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基因工程知识点总结

基因工程知识点总结

基因工程总结一.概念(1)原理:。

(2)优点:与杂交育种相比,;与诱变育种相比,。

(3)基因工程成功的原因:①成功拼接的原因:②成功表达的原因:二.基本工具1、两种酶:(1):作用特点:。

(2):E ·coli DNA 连接酶与T 4 DNA 连接酶的区别:2、一种运载体(1)条件:①;②;③具有特殊的标记基因(作用:)(2)种类:最常用;其他动植物病毒、三、操作程序(1):方法:①:不知道脱氧核苷酸序列②:已知目的基因两端一小段序列,便于③利用化学方法人工合成:知道全部序列,且基因比较小。

这种方法不需要模板。

(2)——基因工程的核心基因表达载体的组成:(3)生物种类常用方法受体细胞将目的基因插入到Ti 植物动物受精卵将含有目的基因的表+微生物原核细胞Ca 2处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA 分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA 分子质粒的T-DNA 上→农达载体提纯→取卵转化过程杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得色体的DNA 上→表达具有新性状的动物(4)①目的基因是否插入到转基因生物的染色体DNA 上:②是否转录:③是否翻译:④个体水平鉴定:抗虫、抗病接种实验易错点说明:1、切割目的基因和运载体的要求:用限制酶。

目的是:。

同种的含义是:同一种或相同两种,即单酶切或双酶切。

选择双酶切的原因是。

2、工具≠工具酶;运载体≠质粒。

3、启动子≠起始密码子,终止子≠终止密码子起始密码子和终止密码子位于mRNA上,分别控制翻译过程的启动和终止。

启动子:。

终止子:一段有特殊结构的DNA短片段,位于基因的尾端,作用是使转录过程停止。

4、基因探针的要求:①单链②有③5、农杆菌转化法中的“2”次导入:第一次:将含有目的基因的T—DNA的质粒导入农杆菌;第二次(非人工操作):将含有目的基因的T—DNA导入受体细胞并整合到植物细胞的染色体DNA上。

6、转化:。

《基因工程的基本操作程序》 讲义

《基因工程的基本操作程序》 讲义

《基因工程的基本操作程序》讲义基因工程是现代生物技术的核心,它让我们能够按照人类的意愿改造生物的遗传特性。

下面咱们就来详细说一说基因工程的基本操作程序。

一、获取目的基因目的基因是我们想要导入受体细胞的特定基因。

获取目的基因的方法主要有以下几种:1、从基因文库中获取基因文库就像是一个基因的大仓库,里面存放着各种各样的基因。

我们可以根据目的基因的有关信息,比如它的核苷酸序列、功能等,从基因文库中筛选出我们需要的目的基因。

2、利用 PCR 技术扩增目的基因PCR 技术就像是基因的复印机。

如果我们已经知道了目的基因的核苷酸序列,就可以设计引物,通过 PCR 反应让目的基因在短时间内大量扩增。

3、人工合成当目的基因较小,而且核苷酸序列又已知的时候,我们可以通过化学方法直接人工合成目的基因。

二、构建基因表达载体有了目的基因还不够,还得给它安个“家”,这个“家”就是基因表达载体。

基因表达载体就像是一辆搭载着目的基因的“专车”,能把目的基因准确无误地送到受体细胞中,并且让目的基因能够稳定存在和表达。

基因表达载体通常包括以下几个部分:1、启动子启动子就像是基因表达的“开关”,它能启动目的基因的转录。

2、终止子终止子就像是基因表达的“刹车”,它能让转录在需要的时候停止。

3、标记基因标记基因就像是基因表达载体的“身份证”,它能帮助我们筛选出含有目的基因的受体细胞。

4、目的基因这是我们想要导入受体细胞的基因。

构建基因表达载体是基因工程的核心步骤,一般需要用到限制酶和DNA 连接酶。

限制酶能够识别特定的核苷酸序列,并在特定的位点切割 DNA 分子;DNA 连接酶则能够把切割后的 DNA 片段连接起来,形成一个完整的基因表达载体。

三、将目的基因导入受体细胞目的基因只有进入受体细胞,并且在受体细胞中稳定存在和表达,才能发挥作用。

将目的基因导入受体细胞的方法有很多种,下面介绍几种常见的方法:1、农杆菌转化法对于植物细胞来说,农杆菌是一种天然的“基因运输员”。

第18讲 基因工程(讲义)解析版

第18讲 基因工程(讲义)解析版

第18讲 基因工程考点01 基因工程★ 考向1 基因工程的理论基础1、基因工程的理论基础2、基因工程的基本操作程序(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR 技术扩增和人工合成。

