活性氧在血小板活化和凋亡中的作用机制研究进展_朱可馨
坏死性凋亡及其相关疾病的研究进展
南京农业大学学报2021,44(1) :8-17Journal qf Nanjing Agricultural University http :// DOI ：10.7685/jnau.202006001鲍春彤，张晓光，雷连成.坏死性凋亡及其相关疾病的研究进展［J ］.南京农业大学学报,2021,44(1):8-17.BAO Chuntong,ZHANG Xiaoguang,LEI Liancheng. Research progress of necroptosis and related diseases ［ J ］ . Journal of Nanjing Agricultural Lniversity, 2021,44(1):8-17.坏死性凋亡及其相关疾病的研究进展鲍春彤-张晓光-雷连成(1.吉林大学动物医学学院，吉林长春130000;2.长江大学动物科学学院，湖北荆州434000)摘要:坏死性凋亡，即程序性坏死，主要由细胞因子(TNF-a 、IFN-a 、IFN -丫)、Toll 样受体(TLR3、TLR4、TLR9)以及核酸 (DNA 、RNA)感受器等介导起始过程。
受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)、受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)和底物混合谱 系激酶样蛋白(MLKL)参与坏死性凋亡的发生,MLKL 是关键分子。
目前研究发现,坏死性凋亡与感染性疾病、神经系统疾 病、炎症、癌症的发生密切相关。
本文将对细胞坏死性凋亡在炎性因子失衡中的作用、坏死性凋亡发生的分子机制、坏死性 凋亡与多种疾病的关系以及治疗药物研究进展方面进行综述。
关键词:炎性因子;坏死性凋亡;疾病中图分类号:S858.28 文献标志码：A 文章编号：1000-2030( 2021) 01-0008-10Research progress of necroptosis and related diseasesBAO Chuntong 1 ,ZHANG Xiaoguang 1 ,LEI Liancheng 1,2*(1.College of Veterinary Medicine ,Jilin University ,Changchun 130000,China ；2.College of Animal Science , Yangtze University , Jingzhou 434000,China)Abstract : Necroptosis is programmed death , and is mainly caused by cytokines ( TNF-a , IFN-a , IFN -7) , Toll-like receptors ( TLR3, TLR4, TLR9) and nucleic acid( DNA, RNA ) sensors. Receptor interacting serine/threonine protein kinase 1 ( RIPK1) , receptor inter acting serine/threonine protein kinase 3 ( RIPK3) and mixed lineage kinase domain like pseudokinase ( MLKL ) are involved , and MLKL is the key molecule. The current research found that necroptosis has been linked to infectious diseases , neurological diseases , inflammatory diseases and cancer. In this article , the role of necroptosis will be reviewed in the imbalance of inflammatory cytokines , the molecular mechanism , the correlation between necroptosis and a variety of diseases and therapeutic drugs.Keywords : pro-inflammatory cytokine ； necroptosis ； disease坏死性凋亡(necroptosis)，也被称作“程序性坏死”，是一种类似于坏死的细胞死亡方式，依赖受体相 互作用蛋白激酶 1 ( receptor interacting serin^^threonine protein kinase 1, RIPK1)、受体相互作用蛋白激酶 3 (receptor interacting serin^^threonine protein kinase 3 , RIPK3 )和底物混合谱系激酶样蛋白(mixed lineage kinase domain like pseudokinase , MLKL ),不依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋 白酶(cysteine-aspartic proteases , Caspase )［1］o凋亡(apoptosis)与坏死(necrosis)是两类主要的细胞死亡方式,坏死曾经被认为是被动和非程序性 的。
复方丹参滴丸抗血小板活化及性研究进展
复方丹参滴丸抗血小板活化及性研究进展:祝国光罗瑞芝郭治昕【摘要】综述了复方丹参滴丸抗血小板活化及性药理及临床方面的研究进展，从药理学角度探讨了复方丹参滴丸抗血小板活化及功能的可能机制，通过分析初步得出结论,复方丹参滴丸是多部位、多层面和多靶点地抑制血小板的活化及功能.【关键词】复方丹参滴丸; 血小板活化XX近年来急性冠状动脉综合征的病理生理学机制已经趋向明晰，主要是动脉粥样斑块破裂或侵蚀导致血小板激活，血栓,造成冠状动脉部分阻塞或完全闭塞,伴有或不伴有远端微循环障碍。
学者们对血小板尤为关注。
复方丹参滴丸从动物研究到临床观察的近十年时间里，已证实其对血小板活化有确切抑制作用,并发现其抑制血小板活化的作用也呈现多部位，多环节,多靶点,多层面的效应（图１）。
复方丹参滴丸除对冠心病具有治疗作用外，还能预防动脉粥样硬化的及减少冠心病患者突发心脑血管意外事件。
图1 复方丹参滴丸抗血小板活化及性作用呈现多种有效成分、多部位、多途径、多种靶细胞、多层面的效应(略)1 复方丹参滴丸抑制血小板作用的药理学研究李洁等采用7２只雄性SD大鼠造成高脂血症模型，观察复方丹参滴丸50 mg/kg、150 mg/kg和4５0 ｍg/ｋg不同剂量组的药效以藻酸双脂钠２5 mｇ／kｇ为对照组，灌胃给药13d后,测定试验动物的血栓指数、高切变率及低切变率下全血黏度、及全血还原黏度等指标.试验结果表明，高脂血症模型组大鼠血小板黏附率较正常对照组明显升高，差异有统计学意义。
