人干扰素调节因子
γ干扰素释放实验的原理

γ干扰素释放实验的原理γ干扰素(Interferon gamma,IFN-γ)是一种由免疫细胞产生的重要分子信号物质,对机体的免疫反应起着重要的调节作用。
γ干扰素释放实验是一种评估机体免疫功能的常用方法之一,可以检测特定细胞(通常是T细胞)对某种刺激物质引起的γ干扰素分泌反应。
γ干扰素释放实验的原理主要涉及以下几个方面:1. 细胞样本的准备:γ干扰素释放实验通常使用外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)或组织细胞作为细胞样本。
这些细胞样本可以通过静脉采集外周血或组织活检等方式获取。
在实验前,需要对细胞进行处理,如离心、洗涤和培养,以确保细胞的状态良好并有足够的数量。
2. 刺激物质的选择:γ干扰素释放实验中常用的刺激物质主要包括抗原、药物或其他具有免疫刺激性的物质。
抗原可以是病原体的特异性成分,如细菌、病毒或其他微生物产生的蛋白质或多肽。
药物刺激物可以是某些药物对机体免疫系统的直接或间接作用引起的免疫反应。
刺激物质的选择应该与样本来源和实验目的相匹配。
3. 实验方法的选择:γ干扰素释放实验可以通过多种方法进行,如ELISA(酶联免疫吸附测定法),ELISPOT(酶联免疫斑点法),流式细胞术等。
这些方法的选择取决于实验的需要和可用设备的条件。
比较常用的方法是ELISPOT法,该方法可以评估单个细胞生产γ干扰素的能力,形成的斑点数量与细胞产生的γ干扰素水平成正比。
4. 数据分析:γ干扰素释放实验得到的数据需要进行合理的分析和解释。
通常,根据刺激物质和实验目的的不同,可以采用差异分析、统计学方法等对数据进行处理。
数据的分析和解释可以为研究者提供了解细胞免疫功能的信息。
通过γ干扰素释放实验,我们可以了解机体对刺激物质的免疫反应程度和免疫调节功能。
这对于疾病的诊断、药物研发和免疫治疗等方面具有重要意义。
总结回顾:γ干扰素释放实验是一种评估机体免疫功能的方法,通过检测特定细胞对刺激物质引起的γ干扰素分泌反应来评估免疫反应的程度和调节能力。
ifnb的转录因子

ifnb的转录因子IFNB(干扰素β)是一种重要的转录因子,它在免疫应答和抗病毒反应中起着重要的作用。
本文将从IFNB的结构、功能、调控以及应用等方面进行介绍。
IFNB是一种干扰素,属于干扰素家族的一员。
它是由细胞在病毒感染或其他外界刺激下产生的一种蛋白质。
IFNB的基因位于人类染色体9p21.3区域,编码的蛋白质由166个氨基酸组成。
IFNB蛋白质的N末端含有一个信号肽序列,C末端则是成熟的干扰素β蛋白。
IFNB主要通过与其受体相结合,激活下游信号通路来发挥其功能。
在细胞受到病毒感染或其他外界刺激后,IFNB的表达会被启动。
其转录过程涉及多个转录因子的调控。
例如,IRF3(干扰素调节因子3)能够与IFNB启动子区域结合,促进IFNB的转录。
同时,NF-κB (核因子κB)也参与了IFNB的表达调控过程。
这些转录因子的活化将引导细胞启动干扰素信号通路,进而诱导抗病毒反应。
IFNB的抗病毒作用是通过多种机制实现的。
首先,IFNB能够抑制病毒的复制和传播。
它可以诱导细胞产生多种抗病毒蛋白,如RNase L、OAS(2'-5'-寡腺苷酸合成酶)等,这些蛋白具有直接抑制病毒复制的作用。
其次,IFNB还能够增强天然免疫反应。
它可以增加天然杀伤细胞的活性,促进巨噬细胞的吞噬功能,并增强树突状细胞的抗原递呈能力。
此外,IFNB还能够调节炎症反应,抑制炎症因子的产生,减轻炎症反应对机体的损伤。
除了在免疫应答和抗病毒反应中的重要作用外,IFNB在临床上也有一些应用。
例如,IFNB已经被应用于多发性硬化症(MS)的治疗。
研究发现,IFNB能够减少MS患者的发作次数和病情的进展。
此外,IFNB还被用于治疗乙型肝炎、结核病等疾病。
IFNB作为一种重要的转录因子,在免疫应答和抗病毒反应中发挥着重要的作用。
它通过调控多个下游基因的表达,实现对病毒感染的抵抗。
同时,IFNB还具有调节炎症反应和增强天然免疫的功能。
干扰素(IFN)

