壬基酚和双酚A检测办法
BPA及其他酚类的检测
2011年1月BPA 及其他酚类的检测Dionex 技术文献2双酚A ——离我们的生活有多远？双酚A 可以让聚碳酸酯等塑料产品变得透明、耐用、防摔，广泛用于矿泉水瓶、太空杯、塑料餐具、婴儿奶瓶等产品中。
早在1998年，美国华盛顿州立大学Patricia Hunt 发现，被注射双酚A 的雌性小鼠会产生有缺陷的卵子。
最近，她又发表文章称，孕期暴露于双酚A 环境中的小鼠“一次暴露危害三代”。
研究显示，食品盒及饮料瓶中的双酚A 能够析出到食物和饮料当中，特别是在加热时。
而双酚A 可能会发挥类似雌激素的作用，扰乱人体代谢过程。
上海市松江区中心医院儿科医生乔丽丽等人曾经研究指出，在110例初诊性早熟女童中，血清中双酚A 含量与性早熟症状严重程度呈明显的正相关关系。
中国研究人员还率先得出双酚A 对男性性功能有危害的直接证据：暴露于双酚A 环境中的男性工人发生勃起障碍和射精困难的可能性，分别是对照组的4倍和7倍。
2010年3月，欧盟成员国多位专家呼吁禁止在食品容器中添加双酚A ，因为过去十年中有大量研究表明：双酚A 与先天性缺陷、癌症和早熟等一系列健康问题都有潜在关系。
2010年11月25日，欧盟食品链和动物健康委员会通过一项决定：禁止使用含有化学物质双酚A 的塑料生产婴儿奶瓶。
目前，美国有多个州禁止在儿童食品容器中使用双酚A 。
欧盟指令规定，人类饮用水中酚类之法定限值为0.5 µg/L 。
日本厚生劳动省规定，饮用水中酚类污染物的最高水平不得高于5µg/L （MDL ）。
美国环保局规定了五氯苯酚的限值为1µg/L （MDL ）。
此外，还有11种常见酚进入了美国EPA 优先控制污染物名单。
2010年10月，加拿大政府在公报中宣布，其已将该物质列入对环境和人类健康有影响的有毒物质，从而成为全面限制使用双酚A 的首个国家。
就目前的技术而言，测定酚类化合物可以采用气相色谱—氢火焰离子化检测器法（GC-FID ）或质谱检测器法（GC- MS ）。
双酚a测定法标准
双酚a测定法标准
双酚a测定法是一种常用的分析方法，专门用于测定双酚a的含量。
该方法主要基于酸性条件下双酚a与铁离子形成的蓝色络合物，通过分光光度法测定其吸光度值，进而计算出双酚a的含量。
在双酚a测定法的实验过程中，需要准备一定浓度的双酚a标准溶液，以便进行定量测定。
标准溶液的制备应当严格按照国家标准规定的浓度进行配制，以确保测试结果的准确性和可靠性。
此外，在进行双酚a测定法的实验过程中，还需要注意一些实验技巧和注意事项。
比如，应当注意样品的处理方式、反应条件的控制、仪器的使用方法等等。
只有在严格遵循标准操作流程的情况下，才能够得到准确可靠的测试结果。
总之，双酚a测定法是一种重要的分析方法，其标准规定了实验过程中的各项操作要点和注意事项，可以有效地保证测试结果的精确度和可靠性。
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食品中辛基酚等5种酚类物质的测定
食品中辛基酚等5种酚类物质的测定BJS 2019131 范围本标准规定了食品中辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚、双酚A的液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于婴儿配方食品、畜肉、禽蛋、水产品、罐头食品、植物油中辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚、双酚A的测定。
2原理试样中加入同位素内标后，经乙腈提取，离心，取上清液经固相萃取柱净化，采用液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。
3试剂和材料除另行规定外，本实验所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1 甲醇（CH3OH）：质谱级。
3.1.2 乙腈（CH3CN）：质谱级。
3.1.3 氨水（NH4OH）：色谱级。
3.2 试剂配制0.05% 氨水溶液（V/V）：取氨水（3.1.3）0.5mL用水稀释至1000 mL。
