pTT5哺乳动物表达载体说明
pEF1α-IRES-DsRed-Express2哺乳动物表达载体说明
GTTAGGCCAG TCTTGGTTCA TCGTGACGCT CGGTACCGCG AGCCGCTTGG TCTTTTGGCA GGTCTTTCCC CCTCTGGAAG CCCCCACCTG AAGGCGGCAC CTCTCCTCAA GGATCTGATC CGTCTAGGCC GGCCACAACC CATGGAGGGC CTACGAGGGC CTGGGACATC CGACATCCCC GAACTTCGAG CTTCATCTAC GAAGAAGACT GAAGGGCGAG CAAGTCAATC CAAGCTGGAC CGAGGCCCGC CCACATTTGT AACATAAAAT AATAAAGCAA GTGGTTTGTC TTAAAATTCG GGCAAAATCC TGGAACAAGA TATCAGGGCG TGCCGTAAAG AAGCCGGCGA CTGGCAAGTG CTACAGGGCG TTTTTCTAAA CAATAATATT AGTTAGGGTG TCAATTAGTC AAAGCATGCA CCCTAACTCC ATGCAGAGGC
GGAGACTGAA TGAGTTTGGA ATTTCAGGTG CTGCAGTCGA TACTGGCCGA CATATTGCCG CATTCCTAGG GGAAGCAGTT GCAGCGGAAC TACACCTGCA AGTCAAATGG CCATTGTATG GTTAAAAAAA ATGATAATAT TCAAGGTGCA AGGGCAAGCC TGCCCTTCGC AGCACCCCGC AGCGCGTGAT AGGACGGCAC CCGTAATGCA ACGGCGTGCT TGGTGGAGTT ACGTGGACTC ACGAGCGCGC ATCAGCCATA CTGAACCTGA AATGGTTACA CATTCTAGTT TAATATTTTG GGCCGAAATC TGTTCCAGTT AAAAACCGTC GGGGTCGAGG TTGACGGGGA CGCTAGGGCG TAATGCGCCG TATTTGTTTA ATAAATGCTT AATGTGTGTC AGCATGCATC AGAAGTATGC CCCATCCCGC TTTTTTATTT
人教版八上生物课件5.1.7 哺乳动物 (22张PPT)
既提高了哺乳动物的摄食能力， 又增强了对食物的消化能力 食草动物
具有发达的神经系统和感觉器官，能对环境的复杂 多变及时作出反应
哺乳动物的主要特征
体表被毛 胎生，哺乳 牙齿有门齿、犬齿和臼齿的分化 具有高度发达的神经系统
和感觉器官
哺乳动物与人类的生途
野生双峰驼
野生双峰驼 濒临灭绝， 全球仅剩 650余峰， 因此有人称 其为比大熊 猫还珍贵， 到了极度濒 危的状态。
1.食草动物牙齿分化的一般特征是（ C ） A.门齿和犬齿发达，臼齿退化 B.臼齿和犬齿发达，门齿退化 C.门齿和臼齿发达，犬齿退化 D.门齿、臼齿和犬齿发达
2.属于哺乳动物的是（ A ）
体毛有很好的保温作用
胎生、哺乳
母体都有乳腺，能分泌乳汁哺育幼崽，在短时间 内解决了幼崽的温饱和营养问题，因而大大提高 了后代的成活率、增强了对自然环境的适应能力
1、兔和狼的牙齿有什么共同特点？ 2、兔和狼的牙齿有什么不同？这与它们的生活习性 有什么关系？
3、牙齿的分化对摄食和消化有什么意义？
门齿用于切割食物 臼齿用于磨碎食物 犬齿用于撕裂食物
北部白犀牛
刚果瓜兰巴 (Garamba)国家 公园拥有世界仅 存的不足25只的 北部白犀牛，北
部白犀牛将可能
在地球上彻底消 失。
伊比利亚猞猁 也被称为西班 牙猞猁 (Spanish Lynx)。 它是国际公认 的数量最少的 中型猫科动物， 目前仅剩不足 120只。
苏门达腊猩猩
产地印度尼西亚。 尽管生活在国家 公园和保护区中， 但这些地区仍极 易受到当地人的 非法猎杀和农垦 活动的毁坏，以 至于每年数量都 要减少1000。
1、概述哺乳动物的主要特征（重难点） 2、说明哺乳动物与人类生活的关系 3、通过学习，确立关注哺乳动物生存环境的观点
人教版初中生物课标版八年级上册第五单元第一章第七节 哺乳动物(共34张PPT)
课后作业（二）
列表比较动物的主要 类群中各自的主要特征， 简要归纳动物进化的规律 （主要从结构、等级以及 生活环境等方面）
同学们再见！
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成 。2021/8/102021/8/102021/8/102021/8/108/10/2021
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14、谁要是自己还没有发展培养和教 育好， 他就不 能发展 培养和 教育别 人。2021年8月 10日星 期二2021/8/102021/8/102021/8/10
A.蚯蚓身体分节，属于节肢动物 B.爬行动物、鸟类、哺乳动物均属于恒温 动物 C.鲨鱼、鲸、海豚、海狮、海马均属于哺 乳动物 D.爬行动物、鸟类和哺乳动物的生殖和发 育已经摆脱了对水环境的依赖，适应陆地 生活。
课后作业（一）
鸭嘴兽是 鸭 一种体温不恒 嘴 定，下蛋 （卵 兽
生）的动物。 请查阅材料对 鸭嘴兽这种动 物进行归类
A.主要特征包括胎生和哺乳 B.是动物界最高等的类群 C.有些可以生活在水中 D.哺乳动物适应环境的能力很强，能 适应任何环境。
6.下列哪项不是胎生、哺乳的优势？（C）
A.大大提高了幼崽的成活率 B.为幼崽推提供了更好的营养条件 C.提高了哺乳动物的受精率 D.为胚胎发育提供了更稳的环境
D 7.下列关于动物的描述，正确的是（ ）
八年级《生物学》上册
第七节 哺乳动物
第七节 哺乳动物
学习目标：
1.哺乳动物的主要特征
2.举例说明哺乳动物与人类生 活的关系
一、哺乳动物的主要特征
观察不同种的哺乳动物
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9、要学生做的事，教职员躬亲共做； 要学生 学的知 识，教 职员躬 亲共学 ；要学 生守的 规则， 教职员 躬亲共 守。2021/8/102021/8/10Tuesday, August 10, 2021
pTRE3G-Luc哺乳动物表达载体说明
pTRE3G-Luc哺乳动物表达载体说明pTRE3G-Luc编号载体名称北京华越洋⽣物VECT6088 pTRE3G--‐LucpTRE3G--‐Luc载体基本信息载体名称: pTRE3G-Luc质粒类型: 哺乳细胞表达；四环素调控载体⾼拷贝/低拷贝: --启动⼦: --克隆⽅法: 多克隆位点，限制性内切酶载体⼤⼩: 5075bp5' 测序引物及序列: --3' 测序引物及序列: --载体标签: --载体抗性: 氨苄青霉素（Ampicillin)筛选标记: --备注: --稳定性: --组成型: --病毒/⾮病毒: --pTRE3G--‐Luc载体质粒图谱和多克隆位点信息其他哺乳动物表达载体：pCHO1.0 pBApo-CMV-Pur pOPRSVIpcDNA3.1/His C pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO pREP4pcDNA3.1/His B pcDNA5/FRT/TO-TOPO pDual-GCpcDNA3.1/His A pcDNA5/TO pBK-RSVpIRESpuro3 pcDNA5/FRT/TO pBK-CMVpIRES2-EGFP pcDNA5/FRT pBI-CMV4pTT5 pFLAG-CMV2 pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ pNFkB-DD-tdTomato pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO pOPI3CAT pBI-CMV5 pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO pGene/V5-His B pSEAP2-Basic pOptiVEC-TOPO pSwitchpSEAP2-Control pCMV-MEKK1 pCMVLacIpBI-CMV3 pCMV-MEK1 pVgRxRpBI-CMV2 pCMV-PKA pINDpBI-CMV1 pcDNA6.2/nTC-Tag-DEST pTRE3G-LucpNFκB-MetLuc2-Reporter pcDNA6.2/cTC-Tag-DEST pTRE3GpCRE-MetLuc2-Reporter pcDNA3.2/V5/GW/D-TOPO pTRE2-hygropAcGFP1-Actin pcDNA6.2/V5/GW/D-TOPO pTRE-TightpAcGFP1-N In-Fusion Ready pcDNA6.2/nGeneBLAzer-GW/D-TOPO pTK-hygpAcGFP1-C3 pcDNA6.2/C-YFP-DEST pTet-OnpAcGFP1-C pcDNA6.2/cGeneBLAzer-DEST pTet-OffpAcGFP1-p53 pcDNA6/V5-His A pTet on advanced pAcGFP1-Mito pcDNA6/V5-His B pRevTREpAcGFP1-Mem pcDNA6/V5-His C pRevTet-OnpAcGFP1-Lam pcDNA6/myc-His C pRevTet-OffpAcGFP1-Golgi pcDNA6/myc-His A pCMV-Tet3GpAcGFP1-F pcDNA6/myc-His B pTRE2pAcGFP1-Hyg-C1 pcDNA6.2/nGeneBLAzer-DEST pBD-NF-κBpAsRed2-N1 pcDNA4/HisMax-TOPO pCMV-ADptdTomato-N1 pcDNA6.2/nLumio-DEST pCMV-BDpCMV-tdTomato pcDNA6.2/cLumio-DEST pBIND-Id ControlpCRE-DD-tdTomato pcDNA4/myc-His C pBINDpCMV-DsRed-Express2 pcDNA4/HisMax C pG5 luciferasepEF1α-tdTomato pcDNA4/HisMax A pACT-MyoDpCRE-hrGFP c-Flag pcDNA3 pACTptdTomato-C1 pcDNA4/HisMax B pCMV-SPORT6 pAsRed2-C1 pcDNA4/myc-His B pGL4.13pGL3-Promoter pcDNA4/myc-His A pGL4.19pGL3 basic pcDNA4/His C pGL4.26pAcGFP1-C2 pcDNA4/His B pGL4.20pAcGFP1-C1 pcDNA4/His A pGL4.29pAcGFP1-N3 pcDNA6/TR pGL4.30pAcGFP1-N2 pcDNA4/TO/Myc-His A pGL4.27pAcGFP1-N1 pcDNA4/TO pGL4.75pAcGFP1-C In-Fusion Ready pcDNA4/TO/Myc-His