胶乳颗粒增强比浊法浅谈
乳胶增强免疫比浊法与电化学发光法检测降钙素原的对比分析

methods was 9 5 % 、96. 2 5 % 、95%. The chi - square test showed that
theLeabharlann difference was not statistically
significant (
Conclusion Latex enhanced immunoturbidimetric assay and electrochemiluminescence assay both could effectively detect pro
■ 1410 ■
吉林医学2018年 8 月第39卷 第 8 期
•临床研究•
乳胶增强免疫比浊法与电化学发光法检测降钙素原的对比 分析
王 欢 1 徐令清2 朱振杰3 (广州医科大学附属第六医院/ 清远市人民医院检验科,广 东 清 远 511518)
[ 摘 要 ] 目 的 :探讨乳胶增强免疫比浊法与电化学发光法检测降钙素原结果的可比性。方法:依照美国临床实
of Guangzhou Medical University /Qingyuan People's Hospital ,Qingyuan 511518,C h i a )
Abstract:Objective To investigate
the comparability of
the
results of
验室标准化协会指南比对标准文件EP9 - A2 , 以电化学发光- 双抗体夹心法为比较方法,以乳胶增强免疫比浊法为试
验 方 法 ,采用患者血清样本检测降钙素原含量,通过检测数据比对分析,对两种检测方法之间的偏倚进行评估。结 果 :
两种方法检测降钙素原(PCT)在 线 性 范 围 内 的 结 果 ,直 线 回 归 方 程 为 F = 0. 037 +0.992 15X ,相 关 性 良 好 , r =0.990 92,在 选 定 PC T 医学决定水平0. 5 ng/ml、2 ng/ml、10 ng/m l以比较方法为参考方法计算两种方法检测值的阳性符合率 为 9 5 % 、96. 2 5 % 、95咙 ,经;x2 检验表明差异无统计学意义(P > 0.05)。结论:胶乳增强免疫比浊法与电化学发光法均
胶乳增强免疫比浊法定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价及临床应用

胶乳增强免疫比浊法定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价及临床应用孙丽;牛国平【摘要】Objective To evaluate latex-enhanced immunoturbidimetric assay ( LEIA ) for the detection of plasma neutrophil gelatinase-associated lipocalin ( NGAL) and its clinical application .Methods LEIA was used to determine the concentration of plasma NGAL according to the Clinical and Laboratory Standards Institute ( CLSI ) standardization evaluation protocal.The imprecision, recovery rate, linear range, anti-interference and stability were assessed.The plasma NGAL levels of 86 patients with type 2 diabetes mellitus ( T2DM), including 41 patients with diabetic nephropathy( DN), and 40 healthy subjects ( healthy control group ) were determined.Results The within-run coefficients of variation(CV) for low and high levels of NGAL were 3.76%and 1.79%, respectively.The inter-day CV were 6.62%and 3.45%, respectively.The average recovery rate was 97.3%-104.6%.The linear range was from 0 to 5 000μg/L, and the deviation was <8%.Comparing with similar foreign kit ( particle-enhanced immunoturbidimetric