基因重组
基因重组知识点总结
基因重组知识点总结一、基因重组的原理基因重组的原理是在DNA分子水平上，通过切割和重组DNA的不同片段，形成新的DNA 序列。
基因重组可以实现DNA片段的互换、合并、删除或插入操作，从而改变DNA的序列，并且产生新的基因组合。
基因重组的原理主要涉及到DNA的结构、酶的作用和DNA片段的互补配对等方面。
1. DNA的结构DNA是由四种碱基（腺嘌呤A、胞嘧啶T、鸟嘌呤G、胞嘧啶C）组成的双链分子，它的结构在空间上呈现出双螺旋的形态。
每一条DNA链都由磷酸和脱氧核糖组成，而这些单元组成了DNA的主干。
而碱基对（A-T、G-C）则连接了两条DNA链，形成了DNA的双链结构。
2. 酶的作用在基因重组的过程中，酶起着至关重要的作用。
例如，核酸酶能够切割DNA分子，使得DNA的特定区域被切割成不同的碱基序列；而连接酶则能够将不同的DNA片段连接起来，形成新的DNA序列。
此外，一些重组酶还可以通过其催化作用来促进DNA分子的重组。
这些酶的作用在基因重组的过程中起着关键的作用。
3. DNA片段的互补配对在DNA重组的过程中，DNA分子的互补配对起着非常重要的作用。
DNA的双链结构使得其具有互补配对的性质，即A会与T形成氢键，而G则会与C形成氢键。
这种互补配对性质使得DNA片段能够通过互补配对的方式进行连接或重组。
综上所述，基因重组的原理涉及到DNA的结构、酶的作用和DNA片段的互补配对等方面。
通过这些原理，我们可以实现DNA分子中某一段DNA片段的与同一DNA分子或不同DNA分子中的另一段DNA片段重新组合成新的DNA序列。
二、基因重组的方法基因重组的方法主要包括DNA重组、基因克隆、基因组编辑和CRISPR-Cas9等。
这些方法可以分别用于不同的应用领域，并且在现代生物技术中有着重要的价值。
1. DNA重组DNA重组是指通过DNA片段的切割和重组来形成新的DNA序列。
这一方法主要依赖于核酸酶的切割作用和连接酶的连接作用。
基因重组方式
基因重组方式
嘿，大家知道吗，基因可是个超级神奇的东西！今天咱就来聊聊基因重组方式。
基因重组就像是一场基因的大变身游戏。
有一种常见的方式叫减数分裂中的重组。
就好比搭积木，染色体在减数分裂时重新组合，产生新的基因组合。
这就像抽奖一样，每次都可能有不同的结果，是不是很有意思？
还有一种呢，是基因工程带来的重组。
这就像是我们人类当导演，把不同的基因片段拼接到一起，让生物拥有我们想要的特性。
比如说，我们可以把能产生某种有用蛋白质的基因放到细菌里，让细菌帮我们大量生产，这多厉害呀！
再说说同源重组，这就像是基因世界里的“交换生”活动。
相似的基因片段会相互交换位置，从而产生新的基因组合。
想象一下，两个差不多的拼图块换了一下位置，整个画面就不一样了，基因也是这样哦。
转座子重组呢，就像是基因里的“小调皮”。
这些转座子可以在基因里跳来跳去，改变基因的结构和功能。
这不就像一个调皮的孩子在房间里跑来跑去，把东西都弄乱了，但有时候也会带来一些意想不到的变化呀。
基因重组的意义可太大啦！它让生物有了更多的多样性，让世界变得丰富多彩。
没有基因重组，生物可能就一直是老样子，哪来这么多千奇百怪、有趣好玩的生物呢？
基因重组方式真的超级神奇，它让生命充满了无限可能。
我们对基因重组的研究和利用也会越来越深入，未来肯定会有更多让人惊叹的发现和应用！。
基因重组定义
基因重组定义
基因重组是指通过人工手段将不同来源的DNA序列进行拼接、切割、复制等操作，使其产生新的基因组合或改变原有的基因序列，从而达
到改变生物遗传特征的目的。
基因重组技术在现代生命科学领域中具
有非常重要的应用价值，如医学、农业、工业等领域。
在基因重组技术中，首先需要获得所需的DNA序列。