(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等,启动子在基因的首段,它是RNA 聚合酶的结合位点,能控制着转录的外源基因在受体细胞内表达理论 基础 ①基因是控制生物性状的遗传物质的结构和功能的基本单位。

②遗传信息的传递都遵循中心法则。

③生物界共用一套遗传密码。

重组DNA : 载体+目的基因 复制转录 RNA 翻译 蛋白质基因拼接 ①DNA 的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。

②DNA 分子都遵循碱基互补配对原则。

③双链DNA 分子的空间结构都是双螺旋结构。

开始;终止子在基因的尾端,它控制着转录的结束;标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。

(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样,将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

(4)目的基因的检测与鉴定。

分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术,个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

易错警示:辨析农杆菌转化法中的两次拼接与两次导入(1)两次拼接:第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA中;第二次拼接指被插入目的基因的T-DNA被拼接到受体细胞染色体的DNA上。

(2)两次导入:第一次导入是将含目的基因的Ti质粒导入农杆菌;第二次导入是将含目的基因的T-DNA导入受体细胞。

3、DNA的粗提取与鉴定(1)原理:利用DNA、RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。

《基因工程的基本操作程序》 讲义

《基因工程的基本操作程序》 讲义

《基因工程的基本操作程序》讲义基因工程,这一现代生物技术的核心领域,为我们打开了一扇通往生命奥秘和创新应用的大门。

它让我们能够在分子水平上对生物的遗传物质进行操作和改造,从而实现特定的目标。

接下来,让我们深入了解基因工程的基本操作程序。

一、获取目的基因目的基因是我们期望在受体细胞中表达和发挥特定功能的基因。

获取目的基因的方法多种多样。

一种常见的方法是从基因文库中获取。

基因文库就像是一个基因的“图书馆”,包含了某种生物的全部基因。

我们可以根据目的基因的相关信息,在这个“图书馆”中进行筛选和查找。

另一种方法是利用 PCR 技术扩增目的基因。

PCR 技术就像是一台基因的“复印机”,能够以少量的 DNA 为模板,通过多次循环的变性、退火和延伸过程,快速大量地扩增出特定的基因片段。

此外,如果已知目的基因的核苷酸序列,还可以通过化学方法人工合成目的基因。

二、构建基因表达载体获取了目的基因后,接下来需要构建基因表达载体。

这就像是给目的基因打造一个“专车”,使其能够顺利地进入受体细胞并发挥作用。

基因表达载体通常由目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分组成。

启动子是基因表达的“开关”,它能够控制基因在何时何地开始表达。

终止子则像是“停车信号”,告诉基因表达在何处结束。

标记基因则用于筛选和鉴定含有目的基因的受体细胞,常见的标记基因有抗生素抗性基因等。

构建基因表达载体时,需要使用限制酶和 DNA 连接酶等工具酶。

限制酶能够识别特定的核苷酸序列,并在特定的位点切割 DNA 分子。

DNA 连接酶则能够将切割后的 DNA 片段连接起来,形成完整的基因表达载体。

三、将目的基因导入受体细胞有了基因表达载体,接下来要将其导入受体细胞。

这是基因工程中的关键步骤之一,就像是把“专车”开到目的地。

导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法等。

农杆菌转化法是利用农杆菌能够感染植物细胞,并将其 Ti 质粒上的TDNA 转移到植物细胞中的特点来实现目的基因的导入。

基因工程重点总结(完整)

基因工程重点总结(完整)

基因工程重点总结(完整)基因工程名词解释:基因工程:重组DNA技术或者基因转移技术,在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子,构成遗传物质的新组合,并使之渗入到原先没有这类分子的宿主细胞内,而能持续稳定的传递和表达。

