沙门菌增菌培养基增菌效果的探讨与分析研究

国卫生检验杂志２００４年４月第１４鲞第２—Ｊ￣　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａ

ｌ　ｏｆ

Ｈｅａｌｔｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｔ　

［文章编号］ｌＯＯ４－８６８５（２ｏｏ４）ｏ２．１５９・０３　沙门菌增菌培养基增菌效果的探讨与分析研究　

熊国强，应艳，余蔷，余希　（南昌市西湖区卫生防疫站检验科，江西３３０００３）　

１５９　【研究报告】　

摘要［目的］选择好的商品增菌培养基，以提高沙门菌的检出率。［方法］用一定数量的大肠埃希菌与不同数量　种类的沙门菌混合培养，观察不同增菌液的增菌效果。［结果］目前市售的沙门增菌培养基的增菌效果差距很大，差的只　有在１：１０状况下沙门菌呈优势生长，好的可达１：１×１　或以上状况下仍呈优势生长。［结论］自配的Ｓｃ和ＴｒＢ增菌液　增菌效果最好。　关键词沙门菌；增菌效果；ＳＣ；ＭＭ；ＴｒＢ　

Ｅ，ｌｒｉ￣ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ　ｍｅｄｉｕｌｎ　ｆｏｒ　ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｅ　Ｘｉｏｎｇ（　０ｇ　，Ｙｉｎｇ　Ｙａｎ，Ｙｕ　，ｅｔ　ａ１．Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｉｚｚｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆＸｉｈｕ　Ｓａ，ａｔ，￣ａｎｄＡｎｔｉ—ｅｐｉｄｅｍｉｃ　Ｓｔａｔｉｏｎ，　，　３３０００３，Ｃｈｉｎａ　Ａｂｓｔｒａｃｔ［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｔｏ　ｃｈｏｏｓｅ　ａ　ｂｅｔｔｅｒ　ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ　ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ　ｍｅｄｉｕｍ　ｔｈａｔ　ｃａｌｌ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｅ．　［Ｍｅｔｈｏｄｓ］Ｅ　ｃｏｌｉ　ａｎｄ　ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｅ　ｗｅｒｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｔｏｇｅｔｈｅｒ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ　ｍｅｄｉａ．Ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｅｎｒｉｃｈｉｎｇ　ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅａｃｈ　ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ　ｍｅ—　ｄｉｕｍ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．［Ｒｅｓｕｌｔｓ￣Ｔｈｅ　ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ　ｃｏｔｍｎｅｒｃｉａＩｌｙ　ａｖａｉｌａｂｌｅ　ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ　ｍｅｄｉａ　Ｗａｓ　ｖｅｒｙ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ．Ｔｈｅ　ｓａｌｍｏｎｅＵａｅ　ｃｏｕｌｄ　ｇｒｏｗ　ｗｅｌｌ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ　ｖａｒｙｉｎｇ　ｆｒｏｍ　１：１０　ｔｏ　１：１　．【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ］Ｔｈｅ　ＳＣ　ａｎｄ　１邛ｐｆｅ１）ａｒｅｄ　ｂｙ　ｏｕｌ＇￣ｌｖｅ￥ｉｓ　ｂｅｔｔｅｒ　ｔｈａｎ　ｏｔｈｅｒ　ｍｅｄｉａ　ｉｎ　ｅｎｒｉｃｈｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｅ；Ｅｎｒｉｃｈｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔ；Ｓｅｌｅｎｉｔｅ　ｃｙｓｔｉｎｅ　ｂｒｏｔｈ；Ｒａｐｐａｐｏｒｔ’ｓ　ｂｒｏｔｈ；Ｔｅｆｒａｔｈｉｏｎａｔｅ　ｂｒｏｔｈ　

