博日Linegene9640荧光核酸扩增仪标准操作规程作业指导书
核酸检验操作规程

核酸检验操作规程一、引言核酸检验是一种常用的生物化学分析方法,广泛应用于医学、生物学和病毒学等领域。
为了保证核酸检验的准确性和可靠性,制定核酸检验操作规程是必要的。
本文档旨在规范核酸检验操作流程,确保实验的一致性和可重复性。
二、实验前准备1.检查实验室仪器和设备的情况,确保正常工作。
2.检查实验所需试剂和材料的存量,及时补充。
3.准备相关资料和记录表格,如实验记录表和生物废弃物处理记录表。
4.实验人员需佩戴个人防护装备,包括实验服、手套、口罩和护目镜。
三、核酸样本处理1.根据实验要求,选择合适的样本类型,如血液、组织或细胞。
2.从样本中提取核酸,可以使用商用核酸提取试剂盒或自行制备提取缓冲液。
3.操作前,检查提取试剂盒或提取缓冲液的有效期和保存条件,确保试剂的质量。
4.按照提取试剂盒的说明书或提取缓冲液的制备方法进行提取操作,遵循每一步的操作要求和时间控制。
5.注意避免污染,使用新鲜的一次性操作工具和试剂管,避免手指直接接触样本。
四、核酸质量检测1.提取后的核酸需要进行质量检测,常用方法包括浓度检测和纯度检测。
2.浓度检测可使用分光光度计测量核酸的吸光度,并根据标准曲线计算浓度值。
3.纯度检测常用比值检测法,包括260/280比值和260/230比值,分别用于检测蛋白质和污染物的存在。
4.检测结果需记录在实验记录表中,并进行相应分析和评估。
五、核酸扩增1.根据实验设计选择合适的扩增方法,如聚合酶链反应(PCR)或逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)。
2.准备扩增反应体系,包括DNA模板、引物、酶和缓冲液等。
3.按照反应体系的配比和引物扩增温度等参数进行扩增反应,严格控制反应时间和温度。
4.同时设置阳性对照和阴性对照,用于确定扩增结果的可靠性。
5.扩增后的产物可以进行凝胶电泳分析或实时荧光定量分析。
六、实验后处理1.实验后,关闭仪器和设备。
2.将实验产生的生物废弃物进行规范处理,包括核酸废弃物和一次性器材。
Roche480II实时荧光定量PCR仪操作规程、维护方法、校准(SOP-1)

Roche 480II实时荧光定量PCR仪操作规程、维护方法、校准(SOP-1)1 目的:确保Line-Gene型核酸扩增荧光检测仪正确及正常使用。
2 适用范围:Line-Gene型核酸扩增荧光检测仪。
3操作人 ** **4标准操作方法:4.1在打开电源以前,先确认以下内容:4.1.1确认电源线插头已插入电源插座中。
4.1.2 Line-Gene与计算机及电源的连接是否可靠。
4.2.核酸扩增仪操作方法:4.2.1依次打开电脑显示器和电脑主机的电源开关,进入“荧光定量PCR检测系统”界面;4.2.2模板制好后,按模拟模板反应孔的样式放入扩增仪反应槽,注意阴阳性、阳性标准品、质控品位置,标本不够用空白管填补;4.2.3打开PCR仪电源开关,预热5分钟;4.2.4点击“运行”键,打开“运行”文件中“达安”试剂程序;4.2.3点击工具栏中的“样本资料”按钮,输入样本资料,并清空缺省样本号;点击“确认”保存样本资料信息,保存的文件名为:年月日+批次(批次用a、b、c表示)如20030516a 文件自动形成后缀名为*.flr4.2.4点击仪器运行的红色按钮“!!”,仪器进入运行状态。
4.2.5检测结果分析:a.程序运行结束后,系统自动进入分析界面并将检测结果自动保存,在荧光定量PCR检测系统界面单击“数据分析”键,进入结果分析界面。
b.定量分析:1)单击“分析模式”菜单中的“定量分析”命令,在分析方法选择中可选择样点拟合法。
2)样点数选择:样点为循环数/荧光强度对数曲线中基线以上各循环的点,系统根据选择的样点数,将被选中的样点拟合成直线,该直线与域值的交叉点即为CT值(仅适合于样点拟合)。
3)击“零点调整”,在弹出零点调整对话框进行设置——手动调整:以设置的起始循环至终止循环荧光强度的平均值为零点设置时尽可能选择样本荧光强度稳定(用“达安”试剂在Line-Gene荧光定量扩增仪对标本及控制品4)检测,通常起始及终止为5-15,结果较理想)。
博日PCR