这可以通过多种方法实现，如从细胞中提取DNA、利用PCR扩增特定片段等。
然后，将所需的DNA片段进行切割，并利用特定酶类进行黏合连接。
这样就可以得到一个新的DNA序列，其中包含来自不同来源的基因信息。
在基因重组技术中，还需要使用载体来传递新构建的DNA序列。
常见的载体包括质粒、病毒等。
通过将新构建的DNA序列插入到载体中，并将其导入到宿主细胞中，就可以实现对宿主细胞遗传信息进行修改。
基因重组技术在医学领域中应用广泛。
例如，在治疗某些疾病时可以
利用该技术生产人类蛋白质，如胰岛素、生长激素等。
此外，基因重
组技术还可以用于治疗癌症、遗传性疾病等。
在农业领域中，基因重组技术可以用于改良农作物品种。
例如，可以
将一些抗虫、抗草药性较强的基因插入到作物中，提高其抗虫、抗草
能力，从而提高产量和质量。
在工业领域中，基因重组技术也具有广泛的应用。
例如，在生产某些化学品时可以利用该技术生产酶类和蛋白质等物质。
总之，基因重组技术是一项非常重要的现代生命科学技术。
通过该技术可以实现对生物遗传信息的修改和改良，从而为人类社会带来巨大的经济和社会效益。
生物进化中的基因重组与基因改造
生物进化中的基因重组与基因改造基因重组和基因改造是生物进化过程中的两个重要方面。
基因重组指的是基因在个体或群体中重新组合或重排，而基因改造则是通过不同的方式对基因进行修改和调整。
这两个过程在进化中发挥着关键作用，对物种的适应性和多样性起到了重要影响。
一、基因重组基因重组是指在生物个体的繁殖过程中，两个基因座之间的连锁关系发生改变，导致后代个体携带不同的基因组合。
这种重新组合的结果可能会带来新的基因型和表型，从而为种群的进化提供了新的可能性。
在性繁殖过程中，基因重组通过交叉互换和染色体分离来实现。
交叉互换发生在有丝分裂的减数分裂过程中，通过染色体间的互换，使得两个非姐妹染色单体上的基因在一个染色体上重新组合。
染色体分离指的是两个基因座之间的基因在减数分裂过程中以不同的方式分离到两个子细胞中，由此产生不同的遗传组合。
基因重组的结果是使得基因组得以重新组合和重排，从而在后代中产生新的基因型和表型。
这种新的基因组合可能会产生新的适应性特征，使得物种能够更好地适应环境的变化。
同时，基因重组也为物种的遗传多样性提供了基础，增加了物种的适应性和进化潜力。
二、基因改造基因改造是指通过人为手段对基因进行修改和调整，以实现特定目的的遗传改变。
基因改造可以通过基因工程技术或其他手段来实现，它使得人们能够对生物体的基因进行精确的控制和调节。
基因改造的应用范围非常广泛。
在农业领域，基因改造可以使植物具有抗病性、抗虫性和耐逆性等特点，从而提高农作物的产量和品质。
在医学领域，基因改造可以用于治疗遗传疾病、生产重要药物和研发新的治疗方法。
此外，基因改造还可以用于环境修复、能源生产和工业生产等方面。
然而，基因改造也存在一定的争议和风险。
在农业领域，转基因作物的安全性和环境影响一直备受争议。
在医学领域，基因治疗的长期效果和潜在风险也需要进一步的研究和验证。
因此，在进行基因改造时，必须进行严格的评估和监管，确保其安全性和可行性。
三、基因重组与基因改造的关系基因重组和基因改造是生物进化过程中密切相关的两个方面。
基因突变和基因重组(上课用)
汇报人姓名
汇报时间：xx月xx日
2022
Anuanl Work Summary Report
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基因突变的原因和影响
如紫外线、化学物质、病毒等可以引起基因突变。
自然因素
如辐射、化学诱变剂等可以引起基因突变。
诱变因素
某些基因突变与遗传因素有关，如某些遗传性疾病。
遗传因素
基因突变可以导致遗传性疾病的发生，如镰状细胞贫血症；也可以促进生物进化，产生新的物种和生物多样性。