［中图分类号］Ｒ３７８．２　２　［文献标识码］Ａ　沙门菌是引起食物中毒、伤寒、副伤寒、肠炎等消化道传　染病的主要病原菌。其常规检验技术仍是国标方法　。一般　分为四个步骤（Ｉ）前增菌和增菌。（２）分离纯培养物。（３）生化　试验。（４）血清学分型鉴定，其中选择性增菌培养基亚硒酸盐　胱氨酸肉汤、四硫磺酸钠煌绿肉汤和氯化镁孔雀绿肉汤的增　菌效果的好与差对能否分离出沙门菌相当重要。我站在实际　工作中发现：市售商品的增菌培养基增菌效果相差很大　Ｊ。　为了解市售商品增菌培养基的增菌效果状况，选择质量好的　培养基，以提高沙门菌的检出率，我们对５个厂家生产的三种　沙门菌增菌培养基的增菌效果进行了研究，现报道如下：　Ｉ材料与方法　Ｉ．Ｉ　实验菌株大肠埃希菌ＮＩＣＰＢＰ４４１１３购自广东环凯微生　物科技有限公司；鼠伤寒沙门菌４３１６３０购自杭州天和微生物　试剂有限公司；德尔卑沙门菌、阿贡纳沙门菌，为本实验室检　出的菌种。　１．２实验材料营养肉汤、伊红美兰琼脂购自杭州天和微生　物试剂有限公司。亚硝酸盐胱氨酸增菌液（ｓｃ）、四硫磺酸钠　煌绿增菌液（１邛）和氯化镁孔雀绿增菌液（ＭＭ）分别购自杭州　天和微生物试剂有限公司，批号分别为：２（ＸＰ．０３０７、２００１１０２４、　２００２０２０１，杭州微生物试剂有限公司，批号分别为２００２０８１４、　２００１０９１１、２（￣２０１２３，北京双旋微生物培养基制造厂，批号分别　为２１ＸＰ＿．Ｏ１１０、０２０１２５、０２０１２８，中国进出口商品检验技术研究所　北京陆桥技术有限公司，批号分别为０２０５３０、０２０７２４、０２０５２９广　东环凯微生物科技有限公司，批号分别为：２（Ｘ）２０３０２９、　２ａＸＰ．０９１４３、２００１０８１０１，共五个厂家的产品和本实验室自配的以　上三种菌液　Ｊ，总共１８个待测增菌菌液。　１．３实验方．法【。］　１．３．１试验菌液的准备取鼠伤寒沙门菌、德尔卑沙门菌、阿　贡纳沙门菌和大肠埃希菌分别接种肉汤管，在３７℃培养ｌ８—　２４ｈ。　１．３．２将培养好的上述４种肉汤管用肉汤作连续１０倍稀释，　从１０　到１０一，分另取１０～～１０　三个稀释度各０．１ｍｌ滴加三　个营养琼脂平皿上，用Ｌ棒涂布均匀，３７℃培养１８—２４ｈ，计算　菌落数，算出各稀释度０．１ｍｌ中的所含细菌数　Ｊ。　１．３．３将待测增菌效果的１８个增菌培养基按说明书或配制　要求配制？肖毒并分装成５ｍｌ／支，每种增菌液取８管一排，编号　记录，每管加人大肠埃希菌培养原液０．１ｍｌ和分别加入各稀释　度的鼠伤寒沙门菌、德尔卑沙门菌和阿贡纳沙门菌０．１ｍｌ，　３７℃培养２０ｈ，挑取增菌培养液划线接种伊红美兰琼脂平板，　于３７℃培养１８—２４ｈ观察并记录结果。　＋＋＋＋几乎为沙门菌纯培养，＋＋＋沙门菌菌落呈优　势（占８０％），＋＋沙门菌落有一半以上，＋沙门菌落较少　（２０％以上），±沙门菌落１—１０个。　Ｉ．３．４增菌效果的判断参照菌落数测定的结果，算出稀释度沙　门菌与大肠埃希菌的比例，如在１：１０６的比例下或接种的沙门　菌为１个或接近１个的状况下，经过培养，沙门菌落在＋＋＋以　上者，则此增菌液效果很好。反之则增菌效果不理想。　１．３．５稀释菌液时必须用ｌｍｌ吸管准确稀释，每个稀释度须　换一支消毒吸管。用伊红美兰琼脂平板观察增菌效果的目的　是为了使大肠埃希菌也能正常生长，方可正确判断增菌效果，　复测增菌效果时，只做１０　到１０　四个稀释度即可。　２结果　２．１菌种的肉汤培养物原液经稀释测定茵落总数大肠埃希　菌为５．７　Ｘ　１０＿７个／ｍｌ，鼠伤寒沙门菌为３．７　Ｘ　１０７个／ｍｌ，德尔卑　沙门菌为５．１　Ｘ　１　０＿７个／ｍｌ，阿贡纳沙门菌为２．６Ｘ　１　０＿７个／ｍｌ。　２．２为了便于列表，将Ｓｃ、１邛、ＭＭ增菌液分别编为１—６号。　德尔卑沙门菌编为（１），阿贡纳沙门菌编为（２），鼠伤寒沙门菌　为编为（３）。　

维普资讯 http://www.cqvip.com １６０　中国卫生检验杂志２００４年４月第ｌ４卷第２期Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＨｅａｌｔｈ　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　２００４．Ａｐｒｉｌ．１４．Ｎｏ．２　表１　ＳＣ增茵液的增茵效果　

表３　ＴＴＢ增茵液的增茵效果　续表３　从上列表可以看出：６个不同来源的Ｓｃ增菌液的增菌效　果差距悬殊，有三个厂家生产的ＳＣ增菌效果只能在１０～～　１０　的稀释管中生长出部分沙门菌，且菌落并非优势菌。其它　二个厂家的ＳＣ增菌液对三种沙门菌的增菌效果各不相同，只　有本实验室自配的ＳＣ增菌液对三种沙门菌均达到非常好的　增菌效果。　

