附录VII霉菌毒素黄曲霉毒素测定方法
黄曲霉毒素的检查方法
几种黄曲霉素检测方法的特点
免疫亲和层析净化高效液相色谱法
• 试样经过甲醇一水提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有 黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此抗体对黄曲霉毒素B1， B2,G1，G2具有专一性，黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。用水 或吐温-20/PBS将免疫亲和柱上杂质除去，以甲醇通过免疫亲和层析 柱洗脱，洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪柱后碘溶液衍生 测定黄曲霉毒素的含量。
由于生物传感器具有选择性高，响应快操作简单携 带方便和适合于现场检测等优点，因此各国科研工作者正 积极探索研制新型生物传感器用于检测黄曲霉素。
研
• 试样经过甲醇一水提取，提取液经过滤、稀释后，滤 液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此 抗联体在对层黄析曲介霉质毒中素的B抗1，体B上2,G。1，用G2水具将有免专疫一亲性和，柱黄上曲杂霉质毒除素去交 .以甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱，加入溴溶液衍生，以 提高测定灵敏度。洗脱液通过荧光光度计测定黄曲霉毒素 (B1+B2+G1+G2)总量。
，经柱层析（它利用吸附剂对不同物质吸附能力的差异，用溶剂将 混合物的组分逐一洗脱分离的一种分离方法）净化后，再在薄板 上展开后分离，利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点 的强弱与标准比较确定其含量，对于一些组分很复杂的试 样要双向展开，才能获得较高的灵敏度
• TLC法设备简单，检测费用低，但操作繁琐费时，萃取和 净化效果不理想，灵敏度差，对操作人员的身体健康存在 较大程度的危害
质，使其被检测到。例如将发色基团或荧光基团键合到样品中去，多极放大检测灵 敏度 柱后衍生系统：有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学 衍生化法 免疫亲和柱：基于抗原抗体反应，特异性抗体连接在柱体内，选择性吸附样品中的 待检物，杂质不被吸附，流出柱外，柱上结合的目标物再被特定的洗脱液洗下来， 可以用于液相色谱(HPLC)分析或者ELISA含量测定，是一种高效的前处理柱。
食品中黄曲霉毒素检测方法概述
食品中黄曲霉毒素检测方法概述黄曲霉毒素是由黄曲霉菌（Aspergillus flavus和Aspergillus parasiticus）产生的一类有害物质，可存在于多种食品中，包括谷物、豆类、坚果、麦芽、果蔬等。
长期摄入含有黄曲霉毒素的食品可能对人体健康造成严重影响，如致癌、免疫毒性、肝毒性等。
对食品中的黄曲霉毒素进行检测具有重要意义。
目前，根据国内外相关标准和技术，已经发展了各种不同的黄曲霉毒素检测方法。
常用的黄曲霉毒素检测方法主要包括物理方法、生化方法和分子生物学方法。
