实验操作细节分析及注意事项

实验试剂/仪器/设备的准备——
Ø实验试剂：试验所需各组分（含底物）在试验开始前至少20min取 出恢复工作温度，若试剂体积较大，需适当延长恢复室温时间；应 将试剂取出摆至合适的工作布局（充分恢复室温及方便试验操作）。 Ø微量加样器及适量枪头的准备； Ø洗板机开启后使用工作洗液冲洗管道，检查是否发生堵孔，进行 故障排除； Ø水浴锅开启后检查内水面高度，适当调整；温箱检查箱内温度； Ø发光仪/酶标仪等开启，排除异常，保证试验使用。
稀释及溶解操作——
Ø稀释操作时应选取状态较好的微量移液器进行操作； Ø考虑稀释准确，取样量不宜过小，尽量选择20ul以上； Ø确立好稀释方案后，准备所需物品，做好相应标记； Ø操作时，高值取样时若湿润枪头则加入时不涮枪头；若高值取样 不湿润枪头，则加入时涮枪头； Ø高值取样时，尽量保持枪头以尽可能小的距离伸入液面下，减少 枪头外壁粘附干扰；加入涮枪头时亦同； Ø单次加入操作后均需充分混匀；
相关操作细节分析
•临床样本的使用及保存； •实验试剂/仪器/设备的准备； •稀释及溶解操作； •加样操作； •振荡混匀及温育操作； •洗板、甩板及拍干操作； •底物加入操作；
临床样本的使用及保存——
Ø带值标本收集后及时分离血清/浆，并根据样本量进行分装冻存； 稀少标本特别放置； Ø高中低值样本均需适量收集； Ø带值但发生溶血/脂血/黄疸或其它异常的样本收入个人异常样本 盒内备用； Ø样本冻存要避免反复冻融 (经常翻启的冰箱避免于冰箱口放置)； Ø样本使用时注意避免室温下长时间放置；避免剧烈振荡； Ø样本中漂浮血细胞、絮状物等时应离心后取上清用； Ø样本使用时注意保护，避免污染、损失及遗失。
Ø要避免加在孔壁上部；
Ø不可溅出和产生气泡。溅出，对邻近孔产生污染；出现气泡则反 应液界面有差异；
Ø加样时注意慢吸快打，尤其是较大 体积取样时，吸样不宜过快；
Ø连续加样需注意枪头残余液量变化。
振荡混匀及温育操作——
Ø加样完成后需振荡混匀，振荡器开启前应调至较小振幅，开启后由 小往大调节至适当振幅（适量及可，不宜过大）(标准化）； Ø准确把握振荡时间，一般10s~30s； Ø温育时应贴好板贴保护，做好标识，并标记时间（置入温箱/水浴锅 时间起算）； Ø使用水浴锅温育时应注意反应板下部应和水面充分接触且不越过反 应板上面。
常见错误操作分析
称量操作考核时常见错误——
•称量前未检查仪器状态； •称量数据未及时记录； •称量时多余试剂处理不当； •称量时有发生污染的不当操作; •称量后未清理桌面； •天平称量考核超时； •未填写设备使用记录 ü操作不熟练，标准操作未掌握，未按照要求进行，不良操作习惯
Ø使用温箱时应避免放于开门处，开启频繁导致温 度变化较大，对试验造成影响； Ø要保证在设定的温度下足够的反应时间 。
洗板、甩板及拍干操作——
Ø手工洗板：在每次反应温育后，将反应液吸出或甩干，然后在板 孔中加满洗液，放置2～3min后，将洗液吸出或甩干，再在吸水纸 上拍干。重复上述洗涤步骤3～4次，最后在吸水纸上拍干，即可进 行下一步测定操作； Ø甩板时应注意手法，平稳持板，迅速翻转并甩出板内液体，不可 有停留和迟疑，否则会造成污染； Ø拍干时应注意更换吸水纸，防止污染； Ø仪器洗板时注意洗液、观察注液量，残液应在吸水纸上拍干后进 行下一步操作；
底物加入操作——
Ø底物充分混合； Ø底物加入应在尽量短的时间内完成，减小时间间隔，平衡反应时 间； Ø若反应孔较多时，须使用排枪加入； Ø底物加入后须轻微振荡混匀10s后计算时间进行测量；
实验过程中若出现与标准操作不符合的情况，应及时标记或记 录，备过程分析和数据处理时使用！
测定的重复性差——
（1）加样本及试剂量不准；孔间不一致； （2）加样过快，孔间发生污染； （3）加错样本； （4）加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区； （5）不同批号试剂盒中组分混用； （6）温育时间、洗板、显色时间不一致； （7）孔内污染杂物；
剂亦应弃去，不得倒回原容器中，防止污染。 5. 每次称量读数时应当关闭天平侧门，待数显读数稳定后记数。 6. 液体取用时应使用量筒准确量取，配液时转子应彻底清洗，并使用合适材
料包裹，使用时加入容器内。 7. 撑拌器打开顺序为：电源开关—搅拌开关—控速旋扭，关闭时顺序相反。 8. 溶液配制完成后应取出转子，填写标签并贴好。 9. 放回各使用器材，清理桌面，填写仪器使用记录。
常见仪器/设备操作注意事项
称量及配液考核——
操作规程： 1. 称量前检查分析天平状态，应处于平衡位置，距离桌面外缘10cm以上放
置。 2. 备齐所有器材，按顺序放置于合适位置，进行称量操作。 3. 取用试剂时试剂瓶盖应倒立放置。 4. 称量时注意选取适合的称量纸及药匙，每个药匙使用一次后弃去，多余试
ü溶解时除注意以上内容外，还需转动容器，充分溶解瓶内冻干粉剂， 振荡并放置5min后使用。
加样操作——
Ø检查微量加样器，嘴锥处若有杂物，应用且仅用75%酒精溶液进 行清洁操作（非常重要）；
Ø新枪头首次取样时应以即用体积湿润枪头一次；
Ø加样不可太快，无法保证微量加样的准确性和均一性，且易发生 错加和污染操作；
实验工作要求
Ø严格遵守公司相关管理规定，按照实验场所、仪器/设备、物品使用 要求操作； Ø实验室内工作期间注意言行举止，营造良好工作氛围； Ø根据工作安排完成实验设计，及时备好实验相关物品/试剂等； Ø工作期间注意时间和事物的统筹安排，达到一定的工作效率； Ø正确进行试验、仪器/设备操作，保证工作有效； Ø充分分析实验过程及结果数据，把握实验方向； Ø进行实验仪器/设备维护及保养； Ø养成良好的工作习惯，注意实验卫生及安全工作。
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实验操作细节分析及注意事项
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实验操作细节分析及注意事项
• 实验工作要求 • 实验操作细节分析 • 常见仪器/设备操作注意事项
Ø常见错误操作分析 • 实验卫生工作注意事项 • 实验安全注意事项
培训预期目标
ü通过本次培训，引导新入员工学习标准操作规程、增强操作意 识、提高操作能力并培养正确的工作习惯； ü纠正实验中的不正确操作，对不确定的操作方法进行整理和规 范化统一； ü在工作中对所进行的所有操作进行思考，建立正确的操作规范； ü减少因为失误操作造成的重复工作或错误引导。