基因突变的影响
基因重组
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同源重组
非同源重组则是指发生在非同源染色体之间的基因交换。这种重组过程通常发生在减数分裂的四分体时期，通过非姐妹染色单体之间的交叉互换实现。非同源重组的结果通常是产生新的非等位基因组合。
非同源重组
重组过程中的关键酶
01
02
03
关键酶3
重组的生物学意义
生物进化 基因重组是生物进化的主要驱动力之一，通过基因重组可以产生新的基因组合，增加生物的适应性和多样性。 生长发育 基因重组在生物的生长发育过程中也具有重要作用，例如在免疫系统的发育和神经系统的发育过程中，基因重组都发挥了关键作用。 遗传性疾病 基因重组也与一些遗传性疾病的发生有关，例如亨廷顿氏病和囊性纤维化等。这些疾病的发生往往与特定的基因重组事件有关。
基因重组
5．下列关于基因突变的叙述中，正确的 下列关于基因突变的叙述中， 是 （ A ） 基因突变发生在DNA DNA的复制过程中 A．基因突变发生在DNA的复制过程中 基因突变都是有害的， B．基因突变都是有害的，不利于生物 进化 C．只有细胞核中的基因才会发生基因 突变 D．同源染色体上的成对基因往往同时 突变
胡桃冠 RrPp
胡桃冠
玫瑰冠
豆冠
单冠
分 析
1、子四代4种表现型对应的 、子四代 种表现型对应的 基因型是什么？ 基因型是什么？ 2、为什么子二代会出现亲 、 代没有的性状？ 代没有的性状？
不同生物的可遗传变异来源： 不同生物的可遗传变异来源： 病毒——基因突变 病毒 原核生物——基因突变 原核生物 基因突变、基因重组、 基因突变、基因重组、 真核生物—— 真核生物 染色体变异
基因突变和基因重组引起的变异有什么区别? 基因突变和基因重组引起的变异有什么区别? 1．基因突变： 基因突变： 基因_________改变， ____(能或否 产生新的基因 _________改变 基因_________改变，它____(能或否)产生新的基因 内部结构 能 能或否) 细胞分裂间期（DNA复制时） 复制时 发生时期： 细胞分裂间期（DNA复制时 发生时期：________________________ ） 特点： 普遍性、 随机性、 ___________、 特点：①普遍性、 ②随机性、 ③___________、 突变率低 多数有害、 不定向性。 ④多数有害、⑤不定向性。 基因重组： 2．基因重组： 基因重新组合 控制不同性状的_____________ _______新基因 _____________， 不产生 新基因， 控制不同性状的_____________，_______新基因，可 基因型 形成新的________ ________。 形成新的________。 发生时期： 有性生殖过程中 发生时期：___________________ 特点： 非常丰富 特点：__________
遗传信息的重组—基因重组
遗传信息的重组—基因重组介绍基因重组是一种重要的遗传工程技术，可用于修改生物体的遗传信息。
通过基因重组，科学家可以将不同的基因片段从一个生物体的染色体中剪切下来，然后插入到另一个生物体的染色体中，从而改变目标生物体的遗传特征。
基因重组的原理基因重组主要涉及DNA的分子技术。
这项技术利用限制酶可以将DNA序列剪切成特定的片段，然后使用DNA连接酶将这些片段重新组装起来。
在基因重组过程中，科学家可以选择不同的片段来重新组合，从而创造出具有特定功能或特征的DNA序列。
基因重组的应用基因重组技术在许多领域都有广泛的应用。
以下是一些常见的应用领域：1.农业：基因重组被用于培育具有抗虫、抗病能力的作物品种。
这些转基因作物能够提高产量和抵抗逆境，有助于解决粮食安全和农业可持续发展的问题。