B pGL4.10pCRE-DD-AmCyan1 pcDNA4/TO/Myc-His C pGRN145pNFkB-DD-AmCyan1 pcDNA3.3-TOPO pSecTag2 A pDsRed2-Bid pBudCE4.1 pEBVHis B pDsRED2-Mito pFLAG-CMV-4 pEBVHis ApDD-AmCyan1 Reporter pFLAG-CMV-3 pCMV-Tag 3C pAmCyan1-N1 pFLAG-CMV-2 pCMV-Tag 3A pAmCyan1-C1 pFLAG-CMV-5a pCMV-Tag 3BpEF1α-IRES-DsRed-Express2 p3XFLAG-CMV-9 pCMV-Tag 5CpEF1α-DsRed-Monomer-N1 p3xFLAG-CMV-10 pCMV-Tag 5A pDsRED-Monomer-N1 p3XFLAG-CMV-8 pCMV-Tag 4A pDsRed-Express-N1 p3XFLAG-CMV-7.1 pCMV-Tag 5Bp3XFLAG-CMV-7 pDsRed-Monomer-N In-Fusion Ready pCMV-Tag 4B pDsRed-Express-C1 p3XFLAG-CMV-13 pCMV-Tag2C pIRES2-ZsGreen1 p3XFLAG-CMV-14 pCMV-Tag 2B pDsRed-Express2-C1 plRES2-ZsGreen1 pCMV-Tag 2A pDsRed-Express2-N1 pBApo-EF1α-pur pCMV-LacZpEF1α-DsRed-Express2 pBApo-EF1α-neo pCMV-MycpIRES2-DsRed-Express pBApo-CMV pEF1α-IRES-AcGFP1 pIRES2-DsRed-Express2 pBApo-CMV-neo pEF1α-IRES-ZsGreen1 pIRES-hrGFP-1a pIRES-EGFP pEF1α-AcGFP1-N1 pIRESneo2 pIRESneo3 pIRES2-DsRed2 pIRESneo pDsRed-Monomer pIRES2-AcGFP1 pIREShyg3 pIRES。
pcDNA4 myc-His C哺乳动物表达载体说明
pcDNA4/myc-His C编号 载体名称北京华越洋生物VECT6123 pcDNA4/myc-‐His C pcDNA4/myc-‐His C载体基本信息载体名称: pcDNA4/myc-His C质粒类型: 哺乳动物表达载体；cDNA表达载体高拷贝/低拷贝: 高拷贝克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶启动子: CMV载体大小: 5071 bp5' 测序引物及序列: T7 Forward: 5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’ 3' 测序引物及序列: BGH Reverse: 5-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3 载体标签: His Tag (C-端）, c-Myc Epitope Tag（C-端）载体抗性: 氨苄青霉素筛选标记: Zeocin克隆菌株: TOP10F´, DH5a, JM109, TOP10宿主细胞（系）: 常规细胞系，如293、Hela等备注: pcDNA4/myc-His C 载体是哺乳动物表达载体，适用于cDNA的表达与克隆；CMV启动子驱动目的基因的高水平表达；pcDNA4/myc-His A,B,C的区别仅在于多克隆位点处。
稳定性: 瞬表达或稳表达组成型/诱导型: 组成型病毒/非病毒: 非病毒pcDNA4/myc-‐His C载体质粒图谱和多克隆位点信息pcDNA4/myc-‐His C载体描述pcDNA4/myc-His A, B, and C are 5.1 kb vectors designed for overproduction of recombinant proteins in mammalian cell lines. Features of the vectors allow purification and detection of expressed proteins (see pages 11-12 for more information). High-level stable and transient expression can be carried out in most mammalian cells. The vectors contain the following elements:Human cytomegalovirus immediate-early (CMV) promoter for high-level expression in a wide range of mammalian cellsThree reading frames to facilitate in-frame cloning with a C-terminal peptide encoding the myc (c-myc) epitope and a polyhistidine (6xHis) metal-binding tagZeocin resistance gene for selection of stable cell lines (Mulsant et al., 1988) (see page 14 for more information).Episomal replication in cell lines that are latently infected with SV40 or that express the SV40 large T antigen (e.g., COS7).The control plasmid, pcDNA4/myc-His/lacZ is included for use as a positive control for transfection, expression, and detection in the cell line of choice.实验流程：Use the following outline to clone and express your gene of interest in pcDNA4/myc-His:1.Consult the multiple cloning sites described on pages 3-4 to determine which vector (A, B, or C) to use for cloning your gene in frame with the C-terminal myc epitope and the polyhistidine tag.2.Ligate your insert into the appropriate vector and transform into E. coli. Select transformants on 50 to 100 μg/mL ampicillin or 25 to 50g/mL Zeocin in Low Salt LB. For more information.3.Analyze your transformants for the presence of insert by restriction digestion.4.Select a transformant with the correct restriction pattern and use sequencing to confirm that your gene is cloned in-frame with the C-terminal peptide.5.Transfect your construct into the cell line of choice using your own method of transfection. Generate a stable cell line, if desired.6.Test for expression of your recombinant gene by western blot analysis or functional assay. For antibodies to the myc epitope or the C-terminal polyhistidine tag.7.To purify your recombinant protein, you may use metal-chelating resin such as ProBond. ProBond resin is available separatelypcDNA4/myc-‐His C载体序列ORIGIN1 GACGGATCGG GAGATCTCCC GATCCCCTAT GGTCGACTCT CAGTACAATC TGCTCTGATG61 CCGCATAGTT AAGCCAGTAT CTGCTCCCTG CTTGTGTGTT GGAGGTCGCT GAGTAGTGCG 121 CGAGCAAAAT TTAAGCTACA ACAAGGCAAG GCTTGACCGA CAATTGCATG AAGAATCTGC 181 TTAGGGTTAG GCGTTTTGCG CTGCTTCGCG ATGTACGGGC CAGATATACG CGTTGACATT 241 GATTATTGAC TAGTTATTAA TAGTAATCAA TTACGGGGTC ATTAGTTCAT AGCCCATATA 301 TGGAGTTCCG CGTTACATAA CTTACGGTAA ATGGCCCGCC TGGCTGACCG CCCAACGACC 361 CCCGCCCATT GACGTCAATA ATGACGTATG TTCCCATAGT AACGCCAATA GGGACTTTCC 421 ATTGACGTCA ATGGGTGGAC TATTTACGGT AAACTGCCCA CTTGGCAGTA CATCAAGTGT 481 ATCATATGCC AAGTACGCCC CCTATTGACG TCAATGACGG TAAATGGCCC GCCTGGCATT 541 ATGCCCAGTA CATGACCTTA TGGGACTTTC CTACTTGGCA GTACATCTAC GTATTAGTCA 601 TCGCTATTAC CATGGTGATG CGGTTTTGGC AGTACATCAA TGGGCGTGGA TAGCGGTTTG 661 ACTCACGGGG ATTTCCAAGT CTCCACCCCA TTGACGTCAA TGGGAGTTTG TTTTGGCACC 721 AAAATCAACG GGACTTTCCA AAATGTCGTA ACAACTCCGC CCCATTGACG CAAATGGGCG 781 GTAGGCGTGT ACGGTGGGAG GTCTATATAA GCAGAGCTCT CTGGCTAACT AGAGAACCCA 841 CTGCTTACTG