细胞工程复习资料

第二章

一.实验室的常规设备:

天平冰箱酸度计离心机水纯化装置可调式微量移液器磁力搅拌器水浴锅或微波炉.

二．实验材料的灭菌方法

物理方法

1.热力灭菌，干热湿热

2.辐射灭菌:常用紫外线灭菌(紫外灯)

3.过滤灭菌，孔径0.45或0.20微米

0.20微米滤膜除去病毒以外的所有微生物

0.45微米滤膜可过虑酶系或小量液体培养基

化学方法(化学药物灭菌)

1、含氯化合物:常用的为漂白粉、0.1%氯化汞、次氯酸钠。

2、过氧化物:3%一6%双氧水，0、2%过氧乙酸

3、醇类:70%乙醇。

4、季胺盐类:常用0.1%-0.5%新洁尔溶液

5、酚类:35%有炭酸或煤酚皂

6，醛类:甲醛30%-35%

三．灭菌

1.培养基灭菌

某些激素、维生素等不耐高温高压灭菌的采用过滤灭菌

若采用高压蒸汽灭菌（121℃，15-40min），具体操作方法：

（1）洗涤（2）配制培养基并分装包扎（3）装水，在高压灭菌锅内装水至淹没电热丝。（4）装物品（5）灭菌

注意：先打开放气闸，再打开锅盖（避免锅内压力大而爆炸）

2.玻璃器皿灭菌

干热灭菌：160-180℃，1.5h-2.0h；湿热灭菌：121℃，20-40min

操作步骤：

（1）洗涤（2）包扎（3）灭菌

3.金属用具灭菌

用前干热灭菌：160-180℃，1.5h-2h；用前湿热灭菌：121℃，20-30min

接种前酒精棉擦拭，浸入95%酒精灯中，并在酒精灯火焰上灼烧灭菌

4.接种室灭菌

紫外灯照射：波长260nm，距离小于1.2m，20-30min。

接种台喷雾消毒：75%酒精

四.培养条件

1.光照分为光照强度、光质、光周期。

光照强度:光照强度较强，幼苗生长粗壮，光照强度较弱，幼苗容易徒长

光质:光质对愈伤组织诱导、培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响光周期:最常用的是16h光照、8h黑暗。（对短日照敏感品种的器官组织，在短日照下易分化，而在长日照下产生愈伤组织。）