一、物理方法：1. 目视法：通过观察食品外观和质地等特征，判断食品是否受到黄曲霉毒素污染。
这种方法简单易行，但只适用于一些直观的食品，如坚果。
2. UV检测法：利用紫外光的特性，根据黄曲霉毒素的吸收特征，通过分析样品吸收的紫外光谱，间接判断样品中黄曲霉毒素的含量。
二、生化方法：1. 水溶性黄曲霉毒素试纸法：将食品样品与特定试剂反应，产生特定的颜色反应，通过颜色的变化判断样品中黄曲霉毒素的阳性与阴性。
这种方法操作简单、快速，可用于野外快速检测，但精确度有限。
2. 高效液相色谱法（HPLC）：通过将样品中的黄曲霉毒素分离和定量测定，实现样品中黄曲霉毒素的检测。
HPLC方法精确度高，可靠性强，被广泛应用于黄曲霉毒素的检测与分析。
三、分子生物学方法：1. PCR法：利用聚合酶链反应（PCR）技术，通过选择性引物扩增样品中黄曲霉毒素基因的特异序列，最终实现对黄曲霉毒素的检测。
2. 免疫学方法：包括酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫扩散法。
ELISA法通过特异性抗体与黄曲霉毒素结合，形成抗原-抗体复合物，通过测定复合物的光学密度来判断样品中黄曲霉毒素的含量。
总结而言，食品中黄曲霉毒素检测方法多种多样，根据不同的需求可以选择适当的方法进行检测。
无论采用何种方法，都必须满足准确、快速、灵敏、可靠的检测要求，以确保食品的安全性。
食品中黄曲霉毒素检测方法概述
食品中黄曲霉毒素检测方法概述黄曲霉毒素是一种由黄曲霉属真菌产生的毒素，它主要存在于一些谷物和豆类等食品中。
长期摄入过量的黄曲霉毒素会对人体健康造成严重危害，包括肝脏损伤、免疫抑制、致癌和致突变等。
对食品中的黄曲霉毒素进行检测至关重要。
黄曲霉毒素检测的方法通常可以分为生物学法、生化法和物理化学法等多种类型，每种方法都有其特点和适用范围。
本文将对食品中黄曲霉毒素检测的常见方法进行概述，以期加深对这些方法的认识和理解。
一、生物学法1.担体法担体法是一种常见的黄曲霉毒素检测方法，其原理是利用含有特定受体蛋白的担体来结合毒素，然后通过测定结合后的复合物来检测毒素的含量。
担体法可以分为放射性担体法、酶标记担体法和免疫检测法等。
这些方法具有检测灵敏度高、特异性好和操作简便等优点，但也存在着高成本和对设备、试剂和技术人员的要求高等缺点。
2.胚胎法胚胎法是一种利用胚胎生物对黄曲霉毒素进行毒性测定的方法，其原理是将黄曲霉毒素溶液与受精鸡卵一起触发孵化，然后观察胚胎的死亡率和畸形率等指标来评价毒素的毒性。
胚胎法具有检测方法简便、成本低廉和结果可靠等优点，但也存在着操作繁琐、耗时长和对实验条件的要求严格等缺点。
二、生化法1.高效液相色谱法高效液相色谱法是一种利用液相色谱仪对食品样品中的黄曲霉毒素进行定量分析的方法，其原理是首先将样品中的黄曲霉毒素提取出来，然后通过液相色谱技术对其进行分离和检测。
高效液相色谱法具有分析速度快、灵敏度高和分辨率好等优点，但也存在着设备昂贵、操作复杂和需要专业技术人员等缺点。
食品中黄曲霉毒素检测方法有着不同的特点和适用范围，选择合适的检测方法需要综合考虑样品的特性、检测要求和实验条件等因素。
希望本文的概述能够为相关领域的科研工作者和食品生产企业提供一定的参考和帮助，促进食品中黄曲霉毒素检测技朧的进步和完善。
黄曲霉毒素及其检测方法综合介绍
