血清骨型碱性磷酸酶质量的测定
碱性磷酸酶km值测定实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除碱性磷酸酶km值测定实验报告篇一:酶促反应动力学实验报告酶促反应动力学实验报告14301050154杨恩原实验目的:1.观察底物浓度对酶促反应速度的影响2.观察抑制剂对酶促反应速度的影响3.掌握用双倒数作图法测定碱性磷酸酶的Km值实验原理:一、底物浓度对酶促反应速度的影响在温度、ph及酶浓度恒定的条件下,底物浓度对酶的催化作用有很大的影响。
在一般情况下,当底物浓度很低时,酶促反应的速度(v)随底物浓度[s]的增加而迅速增加,但当底物浓度继续增加时,反应速度的增加率就比较小,当底物浓度增加到某种程度时反应速度达到一个极限值(即最大速度Vmax)。
底物浓度和反应速度的这种关系可用米氏方程式来表示(michaelis-menten方程)即:式中Vmax为最大反应速度,Km为米氏常数,[s]为底物浓度当v=Vmax/2时,则Km=[s],Km是酶的特征性常数,测定Km是研究酶的一种重要方法。
但是在一般情况下,根据实验结果绘制成的是直角双曲线,难以准确求得Km和Vmax。
若将米氏方程变形为双倒数方程(Lineweaver-burk方程),则此方程为直角方程,即:以1/V和1/[s]分别为横坐标和纵坐标。
将各点连线,在横轴截距为-1/Km,据此可算出Km值。
本实验以碱性磷酸酶为例,测定不同浓度底物时的酶活性,再根据1/v和1/[s]的倒数作图,计算出其Km值。
二、抑制剂对酶促反映的影响凡能降低酶的活性,甚至使酶完全丧失活性的物质,成为酶的抑制剂。
酶的特异性抑制剂大致上分为可逆性和不可逆性两类。
可逆性抑制又可分为竞争性抑制和非竞争性抑制等。
竞争性抑制剂的作用特点是使该酶的Km值增大,但对酶促反映的最大速度Vmax值无影响。
非竞争性抑制剂的作用特点是不影响[s]与酶的结合,故其Km值不变,然而却能降低其最大速度Vmax。
本实验选取na2hpo4作为碱性磷酸酶的抑制物,确定其抑制作用属于哪种类型。
骨源性碱性磷酸酶测定在慢性肾脏病患者肾性骨病诊断中的意义

骨源性碱性磷酸酶测定在慢性肾脏病患者肾性骨病诊断中的意义赵黎;金娟;龚建光;何强【期刊名称】《实用医学杂志》【年(卷),期】2016(32)18【摘要】目的:探讨血清骨源性碱性磷酸酶(BALP)在慢性肾脏病患者肾性骨病诊断中的意义。
方法:选择慢性肾脏病3~5期患者111例,均抽取空腹静脉血,分别测定 BALP、ALP 及 iPTH、β-CTx、P1NP、N-MID osteocalcin、Vitamin D (25-OH),进行相关性分析和比较透析患者与保守治疗患者的差异。
结果:BALP与ALP、iPTH、β-CTx、P1NP、N-MID osteocalcin 呈正相关,差异有统计学意义(r =0.686、0.443、0.405、0.399、0.309,P <0.05);BALP与Vitamin D (25-OH)无相关性(P >0.05)。
透析患者血清BALP、ALP、iPTH、β-CTx、P1NP、N-MID osteocalcin 均高于保守治疗患者,差异有统计学意义(P <0.05);透析患者血清Vitamin D (25-OH)与保守治疗患者比较差异无统计学意义(P >0.05)。
结论:BALP测定在慢性肾脏病患者肾性骨病诊断中有意义,是评估透析患者肾性骨病的非创伤性指标,指导临床治疗。
【总页数】3页(P3070-3072)【作者】赵黎;金娟;龚建光;何强【作者单位】310014 杭州市,浙江省人民医院肾脏病科;310014 杭州市,浙江省人民医院肾脏病科;310014 杭州市,浙江省人民医院肾脏病科;310014 杭州市,浙江省人民医院肾脏病科【正文语种】中文【相关文献】1.骨源性碱性磷酸酶测定在儿童维生素D缺乏亚临床状态诊断中的意义 [J], 付晓玲2.甲状旁腺素及骨转运指标的测定在维持性血液透析患者肾性骨病诊断中的意义[J], 贾艳丽;刘惠兰3.骨源性碱性磷酸酶测定在家兔骨折修复过程中的意义 [J], 刘建鹏;杨红志;沙永顺;范红旗;刘海金;桑敏4.探讨骨源性碱性磷酸酶测定在婴幼儿体检中的临床意义 [J], 陆春霞;陈琼5.探讨骨源性碱性磷酸酶测定在婴幼儿体检中的临床意义 [J], 陆春霞;陈琼因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒标准操作程序

