小鼠脂肪细胞取材
小鼠皮肤的解剖结构
小鼠皮肤的解剖结构
小鼠是一种常见的小型哺乳动物，它们的皮肤结构与人类有着相似之处，但也存在一些不同之处。
下面就来了解一下小鼠皮肤的解剖结构。
首先，小鼠的皮肤由三层组成：表皮、真皮和皮下组织。
表皮是最外层的一层，它由多层角质细胞构成，起着保护作用。
真皮是皮肤的中间层，它包含了血管、汗腺和毛囊，是皮肤的主要组织。
而皮下组织则主要由脂肪细胞组成，起到保温和储存能量的作用。
其次，小鼠的皮肤中还存在着丰富的感觉神经末梢。
这些感觉神经末梢负责传递触觉、温度、痛觉等信息，使小鼠能够感知外界环境并做出相应的反应。
此外，小鼠的皮肤中还存在着大量的毛囊，它们与周围的肌肉和神经紧密相连，可以对外界刺激做出快速反应。
最后，小鼠的皮肤具有自我修复的能力。
当小鼠的皮肤受到损伤时，身体会迅速启动修复机制，通过增加细胞分裂和蛋白质合成等
过程来修复受损的组织。
这种自我修复的能力使得小鼠能够在野外生存并适应各种环境。
总的来说，小鼠的皮肤结构复杂而精密，它不仅具有保护身体、感知外界刺激的功能，还具有自我修复的能力。
通过对小鼠皮肤结构的了解，我们可以更好地研究小鼠的行为、生理和疾病等方面，为人类健康和医学研究提供重要的参考。
小鼠前脂肪细胞中AP-2α相互作用蛋白质的分离和鉴定
ｄｔ ａｅｓａ ｈ ｈｙａｅａｙ—ｏ ｎｙ ｅＡ ｄｈ ｄｏｅ ａｅ ｌ ｇｃａｎ Ｐｏ ｉ—— ｏｓａ ａ （ —ｓａｔ ｅ Ｏ ｍ ｔｙ— ａａ ｓ ｅｒ ，ｔ ｒ ｃｌ ｅ ｚｍ ｅ ｙｒｇｎ ｓ，ｏ —ｈｉ 、 ｒｔｎＬｉ ａｐｒ ｔ Ｄ ａｐ ｒ ｔ） — ｅｈｌ ｂ ｃ ｅ Ｃ ｎ ｅ ｓ ｔ ｅ ａ
ｔｏ ｆａ ｉ ｏ ｙｅ ｄｆｅ ｅ ｉ ｔ ｉ ｎ ｏ ｄ ｐ ｃ ｔ ｉｆｒ ｎｔａｉ ｏｎ， ｍａ ｕ ａ ｉｎ ａ ｄ ａ ｐ ｃ ｔ ａ ｔｒｓ ｃ ｅｉ ｔ ｒ ｔｏ ｎ ｄｉ ｏ ｙｅ ｆ ｃｏ ｅ ｒ ｔ ｏｎ． Ｔｏ ｅｕｃｄａｅ ｔ ｅ ｍ ｅ ｈ ｎｉｍ ｆｔ ｏ ｒ ｉ ａ ｌ ｉ ｔ ｈ ｃ ａ ｓ ｏ ｈｅ ｃ ｏ ｄ ｎ — ｔｏ ｅ ｕｌｔｏ ｉ ｎ ｒ ｇ ａｉ ｎ．ｔ ｓ ｐ ｐｅ ｒｉ ｓｏ ｈ ｏ ｉ ｈｉ ａ ｒｃａｒｅ ｕｔｔ ｅ ｃ —ｍｍ ｕ ｏｐ ｅ ｉ ｔｔｏ ｔ ｏ ｓｎ ｈ ｎｔ— ｎ ｒ ｃｐｉ ｉｎ ｍｅ ｈ ｄ ｕ ｉｇ ｔ ｅ ａ ｉＡＰ一 ｏ ｎ ｉ ｄ ｅ ． ａ 一 ｉ ｅ ａ — ａ ２ ｒａ ｔｂｏ ｉ ｓ ｐ ２一ｎｔｒ ｅ ｔｎ ｏｅｎｓｗｅ ｅ ｉｏｌｔｄ ｆｏ ｌｍｏ ｅ ｐ ｅ— ｄｐｏ ｙｅ ｃ ｌｓ，ｔ ｅ ｅ ｂ ｎ ｉ ｇ ｆ ｃｏ ｓｗｅ ｅ ｉ ｎ ｉ ｅ ＡＬＤＩＴＯＦ— Ｓ ａ ｄ ｉ ｇ ｐｒｔ ｉ ｒ ｓ ａｅ ｒ ｎ ｕｓ ｒ ａ ｉ ｃ ｔ ｅ ｌ ｈ ｓ ｉ ｄ ｎ ａ ｔ ｒ ｒ ｄｅ ｔｆ ｄ ｂｙ Ｍ ｉ — Ｍ ｎ
小鼠主动脉平滑肌细胞取材步骤
小鼠主动脉平滑肌细胞取材步骤嘿，朋友们！今天咱就来讲讲小鼠主动脉平滑肌细胞取材那些事儿。
你想想看，这小鼠主动脉平滑肌细胞就像是藏在小鼠身体里的小宝贝，咱得小心翼翼地把它们给找出来。
首先呢，你得准备好各种工具，这就好比战士上战场得有趁手的兵器呀！什么手术剪啦、镊子啦，都得准备齐全咯。
然后就是抓小鼠啦，这小鼠可机灵着呢，可得费点功夫抓住它。
抓住后把它固定好，可别让它乱跑乱动，不然咱这工作可没法开展呀。
接下来，就该动真格的啦！用手术剪剪开小鼠的胸腔，哎呀，这一步可得小心再小心，别伤着那些咱们要找的宝贝细胞呀。
就好像拆礼物一样，得轻轻地、慢慢地打开。
找到主动脉后，仔细地把周围的组织清理干净，这就像是给宝贝打扫房间一样，得弄得干干净净的。
然后呢，用镊子小心地把主动脉取出来，这时候你的手可得稳如泰山呀，千万别抖。
取出来后，把主动脉放在合适的溶液里，让它舒舒服服的。
这就好比给小宝贝找了个温暖的小窝。
再之后呢，就是要把平滑肌细胞从主动脉上分离出来啦。
这可是个精细活儿，就跟雕刻大师在雕琢一件艺术品似的，得全神贯注。
你说这是不是挺有意思的？就像一场小小的冒险，在小鼠的身体里寻
找那些神奇的细胞。
咱做这个可不能马虎，每一步都得认真对待。
要是不小心弄错了一步，那可能就前功尽弃啦！就像建房子，一块砖没放好可能整个房子就不稳咯。
总之呢，小鼠主动脉平滑肌细胞取材虽然有点麻烦，但只要咱认真、细心，就一定能把这些小宝贝给成功找出来！这可是为了咱们的实验、咱们的研究呀，可不能马虎！加油吧，朋友们！。
2010__%D1о%BF%C9%FA%B7%D6%D7%D3%C9%FA%CE%EF__%D1龋%D2%E5
脂肪细胞蛋白电泳及western blot 条件探索段程伟（西安文理学院, 生命科学系，陕西西安，710065）摘要脂肪细胞是能量储存细胞，也是活跃的内分泌细胞，而其中的脂肪细胞因子对机体的能量代谢和脂肪积累有显著地调节功能。