高脂血症模型组大鼠血栓指数较正常对照组明显升高，差异比较有统计学意义.复方丹参滴丸1５0 mｇ/kg和４5０mg/kｇ组与藻酸双脂钠２5 mｇ/ｋｇ组均可明显降低实验性高脂血症大鼠血小板黏附率和血栓指数,说明复方丹参滴丸可明显降低实验性高脂血症大鼠的血小板黏附率和体外血栓指数，复方丹参滴丸能预防和治疗动脉粥样硬化。
XX马复先等取１６只正常Wistaｒ大鼠和２6只Wistar大鼠动脉硬化（ａtheroscleｒｏsis, AS)模型(其中10只服复方丹参滴丸50 mg)置于减压舱内上升到8００0 m,停留３0 min.取减压前后的大鼠血，分离出血浆和血小板，并制成血小板悬液，用单抗放免法和放免法测定血浆α颗粒膜蛋白？140 （granuｌｅmembrane proteｉｎ?140，GMＰ？140)的值,试验结果表明,减压应激可导致大鼠血小板中ＧMP？1４０水平增加，其中以AS模型大鼠升高最显著，显示AS模型大鼠血小板活化程度高于正常大鼠,服用复方丹参滴丸有减弱其升高的作用。
铁死亡和自噬在骨关节炎发病机制中作用的研究进展
铁死亡和自噬在骨关节炎发病机制中作用的研究进展龚梓恒，邱波武汉大学人民医院骨科，武汉430060摘要：骨关节炎（OA）是中老年人常见的一种退行性关节疾病。
目前，临床尚无有效方法来阻止、减缓或逆转OA进程，晚期通常采取人工关节置换治疗。
铁死亡是一种独特的细胞死亡方式，其特征是铁依赖性脂质过氧化物过度累积。
自噬是一种广泛存在于真核细胞、进化上保守的溶酶体依赖的分解代谢过程，负责将受损的细胞器、错误折叠的蛋白及其他大分子物质等运送至溶酶体降解和再利用。
近年来，越来越多研究证实OA的发生、发展与铁死亡和自噬密切相关。
抑制铁死亡或激活自噬在OA的治疗中显示出巨大的潜力，相信随着进一步研究，最终将被广泛用于临床，从而为OA带来新的治疗策略。
关键词：骨关节炎；铁死亡；自噬doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.28.026中图分类号：R684.3 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）28-0103-04骨关节炎（OA）是中老年人常见的一种退行性关节疾病，典型临床表现为关节疼痛、肿胀和活动受限等，主要病理改变为关节软骨退行性病变、软骨下骨异常重塑和骨赘形成等。
作为软骨的唯一细胞成分，软骨细胞衰老和死亡是导致OA发生、发展的重要原因［1］。
目前，临床尚无有效方法来阻止、减缓或逆转OA进程，晚期通常采取人工关节置换治疗。
因此，迫切需要探索新的治疗方法来改善OA症状和延缓疾病进展。
铁死亡是一种独特的细胞死亡方式，其特征是铁依赖性脂质过氧化物过度累积［2］。
铁死亡与诸多生物过程密切相关，如铁代谢、多不饱和脂肪酸代谢以及具有抗氧化活性化合物的生物合成等［3］。
近年来，越来越多研究证实，铁死亡与OA 的发生、发展密切相关。
自噬是一种广泛存在于真核细胞、进化上保守的溶酶体依赖的分解代谢过程，负责将受损的细胞器、错误折叠的蛋白及其他大分子物质等运送至溶酶体降解和再利用［4］。
自噬对细胞的自我更新和内环境稳态的维持具有至关重要的作用。
内皮细胞分泌的外泌体在缺血性脑卒中的研究进展
内皮细胞分泌的外泌体在缺血性脑卒中的研究进展作者：王敏，王鹏宇，王光明来源：《右江医学》2023年第11期［专家介绍］王光明，教授，医学博士，留美博士后，硕士研究生导师。
大学本科毕业于武汉大学，硕士研究生、博士研究生均毕业于北京大学医学部，2006年至2012年在美国从事博士后及研究助理工作，现任大理大学临床医学院教授，大理大学第一附属医院基因检测中心主任，云南省中青年学术技术带头人，云南省医学学科带头人，云南省医师协会遗传咨询分会副主任委员，中国医师协会医学遗传医师分會委员。
主要从事缺血性脑卒中及新生儿遗传病等方面的科研和临床诊治工作。
目前主持国家自然科学基金等科研项目10余项，发表各类论文100余篇，其中SCI收录 20余篇，北大中文核心10余篇；参编专著1部，获专利2项，系《广东医学》《重庆医学》《中华行为医学与脑科学》等杂志编委和审稿专家。
【摘要】脑卒中是一种突发的血流障碍性疾病，外泌体在缺血性脑卒中的发生发展机制中起重要作用。
内皮细胞分泌的外泌体不仅可迁移到损伤区，参与血管新生，恢复血脑屏障（BBB）的完整性，而且在减轻炎症反应、卒中病理相关的运动和神经功能损伤方面起到重要的作用。
该文就近几年来国内外有关内皮细胞分泌的外泌体在缺血性脑卒中发病中的最新研究做一综述，探讨内皮细胞来源的外泌体在缺血性脑卒中的治疗潜在价值。
【关键词】缺血性脑卒中；内皮细胞；外泌体中图分类号：R743.3文献标志码：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2023.11.001Research progress of exosomes secreted by endothelial cells in cerebral ischemic strokeWANG Min1， WANG Pengyu1， WANG Guangming2▲（1. School of Clinical Medicine， Dali University， Dali 671000， Yunnan， China; 2. Gene DetectionCenter of the First Affiliated Hospital of Dali University， Dali 671000， Yunnan， China）【Abstract】 Stroke is a sudden blood flow disorder， and studies have shown that exosomes play an important role in the occurrence and development of cerebral ischemic stroke. Exosomes secreted by endothelial cells can not only migrate to the injured area， participate in angiogenesis，restore the integrity of the blood-brain barrier （BBB）， but also play an important role in alleviating inflammatory responses， motor and neurological functional damage associated with stroke pathology. This article summarizes the latest researches on the role of exosomes secreted by endothelial cells in the pathogenesis of cerebral ischemic stroke at home and abroad in recent years，and explores the potential value of exosomes derived from endothelial cells in the treatment of cerebral ischemic stroke.