GCTTATCGAA ATTAATACGA CTCACTATAG GGAGACCCAA GCTGGCTAGT 901 TAAGCTTGGT ACCGAGCTCG GATCCACTAG TCCAGTGTGG TGGAATTCTG CAGATATCCA 961 GCACAGTGGC GGCCGCTCGA GGTCACCCAT TCGAACAAAA ACTCATCTCA GAAGAGGATC 1021 TGAATATGCA TACCGGTCAT CATCACCATC ACCATTGAGT TTAAACCCGC TGATCAGCCT 1081 CGACTGTGCC TTCTAGTTGC CAGCCATCTG TTGTTTGCCC CTCCCCCGTG CCTTCCTTGA 1141 CCCTGGAAGG TGCCACTCCC ACTGTCCTTT CCTAATAAAA TGAGGAAATT GCATCGCATT 1201 GTCTGAGTAG GTGTCATTCT ATTCTGGGGG GTGGGGTGGG GCAGGACAGC AAGGGGGAGG 1261 ATTGGGAAGA CAATAGCAGG CATGCTGGGG ATGCGGTGGG CTCTATGGCT TCTGAGGCGG 1321 AAAGAACCAG CTGGGGCTCT AGGGGGTATC CCCACGCGCC CTGTAGCGGC GCATTAAGCG 1381 CGGCGGGTGT GGTGGTTACG CGCAGCGTGA CCGCTACACT TGCCAGCGCC CTAGCGCCCG 1441 CTCCTTTCGC TTTCTTCCCT TCCTTTCTCG CCACGTTCGC CGGCTTTCCC CGTCAAGCTC 1501 TAAATCGGGG CATCCCTTTA GGGTTCCGAT TTAGTGCTTT ACGGCACCTC GACCCCAAAA 1561 AACTTGATTA GGGTGATGGT TCACGTAGTG GGCCATCGCC CTGATAGACG GTTTTTCGCC 1621 CTTTGACGTT GGAGTCCACG TTCTTTAATA GTGGACTCTT GTTCCAAACT GGAACAACAC 1681 TCAACCCTAT CTCGGTCTAT TCTTTTGATT TATAAGGGAT TTTGGGGATT TCGGCCTATT 1741 GGTTAAAAAA TGAGCTGATT TAACAAAAAT TTAACGCGAA TTAATTCTGT GGAATGTGTG 1801 TCAGTTAGGG TGTGGAAAGT CCCCAGGCTC CCCAGGCAGG CAGAAGTATG CAAAGCATGC 1861 ATCTCAATTA GTCAGCAACC AGGTGTGGAA AGTCCCCAGG CTCCCCAGCA GGCAGAAGTA 1921 TGCAAAGCAT GCATCTCAAT TAGTCAGCAA CCATAGTCCC GCCCCTAACT CCGCCCATCC 1981 CGCCCCTAAC TCCGCCCAGT TCCGCCCATT CTCCGCCCCA TGGCTGACTA ATTTTTTTTA 2041 TTTATGCAGA GGCCGAGGCC GCCTCTGCCT CTGAGCTATT CCAGAAGTAG TGAGGAGGCT 2101 TTTTTGGAGG CCTAGGCTTT TGCAAAAAGC TCCCGGGAGC TTGTATATCC ATTTTCGGAT 2161 CTGATCAGCA CGTGTTGACA ATTAATCATC GGCATAGTAT ATCGGCATAG TATAATACGA 2221 CAAGGTGAGG AACTAAACCA TGGCCAAGTT GACCAGTGCC GTTCCGGTGC TCACCGCGCG 2281 CGACGTCGCC GGAGCGGTCG AGTTCTGGAC CGACCGGCTC GGGTTCTCCC GGGACTTCGT 2341 GGAGGACGAC TTCGCCGGTG TGGTCCGGGA CGACGTGACC CTGTTCATCA GCGCGGTCCA 2401 GGACCAGGTG GTGCCGGACA ACACCCTGGC CTGGGTGTGG GTGCGCGGCC TGGACGAGCT 2461 GTACGCCGAG TGGTCGGAGG TCGTGTCCAC GAACTTCCGG GACGCCTCCG GGCCGGCCAT 2521 GACCGAGATC GGCGAGCAGC CGTGGGGGCG GGAGTTCGCC CTGCGCGACC CGGCCGGCAA 2581 CTGCGTGCAC TTCGTGGCCG AGGAGCAGGA CTGACACGTG CTACGAGATT TCGATTCCAC 2641 CGCCGCCTTC TATGAAAGGT TGGGCTTCGG AATCGTTTTC CGGGACGCCG GCTGGATGAT2701 CCTCCAGCGC GGGGATCTCA TGCTGGAGTT CTTCGCCCAC CCCAACTTGT TTATTGCAGC 2761 TTATAATGGT TACAAATAAA GCAATAGCAT CACAAATTTC ACAAATAAAG CATTTTTTTC 2821 ACTGCATTCT AGTTGTGGTT TGTCCAAACT CATCAATGTA TCTTATCATG TCTGTATACC 2881 GTCGACCTCT AGCTAGAGCT TGGCGTAATC ATGGTCATAG CTGTTTCCTG TGTGAAATTG 2941 TTATCCGCTC ACAATTCCAC ACAACATACG AGCCGGAAGC ATAAAGTGTA AAGCCTGGGG 3001 TGCCTAATGA GTGAGCTAAC TCACATTAAT TGCGTTGCGC TCACTGCCCG CTTTCCAGTC 3061 GGGAAACCTG TCGTGCCAGC TGCATTAATG AATCGGCCAA CGCGCGGGGA GAGGCGGTTT 3121 GCGTATTGGG CGCTCTTCCG CTTCCTCGCT CACTGACTCG CTGCGCTCGG TCGTTCGGCT 3181 GCGGCGAGCG GTATCAGCTC ACTCAAAGGC GGTAATACGG TTATCCACAG AATCAGGGGA 3241 TAACGCAGGA AAGAACATGT GAGCAAAAGG CCAGCAAAAG GCCAGGAACC GTAAAAAGGC 3301 CGCGTTGCTG GCGTTTTTCC ATAGGCTCCG CCCCCCTGAC GAGCATCACA AAAATCGACG 3361 CTCAAGTCAG AGGTGGCGAA ACCCGACAGG ACTATAAAGA TACCAGGCGT TTCCCCCTGG 3421 AAGCTCCCTC GTGCGCTCTC CTGTTCCGAC CCTGCCGCTT ACCGGATACC TGTCCGCCTT 3481 TCTCCCTTCG GGAAGCGTGG CGCTTTCTCA ATGCTCACGC TGTAGGTATC TCAGTTCGGT 3541 GTAGGTCGTT CGCTCCAAGC TGGGCTGTGT GCACGAACCC CCCGTTCAGC CCGACCGCTG 3601 CGCCTTATCC GGTAACTATC GTCTTGAGTC CAACCCGGTA AGACACGACT TATCGCCACT 3661 GGCAGCAGCC ACTGGTAACA GGATTAGCAG AGCGAGGTAT GTAGGCGGTG CTACAGAGTT 3721 CTTGAAGTGG TGGCCTAACT ACGGCTACAC TAGAAGGACA GTATTTGGTA TCTGCGCTCT 3781 GCTGAAGCCA GTTACCTTCG GAAAAAGAGT TGGTAGCTCT TGATCCGGCA AACAAACCAC 3841 CGCTGGTAGC GGTGGTTTTT TTGTTTGCAA GCAGCAGATT ACGCGCAGAA AAAAAGGATC 3901 TCAAGAAGAT CCTTTGATCT TTTCTACGGG GTCTGACGCT CAGTGGAACG AAAACTCACG 3961 TTAAGGGATT TTGGTCATGA GATTATCAAA AAGGATCTTC ACCTAGATCC TTTTAAATTA 4021 AAAATGAAGT TTTAAATCAA TCTAAAGTAT ATATGAGTAA ACTTGGTCTG ACAGTTACCA 4081 ATGCTTAATC AGTGAGGCAC CTATCTCAGC GATCTGTCTA TTTCGTTCAT CCATAGTTGC 4141 CTGACTCCCC GTCGTGTAGA TAACTACGAT ACGGGAGGGC TTACCATCTG GCCCCAGTGC 4201 TGCAATGATA CCGCGAGACC CACGCTCACC GGCTCCAGAT TTATCAGCAA TAAACCAGCC 4261 AGCCGGAAGG GCCGAGCGCA GAAGTGGTCC TGCAACTTTA TCCGCCTCCA TCCAGTCTAT 4321 TAATTGTTGC CGGGAAGCTA GAGTAAGTAG TTCGCCAGTT AATAGTTTGC GCAACGTTGT 4381 TGCCATTGCT ACAGGCATCG TGGTGTCACG CTCGTCGTTT GGTATGGCTT CATTCAGCTC 4441 CGGTTCCCAA CGATCAAGGC GAGTTACATG ATCCCCCATG TTGTGCAAAA AAGCGGTTAG 4501 CTCCTTCGGT CCTCCGATCG TTGTCAGAAG TAAGTTGGCC GCAGTGTTAT CACTCATGGT 4561 TATGGCAGCA CTGCATAATT CTCTTACTGT CATGCCATCC GTAAGATGCT TTTCTGTGAC 4621 TGGTGAGTAC TCAACCAAGT CATTCTGAGA ATAGTGTATG CGGCGACCGA GTTGCTCTTG 4681 CCCGGCGTCA ATACGGGATA ATACCGCGCC ACATAGCAGA ACTTTAAAAG TGCTCATCAT 4741 TGGAAAACGT TCTTCGGGGC GAAAACTCTC AAGGATCTTA CCGCTGTTGA GATCCAGTTC 4801 GATGTAACCC ACTCGTGCAC CCAACTGATC TTCAGCATCT TTTACTTTCA CCAGCGTTTC 4861 TGGGTGAGCA AAAACAGGAA GGCAAAATGC CGCAAAAAAG GGAATAAGGG CGACACGGAA 4921 ATGTTGAATA CTCATACTCT TCCTTTTTCA ATATTATTGA AGCATTTATC AGGGTTATTG 