蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制作及不同频率对肌肉收缩的影响
刺激强度和刺激频率对骨骼肌收缩的影响
刺激强度和刺激频率对骨骼肌收缩的影响【摘要】为了观察在刺激时间、强度变化率恒定的条件下，不同强度和频率的电刺激对肌肉收缩的影响，学习微机生物信号采集处理系统和换能器的使用，我们制备了蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本，用不同刺激强度和频率刺激神经使神经细胞产生兴奋，标注刺激强度、刺激频率与肌肉收缩曲线记录图，发现兴奋的产生与刺激强度有关，在本次标本中，0.09V为阈强度，0.14V为最大刺激强度，肌肉收缩形式与刺激频率有关，本次标本在3.0Hz时出现单收缩，7.0Hz时出现不完全强直收缩，21.0Hz时为强直收缩。
关键词刺激强度、刺激频率、肌肉收缩、阈刺激、最大刺激、单收缩、不完全强直收缩、强直收缩1实验材料和方法1.1实验材料1.1.1实验动物蟾蜍（浙江中医药大学实验动物中心）1.1.2实验材料和器械培养皿；任氏液；镊子；蛙钉；金属探针；玻璃分针；锌-铜弓；粗剪刀；手术剪；蛙板；玻璃板；刺激电极；张力换能器；BB-3G标本屏蔽盒；一维位移微调器；实验支架；微机生物信号采集处理系统1.2实验方法1.2.1 毁脑脊髓：用金属探针自枕骨大孔处毁蟾蜍脑脊髓。
1.2.2 剪除躯干上部和内脏：用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱，剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于瓷盆内。
1.2.3 剥皮：避开神经，将全部皮肤剥除，并将标本置于盛有任氏液的培养皿中。
1.2.4 分离双腿：避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两半，再从耻骨联合中央剪开，并将已分离的标本浸入盛有任氏液的培养皿中。
1.2.5 游离坐骨神经：取腿一条，先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后用蛙钉将标本背位固定于干净蛙板上。
用玻璃分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分，直至分离至腘窝胫神经分叉处。
然后剪段股二头肌腱、半肌腱和半膜肌肌腱，并绕至前方剪断股四头肌腱，自上向下剪断所有坐骨神经分支，将连着3、4节椎骨的坐骨神经分离出来。
万洋坐骨神经—腓肠肌标本的制作及刺激对肌肉收缩的影响
坐骨神经—腓肠肌标本的制作及刺激对肌肉收缩的影响实验水产一班万洋20107396一、实验目的:1、学习生理学实验基本的组织分离技术；学会制作蛙类坐骨神经—腓肠肌标本；2、学习神经—肌肉实验的电刺激方法和记录肌肉收缩的方法；观察刺激强度与肌肉收缩之间的关系；掌握阈刺激、阈下刺激、阈上刺激、最适刺激等概念。
3、观察用不同频率的最适刺激刺激坐骨神经对腓肠肌收缩形式的影响及其特征。
了解和掌握单收缩、复合收缩、强直收缩特征和形成的基本原理。
二、实验原理:蛙类的一些基本的生理功能与恒温动物类似。
将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，兴奋性可保持几个小时。
若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在肌肉和神经上产生一个动作电位，肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。
生理学实验常用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本研究不同强度和频率的刺激和肌肉收缩的关系。
