沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品质量暂行标准

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沼泽红假单胞菌

沼泽红假单胞菌的生物学特性与研究进展摘要：沼泽红假单胞菌，是地球上最古老的具有原始光能合成体系的原核生物，沼泽红假单胞菌是广泛存在于自然界的微生物，是一类以光为能源，利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体，并能进行光合作用的生物。

在生物学分类中，属于真细菌纲、红螺菌目、红螺菌科、红假单胞菌属。

当前广泛应用于以下几个方面：①高浓度工农业有机废水的处理及资源化；②水质净化剂，水产养殖的水质调控及促进健康生长；③高营养饲料添加剂；④农业生产中的高效活性菌肥。

本文针对沼泽红假单胞菌的生物学特性、发酵条件或培养的情况（培养基、培养条件）、生化特征、生理特性、应用及研究进展进行先关阐述。

关键字：光合细菌沼泽红假单胞菌生物学特性生理生化实验研究进展光合细菌：光合细菌(PhotosyntheticBacteria，简称PSB)是自然界最广泛存在的比较古老的、能进行光合作用而不产氧的特殊生理类群的原核微生物的总称，具有原始光能合成体系，能在厌氧条件下进行不放氧的光合作用，是水体兼性厌氧层中主要的初级生产者，并在自然界的碳素、氮素、硫素转化循环中起重要作用。

它包括有红螺菌科(Phodospirillaceae)、着色菌科(Chromati-aceae)、绿杆菌科(Chlorobiaceae)、绿色丝状菌科(Chlo-roflexaceae)4科。

光合细菌广泛分布于水田、湖沼、江河、海洋、活性污泥、土壤、极地或温泉(包括高热水体)以及高盐、高有机质含量等不同生态环境中，它可以光能异养、化能异养、光能自养方式生活，存在着好氧、厌氧和兼性厌氧类型，能利用多种基质。

光合细菌细胞内含有细菌色素(如类胡萝卜素、菌绿素)、卟啉类化合物、泛醌等多种有效的自由基清除物质，可保护细胞膜、DN等自身细胞的重要组份不受损伤。

光合细菌具有多重代谢方式，尤其在对高浓度有机废水的净化处理中，表现出负荷低、效率高及投资少的优点；在禽畜养殖方面，光合细菌可作为一种饲料蛋白补充，还可以起到益生菌的作用。

沼泽红假单胞菌培养条件研究【最新】

沼泽红假单胞菌培养条件研究【最新】沼泽红假单胞菌培养条件研究摘要:对光合细菌沼泽红假单胞菌(B9)的培养条件及培养基配方进行了研究。

新筛选的培养基配方具有成分少、易配制、价格低的特点。

试验结果表明,沼泽红假单胞菌(B9)是一株较耐低营养的微耗氧的菌株,在500~5000lx光照下能良好生长,最适的生长温度为30e,培养周期为4d。

关键词:光合细菌;沼泽红假单胞菌;培养条件A Study on Conditions of Culture of Photosynthetic BacteriaAbstract:This paper studied on conditions and prescriptions ofculture ofphotosynthetic bacteria with Rhodopseudomonas palustris B9.New media is low cost and very simple. The results showed that suitable conditions of PSB were at 30e,4000~5000lx and 4days.Kew words:photosynthetic bacteria; Rhodopseudomonas palustris; conditions andprescriptions of culture随着光合细菌在水产养殖、污水净化等领域的应用,对光合细菌菌剂的需求量增加,本试验对光合细菌沼泽红假单胞菌(B9)的主要培养条件进行研究,为光合细菌菌剂生产提供可靠依据。

1材料与方法1.1菌种光合细菌(PSB)沼泽红假单胞B9菌株,由沈阳农业大学微生物教研室光合细菌课题组分离提供。

活菌数测定方法,见参考文献[4]。

1.2营养条件对PSB生长的影响按照表1设计培养基配方,配制培养基。

EDTA和微量元素配制成母液。

分装500mL滴流瓶,每瓶400mL,胶塞封口, 121e,灭菌30min。

Q_LMSW002-2019光合细菌企业标准

Q/LMSW 上海领魅生物科技有限公司企业标准Q/LMSW002-2019光合细菌2019-10-22发布2019-10-22实施上海领魅生物科技有限公司发布前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由上海领魅生物科技有限公司提出。

