3.分子生物学专题-2014
分子生物学PPT优秀课件
直接在组织或细胞切片上进行核酸杂交，用于基因定位和表达分析 。
聚合酶链式反应（PCR）
引物设计
根据目标DNA序列设计特异性引物。
PCR反应体系
包括DNA模板、引物、dNTPs和Taq DNA 聚合酶等。
PCR反应程序
包括预变性、退火、延伸等步骤，实现 DNA片段的扩增。
PCR产物分析
如凝胶电泳、测序等，用于产物鉴定和定量 分析。
DNA的复制与修复
半保留复制
DNA双链在复制时解开，每条链作为模板合成新 的互补链
碱基互补配对原则
保证复制的准确性
DNA修复机制
包括直接修复、切除修复和重组修复等，用于纠 正复制过程中产生的错误
PART 03
RNA的结构与功能
REPORTING
RNA的分子组成
01
02
03
核糖核苷酸
RNA的基本组成单位是核 糖核苷酸，由磷酸、核糖 和碱基组成。
发展历程
从20世纪50年代DNA双螺旋结构 的发现开始，分子生物学经历了 飞速的发展，成为现代生命科学 中最为活跃和前沿的领域之一。
分子生物学的研究内容
生物大分子的结构与功能
研究DNA、RNA和蛋白质等生物大 分子的空间结构、构象变化以及结构 与功能之间的关系。
基因的表达与调控
研究基因在转录、翻译等过程中的表 达调控机制，包括转录因子、表观遗 传学修饰等。
REPORTING
基因诊断与治疗
基因诊断
利用分子生物学技术，通过检测 基因序列或表达水平的变化，对 遗传性疾病、肿瘤等疾病进行精
确诊断。
基因治疗
通过导入正常基因或修饰异常基因 ，治疗遗传性疾病、癌症等疾病。
分子生物学专题训练(含答案)
分子生物学专题训练(含答案)分子生物学是研究生物体内分子结构、组成和功能的学科。
以下是一些分子生物学的专题训练题目及其答案。
1. DNA复制问题：DNA复制是指什么？在细胞中是如何进行的？答案：DNA复制是指在细胞分裂过程中，将一个DNA分子复制成两个完全相同的DNA分子的过程。
在细胞中，DNA复制通过酶的作用，在DNA双链上建立一个新的互补链，生成两个完全相同的DNA分子。
2. 基因转录问题：基因转录是什么过程？主要酶有哪些？简要描述转录的过程。
答案：基因转录是指将DNA中的基因信息转录成mRNA的过程。
主要酶有RNA聚合酶和辅助因子。
转录的过程分为三个阶段：起始、延伸和终止。
起始阶段是RNA聚合酶与DNA结合，形成转录起始复合物；延伸阶段是RNA聚合酶沿DNA模板链合成mRNA链；终止阶段是mRNA链与RNA聚合酶和DNA分离，形成终止转录复合物。
3. 翻译过程问题：翻译是指什么过程？主要的遗传密码是什么？简要描述翻译的过程。
答案：翻译是指将mRNA中的核酸序列转译成蛋白质的过程。
主要的遗传密码是以三个核苷酸为一个密码子，共有64种可能的密码子，编码了20种氨基酸和一个终止信号。
翻译的过程分为起始、延伸和终止三个阶段。
起始阶段是在起始密码子AUG的指导下，启动翻译过程；延伸阶段是tRNA带着相应的氨基酸与mRNA上的密码子互补配对，合成蛋白质链；终止阶段是遇到终止密码子时，翻译终止，释放蛋白质。
4. DNA重组问题：DNA重组是指什么过程？主要的DNA重组方式有哪些？简要描述DNA重组的过程。
答案：DNA重组是指在细胞中不同DNA分子之间交换DNA片段的过程。
主要的DNA重组方式有两个：同源重组和非同源重组。
同源重组是指两个同源染色体或同一个染色体上的两个同源DNA片段之间的重组；非同源重组是指不同染色体或同一染色体上的非同源DNA片段之间的重组。
DNA重组的过程包括DNA切割、DNA片段交换和DNA连接三个步骤。
武汉大学分子生物学真题2001-2014汇总.