三、实验步骤：㈠坐骨神经-腓肠肌标本的制备1、破坏脑和脊髓2、去除躯干上部、皮肤及内脏3、剥离皮肤一只手捏住脊柱的断端（注意不要捏住脊柱两侧的神经），另一只手捏住皮肤的边缘，向下剥掉全部后肢的皮肤，将标本放在盛有任氏液的玻璃器皿中。
将手及使用过的全部器械冲洗干净。
4、分离双下肢将标本提起，剪去向上突起的骶骨，然后沿正中线将脊柱剪为两半，并从耻骨联合处剪开两侧下肢，浸入盛有任氏液的培养皿中使用。
5、辨认蛙后肢主要肌肉，找出腓肠肌。
6、游离坐骨神经和腓肠肌取一侧下肢固定于蛙板上，固定时，坐骨神经、腓肠肌向上，先用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经腹腔段，分离坐骨神经直至腘窝（不要伤及神经）；再用玻璃分针分离腓肠肌，并在肌腱上穿线结扎。
7、剪去其他不用的组织在坐骨神经两端各留一块骨头和肌肉，以便于固定。
注意：剥离时一定要保持标本完整性；尽可能用玻璃分针，少用镊子，避免刺激神经。
8、标本检验完整的标本应包括四部分：一段脊柱骨、坐骨神经、腓肠肌、一段股骨头。
用镊子轻轻提起结扎神经线，经任氏液沾湿的锌铜弓短暂轻触坐骨神经，如腓肠肌发生迅速的收缩反应，则表明机能完好。
实验二 蟾蜍坐骨神经干电生理实验
缩，使收缩张力逐渐增大，完全强直收缩时收缩张力达到了一个稳
定的最大值[3]。
1.5 仪器连接和参数( Apparatus junction and parameter ) 换能
器接第1通道。1通道时间常数直流、滤波频率30Hz、灵 敏度7.5g、，采样频率：800Hz，扫描速度：2.5s/div。
1.6 坐骨神经腓肠肌的股骨插入固定孔固定，神经干标本盒的
电极上，神经与电极接触良好，调节刺激电压，记录肌肉 收缩曲线。
1.1实验动物（laboratory animal) 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，
Zhuoshan Toad）
1.2药品(drug) 任氏液
1. 3器材( Experimental apparatus) RM6240 生物信号处理系统 (RM6240 multichannel physiological recording and processing system )（成都仪器厂）、神经标本盒（ nerve chamber )、 张力换能器。
1.4 坐骨神经腓肠肌标本制备 (Preparation of sciatic gastrocnemius )
蟾蜍
毁脑脊髓，去上肢和内脏，下肢剥皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向 上置于蛙板上；用剪刀从脊柱正中剪开，向下从耻骨联合剪开分成两 个下肢标本，用玻璃分针分离脊柱傍的神经丛，用线在近脊柱处结扎， 剪断神经，从大腿至腘窝分离坐骨神经，将神经干提起剪断分支。去 除股骨上的肌肉，距膝关节1cm剪断股骨，分离腓肠肌跟腱穿线结扎， 剪断跟腱，游离腓肠肌，在膝关节剪去小腿其余办法，将坐骨神经－ 腓肠肌标本标本置任氏张力也逐渐增大，强直收缩产
生的张力显著大于单收缩。肌肉单收缩时，胞浆内Ca2+浓度升高的持 续时间太短，被激活的收缩蛋白尚未产生最大张力时，胞浆Ca2+浓度
蛙_肌肉收缩实验报告(3篇)
第1篇 一、实验目的 1. 理解并掌握蛙坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。 2. 观察肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律，以及骨骼肌收缩的特点。 3. 掌握阈强度、阈刺激、最大刺激等概念，理解动作电位“全或无”的特点。 4. 探讨不同刺激频率对骨骼肌收缩的影响，了解强直收缩的机制。 二、实验对象 蛙（或蟾蜍） 三、实验器材和药品 1. 蛙类手术器械（蛙板、玻璃板、蛙钉、刺蛙针、粗剪刀、组织剪、眼科剪、镊子、玻璃分针、放污碟和棉线等）