4981 TCTCATGAGC GGATACATAT TTGAATGTAT TTAGAAAAAT AAACAAATAG GGGTTCCGCG 5041 CACATTTCCC CGAAAAGTGC CACCTGACGT C//其他哺乳动物表达载体：pCHO1.0 pBApo-CMV-Pur pOPRSVIpcDNA3.1/His C pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO pREP4pcDNA3.1/His B pcDNA5/FRT/TO-TOPO pDual-GCpcDNA3.1/His A pcDNA5/TO pBK-RSVpIRESpuro3 pcDNA5/FRT/TO pBK-CMVpIRES2-EGFP pcDNA5/FRT pBI-CMV4pTT5 pFLAG-CMV2 pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ pNFkB-DD-tdTomato pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO pOPI3CATpBI-CMV5 pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO pGene/V5-His B pSEAP2-Basic pOptiVEC-TOPO pSwitchpSEAP2-Control pCMV-MEKK1 pCMVLacIpBI-CMV3 pCMV-MEK1 pVgRxRpBI-CMV2 pCMV-PKA pINDpBI-CMV1 pcDNA6.2/nTC-Tag-DEST pTRE3G-LucpNFκB-MetLuc2-Reporter pcDNA6.2/cTC-Tag-DEST pTRE3GpCRE-MetLuc2-Reporter pcDNA3.2/V5/GW/D-TOPO pTRE2-hygropAcGFP1-Actin pcDNA6.2/V5/GW/D-TOPO pTRE-TightpAcGFP1-N In-Fusion Ready pcDNA6.2/nGeneBLAzer-GW/D-TOPO pTK-hygpAcGFP1-C3 pcDNA6.2/C-YFP-DEST pTet-OnpAcGFP1-C pcDNA6.2/cGeneBLAzer-DEST pTet-OffpAcGFP1-p53 pcDNA6/V5-His A pTet on advanced pAcGFP1-Mito pcDNA6/V5-His B pRevTREpAcGFP1-Mem pcDNA6/V5-His C pRevTet-OnpAcGFP1-Lam pcDNA6/myc-His C pRevTet-OffpAcGFP1-Golgi pcDNA6/myc-His A pCMV-Tet3GpAcGFP1-F pcDNA6/myc-His B pTRE2pAcGFP1-Hyg-C1 pcDNA6.2/nGeneBLAzer-DEST pBD-NF-κBpAsRed2-N1 pcDNA4/HisMax-TOPO pCMV-ADptdTomato-N1 pcDNA6.2/nLumio-DEST pCMV-BDpCMV-tdTomato pcDNA6.2/cLumio-DEST pBIND-Id ControlpCRE-DD-tdTomato pcDNA4/myc-His C pBINDpCMV-DsRed-Express2 pcDNA4/HisMax C pG5 luciferasepEF1α-tdTomato pcDNA4/HisMax A pACT-MyoDpCRE-hrGFP c-Flag pcDNA3 pACTptdTomato-C1 pcDNA4/HisMax B pCMV-SPORT6 pAsRed2-C1 pcDNA4/myc-His B pGL4.13pGL3-Promoter pcDNA4/myc-His A pGL4.19pGL3 basic pcDNA4/His C pGL4.26pAcGFP1-C2 pcDNA4/His B pGL4.20pAcGFP1-C1 pcDNA4/His A pGL4.29pAcGFP1-N3 pcDNA6/TR pGL4.30pAcGFP1-N2 pcDNA4/TO/Myc-His A pGL4.27pAcGFP1-N1 pcDNA4/TO pGL4.75pAcGFP1-C In-Fusion Ready pcDNA4/TO/Myc-His B pGL4.10pCRE-DD-AmCyan1 pcDNA4/TO/Myc-His C pGRN145pNFkB-DD-AmCyan1 pcDNA3.3-TOPO pSecTag2 A pDsRed2-Bid pBudCE4.1 pEBVHis B pDsRED2-Mito pFLAG-CMV-4 pEBVHis ApDD-AmCyan1 Reporter pFLAG-CMV-3 pCMV-Tag 3C pAmCyan1-N1 pFLAG-CMV-2 pCMV-Tag 3A pAmCyan1-C1 pFLAG-CMV-5a pCMV-Tag 3BpEF1α-IRES-DsRed-Express2 p3XFLAG-CMV-9 pCMV-Tag 5CpEF1α-DsRed-Monomer-N1 p3xFLAG-CMV-10 pCMV-Tag 5A pDsRED-Monomer-N1 p3XFLAG-CMV-8 pCMV-Tag 4A pDsRed-Express-N1 p3XFLAG-CMV-7.1 pCMV-Tag 5Bp3XFLAG-CMV-7 pDsRed-Monomer-N In-Fusion Ready pCMV-Tag 4B pDsRed-Express-C1 p3XFLAG-CMV-13 pCMV-Tag 2C pIRES2-ZsGreen1 p3XFLAG-CMV-14 pCMV-Tag 2B pDsRed-Express2-C1 plRES2-ZsGreen1 pCMV-Tag 2A pDsRed-Express2-N1 pBApo-EF1α-pur pCMV-LacZpEF1α-DsRed-Express2 pBApo-EF1α-neo pCMV-MycpIRES2-DsRed-Express pBApo-CMV pEF1α-IRES-AcGFP1 pIRES2-DsRed-Express2 pBApo-CMV-neo pEF1α-IRES-ZsGreen1 pIRES-hrGFP-1a pIRES-EGFP pEF1α-AcGFP1-N1 pIRESneo2 pIRESneo3 pIRES2-DsRed2 pIRESneo pDsRed-Monomer pIRES2-AcGFP1 pIREShyg3 pIRES。
哺乳动物细胞表达系统表达策略
一、概述在生物医学研究领域，哺乳动物细胞表达系统被广泛应用于蛋白质表达、疫苗研发、疾病治疗等多个方面。
然而，由于哺乳动物细胞表达系统的复杂性和不稳定性，研究人员不断探索新的表达策略，以获得更高效、更稳定的表达效果。
本文将就哺乳动物细胞表达系统的表达策略进行探讨，介绍目前常用的表达策略，并分析其优缺点。
二、哺乳动物细胞表达系统常用的表达策略1. 质粒转染法质粒转染法是最常见的哺乳动物细胞表达策略之一。
该方法通过将感兴趣的基因克隆入表达载体，然后转染至哺乳动物细胞中，利用哺乳动物细胞的表达机器来合成蛋白质。
质粒转染法操作简便，成本较低，适用于初步筛选基因表达情况。
2. 病毒载体介导的表达病毒载体介导的表达策略利用改良过的病毒载体携带外源基因，并将其导入哺乳动物细胞，以实现高效表达。
这种表达方式具有高效率和稳定性，适用于大规模基因表达和蛋白质生产。
3. 融合蛋白表达融合蛋白表达是一种常用的策略，通过将目标蛋白与融合标签结合，提高其稳定性和溶解性，使其更容易在哺乳动物细胞中表达和纯化。
4. 基因组集成技术基因组集成技术是近年来出现的一种新策略，通过将外源基因整合到哺乳动物细胞基因组中，实现长期高效的表达。
这种策略可以提高蛋白质表达的稳定性和可控性，适用于需要长期大量表达的研究领域。
5.化学修饰策略化学修饰策略是指通过对基因序列进行合成优化、蛋白质工程、修饰剂添加等手段，改善蛋白质表达效率和稳定性。
这种策略在提高蛋白质溶解性、减少蛋白结构的折叠和聚集等方面具有一定优势。
三、各种表达策略的优缺点分析1. 质粒转染法优缺点优点：操作简便、成本低、适用于常规表达实验缺点：表达水平和稳定性有限，不适用于大规模蛋白质表达和纯化2. 病毒载体介导的表达优缺点优点：高效率、稳定性好、适用于大规模蛋白质生产缺点：病毒安全性、成本较高、用于基础研究时操作复杂3. 融合蛋白表达优缺点优点：提高蛋白质稳定性和溶解性、易于纯化缺点：可能影响蛋白质的生物活性和功能4. 基因组集成技术优缺点优点：长期高效表达、提高表达稳定性和可控性缺点：操作复杂、潜在的遗传毒性5.化学修饰策略优缺点优点：改善蛋白质表达效率和稳定性缺点：操作繁琐、可能影响蛋白质的天然构象和活性四、结论与展望当前，哺乳动物细胞表达系统的表达策略多种多样，各自具有一定的优缺点。
人教版八年级生物上册第5单元第1章第7节哺乳动物(共19张PPT)
10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。20:06:5720:06:5720:068/28/2021 8:06:57 PM
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11、只有让学生不把全部时间都用在学习上，而留下许多自由支配的时间，他才能顺利地学习……（这）是教育过程的逻辑。21.8.2820:06:5720:06Aug-2128-Aug-21
• 2、兔和狼的牙齿有什么不同？这与它们的 生活习性有什么关系？ 狼有犬齿，而兔没有，这是狼与兔的生活习 性相适应的。狼是肉食动物，犬齿尖锐锋利， 可攻击、撕咬猎物，兔是草食动物，门齿形 状像凿，适于切断食物，臼齿咀嚼面宽阔， 适于磨碎食物。
• 3、牙齿的分化对摄食和消化有什么意义？
牙齿的分化提高了动物摄取食物 的能力，增强了对食物的消化能 力。
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12、要记住，你不仅是教课的教师，也是学生的教育者，生活的导师和道德的引路人。20:06:5720:06:5720:06Saturday, August 28, 2021
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。21.8.2821.8.2820:06:5720:06:57August 28, 2021
胸腔 腹腔
心脏
膈
和肺 胃肝肠
4.哺
乳动
物所
特有
的结
5、哺乳动物适于陆地生活的原因 胎生；哺乳；神经系统和感觉器官发达。
家兔的神经系统由哪几部分构成？有什么好处呢？
家兔的神经系统由脑、脊髓、和神经构成。
脑包括大脑、小脑和脑干三部分。 神经系统发达，能对外界刺激及时作出反应， 能适应较为复杂的生活环境。
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17、儿童是中心，教育的措施便围绕他们而组织起来。下午8时6分57秒下午8时6分20:06:5721.8.28