本标准由上海领魅生物科技有限公司起草。

本标准主要起草人：李友全。

光合细菌1、范围本标准规定了水产养殖用光合细菌制剂的要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输和贮存及保质期。

本标准适用于以光合细菌为主要菌种，混合有机、无机物质，经发酵培养而成的，用于调节养殖水质、改善水产养殖环境的制剂。

2、规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T19524.1肥料中粪大肠菌群的测定GB/T19524.2肥料中蛔虫卵死亡率的测定GB20287－2006农用微生物菌剂GB/T23349－2009肥料中砷、镉、铅、铬、汞生态指标JJF1070定量包装商品净含量计量检验规则国家质量监督检验检疫总局令（第75号）定量包装商品计量监督管理办法3、要求3.1菌种产品所采用的菌种应安全、有效，并经过农业部认定的国家级科研单位的鉴定，包括属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据、活性、安全性等完整资料。

3.2外观本产品为白色粉末或深红棕色液体，应无肉眼可见的杂质。

3.3理化性能产品的理化性能应符合表1要求。

表1项目指标有效活菌数（cfu）/（亿个/g）≥10杂菌率/％≤10水分/%≤35.0pH值 6.0～8.53.4无害化指标产品的无害化指标应符合表2的要求。

表2项目指标粪大肠菌群数/（个/g）≤100蛔虫卵死亡率/％≥95砷及其化合物含量（以As计）/（mg/kg）≤75镉及其化合物含量（以Cd计）/（mg/kg）≤10铅及其化合物含量（以Pb计）/（mg/kg）≤100铬及其化合物含量（以Cr计）/（mg/kg）≤150汞及其化合物含量（以Hg计）/（mg/kg）≤53.5净含量定量包装产品应符合国家质量监督检验检疫总局令[2005]第75号《定量包装商品计量监督管理办法》。

微生态制剂的质量鉴别与选择_检测指标和标准

微生态制剂（农业部官方称为“微生物饲料添加剂”）在20世纪70年代兴起时，被认为只有活的微生物才能起到微生态的平衡作用，因此认定微生态制剂是活菌制剂，甚至有一段时间，把微生态制剂就称为“活菌制剂”。

但随着科学研究的不断深入，大量资料证明，死菌体、菌体成分、代谢产物也具有调整微生态失调的功效。

因此，在1994年德国海德堡召开的国际微生态学术讨论会上，修改了微生态制剂（益生菌）的定义：“益生菌是含活菌和（或）死菌，包括其组分和产物的活菌制品，经口或经由其它粘膜途径投入，旨在改善粘膜表面处微生物或酶的平衡，或者刺激特异性或非特异性免疫机制”。

人们对活菌的作用比较容易理解，而对死菌的作用了解甚少，有资料证明，从电镜也能直接观察到死菌体也可黏附在肠壁，排斥有害菌，从而调节微生态平衡；菌体的细胞壁成分———脂磷壁酸（LTA）及胞壁肽聚糖（PG），二者都能抑制腐败菌的致癌作用，并有很强的免疫激活作用。

死菌体的特点是质量较稳定，比活菌更安全，并可以与抗生素同时使用。

代谢产物是指细菌在生命活动过程中产生的代谢产物（排泄物），如酸性物质及细菌素对有害菌有拮抗、杀灭作用，细菌分解食物后的氨基酸以及合成的维生素、酶具有营养作用，菌体碎片对动物体也有免疫促进作用。