【Key words】cerebral ischemic stroke; endothelial cells; exosomes缺血性脑卒中是一种常见且严重的脑血管疾病，占所有脑卒中的87%，是持续性残疾的主要原因［1］。
NCTD通过调控PPP5C影响人白血病细胞增殖和凋亡的机制研究
NCTD通过调控PPP5C影响人白血病细胞增殖和凋亡的机制研究张鑫;崔冰洁;于国兴;王飞;赵靓;高娜;杜静【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2024(34)4【摘要】目的研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)通过调控磷酸蛋白磷酸酶催化亚基5C(protein phosphatase 5 catalytic subunit,PPP5C)对人白血病NB4、K562细胞增殖、凋亡能力的影响及机制的初步研究。
方法体外培养NB4、K562细胞,电转PC3.1和PPP5C-PC3.1质粒至NB4、K562细胞,遗传霉素(geneticin,G418)筛选NB4、K562稳转细胞系。
Western blot和RT-qPCR实验检测PPP5C蛋白和mRNA表达水平。
采用CCK-8、迁移实验、Live&Dead^(TM)动物细胞活力/毒性检测试剂盒分别检测NB4、K562细胞的增殖能力、迁移能力和死细胞、活细胞的数量。
将NB4、K562稳转细胞分为0μg/mL NCTD组和不同浓度NCTD组,分别用含有0、8、16、32μg/mL NCTD 的1640培养基培养;Live&Dead^(TM)动物细胞活力/毒性检测试剂盒检测死细胞率并对细胞形态进行拍照;Western blot检测各组细胞caspase 3、Cleaved caspase 3、JNK、p-JNK、p38、p-p38和α-Tubulin蛋白表达水平。
结果NB4、K562细胞转染后PPP5C表达水平显著提高,细胞增殖能力、迁移能力、抗凋亡能力显著增强;与0μg/mL N CTD组相比,NCTD各浓度组会促进细胞凋亡,且呈剂量依赖性;PPP5C过表达拮抗NCTD对白血病细胞的杀伤作用;机制研究发现PPP5C通过去磷酸化修饰降低p-JNK的蛋白水平进而调控与细胞凋亡相关蛋白Cleavedcaspase 3的表达。
丹参及其活性成分治疗血管性痴呆作用机制的研究进展
环球中医药2023年7月第16卷第7期 Global Traditional Chinese Medicine,July 2023,Vol.16,No.71475 ㊃综述㊃基金项目:国家自然科学基金(82074527)作者单位:100700 北京中医药大学东直门医院针灸科[杨圆圆㊁倪金霞㊁袁静雪(博士研究生)㊁宋越(博士研究生)],脑病一科(赵子珺);黑龙江中医药大学附属第二医院哈南分院针灸二科(王迪);黑龙江中医药大学附属第一医院针灸二科(闫禹竹);黑龙江中医药大学佳木斯学院(汪金宇)作者简介:杨圆圆(1989-),博士,在站博士后,主治医师㊂研究方向:中医药防治脑血管疾病的研究㊂E⁃mail:yuanyuan5250@ 通信作者:倪金霞(1972-),博士,博士生导师,主任医师㊂研究方向:针灸防治脑血管疾病的研究㊂E⁃mail:nijinxia118@丹参及其活性成分治疗血管性痴呆作用机制的研究进展杨圆圆 倪金霞 王迪 闫禹竹 汪金宇 赵子珺 袁静雪 宋越【摘要】 丹参其活性成分包括丹参酮IIA㊁丹参酸B㊁丹参素㊁隐丹参酮等㊂其中丹参酮IIA 可通过抑制内质网应激抑制神经细胞凋亡,通过调节Toll 样受体4(toll⁃like receptor 4,TLR4)/髓系分化初级反应蛋白88(myeloid differentiation primary response protein 88,MyD88)依赖性信号通路,下调β位淀粉样蛋白前体蛋白切割酶1(βamyloid precursor protein cleaving enzyme 1,BACE1)表达,调控核因子κB 及其抑制蛋白的活性,减轻神经炎症反应,降低神经细胞炎性损伤;改善胆碱能功能对神经系统发挥保护作用;通过上调磷酸化 细胞外调节蛋白激酶(phosphorylation -extracellularregulated protein kinase,p⁃ERK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)㊁蛋白激酶C 受体1(protein kinase C receptor 1,RACK1)和抑制自噬来减轻神经元损伤㊂丹参酸B 上调胰岛素样生长因子1(insulin⁃like growth factor 1,IGF⁃1)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路㊁调节信号转导及转录激活蛋白3(transcription activating protein 3,STAT3)/促血管生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路,抑制神经细胞凋亡,通过激活低密度脂蛋白受体相关蛋白6(low density lipoprotein receptor⁃associated protein 6,LRP6)/Wnt /β⁃连环蛋白(β⁃catenin)信号通路减轻神经元氧化应激损伤,还能通过抑制氧化应激反应促使突触蛋白恢复,以改善神经功能和认知功能㊂丹参素调节磷脂酰肌醇3激酶/Akt 信号通路,抑制神经元凋亡,发挥神经保护作用㊂隐丹参酮可通过抑制脑血管内皮细胞中的β淀粉样蛋白聚集发挥抗血管性痴呆的作用㊂现将近年来丹参活性成分用于血管性痴呆的研究报道进行综述总结,为丹参的临床运用及血管性痴呆的治疗提供理论依据㊂【关键词】 丹参; 丹参酮IIA; 丹参酸B; 丹参素; 隐丹参酮; 血管性痴呆; 作用机制【中图分类号】 R285.5 【文献标识码】 A doi:10.3969/j.issn.1674⁃1749.2023.07.039Research