assay), the correlation was high (R2 =0.996 6).The system biases of 200 μg/L and 700 μg/L were 3.66 μg/L and 11.79 μg/L, respectively.The results met the requirements of manufacturers .There was no significant interference on the determination of plasma NGAL with total bilirubin≤600 μmol/L, hemoglobin≤10 g/L, vitamin C≤0.6 g/L and triglyceride≤15 mmol/L.The reagent could be stable for 35 d in theinstrument under the condition of 2-8 ℃.The plasma levels of NGAL in healthy c ontrol group were all in manufacturers′reference range .The level of plasma NGAL had been gradually increasing in healthy control group , T2DM group and DN group with statistical significance( P<0.01).The plasma NGAL were positively correlated with serum cystatinC (Cys C) and creatinine (Cr) (correlation coefficients were 0.58 and 0.43, P<0.01).Conclusions The LEIA for plasma NGAL determination has high sensitivity and precision , which is fast and easy to operate , and can be used directly on the automatic biochemical analyzer .The results are accurate and reliable .It is suitable for the clinical application for mass determination .%目的:对胶乳增强免疫比浊法(LEIA)定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)进行方法学评价并探讨其初步的临床应用。
浅谈免疫比浊法技术优势

结果一致, 有很好的相关性和重复性, 胶乳增强免疫
的灵敏度高出两倍。但另一方面, 免疫透射比浊法 。
透射比浊法检测的灵敏度高、 线性范围广、 结果稳 定、 操作简单、 抗干扰能力强、 速度快、 适合各种有全 自动生化分析仪的医院, 完全符合实验室常规检测 的要求。因此, 免疫透射比浊法比免疫散射比浊法 在临床实验室的应用中, 更具有广泛的应用价值与 圆愿苑员
检验领域普遍使用。人们传统地认为散射比浊法要 比透射比浊法更灵敏, 准确度高, 包括许多教科书也 测定法, 即免疫透射比浊测定和免疫散射比浊
[ 员]
这样述说。圆园 世纪 苑园 年代起出现了微量免疫沉淀 此免疫比浊测定逐渐被广泛应用于临床体液中蛋白
, 自
质含量检测的领域。近几年来, 免疫透射比浊测定 技术被广泛使用在全自动生化分析仪上, 实现高速、 灵敏和自动化。 一束光线通过有悬浮质点的胶体溶液时, 会产 生丁铎尔现象, 这是胶体粒子散射光的结果。粒子 被光照射后而发光, 同时受到散射和吸收两个因素 万方数据 圆愿苑园
皂藻贼澡燥凿 早燥燥凿 葬灶凿 遭葬凿 责燥蚤灶贼泽援 酝藻贼澡燥凿泽: 粤灶凿 糟燥皂责葬则藻 遭燥贼澡 贼澡则燥怎早澡 贼澡藻 藻曾葬皂蚤灶葬贼蚤燥灶 蚤皂皂怎灶蚤贼赠 贼则葬灶泽皂蚤泽泽蚤燥灶 贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟 皂藻贼澡燥凿 葬灶凿 贼澡藻
摇 摇 比浊法也称浊度法, 属于散射光谱分析, 是在比 许多方面和比色法相似, 但本质上又有区别