维普资讯 http://www.cqvip.com 卫生检验杂志２００４年４月第ｌ４鲞笙　塑　！　Ｔ　［文章编号］１００４－８６８５（２００４）０２—１６１—０３　连续消毒中大肠杆菌０。５７：Ｈ７对碘伏抵抗力的变化　

及其与质粒ｐ０。５７关系的研究　

ｌ６ｌ　【研究报告】　

张本　，张晓莉　，任静　，刘衡川　，殷强仲　，叶梅君　，黄磊　（１．成都市武侯区疾病预防控制中心，四川６１００４１；２．四川大学华西公共卫生学院医检教研室）　摘要［目的］研究分析在连续消毒中大肠杆菌０　：Ｈ７对碘伏抵抗力变化及其与质粒ｐ０　关系。［方法］用碘伏　连续消毒６株大肠杆菌０　：Ｈ７　１０代，对比消毒前后试验菌对该消毒剂的抵抗力、质粒图谱以及质粒酶切图谱，用ＳＤＳ一　高温法消除原始菌与连续消毒后试验菌的质粒。［结果］连续消毒１０代后，试验菌对碘伏的抵抗力增加；试验菌的质粒　图谱以及质粒ｐ０　的ｃａｌ　Ｉ酶切图谱均无明显变化；消除原始菌的小质粒后，细菌对消毒剂的抵抗力不变，消除原始菌　的大质粒和连续消毒后试验菌的质粒后，试验菌对碘伏的抵抗力增加。［结论］结果提示，连续消毒会使试验菌对碘伏的　抵抗力增加，抵抗力增加的原因可能与质粒ｐ０　无直接关系。　关键词大肠杆菌；定量杀菌试验；质粒；抵抗力　

Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　Ｅ　ｃ　Ｏｌ５７：Ｈ７　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ｉｏｄｏｐｈｏｒ　ｉｎ　ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｒｅ　ｔａＩｌｃｅ　ａｎｄ　ｐｌａｓｍｄ　ｐＯ１５７　Ｚｌ￣ｎｇ　Ｂｅｎ，Ｚｌｍｎｇ　Ｘｉａｏｌｉ，Ｒｅｎ　Ｊｉｎｇ，ｅｔ　ａ１．Ｗｕｈｏｕ　Ｃｅｎｔｅｒｆｏｒ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｃｏｎｔｒｏｌ＆／）ｒｅｃｅｎｔ／ｏｎ，Ｃ‰，　６１００４１，Ｃｈ／ｎａ　Ａｂｓｔｒａｃｔ［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　Ｅ　ｃｏｌｉ　０ｌ５７：Ｈ７　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ｉｏｄｏｐｈｏｒ　ｉｎ　ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉａｌ　ｐｌａｓｍｉｄ　ｐＯｌ５７．【Ｍｅｔｈｏｄｓ］Ｉｏｄｏｐｈｏｒ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｙ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔ　１０　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　６　ｓｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　Ｅ　ｃｏｌｉ　０１５７：Ｈ７．Ｔｈｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　Ｗａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｂｅｆｏｒｅ　ａｎｄ　ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｏｏ１５７，ｔｈｅ　ｂａｃ—　ｔｅｒｉｕｍ’Ｓ　ｐｌａｓｍｉｄ，ｗｅｒｅ￣ｙｚｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　１０　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ．【ＲｅｓｕｌｔｓＪ　Ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　１０　ｇｅｎｅｒａ—　ｔｉｏｎｓ．ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｕｍ’Ｓ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ｉｏｄｏｐｈｏｒ　Ｗａｓ　ｅｎｈａｎｃｅｄ．ｑｌａｅｒｅ　Ｗａｓ　ｎｏ　ｃｈａｎｇｅ　ｉｎ　ｐｌａｓｍｉｄ　ｍａｐ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍａｐｓ　ｏｆ　Ｃａｌ　Ｉ　ｃｕｔｔｉｎｇ　ｐｌａｓｍｉｄ　Ｏｌ５７．Ｔｈｅ　ｂａｃｔｅｒｉｕｍ’Ｓ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ｉｅｄｏｐｈｏｒ　ｂａｄ　ｎｏ　ｃｈａｎｇｅ　ａｆｔｅｒ　ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｍａｌｌ　ｐｌａｓｍｉｄ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　Ｗａｓ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｏｌ５７．［Ｃｏｎｄｕｓｉｏｎｓ］１１１ｅ　ｂａｃｔｅｒｉｕｍ’Ｓ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　ｉｅｄｏｐｈｏｒ　ｉｓ　ｅｎｈａｎｃｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ　ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　１０　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ．　Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ　ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ　ｍｉｇｈｔ　ｎｏｔ　ｂｅ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｐｌａｓｍｉｄ　ｐＯｌ５７．