progress on the mechanism of Salvia miltiorrhiza and its active components in the treatment of vascular dementiaYANG Yuanyuan ,NI Jinxia ,WANG Di ,YAN Yuzhu ,WANG Jinyu ,ZHAO Zijun ,YUAN Jingxue ,SONG YueDongzhimen Hospital of Beijing University of Chinese Medicine ,Beijing 100700,China Corresponding author :NI Jinxia ,E⁃mail :nijinxia118@【Abstract 】 The active ingredients of Salvia miltiorrhiza include tanshinone IIA,tanshinone B,tanshinol,cryptotanshinone and so on.Tanshinone IIA can inhibit neuronal apoptosis by inhibitingendoplasmic reticulum stress.Tanshinone IIA regulates the Toll⁃like receptor 4(TLR4)/myeloid1476 环球中医药2023年7月第16卷第7期 Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.7 differentiation primary reactive protein88(MyD88)⁃dependent signaling pathway,down⁃regulates the expression ofβ⁃site amyloid precursor protein cleaving enzyme1(BACE1),and regulates the activitiesof NF⁃κB and IκB.It can reduce the neuroinflammatory response and reduce the inflammatory damage ofnerve cells.It improves cholinergic function and protects the nervous system.It alleviates neuronal injuryby up⁃regulating phospho⁃extracellular regulated protein kinase(p⁃ERK)/extracellular regulated proteinkinase(ERK),protein kinase C receptor1(RACK1)and inhibits autophagy.Salvianolic acid B up⁃regulates insulin⁃like growth factor1(IGF⁃1)/protein kinase B(Akt)signaling pathway,regulatessignal transducer and activator of transcription3(STAT3)/pro⁃angiogenic growth factor(VEGF)signaling pathway,and inhibits neuronal apoptosis.It alleviates neuronal oxidative stress injury by activating the low⁃density lipoprotein receptor⁃associated protein6(LRP6)/Wnt/β⁃catenin signaling pathway,and can also promotes the recovery of synaptic proteins by inhibiting oxidative stress response toimprove neurological function and cognitive function.Danshansu plays a neuroprotective role by regulatingPI3K/Akt signaling pathway and inhibiting neuronal apoptosis.Cryptotanshinone plays an anti⁃vasculardementia role by inhibiting the aggregation of Aβin cerebrovascular endothelial cells.This article reviewsand summarizes the research reports of active ingredients of Salvia miltiorrhiza used in VaD in recentyears,so as to provide theoretical basis for the clinical application of Salvia miltiorrhiza and the treatmentof VaD.【Key words】 Danshen; Tanshinone IIA; Danshen acid B; Danshensu; Cryptotanshinone; Vascular dementia; Mechanism of action 血管性痴呆是全球人类仅次于阿尔茨海默病的第二大常见痴呆类型,临床缺乏根治的治疗方法,寻找积极有效的抗血管性痴呆药物成为研究的热点[1]㊂丹参属于经典活血中药,‘神农本草经“将其列为上品,具有活血化瘀㊁凉血消痈㊁调经止痛的作用,临床广泛用于胸痹㊁癥瘕㊁月经不调㊁中风等症的治疗[2]㊂现代研究发现,丹参的主要活性成分包括水溶性丹酚酸类化合物(丹酚酸类化合物)及脂溶性醌类化合物(丹参酮类化合物),以及丹参素㊁隐丹参酮等成分,具有抗动脉硬化㊁抗炎㊁抗氧化应激㊁改善血液循环㊁降低组织缺血再灌注损伤等作用[3]㊂本文通过查阅近年来国内外相关文献,综述了丹参活性成分在血管性痴呆作用机制,以期为丹参的临床运用价值提供参考㊂1 丹参活性成分通过抑制神经元凋亡以保护神经功能 丹参活性成分可通过抑制内质网应激㊁上调胰岛素样生长因子⁃1(insulin⁃like growth factor⁃1,IGF⁃1)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路㊁调节磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-kinase, PI3K)/Akt信号通路㊁调节信号转导及转录激活蛋白3(transcription