2.温度:大多数植物组织培养都是在23-27℃进行

3.湿度:培养容器内的湿度条件，容器内主要受培养基水分含量和封口材料的影响及琼脂含量的影响。环境的相对湿度一般要求70~80%。

4.pH值不同的植物对培养基最适pH值的要求也是不同的，大多在

5.5-

6.5左右，一般培养基5.8。（注：高温灭菌会降低 0.2-0.3个PH值）

5.培养基中的盐类及蔗糖会影响到渗透压的变化。1-2个大气压对植物生长有促进作用，2个以上对生长阻碍，5-6个植物生长完全停止，大于6个植物细胞不能生存。

5.通气条件，氧气是组织培养中必需的因素，瓶盖紧闭时要考虑通气条件，可用附有滤气膜的封口材料。（通气最好的是棉塞封闭瓶口）

五．离体培养的营养需求

用于离体培养的培养基至少包括无机盐类、有机化合物类、植物激素及其他附加成分。

1.无机盐类包括大量元素和微量元素

（1）大量元素指浓度大于0.5mmol/L的元素，有N P K Mg S Ca等

N 制备培养基时以NO3-N和NH4-N两种形式添加，常用添加物质有KNO3或NH4NO3等。

P 常用的物质有KH2PO4或NaH2PO4等

K 常以KCL或KNO3等盐类提供。

Mg、S、Ca 常以MgSO4.7H2O和CaCL2.H2O形式提供。

（2）微量元素指浓度小于0.5mmol/L的元素，有Fe B Mn Cu Mo Co等

第三章

一.名词解释

1、单细胞培养:从植物器官、愈伤组织或悬浮培养物中游离出单个细胞，在无菌条件下，进行体外生长、发育的技术

2、看护培养:也称饲喂培养，是指用一块愈伤组织或植物离体组织看护单细胞使其生长并增殖的一种单细胞培养方法

3、植板率:植板率是平板培养中常用的一个术语，它以长出的细胞团的单细胞在接种细胞中所占的百分数来表示

植板率=每个平板中新形成的细胞团数/每个平板中接入的细胞数×100%

4.胞质杂种:融合细胞在发育过程中亲本之一的染色体组全部被排斥掉，细胞核中只有一个白亲本的全套染色体，但细胞质是双亲的

5.原生质体：指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸漏细胞。

6.原生质体融合:也就是体细胞融合，它是相对有性杂交而言的，它是指把两种不同种和不同属、不同科生物体细胞的原生质体分别分离出来，再用一定的技术融合成一个新的杂种

二.原生质体的分离过程

分离方法有机械法分离和酶解法分离

酶解法：

分离植物原生质体的酶制剂主要有：纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、离析酶。渗透压的调节是保证原生质体完整性的前提。常用的稳定剂∶甘露醇、山梨醇、蔗糖、葡萄糖、麦芽糖等，浓度为0.4-0.8mol/L，本系统还可以促进分离的原生质体再生细胞壁并继续分裂。（或：盐溶液系统：包括KCL、MgSO4、KH2PO4，优点是获得的原生质体不受生理状态的影响）

酶解法分离原生质体（1）两步分离法

（2）一步分离法具体：若用叶片作为材料，取已展开的生活叶片，用0.53%次氯酸钠和70%酒精进行表面灭菌，然后切成2cm见方的小块。把4 g叶组织置

于含有200 mL不加蔗糖和琼脂的培养基500 mL三角瓶中。在4℃黑暗条件下培养16～24 h，以后叶片转人含有纤维素酶、果胶酶、无机盐和缓冲液的混合液中，p值为5.6，通常在酶液中使用的等渗剂为0.55～0.6 mol/L甘露醇。然后，抽真空使酶液渗入叶片组织。在28℃条件下，40 r/min的旋转式转床上培养4h 后，叶片组织可完全分离。若用悬浮培养细胞，可不经过果胶醉处理，因为悬浮细胞液主要由单细胞和小细胞团组成。取悬浮细胞放入10 mL的梅液中（3%纤维，14%蔗糖，pH值

5.0～

6.0)，在25～33℃条件下酶解24 h。原生质体-酶混合液用30μm的尼龙网过滤，通过低速离心收集原生质体。

二.原生质体活力的测定

1.形态识别:形态上完整，含有饱满的细胞质，颜色新鲜的原生质体即为存活的

2.染色识别：荧光素双醋酸酯(FDA)染色法:取纯化后的植物原生质体悬浮液0.5ml置于小试管中，加入含2mg/L的FDA的丙酮溶液，使最终浓度为0.01%，混匀，放置5分钟，荧光显微镜观察，有活力原生质体发绿色荧光，不产生荧光为无活力。对于叶肉、子叶、下胚轴而言，由于叶绿素的关系，原生质体发黄绿色荧光的为有活力的，发红色为没有活力的。

三.原生质体的培养方法

1.液体浅层培养法

2.平板培养法

3.悬滴培养法

4.双层培养法

5.饲喂层培养法双层培养法的过程

固体培养和液体培养浅层培养相结合的方法，效果最佳。原生质体采用平板培养方法包埋在培养皿底层，上面再加入相同成分的液体培养基，暗培养。需更换新鲜液体培养基。特点:原生质体分布均匀，有利于分裂，易获单细胞株系，能除去抑制分裂的有害物质，细胞植板率高。原生质体易受热伤害，易破碎。缺点：不宜观察细胞的发育过程。

四．原生质体发育与植株再生

包括（1）细胞壁的再生（2）细胞分裂和生长（3）愈伤组织形成（4）植株再生

五、原生质体融合的方法:

1.NaNO3诱导融合。

2.高ph值高Ca2+诱导融合。

3.PEG 诱导融合。

4.电融合法。

5.微滴培养与单细胞融合技术

六、PEG诱导融合优缺点，特点

①先制备融合亲本的原生质体，再将高密度的亲本双方原生质体(仍停留在酶溶液中)各

取0.5mL混合在一起，m酶洗液1000/min离心4min。

2吸去磨液，如上再重复洗一次，将沉淀的原生质体悬浮于1.0mL原生质体培养液中。3放一滴液态硅于60 mm×15 mm培养血中，再放一片方形载玻片(22 mm ×22 mm)于液态硅滴之上。