糟造怎泽蚤燥灶泽:蚤皂皂怎灶燥贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟 皂藻贼澡燥凿 蚤皂皂怎灶藻 灶藻责澡藻造燥皂藻贼则赠 澡葬泽 皂葬灶赠 葬凿增葬灶贼葬早藻泽援 月怎贼 贼澡藻 贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟 蚤皂皂怎灶燥葬泽泽葬赠 皂藻贼澡燥凿 澡葬泽 葬 灶蚤择怎藻 遭藻糟燥皂藻泽 澡藻贼藻则燥早藻灶藻燥怎泽 则藻葬糟贼蚤燥灶 蚤泽 澡燥皂燥早藻灶藻燥怎泽 则藻葬糟贼蚤燥灶,早则藻葬贼造赠 蚤皂责则燥增藻泽 贼澡藻 泽藻灶泽蚤贼蚤增蚤贼赠,憎澡蚤糟澡 皂葬噪藻泽 贼澡藻 贼藻糟澡灶蚤择怎藻 澡葬泽 遭藻贼贼藻则 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 葬凿增葬灶贼葬早藻援 【 运藻赠 憎燥则凿泽】 栽澡藻 蚤皂皂怎灶蚤贼赠 贼则葬灶泽皂蚤泽泽蚤增蚤贼赠 贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟;栽澡藻 蚤皂皂怎灶蚤贼赠 泽糟葬贼贼藻则蚤灶早 贼怎则遭蚤凿蚤皂藻贼则蚤糟; 杂怎责藻则蚤燥则蚤贼赠 造燥憎藻则 泽藻灶泽蚤贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 蚤泽泽怎藻,贼燥 凿藻增藻造燥责 造葬贼藻曾 藻灶澡葬灶糟藻凿 贼藻糟澡灶燥造燥早赠,葬灶贼蚤早藻灶 葬灶贼蚤遭燥凿赠 遭蚤灶凿蚤灶早 糟燥葬糟藻则增葬贼蚤燥灶 则藻葬糟贼蚤燥灶( 圆 ) ,贼澡蚤泽 贼藻糟澡鄄
胶乳增强免疫比浊法测定血清脂蛋白(a)试剂的临床应用评价

胶乳增强免疫比浊法测定血清脂蛋白(a)试剂的临床应用评价摘要】目的评价胶乳增强免疫比浊法脂蛋白(a)试剂的性能。
方法按NCCLS有关评价方案对试剂的精密度、线性范围、准确度(回收率)、比对实验三项主要性能指标进行系统评估。
结果该试剂的低、中、高值样本天内精密度(用CV天内值表示)分别为3.55、2.13%和1.36%,天间精密度(用CV天间值表示)分别为5.29、4.33%和2.86%;试剂在31~1284mg/L范围内线性良好;与进口试剂相比,相关系数r2=0.9905,相关方程为Y=0.9375X+10.23,测定结果呈显著相关(P<0.05)。
结论该试剂完全符合临床应用要求,建议推广使用。
【关键词】脂蛋白(a)临床应用评价【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)09-0376-01研究表明,脂蛋白(a)是公认的致动脉粥样硬化的独立危险因素,其发病机制还有待深入研究[1]。
而根据刘怀平等[2]报导,冠心病、急性心肌梗死、脑梗死、高血压、糖尿病肾病、急性感染、肝硬化、肾衰竭、原发性肾病综等患者血清Lp (a)均明显高于正常人血清水平。
因而,Lp(a)的测定具有广泛的临床意义。
目前最为常用测定Lp(a)的方法为胶乳增强免疫比浊法,本文结合国内应用较广的浙江伊利康公司生产的Lp(a)测定试剂盒进行了主要的指标评价和探讨。
现将结果报告如下:1 材料与方法1.1 样本我院住院和门诊病人当天空腹血清标本。
1.2 试剂和仪器 Lp(a)测定试剂盒由浙江伊利康公司生产,批号:111209;比对试剂为英国朗道公司生产,仪器为日立7080全自动生化分析仪。
1.3 方法均按试剂盒生产厂商提供测定参数、测定方法进行。
2 实验结果2.1 精密度按NCCLS[3] 评价方案,取低、中、高三个不同浓度的样本,连续测20次,再每天测2次,共测20天,结果见表1。
表1 天内和天间精密度测定结果(单位:mg/L ,n=20)2.2 回收试验取一份新鲜混合人血清,测定Lp(a)的浓度为265mg/L,将其分成6份,每管0.9m1,分别加入浓度为136 mg/L、489 mg/L、834mg/L的高、中、低血清0.1ml,混合后Lp(a)浓度分别为252 mg/L、287mg/L、322mg/L共3个浓度的样品,共测定5次,计算回收率分别为102.7%、101.5%、99.2%,平均为101.1%。
胶乳增强免疫比浊法尿微量白蛋白双试剂盒的研究及性能分析

胶乳增强免疫比浊法尿微量白蛋白双试剂盒的研究及性能分析曲怡蓉;王学亮;韩玉环;王华丽【摘要】目的:利用胶乳增强免疫比浊法研究测定尿微量白蛋白的双试剂,并进行性能评价.方法:选用不同批次产品,分别在OLYMPUS AU2700、罗氏C501、迈瑞BS-800生化分析仪上设置项目参数并进行检测校准;方法学评价包括准确度、分析灵敏度、精密度、线性范围等性能指标.结果:该试剂盒检测准确度符合要求.用试剂盒测试15.5mg/L尿微量白蛋白时,灵敏度变化均大于0.010,符合行业标准.低值样本S低和高值样本S高批内精密度结果CV≤4.0%,批间精密度≤10.0%,符合行业标准.线性范围(0.3~200.0mg/L)符合行业标准.结论:新研究的双试剂盒在一般全自动生化分析仪上性能能够满足临床尿微量白蛋白检测.【期刊名称】《中国医疗器械信息》【年(卷),期】2018(024)023【总页数】3页(P29-30,127)【关键词】胶乳增强免疫比浊法;尿微量白蛋白;性能;评价【作者】曲怡蓉;王学亮;韩玉环;王华丽【作者单位】山东药品食品职业学院药品研发中心山东威海 264210;山东药品食品职业学院药品研发中心山东威海 264210;山东药品食品职业学院药品研发中心山东威海 264210;山东药品食品职业学院药品研发中心山东威海 264210【正文语种】中文【中图分类】R197.39糖尿病是以高血糖为特征的代谢性疾病,随着糖尿病患者的病情加重,糖尿病肾病患者的发病率也越来越高,大约有30%的糖尿病患者患有糖尿病肾病,患者的健康受到了极大的危害[1]。