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七、黄曲霉毒素检测——“免疫亲和柱法”方法简介 为了开发一种简单、快速、灵敏、准确的分析方法,美国 VICAM(维康)公司与哈佛大学、麻省理工 学院、约翰－霍普金斯大学、AOAC、FDA、FGIS、美国农业部等著名大学和政府机构通力合作，发 明研制了一系列以单克隆免疫亲和柱为分离手段，用荧光计、紫外灯作为检测工具的分析方法。 该项技术有一下特点： 1、 认证机构广泛，通用性强（见第六项） 2、 分析速度快，一个样品只需 10－15 分钟，其他传统的方法要做到定量分析需要几小时至几天 的时间。 3、 灵敏度高，测定范围广泛（0－300ppb）,用荧光计可以测定 0.1ppb 的黄曲霉毒素 M1，用 HPLC 可以检测出 10ppt 的黄曲霉毒素 M1。 4、 采用单克隆免疫技术，可以特效性地将黄曲霉毒素和其他真菌毒素分离出来，分离效率和回 收率高，正确性和可靠性强。 5、 仪器轻便容易携带，自动化程度高，操作简单，直接读出测试结果，对实验操作人员要求不 高，可以在小型实验场所使用。 6、 不需要剧毒的黄曲霉毒素和其他真菌毒素标准物来标定，所以在整个实验过程中，绝对安全 可靠。 目前，美国花生农场主、加工厂、官方检测机构 90%以上均采用维康技术分析黄曲霉毒素，维康
二、黄曲霉毒素对人体的危害 1、 引起急、慢性中毒：
黄曲霉毒素是剧毒物质，其毒性相当于氰化钾的 10 倍，砒霜的 68 倍。黄曲霉毒素属肝脏毒，除 抑制 DNA、RNA 的合成外，也抑制肝脏蛋白质的合成，黄曲霉毒索引起人类的急性中毒事件， 国内外均有许多报导，最典型的是印度的霉变玉米事件，该事件直接导致了数十人丧生，数百人 患上不同类型的肝脏疾病。 2、 致癌性： 黄曲霉毒素有极强的致癌性，长期摄入黄曲霉毒素会诱发肝癌。它诱发肝癌的能力比二甲基亚硝 胺大 75 倍，是目前公认的致癌性最强的物质之一。另据世界卫生组织报导，黄曲霉毒素含量在 30—50ug/kg 时为低毒，50—100ug/kg 时为中毒，100—1000ug/kg 时为高毒，1000ug/kg 以上为 极毒。鉴于黄曲霉毒素对人类的巨大危害性，我国对其在食品中的含量作了严格规定，其中，乳 制品中黄曲霉毒素最高允许量为 5ug/kg（即 5ppb）。
食品中黄曲霉毒素检测方法概述
食品中黄曲霉毒素检测方法概述黄曲霉毒素是一种有潜在致癌危险的真菌代谢产物，存在于各种食品中，如谷类、坚果、干果、酒精饮料等，对人体健康有很大危害。
因此，黄曲霉毒素检测方法的研究与应用非常重要。
现如今，黄曲霉毒素检测方法主要有以下几种：1.高效液相色谱法（HPLC）此法以无色或微黄色的液体色谱柱作为固定相，溶剂为流动相，实现对黄曲霉毒素含量的检测。
其优点是具有高分离效率、快速、简单等特点，也适用于其他真菌毒素检测。
但其高昂的设备成本和较长的分析时间是不可忽视的缺点。
通过气相色谱的分离机理，将样品中的黄曲霉毒素分离出来，然后使用质谱法或紫外分光光度计进行定量分析。
其优点是分离效果较好，分析结果比较可靠，但其检测灵敏度较低，同时样品的前处理和准备工作比较繁琐。
3.荧光光谱法（FLU）该方法利用黄曲霉毒素的红外光谱图能与荧光特性产生关联的特点，通过对样品进行荧光光谱分析实现对黄曲霉毒素含量的检测。
其优点是对多种毒素具有高选择性和灵敏度，检测结果准确可靠，但标准化程度较差。
