云南兰科植物菌根内生真菌种类研究2006
植物内生菌的研究进展
植物内生菌的研究进展植物内生菌是一种与植物共生的微生物，它们在植物的内部生活并与其共同生长。
近年来，对植物内生菌的研究逐渐增多，科学家们发现，这些微生物与植物之间存在着复杂的相互作用。
本文将介绍植物内生菌的研究进展，探讨其对植物生长和环境适应的影响，以及对人类农业的潜在价值。
植物内生菌是一类普遍存在于植物体内的微生物，包括细菌、真菌和放线菌等。
与植物共生的菌根菌、内生细菌和内生真菌是常见的植物内生菌。
这些微生物与植物形成共生关系，通过与植物根系接触，提供养分、促进生长、增加抗逆性和减少害虫的侵害。
植物也为内生菌提供生长和繁殖的条件。
植物内生菌与植物之间的共生关系是一种相互促进的共生关系，对植物的生长发育和环境适应具有重要意义。
近年来，许多研究表明，植物内生菌对植物的生长和发育具有显著的促进作用。
植物内生菌可以帮助植物吸收土壤中的养分。
据研究发现，菌根菌和内生细菌通过产生一些特定的酶，可以分解土壤中的有机物质，提供植物所需的养分。
内生菌还可以合成一些植物生长所需的激素，例如赤霉素和生长素，从而促进植物的生长和发育。
植物内生菌还可以帮助植物抵抗外界环境的逆境因素，如干旱、盐碱和病虫害的侵害。
内生菌通过激活植物的防御系统，增强植物的抗逆性，从而使其更好地适应恶劣的环境条件。
虽然植物内生菌对植物生长和环境适应具有重要的影响，但其研究仍处于起步阶段，仍有许多问题有待解决。
目前对植物内生菌的种类和功能了解不足，有待深入研究。
植物内生菌与植物之间的相互作用机制尚不清楚，需要进一步明确。
植物内生菌在农业生产中的应用价值尚未得到充分发挥，需要加强相关技术研发和产业化推广。
植物内生菌是一类对植物生长和环境适应具有重要影响的微生物，对植物的促进作用和对农业发展的潜在价值引起了科学家们的广泛关注。
随着对植物内生菌研究的不断深入，相信它将为人类农业生产和生态环境的保护带来新的机遇和挑战。
希望未来能够加强植物内生菌的研究，揭示其在植物生长中的作用机制，加速其在农业生产中的应用，为实现绿色农业和可持续农业发展做出更大的贡献。
菌根研究进展简述
云南大学学报(自然科学版) 2001,23(植物学专辑):85～87CN53-1045/N ISSN0258-7971 Journal of Yunnan U niversityΞ菌根研究进展简述杨 雪1,张龄祺2,刘吉开1(1.中国科学院昆明植物研究所,云南昆明 650204;2.云南大学生物系,云南昆明 650091)摘要:对近期的菌根研究作一简要综述.菌根因其有重要的应用价值和生态学意义,一直是植物学家、生态学家和农学家关注的研究热点,近年来,特别是实验研究方法的应用,在这一领域的研究取得了大量进展.关键词:菌根;研究进展;简述中图分类号:Q934.11 菌根及其种类地球上大多数广泛分布的陆生植物在它们的根部与菌根菌建立起了联合的关系[1,2],多数这些共生现象都发生在由土壤传播的真菌—地衣共生菌(mycobiont)和陆生植物种类—植物有机体(phytobiont)之间.真菌与植物根部相结合形成的共生体为菌根(mycorrhiza),这样的真菌为菌根菌.菌根菌与植物的根相联系而存在,互为条件形成共生体.在生理上是相互协调的整体,并由于共同进化的作用在形态上也有所表现.根据菌根的形态解剖结构,可以把菌根分为外生菌根、内生菌根、内外生菌根及其它的菌根———混合菌根、假菌根和外围菌根等类型.外生菌根是真菌的菌丝体包围宿主植物尚未木栓化的营养根形成,其菌丝体不穿透细胞组织的内部,仅在胞壁间延伸、伸展而形成.在外形成菌套,在内形成类似于网格状的“哈蒂氏网”.内生菌根是真菌的菌丝体可以侵入根细胞内,宿主的根部一般无形态及颜色的变化,表面也无特殊的形态变化,难以用肉眼辨别.但内生菌根的四周有松散的菌丝网,菌丝体可以伸入细胞间及细胞内,并形成不同形状的吸器,称VA菌根或泡囊丛枝菌根,通过光学显微镜就能观察到.2 菌根基础研究的主要方向及其意义近年来,菌根的研究已经从简单的资源调查,包括感染菌根的高等植物、蕨类、真菌、外生菌根菌、AV(arbuscular-vesicular mycorrhiza)菌根菌种类的调查,发展到对它们的形态、解剖、生理机制的研究和生态学研究,并逐渐发展到应用分子生物学的技术对其基因片段进行分析、鉴定,并对其种群隔离机制进行研究[3].首先值得一提的是,菌根资源调查方面的研究仍然占了很大数量,说明无论是菌根菌还是与之共生的植物有机体还有待于继续调查.它们之间共同进化的关系还未被完全掌握,因此,很多植物学家、农学家和微生物学家对此仍然很感兴趣并进行着大量的研究[4,5].在物种鉴定方面,除了利用传统的鉴定方法外,有的研究小组已经开始采取提取真菌的DNA,用PCR进行扩增,建立不同菌根菌的基因库,来鉴定与植物根部共生的未知真菌[3,6,7].还利用荧光原位杂交技术和激光共聚焦显微镜对细菌群落结构及植物(如水青冈)外生菌根范围、种类及数量组成进行研究[8].而专门从事某一类群如蕨类进行研究的并不多.云南省分布的256种蕨类植物中,有AM丛枝菌根(Arbuscular Mycorrhizal)的种类比在被子植物中的比例要低.真蕨纲的进化趋势是:经常性菌根—兼有性菌根—非菌根植物[9].越进化的等级,就越没有菌根菌与之共生.