急性白血病免疫分型

各系列造血细胞表达的主要相关抗原：
T淋巴细胞系：CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8； B淋巴细胞系：CD10、CD19、CD20、CD22、CD23、CD24、CD79； 粒、单核细胞系：CD11b/c，CD13，CD14，CD15，CD33、CD64、 CD65w、CD117及MPO；
ANLL的免疫分型

急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）的分型主要 依靠形态学（包括细胞化学染色）来区分，尤 其是FAB分型中的M1、M2与M4、M5之间尚无明 确的免疫标志划分，但对一些形态学难于分类 或特殊类型的ANLL（如M0、M6、M7），细胞免 疫学分析对临床确诊ANLL可提供重要信息。
ANLL的免疫分型
B-ALL的免疫表型特点：
B-ALL分类
early Pre-B-ALL
common-B-ALL Pre-B-ALL mature-B-ALL
免疫表记
HLA-DR+ 、 TDT+ 、 CD19+等
CD34+ 、CD10CD34+ 、CD10+ CD34- 、CD10+/- 、CyIgM+ CD34- 、CD10-/+ 、sIgM+ 、 TDT-
T-ALL的免疫表型特点：
T-ALL分类
免疫表记
TdT+ 、CyCD3+ 、CD7+
Pro/Pre-T-ALL CD2-、sCD3- 、CD1aT-ALL CD2+、 sCD3+ 、 CD5+/- 、 CD8+/- 、CD4+/- 、 CD1a+/-
ALL和AML的免疫学鉴别
类别 TdT HLADR CyMPO CyCD3 CyCD79 CD1 CD7 9 a或 或 CyCD13 CyCD22

通过CD45／SSC散点图即可获得初步印象。若 同时加上一个或二个以上其它单抗进行二、三 色甚至四色分析，则很容易识别非正常细胞群 的表型。 通常在CD45/SSC散点图上,白血病细胞群体多 出现于由淋巴细胞、单核细胞、粒细胞和红细 胞围成的称为“白血病窗”的区域内。

根据骨髓细胞CD45/SSC 图中分布情况设门圈定各类 细胞
ALL的免疫学分类（EGIL，1994年）
1.B-ALL 早期前B-ALL（early Pre-B-ALL） 普通型B-ALL（common-B-ALL） 前B-ALL（Pre-B-ALL） 成熟B-ALL（mature-B-ALL） 2.T-ALL 早期前T-ALL（Pro/Pre-T-ALL） 成熟T-ALL（T-ALL）
R1 门为成熟淋巴细胞 R2 门为正常单核细胞位置 R3 门正常粒细胞位置 R4 门为幼稚淋巴细胞出现位 置 R5 门为有核红细胞或细胞碎 片位置 R6 门为幼稚髓细胞出现位置 白血病细胞通常会在R4 R6 两门位置处出现

正常骨髓经CD45/SSC射门的散点图
CD45/SSC 图中可见 CD45 强阳性SSC 低信号的 细胞群为淋巴细胞褐色细胞 群体 中等强度的CD45 表达SSC 信号最强的细胞群体为粒细 胞蓝色及红色细胞群体 CD45 表达与SSC 信号介于 淋巴细胞与粒细胞之间的是 单核细胞群体绿色细胞群体 CD45 阴性SSC 信号最低的 有核红细胞和细胞碎片
ANLL的免疫分型特点

FAB-M4/M5的免疫表型特点：HLA-DR+、CD15+、 CD14+、CD64+、 CD33+/-、CD13+/-、CD34-/+、 CD11b/c+。
ANLL的免疫分型特点

FAB-M6免疫表型特征为HLA-DR-/+，CD36+,血 型糖蛋白A或B（Gly-A/B）是阳性，CD34+/-， 髓系抗原也可以表达。
IV
V VI
+
+ +
+
+ +
+
+/-
+
+/+
+ -
+
50
<5 <2
1986年后两大类九分法
T亚型 CD7 CD5 CD2 CD3 CD4 CD8 CD1a 发生率
I
+
+
+
-
-
-
-
55
II
+
+
+
+(25%) +(90%) +(90%)
+
25
III
+
+
+
+
+/-
-/+
-
20
1994年四型21类法
4型21类法： 这是1994年法国国际白血病欧洲协作组在过去 白血病分型的基础上，对ALL免疫学分型提出的新方法。 首先，根据每个CD抗原特异性强弱，确定其相应的积分， 并在此基础上将ALL分为4型: ①裸型：此型中每个系列（T淋巴细胞系、B淋巴细胞系、髓 细胞系）积分均<2。 ②纯型：此型要求T、B、髓细胞某一系列积分≥2，而其它 细胞系列积分为0。 ③变异型：此型要求某一系列积分≥2，其它系列积分<2。 ④多表型：此型要求2个或2个以上系列积分≥2。
单克隆抗体的选择

白血病免疫分型时尽量选用系列特异性强的单抗 作为一线单抗，目前较为公认系列特异性单抗有T 系的CD3、CD2；B系的CD79a、CD22 、CD19和髓系 的MPO、CD117、CD13等。一般说来胞浆比胞膜的 标志特异性强。用这些特异性强的标志作为初筛， 基本可确定T系、 B系或髓系，随后即以二线单抗 （CD14,CD36,CD41,CD34,CyIg,SmIg等）做进一步 的免疫分型，以确定最后亚型。