4.酶联免疫吸附法（ELISA）此法利用双抗体夹心ELISA，将样品中的黄曲霉毒素与反应所需的抗体结合，产生免疫复合物，最后以光学密度为依据，通过比较样品与标准品反应的差异，从而确定检测样品中的黄曲霉毒素含量。
该方法灵敏度高、检测速度快，并且易于进行批量检测，但会受到一些干扰因素的影响，如样品中的杂质等等。
5.涂片显微镜法该方法适用于对饲料等繁杂样品中的黄曲霉毒素进行检测。
检测方法是把样品制成涂片，然后使用显微镜下光学显微镜进行观察，判断样品中是否出现了黄曲霉菌丝，从而判断样品是否受到黄曲霉毒素的污染。
其优点是操作简单，要求不高，适用范围广泛，但准确度和检测灵敏度相对较低。
总之，黄曲霉毒素检测方法各有优劣，选择适当的检测方法取决于样品类型、检测目的、检测精度和检测成本等方面的考虑。
随着技术的不断发展和进步，已经有不少基于快速光谱和生物芯片等技术的黄曲霉毒素检测新方法应运而生，对黄曲霉毒素检测的进一步完善提供了更多的可能性。
黄曲霉毒素检测方法
黄曲霉毒素检测方法
一、黄曲霉毒素检测方法二、黄曲霉毒素的临床特征三、黄曲霉毒素中毒的急救措施
黄曲霉毒素检测方法1、生物鉴定法可检测黄曲霉素
其特点是待检样品不需很纯,主要用于定性,共有10种:抑菌试验;对微生物遗传因子影响试验;细菌发光试验;荧光反应;组织培养检测法;鸡胚试验;鸭胚试验;鳟鱼试验;植物试验;饲喂实验动物试验。
生物鉴定法是利用AFT能影响微生物、水生动物、家禽等生物体的细胞代谢,来鉴定AFT的存在。
其方法专一性差,灵敏度低,一般只作为化学分析法的佐证。
2、化学分析法可检测黄曲霉素
最常用的为薄层层析法(TLC),适用于粮食及其制品、调味品等AFB1的检测,主要是半定量。
利用AFB1具有荧光性的特点,提取和浓缩样品中的AFB1,用单向或双向展开法在薄层上分离后,在365nm紫外光照射下产生蓝紫色荧光,根据在薄层上显示荧光的最低检出量定量,其灵敏度为5μg/kg。
由于薄层层析法测定AFB1不是很专一,因此样品中其他荧光物质的干扰造成测定误差。
3、仪器分析法可检测黄曲霉素
高效液相色谱法(HPLC)是20世纪70年代初发展起来的一种以液体为流行相的新型色谱技术。
是分离分析各种AFT的好方法,如配以荧光检测器,则该法具有灵敏度高、分离能力强、特异性好、测定结果准确可靠等优点。
在国外己广泛地用于食品中AFT的测定。
但由于食物样品成分复杂,在进行液相色谱分离分析前,需对样品作彻底有效的净化处理。
常用的净化方法是柱色谱法,该法操作繁琐,且需使用大量有机溶剂。
黄曲霉毒素的测定ELISA法
黄曲霉毒素的测定ELISA法测试前请仔细阅读本说明在2—8℃冷藏—不要冻结1.简介黄曲霉毒素黄曲霉毒素是一种剧毒且致癌的物质，它是由黄曲霉菌和寄生曲霉菌A的某些菌株产生的。
黄曲霉毒素有四种类型：B1，B2，G1和G2。
黄曲霉毒素B1是毒性最大且最常有的。
最容易产生黄曲霉毒素污染的物质是谷物、花生、棉子、高梁和大多数的树果。
动物食入过量黄曲霉毒素的影响从慢性健康直到死亡，已经证明黄曲霉毒素能引起肝损坏或癌症、降低奶和蛋的产出、免疫抑制和干扰再生效率。
美国食品药物管理局已经规定了食品和饲料中最大黄曲霉毒素限量。
因此，准确测定黄曲霉毒素的含量，对于监测可能发生黄曲霉毒素污染的食品和饲料的质量来说，是非常重要的。