3.3 标准品辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚、双酚A标准物质和辛基酚-13C6、正辛基酚-D17、壬基酚-13C6、正壬基酚-D4、双酚A -D4同位素内标的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.4 标准溶液配制3.4.1标准储备溶液（100 mg/L）：分别称取辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚和双酚A标准物质（3.3）10 mg（精确至0.000 1 g），用甲醇（3.1.1）溶解，并转移至100 mL容量瓶中，定容至刻度，标准储备液浓度为100 mg/L。
溶液转移至试剂瓶中，贮存于-20 ℃冰箱中，有效期12个月。
3.4.2混合标准中间溶液（1 mg/L）：分别准确吸取辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚和双酚A标准储备液(100 mg/L)(3.4.1) 1 mL至100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成1 mg/L的混合标准中间溶液，溶液转移至试剂瓶中，置于4 ℃冰箱中保存，有效期3个月。
3.4.3同位素内标标准储备溶液（100 mg/L）：分别称取辛基酚-13C6、正辛基酚-D17、壬基酚-13C6、正壬基酚-D4、双酚A -D4同位素内标（3.3）10 mg（精确至0.000 1 g），用甲醇（3.1.1）溶解，并转移至100 mL容量瓶中，定容至刻度，标准储备液浓度为100 mg/L。
壬基酚检测
壬基酚检测壬基酚是一种重要的精细化工原料和中间体，外观在常温下为无色或淡黄色液体，略带苯酚气味，不溶于水，溶于丙酮。
主要用于生产表面活性剂、也用于抗氧剂、纺织印染助剂、润滑油添加剂、农药乳化剂、树脂改性剂、树脂及橡胶稳定剂等领域。
壬基酚属有机污染物，有“精子杀手”之称。
壬基酚主要用于生产非离子表面活性剂，润滑油添加剂，油溶性酚醛树脂及绝缘材料，纺织印染，造纸助剂，橡胶，塑胶的防老抗氧剂TNP，抗静电ABPS，油田及炼厂化学品，石油制品洁净分散剂和铜矿及稀有金属浮选择剂，也用于入抗氧剂，纺织印染助剂，润滑油添加剂，农药乳化剂，树脂改性剂，树脂及橡胶稳定剂等领域用于环氧乙烷缩合剂制非离子表面活性剂，用作洗涤剂，乳化剂，分散剂，湿润剂等，进一步加工成硫酸脂和磷酸脂，制成阴离子表面活性剂。
也用于制作除垢剂，抗静电剂，发泡剂等。
壬基酚乙氧基化物是十分重要的非离子型表面活性剂，此种表面活性剂在自然环境中会发生去乙氧基反应生成壬基酚类物质。
NPE在纺织业中都被广泛应用于印染、清洗的工序。
而在纺织业之外，NPE也可以用做表面活性剂、清洁剂。
具有内分泌干扰效应，可促进乳腺癌细胞增殖，属于内分泌干扰物，致癌物。
壬基酚的危害：环境标准(Environmental Standard)美国国家环保局(EPA)推荐标准，在淡水中，壬基酚的含量不应高于6.6ug/L，在咸水中不应高于1.7ug/L。
同时，NPE一旦进入到环境中，就会迅速分解成毒性更强的环境激素——NP，也就是壬基酚。
NPE是全世界公认的环境激素。
研究表明，即便这种物质排放的浓度很低，也极具危害性。
2011年4月至5月间，绿色和平在中国、英国、阿根廷等全球18个国家采购了15个服装品牌的78件样品，其中包括运动服装、休闲服装及鞋类。
这些样品的产地涉及中国、孟加拉国、印度尼西亚、斯里兰卡、泰国等13个纺织品生产国。
绿色和平将这些样品送至具有资质的第三方实验室进行检测，结果表明，包括阿迪达斯、李宁等在内的2/3的样品被检测出含有NPE[2]。
色水质 9种烷基酚类化合物和双酚A的测定 固相萃取_高效液相谱法HJ 1192
HJ1192—2021水质9种烷基酚类化合物和双酚A的测定固相萃取/高效液相色谱法警告：实验中所使用的有机溶剂、标准物质和标准溶液均有一定的毒性，试剂配制和样品前处理过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具，避免吸入呼吸道、接触皮肤和衣物。
1 适用范围本标准规定了测定水中烷基酚类化合物和双酚A的高效液相色谱法。