代谢产物的特点是对动物体的作用较快。

按照最新的益生菌概念内涵来理解，则给微生态制剂的质量评定增加了不少困难。

即从成分上至少包括三个方面：活菌数量、死菌体含量、代谢产物的种类及含量。

FAO/WHO对益生菌也作了定义：益生菌是活的微生物，当摄入足够数量时，对宿主起有益健康作用。

大家公认的观点是：益生菌首先在销售过程中要保持活性（存活），而且在动物饲用后还要抵抗胃液、胆汁的强酸性消化作用。

在国标《微生物饲料添加剂技术通则(NY/T1444—2007)》（以下简称《通则》）中指出，微生物饲料添加剂(microbial feed additive)是指在饲料中添加或直接饲喂给动物的微生物或微生物及其培养物，参与肠内微生态平衡或者刺激特异性或非特异性免疫功能、具有促进动物生长和提高饲料转化效率的微生物制剂。

沼泽红假单胞菌的培养优化及植物病害防治研究

沼泽红假单胞菌的培养优化及植物病害防治研究作者：颜纲邹宁高乐天来源：《农业灾害研究》2022年第07期摘要沼泽红假单胞菌是应用较为广泛的一种光合细菌，在污水处理、农业种植、畜牧与水产养殖等领域都有较多应用。

在自然培养条件下优化培养基配方，对培养条件中对影响细菌生长的因素进行探究。

最终确定最佳C源乙酸钠添加浓度为10 g/L，最优N、P源为复合肥2（N：P：K=15：15：15），最佳添加浓度为0.5 g/L。

细菌适宜生长的培养条件为温度25℃以上、光照强度 4 000 lx以上、pH值范围为7.5～8.0。

在植物病害防治实验中，结果表明：沼泽红假单胞菌对枣锈病病原菌、根腐病病原菌、褐腐病病原菌、叶霉病病原菌具有显著的抑制效果。

关键词沼泽红假单胞菌;培养优化;植物病害防控中图分类号：X703 文献标识码：B 文章编号：2095–3305（2022）07–0028–03沼泽红假单胞菌（Rhodopseudom-onas palustris），红螺菌科，红假单胞菌属，属于光合细菌中紫色非硫细菌属的代表菌种之一，也是目前应用较广泛的光合细菌之一。

王兰等[1]利用沼泽红假单胞菌和纤细红螺菌、球形红假单胞菌的混合菌液处理虾池养殖废水，4 d后发现混合菌体对养殖废水中的COD、氨氮的去除率分别达到了72.59%、89.2%。

崔艺久等[2]对沼泽红假单胞菌的培养基和培养条件进行了优化以获得类胡萝卜素，在培养7d 后，类胡萝卜素最大产量达2.863 mg/g。

杨素萍等[3]探究了沼泽红假单胞茜Z菌株光合产氢的主要影响因素，研究结果表明：在标准状况下，菌株的最大产氨速率可达19.4 mL/（L·h）。

易力等[4]从洛河水域分离筛选得到2株光合细菌，分别为沼泽红假单胞菌、万尼氏红微菌，这2种菌对模式菌株金黄色葡萄球菌和大肠杆菌都具有较好的抑制作用，且沼泽红假单胞菌对大肠杆菌的抑制效果优于万尼氏红微菌，后者对金黄色葡萄球菌的抑制效果优于前者。