测试程序包括仔细的采样、化学提取、卫生学评价和定量分析。
2.方法原理本测试盒的测试原理是一种竞争性的直接酶联免疫吸附剂测试方法（ELISA），可准确检测出样品中ppb级的黄曲霉毒素。
样品和标准控制液中游离的黄曲霉毒素与轭合物中的黄曲霉毒素竞争抗体结合位置。
清洗后，加入底物，底物与轭合物反应出现兰色，兰色越深表明黄曲霉毒素越少。
将其置于微型孔阅读器中可读出透光度，以控制标准液的透光度作标准曲线，将样品的透光度与标准曲线比较计算出样品中黄曲霉毒素的准确浓度。
3.贮存要求本试剂盒存放在2～8℃时，可以一直使用到标签上注明的到期日期。
4.试剂与仪器4.1提供的材料48个包被了抗体的孔；48个红色标记的混合孔；4瓶1.5ml浓度为0、5、15、50ppb黄曲霉毒素控制标准液(黄色标签)（甲醇溶液的处理，见注意事项）；1瓶7ml黄曲霉毒素-HRP轭合物溶液(兰色标签)；1瓶24mlK兰○R底物溶液(绿色标签)；1瓶32ml红色 (红色标签)。
4.2需要但未提供的材料70%甲醇溶液；100ml量筒；150ml的具塞三角瓶；滤纸；样品收集具塞试管；漏斗；粉碎机；称量为5～25克的秤；带450nm滤光片的酶标仪；200μl移液器；200μl吸咀；纸巾或等效的吸水材料；计时器；防水记号笔；洗瓶；移液器用的试剂槽；蒸馏水或去离子水；12通道移液器5.注意事项甲醇易燃，其容器应密闭并远离热、火花、明火和烟。
黄曲霉毒素的危害、限量标准及检测方法
黄曲霉毒素的危害、限量标准及检测方法作者：来源：《食品安全导刊》2017年第05期黄曲霉毒素（Aflatoxins，简写AF）主要为黄曲霉和寄生曲霉的次生代谢产物。
在温暖与潮湿的气候地区，凡是被黄曲霉和寄生曲霉污染过的粮食和饲料都可能存在黄曲霉毒素。
最易受黄曲霉毒素污染的有花生、玉米、棉籽、禽蛋、肉、奶及奶制品等产品，其次是小麦、高粱和甘薯，而大豆豆粕污染黄曲霉毒素的程度略轻。
在我国，粮食和饲料被黄曲毒素污染的概率很高，给饲料企业以及养殖业主带来了很大的损失，而人们食用含有黄曲霉毒素的食物还会危害到身体健康。
黄曲霉毒素的理化特性目前已经确定黄曲霉毒素的结构有AFB1、AFB2、AFM1等18种，它们的基本结构中都含有二呋喃环和氧杂萘邻酮（又名香豆素）。
黄曲霉毒素很难溶解于水、己烷、乙醚和石油醚，易溶于甲醇、乙醇、氯仿以及二甲基甲酰胺（DMF）等有机溶剂。
黄曲霉的分子量为312～346，熔点为200～300℃，该毒素耐高温，通常的加热处理方式对其破坏性很小，只有在熔点的温度下才会发生分解。
黄曲霉毒素在遇碱情况下能迅速分解，但此反应可以实现逆还原，即在酸性的条件下又会复原。
一般来说，温度30℃、相对湿度80%、谷物水份在14%以上（花生的水份在9%以上）的条件最适合黄曲霉繁殖和生长。
在24～34℃之间，黄曲霉菌产毒量最高。
几乎所有谷物、饲草和各种食品（包括畜产品）都可作为黄曲霉基质。
黄曲霉毒素对动物和人的危害黄曲霉毒素对动物的危害黄曲霉毒素的毒性非常高，是目前已发现霉菌中毒性最大的一种。
目前发现的18种黄曲霉菌毒素家族中，AFB1的毒性最为强烈，AFM1、AFG1次之，AFB2、AFG2、AFM2毒性较弱。
AFB1的毒性是砒霜的68倍，诱发肝癌的能力甚至比二甲基亚硝胺还要大75倍。
其毒性大小因动物的种类、年龄、性别、体况及营养状况的不同而有所差异，其中，年幼动物、雄性动物对其反应较敏感。