pCHO1.0哺乳动物表达载体说明
pCHO1.0编号 载体名称北京华越洋生物VECT6001 pCHO1.0pCHO1.0载体基本信息载体名称: pCHO1.0质粒类型: 哺乳动物细胞表达载体, 哺乳动物细胞稳定细胞系建立载体 启动子: CMV表达水平: 高克隆方法: 多克隆位点，限制性内切酶载体大小: 12988 b p5' 测序引物: AB-‐F: G TCTGAGCCTCCTTGTCTTG； EP-‐F：GGTGTCGTGAGGAATTTCAG3' 测序引物: AB-‐R: A GAAGACACGGGAGACTTAG; EP-‐R: G AGGCAGCCGGATCATAATC载体标签: /载体抗性: 卡那筛选标记: Puromycin， DHFR备注: -‐-‐稳定性: 稳表达组成型: 组成型 Constitutive病毒/非病毒: 非病毒pCHO1.0载体质粒图谱和多克隆位点信息pCHO1.0载体简介pCHO 1.0载体是能够表达一个基因或利用载体上面的杂交CMV启动子共表达2个目的基因。
该载体包含有二氢叶酸还原酶（DHFR）选择性标记和嘌呤霉素（puromycin）抗性基因，可以同时使用MTX和嘌呤霉素进行筛选。
其他哺乳动物表达载体：pCHO1.0 pBApo-CMV-Pur pOPRSVIpcDNA3.1/His C pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO pREP4pcDNA3.1/His B pcDNA5/FRT/TO-TOPO pDual-GCpcDNA3.1/His A pcDNA5/TO pBK-RSVpIRESpuro3 pcDNA5/FRT/TO pBK-CMVpIRES2-EGFP pcDNA5/FRT pBI-CMV4pTT5 pFLAG-CMV2 pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ pNFkB-DD-tdTomato pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO pOPI3CATpBI-CMV5 pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO pGene/V5-His BpSEAP2-Basic pOptiVEC-TOPO pSwitchpSEAP2-Control pCMV-MEKK1 pCMVLacIpBI-CMV3 pCMV-MEK1 pVgRxRpBI-CMV2 pCMV-PKA pINDpBI-CMV1 pcDNA6.2/nTC-Tag-DEST pTRE3G-LucpNFκB-MetLuc2-Reporter pcDNA6.2/cTC-Tag-DEST pTRE3GpCRE-MetLuc2-Reporter pcDNA3.2/V5/GW/D-TOPO pTRE2-hygropAcGFP1-Actin pcDNA6.2/V5/GW/D-TOPO pTRE-TightpAcGFP1-N In-Fusion Ready pcDNA6.2/nGeneBLAzer-GW/D-TOPO pTK-hygpAcGFP1-C3 pcDNA6.2/C-YFP-DEST pTet-OnpAcGFP1-C pcDNA6.2/cGeneBLAzer-DEST pTet-OffpAcGFP1-p53 pcDNA6/V5-His A pTet on advanced pAcGFP1-Mito pcDNA6/V5-His B pRevTREpAcGFP1-Mem pcDNA6/V5-His C pRevTet-OnpAcGFP1-Lam pcDNA6/myc-His C pRevTet-OffpAcGFP1-Golgi pcDNA6/myc-His A pCMV-Tet3GpAcGFP1-F pcDNA6/myc-His B pTRE2pAcGFP1-Hyg-C1 pcDNA6.2/nGeneBLAzer-DEST pBD-NF-κBpAsRed2-N1 pcDNA4/HisMax-TOPO pCMV-ADptdTomato-N1 pcDNA6.2/nLumio-DEST pCMV-BDpCMV-tdTomato pcDNA6.2/cLumio-DEST pBIND-Id ControlpCRE-DD-tdTomato pcDNA4/myc-His C pBINDpCMV-DsRed-Express2 pcDNA4/HisMax C pG5 luciferasepEF1α-tdTomato pcDNA4/HisMax A pACT-MyoDpCRE-hrGFP c-Flag pcDNA3 pACTptdTomato-C1 pcDNA4/HisMax B pCMV-SPORT6pAsRed2-C1 pcDNA4/myc-His B pGL4.13pGL3-Promoter pcDNA4/myc-His A pGL4.19pGL3 basic pcDNA4/His C pGL4.26pAcGFP1-C2 pcDNA4/His B pGL4.20pAcGFP1-C1 pcDNA4/His A pGL4.29pAcGFP1-N3 pcDNA6/TR pGL4.30pAcGFP1-N2 pcDNA4/TO/Myc-His A pGL4.27pAcGFP1-N1 pcDNA4/TO pGL4.75pAcGFP1-C In-Fusion Ready pcDNA4/TO/Myc-His B pGL4.10pCRE-DD-AmCyan1 pcDNA4/TO/Myc-His C pGRN145pNFkB-DD-AmCyan1 pcDNA3.3-TOPO pSecTag2 A pDsRed2-Bid pBudCE4.1 pEBVHis B pDsRED2-Mito pFLAG-CMV-4 pEBVHis ApDD-AmCyan1 Reporter pFLAG-CMV-3 pCMV-Tag 3C pAmCyan1-N1 pFLAG-CMV-2 pCMV-Tag 3A pAmCyan1-C1 pFLAG-CMV-5a pCMV-Tag 3BpEF1α-IRES-DsRed-Express2 p3XFLAG-CMV-9 pCMV-Tag 5CpEF1α-DsRed-Monomer-N1 p3xFLAG-CMV-10 pCMV-Tag 5A pDsRED-Monomer-N1 p3XFLAG-CMV-8 pCMV-Tag 4A pDsRed-Express-N1 p3XFLAG-CMV-7.1 pCMV-Tag 5Bp3XFLAG-CMV-7 pDsRed-Monomer-N In-Fusion Ready pCMV-Tag 4B pDsRed-Express-C1 p3XFLAG-CMV-13 pCMV-Tag 2C pIRES2-ZsGreen1 p3XFLAG-CMV-14 pCMV-Tag 2B pDsRed-Express2-C1 plRES2-ZsGreen1 pCMV-Tag 2A pDsRed-Express2-N1 pBApo-EF1α-pur pCMV-LacZpEF1α-DsRed-Express2 pBApo-EF1α-neo pCMV-MycpIRES2-DsRed-Express pBApo-CMV pEF1α-IRES-AcGFP1 pIRES2-DsRed-Express2 pBApo-CMV-neo pEF1α-IRES-ZsGreen1 pIRES-hrGFP-1a pIRES-EGFP pEF1α-AcGFP1-N1 pIRESneo2 pIRESneo3 pIRES2-DsRed2 pIRESneo pDsRed-Monomer pIRES2-AcGFP1 pIREShyg3 pIRES。
哺乳细胞表达载体
这个是我根据个人的实验需要整理的哺乳细胞表达载体的资料，望指正Invitrogen 公司Invitrogen 公司拥有最丰富的表达载体，包括原核和真核表达系统。
其中真核表达系统中哺乳细胞表达的主要有FRT 系统、GW 系统、DEST 系统、pcDNA 系统、pRc 系统等（详细资料请看表1 ），他们分别有自己的特性。
其中FRT 系统在转染哺乳细胞后会形成相同基因的细胞，但必须和FIp 重组表达载体pOG44 共转染FIp 细胞，增加了操作时间和难度。
DEST 系统在attR1,attR2;ccdB;CmR;TEV 用于切割V5 抗原。
pRc 系统在MCS 处有 2 个BstXI 酶切位点。
还有可以表达两个外源蛋白的pBudCE4 载体pCMV/Zeo,pSV40/Zeo 和pCMV/Bsd,pEF/Bsd,pUB/Bsd 分别是用于在一新载体上构建Zeo/Bsd 抗性的盒式载体。
pcDNA 系统种类繁多，是最为普遍常用，其中分类详细，有带tag 的，也有无tag 的，分别构建了由CMV/Ub/EF-1a 启动子，在N 端/C 端增加myc-6*His/V5-6*His/6*His tag 以形成融合蛋白以及Neo/Zeo/Bsd 三种抗性基因逐一不同组合形成的哺乳细胞表达载体，充分满足多方面实验要求。
所以我们着重参考此类载体。
pcDNA 系列载体——Invitrogen 公司开发的适用于哺乳细胞表达的真核表达载体，有28个之多，由于部分载体有 3个ORF ,所以可形成 68 种重组质粒。
组分：影响表达的主要因素： CMV/Ub/EF-1a 启动子、均无内含 子序列， Neo/Zeo/Bsd/Hyg 四种抗性基因、 T7 RNA 聚合酶启动 子、转录终止信号以及 BGH polyA 、f1+pUC+SV40 复制起始子。
特性：均可瞬时 / 稳定表达。
各组分分别逐一组合成不同载体， 选择性强，可满足各种实验需要，在N 端/C 端增加myc-6*His/V5-6*His/6*His tag 以形成融合蛋白。
【VIP专享】pAcGFP1-N1哺乳动物表达载体说明
pAcGFP1-N1编号 载体名称北京华越洋生物VECT6107 pAcGFP1-‐N1pAcGFP1-‐N1载体基本信息载体名称: pAcGFP1-N1质粒类型: 哺乳动物细胞表达载体；荧光报告载体高拷贝/低拷贝: 高拷贝克隆方法: 限制性内切酶，多克隆位点启动子: CMV IE载体大小: 4726 bp5' 测序引物及序列: --3' 测序引物及序列: --载体标签: AcGFP1 (C-端）载体抗性: 卡那霉素筛选标记: 新霉素（Neomycin）克隆菌株: DH5α, HB101宿主细胞（系）: 常规细胞系（293、CV-1、CHO等）备注: 哺乳动物载体pAcGFP1-N1组成型表达C端AcGFP融合蛋白；AcGFP1与GFP相比，密码子经过了优化，更适合在哺乳动物细胞中高水平表达，同时也增强了亮度。