沼泽红假单胞菌注意事项

沼泽红假单胞菌注意事项1. 沼泽红假单胞菌是一种常见的细菌，生活在湿地、沼泽和水稻田等潮湿环境中。

在研究和处理沼泽红假单胞菌时，需要注意以下几点。

2. 实验操作时，应确保严格的无菌条件，以防止其他微生物的污染。

使用高温高压消毒器进行培养器皿和培养基的消毒是一个好的选择。

3. 沼泽红假单胞菌在温度和湿度较高的环境中生长最好。

通常在30°C到37°C的温度下培养，保持适当的湿度。

4. 沼泽红假单胞菌对光线敏感，因此在培养时，应尽量避免直接阳光照射到培养物上，最好放置在遮光布下。

5. 在培养基的选择上，常用的有牛肉膏培养基、大肠杆菌培养基和麦康凯培养基等。

选择合适的培养基可以促进红假单胞菌的生长和繁殖。

6. 沼泽红假单胞菌对氧气有一定的耐受能力，可以在有或无氧环境中生长。

在研究和培养沼泽红假单胞菌时，可以选择合适的培养条件，以满足不同研究需求。

7. 由于沼泽红假单胞菌是一种革兰氏阴性菌，肽聚糖和革兰氏染色是常用的检测方法。

可以使用显微镜观察细菌的形态特征，并进行染色以便于观察。

8. 沼泽红假单胞菌在实验室中可以用于生化试验，如碳源利用实验、酶活性测定等。

这些实验可以提供沼泽红假单胞菌的生理特征和代谢活性信息。

9. 对于研究红假单胞菌的抗菌素敏感性，可以进行抗生素敏感试验。

常用的方法有纸片扩散法和微量稀释法等。

10. 在研究和处理沼泽红假单胞菌时，应遵循实验室安全操作规程。

注意个人防护，避免接触细菌悬浮液和培养基，避免摄入和入侵伤口。

实验结束后，及时进行培养器皿和试剂的消毒处理。

高活性光合细菌沼泽红假单胞菌培养特性初探

收稿日期:2001-09-03作者简介:张玲华(1973-),女(汉族),浙江宁波人,助理研究员,硕士.文章编号:1000-5463(2001)04-0037-03高活性光合细菌沼泽红假单胞菌培养特性初探张玲华,邝哲师,陈　薇,张宝玲(广东省农业科学院生物技术研究所,广东广州510640)摘要:从广东台山养虾塘底污泥中采用平板涂布法分离光合细菌,得到一株活性较高的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris ),并对其培养特性进行了初步探讨,结果表明:菌株最适生长温度为25-30℃,光照强度为1500-3000lx ,适当地添加酵母膏有利于菌体繁殖,酵母膏的最适添加量为质量分数0115%,盐度范围在质量分数为011%-3%均能生长.关键词:沼泽红假单胞菌;筛选;培养特性中图分类号:Q939.11+2 文献标识码:A 当前我国水产业迅猛发展,但由于长期养殖方式不当,导致池塘老化,水质恶化,有机物严重污染,致病微生物大量繁殖,形成大量的鱼虾病害.因此寻求一种新型水质改良剂已是当务之急.光合细菌是广泛存在于自然界的微生物,是一类以光为能源,利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体,并能进行光合作用的生物.它不仅能净化水质,而且含有丰富的营养,可作为鱼虾的饵料添加剂,同时能促进水产品的繁殖,提高孵化率[1-4].光合细菌的多种良好性能已引起国内外广大学者的关注.我们特从本省高产虾塘的污泥中进行了光合细菌的分离,得到一株细胞活性高的沼泽红假单胞菌ZP23,并对其培养条件进行了初步摸索,为以后的应用研究打下基础.1　材料与方法(1)待分离材料.取广东省台山高产虾塘的底泥为材料.(2)培养基.富集培养基和分离培养基按参考文献[5];扩大培养基是在分离培养基的基础上添加微量元素母液10m L (每升培养基).(3)菌株的分离筛选方法.由台山高产虾塘的底泥,于28℃,2000lx 光照下进行富集培养3-4d 后,培养液呈绛红色,连续转接3次,然后采用改良的Hungate 厌氧培养技术———柱滚管法[6]进行分离纯化,用分离培养基的琼脂柱穿刺培养后保存[6].(4)温度和光照强度对菌株生长的影响①温度实验.将已接种的光合细菌培养液于光照强度为2000lx 的条件下培养,温度分别控制在15、20、25、28、30、35、40℃,培养3d ,用721分光光度计测定OD 660.②光照实验.将已接种的光合细菌培养液于温度为28℃,光照强度分别为500、1000、1500、2000、2500、3000、4000、5000lx 下培养3d ,用721分光光度计测定OD 660(用培养初刚接种的培养液为空白对照).(5)酵母膏的质量分数对菌株生长的影响在培养液中分别加入酵母膏,令其质量分数分别为0101%、0103%、0105%、0108%、2001年11月 N ov.2001 华南师范大学学报(自然科学版)JOURNA L OF SOUTH CHINA N OR MA L UNIVERSIT Y (NAT URA L SCIE NCE E DITI ON ) 2001年第4期　N o.4,20010110%、0115%、0120%、0125%、0130%、0135%.于28℃,2000lx下培养3d.用721分光光度计测定OD660(用培养初刚接种的培养液为空白对照).(6)培养液盐浓度对菌体生长的影响.将培养液的盐度分别调至质量分数为011%、015%、110%、115%、2%、3%、4%、5%、6%,其它情况如上所述.2　结果与分析211　菌种的形态特征及培养特征菌株ZP23幼龄单个细胞呈杆形,偶见弯曲,极生鞭毛,革兰式阴性菌,细胞大小为016-019μm×112-210μm,老龄菌株常形成玫瑰花形或集束形排列.