报告基因:其编码产物能够被快速测定,常用来判断外源基因是否成功地导入受体细胞(器官或组织)并检测其表达活性的一类特殊用途的基因。

双元载体:由两个分别含有T—DNA和Vir区的相容性突变Ti质粒构成的双质粒载体系统。

受体系统:用于转化的外植体通过组织培养途径或其他非组织培养途径,能高效、稳定地再生无性系,并能接受外源基因的整合,对转化选择抗生素敏感的再生系统。

正负选择法:哺乳动物细胞转染DNA发生随机整合的几率相当高,而同源重组的频率则相当低。

正是由于这种缘故,给哺乳动物细胞的基因定向插入事件的检测造成了很大困难。

用于富集同源重组事件的特殊试验体系,涉及正选择和负选择两个方面。

基因靶标:通过在转染细胞中发生的外源基因与核基因组目标基因之间的DNA同源重组,使外源基因定点地整合到核基因组的特定位置上,从而达到改变系把你遗传特性的目的。

密码子使用的偏爱性:无论是真核基因还是原核基因,一种特定的氨基酸并不是以同等频率使用所有的同义密码子,而主要使用其中的某一两种。

这种密码子使用的非随机性现象选择标记基因:用于鉴别目标DNA的存在,将成功转化了质粒的宿主挑选出来的基因。

主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因。

HA T选择法:由于选择TK+细胞的培养基含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸苷,所以称之为。

生殖细胞浸泡法:将供试外植体如种子、胚、胚珠、子房、花粉粒、幼穗悬浮细胞培养物等直接浸泡在外源DNA溶液中,利用渗透作用把外源基因导入受体细胞并稳定地整合、表达和遗传。

胚囊、子房注射法:使用微量注射器把外源DNA溶液注射到子房或胚囊中,由于卵细胞的吸收使外源DNA进入受精的卵细胞中,从而获得转基因的种子。

基因工程总结教学总结

基因工程总结教学总结

基因工程总结教学总结第一章绪论1、基因工程的含义:按照人们的意愿,进行严密的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术,有目的地改造生物种性,使现有的物种在较短时间内趋于完善,创造出更符合人们需求的新的生物类型。

2、基因工程的优点:打破物种间基因交流的隔离界限;②克服常规育种的周期长,效率低的缺点,定向改造生物性状;③可按照人的意愿去改造物种。

3、基因工程理论依据:不同基因具有相同的物质基础;②基因是可分割的;③基因是可以转移的;④多肽与基因之间存在对应关系;⑤遗传密码是通用的;⑥基因可以通过复制传递给下一代。

注:基因工程及其应用的图解看看第二章DNA重组的相关技术及原理1、重组DNA技术的原理重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序2、碱性SDS法提取质粒DNA原理:强碱使所有DNA变性沉淀,而pH为中性时,质粒DNA复性快,形成闭合环状从沉淀物中分离。

3、提取DNA总的原则保证核酸一级结构的完整性;其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;其他核酸分子,如RNA也应尽量去除。

4、核酸鉴定浓度鉴定②纯度鉴定③完整性鉴定5、限制性核酸内切酶:是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列(4-8bp),并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。

