白血病免疫分型

白血病细胞中的抗原表达特点
‫ ‫‬表达模式基本与相应阶段正常细胞相似，还具 有以下特点：
‫ ‫‬1. 跨系表达 ‫ ‫‬2. 时相混乱 ‫ ‫‬3. 抗原表达量的改变
免疫分型四种急性白血病
单表型急性白血病 表达某一个系列抗原为主的急性白血病 双表型/双克隆急性白血病 未分化型急性白血病
粒单核系
CD34 CD13 CD33 CD117 MPO
粒系 CD15 CD71 CD16
单核系
CD4 CD11b CD14 CD64 HLA-DR CD36
CD5+ CD19+ CD20 CD22+ CD23 + sIg+ FMC7-
CLL/SLL
抗
原
干 细 胞
早 前
前
静刺
止 期
激
B B B
Pro-B ALL
Common Pre-B -B ALL ALL
免疫母细胞
浆细胞样淋巴细胞
大B细胞 淋巴瘤
淋巴浆细 胞淋巴瘤
CD19+ CD20+ CD22+ CD38+ IgM++ sIg++
外 套 细 胞
滤 泡 区 母 细 胞
中 心 母 细 胞
中边 心缘浆 细带细 胞细胞
胞
TDT+ CD34+ cCD79a+ CD19+ CD10± cμ-
APC(别藻兰蛋白）： 660nm（红）
检测物： 细胞表面、胞浆或胞核抗原性物质
CD（cluster of differentiation）：1982年起将 识别同一分化抗原的来自不同实验室的单 克隆抗体归为一个分化群，并进行流水编 号。一个CD相关抗体可包含多个克隆号。
其他非CD系列抗原：如TCR、HLA等
大B细胞 淋巴瘤
CD22+ bcl-6+ CD10 ± CD5 ± CD30 ±
滤泡淋 巴瘤
CD22+ CD10+ FMC7+
CD23±
bcl-2+ CD5-
边缘带 淋巴瘤
CD22+ CD5CD10CD23-
骨 髓 瘤
CD38 CD138 CD56 cIg CD19CD45-
Precursor-T ALL
CD2 CD3 CD5 CD7 CD4 CD8 CD25 CD56 CD57
T-CLL/PLL + + + + +/- -/+ -
T-LGL
+ + +/- +/- -
+
-
-/+
+
NK-LGL + - -
- +/- -
+
-
ATL
+++ - +
+源自文库
肝脾γδT细胞淋巴瘤：CD2+ CD3+ CD7+ TCRγδ+ CD16+/- CD56+/- CD8-/+ CD4- TCRαβ-
标本种类：怀疑含有病变细胞的组织或体 液，如外周血、骨髓、胸腹水、脑脊液、 淋巴结等。
标本要求：细胞有活性，最好不要超过48h。
光散射特征与细胞形态的关系
CD45在免疫分型中的应用意义
正常
SSC
嗜酸
粒 细 胞
单核
原始
嗜
碱 淋巴
CD45
白血病
SSC
M3
MM
非造血
来源细胞
L1~3, M0~2
CD19+
M0
M2
TdT+, CD7+ 见于M0
CD56+
M5/M4
t(9;22)
t(15;17)，或RAR+， t(11;17)
inv(16)或 t(16;16) t(9:22)多见 t(8;21)
双表型急性白血病记分系统
‫ ‫‬分值 ‫‫‬2
‫‫‬ ‫‫‬
‫‫‬1
‫‫‬ ‫‫‬
‫ ‫‬0.5
‫‫‬ ‫‫‬
TDT+ CD34+ cCD79a+ CD19+ CD20 ± CD10+ cμ-
TDT+ CD34± cCD79a+ CD19+ CD20+ CD10± cμ+
套细胞 伯基特 淋巴瘤 淋巴瘤
CD5+ CD22+ sIg+ FMC7+ Cyclin D1+ CD23-
CD22+ CD10+ sIg+ CD34TDT-
‫‫‬
表达率
‫ ‫‬CD13
70%
‫ ‫‬CD33
70%
‫ ‫‬CD117
70%
‫ ‫‬cMPO
70%
特异性 非特异 非特异 特异 特异
错译表达（Ly+AML ，My+ALL ）：