本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中4-叔丁基苯酚、4-丁基苯酚、4-戊基苯酚、4-己基苯酚、4-庚基苯酚、4-辛基苯酚、4-支链壬基酚、4-叔辛基苯酚和4-壬基酚等9种烷基酚类化合物和双酚A的测定。
当取样体积为200 ml，试样的定容体积为1.0 ml，进样体积为30 µl时，方法检出限为0.04 μg/L～0.06 µg/L，测定下限为0.16 μg/L～0.24 µg/L。
详见附录A。
2 规范性引用文件本标准引用了下列文件或其中的条款。
凡是注明日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。
凡是未注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。
HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范HJ 91.1 污水监测技术规范HJ 164 地下水环境监测技术规范3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。
3.14-支链壬基酚 4-nonyl-branched phenol商品化的4-壬基酚的支链异构体混合物，CAS No.为84852-15-3。
4 方法原理水中的烷基酚类化合物和双酚A在酸性条件下，经固相萃取富集、净化，用甲醇和二氯甲烷洗脱，浓缩后使用具有荧光检测器的高效液相色谱仪测定，根据保留时间定性，外标法定量。
5 试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的不含目标化合物的蒸馏水或纯水。
1HJ1192—20215.1硫代硫酸钠（Na2S2O3•5H2O）：优级纯。
5.2乙腈（CH3CN）：高效液相色谱纯。
食品包材壬基酚检出标准
食品包材壬基酚检出标准
为了保障食品包材的安全和质量，现制定食品包材壬基酚检出标准如下：
1. 壬基酚的检测方法应符合国家标准或行业标准，并采用可靠、准确、敏感的检测技术。
2. 食品包材中壬基酚的检出限值应符合国家标准或行业标准，一般不超过0.05mg/kg。
3. 食品包材生产企业应对原材料和生产工艺进行全面管理和控制，确保壬基酚的使用量不超过标准要求。
4. 检测结果不合格的食品包材应及时停止使用，并进行追溯和处理，确保食品安全。
以上标准适用于各类食品包材，包括塑料、纸质、金属等。
食品包材生产企业和使用单位应严格遵守，并持续加强质量管理和监控，保障食品安全和健康。
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液相色谱-串联质谱法检测婴幼儿配方乳粉中双酚A和壬基酚
液相色谱-串联质谱法检测婴幼儿配方乳粉中双酚A和壬基酚张敏娟;安瑜;唐欣;王慧芳;李晓【期刊名称】《农产品加工·学刊》【年(卷),期】2017(000)012【摘要】建立了婴幼儿配方奶粉中双酚A和壬基酚的液相色谱-串联质谱法的测定方法.样品经溶剂提取净化后,采用Poroshell 120SB-C18型液相色谱柱分离,以0.1％氨水和甲醇为流动相,进行梯度洗脱,采用多反应监测模式,外标法定量.结果表明,双酚A的方法检出限为0.05 μg/kg,壬基酚的方法检出限为0.1μg/kg.线性范围内低、中、高3个添加水平双酚A的回收率为76.80％～86.75％,壬基酚的回收率为77.00％～87.34％.该方法具有灵敏度高、定性定量准确等特点,适用于婴幼儿配方乳粉中双酚A和壬基酚的检测.%A test method for the determination of bisphenol A and nonylphenol in infant formula by liquid chromatography-tandem mass spectrometry was established.Samples were extracted by solvent extraction and cleaned up before chromatographic separation on a Poroshell 120SB-C18 column using a mobile phase consisting of water and methanol by