碱性磷酸酶(ALP)测定标准操作程序1.摘要碱性磷酸酶(ALP)存在于成骨细胞、干细胞、白细胞、肾、脾、胎盘、前列腺和小肠内。
测定血清或肝素化血浆中的碱性磷酸酶活力,做临床辅助诊断用。
2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中碱性磷酸酶(ALP)的活力。
3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定碱性磷酸酶(ALP)活力的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理;本SOP的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的碱性磷酸酶(ALP)试剂盒采用的是AMP缓冲液法。
5.原理在AMP的缓冲环境下,磷酸对硝基苯在碱性磷酸酶的作用下,可以水解成磷酸盐和对硝基苯酚。
在一定底物浓度范围内,磷酸对硝基苯的水解产物对硝基苯酚会引起405nm处吸光度的上升,其上升速率与血清中碱性磷酸酶的活力成正比。
−→−+OH−−磷酸盐对硝基苯酚磷酸对硝基苯碱性磷酸酶+26.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源:上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分:R1:AMP缓冲液(PH10.50)、乙酸镁;R2:AMP缓冲液(PH8.85)、磷酸对硝基苯、乙酸镁。
AMP:2-氨基-2-甲基-1-丙醇7.3试剂稳定性:试剂在2-8℃避光保存,有效期1年。
试剂工作液在2-8℃避光保存,可稳定4周,15-25℃可保存稳定4天。
7.4试剂准备:试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序:使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求,并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白,经校准测定,仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装,在2-8℃冰箱可稳定到失效期,使用前用5ml去离子水复溶,待质控物充分溶解(大约30分钟)后使用。
骨源性碱性磷酸酶测定在婴幼儿早期佝偻病应用

骨源性碱性磷酸酶测定在婴幼儿早期佝偻病应用的探讨【摘要】目的:分析婴幼儿骨碱性磷酸酶(banp)的检测意义,探讨其与儿童佝偻病发病的关系。
方法:采用全血干化学和免疫浓缩技术方法,对1776例婴幼儿进行骨碱性磷酸酶检测,分析血nbap 与佝偻病发病早期的关系。
结果:各年龄组男女之间比较差异无统计学意义(p>0.05),各年龄组之间差异有统计学意义(p300 u/l 提示佝偻病激期[2]。
balp值≤200 u/l 为正常水平,balp值200~250 u/l为预防水平,balp值≥300 u/l为治疗水平。
1.4 统计学处理应用spss 11.0统计学软件对数据进行处理分析,计数资料采用字2检验,p<0.05为差异有统计学意义。
2 结果本研究结果显示不同年龄婴幼儿全血balp预防水平结果比较差异有统计学意义(字2=62976.96,p<0.05);以及不同年龄婴幼儿全血balp结果比较,差异有统计学意义(字2=6.91,p<0.05)。
年龄越小、骨碱性磷酸酶的阳性率越高,随着年龄的增长,佝偻病发病率呈逐渐降低趋势。
本研究数据显示正常体检婴幼儿中有70.95%为正常水平,26.07%为预防水平,2.76%为治疗水平,见表1、表2。
3 讨论佝偻病很少直接危及生命,但因发病缓慢,易被忽视,一旦发生明显症状时,机体的抵抗力低下,易并发肺炎、腹泻、贫血等其他疾病典型的佝偻病诊断不难[3],但佝偻病早期症状、体征缺乏特异性,表现不明显,单纯依靠临床表现不易早发现,从而延误治疗,影响儿童的生长发育。
婴幼儿佝偻病是因体内血钙降低,刺激甲状旁腺分泌增加,加速旧骨溶解,释放骨钙入血,以维持血钙接近正常水平。
但因甲状旁腺素抑制,肾小管对磷的重吸收、尿磷排出增加,使血磷降低,导致ca、p乘积降低,骨组织钙化不良,成骨细胞代偿性增生,骨钙化的主要活性物质nbap生成增多,从而形成骨骼病变和一系列症状、体征及血液生化改变。
碱性磷酸酶ALP测定标准操作程序SOP文件

