含量低于空白对照组，照射给药组肝组织中GSH含量高于单纯照射组，差异有高度统计学意义（P＜0.01）。而照射给药组血清中GSH含量高于单纯照射组，但差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。 见图2。 2.3 百里醌对辐射小鼠肝脏及血清中SOD表达的防护作用 照射给药组肝组织中SOD值对比单纯照射组有变化趋势，但三组肝组织中SOD值比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。单纯照射组血清中SOD值低于空白对照组，照射给药组血清中SOD值高于单纯照射组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见图3。 2.4 百里醌对辐射小鼠肝脏及血清中MDA表达的防护作用 单纯照射组血清中MDA含量高于空白对照组，照射给药组血清中MDA含量低于单纯照射组，差异有高度统计学意义（P＜0.01），见图4。肝脏组织中MDA含量没有显著变化，故没有列出。 3 讨论 随着医学研究的迅速发展，活性氧族（ROS）在疾病发病机制中的作用日益得到重视。当今环境中，各种物理、化学等外界因素可直接或间接诱导大量自由基的产生，超过了机体本身清除能力，或导致机体内源性自由基产生和清除失衡，导致机体处于氧化应激状态。相应自由基可与某些生物大分子结合或过氧化产生毒性效应，从而导致各种疾病的发生。为避免机体中过多过氧化物损伤，细胞形成一套复杂的抗氧化酶防御系统，其中主要包括GSH、SOD、CAT等，其中GSH可被催化，变成氧化型谷胱甘肽，促使氧化物还原，接触氧化毒性；SOD使超氧阴离子（O2-）转变为过氧化氢（H2O2）[15]。MDA的量可反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映细胞损伤的程度。MDA测定常与SOD测定相互配合，SOD活力