一.解释概念(20分,每个4分)卫星DNA 复制体逆转座子反式激活因子衰减子与衰减作用三、问答题(50分)1. 说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。
(15分)2. 简述增强子的特点和性质及作用机制。
(10分)3. 简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分)4. DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。
pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。
假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DN**段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10分)武汉大学2002分子生物学三.问答:1.简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分)2.简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分)3.在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分)4. 你正在进行Southern blot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA 从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?(5分)一、下列名词翻译成中文，并简要解释1、Domains and motifs2、Alternative splicing3、Reporter genes4、The PCR cycle5、Restriction mapping6、Multiple cloning sites7、DNA libraries8、Proteomics9、Replicon10、Semi-conservative replication二、简答题(共5题,每题8分,共40分)1、请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。
2013-2014分子生物学章节练习题第5-6章练习题
第五、六章分子生物学研究方法练习题1一、【单项选择题】1.一般的限制性核酸内切酶II作用的特点不包括A.在对称序列处切开DNAB.DNA两链的切点常不在同一位点C.酶切后产生的DNA片段多半具有粘性末端D. DNA两链的切点常在同一位点，E.酶辨认的碱基一般为4-6个4.下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的A.从特定组织或细胞中提取mRNAB.将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中,C.用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD.用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNA5.限制性核酸内切酶的通常识别序列是A.粘性末端B.RNA聚合酶附着点C.回文对称序列,D.多聚腺苷酸E.甲基化的“帽”结构9.基因工程的操作程序可简单地概括为A.载体和目的基因的分离、提纯与鉴定B.分、切、连、转、筛，C.将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株D.将载体和目的基因接合成重组体E.限制性核酸内切酶的应用11.常用质粒有以下特征A.是线性双链DNAB.插入片段的容量比λ噬菌体DNA大C.含有抗生素抗性基因，D.含有同一限制性核酸内切酶的多个切口E.不随细菌繁殖而进行自我复制14.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是A.大肠杆菌表达体系B.原核表达体系C.酵母表达体系D.昆虫E.哺乳类细胞表达体系，18.在分子生物学上“重组DNA技术”又称为A.酶工程B.蛋白质工程C.细胞工程D.发酵工程E.分子克隆技术22.基因组代表一个细胞或生物的A.部分遗传信息B.整套遗传信息，C.可转录基因D.非转录基因E.可表达基因25.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是A.化学合成法B.基因组文库法C.cDNA文库法D.PCRE.差异显示法27.PCR主要的酶是A.DNA连接酶B.反转录酶C.末端转移酶D.碱性磷酸酶E. Taq DNA聚合酶28.重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.DNA连接酶D.RNA连接酶E.限制性核酸内切酶30.最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是A.营养互补筛选B.抗药性筛选，C.免疫化学筛选D.PCR筛选E.分子杂交筛选33.