黄曲霉毒素具有很强的诱导突变、抑制免疫以及强致癌的作用。
食品中黄曲霉毒素检测方法概述
食品中黄曲霉毒素检测方法概述黄曲霉毒素是一种由黄曲霉菌（Aspergillus flavus和Aspergillus parasiticus）和黄曲霉菌（Penicillium verrucosum）产生的毒素。
这些毒素经常出现在各种食品（包括玉米、花生、大米、小麦、各种豆类、香料等）中，并已被证明对人类和动物的健康产生了严重的负面影响。
因此，为了确保食品的安全和质量，必须对黄曲霉毒素进行检测。
这篇文章将重点介绍几种常见的食品中黄曲霉毒素的检测方法。
1. 便携式分析仪便携式分析仪是测试食品中黄曲霉毒素非常便捷的一种方法，例如五羰基二氧化钒分析仪（VICAM），可以快速检测大麦、燕麦、小麦、小米和高粱等谷物中的黄曲霉毒素。
这种测量方法对于食品加工厂、农民和小商贩等需要迅速测试黄曲霉毒素的人来说非常有用。
2. 高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛用于黄曲霉毒素检测的方法。
这是一种分析化学方法，它可以通过将食品中的黄曲霉毒素分离出来，然后使用UV或荧光检测器进行检测。
HPLC法可以检测多种黄曲霉毒素，包括黄曲霉素和掌状芽孢菌毒素等，同时它也是准确、可重复的方法。
不过这种方法需要专业技能的人员，并且设备价格比较昂贵。
3. 气相色谱-质谱法气相色谱-质谱法（GC-MS）是一种常用的现代技术。
与HPLC相比，它可以检测更广泛的黄曲霉毒素，包括黄曲霉酮和芜湖霉素等。
GC-MS法有高效的分辨能力，可以清晰地分析样品中不同的毒素种类、含量和结构等信息。
但是与HPLC相比，GC-MS需要更加昂贵的仪器和更高的技术要求。
4. 免疫学方法免疫学方法包括酶联免疫吸附测定（ELISA）和免疫色谱法。
这些方法基于特定的抗体和抗原的反应，可以检测食品中的黄曲霉毒素。
这些方法具有快速、高通量和灵敏度高等优点，同时在大规模食品安全检测中也有很高的可靠性。
但是，这些方法的不足之处是需要求样品的抽提质和反应基质的影响。
综上所述，不同的方法都有各自的优缺点，对于食品生产企业和监管部门来说，需要根据具体的需求选择合适的黄曲霉毒素检测方法。
黄曲霉毒素标准检测规程.
AFB10.08 0.2 0.6 1.97
AFB20.04 0.12 0.2 0.63 4、职责
部门名称部门职责
质量管理部1、负责本制度的实施。
2、负责本制度的监督Leabharlann 行。5、程序5.1原理
测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品中的黄曲霉毒素B1经过提取、过滤、稀释,然后缓慢的通过黄曲霉毒素B1免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱黄曲霉毒素B1,然后注入到分析仪器中用于检测。
----取25mL上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数:1
5.3.3适用于中药(2015版药典规定的19味中药等
----15g±0.01g样品(固体样品需粉碎,并过2mm分样筛加入75mL 80%乙腈-水溶液混匀;