菌株在光照厌氧培养下,繁殖速度很快,在扩大培养基中培养液颜色由淡粉红色逐渐变成棕红色;在固体培养基上,菌落成圆形,棕红色,直径约为1-4mm1212　温度及光照强度对ZP23菌株生长的影响光合细菌能利用光能作为能源,但光的强弱对菌株的生长与代谢有较大的影响.将ZP23接种于试管中进行光照厌氧培养,图1和图2分别示出了不同光照强度和不同温度对菌体繁殖的影响.图1　温度对ZP23菌株的影响图2　光照强度对ZP23的影响由图1及图2可知,ZP23菌株在温度25-30℃范围内繁殖速度快,温度过高或过低都不利于菌体繁殖;而光照强度在1500-3000lx范围内生长迅速,培养液很快由淡粉红色逐渐变成棕红色,当光照强度低于1500lx时,菌体生长缓慢,当高于3000lx时,菌株细胞易老化,短期内导致细胞大量沉淀,菌体死亡,镜检时发现许多细胞已破碎.213　菌种的鉴定　根据上述实验结果,又依据伯杰式菌种鉴定手册[第八版]中Rhodopseudomonas palustris的形态、生理生化的描述,结果表明ZP23菌株与Rhodopseudomonas palustris的性状相近,故我们初步判断:该菌株为沼泽红假单胞菌.214　酵母膏的质量分数对菌株生长的影响图3示出了酵母膏的质量分数对ZP23菌图3酵母膏的质量分数对ZP23菌株的影响株影响情况.由图3可知,酵母膏对菌体生长有明显的促进作用,酵母膏的质量分数在012%以内对菌体繁殖速度有很大影响,但质量分数太高,不但增加生产成本,而且容易染菌,不利于大规模地生产,故采用质量分数为0115%.83215　ZP23菌株盐度的适应性从高产虾塘的底泥中分离得光合细菌ZP23菌株,令其在质量分数为011%-3%的盐度基质上培养,观察光照下厌氧培养72h菌株的生长情况,如表1所示.由表1可看出:菌株在质量分数为011%-3%的NaCl基质上生长良好,表明ZP23菌株具有较广的适盐性.表1　在不同盐度的培养基质上光合细菌的生长情况w(Nace)/%0.10.5 1.0 1.5 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0菌株生长情况++++++++++++++++++++-(“+++”表示菌体细胞繁殖速度很好;“++”表示生长较好;“+”表示仅仅生长;“+-”表示略有生长)3　结论(1)从广东台山养虾塘底污泥中分离了一株细胞活性高的沼泽红假单胞菌ZP23,该菌株在光照厌氧条件下培养,可得棕红色菌液.(2)ZP23菌株在1500lx-3000lx的光照强度下生长,细胞很快达到对数生长期,其最适生长温度为25-30℃.(3)在添加适量的生长因子-酵母膏的情况下,ZP23菌株能得到明显的促生作用,酵母膏的最佳质量分数为0115%.(4)ZP23菌株具有较广的适盐性,在质量分数为011%-3%的NaCl基质上生长良好.参考文献:[1]　黄　皓.光合细菌在水产养殖中应用的研究[J].湛江水产学院学报,1990,10(3):58-61.[2]　小林正泰.养鱼と光合细菌[J].养殖,1981,18(8):56-59.[3]　小川静夫.光合细菌の养鱼いの利用[J].养殖,1985,22(5):66-68.[4]　俞吉安.应用光合细菌饵料添加剂的研究报告[J].淡水渔业,1991,(3):8-11.[5]　[澳]斯克尔曼V B D.细菌属的鉴定指导[M].北京:科学出版社,1978.313-316.[6]　Hungate R E A.R oll Tube Method for Cultination of S trict Anaerobes[C].北京:高等教育出版社,1969.23. CU LTURE OF A PH OTO SYNTHETIC BACTERIA FR OM THE MU D OF SHRIMP PON DSZH ANGLing-hua,K UANG Zhe-Shi,CHE NG Wei,ZH ANG Bao-ling(Bio-T ech Research Institute,G uangdong Academy of Agricultural Sciences,G uangzhou510640,China)Abstract:A high productivity strain was screened from the mud of shrim p ponds,and was identified as Rhodopseudomonas palustris.The preliminary study on the growth conditions was carriedout.The tests showed the strain can grow anaerobically in light adopted to a large range of organic com pounds.The op2 timun growth tem perature is25-30℃.The cells can grow under the light of1500-30001x.Adding yeast extract can prom ote the cell growth.The optimun content of yeast extract in the culture medium is 0.15%.The strain adapt to0.1-3%salinity.K ey w ords:Rhodopseudomonas palustris;screen;cultural characteristics【责任编辑　黄玉萍】93。