用于重组DNA的限制性核酸内切酶，识别核苷酸序列的A.正超螺旋结构B.负超螺旋结构C.α-螺旋结构D.回文结构，E.锌指结构58、基因治疗是指A．对有基因缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的B．把健康的外源基因导入到有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的C．运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常D．运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的93．PCR实验的特异性主要取决于A．DNA聚合酶的种类B．反应体系中模板DNA的量C．引物序列的结构和长度D．四种dNTP的浓度E．循环周期的次数94．基因剔除（knock out）的方法主要被用来研究A．基因的结构B．基因的功能C．基因的表达D．基因的调控E．基因的突变95．反义核酸作用主要是A．封闭DNA B．封闭RNAC．降解DNA D．降解DNA E．封闭核糖体的功能105. 酵母单杂交技术是分析【】的实验系统。
分子生物学(全套课件557P)
分子生物学（全套课件557P）简介分子生物学是研究生物分子结构、功能和相互作用的学科。
它涉及到核酸、蛋白质和其他生物分子的研究，以及它们在细胞和生物体中的功能。
本文档是一套全面的分子生物学课件，共有557页。
本课件旨在帮助读者系统地了解分子生物学的各个方面，包括基本的分子生物学原理、实验技术、研究方法以及应用等。
目录1.第一章：分子生物学概述2.第二章：DNA结构与功能3.第三章：RNA结构与功能4.第四章：蛋白质结构与功能5.第五章：基因表达调控6.第六章：基因突变与遗传变异7.第七章：分子生物学实验技术8.第八章：分子生物学研究方法9.第九章：分子生物学的应用领域第一章：分子生物学概述1.1 什么是分子生物学分子生物学是研究生物体内分子的结构、功能以及相互作用的学科。
它涉及到DNA、RNA、蛋白质等生物分子的研究，以及它们在细胞和生物体中的功能。
1.2 分子生物学的历史与发展分子生物学起源于20世纪50年代，当时发现DNA是物质遗传信息的携带者后，科学家们开始研究DNA的结构和功能，从而奠定了现代分子生物学的基础。
1.3 分子生物学的重要性分子生物学的研究对于了解生命的本质和机理至关重要。
它不仅有助于解释遗传现象，还可以揭示细胞的结构、功能和调控机制，甚至为疾病的诊断和治疗提供理论基础。
2.1 DNA的组成与结构DNA是由基因序列组成的生物分子，它由核苷酸组成。
本节将介绍DNA的基本结构、双螺旋结构和碱基对的配对方式。
2.2 DNA复制与遗传信息传递DNA复制是细胞分裂过程中最重要的事件之一，它确保了遗传信息的传递和稳定性。
本节将介绍DNA复制的过程和机制。
2.3 DNA修复与突变DNA在生物体内容易受到各种外界因素的损伤，因此细胞拥有多种修复机制来修复DNA损伤。
本节将介绍DNA修复的方式和维护基因组稳定性的重要性。
3.1 RNA的种类与功能RNA是DNA转录的产物，它在细胞内发挥着多种功能，包括mRNA的编码信息传递、tRNA的氨基酸运载和rRNA的构建核糖体等。
分子生物学专题试题题库
《分子生物学》专题题库专题一分子生物学总论一、名词解释1．重组DNA技术：将不同的DNA片段按照人们的设计定向连接起来，在特定的受体细胞中与载体同时复制并得到表达，产生影响受体细胞的新的遗传性状。
2. 中心法则：是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质的转录和翻译的过程，以及遗传信息从DNA传递给DNA的复制过程。
3. gene：生物体携带和传递遗传信息的基本单位。
产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。
二、单项选择题1. 证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是：( )A. 从被感染的生物体内重新分离得到DNA,作为疾病的致病剂B. DNA突变导致毒性丧失C. 生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能D. DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子E. 真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代2. 1953年Watson和Crick提出：( )A. 多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋B. DNA的复制是半保留的，常常形成亲本—子代双螺旋杂合链C. 三个连续的核苦酸代表一个遗传密码D. 遗传物质通常是DNA而非RNAE. 分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变3. 第一个用实验证明“基因”学说的科学家是（）。