isocratic elution.The dyes were analyzed by LC-MS/MS in multiple reaction monitoring (MRM) mode and quantified by the external standard method.The method of bisphenol A was found to be 0.05μg/kg.The method of nonylphenol was found to be 0.1 μg/kg.The recycling rate of low, medium and high levels in linear range the recoveryof bisphenol A was 76.80％～86.75％, the recovery of nonylphenol was 77.00％～87.34％.This method had the characteristics of high sensitivityand quantitative accuracy, which could be applied to the detection of bisphenol A and nonylphenol in infant formula.【总页数】4页(P49-51,55)【作者】张敏娟;安瑜;唐欣;王慧芳;李晓【作者单位】陕西省产品质量监督检验研究院,陕西西安 710048;陕西省产品质量监督检验研究院,陕西西安 710048;陕西省产品质量监督检验研究院,陕西西安710048;陕西省产品质量监督检验研究院,陕西西安 710048;陕西省产品质量监督检验研究院,陕西西安 710048【正文语种】中文【中图分类】O657.63【相关文献】1.液相色谱串联质谱法测定化妆品中的双酚A、辛基酚及壬基酚 [J], 郭新东;冼燕萍;陈立伟;吴文海;罗海英;吴玉銮2.同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定动物性食品中的双酚A、壬基酚及辛基酚[J], 牛宇敏;张晶;张书军;邵兵3.液相色谱-串联质谱法同时测定婴幼儿配方乳粉中全氟辛酸、全氟辛烷磺酸、双酚A和壬基酚残留 [J], 王浩;邵明媛;贾婧怡;刘明艳;裴帆4.液相色谱-串联质谱法检测婴幼儿配方乳粉中双酚A和壬基酚 [J], 张敏娟;安瑜;唐欣;王慧芳;李晓5.高效液相色谱-串联质谱法测定环境水体中双酚A、辛基酚、壬基酚 [J], 张奎文;叶赛;那广水;姚子伟;关道明因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
食品中辛基酚等5种酚类物质的测定 (BJS 201913)
附件2食品中辛基酚等5种酚类物质的测定BJS 2019131 范围本标准规定了食品中辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚、双酚A的液相色谱-串联质谱测定方法。
本标准适用于婴儿配方食品、畜肉、禽蛋、水产品、罐头食品、植物油中辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚、双酚A的测定。
2原理试样中加入同位素内标后，经乙腈提取，离心，取上清液经固相萃取柱净化，采用液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量。
3试剂和材料除另行规定外，本实验所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
3.1 试剂3.1.1 甲醇（CH3OH）：质谱级。
3.1.2 乙腈（CH3CN）：质谱级。
3.1.3 氨水（NH4OH）：色谱级。
3.2 试剂配制0.05% 氨水溶液（V/V）：取氨水（3.1.3）0.5mL用水稀释至1000 mL。
3.3 标准品辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚、双酚A标准物质和辛基酚-13C6、正辛基酚-D17、壬基酚-13C6、正壬基酚-D4、双酚A -D4同位素内标的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见附录A表A.1，纯度≥98%。