LifeTouch GeneMax
梯度生命快车
控温精度更高、升降温更快、模块温度更均 匀、外形体积更小、运行环境更静。在 LifePro 的基础上,LifeTouch 增加了 LCD 彩色触摸 屏。 型号 TC-96/G/H(b)B 样本容量 96 孔×0.2ml,96 孔全群板、半裙板、 无裙板通用,12×8 联管 最大升温速度≥4℃/秒 最大降温速度≥4℃/秒 半导体技术 GeneMax 秉承 FERROTEC 半导体制冷片的 研发、制造和应用能力,仪器的性能和功能 达到了一个新的高度,可以实现退火温度的 完美优化。仪器使用 10.4 英寸超大液晶触摸 屏配有蓝牙信号转接装置,可以实现仪器和 电脑的无线连接。 GeneMax 型 号 TC-S 有 两 种 模 块 型 号 B-96G,B-384G 样本容量前者为 96 微孔板,12×8 试管条,6 ×12 试管条,96 孔×0.2ml;后者为 384 微孔 板。 FERROTEC 半导体技术,6 组独立模块,12 路模块温控传感器 最大升温速率 5℃/秒 最大降温速率 4℃/秒
梯度生命快车在原生命快车(Life Express) 的基础上,新增了科研实验中非常重要的梯 度功能。 梯度生命快车 型号 TC-96/G/H 样本容量 96×0.2ml,12×8 联排管,96 孔 板(无裙板) 最大升温速率 3℃/秒 最大降温速率 2℃/秒
GeneQ 小精灵
Life Express
GeneQ 有两种型号 TC-18/H 和 TC-24/H。前 者样本容量为 18,适用试管为 0.5ml 的;后 者样本容量为 24,适用试管为 0.2ml 的。 变温速度更快升温大于 5 度每秒 降温大于 4 度每秒。 大屏幕液晶显示屏,具有断电保护功能,可 与计算机连接。
荧光操作规程(3篇)

第1篇一、前言荧光技术是一种利用荧光物质在特定波长下发出荧光现象进行物质检测和分析的方法。
荧光操作规程旨在确保荧光实验的准确性和安全性,以下为荧光操作规程的具体内容。
二、实验前准备1. 确认实验设备和试剂:检查荧光仪器是否正常运行,试剂是否过期,确保实验所需试剂和仪器齐全。
2. 实验环境:确保实验室内光线充足,避免强光直射样品,避免外界干扰。
3. 实验人员:实验人员应熟悉荧光技术及相关操作,了解荧光物质的特性和注意事项。
三、荧光操作步骤1. 样品处理:根据实验需求,对样品进行适当的处理,如溶解、离心、过滤等。
2. 样品标记:将荧光标记物加入样品中,确保标记物与样品充分混合。
3. 荧光仪器操作:a. 开启荧光仪器,预热仪器约30分钟;b. 设置激发波长和发射波长,确保仪器稳定运行;c. 调整样品室温度,根据实验需求设定温度;d. 设置曝光时间、增益等参数,确保图像清晰。
4. 样品检测:a. 将标记后的样品放入样品室,调整样品位置;b. 观察荧光信号,记录数据;c. 如需多次检测,重复上述步骤。
5. 数据分析:将检测到的荧光信号进行定量分析,得出实验结果。
四、注意事项1. 试剂和仪器:避免使用过期或受污染的试剂,确保荧光仪器清洁、稳定运行。
2. 样品处理:确保样品处理过程中避免荧光物质降解或漂白。
3. 标记物:选择合适的荧光标记物,确保标记效果明显。
4. 实验环境:避免强光直射样品,确保实验室内光线充足。
5. 操作规范:实验人员应严格按照操作规程进行实验,避免人为错误。
6. 安全防护:操作过程中,注意防护措施,如佩戴防护眼镜、手套等。
五、实验后处理1. 清洁实验器材:使用专用清洗剂清洗荧光仪器、样品室等实验器材。
2. 试剂处理:剩余试剂妥善存放,避免污染。
3. 数据整理:整理实验数据,撰写实验报告。
4. 关闭荧光仪器:关闭荧光仪器,确保实验室内安全。
六、总结荧光操作规程是确保荧光实验顺利进行的重要保障。
结核杆菌核酸扩增荧光检测作业指导书