A．T. H. Morgan B. Gregor Mendel C. Watson D. Griffith4. 证实DNA是遗传物质的实验描述正确的是( )A、Avery利用灭活S型肺炎链球菌完成的转化实验和Hershey的噬菌体侵染细菌实验B、Griffith的肺炎链球菌感染实验C、Morgan的果蝇染色体实验D、烟草花叶病毒重建实验5. 生物分类学中，将地球生命分成“五界”；在分子生物学中，常将生命分成“三域”（domain)，“三域”是指：A、动物B、细菌C、真核D、古细菌E、植物三、填空题1. 请写出以下简称的英文全称：DNA：deoxyribonucleicacid RNA：ribonucleicacidmRNA：messengerRNA siRNA：smallinterferingRNA四、简答与论述题1．分子生物学的主要研究内容有哪些？分子生物学的主要研究内容包括以下4个方面：DNA重组技术，基因表达调控研究，生物大分子结构功能研究，基因组、功能基因组与生物信息学研究。
《分子生物学全套》ppt课件
分子生物学是一门从子水平研究生 物大分子的结构和功能的科学，主要 关注DNA、RNA和蛋白质等生物大 分子的复制、转录、翻译和调控等过 程。
分子生物学特点
以分子为研究对象，阐明生命现象的 本质；与多学科交叉融合，推动生命 科学的发展；实验技术手段不断更新 ，提高研究效率和准确性。
分子生物学发展历程
分子生物学研究内容及方法
研究内容
包括基因和基因组的结构与功能、DNA损伤与修复、基因表达的调控、蛋白质 组学的研究以及疾病产生的分子基础等。
研究方法
包括基因克隆与表达、蛋白质分离与纯化、PCR技术、基因敲除与敲入、高通 量测序技术、生物信息学分析等。这些方法的应用使得分子生物学研究更加深 入和广泛。
阔前景。
下一代测序技术在分子生物学中应用
下一代测序技术原理
基于大规模并行测序的原理，一次可对数百万至数十亿个DNA分 子进行测序。
测序数据分析
包括序列比对、变异检测、基因表达量分析等，以揭示基因组的结 构和功能。
下一代测序技术的应用
在疾病诊断、个性化医疗、物种鉴定和进化生物学等领域发挥重要 作用。
非编码RNA与疾病关系
非编码RNA异常表达与多种疾病相关，如肿瘤、心血管疾 病等，可作为疾病诊断和治疗的新靶点。
非编码RNA研究前景
随着高通量测序技术和生物信息学发展，非编码RNA研究 将更加深入，为疾病防治提供新思路和新方法。
合成生物学在分子生物学中应用前景
合成生物学概念及研究范畴
合成生物学是一门新兴交叉学科，旨在通过设计和构造新的生物部件、系统和机器来理解 和操控自然生物系统。
RNA产物。
影响因素
包括DNA模板的序列和 结构、RNA聚合酶的活 性和选择性、转录因子
2013-2014分子生物学章节练习题第7-8章练习题
第7-8章基因表达调控之习题一一、【单项选择题1】2、一个操纵子（元）通常含有(A) 数个启动序列和一个编码基因(B) 一个启动序列和数个编码基因(C) 一个启动序列和一个编码基因(D) 两个启动序列和数个编码基因(E) 数个启动序列和数个编码基因4、乳糖操纵子（元）的直接诱导剂是(A) 葡萄糖(B) 乳糖(C) β一半乳糖苷酶(D) 透酶(E)异构乳糖5、Lac阻遏蛋白结合乳糖操纵子（元）的(A) CAP结合位点(B) O序列(C) P序列(D) Z基因(E) I基因6、cAMP与CAP结合、CAP介导正性调节发生在(A) 葡萄糖及cAMP浓度极高时(B) 没有葡萄糖及cAMP较低时(C) 没有葡萄糖及cAMP较高时(D) 有葡萄糖及cAMP较低时(E) 有葡萄糖及CAMP较高时7、Lac阻遏蛋白由(A) Z基因编码(B) Y基因编码(C) A基因编码(D) I基因编码、(E) 以上都不是8、色氨酸操纵子（元）调节过程涉及(A) 转录水平调节(B) 转录延长调节(C) 转录激活调节(D) 翻译水平调节(E) 转录／翻译调节9、大肠杆菌lac operon中，与O序列结合(A) Lac阻遏蛋白(B) RNA聚合酶(C) 环-磷酸腺苷(D) CAP-cAMP(E)异构乳糖10、大肠杆菌lac operon中，与P序列结合(A) Lac阻遏蛋白(B) RNA聚合酶(C) 环-磷酸腺苷(D) CAP-cAMP(E)异构乳糖11、大肠杆菌lac operon中，与CAP结合(A) Lac阻遏蛋白(B) RNA聚合酶(C) 环-磷酸腺苷(D) CAP-cAMP(E)异构乳糖12、大肠杆菌lac operon中，与CAP位点结合(A) Lac阻遏蛋白(B) RNA聚合酶(C) 环-磷酸腺苷(D) CAP-cAMP(E)异构乳糖13、乳糖、阿拉伯糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是A与启动子结合B与DNA结合影响模板活性C与RNA聚合酶结合影响其活性D与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNAE与操纵基因结合14、DNA损伤修复的SOS系统A是一种保真性很高的复制过程B LexA蛋白是一系列操纵子的阻遏物C RecA蛋白是一系列操纵子的阻遏物D它只能修复嘧啶二聚体15、以下关于cAMP对原核基因转录的调控作用的叙述错误的是A cAMP可与分解代谢基因活化蛋白(CAP)结合成复合物B cAMP-CAP复合物结合在启动子前方C葡萄糖充足时，cAMP水平不高D葡萄糖和乳糖并存时，细菌优先利用乳糖E葡萄糖和乳糖并存时，细菌优先利用葡萄糖17．