④滴3滴混合双亲的原生质体于上述载片上，静置5 min，让其在载玻片上形成薄薄的一层。

⑤缓缓小心地加入含相对分子质量在1500～1600的PEG的融合液0.45 mL于上述的原生质体小滴的中央，盖上培养皿盖。

⑥让在PEG融合液中的原生质体在室温下静置10～20 min。

⑦用移液管轻轻加入2～3滴高Ca+、高pH液于中央，静置10～15 min。

⑧以后每隔5 min加入高Cat、高pH液，每次滴数逐增，共加5次，总共加入高Ca+、高pH液1mL，然后在离心管中离心，吸去上清液，用原生质体培养液洗4～5次。

⑨加入原生质体培养基0.3～0.5 mL，这样重悬后的原生质体及杂种细胞以微滴形式进行培养，用双层封口膜封培养皿的边缘，在倒置显微镜下观察细胞并计算融合率。

优点:1.融合率高，可重复性强2.融合成本低，勿需特殊设备3.融合子产生的异核率较高4.融合过程不受物种限制。

缺点：融合过程繁琐，PEG可能对细胞有毒害，一些植物种原生质体由于质膜性质、原生质体强弱不一，常出现对PEG敏感而破碎的现象，

七、电融合法的优缺点

该法融合过程是:将悬浮原生质体先置于电融合仪的非均匀交变电场中，使之发生电泳而进人电场强反应的区域:同时，又使得原生质体发生极化而形成偶极子，这样它们会自动聚集并粘连成串珠链，此外再外加一方波电脉冲，即可导致膜接触面的击穿和融合。因此该法融合的过程包括“粘连一电击- -融合”3个步骤。优缺点:电融合法与PEG融合法相比具有三大优点，一是不存在对细胞的毒害问题；二是融合效率高;三是融合技术操作简便。

但此法常常影响杂种细胞再生植株。对介质要求高，使用过程注意控制高频交流电压和直流脉冲电压的强度和时间。

八、杂种细胞的选择

互补选择

1.激素自养型互补选择

2.白体化和野生型的互补选择

3.白化生长自主细胞的利用

4.营养缺陷型互补选择

5.非等位基因互补选择

6.抗性互补选择

九、体细胞杂种的特征

1、性状表现:许多形态学上的特征是介于两亲本之间的，如叶片的大小和形态，花形状、花大小和颜色等。

2、同工酶分析:一般来自不同亲本的两种同工酶均有不同的谱带，而杂种都具有两亲谱带的总和。有时还出现新的谱带。

3、染色体观察:体细胞染色体的数目有时是两亲本染色体数目之和。另外，染色体的形态上也具有两亲的特点。

4、花粉生活力和育性:体细胞杂种的生活力和育性常常不正常或受到某种程度破坏。

5、分子标记鉴定

十．一个成功的悬浮细胞培养体系必须满足的三个条件

1.悬浮培养分散性良好，细胞团较小，一般在30~50个细胞以下

2.均一性好，细胞形状和细胞团大小大致相同。悬浮系外观为大小均一的小颗粒，培养基清澈透亮，细胞色泽呈鲜艳的乳白或淡黄色。

3.细胞生长迅速，悬浮细胞的生长量一般2~3天甚至更短时间便可增加一倍。十一．影响悬浮细胞生长的因素

1.起始愈伤组织的质量松散性好、增殖快，再生能力强。其外观一般是色泽呈

鲜艳的乳白或淡黄色，呈细小颗粒状，疏松易碎

2.接种细胞密度接种初期的细胞密度过低往往使延迟期加长，悬浮细胞的起始密度-般在(0.5-2.5) ×10^5/ml,低于这一密度则会使细胞生长延迟。

3.培养条件。方式、温度、继带周期。

十二．悬浮细胞的同步化

1.物理方法

(1)分选法:通过细胞体积大小分级，直接将处于相同周期的细胞进行分选，然后将同一状态的细胞继代培养于同一培养体系中。

(2)冷处理法:不同温度对细胞有丝分裂有极明显影响，在一定范围内，温度下降使细胞分裂速度减慢，细胞周期延长，从而相应延长分裂期时间，使分裂指数提高，细胞同步率升高。