这一结果具有启示性,它为蕨类植物的系统进化、物种鉴定的研究提供了重要依据,并对一些观赏美丽蕨类的移栽引种工作有重要价值.Ξ收稿日期:2001-07-15 作者简介:杨 雪(1969- ),女,云南人,助理研究员,主要从事高等真菌的化学研究.对菌根的生理学研究既有一般对氮、磷吸收[10]及其有关酶的研究[11],也有对金属阳离子吸收的研究[12].证明地衣共生菌的丛枝状菌丝能获得植物有机体中固有的近20%的碳,并转化为海藻糖加以利用;在植物的根皮层细胞中双向地运输碳、磷和其它生理需要的重要的分子.植物有机体依靠各种不同菌丝体吸收和运输植物根自己难以获得的土壤中的阳离子.因此,丛枝被认为是进化发展的关键结构[2].植物学家、生态学家和农学家都非常关注AM的研究,并通过有效控制其生长条件的实验,证实它对植物的生长、活力和再生的潜能均有戏剧性地影响.实验中,设置与在自然界中相似的条件,却往往得到不一致的或缺失的结果,预示着生长中的利益关系是AM共生体长期、稳定地联合的唯一因素,而非进化的结果.地衣共生菌和植物的进化路线特征也很重要,不同寄主植物和不同基因型真菌在不同环境中的结合有不同的机制.化石的发现和DNA序列的研究对AM起源的研究起到了重要作用.在Aglaophyton中发现的完好的菌丝体结构与现有的丛枝菌丝惊人地相似.孢子化石的横截面在形态上也很接近现存的G lo2 mus[13].测定现有的5～6个种的18S rDNA核苷酸序列并结合化石证据,利用分子钟计算出菌根起源的时间距今约为4亿年前.Pirozynski和Mal2 loch[14],Pirozynski[15]及Morton[16]一致同意此假说:基于化石和G.pyriforme理论,无轴根在陆地生活习性的辐射发展和被子植物的发展及传播, G lomus是最可能的祖先.一旦疏通并建立了最早的共生关系渠道,地衣共生菌就与植物有机体牢固地联合起来,二者也就共同走过了4亿a的进化历程.虽然二者各有其进化路线,但平行发展的功能发展了相似的进化取向.大量物种不均衡的形态引起的功能变化和菌根真菌联合、综合作用形成了新的物种,而非生态环境的影响.在高等植物产生之前,菌根菌就已经同古老的陆生植物形成了共生联合体,它们共同演化,保持着相互营共生生活的亲密关系,共同发展并一直沿留下来.3 菌根应用研究进展根内总菌丝的总侵染率并不能完全反映AM 真菌对植物生长的促进作用.将AM内总菌丝、功能菌丝和活性菌丝与植物生长、抗旱性能进行综合对比分析后,证实对宿主生物量积累起促进作用的主要是根内菌丝中的活性菌丝.具有磷酸酶活性的菌丝对植物生长和抗旱作用最强.AM既能改善植物磷素营养,增强植物的抗旱性,而且在提高宿主抗旱性的同时,也能在水分缺乏状态下有效地改善宿主对土壤磷素养分的吸收利用,提高宿主林木的抗贫瘠能力.有针对性地在干旱及荒漠区利用菌根生物技术,对克服干旱和贫瘠具有重要意义[17].菌根的研究在农业生产的防病治病方面也起着重要的作用.接种菌根真菌后,花生的结实率、种子重量、植物体干重等都明显高于被豆荚腐烂的病原菌侵染的植株.使埃及的花生果实(豆荚)腐烂病得到有效控制[18].对外生菌根研究的报道和泡囊菌根的报道均比丛枝菌根少得多[19].外生菌根因为取样、分离、获得纯培养和鉴定工作均容易些,因此,这方面的研究似乎不太神秘,大家在基础研究方面的兴趣也不太高,但在制作菌剂,提供生产与应用方面,具有重要的价值,经济前景也更加开阔.在“以研养研”方面,值得我国搞基础研究的科学家们,再多投入一些精力,争取改善自己的研究条件.世界范围内对AM菌根的研究处于一种极其活跃的状态中,对其生态、生理学,新技术的应用等等方面,均有大量报道[20].第三届国际菌根学会议于2001年7月在南澳大利亚的阿得雷德举行,主要议题是:“菌根的多样性和综合利用”,大量论文的交流和各国学者之间的交流研讨,对于菌根的基础和应用研究产生了极大的促进.[参 考 文 献][1] BRUNDRETT M.Mycorrhizas in natural ecosystems[J].Advances in Ecological Research,1991(21):171—313.[2] SMITH S E,READ D J.Mycorrhizal Symbiosis[M].San Diego:Academic Press,1997.[3] PRITSCH K,J EAN2CHARL ES M,FRANCOIS B.I2dentification and differentiation of mycorrhizal isolatesof black alder by sequence analysis of the ITS region[J].Mycorrhiza2000,10(2):87—93.[4] ANA S A.Mycorrhizal status of some plants of the A2raucaria forest and the Atlantic rainforest in Santa Cata268云南大学学报(自然科学版) 第23卷rina[J ].Brazil Mycrrhiza ,2000,10(3):131—136.