2.医学：基因重组被用于研发新药物和治疗方法。
通过将特定的基因片段插入到病人的细胞中，科学家可以研究和治疗遗传性疾病、癌症等疾病。
3.工业：基因重组被用于生产工业用途的微生物。
通过改变微生物的遗传信息，科学家可以使其具有特定的代谢能力，从而生产有用的化学品、酶和其他生物产品。
基因重组的伦理和法律问题基因重组技术引发了一些伦理和法律问题。
一些关注点包括对环境和人类健康的潜在影响、基因所有权和知识产权等。
在灵活运用基因重组技术的同时，科学家和决策者也需要考虑伦理原则和法律法规，以确保技术的安全性和可持续性。
结论基因重组是一项激动人心的遗传工程技术，具有广泛的应用前景。
通过合理应用基因重组技术，我们可以更好地解决农业、医学和工业方面的问题，并助力社会的可持续发展。
然而，我们在使用基因重组技术时也要意识到其中的伦理和法律问题，并制定相应的法规和准则来引导科学家和决策者的行动。
参考资料（此处列出参考资料的引用信息，以确保内容的来源准确性）。
基因突变和重组
归纳概念
内涵: DNA分子中发生的碱基对的替换、增添和缺失； 外延: 基因突变某一个基因内部碱基对种类和数目的变化，基因的数目和位置并未改变。 思考： 1、DNA分子中任何一处碱基对的替换、增添和缺失都能称为基因突变吗？ 2、发生基因突变的三种类型对蛋白质的影响程度都是相等的吗？
②产生新基因
引发生物变异
为进化提供原始材料
二 基因重组
“一母生九仔，连母十个样”，这种个体的差异，主要是什么原因产生的?
基因重组
（二）、基因重组的概念和类型: 1、概念:在生物进行有性生殖过程中,控制不同性状的基因的自由组合.
2、类型①基因的自由组合:减I后期时，随着非同源染色体的组合，非等位基因也自由组合。
知识回顾： 什么叫基因？什么叫遗传信息？ 基因与染色体、DNA关系如何？ 基因是具有遗传效应的DNA片段，基因中的脱氧核苷酸排列顺序（碱基顺序）就代表遗传信息。不同的基因，脱氧核苷酸的排列顺序（碱基顺序）不同 DNA是染色体的组成成分，染色体是基因的载体。
表现型
基因型
+ 环境条件
不遗传的变异（如：晒黑的脸色）
DNA的碱基对发生改变后，可能不引起生物性状改变的情况
①发生替换的密码子仍决定原来氨基酸 ②发生改变的生物基因型由AA→Aa ③发生替换后氨基酸改变了，但并影 响蛋白质的功能 ④发生改变的细胞并不表达该基因 ⑤改变发生在非基因片段
跟踪训练 1、若某基因原为303对碱基，现经过突变，成为300个 碱基对，它合成的蛋白质分子与原来基因合成的蛋 白质分子相比较，差异不可能为（ ） A．只相差一个氨基酸，其他顺序不变 B．长度相差一个氨基酸外，其他顺序也有改变 C．长度不变，但顺序改变 D．A、B都有可能 2、在一个DNA分子中如果插入了一个碱基对，则（ ） A.不能转录 B.不能翻译 C.在转录时造成插入点以前的遗传密码改变 D.在转录时造成插入点以后的遗传密码改变
细菌的基因重组方式
细菌的基因重组方式
细菌的基因重组方式主要有四种，分别是：
1.转化：指细菌通过细胞膜摄取周围环境中的DNA体段，并通过重组将其整合到
自身染色体中的过程。
2.接合：指DNA从活的供体细胞转移至受体细胞的过程。
在这个过程中，供体自
身的DNA在相应位点单链断开，以断开处作为起点向受体细胞转移。
转移进去的单链DNA在受体中复制，当接合中断后，形成的供体DNA以双链形式与受体的染色体DNA 进行同源联会，最后供体DNA的一条单链组合到受体的染色体DNA，形成一段异源双链区。
3.转导：以噬菌体为媒介所进行的细菌遗传物质重组的过程。
4.原生质体融合：细菌基因重组的另一种方式。
这些过程都涉及到细菌从外源取得DNA，发生基因重组合，引起原有基因的改变而导致的变异，称为基因转移。