干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。
干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。
它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。
目录1干扰素2干扰素简介3治疗有效率4干扰素多少钱5发现6什么叫干扰素(IFN)7品种及价位8作用机制1.8.1 ①间接性2.8.2 ②广谱性3.8.3 ③种属特异性4.8.4 ④发挥作用迅速1干扰素药物类别:抗肿瘤药,抗病毒药;所属类别:生物反应调节剂药物名称:干扰素英文名称:Interferon药物别名:序号中文别名英文别名一.α干扰素制剂/规格:序号制剂规格1.注射剂 5×10。
单位(1 ml);1×106。
单位(1 ml);2.冻干剂l×10。
单位成份/化学结构:序号成份化学结构药理作用:1.抗病毒作用:其抗病毒活性不是杀灭而是抑制病毒,它一般为广谱病毒抑制剂,对RNA和DNA病毒都有抑制作用。
当病毒感染的恢复期可见干扰素的存在,另一方面用外源性干扰素亦可缓解感染。
2.抑制细胞增殖干扰素抑制细胞分裂的活性有明显的选择性,对肿瘤细胞的活性比正常细胞大500~1000倍。
干扰素抗肿瘤效果可以是直接抑制肿瘤细胞增殖,或通过宿主机体的免疫防御机制限制肿瘤的生长。
3.诱导细胞凋亡:干扰素可以诱导肿瘤细胞凋亡,从而杀灭肿瘤细胞。
4.干扰素对体液免疫、细胞免疫均有免疫调节作用,对巨噬细胞及NK细胞也有一定的免疫增强作用。
药动学:干扰素在肌内注射或皮下注射后入血的速度较慢,需较长时间才能在血中测到。
肌内注射后Tmax为5~8小时。
一次肌注:106单位,血清浓度为100单位/ml,这比在病毒感染时自然产生的干扰素量为高。
干扰素(IFN)

干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。
干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。
它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。
目录1干扰素2干扰素简介3治疗有效率4干扰素多少钱5发现6什么叫干扰素(IFN)7品种及价位8作用机制1.8.1 ①间接性2.8.2 ②广谱性3.8.3 ③种属特异性4.8.4 ④发挥作用迅速1干扰素药物类别:抗肿瘤药,抗病毒药;所属类别:生物反应调节剂药物名称:干扰素英文名称:Interferon药物别名:序号中文别名英文别名一.α干扰素制剂/规格:序号制剂规格1.注射剂5×10。
单位(1 ml);1×106。
单位(1 ml);2.冻干剂l×10。
单位成份/化学结构:序号成份化学结构药理作用:1.抗病毒作用:其抗病毒活性不是杀灭而是抑制病毒,它一般为广谱病毒抑制剂,对RNA和DNA病毒都有抑制作用。
当病毒感染的恢复期可见干扰素的存在,另一方面用外源性干扰素亦可缓解感染。
2.抑制细胞增殖干扰素抑制细胞分裂的活性有明显的选择性,对肿瘤细胞的活性比正常细胞大500~1000倍。
干扰素抗肿瘤效果可以是直接抑制肿瘤细胞增殖,或通过宿主机体的免疫防御机制限制肿瘤的生长。
3.诱导细胞凋亡:干扰素可以诱导肿瘤细胞凋亡,从而杀灭肿瘤细胞。
4.干扰素对体液免疫、细胞免疫均有免疫调节作用,对巨噬细胞及NK细胞也有一定的免疫增强作用。
药动学:干扰素在肌内注射或皮下注射后入血的速度较慢,需较长时间才能在血中测到。
肌内注射后Tmax为5~8小时。
一次肌注:106单位,血清浓度为100单位/ml,这比在病毒感染时自然产生的干扰素量为高。
IRF-3简介 PPT课件