activating protein3,STAT3)/促血管生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)信号通路,抑制神经元凋亡,对神经功能发挥保护作用㊂1.1 丹参活性成分通过抑制内质网应激降低细胞凋亡内质网是蛋白质折叠和分泌的主要隔室,内质网蛋白发生未折叠或错误折叠可引起未折叠蛋白质反应(Unfolded protein reaction,UPR)的细胞应激反应,进而启动多种应激传感器蛋白,清除有毒的错误折叠蛋白质,维护正常的内质网功能,β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)能促进内质网应激标志物的表达,并增加内质网应激相关细胞凋亡途径,如C/Ebp同源蛋白(C/Ebp homologous protein,CHOP),c⁃Jun N端激酶(C⁃Jun N⁃terminal kinase, JNK)㊁半胱天冬酶⁃12等效应分子的表达[4]㊂Yang等[5]将丹参酮IIA(1~20μmol/L)Aβ1⁃42诱导的SH⁃SY5Y神经母细胞细胞损伤,结果显示,丹参酮IIA呈浓度依赖性提高细胞的活力,降低Aβ引起的细胞收缩㊁形状不规则㊁悬浮,有效降低细胞凋亡,减轻内质网应激反应,降低GRP78㊁UPR 蛋白表达,抑制CHOP和磷酸化JNK的表达,降低B 淋巴细胞瘤⁃2蛋白(B⁃cell lymphoma⁃2,Bcl⁃2)和Bcl⁃2相关X蛋白(Bcl⁃2⁃associated X,Bax)㊁4⁃苯基丁酸的表达,提高Bcl⁃2/Bax的比值,降低半胱天冬酶⁃9㊁裂解半胱天冬酶⁃3和半胱天冬酶⁃3/7的活性,其机制与丹参酮IIA抑制内质网应激引起的细胞凋亡㊂环球中医药2023年7月第16卷第7期 Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.714771.2 丹参活性成分通过调节PI3K/Akt信号通路降低细胞凋亡胰岛素样生长因子1(insulin⁃like growth factor 1,IGF⁃1)广泛表达于大脑皮层㊁小脑㊁下丘脑和海马等中枢神经系统的多肽物质,可通过控制神经营养反应和细胞信号传导,发挥神经保护作用,还能降低大脑中的糖原合酶激酶3和Aβ水平,改善认知障碍[6]㊂IGF⁃1和p⁃Akt的下调表达与血管性痴呆的认知缺陷有关㊂活化的Akt通过磷酸化其下游蛋白[如半胱天冬酶⁃9㊁Bcl⁃2相关死亡蛋白(Bcl⁃2 related death protein,Bad)㊁糖原合酶激酶3β(Glycogen synthase kinaseβ,GSK3β)],以促进细胞存活并抑制细胞凋亡[7]㊂Ma等[8]运用丹参酸B(20mg/kg)治疗双侧颈总动脉夹闭建立的血管性痴呆大鼠,研究发现,丹参酸B能显著降低大鼠的逃逸潜伏期,增加跨平台时间及数量,上调海马区IGF⁃1和p⁃Akt的表达,减轻神经元细胞形态学改变,减轻海马区及CAI区神经元凋亡,表明丹参酸B通过上调IGF⁃1/Akt信号途径减轻神经元凋亡有关㊂祁敏芳等[9]对双侧颈总动脉夹闭再灌注建立的血管性痴呆小鼠,运用丹参素(10㊁20㊁30mg/kg)进行预处理,结果发现,丹参素能呈剂量依赖性改善脑组织的细胞结构及功能,减轻病理性损伤,缩短小鼠逃避潜伏期,降低血清神经元特异性烯醇化酶㊁中枢神经特异蛋白的水平,上调脑组织中PI3K㊁Akt蛋白的表达,通过调节PI3K/Akt信号通路提高认知功能㊂1.3 丹参活性成分通过调节STAT3/VEGF信号通路降低细胞凋亡脑小血管疾病是种重要的脑血管疾病的类型,可引起老年认知障碍和功能丧失,与中风㊁痴呆和衰老等病理生理学改变密切相关[10]㊂VEGF存在于中枢神经系统内,不仅能刺激内皮细胞的增殖,维持神经细胞存活,还能抑制细胞凋亡[11]㊂STAT3蛋白主要存在于神经胶质细胞内,在缺血性损伤后呈高表达,能促使VEGF的表达,促进神经功能的恢复[12]㊂Wang等[13]将丹参酸B(80mg/kg)治疗脑小血管疾病大鼠的实验发现,丹参酸B能降低逃逸延长期,增加穿过前平台次数和路径长度,改善大鼠的认知缺陷,显著降低大鼠血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF⁃α)㊁白介素(interleukin,IL)⁃1β㊁IL⁃6和IL⁃18水平,显著抑制丙二醛(malondialde hyde,MDA)水平,升高谷胱甘肽㊁过氧化氢酶㊁超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的水平,抑制半胱天冬酶⁃3和Bax蛋白的表达,显著降低大鼠神经细胞的数量,上调p⁃STAT3㊁VEGF和VEGF⁃R2蛋白表达,表明,丹参酸B通过调节STAT3/VEGF信号通路以减轻神经细胞凋亡㊂Kong等[14]将丹参酮IIA(30mg/kg)用于四血管咬合建立的血管性痴呆大鼠的实验发现,丹参酮IIA 能显著降低逃逸潜伏期,增加靶向象限的时间和穿越平台的数量,增加CA1海马区域的Tunel阳性细胞数量,减弱了CA1海马区域中4⁃VO诱导的神经元凋亡,促进GSK3β磷酸化和抑制tau磷酸化,与间充质干细胞可发挥协同治疗作用,其机制为丹参酮IIA通过抑制神经元凋亡有关㊂2 丹参活性成分通过减轻神经炎症反应以减轻神经细胞损伤 丹参活性成分能通过下调β位淀粉样蛋白前体蛋白切割酶1(βamyloid precursor protein cleaving enzyme1,BACE1)表达㊁调控核因子⁃κB(nuclear factor⁃κB,NF⁃κB)和NF⁃κB抑制蛋白(inhibitor of NF⁃κB,IκB)的活性,以减轻神经炎症反应,降低神经细胞损伤㊂2.1 丹参活性成分通过抑制调节Toll样受体4 (Toll⁃like receptor4,TLR4)/髓系分化初级反应蛋白88(myeloid differentiation primary response protein 88,MyD88)依赖性信号通路减轻神经炎症反应TLR4可在小胶质细胞㊁星形胶质细胞㊁巨噬细胞上表达,与神经炎症密切相关,TLR4与MyD88结合,能激活NF⁃κB和其他转录因子,诱导主要促炎细胞因子IL⁃1β,TNF⁃α和IL⁃6的释放,进一步加重神经组织的炎性损伤[15]㊂Jin等[16]将丹参酮IIA(1㊁5㊁10㊁20㊁40μmol/ L)预处理脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人胶质母细胞瘤U87细胞的炎性损伤,结果发现,1㊁5㊁10μmol/L丹参酮IIA能呈浓度依赖性提高了U87细胞活力,但20㊁40μmol/L的浓度反而抑制了U87细胞的活力,丹参酮IIA还能抑制胶质纤维酸性蛋白的高蛋白水平,阻止细胞内IL⁃1β㊁TNF⁃α和IL⁃6基因及蛋白的表达,阻止NF⁃κB的核易位,明显抑制了LPS诱导的细胞质中NF⁃κB