[5] STEFANO B.Paris 2type mycorrhizas in Smilax asperaL.growing in a Mediterranean scherophyllous wood[J ].Mycorrhiza ,2000,10(1):9—13.[6] 弓明钦,陈应东,仲崇禄,等.菌根研究及应用[M ].北京:中国林业出版社,1997.[7] DEDECKER D.Specific PCR primers to identify arbus 2cular mycorrhizal fungi within colonized roots[J ].Myc 2orrhiza ,2000,10(2):73—80.[8] MO GGE B ,LOFERER C ,A GERER R ,et al.Bacterialcommunity structure and colonization patterns of Fagus sylvatica L.ectomycorrhizospheres as determined by flu 2orescence in situ hybridization and confocal laser scan 2ning microscopy [J ].Mycorrhiza ,2000,9(5):271—278.[9] ZHAO Zhi 2wei.The arbuscular mycorrhizas of pterido 2phytes in Yunnan ,SW China :evolutionary interpreta 2tions[J ].Mycorrhiza ,2000,10(3):145—149.[10] L IU A.Acquisition of Cu ,Zn ,Mn and Fe by mycor 2rhizal maize (Zea mays L.)grown in soil at diffenent P and micronutrient levels [J ].Mycorrhiza ,2000,9(6):331—336.[11] HARRIER L ,JOANNA S.Detection of the 32phos 2phoglycerate kinase protein of G lomus mosseae [J ].Mycorrhiza ,2000,10(2):81—86.[12] L IU A ,HAMEL C ,HAMIL TON R I ,et al.Acquisi 2tion of Cu ,Zn ,Mn and Fe by mycorrhizal maize (Zea m ays L.)grown in soil at different P and micronutri 2ent levels[J ].Mycorrhiza ,2000,9(6):331—336.[13] HASS H.Fungi from the lower Devonian rhynie chert[J ].Mycoparasitism American Journal of Botany ,1994,81:29—37.[14] PIROZYNSKI K A.Interactions between fungi andplants through the ages [J ].Canadian Journal of Botany ,1981,59:1824—1827.[15] TRAPPE J M ,TRAPPE.Phylogenetic and ecologicalaspects of mycotrophy in the angiosperms from an evo 2lutionary standpoint [A ].In :Ecophysiology of VA My 2corrhizal Plants ,ed.G.R.Safir [C ].Boca Raton ,Flori 2da :CRC Press ,1987,5—25.[16] MORTON J B.Species and clones of arbuscular mycor 2rhizal fungi (G lomales ,Zygomycetes ):their role in macro -and microevolutionary processes[J ].Mycotax 2on ,1990b ,37:493—515.[17] 唐 明,陈 辉,高鸿生,等.丛枝菌根真菌(AMF )对沙棘抗旱性的影响[J ].林业科学,1999,35(3):48—52.[18] MOHAMED E ,ABDALLA.Influence of the endomyc 2orrhizal fungus G lomus mosseae on the development of peanut pod rot disease in Egypt [J ].Mycorrhiza ,2000,10(1):29—35.[19] 纪大干.云南外生菌根研究、林木菌根研究[M ].北京:中国科学技术出版,1995,87—93.[20] 花小梅.林木菌根研究[M ].