ABCD医院
生化实验室
文件编号:
ABCD-SOP-04-17
ALP测定
版序:ABCD
页码:第4页,共4页
ALP参数设置表
TEST NAME [ ALP ]
R.VOLUME(R4) [ 0 ]
TEST CORD [ 158 ]
ABSORBANCE LIMIT [ 10000/INCREASE ]
页码:第2页,共4页
准备:直接使用。
质控间隔时间及限制:应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内,如果超出范围,实验室应根据情况采取措施。
5仪器
ROCHE MODULAR P或日立7060生化分析仪。
6上机操作
见仪器作业指导书。
7参考范围
男性:40-129IU/l
8性能指标
本法线性范围为1-1200u/l,不准确度允许范围 ±10%,不精密度CV=0.67%,灵敏度为0.67u/l。
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
S1 ABS(LOW) [ -32000 ]
R.VOLUME(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 32000 ]
R.VOLUME(R3) [ 36 ]
ABCD医院
生化实验室
文件编号:
ABCD-SOP-04-17
ALP测定
版序:ABCD
页码:第3页,共4页
增高可见于下列情况:
a)肝胆疾病:阻塞性黄疸,急性或慢性黄疸型肝炎,肝癌等。
b)骨骼疾病:由于骨的损伤或疾病使成骨细胞内所含高浓度的碱性磷酸酶释放入血液中,引起血清碱性磷酸酶活力增高。如纤维性骨炎、成骨不全症、佝偻病、骨软化病、骨转移癌和骨折修复愈合期等。
血清骨型碱性磷酸酶对于恶性肿瘤骨转移的诊断价值

i0 0年 1 月 第 l 1 2 1 5卷第 1 期 1
C ieeCi cl n hns l ia O n
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血清 骨 型碱 性磷 酸 酶 对 于 恶性 肿瘤 骨转移 的诊 断价 值
6 0 8 成都 成都 铁路 中心 医院肿瘤科 10 1
t1 Ch n du 61 0 a . e g 0 81. ia n t 6 c m Co rs n n u h r zHENG ig , mat x d @ 1 3. o repo dig a t o : L n E— l
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【 bt c】 O j t e o s st i nsc a e f oe l le hshte( —L ) eco s u m tt i A s at r be i T s sh d goiv u n k i o a s BA P dt tn n s os e s s cv a e e a t l ob a an p p a e i i o e a as
=
0 00 , .0 ) 骨转 移 组 血 清 B A P水 平 为 ( 5 .2 4 .9 ) / , 无 骨 转 移 组 的 (0 . —L 12 364 0 30 U L 与 - 175±1.9 ) / 5 11 U L相 比 , 异 显 著 ( = 差 P
骨碱性磷酸酶测定对早期预防佝偻病的指导意义

4 J 维 生 素 D 缺 乏性 佝 偻 病 是 我 国婴 幼 儿 发 ,L
B P的检测结 果见 表 1 AL 。
表 1 B P检 测 结 果 AL
病 率较 高 的营养 障碍 性 疾病 之 一 , 国北 方 为高 发 我 地区 。由于 日照时 间少 , 食结 构不 合理 , 饮 环境 污染 及 生活 习惯等 多方 面原 因 , ~3岁婴 幼 儿 属佝 偻病 0 高发 人群 。维 生 素 D 是 治 疗 和 防 小 儿佝 偻 病 的
骨 碱 性 磷 酸 酶 > 3 0U/ ,3例 结 论 0 L 7
骨 碱 性 磷 酸 酶检 测 方 法 具 有 简 便 易 行 、 敏 、 异 性 等 特 点 , 用 于 灵 特 可
指 导 维 生 素 D应 用 , 预 防 和 治疗 佝 偻 病 。 以 关 键 词 : 碱 性 磷 酸 酶 ; 偻 病 ; 生 素 D; 骨 佝 维 婴儿 中 图 分 类 号 : 7 3 Q5 61 R 2 ; 5 . 文 献标 识 码 : B 文 章 编 号 :0 93 2 ( 0 70 -2 60 10 -4 72 0 ) 40 4 -2
果 。B P< 2 0 U/ 一) 为 正 常 ; AL 0 ~ AL 0 L( , B P 20
2 0U/ ( ) 为 维 生 素 D 缺 乏 状 态 ; AL 5 ~ 5 L + , B P2 0
精确、 简便 、 速 , 需要 静脉抽 血 , 快 不 易被 d J 及 家长 ,g 所 接受 。因此 , AL B P作为 检测 d J 佝偻 病最 特 异 、 ,L 最敏 感且 简便 易行 , 已被广 大 临床 医师 所认 同 。
检测 人 员经 过技 术 培训 , 格按 操作 程 序进 行。 严 B P测 定采 用北 京 中生金域 诊断技 术 有 限公 司研 AL 制 的 4 J 型 骨碱 性 磷 酸酶 诊 断用 试 剂盒 ] 常规 消 ,L ,
骨碱性磷酸酶检测试剂盒(酶联免疫法)说明书