----高速均质(≥10,000r/min1min,或摇床(200r/min~300r/min剧烈振荡20min,用快速定性滤纸过滤,收集滤液;
变更类型:A –新起草M -修订
----高速均质(≥10,000r/min1min,或摇床(200r/min~300r/min剧烈振荡20min,用快速定性滤纸过滤,收集滤液;
----取10mL滤液加入20mL蒸馏水稀释,再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;
----取15mL上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数:1
5.3.2适用于辣椒、花椒、黄豆酱等调料,面粉、麦芯粉、芝麻油及其它植物油、谷草
5.2溶液配制
5.2.1 70%甲醇-水溶液:取700mL甲醇,加入300ml去离子水混匀即可。
5.2.2 80%乙腈-水溶液:取800m乙腈,加入200ml去离子混匀即可。
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表 1 රϜብݭ९ٙʱɿඎMw ʿᅙဧіΈӻᅰε
黃曲霉毒素
B1 B2 G1 G2
分子量（Mw） 312 314 328 330
摩爾吸光系數（ε） 19800 20900 17100 18200
黃曲霉毒素混合標準溶液 { Ⴁ௪ЇˇʞࡈʔΝዢܓӻΐٙᏝ֛රϜ ብݭ९70% ͠ቐ૿Υ૰d͜˸ᖭႡᅺϜ㝬f
ίආБ৷ࣖ૰Ѝᗅʱ̙ؓࣛ፯͜j
h ૰Ѝᗅݒ4.6 mm Ò 25 cm{ ո֛މɤɞὮਿᒟΥᾼᇭ ࢰ 5 µmi
附錄 - 27
附錄 VII 霉菌毒素（黃曲霉毒素）測定方法
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1ຢ᭤͛ʷ ܝݒˀᏐӻ୕ { ˀᏐ ܓ70˚C Ԩ˸ 0.5 mM ຢ๓૰Ъܝݒމ᭤ ͛ʷ༊૰fܝݒ᭤͛ʷ༊૰ݴމ0.3 mL/minf
a ˙جᏐቇΥᏝ֛රϜብݭ९d˲ʔաᖹҿ՟يٙʍᓔi b ᆽ֛Ꮭ֛රϜብݭ९ٙᏨࠢʿ֛ඎࠢi c ࡈරϜብݭ९֛ٙඎࠢண֛ މ0.3 µg/kgi d ̋ᅵΫϗଟᏐί 50 - 120%ᇍఖʘʫi e ˙ࠠجልٙ࿁ᅺࢨᏐʃ 15%i f ᄃኜᏨٙࣧ࿁ᇍఖᏐя㝬ˀᏐf 2 試劑 { ʱؓ͜הٙ༊ኒމʱؓॱאഃΝf͜͠הቐʿɔ㹶މЍᗅॱא ˸ɪf 3 容器 { הϞ࢙ኜ̙˙ܝݹԴ͜d˸ᆽೌڭරϜብݭ९ٙϮݑf࢙ኜ̙ ͜10% ͜ဎͣ૰ऍظЇˇ 12ʃࣛܝdΎ͜ႋᕞ˥әݹf 4 樣品製備 { ፯՟ՈϞ˾ڌٙᖹҿdνცࠅdίጋ४̙ۃਗ਼ᖹҿ४ຟf ίᅵۜʱؓۃdᖹҿᅵۜ̀४ຟfί̙Бઋرɨd՟ᅵඎᏐʔˇ ༊ඎʘʞ࠴f 5 操作程序 { ͉˙جԱኽරϜብݭ९ B1eB2eG1 ձ G2 ܝݒຢࠃ͛ʷʿഓ ̮㝬ዧ೯אܝΈʷኪ᭤͛ʷd֛ՉဦΈ੶ܓfࡈйᖹҿᅵۜЪҏ̙ ቇࡌҷf
ڝൗjίࠠ͜אໄۃdਗ਼הϞྼ᜕࢙͜ኜί 10% ͜ဎͣ૰ऍظཀ ցf
Байду номын сангаас
限度 { ৰ๕ᘤيٙᖹҿ̤אϞ֛̮dᖹҿᅵۜʕරϜብݭ९ B1 ʿᐼරϜብ ݭ९B1eB2eG1 ʿ G2 ʘձᏐୌΥ ڌ2 הΐٙࠢܓf
表 2cᖹҿʕٙරϜብݭ९ࠢܓ
附錄 VII 霉菌毒素（黃曲霉毒素）測定方法
