基因工程试题及答案

《基因工程》

一、选择题(每小题1、5分,共15分)

1.基因工程的创始人就是 ( )。

A A、 Kornberg

B W、 Gilbert

C P、 Berg

D S、 Cohen

2.关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有( )不太恰当。

A 由作用于同一DNA序列的两种酶构成

B 这一系统中的核酸酶都就是Ⅱ类限制性内切核酸酶

C 这一系统中的修饰酶主要就是通过甲基化作用对DNA进行修饰

D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统

3.在DNA的3’-5’链上,基因的起始密码子就是 ( )

A ATG(或GTG)

B AGT

C TAG

D TGA

4.II限制性内切核酸酶可以特异性地识别 ( )。

A 双链DNA的特定碱基对

B 双链DNA的特定碱基序列

C 特定的三联密码

D 以上都正确

5.末端转移酶就是合成酶类,具有( )活性。

A 3’→5’DNA聚合酶

B 5’→3’DNA聚合酶

C 5’→3’DNA内切酶

D 5’→3’DNA外切酶

6.下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid)性质的描述中,( )就是不正确的。

A 质粒的复制只受本身的遗传结构的控制,因而有较多的拷贝数。

B 可以在氯霉素作用下进行扩增。

C 通常带有抗药性标记。

D 同严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。

7.关于cDNA的最正确的说法就是( )。

A 同mRNA互补的单链DNA

B 同mRNA互补的双链DNA

C 以mRNA为模板合成的双链DNA

D 以上都正确

8.关于T4 DNA Ligase,下列说法中哪一项不正确? ( )

A 就是最常用的DNA连接酶。

B 不但能连接粘性末端,还能连接齐平末端。

C 不但能连接粘性末端。

D 最适温度37 ℃。

9.下列关于建立cDNA文库的叙述中,( )就是错误的?

A 从特定组织或细胞中提取DNA或RNA

B 用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA

C 以新合成的单链DNA为模板合成双链DNA

D 新合成的双链DNA克隆到载体上,并导入受体细胞

10.用下列方法进行重组体的筛选,只有( )说明外源基因进行了表达。

A Southem blot

B Northem blot

C Western印迹

D 原位菌落杂交

二、填空题(每空1分,共25分)

1.限制性内切核酸酶分为三类,基因工程中应用的就是____________ _。

2.为了防止DNA的自身环化,可用_____________去双链DNA__________________。

3.切口平移(nick translation)法标记DNA探针时应用的酶就是_____ ___ __。

4.基因工程中的3种主要类型的载体就是_______________、_____________、__________。

5.野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因就是、与。

6.黏粒(cosmid)就是杂合载体。

7.引物在基因工程中至少有4个方面的用途:(1) (2) 、 (3) (4) 。

8.Northern印迹与Southern印迹有两点根本的区别:(1)_ __、,(2)________

9.PCR反应中常用的酶就是______ _ 。

10.感受态的大肠杆菌细胞在温度为______ _时吸附DNA, _________时摄人外源DNA。

11、用碱法分离质粒DNA时,染色体DNA之所以可以被除去,就是因为。

12、除具有较低的分子量外,一个理想的质粒载体必需包括______、__________、_______三个部分。

13.转基因植物操作中常用的载体就是。

14、 pcDNA3、1用于。

三、名词解释(每小题4分,共20分)

1.目的基因:

2.基因工程:

3.载体:

4.Western印迹:

5.核酸分子杂交:

四、简答题(每小题10分,共20分)

1、基因工程的基本操作程序?

2、怎样制备目的基因?

《基因工程》评分标准与参考答案

一、选择题:每小题1、5分,共15分;多选不得分。

1d; 2b; 3a; 4b; 5b; 6c; 7c; 8c; 9a; 10c

二、填空题: 每空1分,共25分

1.II类酶。

2.碱性磷酸酶;5’端的磷酸基团

3.DNA聚合酶I。

4.质粒DNA;病毒DNA;质粒与病毒DNA杂合体

5.没有合适的限制性内切核酸酶识别位点;选择标记

6.质粒与λ噬菌体

7.合成探针;合成cDNA;用于PCR反应;进行序列分析

8.印迹的对象不同:Northern就是RNA,Southern就是DNA;)电泳条件不同,前者就是变性条件,后者就是非变性电泳

9.Tag DNA 聚合酶

10.0︒C;42︒C

11.染色体变性后来不及复性

12.复制起点;选择标记;克隆位点

13.Ti质粒

14.外源基因导入哺乳动物细胞

三、名词解释(每小题4分,共20分)

1.在基因工程中被操作的DNA序列;又称外源基因(foreign gene/exogenous gene),主要就是指编码蛋白质的结构基因(structural gene);它们可以从自然界中已有的物种基因组(genome)中分离出来,也可以用人工的方法合成。

2.按照人们的意愿,进行严密的设计,通过体外DNA重组与转基因等技术,有目的地改造生物种性,生产生物活性物质,甚至创造新物种的技术。

3.携带外源基因进入受体细胞的DNA分子。

4.Western印迹就是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上;然后用特异性的抗体进行检测;可说明基因就是否进行了表达。

5.用标记的探针检测出DNA或RNA同源序列的技术;原理就是碱基互补;常用的有Southern blot、Northern blot与原位杂交。

四、简答题(20分)

1. 目的基因的制备;目的基因与载体连接;目的基因导入受体细胞;目的基因的表达与检测。或者:转、接、切、增、检(加以解释)。

2. 直接分离法、构建基因文库分离法、PCR扩增法、人工合成法等。(加以解释)

五、实验与论述题(20分)

①由于基因已被测序,可通过RT-PCR方法克隆该基因;

②也或通过基因文库分离法获得该基因;

③基因可以在大肠杆菌中作为融合蛋白质或分泌蛋白质进行表达。

具体操作如下:

④制备目的基因;⑤连接到T-载体;⑥转化大肠杆菌,提质粒;⑦测序;⑧酶切,回收目的基因,连接到原核表达载体;⑨再转化大肠杆菌,大量培养;⑩分离、纯化与检测表达产物。