Triggering the Innate Antiviral Response through IRF-3 Activation
文章重点介绍IRF-3、IRF-7的激活机制 和生理功能。
IRF-3
Ⅰ型干扰素的诱导特异性是通过IRF转录 因子家族成员实现的。
IRF-3转录活性受到病毒和dsRNA介 导,C端磷酸化受到丝氨酸385和386位,以及 丝氨酸/苏氨酸396和405之间的调控,通过 IKK相关激酶TBK-1和IKK∈介导。
用腺病毒作为载体,将IRF-3转导入巨噬 细胞中可导致细胞快速死亡。 IRF-7转导入 巨噬细胞可产生Ⅰ型干扰素并增强TRAIL, IL-12, IL-15, 和CD80基因编码的表达。说 明IRF-7转导入巨噬细胞可在不同癌症细胞 中突出抑制活性,显示IRF-3或IRF-7在原
始巨噬细胞中有不同的分子凋亡和抗肿瘤 基因程序。
IRF-3在非感染细胞中存在于胞内,在胞
质中不与其他蛋白质结合,以单体非活化
形式存在。一旦受到上游信号转导,如病 毒感染、双链RNA的刺激,IRF-3被磷酸化
激活,分子内部的自我抑制域被打开,形 成同二聚体或与IRF-7形成异二聚体后进入 细胞核,与共同活化因子CBP/p300结合发 挥转录活性。磷酸化后的IRF-3与β-干扰素 启动子结合,可显著增高病毒介导的I型IFN 的表达。
IRF-3和IRF-7 靶基因激活
人IFNβ,IFNα1和RAN-TES(激活正常 T细胞表达和分泌的调节)启动子被IRF-3 共表达刺激,然而IFNα4,α7和α14启动子 都优先的仅被IRF-7诱导。
DNA结合位点选择研究显示 IRF-3和 IRF-7结合在病毒诱导基因的5 ’-GAAANNGAAANN-3’共有序列上。
5 人干扰素γ

人干扰素γ
Human Interferon γ
IFN-γ主要由活化的Th细胞和NK细胞产生。
其生物学功能主要是免疫调节,诱导多种抗原提呈细
胞表达 MHC-I/II 分子,活化单核、巨噬细胞并增强起溶菌活性及分泌 IL-1,6,8,TNF-a 等。
IFN-γ还能活化中性粒细胞、NK细胞,刺激血管内皮细胞和白细胞合成的粘附分子,促进Th1细胞发育和抑制 TH2细胞活化与增殖,刺激B细胞产生的抗体类型向调理素方向转变。
本产品系由含有高效表达人干扰素γ基因的原核表达系统(E.coli)经发酵、分离和高度纯化后经冻干制成。
由144个氨基酸残基组成多肽链,分子量为16.8kDa。
本产品为溶液形式,溶在 10 mM 磷酸盐( pH为 7.2)、0.1% BSA 以及10% 甘油中。
★产品号
Cat No : BP0003
★产品组成
名称产品号规格贮藏条件运输AdvCell®人干扰素γ(IFNγ)
BP0003 1 mg/管-20℃避光干冰AdvCell® Human Interferon γ
★质量控制
完全按照 GMP 标准生产
生物学活性:大于1.6×107IU/mg
纯度:经高效液相色谱(SEC-HPLC)和SDS-PAGE检测,纯度大于98.0%
内毒素:小于0.1EU/μg
★使用说明
建议将冻干 rHuIFN-γ溶解在注射用水中,浓度不低于100 μg/ml,以待进一步稀释至工作浓
度。
尽可能避免反复冻融。
复溶后的细胞因子:4℃可稳定储存4-7天;长期保存请分装后存放于-20℃,可稳定保存至少三个月。
雾化吸入重组人干扰素-α1b对呼吸道合胞病毒感染患儿免疫功能与炎性因子水平的影响

1.4 统计学方法 应用 SPSS 22.0 统计软件分析数据,计 病毒、抗肿瘤及免疫调节功能,可有效增强自然杀伤细胞 量资料以 ( ) 表示,采用 t 检验,多时间点计量资料 活性,抑制肿瘤细胞生长,清除早期恶变细胞等 [7]。雾化
比较采用重复测量方差分析。以 P < 0.05 为差异有统计学 是将药液分散成微小雾滴或微粒,形成气溶胶直达病灶,
药准字 S 20033035,规格:60 μg/ 支)雾化吸入治疗,将 3 讨论
30 μg 注射用重组人干扰素 -α1b 用 2 mL 生理盐水溶解,
婴幼儿的呼吸道黏膜抵抗力不足,极易受到各种病原
雾化吸入,2 次 /d。均持续治疗 6 d。
体的感染,且婴幼儿的免疫系统发育不完全,局部清除能
1.3 观察指标 ①比较两组患儿治疗后临床症状恢复 力弱,进而引起感染扩散。呼吸道合胞病毒引起的毛细支
表 1 两组患儿临床症状恢复情况比较 ( , d)
组别
例数
体温恢复正常时间
咳嗽消失时间
白细胞计数恢复正常时间
对照组
41
2.63±0.71
6.14±2.54
6.13±2.10
观察组
42
2.12±0.47
4.56±2.23
4.78±1.42
t值
3.868
3.014
3.438
P值
< 0.05
< 0.05
< 0.05
ECP、TNF-α 水平,血液采集方法同①,以 3 000 r/min 的 与疼痛,但复发率较高,预后效果不佳,影响患儿的身心
转速离心 10 min 分离血清,使用酶联免疫吸附法检测 健康。
IL-6、TNF-α 水平,使用放射免疫法检测 ECP 水平。
IRF2的蛋白结构及其对细胞周期的调控