测定尿微量白蛋白是一灵敏、简便、快速的检查方法,对早期肾损害的诊断远远优于常规定性或半定量试验,依据诊断结果给予特定人群相应的早期治疗,避免或减少了以后进行的透析和一些昂贵的末期治疗,因此在临床检验中广泛应用[2]。
目前,尿微量白蛋白测定方法主要采用胶体金法、免疫比浊法、化学发光法、酶联免疫法、胶乳增强免疫比浊法[3]。
胶乳增强免疫比浊法与高压液相色谱法测定糖化血红蛋白的方法学比较

( P > 0 . 0 5 ) : 两 种 方 法 的批 内变 异 系数 ( C V) 均< 2 %, 批间 C V均 < 4 %; r = 0 . 9 8 2 , 回归方程 : y = 0 . 1 3 3 + 0 . 9 7 9 x 。结论 胶 乳 增 强 免
省 渭 南 市 中心 医院 门诊 和住 院 的 患 者 以及 健 康 体 检 者 的 9 0份 临床 血 液样 本 , 通 过 糖 尿 病 医 学诊 疗标 准 , 将 待 检 人 员分 为 : 糖 尿 病 患者 组 ( 4 5 例) 和 非糖 尿 病 患者 组 ( 4 5例 ) , 同时 采 用 H P L C法 和胶 乳增 强免 疫 比浊 法 测 定 H b A l c 。对 两 种 方 法对 两组
G AO Ho n g — l i a n g , Z H AN G Qi n g — l u , L I N i n g ( D e p a r t me n t o f L a b o r a t o r y , We i n a n C e n t r a l H o s p i t a l , We i n a n 7 1 4 0 0 0 , C h i n a ) AB S T RAC T:Ob j e c t i v e T o ma k e t h e me t h o d o l o g y c o m p a r i s o n b e t w e e n l a t e x — e n h a n c e d i m mu n o t u r b i d i me t r y a n d h i g h
胶乳增强透射免疫比浊法与电化学发光免疫分析法检测癌胚抗原结果比对

Abstract:ObjectiveToconductthecomparativeanalysisbetweenlatexenhancedimmunoturbidimetryand electrochemiluminescenceimmunoassay in thedetermination ofcarcinoembryoricantigen.Methods204 random sampleswereselectedforthestudy.Theconcentrationofcarcinoembryonicantigeninserum was detectedbybothlatexenhancedturbidimetryandelectrochemiluminescenceimmunoassay.Thedifferences andcorrelation between them wereanalyzed.ResultsThesetwo methodswerehighly consistent.The correlationcoefficientofSpearmanwas0.998.Conclusion Thecorrelationbetweenthelatexenhanced turbidimetrysystem andelectrochemiluminescenceimmunoassaysystem issignificant,suggestingthatthelatex enhancedturbidimetricmethodisworthytopopularizinginclinicalpractice.However,itissuggestedthatthe referencescopeofthelaboratoryshouldbeestablishedinprimaryhospitalsinvariousregions. Keywords:Latexenhancedimmunoturbidimetry; Carcinoembryonicantigen; Methodologycomparison;
胶乳增强免疫比浊法试剂测定β2-微球蛋白的临床使用评价

临床 常 用 RI 测 定 p A z微 球 蛋 白 ( zMG) p— 含 量 , I 具有 准 确灵 敏 , RA 特异 性高 的 特点 , 该法 需 但 时长 , 作 繁琐 , 操 有放 射 污 染 的 缺 点 。本 文 用 胶 乳