这些基因重组方式在细菌进化和适应环境过程中起着重要作用。
高中基因重组的概念
高中基因重组的概念什么是基因重组基因重组是指利用基因工程技术，人为地将不同来源的DNA片段重新组合，创造新的基因组合，来改变生物的遗传特性的过程。
通过对基因的重组，科学家们可以选择特定的基因来增强生物体的某种特征或功能，同时也可以消除或减弱某些不需要的特征。
基因重组的意义基因重组使得科学家们能够更加深入地研究基因和生物体的关系，对于遗传学的研究起到了重要的推动作用。
通过基因重组技术，科学家们可以比较和分析不同基因组合对生物体的影响，进一步理解基因的功能和相互作用。
此外，基因重组还可以应用于农业、医学和工业等领域，为人类社会的发展带来了许多潜在好处。
基因重组的方法1. PCR（聚合酶链式反应）PCR是一种用于复制和扩增特定DNA片段的技术。
通过PCR，科学家们可以从生物体中提取DNA，并针对所需的特定基因片段进行扩增，以获取足够数量的DNA用于后续的基因重组实验。
2. 限制性内切酶切割限制性内切酶是一类酶，能够在DNA的特定序列部位切割。
科学家们可以选择特定的限制性内切酶来切割不同的DNA片段，然后将这些片段进行重组。
通过不同的酶切位点组合，可以得到各种不同的基因组合。
3. 连接酶连接酶是一类能够将DNA片段连接在一起的酶。
在基因重组实验中，科学家们可以使用连接酶将切割后的DNA片段重新组合，形成新的基因组合。
4. 转化和转染当需要将重组后的DNA导入到细胞中时，科学家们常常使用转化或转染技术。
转化是指将DNA导入到细菌等单细胞生物中，而转染则是指将DNA导入到植物、动物等多细胞生物的细胞中。
通过转化或转染，科学家们可以将重组后的基因导入到目标生物体中，使其表达新的特性或功能。
基因重组的应用基因重组技术在多个领域都有广泛的应用，下面列举了一些常见的应用领域：农业领域基因重组技术可以用于改良农作物的遗传特性，使其具有抗虫、抗草害、耐盐碱等特性。
这样可以提高农作物的产量和抗逆性，减少对化学农药的依赖，从而实现可持续农业发展。
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DNA Recombination and Recombinant DNA technology
目录
一、DNA的重组
DNA Recombination
概述
*自然界常见的基因转移和重组 *基因重组操作的基本概念
目录
（一）、自然界常见的基因转移和重组
1、同源重组 (homologous recombination)
目录
转座子
C 基因
目录
（二）、基因重组操作的基本 概念
目录
1、DNA克隆
克隆(clone) 来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。 获取同一拷贝的过程称为克隆化(cloning)， 即无性繁殖。
目录
技术水平：分子克隆(molecular clone) (即DNA 克隆) 细胞克隆
器官克隆
个体克隆（动物或植物）
DNA) 。
目录
2、基因工程(genetic engineering) —— 实 现基因克隆所用的方法及相关的技术工作称基
因工程，又称重组DNA工艺学。
目的 ① 分离获得某一感兴趣的基因或DNA（或
RNA）
② 获得感兴趣基因的表达产物（蛋白质）
目录
二、重组DNA技术
DNA Recombination Technique
①
反转录酶 多聚核苷酸激酶 末端转移酶 碱性磷酸酶
催化多聚核苷酸5´羟基末端磷酸化，或标记探针 在3´羟基末端进行同质多聚物加尾 切除末端磷酸基
目录
* 限制性核酸内切酶
定义 限制性核酸内切酶是一类能识别特异 DNA 序