p65的降低和细胞核中NF⁃κB p65的增加,抑制抑制了磷酸化⁃p38和磷酸化⁃JNK的水平,降低TLR4和下游蛋白1478 环球中医药2023年7月第16卷第7期 Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.7MyD88和TNF受体关联因子6的表达,其机制与丹参酮IIA通过TLR4/MyD88依赖性信号通路调节NF⁃κB和丝裂原活化蛋白激酶激活以阻断神经炎症反应有关㊂2.2 丹参活性成分通过下调BACE1表达以减轻神经炎症血管性痴呆无论是由外部环境因素还是内部遗传因素引发,所有致病特征都伴随着炎症反应,早期中度炎症可以去除有害物质,对大脑有益,但随着年龄的增长,血脑屏障功能下降,进入大脑的有害异物水平增加,炎症会继续加重症状,由于有毒蛋白质的积累而形成恶性循环,随着损伤的逐渐增加,相关的信号通路被激活,进一步加重神经细胞的炎症反应,最终将导致神经元变性[17]㊂BACE1是Aβ生成途径的限速酶,参与多种神经退行性病变的发生与发展,在血管性痴呆患者的脑组织中BACE1水平明显高于正常人群[18]㊂Huang等[19]研究,采用丹参酮IIA(10mg/kg)治疗Aβ25⁃35诱导的神经炎症大鼠模型,结果发现,丹参酮IIA能显著改善大鼠的学习㊁记忆功能,作用优于间充质干细胞,还能减轻大鼠海马区神经元的病理损伤(神经元模糊不清㊁细胞边界不清㊁黑暗细胞核等),显著降低BACE1㊁淀粉样前体蛋白㊁蛋白酶体抑制剂1(proteasome inhibitor1,PS1)的mRNA的表达,降低海马体中IL⁃1㊁IL⁃4㊁IL⁃10和TNF⁃α的表达,下调BACE1㊁PS1和Aβ蛋白质的表达,其机制与丹参酮IIA下调BACE1表达以减轻神经炎症有关㊂2.3 丹参活性成分通过调控NF⁃κB和IκB的活性减轻神经损伤NF⁃κB是炎症反应的关键调节基因,在脑缺血或脑组织损伤是,可由多种信号通路激活,介导多种炎症因子的分泌,加重神经炎症损伤[20]㊂IκB能调节NF⁃κB的活性,IκB磷酸化后可与NF⁃κB的二聚体解离,NF⁃κB被释放后暴露P65亚基,发挥促炎活性[21]㊂周丽等[22]将丹参酮ⅡA(4㊁8mg/kg)用于缺血再灌注损伤大鼠的实验发现,丹参酮ⅡA能呈浓度依赖性减轻脑组织病理学改变,缩小细胞坏死区域面积,显著降低NF⁃κB和IκB的表达,表明丹参酮ⅡA可通过调控NF⁃κB和IκB的活性对脑组织发挥保护作用㊂3 丹参活性成分通过抗氧化作用发挥抗血管性痴呆作用 丹参活性成分能通过抑制氧化应激反应促使突触蛋白恢复,激活低密度脂蛋白受体相关蛋白6 (low density lipoprotein receptor⁃associated protein6, LRP6)/Wnt/β⁃catenin信号通路减轻神经元氧化应激损伤㊂3.1 丹参活性成分通过清除氧化自由基抑制氧化应激反应氧化应激损伤参与多种神经退行性病变进程,脑组织缺血及再灌注均可引起大量氧化自由基和MDA的产生,导致神经元迟发性损害㊂脑组织长期慢性缺血还能引起脑组织中谷氨酸㊁γ⁃氨基丁酸的含量显著降低,加重脑组织代谢障碍,导致认知功能损伤[23]㊂何治等[24]研究证实,将丹参酮ⅡA(2㊁4mg/ kg)用于夹闭颈总动脉建立的血管性痴呆大鼠的实验发现,丹参酮ⅡA能明显缩短逃避潜伏期,提高象限探索时间,改善认知功能和空间记忆能力,显著降低海马组织MDA的水平,提高SOD㊁谷胱甘肽过氧化物酶的产生,增加大鼠海马组织及大脑皮层中谷氨酸㊁γ⁃氨基丁酸的分泌,其机制与丹参酮ⅡA通过抗氧化作用发挥神经保护作用㊂李小楠等[25]运用丹酚酸B(20mg/kg)治疗双侧颈总动脉夹闭建立的血管性痴呆大鼠,结果发现,丹酚酸B能显著降低上台潜伏期和上台总路程,提高穿越站台次数,降低活性氧㊁乳酸脱氢酶㊁MDA的水平,改善海马区神经元形态变化,提高神经突触凹型㊁活性带长度㊁数量㊁弯曲,提高NR2A/B㊁PSD95㊁CREB等突出蛋白的表达,其机制与丹酚酸B抑制氧化应激反应促使突出蛋白恢复有关㊂3.2 丹参活性成分通过LRP6/Wnt/β⁃catenin信号通路抑制氧化应激反应Wnt/β⁃catenin信号通路是参与神经元的增殖㊁发育㊁分化㊁凋亡㊁氧化应激,该信号通路激活能显著减轻神经元氧化应激损伤,改善认知功能障碍,刺激LRP6能进一步促使Wnt/β⁃catenin信号通路激活,对神经组织发挥保护作用[26]㊂叶明灯等[27]将丹参酮B(2㊁4mg/kg)用于颈总动脉缩窄法建立的血管性痴呆小鼠的实验,结果表明,丹参酮B能提高小鼠目标象限停留时间和穿越平台次数,降低海马组织和皮层的MDA水平,提高环球中医药2023年7月第16卷第7期 Global Traditional Chinese Medicine,July2023,Vol.16,No.71479SOD㊁GSH⁃Px的水平,减轻海马区组织细胞皱缩㊁排列紊乱等病理改变,上调Wnt1㊁p⁃LRP6蛋白的表达,其机制与丹参酮B激活LRP6/Wnt/β⁃catenin信号通路抑制神经元氧化应激反应有关㊂4 丹参活性成分通过调节中枢胆碱能发挥抗血管性痴呆作用 神经退行性病变患者认知功能下降与中枢胆碱能神经纤维损伤目前相关,乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)和乙酸胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)共同维持胆碱能的动态平衡,增强ChAT和AChE的活性可对神经系统胆碱能发挥良好保护作用[28]㊂Kong等[14]研究结果还表明,丹参酮IIA (30mg/kg)能提高ChAT活性和ACh水平,降低AChE活性,有助于调节中枢胆碱能系统的活性㊂孔德燕[29]对血管阻断法建立的血管性痴呆大鼠模型,使用4㊁8mg/kg的丹参酮ⅡA治疗,结果显示,丹参酮ⅡA能缩短逃避潜伏期改善大鼠学习记忆功能,延长平台滞留时间改善空间记忆功能,显著减轻海马CAI区组织病理损伤,降低脑组织中一氧化氮㊁一氧化氮合酶的水平,提高AChE㊁ChAT的活性,机制与丹参酮ⅡA改善胆碱能功能对神经系统发挥保护作用有关㊂5 丹参活性成分通过阻止Aβ聚集发挥抗血管性痴呆作用 丹参活性成分能通过自噬及Aβ聚集,降低Aβ的神经毒性,发挥抗血管性痴呆的作用㊂5.1 丹参活性成分通过抑制自噬减轻神经元损伤自噬是指含有神经炎斑块和细胞内tau蛋白缠结的Aβ的积累,自噬功能障碍参与退行性神经病变的发生与发展,自噬激活可促使神经元中细胞内Aβ25⁃35蛋白聚集[30]㊂Zhu等[31]将丹参酮IIA(40㊁80mg/kg)用于Aβ25⁃35诱导的空间记忆障碍小鼠是实验发现,丹参酮IIA能减轻Aβ引起的小鼠逃逸潜伏期的记忆受损,显著增加平台交叉数量,提高海马区及DG区域的神经元数量,提高细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase,ERK)蛋白的表达,上调海马体中蛋白激酶C受体1(protein