操纵子学说的创立者是A．Watson & Crick B．Nirenberg C．KrebsD．Jacob & Monod E．Hens Kebs & Kurt Henseleit18．诱导乳糖操纵子转录的诱导剂是A．乳糖B．葡萄糖C．阿拉伯糖D．别乳糖E．AMP19．在乳糖操纵子的表达中，半乳糖的可能的作用是A．作为辅阻遏物结合了阻遏物B．作为阻遏物结合了操纵区C．引物D．使阻遏物变构而失去结合DNA的能力E．该操纵子结构基因的产物20．cAMP在转录的调控元件中作用是A．cAMP转变为CAPB．CAP转变为cAMPC．cAMP-CAP形成复合物D．葡萄糖分解活跃，使cAMP增加，促进乳糖利用来扩充能源E．cAMP是激素作用的第二信使，与转录无关21．原核生物转录起始前-10区的核苷酸序列称为A．TATA box B．CAA Tbox C．增强子D．Pribnow box E．调节子22．与DNA结合并阻止转录进行的蛋白质称为A．正调控蛋白B．反式作用因子C．诱导物D．分解代谢物基因活化蛋白E．阻遏物23．下列哪些不是操纵子的组成部分A．结构基因B．启动子C．阻遏物D．Pribnow box E．操纵子24．转录因子（TF）A．是原核生物RNA聚合酶的组分B．是真核生物RNA聚合酶的组分C．有α、β、γ三个亚单位D．是转录调控中的反式作用因子E．是真核生物的启动子25．转录前起始复合物是指A．RNA聚合酶与TATAA T序列结合B．RNA聚合酶与TA TA序列结合C．σ因子与RNA聚合酶结合D．阻遏物变构后脱离操纵基因的复合物E．各种转录因子互相结合后再与RNA聚合酶、DNA模板结合26．关于锌指的叙述正确的是A．凡含Zn2+的蛋白质均可形成B．凡含Zn2+的酶皆可形成C．必须有Zn2+和半胱氨酸或组氨酸形成配价键D．DNA与Zn2+结合就可形成E．含有很多半胱氨酸通过二硫键形成27．下列说法不正确的是A.酶的共价修饰能引起酶分子构象的变化B.脱甲基化作用能使基因活化C.连锁反应中，每次共价修饰都是对原始信号的放大.D. 启动子和操纵子是没有基因产物的基因28．AATAAA序列是A．原核生物的启动子B．真核生物的启动子C．真核生物mRNA加尾修饰点信号D．原核生物的转录终止信号E．真核生物的外显子、内含子交界序列29．基因表达过程中目前仅在原核生物中出现而真核生物没有的是A．tRNA的稀有碱基B．σ因子C．冈崎片段D．DNA连接酶E．AUG用作起始密码子30．与RNA聚合酶结合，启动转录的是A．操纵子B．调节基因C．启动子D．结构基因E．以上都不是31．以乳糖代替葡萄糖培养细菌时可引起A．诱导B．阻遏C．AB两者都是D．AB两者都不是E．衰减32．顺式作用元件是指A．基因的5’侧翼序列B．具有转录调节功能的特异RNA序列C．基因的5’、3’ 侧翼序列D．具有转录调节功能的特异蛋白质序列E．位于基因侧翼具有转录调节功能的特异DNA序列33．基因表达调控的主要环节是A．基因活化水平B．转录水平C．转录后加工D．翻译起始E．翻译后加工36．构成最简单启动子常见功能组件是A．TATA盒B．CAA T盒C．GC盒D．上游调控序列E．Pribnow box37.转录因子是A.调节DNA结合活性的小分子代谢效应物B.调节转录延伸速度的蛋白质C.调节转录起始速度的蛋白质D.保护DNA免受核酸内切酶降解的DNA结合蛋白E.将信号传递给基因启动子的环境刺激39. 阿拉伯糖(Ara)对阿拉伯糖操纵子中ara BAD基因转录的影响是：A.通过抑制Ara C与DNA的结合而减少转录B.通过DNA弯折(bending)而促进转录C.与Ara C结合，改变其与DNA结合的性质，导致去阻遏作用D.促进CAP与DNA的结合E.在高浓度葡萄糖存在时促进转录40. 色氨酸操纵子中的衰减作用最终导致A.DNA复制的提前终止B.在RNA中形成一个抗终止的发夹环C.在RNA中形成一个翻译终止的发夹环D.RNA polymerase从色氨酸操纵子的DNA序列上解离E.合成分解色氨酸所需的酶42. 基因表达调控可在多级水平上进行，但其基本控制点是：A．基因活化B．转录起始C．转录后加工D．翻译E．翻译后加工49. 阻遏蛋白识别操纵子的A promoterB geneC operatorD intronE exon52.与DNA结合并阻止转录进行的蛋白质通常是A.正调控蛋白B.反式作用因子C.诱导物D.分解代谢基因活化蛋白E.阻遏物53. 色氨酸操纵子调节过程涉及A. 转录水平调节B. 转录延长调节C. 转录激活调节D. 翻译水平调节E. 阻遏蛋白和“衰减子”调节54.当培养基中色氨酸浓度较大时，色氨酸操纵子处于：A.诱导表达B.阻遏表达C.基本表达56. 反式作用因子是指A. 对自身基因具有激活功能的调节蛋白B. 对另一基因具有激活功能的调节蛋白C. 具有激活功能的调节蛋白D. 具有抑制功能的调节蛋白E. 对特异基因转录具有调控作用的一类调节蛋白【单项选择题答案】1.D2.B3.A基因表达的阶段特异性是相对于个体发育的整个阶段的一个概念尤其是指发育阶段性胚胎干细胞、功能干细胞与已经完成分化的细胞的基因表达存在明显的阶段性。
2013-2014现代文理学院分子生物学章节练习题第二章练习题