北京:国科学技术出版社,1995,1—376.Recent Advances of Mycorrhizas ResearchYAN G Xue 1,ZHAN G Lin 2qi 2,L IU Ji 2kai 1(1.Kunming Institute of Botany ,Chinese Academy of Sciences ,Kunming 650204,China ;2.Department of Biology ,Yunnan University ,Kunming 650091,China )Abstract :The recent advances of Mycorrhizas research are reviewed briefly.The practical meaning and e 2cological significance of mycorrhizas had made it as a research focus resent years.Experimental method has made mighty advances in the research of mycorrhizas.K ey w ords :mycorrhiza ;advance ;review78植物学专辑 杨 雪等:菌根研究进展简述。
药用植物绶草(兰科)的菌根真菌群落组成分析
表现出明显的相关性，暗示菌根区系组成更多受生境因素的影响。本研宂结果可为进一步采用菌根技术 实现该类兰科药用植物的种质保育及栽培生产提供理论参考。 关 键 词 ：绶 草 ，兰 科 菌 根 ，真 菌 区 系 ，菌根特异性
[引用本文]李佳瑶，赵泽宇，高越，邢晓科,2 0 2 1 .药用植物绶草（兰科）的菌根真菌群落组成分析.菌物学报,40(6): 1317-1327 Li JY, Zhao ZY, Gao Y, Xing XK, 2021. Mycorrhizal fungal community composition of medicinal plant S p ira n th e s s in e n sis (Orchidaceae). Mycosystema, 40(6): 1317-1327
手参内生真菌及根际土壤真菌多样性研究进展
手参内生真菌及根际土壤真菌多样性研究进展阿拉坦存布尔1，2曹乌吉斯古楞1，2*包金花3宝音图1，2胡红霞1，2王秀兰1（1内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古通辽028000；2内蒙古民族大学/蒙医药研发工程教育部重点实验室，内蒙古通辽028000；3内蒙古民族大学农学院，内蒙古通辽028000）摘要手参为二级珍稀濒危植物，具有极高的药用价值。
真菌对手参生长具有重要影响，应筛选获取有效促进手参幼苗生长的共生真菌，开展恢复生态资源栽培已成为必然趋势。
本文通过文献研究整理统计了涉及中国8个地区和其他4个国家的手参内生真菌和根际土壤真菌多样性及其生物学功能研究现状，统计了手参内生真菌共隶属于79属，其中角担菌属、青霉菌属、曲霉属、背芽突霉属、木霉属和Zymoseptoria为手参内生真菌优势类群。
从手参不同器官中分离得到的内生真菌属数从多到少依次为块茎>地上茎、叶>果荚>原球茎>幼苗，花中未分离到；隶属产地排序依次为西藏>北京>甘肃>四川>吉林>河北、黑龙江。
手参内生真菌在植物不同器官及不同产地间存在明显差异。
手参根际土壤真菌隶属于43属，其中镰刀菌属、木霉属、耙齿菌属为优势类群。
手参根际土壤真菌群落结构在不同产地间也存在明显差异，并且各产地手参根际土壤真菌优势类群各不同。
手参内生真菌对手参种子萌发及幼苗生长发育有着重要影响，并具有明显抑菌活性。
应全面了解手参内生真菌，进一步扩大手参分布范围，考虑手参不同生长期内生真菌群落结构变化，开展内生真菌分离鉴定技术的优化与提升以及生物功能的研究与评价等工作，为手参人工繁殖、内生菌资源的开发与利用提供参考。
关键词手参；内生真菌；根际土壤真菌；多样性；生物活性中图分类号S567.23+9文献标识码A文章编号1007-5739（2023）21-0076-08DOI：10.3969/j.issn.1007-5739.2023.21.020开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Research Progress on Diversity of Endophytic Fungi and Fungi in Rhizosphere Soil ofGymnadenia conopseaAltancunbuer1,2CAO Wujisiguleng1,2*BAO Jinhua3Baoyintu1,2HU Hongxia1,2WANG Xiulan1(1Mongolian Medical College,Inner Mongolia Minzu University,Tongliao Inner Mongolia028000;2Key Laboratory of Mongolian Medicine Research and Development Engineering,Ministry of Education,Inner Mongolia Minzu University,Tongliao Inner Mongolia028000;3Agricultural College,Inner