kinase C receptor1,RACK1)㊁Beclin1的蛋白及基因的表达,表明,丹参酮IIA通过上调pERK/ERK㊁RACK1和抑制自噬来减轻神经元损伤,减轻空间记忆障碍㊂5.2 丹参活性成分通过抑制Aβ聚集减轻神经毒性作用Aβ1⁃42聚集可以对神经元和脑血管内皮细胞造成不可逆的细胞毒性,可引发炎症反应和氧化应激反应,进一步促使神经元损伤,促使细胞凋亡[32]㊂Ding等[33]将隐丹参酮(4㊁20㊁40mg/kg)用于Aβ1-42诱导的血管性痴呆大鼠的实验发现,隐丹参酮呈浓度依赖性抑制Aβ1-42聚集,以降低Aβ颤动,减轻Aβ疏水斑的形成,减轻Aβ结构及外观的改变,呈浓度依赖性抑制Aβ1-42淀粉样蛋白生长,抑制在bEnd.3细胞聚集并抑制TNF⁃α㊁IL⁃1β㊁IL⁃6等炎症介质的释放,降低半胱天冬酶⁃3的活性,表明,隐丹参酮可通过抑制脑血管内皮细胞中的Aβ聚集发挥抗血管性痴呆的作用㊂6 结语血管性痴呆给全人类健康造成极大影响,尽早预防及控制病情发展,对改善患者预后具有重要临床意义[34]㊂近年来中医药在血管性痴呆的防治中取得了良好的效果,丹参及其活性成分对血管性痴呆的防治效果已获得多篇报道证实,可为丹参的临床运用提供了循证支持㊂但也存在多项不足:(1)丹参的活性成分复杂,其单体防治血管性痴呆的作用机制存在一定的差异;(2)丹参活性成分的生物利用度㊁药代特征尚不明确;(3)关于丹参活性成分防治血管性痴呆的报道多为基础实验研究,对人体血管性痴呆的疗效尚未明确;(4)临床尚缺乏丹参用于血管性痴呆适应症的新药,对制药工艺也存在一定的考研;(5)丹参活性成分的药物安全性尚未可知㊂以上几点不足为今后的科研工作提供了参考㊂参考文献[1] KUANG H,ZHOU Z F,ZHU Y G,et al.Pharmacologicaltreatment of vascular dementia:a molecular mechanismperspective[J].Aging and disease,2021,12(1):308. 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HYOU1_对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响及其机制
HYOU1对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响及其机制周晨明1，薛岩2，孟丽1，朱艳1，徐彦楠31 河北医科大学大型科研仪器设备共享服务平台，石家庄050017；2 河北医科大学第二医院神经内科；3 河北医科大学教学实验中心摘要：目的 观察内质网分子伴侣复合物缺氧上调基因1（HYOU1）对高糖环境施万细胞自噬和凋亡的影响，并基于ROS /PI3K /AKT 通路探讨相关机制。
方法 培养RSC96细胞，构建HYOU1重组表达质粒，采用随机数字表法将细胞分为高糖组、高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组，三组均以高糖培养，其中高糖+对照质粒组和高糖+HYOU1质粒组分别转染对照质粒和pEGFP -HYOU1质粒。
采用Western blotting 法检测各组细胞中的自噬相关蛋白（LC3、ATG5、ATG12、Beclin1、p62）、JAK /STAT 通路相关蛋白（JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6）、ROS /PI3K /AKT 通路相关蛋白（PI3K 、AKT 、mTOR 、pPI3K 、pAKT 、pmTOR ），采用流式细胞术测算细胞凋亡率，采用RT -PCR 法检测凋亡相关基因Bax 、Bcl -2，采用DCFH -DA 染色检测各组ROS 水平。
结果 高糖+HYOU1质粒组LC3、ATG5、ATG12、Beclin1蛋白表达低于高糖组和高糖+对照质粒组，p62蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组（P 均<0.05）。
高糖+HYOU1质粒组凋亡率、Bax mRNA 表达低于高糖组和高糖+对照质粒组，Bcl -2 mRNA 表达及JAK1、JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、STAT6蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组（P 均<0.05）。
高糖+HYOU1质粒组PI3K 、AKT 、mTOR 、pPI3K 、pAKT 、pmTOR 蛋白表达高于高糖组和高糖+对照质粒组，ROS 水平低于高糖组和高糖+对照质粒组（P 均<0.05）。
脑红蛋白对活性氧的清除作用及其在神经系统疾病中的功能意义
脑 红 蛋 白对 活 性 氧 的 清 除 作 用 及 其 在 神 经 系统 疾病 中的 功 能 意义 术
李 伟光 任 长虹 张成岗
（ 军事 医学科学 院放射 与辐射 医学研究 所 ， 白质组学 国家重点实验室 ， 蛋 北京 １０ ５ ） ０ ８０
电 子 的 氧 原 子 或 原 子 团 ， 常 包 括 超 氧 阴 离 子 通
（ ）过 氧化 氢 （ 等 多种形 式 ， 机体 内具有 ０ 、 ＨＯ） 在
很强 的氧 化反应 能 力 ， 与 各种 生 物 大 分 子 发 生反 易 应而 导致 细胞 和组 织 氧 化 损 伤 。通 常 ， 入 机 体 的 进
国家 重 点 基 础研 究 发 展 规 划 项Ｒ Ｓ Ｏ Ｏ 。Ｒ Ｓ是 机体 正 常代 谢 的 中
间产 物 ， 理状态 下人 体 内 Ｒ Ｓ处 于产 生与 清 除 的 生 Ｏ
动态平衡 中 ， 而此 平 衡 主要 依靠 机 体 内的抗 氧化 系
统进行 维持 。机 体 内过 多 的 Ｒ Ｓ是 产 生 氧 化 应 Ｏ 激 的重要 因素 ， 是致 病 的重要 原 因 ， 也 如神 经系 统退
行性 疾 病 、 中 风 、 瘤 等 ， 此 清 除 体 内过 多 的 脑 肿 因
Ｒ Ｓ或 防止过 多 Ｒ Ｓ的产 生 已成 为预 防神 经 系统 Ｏ Ｏ
一
、
（ ）Ｎ Ｂ在 神经 系统 中 的作 用 一 Ｇ
Ｎ Ｂ是新 发 Ｇ
现 的存 在 于 人 和 小 鼠 脑 部 的 第 三 类 携 氧 珠 蛋 白
（ ｕｍｅｔ 等．２０ ） 与 氧 的亲 和力 较高 （ ５ ２ Ｂｒ ｓｒ ｅ ００ ， Ｐ０