增 强免 疫 比浊法 测定 p— zMG, 与 R A 进行 对 比。 并 I
5 0、8 0 0 0 / 进 行 检 测 , 算 检 测值 与 . . 、1 、2 mg L, 计
,
为 0 2 mg L。 ~ 0 /
() 4 干扰试 验
加 入胆 红 素在 4 ~3 4 mo/ O 8 # lL
浓 度 时 J一 3 MG浓 度 与原 血 清 比较 分 别 为 9 . 、 68
本 法 与 R A 对 比结 果见 图 。 I
作 程序 、 量 控制 中的组 合 , 为检 测系 统 。 质 称 ] 本 文将 岛津 C 8 0 L 0 0全 自动 生 化 仪 、2MG胶 7 - 乳增 强免疫 比浊 法 试 剂 , 套 标 准 品 , 成 一 个 新 配 组 的检测 B一 MG 的 检 测 系 统 。为 了 评 价 该 系 统 对 B- MG 的测 定效 果 , 了重 复性试 验 、 做 准确 度试 验 、 干扰 试 验 、 以及 与 R A 对 比试 验 。 I 胶 乳增 强 免疫 比浊 法 测定 原 理 是 B一 MG 与包 被在 胶 乳颗 粒 上 的 抗 人 B- MG 抗 体 产 生 浊度 , 其 浊度 与 B一 。MG 浓 度 成 正 比。该 法 在 C 8 0 L 0 0上 显
材 料 与 方 法
1 材 料
() 4 干扰 试 验 干 扰 因素 主 要 来 自于 溶 血 、 黄
疸 和脂 浊 这 三 种 。本 文 采 用 “ 对 差 异 ” 验[ 。 配 试 3 ]
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胶乳颗粒增强比浊法浅谈
目前,体液标志蛋白的检测方法主要采用免疫学方法,以酶联免疫吸附测定(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssay,ELISA)、放射免疫测定(Radioimmunoassay,RIA)和胶体金层析法(俗称“金标”)这几种方法为主。
ELISA方法虽然在临床上使用了近二十年,但它依然存在一些致命缺点,定量准确性差、操作时间长、自动化程度低,一般只能用于定性检测。
RIA灵敏度高,但不稳定,重复性比ELISA差,而且存在放射性污染的危险。
金标方法虽然稳定性较好,但灵敏度较低,只能定性,不能定量。
特别是重复性差这一缺点限制了这些检测技术在临床上的应用,尤其不适合用于需要通过准确定量来帮助对疾病进行诊断的体液标志蛋白的定量检测。
因此,寻找更加稳定、准确的血浆蛋白定量检测方法一直是国际上近十年来的研究热点。
胶乳颗粒增强比浊法(particle-enhanced turbidimetric immunoassay, PETIA)是近年来出现的一种较为稳定、准确的体液蛋白均相免疫比浊检测方法。
PETIA法大体分为两种。
一种是散射比浊检测法;另一种是透射比浊检测法。
这两种方法的基本原理非常相似,都是在高分子胶乳微球的表面交联单克隆抗体,当交联有抗体的微球与抗原结合后,在短时间内会迅速聚集在一起,改变了反应液的散光性能或透光性能。
而且,反应液散光性能或透光性能(即吸光度)的改变与被测抗原的浓度有较强的相关性,在一定范围内可以反映被测抗原的浓度。
PETIA检测方法是在均相反应体系中进行抗原、抗体反应及结果的测定。
抗原、抗体反应后,直接测定反应液的吸光度值,省却了ELISA法反复孵育和洗板等烦琐操作步骤,几分钟就能获得结果,省时省力。
此外,纳米免疫比浊法操作步骤的简化也相应地避免了许多人为操作因素和试剂、环境等外界因素的干扰,稳定性和重复性都较好,能较真实地反映被测物质的含量。
免疫比浊法的灵敏度虽然比ELISA法差一些,但足于检测到健康人血浆中许多标志蛋白的下限值,可完全满足临床检测要求。
目前,PETIA检测试剂所采用的乳胶颗粒多为惰性微球、羧基化微球及氨基化微球。
表面修饰的胶乳粒子与抗体的结合是通过其表面的羧基或氨基与抗体的氨基端共价结合,在微球与抗体之间有一个桥联化学臂,降低了位阻效应,不仅提高了抗体的结合率,而且还为抗体提供合适的三维空间立体结构,有效地保护了抗体与抗原结合的活性区域。
国外已有多家公司提供纳米级表面修饰的微球粒子原料,并广泛应用于PETIA。
这些厂家提供的粒子直径从20nm-4μm,检测的灵敏度得到了极大的改善,检测灵敏度最高可达到1.0ng/ml。
可以作为多克隆抗体和单克隆抗体的载体。
纳米级粒子的推出解决了对单克隆抗体结合的能力不强,临床检测的线性范围窄,干扰因素多,实验稳定性差等问题,大大促进了免疫比浊法在临床上的广泛应用。
采用单克隆抗体交联高分子纳米微球免疫比浊定量检测人体血清蛋白,归纳起来有以下几个方面的突出优点:(1)操作简单,可在几分钟内快速、准确地检测血清蛋白含量,真实反映病情进展和评估治疗效果,对于疾病的早期诊断和治疗具有重要的临床意义;(2)不易受人为操作和外界因素干扰,检测稳定性和重复性都很好;(3)能利用普通的生化分析仪进行检测,容易实现自动化,可在各级基层医疗机构普及和应用。