沼泽红假单胞菌HEW-GJ106的应用说明书

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号 (45)授权公告日 (21)申请号 201910221032.7(22)申请日 2019.03.22(65)同一申请的已公布的文献号申请公布号 CN 109749975 A(43)申请公布日 2019.05.14(83)生物保藏信息CGMCC NO.17021 2018.12.21(73)专利权人北京好实沃生物技术有限公司地址 100044 北京市海淀区高粱桥斜街59号中坤大厦903(72)发明人李雪平　李成　印遇龙　(74)专利代理机构北京汇泽知识产权代理有限公司 11228代理人李岩(51)Int.Cl.C12N 1/20(2006.01)A23K 10/18(2016.01)C12R 1/01(2006.01)(56)对比文件CN 106148219 A ,2016.11.23CN 106190912 A ,2016.12.07CN 106190913 A ,2016.12.07JP 2008199914 A ,2008.09.04JP 2013133312 A ,2013.07.08CN 103284029 A ,2013.09.11Okamura ,K.等.Rhodopseudomonas palustris strain ATCC 17001 16S ribosomal RNA , partial sequence , NCBI Reference Sequence: NR_112912.1.《Genbank数据库》.2019,ORIGIN.Okamura ,K.等.Rhodopseudomonas palustris strain ATCC 17001 16S ribosomal RNA , partial sequence , NCBI Reference Sequence: NR_112912.1.《Genbank数据库》.2019,ORIGIN.审查员李婷 (54)发明名称一株沼泽红假单胞菌HEW-GJ106及其应用(57)摘要本发明提供了一株新分离的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)HEW ‑GJ106，该菌具有显著的益生性，能显著抑制大肠杆菌(E s c h e r i c h i a c o l i )、金黄色葡萄球菌(S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s )、沙门氏菌(S a l m o n e l l a s p .)、嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila))等病原菌的生长繁殖，具有良好的抑菌性。