白血病细胞表达非本系细胞抗原标志 物，具有预后意义。
ALL
CD13， CD33
AML
CD2+， DR- M3
CD2+， DR+ M4Eo
干细胞
胸腺Ⅰ期
TDT+ CD34+ CD2 cCD3 CD7 CD71
胸腺Ⅱ期
TDT+ CD34± CD1a CD2 cCD3 CD7 CD4 CD8
胸腺Ⅲ期
TDT+ CD2 CD3 CD5 CD7 CD4/CD8 TCR
成熟T细胞 各分化群
造血细胞在其分化、发育过程中，细胞膜、
细胞浆或胞核抗原的有无、表达强弱与血细胞的 分化发育阶段密切相关，表现出与细胞系列及其 分化程度相关的特性。
白血病/淋巴瘤免疫分型
临检血液 蒋能刚
应用目的：
确定淋巴系病变的起源和分化程度； 鉴别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病； 确定髓系白血病各亚型； 对形态学分类不明细胞进行定性； 诊断急性未分化型白血病； 诊断急性混合细胞白血病； 诊断微小残留白血病或白血病浸润； 判断白血病/淋巴瘤预后。
各系急性白血病重要抗原指标
‫ ‫‬1. 急性淋巴细胞白血病 (AL)
‫‫‬
敏感性
特异性
‫ ‫‬B-ALL:
‫ ‫‬CD19 ‫ ‫‬cCD79a
100% 99%
非特异 特异
‫ ‫‬T-ALL:
‫ ‫‬CD7 ‫ ‫‬cCD3
100% 100%
非特异 特异
‫ ‫‬2. 急性髓细胞白血病 (AML)
M6, M7
T
CD45
正常骨髓
AML-M1
AML-M2
AML-M3
AML-M4/M5
AML-M6
ALL
非造血细胞
非特异性染色（死亡细胞）
分类不明细胞
B细胞克隆性
结果报告
白血病免疫分型其他方法：
酶-底物显色 荧光显微镜
谢谢
正常血细胞中的抗原表达特点
‫ ‫‬1. 系列保守性 ‫ ‫‬2. 时序性 ‫ ‫‬3. 抗原表达量的模式化
干细胞
(TDT CD7) CD34 CD117 CD13 CD33 CD38 MPO
定向髓系 干细胞
嗜酸性细 胞
嗜碱性细 胞
红系
CD36 CD71 CD235a
巨核系
CD41 CD42a/b CD61
B系 cCD79a CD22 cIgM CD19 CD10 CD20 TdT CD24
T系 cCD3 TCRαβ TCRγδ CD2 CD5 CD8 TdT CD7
髓系 cMPO
CD117 CD13 CD33 CD14 CD15 CD64
部分慢性B淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型
CD5 CD10 CD19 CD22 CD23 HLA-DR FMC7 SIg CD11c
CLL +
-
+ +/- +
+
-
+ +/-
PLL -
-
+
+
-
+
++
-
MCL + -/+ +
+
-
+
++
-
HCL -
-
+
+
-
+
++
+
FCL -
+
+
+ -/+
+
+/- +
-
MZL -
-
+
+
-
+
+ + +/-
LPL -
-
+
+ -/+
+ -/+
注：HCL CD103+ CD25+
部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病的免疫表型
流式细胞术(Flow Cytometry):
对高速流过检测区的单个细胞或生物颗 粒进行多参数、快速分析（或分选）的一 种技术。
数据显示方式：
单参数直方图 双参数二维点图 等高图 二维密度图 三维图
单参数直方图
双参数点图
荧光素
FITC(异硫氰酸荧光素）：530nm（绿） PE（藻红蛋白）：575nm（橙黄） PI(碘化丙啶）： 620nm（橙红） PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白）：675nm（深红）