稳定性: 稳表达或瞬表达组成型/诱导型: 组成型病毒/非病毒: 非病毒pAcGFP1-‐N1载体质粒图谱和多克隆位点信息pAcGFP1-N1载体描述pAcGFP1-N1 encodes a green fluorescent protein (GFP) from Aequorea coerulescens (excitation maximum = 475 nm; emission maximum = 505 nm). The coding sequence of the AcGFP1 gene contains silent base changes, which correspond to human codon-usage preferences (1). The MCS in pAcGFP1-N1 is between the immediate early promoter of CMV (PCMV IE) and the AcGFP1 coding sequences. Genes cloned into the MCS will be expressed as fusions to the N-terminus of AcGFP1 if they are in the same reading frame as AcGFP1 and there are no intervening stop codons. SV40 polyadenylation signals downstream of the AcGFP1 gene direct proper processing of the 3' end of the AcGFP1 mRNA. The vector backbone also contains an SV40 origin for replication in mammalian cells expressing the SV40 T antigen. A neomycin-resistance cassette (Neor), consisting of the SV40 early promoter, the neomycin/kanamycin resistance gene of Tn5, and polyadenylation signals from the Herpes simplex virus thymidine kinase (HSV TK) gene, allows stably transfected eukaryotic cells to be selected using G418. A bacterial promoter upstream of the gene expresses kanamycin resistance in E. coli. The pAcGFP1-N1 backbone also provides a pUC origin of replication for propagation in E. coli and an f1 origin for single-stranded DNA production.Fusions to the N terminus of AcGFP1 retain the fluorescent properties of the native protein allowing the localization of the fusion protein in vivo . The target gene should be cloned into pAcGFP1-N1 so that it is in frame with the AcGFP1 coding sequences, with no intervening in-frame stop codons. The inserted gene should include the initiating ATG codon. The recombinant AcGFP1 vector can be transfected into mammalian cells using any standard transfection method. If required, stable transformants can be selected using G418 (2). pAcGFP1-N1 can also be used simply to express AcGFP1 in a cell line of interest (e.g., as a transfection marker). Propagation in E. coliSuitable host strains: DH5α, HB101 and other general purpose strains. Single-stranded DNA production requiresa host containing an F plasmid such as JM101 or XL1-Blue.Selectable marker: plasmid confers resistance to kanamycin (30 μg/ml) to E. coli hosts.E. coli replication origin: pUCCopy number: ≈500Plasmid incompatibility group: pMB1/ColE1pAcGFP1-N1载体序列ORIGIN1 TAGTTATTAA TAGTAATCAA TTACGGGGTC ATTAGTTCAT AGCCCATATA TGGAGTTCCG 61 CGTTACATAA CTTACGGTAA ATGGCCCGCC TGGCTGACCG CCCAACGACC CCCGCCCATT 121 GACGTCAATA ATGACGTATG TTCCCATAGT AACGCCAATA GGGACTTTCC ATTGACGTCA 181 ATGGGTGGAG TATTTACGGT AAACTGCCCA CTTGGCAGTA CATCAAGTGT ATCATATGCC 241 AAGTACGCCC CCTATTGACG TCAATGACGG TAAATGGCCC GCCTGGCATT ATGCCCAGTA 301 CATGACCTTA TGGGACTTTC CTACTTGGCA GTACATCTAC GTATTAGTCA TCGCTATTAC 361 CATGGTGATG CGGTTTTGGC AGTACATCAA TGGGCGTGGA TAGCGGTTTG ACTCACGGGG 421 ATTTCCAAGT CTCCACCCCA TTGACGTCAA TGGGAGTTTG TTTTGGCACC AAAATCAACG 481 GGACTTTCCA AAATGTCGTA ACAACTCCGC CCCATTGACG CAAATGGGCG GTAGGCGTGT 541 ACGGTGGGAG GTCTATATAA GCAGAGCTGG TTTAGTGAAC CGTCAGATCC GCTAGCGCTA 601 CCGGACTCAG ATCTCGAGCT CAAGCTTCGA ATTCTGCAGT CGACGGTACC GCGGGCCCGG 661 GATCCACCGG TCATGGTGAG CAAGGGCGCC GAGCTGTTCA CCGGCATCGT GCCCATCCTG 721 ATCGAGCTGA ATGGCGATGT GAATGGCCAC AAGTTCAGCG TGAGCGGCGA GGGCGAGGGC 781 GATGCCACCT ACGGCAAGCT GACCCTGAAG TTCATCTGCA CCACCGGCAA GCTGCCTGTG 841 CCCTGGCCCA CCCTGGTGAC CACCCTGAGC TACGGCGTGC AGTGCTTCTC ACGCTACCCC 901 GATCACATGA AGCAGCACGA CTTCTTCAAG AGCGCCATGC CTGAGGGCTA CATCCAGGAG 961 CGCACCATCT TCTTCGAGGA TGACGGCAAC TACAAGTCGC GCGCCGAGGT GAAGTTCGAG 1021 GGCGATACCC TGGTGAATCG CATCGAGCTG ACCGGCACCG ATTTCAAGGA GGATGGCAAC 1081 ATCCTGGGCA ATAAGATGGA GTACAACTAC AACGCCCACA ATGTGTACAT CATGACCGAC 1141 AAGGCCAAGA ATGGCATCAA GGTGAACTTC AAGATCCGCC ACAACATCGA GGATGGCAGC 1201 GTGCAGCTGG CCGACCACTA CCAGCAGAAT ACCCCCATCG GCGATGGCCC TGTGCTGCTG 1261 CCCGATAACC ACTACCTGTC CACCCAGAGC GCCCTGTCCA AGGACCCCAA CGAGAAGCGC 1321 GATCACATGA TCTACTTCGG CTTCGTGACC GCCGCCGCCA TCACCCACGG CATGGATGAG 1381 CTGTACAAGT GAGCGGCCGC GACTCTAGAT CATAATCAGC CATACCACAT TTGTAGAGGT 1441 TTTACTTGCT TTAAAAAACC TCCCACACCT CCCCCTGAAC CTGAAACATA AAATGAATGC 1501 AATTGTTGTT GTTAACTTGT TTATTGCAGC TTATAATGGT TACAAATAAA GCAATAGCAT 1561 CACAAATTTC ACAAATAAAG CATTTTTTTC ACTGCATTCT AGTTGTGGTT TGTCCAAACT 1621 CATCAATGTA TCTTAAGGCG TAAATTGTAA GCGTTAATAT TTTGTTAAAA TTCGCGTTAA 1681 ATTTTTGTTA AATCAGCTCA TTTTTTAACC AATAGGCCGA AATCGGCAAA ATCCCTTATA 1741 AATCAAAAGA ATAGACCGAG ATAGGGTTGA GTGTTGTTCC AGTTTGGAAC AAGAGTCCAC 1801 TATTAAAGAA CGTGGACTCC AACGTCAAAG GGCGAAAAAC CGTCTATCAG GGCGATGGCC 1861 CACTACGTGA ACCATCACCC TAATCAAGTT TTTTGGGGTC GAGGTGCCGT AAAGCACTAA 1921 ATCGGAACCC TAAAGGGAGC CCCCGATTTA GAGCTTGACG GGGAAAGCCG GCGAACGTGG 1981 CGAGAAAGGA AGGGAAGAAA GCGAAAGGAG CGGGCGCTAG GGCGCTGGCA AGTGTAGCGG 2041 TCACGCTGCG CGTAACCACC ACACCCGCCG CGCTTAATGC GCCGCTACAG GGCGCGTCAG 2101 GTGGCACTTT TCGGGGAAAT GTGCGCGGAA CCCCTATTTG TTTATTTTTC TAAATACATT 2161 CAAATATGTA TCCGCTCATG AGACAATAAC CCTGATAAAT GCTTCAATAA TATTGAAAAA 2221 GGAAGAGTCC TGAGGCGGAA AGAACCAGCT GTGGAATGTG TGTCAGTTAG GGTGTGGAAA 2281 GTCCCCAGGC