CD34是造血干细胞的特征性标记，与AML的分 型有一定关系。CD34+的AML与低分化的FAB亚 型M1及原始细胞比较高的M2a有明显的相关性。 而在分化程度较成熟的M3、M2b及M5b等白血病 细胞则缺乏或极少有CD34抗原的表达。且随着 分化程度渐趋成熟，CD34的表达量逐渐减少。
ANLL的免疫分型特点
急性白血病免疫分型
简介

白血病免疫分型是利用单克隆抗体（McAb） 对骨髓或外周血中的白血病细胞进行免疫标记， 检测其细胞膜及细胞浆抗原，分析其表型，以 了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程 度，从而诊断白血病的类型。
原理

造血细胞分化抗原：造血细胞分化过程中由细 胞核内染色体上的基因编码的镶嵌蛋白, 存在 于细胞表面和（或）细胞浆内，随着分化成熟 过程不断发生改变。

FAB-M1/M2的免疫表型特点：CDl3+、CD15+、 CD33+、 HLA-DR+、CD34+，其中CD34在M1中的 表达强于M2，而CD15在M2的表达较强。
ANLL的免疫分型特点

FAB-M3典型的免疫表型是CDl3+、CD15+、 CD33+、CD9+、 CD38+、CD34-/+、HLA-DR-， 部分病人可能出现CD2+，CD56+。
原理

造血细胞分化抗原出现、增多、减少或消失与 造血细胞所属系列和分化程度密切相关，因而 可作为鉴别和区分造血细胞的标记。
原理

急性白血病细胞来自造血干/祖细胞的恶性克 隆性增生，既保持造血细胞的部分性质，又有 其独特的生物学和免疫学特性： （1）急性白血病主要表现在骨髓或外周血中 原始幼稚细胞显著增多，正常细胞成分受抑制， 因此免疫分型表现在带有某种抗原标志的细胞 比例异常增多或减少，例如T-ALL时的CD7+细胞 远远超过正常人的30%，而CD13+/CD33+细胞的 比例降低，并可能同时伴有CD34+、TdT+细胞的 异常增多；
巨核细胞系：CD41、CD42、CD61、CD62、CD36；
红细胞系：CD71、CD36、血型糖蛋白A（Glycophorin）； 其它：造血干祖细胞共同抗原CD34、CD38及末端脱氧核糖核苷酸 转换酶（TdT），人类主要组织相容性抗原HLA-DR，白细胞共同抗 原CD45等。
CD45/SSC设门中白血病细胞群表面标志 阳性判断标准：阳性率>阴性对照的20％， 对于MPO只需要>3％即可。
原理
（2）错位表达：即同一细胞出现异系列抗原混 合表达，如AML细胞出现CD7、CD10抗原，ALL 细胞出现CD33、CD14等； （3）抗原非同步化表达：如CD34与分化成熟较 晚期的抗原不应该同步表达，但白血病细胞有 时会出现CD34/CD56、CD34/CD20等同时表达的 异常现象；
（4）抗原丢失：如CD13、CD33是髓系最常见抗 原，但少数AML却不表达或仅表达其中一项。
前B细胞型 CyIg+ 2--3% 0.5% 最次 最次
B细胞型 SmIg+ 2--3% 1.5% 最次 最次
DR/CD9/CD10+ 60-70% 50% 最好 次之


198wk.baidu.com年后两大类九分法
ALL免疫分型 －－两类九型法:
非T亚型 I II III HLA-DR + + + CD9 + + CD10 + CD20 μ链 SmIg 发生率% 5 15 30
ANLL的免疫分型特点

FAB-M7特征性的抗原表达是CD41，CD42，CD61， 部分也可表达CD36。
ALL的免疫分型

从70年代开始进行免疫学分型
1986年前五分法


五分法：Common型
表型 发生率：国外 国内 预后： 儿童 成人
未分化型 复杂 30% 30% 次之 再次
T细胞型 CD2/CD5+ 15-25% 20% 再次 最好
BALL TALL AML
+
+ -
(1)
+
(2)
+
+ -
+
-
+
-/+
+ -/+
(3)
+/-
(1).TdT对多数成熟B-ALL为阴性； (2).10％的T-ALL病例HLA-DR可表达阳性； (3).10％～20％的AML病例TdT为阳性
如何进行免疫分型
选择良好的设门方法：FSC/SSC设门法,CD45 ／SSC设门法； 2. 目的：排除正常细胞的干扰，将不正常的细 胞群孤立出来便于重点分析。
1.
CD45是所有白细胞的抗原，其表达量与细胞分 化程度具有高度相关性，即细胞分化程度高的 细胞，CD45表达量高；分化程度低的细胞， CD45表达量低。 CD45表达量在成熟淋巴细胞最高，单核细胞、 粒细胞、早期造血细胞依次减弱。红细胞(中、 晚幼红细胞、成熟红细胞)不表达CD45。 侧向角光散射(SSC)反映细胞的颗粒性，成熟 粒细胞SSC最高，依次为单核细胞、淋巴细胞、 早期造血细胞、红细胞。