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商务版 | 政务版 | ENGLISH 首页 > 政策法规 > 通知农牧函[1998]30号沼泽红假单胞菌（光合细菌）水剂产品质量暂行标准
作者：摘自：日期：1998-08-04
中华人民共和国农业部通知
农牧函[1998]30号
各省市、自治区、直辖市畜牧（农牧）厅（局）、饲料工业办公室：
根据农业部有关饲料添加剂审批的规定，经审核，批准北京市奇威生物工程研究所研制的沼泽红假单胞
菌（光合细菌）水剂为水产养殖用新饲料添加剂。

试产期二年，试产期实行产品保护。

试产期内该产品的生
产监督按我部发布的质量暂行标准执行。

一九九八年八月四日
附件
沼泽红假单胞菌（光合细菌）水剂产品质量暂行标准
1．主题内容与适用范围
本标准规定了沼泽红假单胞菌（光合细菌）水剂产品的质量指标、试验方法、检验规则、
标志包装、运输、储存的要求。

本标准适用于沼泽红假单胞菌类（光合细菌）水剂的生产。

2．引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。

在标准出版时，所
示版本均为有效，所有标准都会被修订，使用标准的各方应探讨、使用下列标准最新版本
的可能性。

GB 13079－91饲料卫生标准
GB 13091－91饲料中沙门氏菌的检验方法
GB 8381－87 饲料中黄曲霉素B1的测定方法
GB 13079－91饲料中总砷的测定方法
GB 13080－91 饲料中铅的测定方法
GB 10648－93饲料标签
3．技术要求
3．1微生物指标
3．1．1菌落形态
本品稀释后在琼脂培养皿上培养，菌落形态为草帽形或园形，表面光滑，少隆起，边缘整
齐，棕红色。

3．1．2菌体形态
显微镜下观察，本产品菌体形态为短杆状或卵园形，宽0.5-0.9微米，长1.2-2.0微米，无
芽孢，无荚膜，单极鞭毛，可运动。

3．1．3革兰氏染色阴性
3．2感观指标
本品为红色悬浮液体，带培养基发酵味，长时间静置红色悬浮菌体会逐渐下沉，振荡后可
恢复悬浮液状，无臭味。

3．3光合细菌含量
总菌数不低于30亿个／ml
活菌数不低于20亿个／ml
3．4理化指标
酸度PH6.5-7.0
电导率6－8ms/cm
3．5光谱指标
光吸收植A660＞1.5
A490＞2.5
A805＞1.7
A860＞1.9
3．6卫生指标
沙门氏菌无
黄曲霉素B1 Mg/Kg ＜0.02
总砷（AS） Mg/Kg ＜0.5
铅 Mg/Kg ＜2.0
4．试验方法
4．1试剂和溶液
除特别注明外，试验中所用试剂为分析纯试剂，水为蒸馏水或相应程度的水，溶液为水溶液。

4．1．1光合细菌培养液
5.5g磷酸二氢钠，1.5gDL苹果酸，2g乙酸钠，2g氢氧化钠，1g氯化铵，0.25g氯化镁，0.05g氯化钙溶于1升蒸馏水，再
加入本产品生产中用的生长因子溶液和微量元素溶液各1ml，搅拌均匀，测定pH应于6.5至7.0之间。

4．1．2 60％蔗糖溶液
4．1．3琼脂粉
4．2仪器设备
常规实验和仪器和设备
4．2．1分光光度计：有10mm比色池，可在340－900nm处测量吸光度。

4．2．2 1600倍光学显微镜
4．2．3电动离心机（4000转／分）
4．2．4酸度计：精度0.01PH
4．2．5电导仪：DDS－11型（或同等精度其它型号）
4．3取样
需备20ml具塞磨口无色透明的三角瓶为样品瓶，洗净后置烘箱120℃干燥灭菌，用清洁并灭菌后的25ml移液管（或吸管）随机在5桶产品中各取25ml左右置于样品瓶中混和，将靡口塞盖严，用胶布封住，贴上标签注明厂名、产品名，批号。