Mongolia Minzu University,Tongliao Inner Mongolia028000) Abstract Gymnadenia conopsea is listed as a Class II rare and endangered plant and has high medicinal value. Fungi have an important effect on the growth of G.conopsea,so it is necessary to select and obtain symbiotic fungi that can effectively promote the growth of G.conopsea seedlings,and it has become an inevitable trend to carry out the cultivation of restoring ecological resources.This paper summarized the research status of G.conopsea endophytic fungi and rhizosphere soil fungi diversity and their biological functions involving8areas in China and4other countries through literature research,a total of79genera G.conopsea endophytic fungi were identified,among which, Ceratobasidium,Penicillium,Aspergillus,Cadophora,Trichoderma and Zymoseptoria were the dominant groups of G.conopsea endophytic fungi.The number of endophytic fungi isolated from different organs of G.conopsea ranged from more to less as follows:tuber>above-ground stem,leaf>pod>protocorm>seedling,and no fungi were isolated from基金项目内蒙古自治区科技计划项目（2021GG0003）；内蒙古民族大学博士启动基金（BS509）。
植物深色有隔内生真菌(DSE)的研究进展
植物深色有隔内生真菌(DSE)的研究进展张玉洁【摘要】对公开发表的有关植物深色有隔内生真菌(Dark Sepatate Endophytes,DSE)研究资料比较分析显示,DSE在世界各种生态类型的植物根内广泛存在,但目前对此类真菌生态功能的研究还处于起步阶段.为了给DSE的更深入的研究提供有启发意义的思路和框架,文章回顾和讨论了DSE的研究历史、类群组成、生态分布和可能的生物学功能.认为DSE-植物共生应当具有多方面的功能而非仅限于促进植物对营养的吸收.强调这一类群鲜为人知的根定植真菌的广布性和潜在的生态学意义,以引发研究者对此类真菌的广泛兴趣.【期刊名称】《文山学院学报》【年(卷),期】2010(023)001【总页数】6页(P145-150)【关键词】深色有隔内生真菌;普遍大量的存在;生态学功能的多样性【作者】张玉洁【作者单位】文山学院生化系,云南文山663000【正文语种】中文【中图分类】Q949.321 深色有隔内生真菌 (DSE)的概念在自然界,任何生命体总是与其周围环境中的其它生物存在相互关系。
几乎所有的植物都能与一定种类的细菌、真菌和放线菌等建立共生关系形成共生体。
微生物定殖于植物体并与其相互作用是一种普遍的生物学现象,它们之间形成包括共生、寄生、中性等关系,具有重要的生态学功能和意义。
植物根定殖真菌是指定殖于植物根表或根内的土壤真菌,近年来,除了研究较多的菌根真菌外,人们逐渐开始注意到普遍存在于植物根内的一类颜色较深的真菌,并据其菌丝的形态学特点将其定名为深色有隔内生真菌[1]。
DSE并不是一个科学的分类单元,而是泛指一群定居于植物根内的小型土壤真菌,可能包括功能和分类关系都不明确的多种属类的真菌。
这类真菌的定居模式在不同植物中是相似的,其一般特征是菌丝颜色较深、有明显的横隔,能够在植物细胞内形成“微菌核”。
此类真菌广泛地存在于健康植物根的表皮、皮层甚至维管束组织的细胞内或细胞间隙,但不会在根组织内形成典型的菌根(mycorrhiza)解剖学特征或病原菌引起的病理学特征[2]。
兰科菌根研究综述
兰科菌根研究综述
黄运峰;杨小波
【期刊名称】《热带亚热带植物学报》
【年(卷),期】2008(16)3
【摘要】兰科菌根是一种内生菌根,主要寄生于兰科(Orchidaceae)植物的种子及根系上.对兰科菌根真菌的分类及真菌资源多样性、兰科菌根的形态和菌根对兰科植物的效应等最新研究进展进行了综述.目前研究已知,感染兰科植物根部并能与之共生的真菌绝大多数属于担了菌门(Basidiomycota)和半知菌门(Deuteromycotina),也有部分属于子囊菌门(Ascomycota);兰科菌根的形成可分为两种情况:一是对兰科植物种子的侵染;二是对成长新根的侵染.菌根真菌对兰科植物的种子萌发及植株生长发育均有一定影响.