本文从脂肪细胞蛋白的提取，蛋白含量测定，电泳液及胶的制备，电泳条件的确定，电泳条带的分析及western blot等方面实验条件进行探索，论述了寻找起关键作用的脂肪细胞因子的主要环节，目的在于为今后脂肪细胞蛋白质组学的研究打下基础。
关键词脂肪细胞；蛋白电泳；western blot英文标题，摘要及关键词肥胖是一种常见病症，尤其城市人群表现尤为突出，并且都呈现为上升趋势，英国现有50%人口身体趋于肥胖，比10年前增加了一倍；我国肥胖症患者有2亿人左右，是10年前的1.5倍左右，在经济发达的城市儿童肥胖已超过10%。
肥胖不但影响体态与活动，并且会引发高脂血症、动脉硬化、冠心病、高血压、糖尿病、痛风、脂肪肝、肿瘤、内分泌失调、肺泡低换气综合症、胆囊炎及抗氧化、抗衰老能力低下。
因此，了解肥胖的发病机制，寻找引起肥胖的相关基因及蛋白，成为许多学者关心的问题。
脂肪细胞是能量储存细胞，也是活跃的内分泌细胞，而其中的脂肪细胞因子对机体的能量代谢和脂肪积累有显著地调节功能。
本文从肥胖及正常小鼠体内分离脂肪细胞，提取蛋白，找到在机体代谢平衡中起，并通过分析其作用等试验的条件探索，来研究脂肪细胞蛋白质组学的可行性，为今后研究解释能量代谢的调节作用与肥胖的关系打下基础。
1动物脂肪组织蛋白质的提取1.1材料实验小鼠动物组织蛋白裂解缓冲液：Tris 50mM，NaCl 150mM，EDTA 0.5mM，DTT 1mM，1%Triton X-100，0.5%去氧胆酸钠，0.1% SDS 。
PMSF/异丙醇储备液100mM （174mg/10ml）于-20℃储存。
1.2操作步骤1. 颈椎脱臼处死小鼠，75%酒精擦拭皮肤，剪开腹部，剪切小肠粘膜，称取0.6g，置于含预冷0.9%NaCl（6mL）的且已经被标记的平皿中。
组胚实验报告总结(3篇)
第1篇一、实验背景组胚学是研究生物体结构和发育规律的一门学科，通过观察和研究胚胎的发育过程，可以了解生物体的生长发育规律和细胞分化的机制。
本实验旨在通过观察小鼠胚胎的发育过程，了解胚胎的早期发育规律，掌握组胚学的基本实验操作。
二、实验目的1. 观察小鼠胚胎的发育过程，了解胚胎的早期发育规律。
2. 掌握组胚学的基本实验操作，包括取材、固定、染色、切片、观察等。
3. 熟悉显微镜的使用，提高观察和分析能力。
三、实验原理1. 胚胎发育过程中，细胞不断分裂、分化，形成各种组织和器官。
2. 通过观察胚胎的发育过程，可以了解细胞分化和组织形成的基本规律。
3. 实验过程中，通过取材、固定、染色、切片等操作，可以观察到胚胎的各个发育阶段。
四、实验材料1. 实验动物：小鼠2. 实验试剂：固定液、染色液、切片液等3. 实验仪器：显微镜、解剖镜、手术刀、镊子、剪刀等五、实验步骤1. 取材：在无菌条件下，取小鼠胚胎，放入固定液中固定。
2. 染色：将固定好的胚胎进行染色，常用的染色方法有HE染色、苏木精-伊红染色等。
3. 切片：将染色后的胚胎进行切片，切片厚度一般为5-10微米。
4. 观察：在显微镜下观察胚胎的各个发育阶段，包括卵裂期、囊胚期、原肠胚期等。
六、实验结果与分析1. 卵裂期：在卵裂期，胚胎细胞不断分裂，形成多个细胞。
此时，胚胎细胞形态相似，大小基本一致。
2. 囊胚期：在囊胚期，胚胎细胞开始分化，形成内细胞团和外细胞团。
内细胞团将发育成胚胎本身，外细胞团将发育成滋养层。
3. 原肠胚期：在原肠胚期，胚胎细胞进一步分化，形成三个胚层：外胚层、中胚层和内胚层。
这三个胚层将发育成各种组织和器官。
七、实验讨论1. 通过本实验，我们了解了小鼠胚胎的早期发育规律，掌握了组胚学的基本实验操作。
2. 在实验过程中，我们遇到了一些问题，如取材困难、染色不均匀等。
这些问题提示我们在实验过程中要细心操作，确保实验结果的准确性。
3. 实验结果表明，胚胎发育过程中，细胞不断分裂、分化，形成各种组织和器官。
实验报告肝脂肪变性
实验报告肝脂肪变性
实验目的：观察饮食中脂肪过量对小鼠肝脏的影响，探究肝脂肪变性的发生机制。
实验方法：
1. 实验组选用6只雄性C57BL6小鼠，将其放置于高脂饮食环境中（脂肪含量为60%）。
3. 将两组小鼠在不同环境下饲养4周，期间每周测量其体重和食物摄入量。
4. 实验结束后，取出小鼠的肝脏组织，用HE染色法对其进行病理学分析。
实验结果：
1. 实验组的小鼠肝脏组织显示出脂肪细胞的增生和肝细胞内脂肪的过度积累，表现为肝脏发生了明显的肝脂肪变性。
2. 对照组的小鼠肝脏组织则没有出现肝脂肪变性的现象。
3. 实验组小鼠的体重和食物摄入量较对照组小鼠增加。
实验结论：饮食中脂肪过量会导致小鼠肝脏发生肝脂肪变性，其发生机制可能与脂肪的过度积累和肝细胞代谢紊乱有关。
这一结论对于预防和治疗肝脏疾病具有一定的指导意义。