2、化学方法

(1)饥饿法悬浮培养细胞中，若断绝供应一种细胞分裂所必需的营养成分或激素，使细胞停在G1或G2期，经过一段时间的饥饿之后，当在培养基中重新加人这种限制因子时，静止细胞就会同步进人分裂。这其中包括营养饥饿法和生长素饥饿。

(2)抑制剂法通过一些DNA合成抑制剂处理细胞，使细胞停留在DNA合成前期，当解除抑制后，即可获得处于同细胞周期的细胞。常用的抑制剂有5-氟脱氧尿苷、5-氨基尿嘧啶，羟基脲。

(3)有丝分裂阻抑法是指在细胞悬浮培养时，加入抑制有丝分裂中纺锤体形成的物质，使细胞分裂阻止在有丝分裂中期，以达到同步化培养的方法。

十三．提高细胞次生代谢产物的途径

1、明确植物细胞生长与产物合成的关系

(1)生长偶联型产物合成与细胞生长成正比。

(2)中间型产物仅在细胞生长下降时合成，细胞处于指数生长期或停止生长产物都不合成。

(3)非生长偶联型产物合成在细胞生长停止以后。

2、选择适宜的起始材料

首先必须选择能够高效合成目的产物的植物种类。在此前提下，起始培养材料还应考虑器官和组织特异性，通常选取自然状态下能够积累次生产物的部位。同时要筛选高产、稳产的细胞株系

3、选择合适的培养基

一般来说，增加培养基的N、P.K的浓度能促进细胞生长，而适当增加糖浓度有利于次生产物的合成。

4、前体

前体是指处于目的代谢物代谢途径上游的物质。前体饲喂，通常便宜并可自由利用，次生代谢物的产率可以增加。前体被转换为完整的植物中使用相同的生物合成途径中的产物。

5、激发子的应用

激发子也称诱导子，是指能够诱导植物细胞中一个反应，并形成细胞特征性自身防御反应的分子。

6、培养技术的选择

培养技术的选择包括对反应器的选择和对培养方式的选择。

1.两阶段培养

通常需要在不同阶段使用不同的培养基，即两阶段培养。第一阶段使用适合细胞快速生长的培养基即生长培养基，用来达到最大的生物量；当细胞生长处于指数生长的后期时及时转人第二阶段培养。第二阶段培养使用适合次生代谢物合成的培养基即生产培养基。

2.两相培养

为了解决产物对合成的反馈抑制可以采用两相培养技术，两相培养法是指在植物细胞培养液加入对细胞无毒性的吸附剂和萃取剂，及时将次生代谢物分离出来，防止代谢积累造成反馈抑制，以提高代谢物产率的培养方法。

第四章

1、花粉发育时期包括四分体-单核花粉-双核花粉-三核花粉四个阶段，取单核期或单核中晚期的花药容易获得成功。

2、花药的预处理：低温处理或者单核后期离心预处理。

第五章

1、体细胞无性系：由任何形式细胞培养所得的再生植株统称为体细胞无性系。

2、体细胞无性系变异的分子遗传学：1、基因变异，包括核基因突变和细胞质基因突变2、DNA序列的选择性扩增与丢失

3、DNA碱基修饰

4、植物转座子的活化

5、基因重排

6、细胞器DNA的变化

第六章

1.常温限制生长保存：利用降低培养物的代谢活动，使其处于一种无生长或缓慢生长的抑制生长状态是植物离体保藏的一种比较理想的方法，可以在常温下进行，因此叫做常温限制生长保存。

2.常温生长保存的方法

（1）高渗保存法（2）生长抑制剂保存法（3）低压保存法(4）营养控制法（5）低光照培养法

第七章

1、原代培养：即第一次培养，是将组织细胞放置在体外生长环境中持续培养，中途不分割培养物的培养过程。

2、细胞核移植：指把一个细胞的细胞核移植到一个去核的成熟卵子的胞质中，由此发育成的动物个体为核移植克隆动物或核质杂交动物。

3、单克隆抗体：指由一个B细胞克隆产生的，只能识别某一个抗原表位的高度特异性抗体。

4.杂交瘤：肿瘤细胞与正常细胞的融合形成的杂交细胞称为杂交瘤。

5.单克隆抗体技术通常称为杂交瘤技术。

一、动物细胞生长的三个特征：贴壁生长接触抑制密度抑制

二、动物细胞体外培养的营养条件：

（主要成分是葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清）

1、水和平衡盐溶液：

a、ph调节液：碳酸氢钠液、Hepes缓冲液。

b、消化液：胰陶溶液、EDTA溶液、胶原酯溶液。

c、抗生素溶液。

2、培养基：

a、天然培养基：有血清、血浆和组织提取液优点∶营养成分丰富，培养效果好缺点：来源受限。成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析。易发生支原体污染。