取样日期、生产日期。

按和以上相同方法取样200ml置于一干燥灭菌洁净的200ml白塑料瓶中，注明标签（内容同上）密封后留存。

4．4检验方法
4．4．1微生物检验
4．4．1．1菌落形态检验：用含1.2％琼脂的光合菌用培养液，除菌处理后，在无菌环境中，充平皿板，厚约3－5mm。

凝固后取光合菌液做平板划线，将平皿厌氧培养光照3－5天，室温30℃，3－5天后长出红色菌落，观察菌落形态。

4．4．1．2原菌液用培养液稀释100倍，取一滴置载片上（盖盖片）在高倍镜下（16×40）观察菌形态大小及运动状态。

4．4．1．3培养中的菌液一滴做涂片，自然干燥，酒精灯火焰固定，经初染（结晶紫），媒染（路氏碘液），脱色（95％乙醇），复染（番红染液）后，油镜（16×100）观察，菌体呈红色。

4．4．2感观检验
量取样品500ml，置三角瓶中，用肉眼观察颜色，用嗅觉检察嗅味。

长期静置已有沉淀的产品应先振荡或搅拌10－20秒后再取样。

4．4．3含量测定
4．4．3．1总菌数测定：样品充分振荡后取0.5ml用水稀释到200ml灭菌水中，搅匀后从中取数微升充板入血球计数板的计数池中（每大格0.1mm3，置600倍显微镜下观察，同时用红血球计数法记菌数，将25个小格的每格菌数平均值乘1亿为每毫升总菌数。

4．4．3．2活菌数测定：将4．4．3．1节中稀释的菌液再稀释100000倍，取1ml加到10ml培养液中，混合均匀后加入20g/1000ml 浓度琼脂溶液10ml，置平皿中凝固，加玻璃盖在25－30℃温度，无菌环境下，60瓦白炽灯照射，距灯泡12cm，1－2天后观察计数菌落数，以下式计算：
每毫升样品中的活菌数＝菌落计数／25×1亿
4．4．4理化指标测定
4．4．4．1酸度测定
以不低于0.01PH值精度的酸度计，直接于20ml样品中测量。

4．4．4．2电导率测定
以DOS－IIA型（或同等精度其它型号）电导仪直接于20ml样品中测量。

4．4．5光谱指标测定
取0.5ml样品置3ml容积，1cm光径比色杯中，加入2ml蒸馏水，以蒸馏水为对照，在可见分光光度计中读取660nm、490nm、
805nm、860nm波长处光吸收值，再乘5得到以上几个波长处的光吸收值。

4．4．6卫生指标检验
4．4．6．1沙门氏杆菌检验
按GB13091－91测定方法检测
4．4．6．2黄曲霉素B1检验
按GB8381－87测定方法检测
4．4．6．3总砷含量测定
按GB13079－91测定方法检测
4．4．6．4铅含量测定
按GB13080－91方法检测
5．检验规则
5．1本品应由生产厂的质量检验部门进行检验：生产厂保证所有出厂的产品均符合本标准的要求，每批出厂的产品，都应附
有质量检验合格证明书。

5．2感观指标、理化光谱及微生物指标为生产厂日常检验项目，由生产厂质检部门进行检验。

6．判定规则
检验中有一项指标不符合本标准时，应重新抽样，进行复检，复检结果仍有一项指标不符合本标准时，则该批产品不能验收。

7．标签、包装、运输、储存
7．1标签
7．1．1采用鲜明的标签贴于外包装；
7．1．2标签内容应符合饲料标签标准规定要求；
7．1．3标签上需采用现已注册的“红精灵”商标，条件成熟时考虑增加防伪标志。

7．2包装
采用白色聚乙烯有密封盖的塑料桶或塑料瓶。

7．3运输
运输中应避免日晒，避免35℃以上高温，搬运装卸时小心轻放，不得到置，不得与有毒物质混装混运。

7．4储存
应保存于阴凉的仓库中，避免直接日晒，（不需要黑暗）避免30℃以上高温，不得和有毒、有害物质一起堆放。

原包装（未
开封）保质期4个月。