列, 并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核
酸内切酶(特殊的核酸水解酶）。
Bam HⅠ GGATCC CCTAGG G GATCC + CCTAG G
目录
目录
例2：细菌的特异位点重组
沙门菌H片段倒位决定鞭毛相转变。
目录
沙门菌H片段倒位决定鞭毛相转变 DNA 启动序列 启动序列
hin
H2
I
H1
H2鞭毛素
Hin重组酶 阻遏蛋白 H2 I H1 H1鞭毛素
目录
hin
转位片段
5、转座重组
大多数基因在基因组内的位臵是固定的，
但有些基因可以从一个位臵移动到另一位 臵。这些可移动的DNA序列包括插入序 列和转座子。 跳跃基因 由插入序列和转座子介导的基因移位或重 排称为转座(transposition)。
目录
当病毒从被感染的（供体）细胞释放出 转导：
来、再次感染另一（供体）细胞时，发生在
供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因
重组即为转导作用(transduction)。
转染：通常是一种特殊的转化，真核生物细胞对任何一 种裸露的DNA的吸收都称为转染。
目录
例 λ噬菌体的生活史
溶菌（裂解）生长途径 (lysis pathway) 溶源菌生长途径 (lysogenic pathway)
轻链的基因片段：
L V J C
重链的基因片段：
L V D J C
目录
L 、代表前导片段 V、代表可变片段 J、代表连接片段 D、代表多样性片段 C、代表恒区片段
编码可变区
目录
目录
免疫球蛋白基因的重排
免疫球蛋白 (Ig) ，由两条轻链 (L 链 ) 和两 条重链(H链)组成，分别由以下不同的基因族 编码，如Ｖ基因含 200~1000 个外显子，Ｄ： 10~12 ； J ： 4 个，其中 D 决定抗体多样性， VDJ结合编码重链可变区，在DNA水平。
目录
1）、插入序列转座
插入序列(insertion sequences, IS)组成：
• 二个分离的反向重复(inverted repeats, IR)序列 • 或特有的正向重复序列 • 一个转座酶（transposase)编码基因（约
750~1500bp）
IR
Transposase Gene
目录
目录
在V片段的下游，J片段的上游以及D片段的两侧均存在保守的重组信号 序列(recombination signal sequence, RSS)。
C区
5‘
V区
D区
J区
目录
附： 不同抗体基因片段的剪裁重排与连接
CACAGTG(12/23)ACAAAAACC GTGTCAC TGTTTTTGG
IR Transposase Gene 有用基因 IR
目录
转 座重组的发现
一段能发生转座的DNA，从染色体的一处转移到另一处， 40~50年代，美 M.Barbara （巴巴拉）发现了第一个转座元 件，印度玉米，粒的颜色不一样，红，黄，斑点，纯白等，称 其有稳定的变异，她证明决定玉米颜色的基因是称C基因座，如 果玉米是白色，则该基因有变异，是因为插入了转座子，改变 了该基因的序列，使基因失活，如果玉米粒恢复颜色，说明该 转座子已经转移，C基因恢复正常，合成色素。
目录
免 疫 球 蛋 白 基 因 重 排 过 程
间插DNA V片段
RSS
单链切开
OH
RSS
RAG1 RAG2
J片段
OH 分子内转酯反应
单链切开 转移核苷酸 修复、连接
V
J
目录
3、细菌的基因转移与重组
（1）、接合作用
当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接 触时，质粒DNA从一个细胞（细菌）转移至 另一细胞（细菌）的DNA转移称为接合作用 (conjugation)。
内切酶 (recBCD)