生物素、叠氮化钠(0.09%)的牛/马蛋白基质。每瓶 14mL。 2. 微孔板:板孔内包被链霉亲和素,包装于带干
燥剂的铝箔袋中。12×8 孔 3. 标准品 0/稀释液(0):不含 BAP 的牛蛋白基质,
含叠氮化钠(0.09%)。每瓶 14mL。 4. 标准品(1-5):含 BAP、叠氮化钠(0.09%)的
变形性骨炎是一种常见的骨骼紊乱,表现为正常骨 细胞的局灶性增生。变形性骨炎的发病率比曾一度认为 发病人群在3%-4%的中年患者和10%-15%的老年人要 高出许多。这种疾病不影响年轻人。绝大部分变形性骨 炎患者无临床症状,容易漏诊,除非在一些不相关原因 的医疗检查时出现X摄片或血清碱性磷酸酶水平异常时 才发现的。这种症状的患者最常见的症状是疼痛和畸形。
骨碱性磷酸酶检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
【产品名称】 通用名称:骨碱性磷酸酶检测试剂盒 (酶联免疫法) 英文名称: OSTASE® BAP EIA
【包装规格】96 人份/ 盒 【预期用途】
骨碱性磷酸酶检测试剂盒(酶联免疫法)仅用于体 外诊断使用,用于定量检测人血清中骨特异性碱性磷酸 酶(BAP)。作为成骨细胞活性的指示剂,本试剂盒可作 为管理绝经后骨质疏松和变形性骨炎的辅助工具。
【检验原理】
本试剂盒是一种固相单克隆抗体酶联免疫测定。样
本中的 BAP 与含有生物素标记的 BAP 特异性单克隆抗 体的溶液进行反应。反应发生在包被了链霉亲和素的微
孔中(微孔固定于塑料板框中),形成固相/捕获抗体/BAP
复合物。微孔洗涤除去未结合的 BAP,再加入酶底物进行
孵育。终止反应后,在酶标仪 405nm 下读取吸光度。吸 光度值与待测样本中 BAP 浓度成正比。样本中 BAP 浓度 的计算基于 BAP 标准品及标准品 0/稀释液的同步检测。
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血清骨型碱性磷酸酶质量的测定
导语:当大人们带着自己的小孩子去体检的时候总有一项检测是血清骨型碱性磷酸酶质量的测定,很多家长们啊看到一长串读不通顺的字肯定是不懂得这个
当大人们带着自己的小孩子去体检的时候总有一项检测是血清骨型碱性磷酸酶质量的测定,很多家长们啊看到一长串读不通顺的字肯定是不懂得这个到底是测量什么的,事实上呢,这个血清骨型碱性磷酸酶质量啊是看看小孩子有没有佝偻病的,下面来具体的讲一讲吧。
你好,碱性磷酸酶是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。
单独升高一点并没有关系,要结合其他的检察才能确诊。
碱性磷酸酶升高主要见于: 1.肝胆疾病:阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎等。
2.由于骨组织中此酶亦很活跃。
因此,孕妇、骨折愈合期、骨软化症。
佝偻病、骨细胞癌、骨质疏松等血清碱性磷酸酶会升高。
3.白血病、甲状腺机能亢进时,血清碱性磷酸酶亦可升高。
如果有条件可以做一下碱性磷酸酶同功酶,或者要求医院用热稳定试验鉴别是来自肝脏还是来自骨骼. 维生素D缺乏病(vitamin D deficiency)是由于日晒少(皮肤经紫外线照射后,可使维生素D前体转变为有效的维生素D)、摄入不足(奶、蛋、肝、鱼等食物)、吸收障碍(小肠疾病)及需要量增加(小儿、孕妇、乳母)等因素,使体内维生素D不足而引起的全身性钙、磷代谢失常和骨骼改变。
同时影响神经、肌肉、造血、免疫等组织器官的功能,严重影响儿童的生长发育。
现在的食物什么的都有那么多的毒素农药什么的,小孩子们因为缺少了应该的要得到的营养元素很容易就会得上佝偻病的,很多家长们
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