b.合成培养基：有氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其他一些辅助物质。优点∶标准化生产，组分和含量相对固定，成本低。缺点∶缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。

三、CCK-8 试剂盒检测法

使用的试剂是CC-8试剂盒，其全称是Cell Conting Kit-8.可用于简便而准确的细题增殖和毒性分析。

其基本原理为：该试剂中含有T-8，其化学名称为2-2-甲氧基-个-确基养基)3-(4一销基茶基)5-(2，4-二碳酸苯)-211-四挫单钠盐，它在电子载体1-甲氧基5-甲基吟噪铺跷酸二甲(1-WethoxyP?As)的作用下被细胞线粒体中的脱氢梅还原为具有高度水洛性的黄色甲琐染料(formazandye)。生成的甲馈物的数量与活细胞的数量成正比，细胞增殖越多越快，则颜色越深，因此可以通过观察检满生成的甲一物的数量来确定活细胞的数量。

CCK-8的原理跟MTT其实是相同的，不同之处在于CCK-8法生成的黄色甲瓒染料是水溶性的，不需要再吸出培养液加人有机瘩剂溶解这个步骤，因此可以减少一定的误差。其他优点就是重复性、灵敏度优于MTT：对细胞毒性小。

四盐(MTT)比色试验：四挫盐比色试验是一种检测细胞存活和生长的方法。试验所用的显色剂四盐是一种能接受氢原子的染料，化学名3-(4，5-二甲基噻唑2)-2，5-二苯基四氮唑漠盐，简称为MTT。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物(甲瓒，Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砚(DMSO)能溶解细胞中的紫色结晶物，用酶联免疫检测仪在490m波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。

该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高，重复性好、操作简便、经济、快速、易自动比，无放射性污染。与其他检测细胞活力的方法(如细胞计数法、软琼脂克隆形成试验和H-TdR掺入试验等)有良好的相关性。

五、细胞核移植过程：供体细胞(供核)—细胞培养一体细胞

六、杂交瘤技术的过程(生产单克隆抗体的过程)：1.免疫动物：一般选用纯系健康8周龄的BALB/C小白鼠作免疫动物，少数用Lou系大鼠 2.融合细胞的制备；脾淋巴细胞、骨髓瘤细胞的制备 3.两种细胞杂交融合。4.分装培养，5.抗体检测；选择抗原结合法、第二抗体法进行检验。6.杂交瘤细胞的克隆包括有限稀释法、软琼脂法 7.McAb的鉴定包括McAb的特异性分析、McAb的类型分析、McAb的亲和力比较、McAb的结合位点的分析。

第八章

1、干细胞：干细胞是一类具有无限或较长期的自我复制能力和多向分化潜能的原始细胞，在一定条件下可以分化成多种功能细胞或组织器官。

2、骨髓造血干细胞：是指存在于骨髓中，具有自我更新能力和多项分化潜能的原始造血细胞。

3、脐带血造血干细胞：脐带血的数量较少，且含有可观地未成熟的造血干细胞

4、白血病抑制因子(LIF)神经干细胞(NSC)胚胎干细胞(ES)骨髓造血干细胞(MHSC)