【总页数】6页(P283-288)
【作者】黄运峰;杨小波
【作者单位】海南大学热带生物研究中心,海口570228;海南大学热带生物研究中心,海口570228
【正文语种】中文
【中图分类】Q949.32
【相关文献】
1.兰科菌根的特点及其菌根真菌在兰花培育中的应用 [J], 李明
2.兰科菌根真菌在兰科植物生长发育中的作用与应用 [J], 杨友联;刘作易
3.大花杓兰根际土壤真菌及兰科菌根真菌多样性分析 [J], 付亚娟;张剑;付琦媛;侯晓强
4.兰科植物菌根真菌研究新见解 [J], 王美娜;胡玥;李鹤娟;李健;陈建兵;兰思仁
5.兰科植物与菌根真菌专一性研究进展 [J], 唐燕静;郭顺星;陈娟
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
植物内生菌根与感染机制的研究
植物内生菌根与感染机制的研究植物生长的环境中存在着许多微生物，其中一些微生物会与植物建立起内生共生关系。
其中最为常见和重要的一种共生关系是植物内生菌根，即植物根系与真菌建立起的共生关系。
内生菌根广泛分布于世界各地的植物中，其主要功能是提高植物的生长和抗逆能力，促进植物的健康成长。
植物内生菌根是由植物与真菌形成的共生结构，其中真菌通过与植物根系建立密切接触，并且将其菌丝穿过植物根部内部组织。
这样的共生结构被称为菌根，它可以有效地促进植物的养分吸收和水分利用，并增强植物对环境逆境的耐受度。
在此过程中，真菌长出的菌丝穿过植物根部内部组织，将植物根系和真菌形成了一个紧密的联结。
在这个结构内部，真菌可以通过菌丝向植物提供养分和水分，而植物则以所吸收的养分代付真菌生长所需的碳源。
然而，对于植物内生菌根感染机制的研究还非常有限。
目前被认为有两种不同的感染方式可以进行植物内生菌根之间的共生关系。
一种是直接感染模式，即真菌直接穿过植物的细胞壁来感染植物。
另一种是间接感染模式，即真菌通过分泌酸性聚糖酶来分解植物细胞壁，然后将菌丝穿过植物细胞壁内部组织建立与植物的结构。
除了两种感染方式外，还有关于真菌菌丝内部结构的研究。
一些先前的研究表明，真菌菌丝中存在一种特殊的“vesicle”结构，这个结构可以促进真菌吞噬外界养分和脂类物质。
另外，一些研究还发现菌丝内部存在着不同的等级结构，这些结构可以协调真菌的新陈代谢和生长。
总的来说，植物内生菌根与感染机制的研究，为我们认识植物生长以及生态系统中的微生物世界做出了贡献。
对于理解真菌与植物之间的关系，以及在可持续农业生产中应用这些知识，都非常有重要意义。
未来，随着科技的不断推进，我们对于植物内生菌根与感染机制的研究还将继续深入下去。
野生兰科植物菌根内生真菌分离及鉴定
１ 材 料 和 方 法
１ １ 供 试 材 料 ．
２ ５种 野生 兰科 植 物为杭 州 师范 大学 生 命 与 环境 科 学 学 院 生 物化 学 与 分 子 生物 学 杭 州 市重 点 实 验 室
１ ４２ Ｐ ． ． ＣＲ 扩 增
利 用 通 用 引 物 Ｉ １（ Ｔ Ｃ ＡＧＧＴ ＴＳ ５＿ Ｃ ＧＴ ｒ ＧＡＡＣ Ｔ Ｇ ３）和 Ｉ Ｓ ５－ Ｃ Ｃ ＴＴ Ｃ ＧＴ － 扩增 内生 真 菌 ｒ ＮＡ Ｉ Ｓ区段 ． Ｄ Ｔ Ｐ Ｒ反应体 系为 ：０ ｘＴ ｑ Ｂ ｆ ｒ含 Ｍｇ。 ２ ５ Ｌ 模板 Ｄ ． Ｌ ｄ Ｐ ２ ５ｒ ｏ／ ） ． Ｌ Ｃ １ ×Ｅ ａ ｕｆ （ ｅ 。 ） ． 、 。 ＮＡ ２ ０ 、ＮＴ （ ． ｔ ｌＬ １ ５ｔ 、 ｅ ｏ ． ｔ
从平 板上 刮 取 约 ０ ．１ ｇ菌 丝 体 置 于 研 钵 中 ， 入 １ ｍＬ 裂 解 缓 冲 液 （ ０ 加 １ ０ ｍｍｏ／ ｉ ＨＣ 、 ｌＬ Ｔｒ － １ ｓ １ ０ｍｍｏ／ ＤＴ ４ ０ｍｍｏ／ ａ Ｉ ２， Ｓ ） ０ ｌＬ Ｅ Ａ、 ０ ｌＬ Ｎ Ｃ 和 Ｄｓ 与少 许 石英砂 ， 菌丝 充分 研磨 ． ９ ６ 将 液体 转移 至 １ ５ｍＬ ． 离心 管 ， 加 入 等 体 积 氯 仿 ／ 戊 醇 （ 积 比 为 ２ 并 异 体 ４：１ 抽 提． ） 高速 离 心后 取 上 清 液 ， 入 ２ Ｌ Ｒ ｓ 加 Ｎａｅ （ ０ｍｇ ｍＬ ，７℃水浴 保温 ３ ｉ． １ ／ ） ３ Ｏｒ ｎ 随后 ， ２倍 体积 无水 乙醇 沉淀 Ｄ ａ 用 ＮＡ， 用 ７ ％乙醇洗 涤 ２次 ， 并 Ｏ 自然 风 干后 溶 于适量 Ｔ Ｅ溶 液 ， 贮存 于 一２ Ｏ℃备 用． 取 ３肛 Ｌ ＤＮＡ样 品 用 ０ ８ 琼脂 糖凝 胶在 １ ． ×ＴＡＥ电泳 缓 冲液 中进 行 电泳 （ ０ ３ ｉ） 溴化 乙 １ ０Ｖ， ０ｒ ｎ ， ａ 啶 染色后 ， 紫外灯 下 观察拍 照 ．
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
¸ÃÎĵµÓÉ Foxit Reader ±à¼-
°æȨûÓÐ ·-°æ²»¾¿
第 3期 伍建榕等 :云½南ö兰¹科©植Æ物À菌¹À根¡内£生真菌种类研究
7
表 2 不同种类及产地兰花内生真菌代表菌株的鉴定情况
序 菌株数 号 /个
菌株号
主 要 特 征