2013-2014现代文理学院分子生物学章节练习题第二章练习题一、【单选题】1.生物遗传信息传递中心法则是【】A.DNA→RNA→蛋白质B.RNA→DNA→蛋白质C.DNA→蛋白质→RNAD.RNA→蛋白质→DNA2.关于DNA复制的叙述，下列哪项是错误的【】A.为半保留复制B.为不对称复制C.为半不连续复制D.新链合成的方向均为3'→5'3.合成DNA的原料有【】A.dAMP dGMP dCMP dTMPB.dADP dGDP dCDP dTDPC.dA TP dGTP dCTP dTTPD.AMP UMP CMP GMP4.DNA合成时碱基互补规律是【】A.A－UC－GB.T－AC－GC.A－GC－UD.A－GC－T5.关于DNA的复制错误的【】：A包括一个双螺旋中两条子链的合成B遵循新的子链与其亲本链相配对的原则C依赖于物种特异的遗传密码D是碱基错配最主要的来源6.一个复制子是：【】A细胞分裂期间复制产物被分离之后的DNA片段B复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白C任何自发复制的DNA序列(它与复制起始点相连)D任何给定的复制机制的产物(如：单环)E复制起点和复制叉之间的DNA片段7.真核生物复制子有下列特征，它们：【】A比原核生物复制子短得多，因为有末端序列的存在B比原核生物复制子长得多，因为有较大的基因组C通常是双向复制且能融合D全部立即启动，以确保染色体在S期完成复制E不是全部立即启动，在任何给定的时间只有大约15％是有活性的8.下述特征是所有(原核生物、真核生物和病毒)复制起始位点都共有的是：【】A起始位点是包括多个短重复序列的独特DNA片段B起始位点是形成稳定二级结构的回文序列C多聚体DNA结合蛋白专一性识别这些短的重复序列D起始位点旁侧序列是A-T丰富的，能使DNA螺旋解开E起始位点旁侧序列是G-C丰富的，能稳定起始复合物9.下列关于DNA复制的说法是正确的有：【】A按全保留机制进行B接3’→5’方向进行C需要4种dNMP的参与D需要DNA连接酶的作用E都涉及RNA引物的形成F需要DNA聚合酶Ⅰ10.在原核生物复制子中以下哪种酶除去RNA引发体并加入脱氧核糖核苷酸? 【】A DNA聚合酶IIIB DNA聚合酶IIC DNA聚合酶ID外切核酸酶MFlE DNA连接酶8.端粒酶是一种1A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶C.DNA水解酶D.反转录酶E.连接酶19.关于大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的说法错误的是A.催化dNTP连接到DNA片段的5′羟基末端B.催化dNTP连接到引物链上C.需要4种不同的dNTP为作用物D.是由多种亚基组成的不对称二聚体E.在DNA复制链的延长中起主要作用20.在一个复制叉中，以下哪一种蛋白质数量最多A.DNA聚合酶B.引发酶C.SSBD.DNA解链酶E.DNA拓朴异构酶21.着色性干皮病（XP）是一种人类遗传性皮肤病，是因什么缺陷而引起的A.DNA复制B.转录C.转录后加工D.DNA修复E.翻译22.在紫外线照射引起DNA分子的损伤中最常见形成的二聚体是A.C-CB.C-TC.T-TD.T-UE.U-C23.下列对大肠杆菌DNA聚合酶的叙述不正确的是A.DNA-PolⅠ可分为大小两个片段B.DNA-PolⅡ具有3′→5′外切酶活性C.DNA-PolⅢ在复制链延长中起主要作用D.DNA-PolⅢ由4个亚基组成E.以4种脱氧核苷三磷酸作为底物24.下列关于大肠杆菌DNA聚合酶的叙述哪一项是正确的A.具有3′→5′核酸外切酶活性B.不需要引物C.需要4种不同的三磷酸核苷D.dUTP是它的一种作用物E.可以将二个DNA片段连起来【单项选择题参考答案】1.A2.D3.C4.B5.C6.C7.C8.D讲的就是容易解开双链成单链的特征9.D 10.C 11.E 12.C 13.D 14.B 15.C 16.A 17.D 18.D19.A 20.C 21.D 22.C 23.D 24.A 25.B 26.D 27.A 28.B二、【多项选择题】2.下列关于大肠杆菌DNA聚合酶I的叙述哪些是正确的？【】A.该酶能从3’羟基端逐步水解单链DNAB.该酶在双螺旋区具有5’-3’外切酶活性C.该酶在DNA中需要游离的3’-OHD.该酶在DNA中需要游离的5’-OHE.有校对功能4.有关DNA复制时的引物的说法下列正确的有【】A.一般引物是RNAB.催化引物合成的酶称引发酶C.哺乳动物的引物是DNAD.引物有游离的3‘-OH，成为合成DNA的起点E.引物有游离的5‘-OH5.DNA聚合酶I的作用是【】A.修复DNA的损伤与变异B.去除复制过程中的引物C.填补合成DNA片段间的空隙D.将DNA片段连接起来E.合成RNA片段9.下列有关大肠杆菌DNA复制的叙述哪些是正确的？A.双螺旋中一条链进行不连续合成B.生成冈崎片断C.需要RNA引物D.单链结合蛋白可防止复制期间的螺旋解链E.DNA聚合酶I是DNA复制最主要酶10.DNA复制的特点是1A.半保留复制B.半不连续C.一般是定点开始，双向等速进行D.复制的方向是沿模板链的5‘-3’方向E. 一般需要RNA引物17.DNA聚合酶III催化的反应A.