结核杆菌核酸扩增荧光检测作业指导书1.目的:保证TB DNA检测结果准确、可靠。
2.适用范围:TB DNA的TaqMan荧光定量检测,标本类型为血清。
3.负责人:操作人:4.原理:本试剂盒用一对结核杆菌特异引物和一条结核杆菌特异性荧光探针,PCR反应液,耐热DNA聚合酶(Taq酶),四种核苷酸单体(dNTPs)等成分,再用PCR体外扩增法检测结核杆菌DNA。
5.性能参数:检出低值<1×103基因拷贝/ml。
6.标本要求:(1)标本类型:血清。
(2)标本采集:见标本采集手册。
(3)标本储存和运输:室温放置不超过8小时,4-8℃不超过72小时,-20℃保存期6个月,应避免反复冻融。
室温运输。
(4)标本拒收状态:细菌污染、严重溶血或脂血标本不能作测定。
7.容器和添加剂类型:无菌离心管和无菌真空管。
8.所需设备:ABI GeneAmp 5700、台式高速离心机、混匀器、冰箱(4℃、-20℃)、生物安全柜、紫外灯9.试剂:DNA提取液(500μl/管)2管;TB-PCR反应液(未贴标签管)20管;阳性定量质控标准品(1×108基因拷贝/ml)(50μl/管)1管;阴性质控品(250μl/管)1管。
10.校准程序(计量学溯源性):送深圳市计量检测所校准。
11.程序步骤::11.1标本处理:标本采集、保存和运送用无菌5ml玻璃管取受检者肺深部咳出痰液1~3ml,密闭,即为标本。
或直接抽取外周血2ml(抗凝)。
标本可立即用于测试,也可保存于-20℃待测,保存期为六个月。
标本运送应采用0℃冰壶。
11.2标本及质控标准品的处理痰液中加入4倍体积的4%NaOH室温放置10分钟后15000rpm离心5分钟。
去上清,沉淀加无菌生理盐水1ml打匀,15000rpm离心5分钟;再重复洗涤一次。
(知液标本直用淋巴细胞分离液分离沉淀)沉淀直接加50ulDNA提取液充分混匀,(提取液内含不溶于水的物质,取样时需用加样器充分混匀后吸取。
荧光操作规程范文

荧光操作规程范文一、实验前准备1.1仪器设备准备:确认所需荧光实验所需的所有仪器设备是否齐全,并进行检查和测试。
如荧光显微镜、荧光分析仪等。
1.2试剂准备:确认所需试剂的种类和数量是否符合实验需求,并检查其保存条件和有效期。
如荧光探针、缓冲液等。
1.3试验条件设置:确定实验室的温度、湿度等试验条件,并保持其稳定。
如实验室温度保持在恒定的20-25摄氏度,湿度保持在相对湿度50-70%。
1.4个人防护:在进行荧光实验前,确保穿戴个人防护用品,如实验服、实验手套、护目镜等。
二、荧光实验操作2.1实验台面整理:在实验前,将实验台面清洁整理,确保实验用具的摆放有序,并保持实验区域的良好通风。
2.2实验操作平稳:荧光实验操作要稳定、轻柔,尽量避免荧光试剂和样品的振荡或剧烈搅拌,以免造成荧光信号的异常。
2.3标本制备及样品处理:在荧光实验前,对标本进行适当的处理,如染色、洗涤等。
对于涉及细胞培养的实验,应严格掌握细胞培养技术及相应的实验规范。
2.4合理选用荧光试剂:根据实验要求和细胞状态的特点,选择合适的荧光探针和染料。
并遵照试剂说明书正确使用。
2.5荧光显微镜使用:使用荧光显微镜前,先进行合适的调整和设定,如荧光滤光片、激发波长、荧光信号接受通道等,并确保显微镜的清洁和镜头的清晰。
使用荧光显微镜时,不宜长时间连续观察,以免损伤眼睛。
2.6荧光信号记录:在记录荧光信号时,要控制好参数的选择和调整,确保荧光信号的质量和准确性。
如荧光强度、发射波长、采样间隔等。
三、荧光废弃物处理3.1合理保存:对于未使用完的荧光试剂或荧光标记的样品,应按照规定保存条件进行保存,避免其变质或损坏。
3.2分类处理:对于废弃的荧光试剂瓶、荧光标记的材料和废液,应按照化学废品处理的规范进行分类和处理。
3.3安全处理:在处理荧光废弃物时,应穿戴好个人防护装备,并采取适当的措施进行处理,如密封包装、集中存放等,以防止对环境和人体造成污染和伤害。
9600型PCR仪中文操作手册