( Chaetom ium )
5
3
SHX107, SHX111
CLN129
菌丝平铺于培养基上迅速生长 ,菌落质地较稀疏 ,白色 ,薄绒状 ,后 期在表面呈环纹状或簇状产生绿色 、墨绿色或黄绿色的分生孢子堆. 培养基背面变为黄色或黄绿色. 分生孢子梗细长 、无色 ,产孢瓶体在 小分枝上常对生或轮生 ,分生孢子淡色 ,浅黄绿色 ,球形 ,多聚生于产 孢瓶体口部
鉴定结果
1
8
CLN110, CLN111
MLX103 , MLX105
CLN113, CLB119
CLB111, KW 214
气生菌丝浅褐至深褐色 ,菌丝分枝处有较明显缢缩 ,不远处有隔 膜 ,菌丝体多为直角分枝 ;有表面深褐色或浅褐色 、内部深褐色的菌 核 ,菌核间有菌丝相连 ,菌核颗粒状 ,细丝与基物相连. 无分生孢子
菌落边缘不规则 ,气生菌丝浅黄色至黄色 ,菌落表面有墨绿色的子囊 壳 ,子囊壳球形 ,四周有毛 ,膜质 ;子囊棒状 ;子囊孢子橄榄形 ,单细胞
兰科丝核菌类 (O rchida2 ceous rhizoctonias) ,包括 角菌 根 菌 属 ( Ceratorh i2 za) , 瘤 菌根菌 属 ( Epu2 lorh iza) 和 念 珠 菌 根 菌 属 (M on iliopsis)等 毛壳菌属
1. 3 诱导子实体的培养基 [ 1 ] 燕麦培养基 ( g /L ) ;玉米培养基 ( g /L ) ;马铃薯
葡萄糖蛋白胨琼脂培养基 ( g /L ) ;燕麦汁蛋白胨琼 脂培养基 ( g /L ) ; AC 培养基 ( g /L ) ;诱导子实体的 壳斗科植物 ,如麻栎 (Q uercus acu tissim a ) 、栓皮栎 及槲栎的叶.
总菌株数 /个 20 15 24 20 15 15 15 15 15 15 7 8 1
表 1 不同产地和种类的兰花获得菌株情况
代表菌株数 /个 7 11 8 5 4
代表菌株
CLD111, CLD112, CLD115, CLD117, CLD118, CLD119, CLD120 CLN103, CLN108, CLN110, CLN111, CLN113, CLN114, CLN115, CLN116, CLN129, CLN130, CLN112 CLB111, CLB110, CLB112, CLB113, CLB119, CLB128, CLB129, CLB130 CLX110, CLX112, CLX113, CLX114, CLX117 HLS101, HLS104, HLS111, HLS112
2 试验方法
2. 1 菌根真菌的分离 自根尖取新鲜营养根的根段 ,长 4 ～5 cm ,清
水冲洗 根 上 的 泥 沙 后 用 75% 的 乙 醇 处 理 20 ～ 30 s, 0. 1%的升汞溶液中浸泡 5 ～10 m in (浸泡时 间视组织材料的大小而定 ) , 对材料表面进行灭 菌 ,无菌水冲洗 4～5次 ,在无菌培养皿中横切成 3 ～5 mm的薄片 ,置于马铃薯葡萄糖琼脂培养基中 (含有 100μg / g氯霉素的 PDA ) ,切面朝向培养基 , 每皿放 3～4块组织 , 25 ℃恒温避光培养. 经过 3～ 7 d菌丝体从组织块上长出并形成一定大小菌落 , 以组织块为中心向周围扩散生长的为分离的目的 菌种 ,即从其边缘挑取菌丝体移到另一 PDA 平板 , 重复至获得纯培养物 ,转入 PDA 斜面保存. 2. 2 各菌株形态及培养形状观察
89株兰科植物的根上共分离获得真菌菌株 185 个 ,其中出现频率较高或文献曾报道可能是兰科 内生真菌的 65个菌株作为代表菌株 ,见表 1.
兰花品种
春兰 1 春兰 2 春兰 2 春兰 3 春兰 4 虎头兰 墨兰 1 墨兰 2 墨兰 3 兜兰 齿瓣石斛 长距石斛 卡特兰
产地
大理 怒江 保山 下关 思茅 西双版纳 元江 思茅 文山 西双版纳 元江 元江 云南
丝核菌属 1 R h izocton ia
2
8 MLX104,MLY105
SHX104, SHX105
CLB112, CLB128
CLB129, CLD120
菌落极薄呈细菌状 ;气生菌丝白色 ,菌丝分枝呈直角或锐角 ,分枝 处有较明显缢缩 ,不远处有隔膜 ,无锁状联合 ;无分生孢子 ;经诱导未 产生子实体
丝核菌属 2
R h izocton ia (在兰 科 植 物 中 寄 生 的 特有种 )
3
11 MLX102,MLX114
CLN114 , ML Y106
MLY107, CLN115
CLN116, CLN103
CLN108 , MLX113
CLB113
4
3
CLX111 , MLX112
SHY113
气生菌丝白色絮状 ,菌丝末端常变形呈念珠状 ,无锁状联合 ; 无分 生孢子 ;经诱导未产生子实体
木霉属 ( T richoderm a)
6
4
SHY114, CLD118
CLD119, CLD117
株重复 3皿 , 25 ℃恒温培养. 用解剖镜仔细观察菌 落形态 (形状 、大小 、边缘 、正背面颜色 、色素 ) ,显 微镜观察菌丝形态 (有无分隔 、缢缩 、有无锁状联 合 )及有无子实体产生 、孢子形态 、大小等及拍照 并记录结果. 2. 3 子实体的培养
在 PDA 培养基上常规培养不产生孢子的菌株 用下列方法诱导子实体.