6、限制性内切酶的命名用属名的第一个字母和种名的头两个字母组成3个字母的略语表示寄主菌的物种名。

大肠杆菌(Escherichiacoli)Eco流感嗜血菌(Haemophilusinfluenzae)Hin用一个右下标的大写字母表示菌株或型。

如Ecok,Ecor(现在都写成平行,如EcoR)。

如果一种特殊的寄主菌内有几种不同的限制性内切酶,用罗马字母表示。

基因工程知识点总结

基因工程知识点总结

基因工程知识点总结基因工程是一门现代生物学领域的重要学科,它通过改造生物体的遗传物质,实现对生物体基因的精确操控和改良。

下面将对基因工程的相关知识点进行总结,以帮助读者更好地了解该领域的基本概念和技术应用。

一、基因工程的基本概念和原理基因工程是指通过人为手段修改生物体的基因组,以改变其性状和功能的技术。

其实现的基本原理包括基因定位、基因克隆和基因传递。

1. 基因定位:基因定位是指确定感兴趣的基因在基因组中的位置。

常用的方法有FISH(荧光原位杂交)和PCR(聚合酶链反应)等。

2. 基因克隆:基因克隆是指将感兴趣的基因从一个生物体中复制到另一个生物体中,使其在目标生物体中表达。

常用的方法有限制酶切、连接酶切和DNA合成等。

3. 基因传递:基因传递是指将经过克隆的基因导入到目标生物体中,并使其在目标生物体中稳定遗传。

常用的方法有基因枪、电穿孔和冷冻贮存等。

二、基因工程的应用领域基因工程技术在农业、医学和工业等领域有着广泛的应用,下面将分别介绍其主要应用领域。

1. 农业应用:基因工程技术在农业领域的应用主要包括转基因作物的培育和遗传改良。

通过导入特定基因,转基因作物可以获得抗病虫害、耐逆性或提高产量等特点,从而增加农作物的产量和质量。

2. 医学应用:基因工程技术在医学领域的应用主要包括基因诊断、基因治疗和生物药物的生产。

通过基因诊断,可以准确检测遗传病的基因突变,为疾病的早期预测和治疗提供依据。

基因治疗则通过修复或替代患者体内的异常基因,治疗遗传性疾病。

此外,基因工程技术还被用于生产重组蛋白和抗体等生物药物。

3. 工业应用:基因工程技术在工业领域的应用主要包括酶的生产和环境修复。

通过基因工程技术,可以大量生产具有特定功能的酶,用于工业生产和制药领域。

此外,基因工程技术还可以改造微生物,使其能够降解有机物污染物,用于环境修复和生物能源开发。

三、基因工程的伦理和安全问题尽管基因工程技术具有重要的应用前景,但也带来了一些伦理和安全问题。

基因工程知识点总结

基因工程知识点总结

基因工程知识点总结基因工程,这个在现代生物学中熠熠生辉的领域,正以惊人的速度改变着我们的生活和对生命的认知。

它就像是一把神奇的钥匙,开启了无数未知的大门,为解决人类面临的诸多问题带来了前所未有的希望和可能。

一、基因工程的定义与基本原理基因工程,简单来说,就是按照人们的意愿,将一种生物的基因在体外进行切割、拼接和重组,然后导入另一种生物的细胞内,使之稳定遗传并表达出相应产物的技术。

其基本原理基于三个重要的步骤:首先是获取目的基因,这就像是在茫茫基因海洋中找到我们想要的那一颗珍珠;其次是构建基因表达载体,相当于给这颗珍珠打造一个合适的盒子,使其能够安全、有效地传递;最后是将重组 DNA 分子导入受体细胞,并使其在受体细胞中稳定存在和表达。

二、获取目的基因的方法1、从基因文库中获取基因文库就像是一个巨大的基因仓库,里面存储着各种各样的基因。

我们可以根据已知的信息,从这个文库中筛选出我们需要的目的基因。

2、利用 PCR 技术扩增目的基因PCR 技术就像是一个基因的复印机,能够以极少量的基因片段为模板,快速大量地复制出我们想要的基因。

3、人工合成法如果已知目的基因的核苷酸序列,或者其氨基酸序列,我们可以通过化学方法直接人工合成目的基因。

三、基因表达载体的构建基因表达载体是基因工程的核心部分,它就像是一辆专门运输基因的列车,需要具备多个关键组件。

1、启动子启动子是基因表达的“开关”,它能够控制基因在何时何地开始表达。

2、终止子终止子则是基因表达的“刹车”,告诉基因在何处停止表达。

3、标记基因标记基因就像是一个个小标签,帮助我们筛选出成功导入目的基因的受体细胞。

4、目的基因这是我们最终想要表达的基因片段。

四、将目的基因导入受体细胞1、导入植物细胞(1)农杆菌转化法农杆菌就像是一个天然的基因运输工具,能够将其携带的基因转移到植物细胞中。

(2)基因枪法通过高速的微粒将目的基因直接打入植物细胞。

(3)花粉管通道法利用花粉管通道将目的基因导入植物的受精卵中。

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