脂肪干细胞的分离提取、鉴定及与脂肪颗粒的混合移植研究
脂肪干细胞的分离提取、鉴定及与脂肪颗粒的混合移植研究目的分離提取脂肪干细胞（ADSCs），对其进行成脂、成骨的鉴定，并与脂肪颗粒混合移植，观察移植后的脂肪组织的存活情况。
方法取大鼠腹股沟脂肪，磷酸盐缓冲液清洗，0.1%Ⅰ型胶原酶37℃消化1 h，离心，取沉淀，用含10%血清的DMEM培养基进行培养、传代，取第3代ADSCs用于成脂、成骨鉴定；另取第3代ADSCs用于移植，分为两组：ADSCs（密度为5×107/mL）0.9 mL+脂肪颗粒0.6 mL组、脂肪颗粒1.5 mL组，分别移植于大鼠背部两侧，共移植24只大鼠，分别于2周、1、3个月时脱颈椎处死8只大鼠，再取出背部脂肪组织。
结果大鼠ADSCs成脂、成骨诱导后，经油红O、茜素红染色呈阳性，移植2周、1个月时，两组取出的脂肪组织的体积变化不大；但移植3个月后，取背部脂肪组织，称重：脂肪颗粒1.5 mL组平均重量为（0.4551±0.0024）g，而ADSCs （密度为5×107/mL）0.9 mL+脂肪颗粒0.6 mL组的平均重量为（0.7798±0.0033）g，两组脂肪组织的重量差异有统计学意义（P < 0.05）。
结论原代分离、培养的ADSCs生长状况良好，具有向成脂、成骨分化的能力，与脂肪颗粒混合移植后组织的存活率高，并能够改善脂肪颗粒单独移植时的液化吸收情况。
[Abstract] Objective To isolate and culture the rat adipose-derived stem cells （ADSCs）and to identificate its multipotent differentiation ability and to observe the survival of transplantation of ADSCs with adipose compared with adipose in the back of the rats. Methods Adipose tissue were obtained from inguinal region and washed in PBS，then digested with 0.1% collagenase type Ⅰat 37℃for 1 h followed by centrifugation and ADSCs pellet was resuspended in DMEM with 10% fetal bovine serum （FBS）and seeded in flasks，cells at passages 3 were used for adipogenic differentiation and osteogenic differentiation，both sides of twenty-four rats were received subcutaneously 5×107/mL ADSCs resuspended in 0.9 mL of DMEM medium+0.6 mL of adipose and 1.5 mL of adipose，took out the adipose tissue of eight rats after two weeks，one month and three months respectively. Results ADSCs stained positively for oil red-O and alizarin red，two weeks and one month later，the weight of adipose had no difference with each other，however，after three months，the average weight of 1.5 mL of adipose group and the 5×107/mL ADSCs resuspended in 0.9 mL of DMEM medium+0.6 mL of adipose group were （0.4551±0.0024）g and （0.7798±0.0033）g respectively，thus，there were significant differences between the two groups （P < 0.05）. Conclusion ADSCs is in good condition and has adipogenic and osteogenic differentiation ability，ADSCs with adipose can improve the survival and the liquefied of the adipose after transplantation when compared with adipose alone.