5´ 3´ 3´ 3´
3´ 5´ 5´ 3´
DNA 连接酶
5´ 3´ 3´ 5´
Holiday中间体
3´ 5´ 5´ 3´
目录
5´ 3´ 3´ 5´
Holiday中间体
3´ 5´ 5´ 3´ 5´ 3´
3´ 5´ 5´ 3´ 3´ 5´
内切酶 (ruvC)
5´ 3´ 3´ 5´
内切酶 (ruvC)
3´ 5´
3´ 5´
3´ 5´
5´ 3´
DNA 连接酶
3´
5´ 3´
5´ 3 ´
5´
5´
3´
3´ 5´ 拼 接 重 组 5´3´ 体
片 5´ 段 3´ 重 组 体 5´
3´
DNA 连接酶
3´ 5´
3´ 5´
目录
拼接重组体、（见模型图左边产物）： 重组体异源双链区的两条链来自不同亲本 DNA。
目录
质粒 —— 细菌染色体外的小型环状双链DNA分子
可编码致育因子，即性鞭毛蛋白也称F 因子(F factor) 发挥接合作用
目录
目录
（2）、转化、转导与转染作用
转化作用：
通过自动获取或人为地供给外源 DNA 如 基因工程操作），使细胞或培养的受体细胞 获得新的遗传表型，称为转化作用
(transformation)。
基因片段 重组信号序列
重链 (IgH) 基因的 V-D-J 重排和轻链 (IgL) 基 因的 V-J 重排均发生在特异位点上。在 V 片 段的下游， J 片段的上游以及 D 片段的两侧 均存在保守的重组信号序列 (recombination signal sequence, RSS)。能识别重组信号参 与 重 组 的 重 组 酶 基 因 rag (recombination activating gene)共有两个，分别产生蛋白质 RAG1和RAG2。
相关的工具酶与载体
目录
（一）、重组DNA技术所用工具酶
限制性核酸内切酶
DNA聚合酶Ⅰ
逆转录酶 T4DNA连接酶
碱性磷酸酶
末端转移酶 Taq DNA聚合酶 Klenow 大片段等
目录
重组DNA技术中常用的工具酶
工具酶 功 能
限制性核酸内切酶
DNA连接酶 DNA聚合酶Ⅰ
识别特异序列，切割DNA
IR
目录
• 二个分离的反向重复(inverted repeats, IR)序列 5‘ 如： GTGCTAA TTAGCAC CACGATT AATCGTG
特有的正向重复序列（串联重复）为不同的插入序列所特有
5’
目录
插入序列发生转座的形式： 保守性转座(conservative transposition) 复制性转座(duplicative transposition) 转座子以复制生成的一份拷贝进行转座的方式。
人类基因组计划，转座子占基因组3%
目录
复制型转座（replicative transposition ）作为自身移动的一个部分，IS被复 制，一个拷贝仍然保留在原来的位置 上，而另一个则插入到一个新的部位 ，这样转座过程伴随着IS拷贝数的增 加。
目录
目录
2）、转座子转座
转座子(transposons) ——可从一个染色体 位点转移到另一位点的分散重复序列。 转座子组成： 反向重复序列 转座酶编码基因 抗生素抗性等有用的基因
目录
分类
Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ （基因工程技术中常用Ⅱ型）
作用 与甲基化酶共同构成细菌的限制修 饰系统，限制外源DNA， 保护自身DNA，
犹似高等动物的免疫系统。由于限制酶的出现
方有基因重组技术的发展。
目录
目录
BamH I
目录
命名
EcoRⅠ
属 种 株 序
E=Escherichia，埃希氏菌属 co=coli，大肠杆菌菌种 R=RY13，菌株名 I=第一个被分离到的内切酶
转导
目录
转导
溶源途径
裂解途径
目录
例：溶菌时，裂解的DNA片段被另一细菌摄取。 （通常称转导）