5
MLX103 , MLX105 , MLX113 , MLX108 , MLX111
5
ML Y105 , ML Y106 , ML Y107 , ML Y111 , ML Y114
7
MLX107 , MLX102 , MLX104 , MLX103 , MLX114 , MLX111 , MLX112
(1. 西南林学院 保护生物学学院 ,云南 昆明 650224; 2. 南京林业大学 森林资源与环境学院 ,江苏 南京 210037; 3. 云南农业大学 植物病理重点实验室 ,云南 昆明 650201)
摘要 :从云南省兰科植物主产区的 8个地区 11个品种 89株兰科植物的营养根上分离获得真 菌菌株 184个 ,其中出现频率较高或文献曾报道为兰科内生菌根真菌的有 65个. 根据菌落形 态 、菌丝特征 、产孢结构 、孢子形态及子实体诱导等大致分为 18类 ,分别隶属于丝核菌属 、兰科 丝核菌类 、毛壳菌属 、木霉属 、镰刀菌属 、顶枝孢 、束格孢属 、团丝核菌属 、T richosporiella sp. 、Gli2 om astix m u rorum、兰小姑 、微囊菌属 、Ca tenu la ria piceae、丝孢纲的其他属等.
关键词 :兰科植物 ;菌根 ;内生菌 ;云南
中图分类号 : S718 文献标识码 : A 文章编号 : 1003 - 7179 (2006) 03 - 0005 - 06
兰科植物是一类观赏价值和经济价值极高的 珍贵花卉和药材 ,目前多采用组培方法进行繁殖. 但移栽无菌苗生长缓慢 ,甚至于不开花 ,长势明显 劣于原生地自然状态下生长的兰科植物. 其原因 是兰科植物需要与菌根真菌共生才能生长良好 , 无菌组培苗不能形成内生菌根. 自 Bernard发现自 然界中几乎所有的兰科植物都与真菌共生形成菌 根 ,对兰科内生真菌的研究已有 100 年的历史. 成 年兰科植物与真菌共生形成内生菌根是自然界的 一种普遍现象 ,菌根真菌为兰科植物提供生长 、繁 殖所必需的营养物质. 为此 ,笔者对云南保山 、怒 江贡山 、大理 、西双版纳等地的兰科植物进行内生 菌根真菌的分离 ,为解决兰科植物这类珍贵花卉 的人工栽培提供理论依据和可用菌根菌种类.
图 1 内生菌根真菌各属的分离频率
4 结 论
(1) 丝核菌属 1,丝核菌属 2 (在兰科植物中寄生 的特有种 )为兰科丝核菌类 ,小菌核属为半知菌亚门 (Deuteromycotina)无孢目 (Agonomycetales)无孢科的 真菌 ;木霉属、单端孢属、青霉属、枝顶孢属为半知菌 亚门 (Deuteromycotina)丛梗孢目 (Moniliales)淡色孢 科 (Moniliaceae)的真菌 ;异孢迭球孢霉属半知菌亚门 (Deuteromycotina) 丛 梗 孢 目 (Moniliales) 暗 色 孢 科 (Dematiaceae)的真菌 ;M enispora、Em bellisia、团丝核菌 属、Endophragm ia、Gliom astix m urorum、无孢菌群属半 知菌亚门 (Deuteromycotina)丝孢纲 (Hyphomycetes)的 真菌 ;镰刀菌属为半知菌亚门 (Deuteromycotina)丛梗 孢目 (Moniliales)瘤座孢科 (Tuberculariaceae)的真菌 ; 毛壳菌属为子囊菌亚门 (A scomycotina) 球壳菌目 (Sphaeriales)毛壳菌科的真菌 ;小姑属为担子菌亚门 (Basidiomycotina)口蘑科 (Tricholomataceae)的真菌.
上 ,待菌丝长满树叶后 ,放入广口瓶内 ,瓶底事先 铺上保湿的海绵 , 再加上湿润滤纸 , 注意经常加 水 ,保持滤纸的湿度 ,分别用黑光灯 、散射光 、室温 和低温交替培养 ,重复 3 次. 待长出子实体再进行 鉴定. 2. 4 内生菌根真菌的鉴定
按常规形态鉴定方法.
3 结果与分析
3. 1 分离试验结果 自云南省主产兰科植物的 8个地区 11个品种
1 试验材料