[Key words] Adipose-derived stem cells；Adipogenic induction；Osteogenic induction；Transplantation 脂肪组织的获得快捷、方便，2001年，Zuk等[1]从脂肪组织中分离到了一种具有多向分化能力的干细胞，即脂肪来源干细胞（ADSCs），有分化为脂肪、成骨、软骨、成肌等能力[2-3]，能够在体外稳定增殖，衰亡率低，少量的组织就可获得大量干细胞，适合大规模培养，是近年来的研究热点之一。
实验报告 脂类的化学——苏丹三染色
姓名 xxxx 班级 xxxxxx 同组人 xxxxxxxx 科目细胞生物学实验题目脂类的化学——苏丹Ш染色组别第2组一．实验目的1.熟悉脂类的显示技术。
2.了解脂类在细胞中的分布。
二．实验原理脂肪是体内储存能量和供给能量的重要物质，根据其性质可以分为中性脂肪、脂肪酸、胆固醇、鞘磷脂等。
很多细胞都含有脂肪，游离状态的脂肪呈小滴状悬浮于细胞质内，比较显著的如肝细胞。
脂肪小滴可以集合，将细胞质及细胞核挤到一旁，如脂肪细胞。
脂肪不溶于水，易溶于浓乙醇、苯、氯仿和乙醚等，因此制作脂类标本一般不用石蜡切片，而用冰冻切片或者铺片法以保存脂类，固定多用甲醛类固定液。
其染色方法有脂溶性染料显示法、化学显示法和特异染色法等。
脂肪染料一般选用有机溶剂做溶剂，丙酮和乙醇对染料和脂肪都是很好的溶剂，这样可以染色大的脂肪积累块，但是小的脂肪滴会溶解。
60%异丙醇当溶剂，可以减轻脂类的溶解。
丙二醇或磷酸三乙酯不会溶解脂类物质，但是能溶解染料，是比较理想的溶剂。
用这些溶剂配的染料溶液要过滤以去掉沉淀，防止蒸发，因蒸发会引起染料在材料中积累。
常用相同溶剂洗掉多余的染料，然后再用水洗，可以防止多余的染料在材料中沉淀。
用锇酸固定的脂肪不溶于无水乙醇、二甲苯等类似的液体，可用于石蜡切片，但是脂肪的标本一般不用石蜡切片或火棉胶包埋，而用如下方法：冰冻切片，明胶包埋冰冻切片，铺片法。
本实验中使用的脂溶性染料显示法利用苏丹染料中的苏丹III、苏丹IV或者苏丹黑等溶于脂类，而使脂类显色的原理显示脂类，使用时，要注意选择溶剂，要求既要溶解苏丹染料，又不溶掉脂肪。
苏丹染料是偶氮染料，它对脂类的显示是一种简单的物理变化。
苏丹染料是一种脂溶性染料，易溶于乙醇但更易溶于脂肪。
当它与含有脂类的标本接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于该含脂结构中使其显色。
三．实验仪器及试剂1.仪器解剖盘，解剖剪，镊子，盖玻片，载玻片，显微镜，胶头滴管2.试剂苏丹Ш染液，甲醛钙溶液，70%乙醇溶液，蒸馏水3.材料小白鼠一只四．实验步骤1.断头法处死小鼠，置于解剖盘中。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
小鼠脂肪细胞取材流程：
Protocol:
i. Sacrifice each mouse (C57BL/6J, 8–10 weeks old) by carbon dioxide asphyxiation.
Wipe with 70% ethanol and open abdominal area. Using sterilized forceps and
scissors, dissect perigonadal (epididymal in male and parametrial in female) and/or
subcutaneous inguinal fat pads and place into 6 cm petri dishes containing HBSS. We
advise proceeding immediately to digestion of fat tissue on the day of harvest.
Chilling or freezing the tissue for storage purposes makes subsequent collagenase
digestion more difficult.
ii. Add an equal volume of collagenase solution (to weight of fat pads) into
autoclaved scintillation vials and warm to 37°C.
iii. Rinse fat pads in HBSS, dry with Kimwipes and place into collagenase solution.