一、干细胞生物学特征

1.干细胞在形态上具有共性，通常呈圆形或楠圆形，细胞体积小，核相对较大，细胞核多为常染色质、染色质比较分散，其他细胞器较少

2.干细胞具有较高的端粒醇活性和破性磷酸酶活性。

3.干细胞存在于个体发育的不同阶段以及成体的不同组织中，机体的数目位置相对恒定。

4.自我更新，指干细胞具有分裂和自我复制的能力，子代细胞维持干细胞的原始特征。

5.增殖具有缓慢性，分裂周期长和自稳性，自身数目相对恒定

6.干细胞具有多向分化潜能，去除了分化抑制因子，干细胞能分化成各种细胞。

7.干细胞具备一定的跨系甚至跨胚层分化的特性，称为干细胞的“可塑性”。二．ES细胞形态结构

ES细胞一般胞体体积小，核大，有一个或几个核仁，呈克隆状生长，细胞紧密聚集，形似鸟巢，界限不清等。不同的ES细胞形态不同，鼠ES细胞集落一般呈紧密的球星，灵长类动物的ES细胞集落相对较为扁平。

三．干细胞的分类

根据分化潜能可以分为全能干细胞、亚全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞根据来源可以分为自体干细胞、异体干细胞、诱导多能干细胞

根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞、成体干细胞

四.ES细胞的特性

1.无限增殖性在不分化的前提下，ES细胞体外增殖迅速，每18～24h增殖一次。增殖过程中细胞大多处于S期，进行DNA的合成，G1、G2期很短，它没有G1期检测点，不需要外部信息启动DNA复制。

2.分化潜能性 ES细胞是一种具有高度分化潜能的细胞，可以分化形成包括3个胚层在内的各种类型细胞。当ES细胞培养体系中去除抑制分化因素时，便能自发分化为血细胞、内皮细胞、肌细胞和神经细胞等。ES细胞在体外某些物质的诱导下可以发生定向分化。如用造血基质细胞、不同造血生长因子对单层培养的ES细胞进行诱导分化，可形成各阶段的造血细胞。

3.种系传递性将ES细胞注入囊胚后发育可获得嵌合体，并参与生殖细胞的合成。在嵌合体中一部分组织和细胞来源于受体囊胚细胞，而另一部分来源于ES 细胞。

五．脐带血造血干细胞的特点（优点）

1.脐带血造血干细胞的异体排斥反应小，免疫原性低，再生能力和速度是外周血造血干细胞的10—20倍，且副作用少

2.脐带血干细胞的质量比较高；没有病毒感染，因为有胎盘屏障，所以比较纯净

3.资源丰富，采集简便，对供者无不良影响

六．干细胞技术的应用：1、建立哺乳动物发育的体外模型

（1）ES细胞具有发育成完整动物体丰富的试验材料。ES细胞悬浮生长时可得到类胚体，这成为早期胚胎发育分化的体外模型

(2)在特定的体外培养条件和诱导剂的共同作用下，ES细胞在体外可被诱导分化为属于3个胚层谱系的各种高度分化的体细胞，是研究某些前体细胞起源和细胞谱系演变的理想实验体系模型。

(3)培育出大量不同时期的胚胎作为研究胚胎早期发育或畸胎发生的机制模型。

2、利用ES细胞生产转基因动物

与传统有种方法相比较,ES细胞在生产转基因动物方面现其独特的优势。

(1)在生产转基因动物以前，通过研究在体外ES细胞系中外源DNA表达质粒的构建，整合和表达，从而可提高转基因动物的效率。

(2)ES细胞增殖迅速，可作为取之不尽的供体细胞来源。

(3)用ES细胞来生产转基因动物突破了物种的界限，突破了亲缘关系的限制，大大加快了动物群体遗传变异程度。

3.细胞和基因治疗

（1）神经干细胞治疗退行性疾病，如帕金森病

（2）间充质干细胞用于治疗中枢神经系统疾病和修复损失神经

（3）角膜干细胞用于治疗失明的病人

4.作为新药开发的工具细胞

（1）干细胞为药物筛选提供了极好的模型。干细胞可无限增殖，获得大量的细胞，并能分化为具各种功能的特化细胞，为新药药效、毒性、药理、药物代谢药物动力学耐药性等的检测提供了细胞水平的研究手段。

（2）例如，诱导干细胞分化为胰岛细胞或用胰腺干细胞诱导分化为胰腺β细胞5.器官培养

利用转基因动物也可以为人类提供器官移植的材料。将人的基因导人猪或其他动物的ES细胞,利用转基因动物猪为人类提供器官移植的材料;或者将干细胞注射到重度免疫缺陷动物的脏器中，让移植的人干细胞逐步替代动物细胞，使其脏器人源化，成为可供移植的器官。