最新天然药物化学实验指导

天然药物化学实验指

导

天然药物化学实验指导

---兰州大学天然药物化学教研室

天然药物化学实验须知

一、每次实验以前，必须预习本实验内容，了解其操作程序和理论要点，切勿盲目进行实验，实验时须准备记录薄一本，随时正确记录每一实验应记的项目。如原料用量，实验时发生的现象，反应结果，产品数量、熔点、沸点、产品纯度等，以作写正式报告的依据。

二、实验所得产品，如不供下一实验用，应交给指导老师，并注明品名、数量、组别、姓名、日期。

三、实验规则

1．实验时不能阅读与本实验无关的书籍，不要高声谈笑，也不能擅自离开，严禁在实验室内吸烟及吃东西。

2．实验室要经常保持整齐清洁，桌上不要乱放无用的仪器与药品。火柴杆、废纸等不要乱抛在地上、废酸、碱液应倒入污水缸中，易燃烧及易挥发的废液应倒入水槽中，并立即用水冲掉。

3．药品、仪器都是国家财产，须节约爱护使用，若有损坏，应填写仪器损坏单，报告指导教师，及时领取，并酌情赔偿。

4．试剂、药品、公用用具，使用后立即放回原处，不可乱放，并应注意不可盖错试剂瓶塞，以免污染试剂。

5．装有易燃性液体的瓶子，不得放在灯火近旁。

6．加热乙醇、乙醚、石油醚、苯等易挥发可燃的液体时，应使用装有冷凝管的烧瓶，在水浴上进行加热，加热前应放入沸石1—2粒，或一端封死的毛细管，防止爆沸冲击，若在加热时未放沸石则应冷却后再加，不可热时追加，添加溶剂时应离开火源，稍冷后再添，并应重新加入沸石。

7．实验过程中，万一遇见溶液着火，应立即用石棉布或其他物品把它盖上，使其隔绝空气而熄灭。

8．实验完毕后，应将用过的仪器洗刷洁净放好，并应指定值班人员将实验室打扫干净，污水缸的废液拿到室外适当地方处理埋掉，离开实验室时，应检查门、窗、水电是否关好。

9．严禁将实验室内的仪器、药品携带室外。

以上须知清严格遵照执行。

实验一薄层色谱(TLC) 实验二从三棵针中提取、分离小檗碱与小檗胺

实验三从洋金花中提取分离东莨菪碱和莨菪碱实验四大黄中蒽醌类化合物的提取分离

实验五芦丁的提取与鉴定实验六甘草酸的提取实验七烈香杜鹃挥发油的含量测定

实验八丹皮酚的提取、分离和制剂鉴别实验九预试验附录一常用溶剂的物理性质附录二常用溶剂的回收及精制方法附录三常用干燥剂性能的说明仪器清单

实验一簿层色谱(TLC)

薄层色谱是色谱法中应用最普遍的方法之一，具有分离速度快，效率高等特点。适用于微量样品的分离鉴定，天然药物化学成分的研究中得到了越来越广泛的应用和发展。

一、实验目的

l、学习并掌握薄层板的制备和使用方法。

2、了解薄层色谱的原理及应用范围。

二、实验原理

薄层色谱是把吸附剂(或载体)均匀地铺在一块玻璃板或塑料板上形成薄层，在此薄板上进行色谱分离，按分离机制可分为吸附，分配，离子交换和凝胶过滤色谱等。

薄层色谱多数情况是一种吸附层析，利用吸附剂对化合物吸附能力的不同而达到分离，吸附剂吸附能力的大小与化合物极性大小有关。化合物极性大，被吸附剂吸附得牢，Rf值小，反之，化合物极性

小，Rf值大。一个化合物在某种吸附剂上Rf值的大小主要取决于展开剂的极性大小，即展开剂极性大，化合物Rf值大，展开剂极性小，化合物的Rf值小。

薄层板根据在制备过程中是干法制板还是湿法制板分为二种。干法制板为软板，湿法制板为硬板。

三、实验内容

(一)薄层板的制备

1、干法：取150—200目的色谱用中性氧化铝适量，散布在玻璃板上，用一根推捧匀速地从一端向另一端推进，使吸附剂均匀地在玻璃板上铺成一薄层(如图示)，即可使用，薄层的厚度取决于推棒下层的塑料圈的厚度，一般以0.25mm为宜。

干法铺层方法

干法铺板方法

2、湿法

(1)硅胶G薄层板的制备：称取硅胶G12克，加蒸馏水34毫升，充分搅拌成糊状后，迅速分倒在四块5×20厘米的玻璃板上，铺匀，水平放置，待室温阴干后110℃活化一小时，备用。

(2)硅胶CMC—Na薄层板的制备：称取CMC—Na(羧甲基纤维素钠)0．1克，加l毫升酒精湿润后，溶于17毫升蒸馏水中。立即用力振摇，搅拌(如不溶可加热)全部溶解后，加人过200目筛的层析用硅胶5克，搅拌成糊状，均匀地铺在两块5×20厘米的玻璃板上，水平放置，室温阴干后，于110℃活化一小时，备用。

(二)薄层色谱

l、制板：取150目—200目的层析用氧化铝按上述干法制成薄层板(5×20厘米)一块。

2、点样：取管口平整的毛细管三支分别吸东莨菪碱，其若碱及二者混合的氯仿溶液，点在上述制好的薄层板上，点的直径一般为2—3毫米，点与点之间的距离一般为1．5厘米左右，样品点在离薄层一端为2厘米左右的起始线上，离板边约有l厘米的距离。

3、展开：点样完毕，待溶剂挥干后，用氯仿：丙酮：无水乙醇(8：2：0．5)上行展开，其方法是将薄层板斜放在盛有展开剂的层析槽内，薄板上端有塑料盖垫起使与液面成15。左右的夹角，点有样品的一端浸入溶剂中，深达0．5厘米左右、切勿使溶剂浸没原点，盖好层析槽盖，当溶剂前沿达板的另一端1厘米左右时，即可取出薄层板，标出溶剂前沿位置。

4、显色：取出的薄层板，立即喷洒改良碘化铋钾试剂，使其显色，计算Rf值。

Rf= 起始线到样品斑点中心距离

起始线到剂剂前沿距离

四、实验说明及注意事项

1、制薄层板用的玻璃应干燥、清洁。

2、干法制板时，推捧用力要均匀，中间不要停顿，否则薄层厚度不均匀。

3、点样时，样品浓度不要太大，点样量也不要太多，否则斑点拖尾。若样品浓度太小，可待第一次点样溶剂挥干后再第二次点样。

4、薄层板放于层析槽时，注意切不可将原点浸入溶剂中。

5、层析后的薄层板，取出立即喷洒显色剂，否则溶液挥干后喷显色剂会吹散吸附剂。但湿法制的硬板就不必如此。

6、湿法制的硬板活化的温度和时间可依需要调整：一般检识水溶性成分或一些极性大的成份，所用的薄层板只在空气中自然干燥，即可使用。

五、参考文献

1、中国医学科学院药物研究所：薄层层析及其在中草药分析中的应用，1978。

2、 E．菜德雷，M•菜德雷合著：陶义训、马立人、夏寿宣合译：色谱法。

3、全国高等医药院校试用教材：中草药化学，1980。

4、 Stahl E，td，Thin Layer Chromatography 2nd edu，1969。

5、 E． Heffmann：Chromatography 3nd edu 1975。