TCCCCAGCAG GCAGAAGTAT GCAAAGCATG CATCTCAATT AGTCAGCAAC 2341 CAGGTGTGGA AAGTCCCCAG GCTCCCCAGC AGGCAGAAGT ATGCAAAGCA TGCATCTCAA 2401 TTAGTCAGCA ACCATAGTCC CGCCCCTAAC TCCGCCCATC CCGCCCCTAA CTCCGCCCAG 2461 TTCCGCCCAT TCTCCGCCCC ATGGCTGACT AATTTTTTTT ATTTATGCAG AGGCCGAGGC2521 CGCCTCGGCC TCTGAGCTAT TCCAGAAGTA GTGAGGAGGC TTTTTTGGAG GCCTAGGCTT 2581 TTGCAAAGAT CGATCAAGAG ACAGGATGAG GATCGTTTCG CATGATTGAA CAAGATGGAT 2641 TGCACGCAGG TTCTCCGGCC GCTTGGGTGG AGAGGCTATT CGGCTATGAC TGGGCACAAC 2701 AGACAATCGG CTGCTCTGAT GCCGCCGTGT TCCGGCTGTC AGCGCAGGGG CGCCCGGTTC 2761 TTTTTGTCAA GACCGACCTG TCCGGTGCCC TGAATGAACT GCAAGACGAG GCAGCGCGGC 2821 TATCGTGGCT GGCCACGACG GGCGTTCCTT GCGCAGCTGT GCTCGACGTT GTCACTGAAG 2881 CGGGAAGGGA CTGGCTGCTA TTGGGCGAAG TGCCGGGGCA GGATCTCCTG TCATCTCACC 2941 TTGCTCCTGC CGAGAAAGTA TCCATCATGG CTGATGCAAT GCGGCGGCTG CATACGCTTG 3001 ATCCGGCTAC CTGCCCATTC GACCACCAAG CGAAACATCG CATCGAGCGA GCACGTACTC 3061 GGATGGAAGC CGGTCTTGTC GATCAGGATG ATCTGGACGA AGAGCATCAG GGGCTCGCGC 3121 CAGCCGAACT GTTCGCCAGG CTCAAGGCGA GCATGCCCGA CGGCGAGGAT CTCGTCGTGA 3181 CCCATGGCGA TGCCTGCTTG CCGAATATCA TGGTGGAAAA TGGCCGCTTT TCTGGATTCA 3241 TCGACTGTGG CCGGCTGGGT GTGGCGGACC GCTATCAGGA CATAGCGTTG GCTACCCGTG 3301 ATATTGCTGA AGAGCTTGGC GGCGAATGGG CTGACCGCTT CCTCGTGCTT TACGGTATCG 3361 CCGCTCCCGA TTCGCAGCGC ATCGCCTTCT ATCGCCTTCT TGACGAGTTC TTCTGAGCGG 3421 GACTCTGGGG TTCGAAATGA CCGACCAAGC GACGCCCAAC CTGCCATCAC GAGATTTCGA 3481 TTCCACCGCC GCCTTCTATG AAAGGTTGGG CTTCGGAATC GTTTTCCGGG ACGCCGGCTG 3541 GATGATCCTC CAGCGCGGGG ATCTCATGCT GGAGTTCTTC GCCCACCCTA GGGGGAGGCT 3601 AACTGAAACA CGGAAGGAGA CAATACCGGA AGGAACCCGC GCTATGACGG CAATAAAAAG 3661 ACAGAATAAA ACGCACGGTG TTGGGTCGTT TGTTCATAAA CGCGGGGTTC GGTCCCAGGG 3721 CTGGCACTCT GTCGATACCC CACCGAGACC CCATTGGGGC CAATACGCCC GCGTTTCTTC 3781 CTTTTCCCCA CCCCACCCCC CAAGTTCGGG TGAAGGCCCA GGGCTCGCAG CCAACGTCGG 3841 GGCGGCAGGC CCTGCCATAG CCTCAGGTTA CTCATATATA CTTTAGATTG ATTTAAAACT 3901 TCATTTTTAA TTTAAAAGGA TCTAGGTGAA GATCCTTTTT GATAATCTCA TGACCAAAAT 3961 CCCTTAACGT GAGTTTTCGT TCCACTGAGC GTCAGACCCC GTAGAAAAGA TCAAAGGATC 4021 TTCTTGAGAT CCTTTTTTTC TGCGCGTAAT CTGCTGCTTG CAAACAAAAA AACCACCGCT 4081 ACCAGCGGTG GTTTGTTTGC CGGATCAAGA GCTACCAACT CTTTTTCCGA AGGTAACTGG 4141 CTTCAGCAGA GCGCAGATAC CAAATACTGT CCTTCTAGTG TAGCCGTAGT TAGGCCACCA 4201 CTTCAAGAAC TCTGTAGCAC CGCCTACATA CCTCGCTCTG CTAATCCTGT TACCAGTGGC 4261 TGCTGCCAGT GGCGATAAGT CGTGTCTTAC CGGGTTGGAC TCAAGACGAT AGTTACCGGA 4321 TAAGGCGCAG CGGTCGGGCT GAACGGGGGG TTCGTGCACA CAGCCCAGCT TGGAGCGAAC 4381 GACCTACACC GAACTGAGAT ACCTACAGCG TGAGCTATGA GAAAGCGCCA CGCTTCCCGA 4441 AGGGAGAAAG GCGGACAGGT ATCCGGTAAG CGGCAGGGTC GGAACAGGAG AGCGCACGAG 4501 GGAGCTTCCA GGGGGAAACG CCTGGTATCT TTATAGTCCT GTCGGGTTTC GCCACCTCTG 4561 ACTTGAGCGT CGATTTTTGT GATGCTCGTC AGGGGGGCGG AGCCTATGGA AAAACGCCAG 4621 CAACGCGGCC TTTTTACGGT TCCTGGCCTT TTGCTGGCCT TTTGCTCACA TGTTCTTTCC 4681 TGCGTTATCC CCTGATTCTG TGGATAACCG TATTACCGCC ATGCAT//其他哺乳动物表达载体：pCHO1.0 pBApo-CMV-Pur pOPRSVIpcDNA3.1/His C pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO pREP4pcDNA3.1/His B pcDNA5/FRT/TO-TOPO pDual-GCpcDNA3.1/His A pcDNA5/TO pBK-RSVpIRESpuro3 pcDNA5/FRT/TO pBK-CMVpIRES2-EGFP pcDNA5/FRT pBI-CMV4pTT5 pFLAG-CMV2 pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ pNFkB-DD-tdTomato pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO pOPI3CATpBI-CMV5 pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO pGene/V5-His B pSEAP2-Basic pOptiVEC-TOPO pSwitchpSEAP2-Control pCMV-MEKK1 pCMVLacIpBI-CMV3 pCMV-MEK1 pVgRxRpBI-CMV2 pCMV-PKA pINDpBI-CMV1 pcDNA6.2/nTC-Tag-DEST pTRE3G-LucpNFκB-MetLuc2-Reporter pcDNA6.2/cTC-Tag-DEST pTRE3GpCRE-MetLuc2-Reporter pcDNA3.2/V5/GW/D-TOPO pTRE2-hygropAcGFP1-Actin pcDNA6.2/V5/GW/D-TOPO pTRE-TightpAcGFP1-N In-Fusion Ready pcDNA6.2/nGeneBLAzer-GW/D-TOPO pTK-hygpAcGFP1-C3 pcDNA6.2/C-YFP-DEST pTet-OnpAcGFP1-C pcDNA6.2/cGeneBLAzer-DEST pTet-OffpAcGFP1-p53 pcDNA6/V5-His A pTet on advanced pAcGFP1-Mito pcDNA6/V5-His B pRevTREpAcGFP1-Mem pcDNA6/V5-His C pRevTet-OnpAcGFP1-Lam pcDNA6/myc-His C pRevTet-OffpAcGFP1-Golgi pcDNA6/myc-His A pCMV-Tet3GpAcGFP1-F pcDNA6/myc-His B pTRE2pAcGFP1-Hyg-C1 pcDNA6.2/nGeneBLAzer-DEST pBD-NF-κBpAsRed2-N1 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pTT5编号 载体名称北京华越洋生物VECT6098 pTT5pTT5载体基本信息载体名称: pTT5质粒类型: 哺乳动物细胞载体高拷贝/低拷贝: 高拷贝克隆方法: 限制性内切酶，多克隆位点启动子: CMV载体大小: 4401 bp5' 测序引物及序列: CMV-F:CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG 3' 测序引物及序列: --载体标签: 无载体抗性: 氨苄青霉素筛选标记: --克隆菌株: DH5α等宿主细胞（系）: 常规细胞系（293、CV-1、CHO等）备注: 利用该质粒构建的基因表达是非融合表达，在构建质粒时需要在基因前面添加Kozak序列来增加蛋白表达效率。
稳定性: 瞬时表达组成型/诱导型: 诱导性病毒/非病毒: 非病毒pTT5载体质粒图谱和多克隆位点信息pTT5载体简介pTT5载体是很好的哺乳细胞瞬时蛋白表达载体，经常用于哺乳细胞的抗体轻链或者重链的表达。