iv. Finely mince the tissue with a sterilized scissor.
v. Shake vials (~100 rpm) in a 37°C water bath shaker for 30 to 60 min. Check digests
every 10 min and stop reaction when complete. The digestion efficiency varies with
speed and type of shakers and batch of collagenase used. You should see a white fat
layer separated and, when the vials settle, it floats on top of the solution.
vi. Transfer and filter the digested solution through a 250 μm nylon filter. Then filter
through a 100 μm cell strainer and transfer the filtrate into 15 ml or 50 ml centrifuge
tubes. Centrifuge at 400g for 5 min at room temperature.
vii. Carefully aspirate the floating layer containing mature adipocytes and aqueous
supernatants, leaving the pellet. This pellet is the stromal vascular fraction (SVF).
viii. Resuspend the pellet with 10 ml HBSS. Centrifuge again at 400g for 5 min.
ix. Repeat the washing step three times.
x. If the pellet appears red, rupture the red blood cells by adding 10 ml erythrocyte
lysis buffer. Pipet up and down to resuspend the pellet. The solution should become
red. Leave for 5 min at room temperature and centrifuge for 5 min. Aspirate the
supernatant. （Optional）
xi. Resuspend the pellet in 10 ml Expansion DMEM media and plate onto Petri
dishes.
xii. Incubate at 37°C in a 5% CO2 incubator for 1 hour. The majority of
hematopoietic lineage cells such as monocytes/macrophages will attach to the Petri
dish at this stage.
xiii. Transfer non-adherent cells (containing ADS cell populations) to 10 cm regular
culture dishes and incubate at 37°C in a 5% CO2 incubator. We typically culture cells
isolated from 2 – 3 g fat in one 10 cm dish.
xiv. Change the media after 24 h. After that, feed cells every 3 d until cells reach
around 80% confluency. mADS cells should exhibit a large and flat fibroblastic
morphology.
Related reagents are being ordered:
1. Type I collagenase (Worthington Biochemical, cat. no. LS004196)
2. Falcon 100 μm cell strainers (BD, cat. no. 352360)
3. Adenosine (Sigma, cat. no. A9251)