9600型PCR 仪中文操作手册一.9600型PCR 仪及键盘说明9600型PCR 仪是利用压缩机制冷,热膜加热方式的温度循环仪,一次最多可扩增0.2 mL 的96个样本。
由于采用热盖,样本管中不需加石蜡油,仪器显示的温度为实际样品温度。
9600的键盘见下图:加热Heating数字键盘制冷CoolingHot仪器状态指示功能键选择光标:由于功能菜单中有多项功能,此选择光标用于指示选中何项功能,为一短线条。
仪器状态指示:仪器运行中有三种状态:加热,制冷及待命。
待命时加热,制冷指示均不显示,在样品温度大于50℃时Hot 指示灯亮。
加热过程中加热灯亮,制冷过程中制冷灯亮。
RUN : 启动或重新启动一个文件的运行。
BACK : 向后移动光标或向后翻页。
STEP : 向前移动光标或向前翻页。
OPTION : 移动光标到选择项或在 "Y es" 和 "No" 间选择。
CE :清除当前输入的数字。
PAUSE : 运行中暂停运行。
STOP : 运行中放弃运行,编辑中回到主菜单。
ENTER : 回车或确认。
MORE : 特殊功能键。
二.仪器安装9600型PCR仪的工作电压是220V,50HZ,850V A,带地线。
9600到货时的内部电压选择位于230V,50HZ挡。
由于在中国是以220V,50HZ供电,所以用户在收到仪器后的第一件事就是要更换电压选择器,随机带有一220V AC/50HZ的电源选择插头,其元件号为N8010513,请按以下步骤更换(更换时把电源拔下):1.拧下仪器前方左右两边的螺丝,并把仪器盖上抬。
2.拧下两个安装螺丝,取下电路板保护罩,可见到仪器的系统配置插头。
取下原来的插头,把N8010513上所带的插头换上,更换时注意方向。
*此控制板位于仪器底部3.换上220V插头后把保护罩放回并拧回安装螺丝。
最后把仪器盖好并拧回左右两个固定螺丝。
HPV SOP - 不带提取

人乳头瘤病毒核酸分型检测试剂盒(荧光PCR 法)标准操作流程一、目的:规范实验室操作,正确使用PCR扩增仪进行HPV-DNA扩增分析,以保证实验结果的准确性。
二、适用范围:人乳头状瘤病毒(HPV)基因分型检测试剂盒在扩增仪上进行扩增以及分析。
三、职责:由临床分子生物实验室专业技术人员制定程序文件,实验室负责人审核,科室主任批准实施。
四、程序:【检验方法】1. 试剂准备(试剂准备区)a) 从-20℃取出试剂盒,将各试剂融化混匀并短暂离心后备用。
计算需要进行的反应份数n (n=待测样本数+空白对照1份+阳性对照1份)。
b) 取出8个离心管分别标记1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#和8#,分别加入n×10μl 核酸扩增反应液,然后对应每个编号离心管分别加入n×8μl A反应液(1#)、n×8μl B反应液(2#)、n×8μl C反应液(3#)、n×8μl D反应液(4#)、n×8μl E反应液(5#)、n×8μl F反应液(6#)、n×8μl G反应液(7#)、n×8μl H反应液(8#)。
c) 混匀并短暂离心后,依次分装至对应编号PCR八联管中,每管18μl,总共分装n排PCR 反应八联管,1排PCR八联管为1人份。
2. 加样(1)小心打开PCR八联管盖,每份待测样本核酸溶液、空白对照按照2μl/管依次加入对应编号含有A-H反应体系的PCR八联管中,1排PCR八联管为1人份,阳性对照(A-H组)同样按照2μl/管分别加入对应的A-H反应体系的PCR八联管中,总体积为20μl/管。
(2)盖紧PCR八联管盖,低速短暂离心。
3. PCR扩增检测(核酸扩增区)3.1 将反应管放入荧光PCR 扩增仪进行扩增检测。
4. 结果分析4.1 杭州博日Linegene 9600荧光定量PCR仪:反应结束保存结果,根据分析后图像调节基线的起始循环、终止循环(可以根据实际情况自行调整,起始循环可以在3~15、终止循环可设在5~20,调整空白对照的扩增曲线平直或低于阈值线;也可由仪器进行自动判读,起始循环为3、终止循环为15),点击确定自动获得分析结果,在同一界面的显示区察看结果。
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博日Linegene9640荧光核酸扩增仪标准操作规
程作业指导书
1 准备工作
把电源线和程序安装文件安装好。
2.首次运行
打开仪器后面的电源开关,按下仪器前面的 Run Switch,使仪器处于允许运行的状态。
此时仪器显示板上指示灯闪烁一下,仪器内部会进行一次自检动作。
RunSwitch 按键用于临时停止运行,建议非工作时间将仪器后方的电源开关切断。
双击桌面上仪器软件的快捷图标,打开软件,点击任意检测模块,键入检测程序,简单任意设置一个检测程序后,点击软件界面上的“联机”,检测通讯是否有效。
通常需等待数分钟,以自动寻找所连接的通讯端口。
无效将会弹出“通讯失败”的提示对话框,应检查通讯线是否连接可靠,是否其它程序占用了端口,直到通讯成功为止。
首次运行,可能有一些参数不匹配的提示信息弹出,。