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DOI∶10．13192/j．issn．1000-1719．2015．08．078活性氧在血小板活化和凋亡中的作用机制研究进展朱可馨1，王冰2，王志成3（1．上海中医药大学中药学院，上海201203；2．上海中医药大学教学实验中心，上海201203；3．复旦大学附属华山医院检验医学科，上海200040）
摘要：血小板在血栓与出血性疾病的发生中起重要作用。当血管内皮细胞受到损伤或在病理性血流高剪切力作用下，血小板通过膜表面的各种受体启动信号转导途径，引起血小板活化。活化的血小板相互聚集成团，形成血小板血栓，因此，血小板活化在生理性止血和病理性血栓形成过程中起关键作用。近年来，血小板凋亡逐渐引起研究者的关注。目前，血小板活化和凋亡的分子机制还未完全阐明。很多研究已证实，各种能诱导血小板活化或凋亡的刺激物，能诱导血小板产生活性氧（ＲOS），ＲOS在血小板活化和凋亡中的作用正逐渐引起研究者的关注。文章将主要综述ＲOS在血小板活化和凋亡中作用的最新研究进展。关键词：血小板；活性氧；凋亡；活化中图分类号：Ｒ558文献标志码：A文章编号：1000-1719（2015）08-1575-03
EffectofＲOSinPlateletsActivationandApoptosis
ZHUKexin1，WANGBing2，WANGZhicheng3（1．ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai201203，China；2．ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai201203，China；3．ShanghaiHuashanHospital，Shanghai200040，China）
Abstract：Plateletsplayanimportantroleinthrombosisandhemorrhagicdisease．Whenthevascularendothelialcellisin-juredorunderthehighshearforceofpathologicalbloodflow，theplateletsareactivatedthroughthesignalingpathway，whichisinitiatedbyavarietyofreceptorsonplatelets'membranesurface．Theactivatedplateletsaggregateintoplatelet－monocyteaggre-
·5751·辽宁中医杂志2015年第42卷第8期gates（PMA）andformplateletthromboses．Therefore，theactivationofplateletsplaysakeyroleintheformationofthephysiolog-icalhemostasisandpathologicalthrombosis．Inrecentyears，theplateletapoptosishasgraduallyarousedtheconcernofresearch-ers．Atpresent，themolecularmechanismsofplateletactivationandapoptosishasnotyetbeenfullyelucidated．Manystudieshaveconfirmedvariousstimuliwhichareabletoinduceplateletactivationorapoptosiscouldinducetheplatelettoproducereactiveox-ygenspecies（ＲOS）．AndtheroleofＲOSintheactivationandapoptosisofplateletsisattractingresearchers'attention．Thispa-permainlysummarizesthelatestresearchprogressoftheeffectofＲOSintheplateletsactivationandapoptosis．Keywords：platelets；ＲOS；activation；apoptosis
活性氧是一类具有极高活性的中间产物，其在细胞调控中具有极其重要的作用。活性氧的来源广泛、种类较多。目前，活性氧在血小板活化和凋亡中的作用正逐渐引起研究者的关注。很多研究已证实，各种能诱导血小板活化或凋亡的刺激物，能诱导血小板产生活性氧。本文从活性氧类型、来源、清除，以及活性氧在血小板活化和凋亡中的作用和分子机制方面进行综述。1活性氧的类型活性氧是一个广泛的术语，包括氧自由基和其他任何一种氧原子比O2分子有更强活性的含氧分子的总称［1］，其存在形式分为：以自由基形式存在和不以自由基形式存在。前者包括超氧阴离子、羟自由基等，后者包括过氧化氢、脂质过氧化物等。1.1超氧阴离子超氧阴离子是在生物系统中通过得到电子而被转换为自由基的最常见的微粒［1］。大部分ＲOS的最初来源为超氧阴离子，主要是在呼吸链电子传递过程中生成。其生成后性质不稳定，迅速通过反应转化为过氧化氢或羟自由基。1.2过氧化氢H2O2在细胞内较稳定、易扩散，生成和消除都受到细胞的调控，在细胞的增殖、分化和凋亡过程中具有重要意义。1.3羟自由基羟自由基与任何生物分子都以极快的速度进行反映，反应活性极高，羟基、自由基可能是对生物体危害最大的氧自由基，其来源广泛，超氧阴离子在超氧化物歧化酶（SOD）的作用下生成过氧化氢，可以通过Haber－Weiss反应生成羟自由基。2活性氧的来源细胞内活性氧主要来自NADPH氧化酶、线粒体、解离的一氧化氮合酶、环氧化酶和脂氧化酶等［2］。2.1NADPH氧化酶大量研究认为NADPH氧化酶是体内生成ＲOS的主要酶体。其广泛存在于吞噬与非吞噬细胞质膜上，其表达有一定的组织特异性。生理状态时NADPH氧化酶即保持一定的活性，产生一定量ＲOS，在感受到外界刺激信号时能迅速催化产生更高水平的ＲOS。NADPH氧化酶能够将分子氧通过单电子还原产生过氧化自由基，并以此为基础形成一系列ＲOS产物［3］。2.2线粒体线粒体是大多数细胞活性氧的主要来源。线粒体电子传递过程可以产生以超氧阴离子为主的活性氧自由基，其过程涉及到辅酶QH2细胞色素C还原酶，琥珀酸辅酶Q等。线粒体复合物Ⅰ、Ⅲ的电子传递链是主要的超氧化物产生的潜在位置，孤对电子脱离电子运输链，与分子氧反应而引起氧分子还原导致活性氧不断产生［4］。
2.3解离的一氧化氮
解离的一氧化氮与超氧阴离子结合形成过氧化亚硝酸阴离子，过氧化亚硝酸阴离子可以与氢离子结合，生成过氧化亚硝酸，后者可以分解为羟自由基等。其中亚硝酸阴离子具有较强的细胞毒性，可以诱导线粒体膜通道开放，使线粒体肿胀和去极化，释放内容物。2.4环氧化酶