附錄 VII 霉菌毒素（黃曲霉毒素）測定方法 ብഽݭ९ܼ̍රϜብݭ९dܸ݊ብഽॆאഽପ͛ٙ˾ݭᑽପيfᖹҿ̙ঐึ աරϜብݭ९ϮݑdᏐ͉֛͜جᖹҿʕරϜብݭ९ B1eB2eG1 ձ G2 ٙўඎf 方法 1 黃曲霉毒素測定法 { ʱؓ˙̀جஷཀ᜕ᗇԨୌΥɨΐࠅӋj
各個黃曲霉毒素標準儲備液 { ͜ഓ̮Έᗅجdܲɨΐʮόࠇၑࡈර Ϝብݭ९ᅺᎷ௪૰ ߽/ ɔ㹶૿Υ૰98:2, v/vʕٙዢܓj
ࡈරϜብݭ९ٙዢܓmg/L=
A 350
Ò Mw ε
Ò
1000
όʕ
A 350 = රϜብݭ९ߒ 350 nm ஈ௰ɽіϗڗتٙіϗܓi M w = රϜብݭ९ٙʱɿඎ ڌ1i ε = රϜብݭ९߽/ɔ㹶૿Υ૰ʕٙᅙဧіΈӻᅰڌ1f
ڝൗ 3jеޥፋձݒٙଋʷҏ̙ΪᏐࡈйʔΝɿЪ̈ቇҷਗd ሗԱႭˏܸࣣf
附錄 - 26
附錄 VII 霉菌毒素（黃曲霉毒素）測定方法
c 定量檢測 { ה፯ٙ͜৷ࣖ૰Ѝᗅӻ୕̀ୌΥɨΐࠅӋj
h ֛ඎࢤʿՉቌࢤڐʘʱᕎܓR jᏐɽ 1.5i h Ѝᗅݒٙଣሞ෫ؐᅰn˸֛ඎࢤࠇjᏐɽאഃ 7000iձ hࢤࠦጐٙ࿁ᅺࢨjᏐʃאഃ 5%f
黃曲霉毒素 රϜብݭ९ B1 ᐼරϜብݭ९B1eB2eG1 ʿ G2 ʘձ
限度（不多於） 5 µg/kg 10 µg/kg
附錄 - 28
2Έʷኪ᭤͛ʷ ܝݒˀᏐӻ୕ { ՈϞഓ̮Έዱ254 nm ձ᭤͛ˀᏐ၍f
h ݴਗ { ႋᕞ˥ – ɔ㹶 – ͠ቐ3:1:1, v/vi
hဦΈᏨኜ { ዧ೯ڗتǃext= 360 nm ʿ ೯࢛ڗتǃem= 450 nmf
ண֛૰Ѝᗅݴݒਗݴ މ1.0 mL/minfίϤૢɨdරϜብݭ९ G2eG1eB2 ձ B1 ึԱϣݹ୭fܲࢤࠦጐʿዢࠇܓၑࡈරϜብݭ९ ўඎf
附錄 - 25
附錄 VII 霉菌毒素（黃曲霉毒素）測定方法
a 提取 { ՟ᅵۜ४͋ 15.0 gd̋ಣʷඒ 3 g ձ 70% ͠ቐ75 mLd̂ʱʴ ߒ 2 ʱᙒܝdᕎː 10 ʱᙒߒ 800 Ò gf֛՟૰ა࠽fၚі ՟ɪ૰ 15 mL[ ڝൗ 1] ໄරಅЍʃଧʕd 60˚C ˥कɪ͜ಢंਗ਼๓ኒ ౨೯Їߒ 5 mLfԱኽеޥፋձݒႭࣣٙࠅӋdίዢᐵ՟૰ʕ̋ቇ ͜еޥፋձݒٙ๓ኒЇ 50 mL[ ڝൗ 2]dᕎːߒ 10 ʱᙒܝd͜ޚᆨᜄ ၪᓩॷפᓩdϗණᓩ૰dЪމԶ༊ۜ๓૰f
b 以免疫親和柱淨化供試品溶液 {
ϤЍᗅଋʷӉ̙፯͜j
h еޥፋձݒjʫўරϜብݭ९ B1eB2eG1 ձ G2 ਖ਼ϞҤi h ݹ୭૰j͠ቐf
免疫親和柱的操作要求 { ਗ਼ቇ࢙ඎٙරϜብݭ९ B1eB2eG1 ձ G2 ᅺ૿Υ๓૰ஷཀеޥፋձݒdԨ࣬ኽɨࠑଋʷԶ༊ۜ๓૰ҏஈ ଣdΫϗଟᏐʱйʔʃ 90%e80%e90% ձ60%f 淨 化供試品溶液 [ 附註 3] { ԱኽႭࣣdਗ਼еޥፋձཫݒሜd˸ݴ 3 mL/minஷཀ22.5 mLԶ༊ۜ๓૰fԱႭܔהࣣᙄٙәݹ૰10 mL әݹ༈ݴݒ3 mL/mindΎ͜10 mL٤ंਗ਼ݒә৻f͜1.5 mL͠ቐ ݹ୭dΎ˸10 mL٤ंәݒdҁΌϗණݹ୭૰ໄ2-mLඎଧʕd್˥̋ܝ ЇՍܓf
ڝൗ1jν՟૰ᅵۜіϗԴהɪ૰ˇ40 mLdۆᏐܲɪࠠج อ՟dҷ͜ಣʷඒ5.0 g ձ 70% ͠ቐ125 mL ՟dԨҷމ՟ɪ૰ 25 mLf
ڝൗ 2jνᅵۜஈଣהٙ՟ึيᅂᚤеޥፋձݒٙ̌ঐdᏐ˸е ޥፋձݒႭࠅࣣӋቇஈଣfतйءจеޥፋձݒაܓٙЪᇍ ఖࠅӋձίଋʷۃ፯͜Υቇٙ๓ኒᙑ՟يf