作用物为dNTPB.合成反应的方向为5’-3’C.以NAD+为辅酶D.生成磷酸二酯键E.需要DNA模板18.DNA复制的特点是A.半保留复制B.需合成RNA引物C.形成复制叉D.有半不连续性E.合成DNA方向是3’-5’19.关于DNA聚合酶的催化作用有A.DNA pol I在损伤修复中发挥作用B.DNA pol I有去除引物，填补合成片段空隙的作用C.DNA pol III是复制中起主要作用的酶D.DNA pol II是复制中起主要作用的酶E.DNA pol I是多功能酶20.参与原核DNA复制的DNA聚合酶有A.DNA聚合酶IB.DNA聚合酶IIC.DNA聚合酶IIID.DNA聚合酶αE.DNA聚合酶δ24.端粒酶和其他DNA合成酶有何区别？A.从5’-3’方向合成DNAB.酶含有RNA成分C.酶以自身RNA为模板D.以dNTP合成DNAE.是特异的逆转录酶25.DNA的复制作用A.包括用于互相配对成双螺旋的子链的合成B.按照新合成子链与一条亲本链结合的原则C.依赖于物种特异的遗传密码D.是半保留复制E.是描述基因表达的过程【多选参考答案】1.ABCDE2.ABCE3.ABCE4.ABD5.ABC6.AB7.ACE8.ABC9.ABC解释：单链结合蛋白的作用是保持解开的单链不要受到DNA酶的降解，而不是放置解链，本身复制期间就是需要解链的10.ABCE 11.ABC 12.BD 13.ABC 14.ABCE 15. AD注意b选项：不能连接单链游离16.BD 17.ABDE 18.ABCD 19.ABCE 20.AC I针对DNA损伤修复时的复制，切除RNA引物并填补其留下的空,II修复紫外等引起的DNA，即损伤修复,III原核生物DNA复制的主要聚合酶.注意I、II的区别21.ABC 22.ABE 23.ACD 24.BCE 25.BD注意A选项不能是互相，只能是其中一个，所以说是半保留的26.CD 27.AC教材p51，后随链的引发过程往往由引发体来完成，由6种蛋白和引发酶组成，主要是Dna B、C 和Dna G也就是引发酶28.ACDE 29.ABCDE三、【解释名词】（1）DNA半保留复制（2）DNA半不连续复制（3）反转录四、【是非题】1.DNA的半保留复制是由Meselson和Stahl首先证明的。
华中农大预防兽医学博士研究生入学考试病原分子生物学2014考题(回忆版+整理答案)
免疫学复习总结一、名词解释1.毒力岛：是指位于细菌染色体之内、但分子结构与功能有别于细菌染色体的某个或某些毒力基因群，其两端往往有重复序列和插入元件，其G+C mol%含量及密码使用与细菌染色体有明显差异。
2.朊病毒：是指细胞正常蛋白经变构后而获得有致病性的病毒。
大多数哺乳动物的基因组均编码，并在许多组织中特别是神经元以及淋巴内皮细胞中表达。
（注意：virion意为“病毒子”，指具有感染性的病毒颗粒，由外壳蛋白质及其包裹的内部核酸分子组成。
）3.慢病毒：是一群基因组结构和遗传组成，复制的分子机制以及宿主的生物学相互作用相似的反转录病毒，在各自宿主体内引起致死性疾病。
4.病毒样颗粒（virus-like particles，VLP）疫苗：VLP是在形态上与某种真正病毒粒子相同或相似、含有病毒一个或多个结构蛋白、不含病毒核酸物质、不能自主复制，也不具有感染性的空心颗粒，用其制成的疫苗称为VLP疫苗。
该类疫苗可激活DCs等抗原递呈细胞，将其递呈给T，B淋巴细胞，从而有效地诱导机体产生免疫保护反应VLP表面能够重复高密度的表达抗原表位，从而引发强有力的免疫应答。
5.基因疫苗：又称DNA疫苗或核酸疫苗。
实为一种亚单位疫苗，是将外源抗原基因插入细菌质粒，构建成重组质粒，直接种于动物机体，被导入宿主的靶组织中，DNA则表达特异的蛋白抗原，与宿主细胞MHC-Ⅰ类或MHC-Ⅱ类抗原分子结合，刺激免疫识别系统，从而引发特异性体液免疫和细胞免疫应答，使动物获得保护力的一种新型疫苗。
6.基因缺失疫苗：利用基因工程去掉病毒基因组中负责毒力的基因中的某一片段，使其成为缺损病毒株，所制成的一类疫苗。
缺失突变株在自然条件下不易发生返祖成强毒，所以这种突变株是稳定的。
7.重组载体苗：是将编码病原体有效免疫原的基因，插入载体（活的细菌或病毒）基因中，接种后，随这种重组的载体在体内的增殖，大量所需的抗原得以表达。
重组载体苗实质上是一种活疫苗，不过比减毒活疫苗安全性要高。
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– 检测速度快，可同时检测多个样品 – 检测极限低，结果客观可靠 – 可与培养方法结合
非培养方法在发酵乳制品中的应用
所用技术 DGGE DGGE
TTGE
DGGE /TTGE
目标菌 乳酸菌 细菌
细菌
细菌
应用领域 Sicilian干酪 Mozzarella干酪
人工制备干酪
商业干酪
参考文献 Randazzo,2002 Ercolini,2004
China Agricultural University
My Research focuses on genetics of LAB
郝彦玲
Food Science and Nutritional Engineering 21 Oct 2014
郝彦玲
研究方向：乳酸菌遗传与代谢工程 课题组：教育部重点实验室－功能乳制品团队