pTT5载体序列ORIGIN1 GTACATTTAT ATTGGCTCAT GTCCAATATG ACCGCCATGT TGACATTGAT TATTGACTAG 61 TTATTAATAG TAATCAATTA CGGGGTCATT AGTTCATAGC CCATATATGG AGTTCCGCGT 121 TACATAACTT ACGGTAAATG GCCCGCCTGG CTGACCGCCC AACGACCCCC GCCCATTGAC 181 GTCAATAATG ACGTATGTTC CCATAGTAAC GCCAATAGGG ACTTTCCATT GACGTCAATG 241 GGTGGAGTAT TTACGGTAAA CTGCCCACTT GGCAGTACAT CAAGTGTATC ATATGCCAAG 301 TCCGCCCCCT ATTGACGTCA ATGACGGTAA ATGGCCCGCC TGGCATTATG CCCAGTACAT 361 GACCTTACGG GACTTTCCTA CTTGGCAGTA CATCTACGTA TTAGTCATCG CTATTACCAT 421 GGTGATGCGG TTTTGGCAGT ACACCAATGG GCGTGGATAG CGGTTTGACT CACGGGGATT 481 TCCAAGTCTC CACCCCATTG ACGTCAATGG GAGTTTGTTT TGGCACCAAA ATCAACGGGA 541 CTTTCCAAAA TGTCGTAATA ACCCCGCCCC GTTGACGCAA ATGGGCGGTA GGCGTGTACG 601 GTGGGAGGTC TATATAAGCA GAGCTCGTTT AGTGAACCGT CAGATCCTCA CTCTCTTCCG 661 CATCGCTGTC TGCGAGGGCC AGCTGTTGGG CTCGCGGTTG AGGACAAACT CTTCGCGGTC721 TTTCCAGTAC TCTTGGATCG GAAACCCGTC GGCCTCCGAA CGGTACTCCG CCACCGAGGG 781 ACCTGAGCGA GTCCGCATCG ACCGGATCGG AAAACCTCTC GAGAAAGGCG TCTAACCAGT 841 CACAGTCGCA AGGTAGGCTG AGCACCGTGG CGGGCGGCAG CGGGTGGCGG TCGGGGTTGT 901 TTCTGGCGGA GGTGCTGCTG ATGATGTAAT TAAAGTAGGC GGTCTTGAGA CGGCGGATGG 961 TCGAGGTGAG GTGTGGCAGG CTTGAGATCC AGCTGTTGGG GTGAGTACTC CCTCTCAAAA 1021 GCGGGCATTA CTTCTGCGCT AAGATTGTCA GTTTCCAAAA ACGAGGAGGA TTTGATATTC 1081 ACCTGGCCCG ATCTGGCCAT ACACTTGAGT GACAATGACA TCCACTTTGC CTTTCTCTCC 1141 ACAGGTGTCC ACTCCCAGGT CCAAGTTTAA ACGGATCTCT AGCGAATTCC CTCTAGAGGG 1201 CCCGTTTCTG CTAGCAAGCT TGCTAGCGGC CGCTCGAGGC CGGCAAGGCC GGATCCCCCG 1261 ACCTCGACCT CTGGCTAATA AAGGAAATTT ATTTTCATTG CAATAGTGTG TTGGAATTTT 1321 TTGTGTCTCT CACTCGGAAG GACATATGGG AGGGCAAATC ATTTGGTCGA GATCCCTCGG 1381 AGATCTCTAG CTAGAGGATC GATCCCCGCC CCGGACGAAC TAAACCTGAC TACGACATCT 1441 CTGCCCCTTC TTCGCGGGGC AGTGCATGTA ATCCCTTCAG TTGGTTGGTA CAACTTGCCA 1501 ACTGAACCCT AAACGGGTAG CATATGCTTC CCGGGTAGTA GTATATACTA TCCAGACTAA 1561 CCCTAATTCA ATAGCATATG TTACCCAACG GGAAGCATAT GCTATCGAAT TAGGGTTAGT 1621 AAAAGGGTCC TAAGGAACAG CGATGTAGGT GGGCGGGCCA AGATAGGGGC GCGATTGCTG 1681 CGATCTGGAG GACAAATTAC ACACACTTGC GCCTGAGCGC CAAGCACAGG GTTGTTGGTC 1741 CTCATATTCA CGAGGTCGCT GAGAGCACGG TGGGCTAATG TTGCCATGGG TAGCATATAC 1801 TACCCAAATA TCTGGATAGC ATATGCTATC CTAATCTATA TCTGGGTAGC ATAGGCTATC 1861 CTAATCTATA TCTGGGTAGC ATATGCTATC CTAATCTATA TCTGGGTAGT ATATGCTATC 1921 CTAATTTATA TCTGGGTAGC ATAGGCTATC CTAATCTATA TCTGGGTAGC ATATGCTATC 1981 CTAATCTATA TCTGGGTAGT ATATGCTATC CTAATCTGTA TCCGGGTAGC ATATGCTATC 2041 CTAATAGAGA TTAGGGTAGT ATATGCTATC CTAATTTATA TCTGGGTAGC ATATACTACC 2101 CAAATATCTG GATAGCATAT GCTATCCTAA TCTATATCTG GGTAGCATAT GCTATCCTAA 2161 TCTATATCTG GGTAGCATAG GCTATCCTAA TCTATATCTG GGTAGCATAT GCTATCCTAA 2221 TCTATATCTG GGTAGTATAT GCTATCCTAA TTTATATCTG GGTAGCATAG GCTATCCTAA 2281 TCTATATCTG GGTAGCATAT GCTATCCTAA TCTATATCTG GGTAGTATAT GCTATCCTAA 2341 TCTGTATCCG GGTAGCATAT GCTATCCTCA TGATAAGCTG TCAAACATGA GAATTAATTC 2401 TTGAAGACGA AAGGGCCTCG TGATACGCCT ATTTTTATAG GTTAATGTCA TGATAATAAT 2461 GGTTTCTTAG ACGTCAGGTG GCACTTTTCG GGGAAATGTG CGCGGAACCC CTATTTGTTT 2521 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GCCCTCCCGT ATCGTAGTTA TCTACACGAC GGGGAGTCAG GCAACTATGG ATGAACGAAA3421 TAGACAGATC GCTGAGATAG GTGCCTCACT GATTAAGCAT TGGTAACTGT CAGACCAAGT3481 TTACTCATAT ATACTTTAGA TTGATTTAAA ACTTCATTTT TAATTTAAAA GGATCTAGGT3541 GAAGATCCTT TTTGATAATC TCATGACCAA AATCCCTTAA CGTGAGTTTT CGTTCCACTG3601 AGCGTCAGAC CCCGTAGAAA AGATCAAAGG ATCTTCTTGA GATCCTTTTT TTCTGCGCGT3661 AATCTGCTGC TTGCAAACAA AAAAACCACC GCTACCAGCG GTGGTTTGTT TGCCGGATCA3721 AGAGCTACCA ACTCTTTTTC CGAAGGTAAC TGGCTTCAGC AGAGCGCAGA TACCAAATAC3781 TGTTCTTCTA GTGTAGCCGT AGTTAGGCCA CCACTTCAAG AACTCTGTAG CACCGCCTAC3841 ATACCTCGCT CTGCTAATCC TGTTACCAGT GGCTGCTGCC AGTGGCGATA AGTCGTGTCT3901 TACCGGGTTG GACTCAAGAC GATAGTTACC GGATAAGGCG CAGCGGTCGG GCTGAACGGG3961 GGGTTCGTGC ACACAGCCCA GCTTGGAGCG AACGACCTAC ACCGAACTGA GATACCTACA4021 GCGTGAGCTA TGAGAAAGCG CCACGCTTCC CGAAGGGAGA AAGGCGGACA GGTATCCGGT4081 AAGCGGCAGG GTCGGAACAG GAGAGCGCAC GAGGGAGCTT CCAGGGGGAA ACGCCTGGTA4141 TCTTTATAGT CCTGTCGGGT TTCGCCACCT CTGACTTGAG CGTCGATTTT TGTGATGCTC4201 GTCAGGGGGG CGGAGCCTAT GGAAAAACGC CAGCAACGCG GCCTTTTTAC GGTTCCTGGC4261 CTTTTGCTGG CCTTTTGCTC ACATGTTCTT TCCTGCGTTA TCCCCTGATT CTGTGGATAA4321 CCGTATTACC GCCTTTGAGT GAGCTGATAC CGCTCGCCGC AGCCGAACGA CCGAGCGCAG4381 CGAGTCAGTG AGCGAGGAAG C//其他哺乳动物表达载体：pCHO1.0 pBApo-CMV-Pur pOPRSVIpcDNA3.1/His C pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO pREP4pcDNA3.1/His B pcDNA5/FRT/TO-TOPO pDual-GCpcDNA3.1/His A pcDNA5/TO pBK-RSVpIRESpuro3 pcDNA5/FRT/TO pBK-CMVpIRES2-EGFP pcDNA5/FRT pBI-CMV4pTT5 pFLAG-CMV2 pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ pNFkB-DD-tdTomato pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO pOPI3CATpBI-CMV5 pcDNA3.1/NT-GFP-TOPO pGene/V5-His B pSEAP2-Basic pOptiVEC-TOPO pSwitchpSEAP2-Control pCMV-MEKK1 pCMVLacIpBI-CMV3 pCMV-MEK1 pVgRxRpBI-CMV2 pCMV-PKA pINDpBI-CMV1 pcDNA6.2/nTC-Tag-DEST pTRE3G-LucpNFκB-MetLuc2-Reporter pcDNA6.2/cTC-Tag-DEST pTRE3GpCRE-MetLuc2-Reporter pcDNA3.2/V5/GW/D-TOPO pTRE2-hygropAcGFP1-Actin pcDNA6.2/V5/GW/D-TOPO pTRE-TightpAcGFP1-N In-Fusion Ready pcDNA6.2/nGeneBLAzer-GW/D-TOPO pTK-hygpAcGFP1-C3 pcDNA6.2/C-YFP-DEST pTet-OnpAcGFP1-C 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