3.4 标准溶液配制3.4.1标准储备溶液（100 mg/L）：分别称取辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚和双酚A标准物质（3.3）10 mg（精确至0.000 1 g），用甲醇（3.1.1）溶解，并转移至100 mL容量瓶中，定容至刻度，标准储备液浓度为100 mg/L。
溶液转移至试剂瓶中，贮存于-20 ℃冰箱中，有效期12个月。
3.4.2混合标准中间溶液（1 mg/L）：分别准确吸取辛基酚、正辛基酚、壬基酚、正壬基酚和双酚A标准储备液(100 mg/L)(3.4.1) 1 mL至100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成1 mg/L的混合标准中间溶液，溶液转移至试剂瓶中，置于4 ℃冰箱中保存，有效期3个月。
3.4.3同位素内标标准储备溶液（100 mg/L）：分别称取辛基酚-13C6、正辛基酚-D17、壬基酚-13C6、正壬基酚-D4、双酚A -D4同位素内标（3.3）10 mg（精确至0.000 1 g），用甲醇（3.1.1）溶解，并转移至100 mL容量瓶中，定容至刻度，标准储备液浓度为100 mg/L。
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1目的建立该程序为规范壬基酚和双酚A测定提供指导性文件。
2 适用范围
本规程适用于婴幼儿食品及食用植物油和包材等双酚A、壬基酚含量的液相色谱-串联质谱法测定。
3 原理
3.1试样中(婴幼儿乳粉及粉状原料）的壬基酚和双酚A经乙酸乙酯-环己烷（体积比按1:1）提取后，同位素稀释高效液相色谱-串联质谱技术（UPLC-MS/MS）检测，与标准系列比较定量。
3.2样品（油类）经过凝胶渗透色谱法（GPC）除脂净化（乙酸乙酯:环己烷（1:1，v/v）超声提取），同位素稀释高效液相色谱-串联质谱技术（UPLC-MS/MS）检测，与标准系列比较定量。
3.3样品（膜）经过正己烷浸泡提取，氮吹（42℃）至干，用1ml甲醇定容后，同位素稀释高效液相色谱-串联质谱技术（UPLC-MS/MS）检测，与标准系列比较定量。
4 试剂和材料
除非另有规定，本方法所用试剂均为色谱纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 乙酸乙酯
4.2 环己烷
4.3 壬基酚和双酚A 及其同位素内标（NP-d4、BPA-d4）
4.4 甲醇
4.5 氨水（分析纯）
4.6 乙腈
4.7 标准溶液
4.7.1 壬基酚和双酚A标准储备液（0.2mg/ml）：分别称取壬基酚和双酚A的标准品0.02g（精确到0.1mg），溶于甲醇中，用甲醇定容到100ml容量瓶中，放置于4℃冰箱中。
4.7.2 壬基酚和双酚A标准中间夜（2ug/ml）：分别吸取1ml壬基酚和双酚A标准储备液，用甲醇定容至100mL。
4.7.3 壬基酚和双酚A标准工作液：分别吸取壬基酚和双酚A标准中间夜10μl，25μl，50μl，75μl，100μl，150μl，250μl，然后分别加入50μl壬基酚和双酚A的同位素内标物标准中间液，最后加甲醇定容至1ml，配制成工作液浓度分别为20ng/ml，50ng/ml，100ng/ml，150ng/ml，200ng/ml，300ng/ml，500ng/ml。
4.8 内标物溶液
4.8.1 壬基酚和双酚A同位素内标物标准储备液（0.2mg/ml）：分别称取壬基酚和双酚A的同位素内标物0.02g（精确到0.1mg），溶于甲醇中，用甲醇定容到100ml容量瓶中，放置于4℃冰箱中。
4.8.2 壬基酚和双酚A的同位素内标物标准中间液（2ug/ml）：分别吸取1ml壬基酚和双酚A的同位素内标物标准储备液，用甲醇定容至100mL。
5 仪器和设备
5.1 天平：感量为0.1mg。
5.2 涡旋振荡器
5.3 氮吹仪
5.4 低温低速离心机
5.5 超高效液相-质谱联用仪
5.6 凝胶渗透色谱仪
6 分析步骤
6.1 试样处理
6.1.1婴幼儿乳粉及粉状原料