IRF2的蛋白结构及其对细胞周期的调控作者:李秀玲来源:《农民致富之友》2018年第24期干扰素调节因子(IRFS)是一类在干扰素(IFN)信号通路中起重要调控作用的多功能转录因子,目前发现其有 10个IRFS成员,IRF1-IRF9和病毒IRF(vIRF),可分为三类:促进型、抑制型和双重型。
它们在诱导、病毒防御、免疫调节、细胞分化、细胞生长与凋亡和许多疾病的调节中具有重要作用。
其中干扰素调节因子2(Interferon regulatory factor 2-binding protein-like,IRF2)就是双重型调节因子,作为IFN蛋白家族中的一员,IRF2连同IRF家族成员形成复杂的IRF调控系统,影响抗原递呈、细胞周期以及抑制肿瘤等作用。
因此有效了解IRF2的功能结构是很有必要的,以便我们抑制其对肿瘤的促进作用,激活对肿瘤的控制作用。
一、IRF2蛋白的结构与功能IRF2蛋白由510个氨基酸组成,分子量约为170kD。
IRF2的蛋白结构域有两个vRING-HC_IRF2BP1_like和IRF-2BP1_2。
IRF-2BP1和IRF-2BP2是核转录抑制蛋白,是增强子活化和基础转录,并且可以抑制增强子激活和基底转录。
IRF-2BPL在下丘脑中枢表达,在调节雌性生殖神经内分泌轴中起关键作用。
它们都含有该家族中代表的N-末端Zn finger和C-末端RING finger结构域。
RING指的变体,HC亚类,在干扰素调节因子2结合蛋白IRF-2BP1,IRF-2BP2和类似蛋白中发现;该家族包括IRF-2BP1,IRF- 2BP2及其同源物IRF-2BP样,也称为IRF-2BPL或C14orf4。
IRF-2BP1和IRF-2BP2是核蛋白,其结合IRF-2的C末端抑制结构域并充当IRF-2依赖性转录辅阻遏物。
RING finger(Really Interesting New Gene)结构域和U-box域的超家族; RING finger是一种特殊类型的Zn-finger,含有40到60个残基,可以结合两个锌原子。
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人干扰素调节因子8(IRF8)酶联免疫分析试剂盒
使用说明书
本试剂盒仅供体外研究使用!
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中IRF8含量。
实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗IRF8抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IRF8抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IRF8呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1.酶联板:一块(96孔)
2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成10ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml,0.625ng/ml,0.312 ng/ml,0.156ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制5ng/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)10ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3.样品稀释液:1×20ml。
4.检测稀释液A:1×10ml。
5.检测稀释液B:1×10ml。
6.检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测
溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
8.底物溶液:1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11.覆膜:5张
12.使用说明书:1份
自备物品
1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)
2.微量加液器及吸头,EP管
3.蒸馏水或去离子水,全新滤纸
标本的采集及保存
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°C1000x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.其它生物标本:请1000x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4.样本处理:血清或血浆标本推荐稀释10倍,如:稀释10倍,取100uL血清或血浆加入900uL 样品稀释液。
标本使用0.1M的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。
实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。
每孔加检测溶液A工作液100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜,37℃反应60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液)100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。
终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
在加终止液后立即进行检测。
注:
1.试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。
实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2.加样:加样或加试剂时,请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与
最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
一次加样时间(包括标准品及所有样品)最好控制在10分钟内,如标本数量多,推荐使用多道移液器加样。
3.孵育:为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响最后的酶标仪读数。
5.试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。
请精确配置标准品及工作液,尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μl),以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
洗板方法
1.手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2.自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的人IRF8,且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
以标准物的浓度为纵坐标(对数坐标),OD值为横坐标(对数坐标),在对数坐标纸上绘出标准曲线。
推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert1.3,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
说明
1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。
所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2.小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。
请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
而且,洗涤不充分将影响试验结果。
3.试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。
4.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
5.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
6.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
7.所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8.有效期:6个月。