16S rDNA 生化鉴定 /16S rDNA 生化鉴定 /16S rDNA
参考文献
An Y 等； 孙天松等 An Y 等；熊素云等 孙天松等；Uchidak 等 孙天松等；毕玉海等 孙天松等；毕玉海等 刘芳等；乌日娜等 乌日娜等 孙天松等；吴敬等 孙天松等；乌日娜等 孙天松等；乌日娜等 乌日娜等 Uchidak 等 刘芳等；贺银凤等 乌日娜等；贺银凤等
联系方式
E-mail: haoyl@ Tel: 62737398 13810369359 食品楼 406实验室
We focus on
1 Isolating LAB from different niches 2 Second Metabolite 3 Food grade vector Construction
Ogier,2002
Ogier,2004
DGGE
细菌
Lighvan干酪
Kaflli,2009
DGGE TTGE DGGE /TTGE DGGE /TTGE
细菌 细菌 细菌 细菌
Carbrales干酪 人工制备发酵奶 Zabady发酵奶
原料奶
Florez,2006 Ogier,2002 El-Baradei,2008 Lafarge,2004
实验方案
酸马奶 样品的采集
细菌总DNA 的提取
DGGE图谱的建立
种特异性 PCR鉴定共 迁移条带
利用比对 Marker 鉴定条带
无法比对 条带进行 测序鉴定
系统了解酸马奶中乳酸菌多样性， 为商业发酵剂的开发提供参考
培养于不同 的培养基
分离 纯化
活菌计数， 确定乳酸菌 主要菌属
分子方 法鉴定
为酸马奶中 乳酸菌的开 发奠定基础
实验结果与分析
（一）种特异性PCR方法的建立
酸马奶中可能存在共迁移菌种的确定
优势菌种
L. plantarum L. pentosus
L.helveticus L.acidophilus
• 酸马奶是以鲜马奶为原料，经乳酸菌和酵母等微生 物共同发酵而成酸性乳饮料。
• 酸马奶具有降血压、降血脂和调节胃肠道疾病等医 疗保健功能，研究表明乳酸菌发挥着非常重要的作 用。
(Montanar et al. 1996; Wang et al.2008；Wu et al. 2009)
存在问题：由于缺乏对传统发酵酸马奶中乳酸菌种类 和组成的系统了解，目前尚无法开发出适宜工业化 生产的发酵剂，阻碍了酸马奶工业化生产的进程。
Begley M, et al. Appl Environ Microbiol. 2006,72(3):1729-1738
解决方法：种特异性PCR可以根据编码基因的种 特异性序列设计引物，通过对PCR产物的分析 ，精确鉴定存在共迁移的菌种。
Ogier M, et al. Appl Environ Microbiol. 2002,72(3):1028-1032
4 Stress response mechanism of LAB
1.1 LAB and Bifidobacteria were isolated from the different niches
(1) A traditionally fermented dairy product koumiss Unpasteurized fresh horse’s Milk fermented with LAB and Yeast Enhancing immunity, treating tuberculosis and so on
L. rhamnosus L.delbrueckii L. fermentum L. curvatus
16S rDNA 生化鉴定 /16S rDNA 生化鉴定 /16S rDNA 生化鉴定 /16S rDNA
L. kefiranofaciens 16S rDNA
L. kefiri Ln. Mensenteroides E. facealis
依赖于培养的方法及其局限性
分离纯化得到纯菌
形态学鉴定 生理生化鉴定 分子生物学鉴定
局限性：标准培养基难以完全模拟环境条件，仅可对可培养的细菌 进行研究，因此不能客观全面的反应样品中微生物的组成。
不依赖于培养方法的优点
不依赖于培养方法：
从样品中直接提取微生物总DNA ,利用分子生物学方法对 微生物的种类和组成进行检测。 – 变性梯度凝胶电泳 – 时间温度梯度凝胶电泳 – 末端限制性长度多态性
DGGE 的原理及步骤
原理：片段大小相同、碱基组成不同的双链DNA分子，在 变性剂梯度凝胶电泳时因具有不同的解链温度而滞留于凝胶 的不同位置，最终形成相互分开的谱带。
酸马奶样品 基因组提取
靶基因序列 PCR扩增
DGGE分析
混合DNA扩增产物 （相同大小，不同序列）
共迁移的原因及解决方法
• 共迁移原因：但由于某些菌株的靶基因序列高度 相似，DGGE时会发生共迁移现象，导致无法根 据Marker比对和测序的方法进行鉴定。
阻碍
Байду номын сангаас
酸马奶乳酸菌多样性研究进展
目标菌种
鉴定方法
L. plantarum L. pentosus L.helveticus L.acidophilus L.casei L.paracasei
生化鉴定/ 16S rDNA 生化鉴定 生化鉴定 /16S rDNA 生化鉴定 /16S rDNA 生化鉴定 /16S rDNA 生化鉴定 /16S rDNA