称取试样1g（原料根据实际情况酌情减少称样量）精确到0.1mg于50ml干燥的玻璃离心管中，向样品中分别加入50μl壬基酚和双酚A的同位素（200ng/ml）内标物（NP—4-n-NP-d4和BPA-d4）,加入8ml乙酸乙酯-环己烷溶液（体积比按1:1），涡旋振荡30s，离心10min（1000转/min）。
然后再重复上述操作进行第二次提取，将两次的上清液合并至同一个试管中。
然后将上清液转移到氮吹管中，进行氮吹（42℃），吹干后用1ml甲醇进行定容，用0.22有机滤膜过滤后上机，同时做试剂空白试验。
准确裁取一定面积（15*30cm）的包材，然后进行塑封，向其中加入100ml的正己烷进行浸泡，向浸泡液中分别加入50μl壬基酚和双酚A的同位素（1ug/ml）内标物（NP—4-n-NP-d4和BPA-d4）.浸泡5小时，每隔半个小时摇晃一次。
取出20ml浸泡液于干净的试管中进行氮吹（42℃），吹干后用1ml甲醇进行定容，同时做试剂空白试验。
用0.22有机滤膜过滤后上机。
6.1.3食用植物油
称取食用植物油样品0.4 g于GPC样品管中，向样品中分别加入50μl壬基酚和双酚A的同位素内标物标准中间液（200ng/ml）,加入5 mL乙酸乙酯:环己烷（1:1，v/v），2000 rpm涡旋混合1 min，用于GPC净化。
GPC分离采用苯乙烯树脂Biobead SX-3 (300 × 10 mm)凝胶色谱柱，流动相为乙酸乙酯:环己烷（1:1，v/v），流速3.0 mL/min。
收集14-17 min组分于100 mL茄形瓶中，30oC，120 rpm旋转蒸发至干，1 mL甲醇（3.1）定容，用0.22有机滤膜过滤后上机，同时做试剂空白试验。
6.2 测定
6.2.1 参考液相色谱条件
色谱柱：Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18柱（50 mm ×2.1 mm）；捕集柱：Waters Isolator Column （P/N：），捕集柱位于进样阀之前（图1）。
流动相:甲醇-0.1﹪氨水
进样量：10μl
流速：0.3mL/min
柱温：35±5℃
样品室温度：15±5℃
根据仪器性能调至最佳状态，液相仪器参考条件见下表
目标化合物参考液相色谱条件
时间（min）流速（ml/min）A%（甲醇）B%(0.1%氨水溶液)
0.3 40 60
0.6 0.3 100 0
2 0.
3 100 0
2.5 0.3 40 60
3 0.3 40 60
6.2.2 参考质谱条件
质谱条件：离子源，电喷雾电离ESI（-）；毛细管电压，2.8 KV；离子源温度，150oC；脱溶剂温度，400oC；脱溶剂气流量，800 L/h；锥孔气流量为50 L/h。
采用多反应监测具体的离子采集参数见下表化合物名称母离子（m/z）子离子（m/z）锥孔电压v碰撞能量ev
4-NP（壬基酚）219.19132.93430
4-NP（壬基酚）219.19146.883426
BPA（双酚A）227.06132.7836 30
BPA（双酚A）227.06211.9636 26
6.2.3超高效液相色谱-质谱联用仪测定（定量测定）
将标准储备液用甲醇稀释称为标准工作液，在仪器最佳工作条件下，标准工作液分别进样，以标准工作液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。
采用外标法进行定量测定，样品溶液中的待测物的响应值应该在标准曲线的线性范围内。
7.1 分析结果的表述
7.1.1试样（粉和油）中壬基酚和双酚A的含量按下式计算：
X=CV/m
式中：
X——试样中检测目标化合物残留量，单位为微克每千克（μg/kg)
C——由回归曲线计算得到的上机试样溶液中目标化合物含量，单位为纳克毫升（ng/ml）；V——浓缩至干后试样的定容体积，单位为毫升（mL）；
m——试样的质量，单位为克（g）。
X=6*CV*f/S
式中：
X——试样中检测目标化合物残留量，单位为微克每千克（μg/kg)
C——由回归曲线计算得到的上机试样溶液中目标化合物含量，单位为纳克毫升（ng/ml）；V——浸泡所使用溶液的体积，单位为升（L）；
S——检测样品的表面积，平方分米。
f——稀释倍数。
6——欧盟指令2002/72/EC中规定1mg/kg=6mg/dm2
8 精密度
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
图1 色谱柱连接示意图。