2. 任氏液 3. 烧杯 4. 滴管 5. 锌铜弓 6. 双凹夹 7. 铁架台 8. 张力换能器 9. 肌动器（肌槽） 10. 生物信号采集处理系统 四、实验方法与步骤 1. 制备蛙坐骨神经-腓肠肌标本 - 洗净实验蛙，用镊子夹住两后肢，用食指按压背部，中指放在胸腹部，用拇指下压头部前端使头前俯。 - 另一只手持刺蛙针沿枕骨正中线向脊柱端触划，当触到凹陷处即为枕骨大孔。刺蛙针可由此垂直刺入枕骨大孔，再折向前方插入颅腔并左右搅动，捣毁脑组织；而后退针至皮下，针尖向右刺入椎管并上下搅动以破坏脊髓。
- 当蛙四肢松软后，将蛙平放在蛙板上，用眼科剪剪开腹部皮肤，分离出坐骨神经和腓肠肌。
2. 连接实验装置 - 将换能器的输出线接至BL-420F生理记录装置的1通道，保护电极接至电脉冲输出通道。
- 把制备好的坐骨神经-腓肠肌标本棉线的另一端接在张力换能器上，将坐骨神经通过保护电极接至电脉冲刺激输出通道，而腓肠肌肌腱端的棉线与张力换能器簧片相连，保持适度松紧并与桌面垂直。
3. 实验记录 - 开机后进入实验，先用单刺激，找出阈强度、最适刺激强度。 - 固定最适刺激强度，用连续单刺激，找出出现完全强直收缩时的最小刺激频率。
4. 观察与分析 - 观察并记录不同刺激强度、频率下肌肉的收缩情况，分析阈强度、阈刺激、最大刺激等概念。
- 分析不同刺激频率对肌肉收缩的影响，观察强直收缩的机制。 五、实验结果 1. 在阈强度以下，肌肉不发生收缩；在阈强度以上，肌肉发生收缩。 2. 随着刺激强度的增加，肌肉收缩幅度逐渐增大，直至达到最大刺激强度。 3. 随着刺激频率的增加，肌肉收缩频率逐渐增大，直至出现完全强直收缩。 六、实验讨论 1. 阈强度是肌肉产生收缩的最小刺激强度，阈刺激是引起肌肉收缩的刺激。 2. 阈强度与最大刺激强度之间存在一定的关系，最大刺激强度通常是阈强度的几倍。
不同频率的电刺激蟾蜍离体坐骨神经对腓肠肌收缩的影响
不同频率的电刺激蟾蜍离体坐骨神经对腓肠肌收缩的影响周晓泉 09临床1班，20091090128【摘要】目的观察在刺激时间、强度变化频率恒定的条件下，不同频率的电刺激对肌肉收缩的影响。
学习微机生物信号采集处理系统和换能器的使用。
方法对以解剖好的蟾蜍骨神经-腓肠肌标本进行不同频率的电刺激，观察腓肠肌的收缩及张力的变化和屏幕上的图像变化。
结果在刺激强度变化率恒定的条件下，在2Hz的刺激下表现为单收缩，在10Hz的刺激下表现为不完全强直收缩；在20Hz刺激下表现为强直收缩；在大于21Hz刺激下，肌肉已经出现疲劳从而表现为收缩强度减少。
结论当刺激频率较小，刺激的间隔大于一次肌肉收缩舒张的持续时间，则肌肉收缩表现为一连串的单收缩；增大频率刺激，使刺激的频率大于一次肌肉收缩的时间、小于一次肌肉收缩舒张的持续时间，则肌肉产生不完全强直收缩；继续增加刺激频率，使刺激的时间小于一次肌肉收缩时间，则肌肉出产生完全强直收缩。
【关键词】频率腓肠肌强直收缩骨骼肌收缩机制是肌丝滑行学说,当肌纤维兴奋时，终池内的Ca2+进入肌浆，致使肌浆中Ca2+浓度升高，Ca2+与肌钙蛋白结合，引起肌钙蛋白构型发生改变，牵拉原肌球蛋白移位，将肌动蛋白上与横桥结合的位点暴露出来，引发横桥与肌动蛋白结合。
横桥一旦与肌动蛋白结合，便激活横桥上的ATP酶，使ATP分解释放能量，使横桥发生扭动，牵拉细肌丝向M线肌节中心方向滑行，结果是肌节缩短，肌纤维收缩。
【材料与方法】1.1实验动物蟾蜍体重适宜，雌雄不限，浙江中医药大学动物实验中心提供1.2实验药品任氏液1.3实验器材锌铜弓微调固定器张力换能器微机生物信号采集处理系统1.4实验方法1.4.1破坏脑和脊髓取蟾蜍一只，左手握住蟾蜍，用食指按压其头部前端使其尽量前俯，右手持探针于枕骨大孔处垂直刺入，然后向前通过枕骨大孔刺入颅腔，左右搅动充分捣毁脑组织。
然后将探针抽回至进针处，再向后刺入脊椎管，反复提插捣毁脊髓。
不同强度和频率的刺激对肌肉收缩的影响 (2)
不同强度和频率的刺激对肌肉收缩的影响【摘要】目的：分析探讨刺激强度和刺激频率与骨骼肌收缩张力的关系。
方法：制备蟾蜍腓肠肌坐骨神经标本，保持刺激时间恒定的条件下，逐步增加或减小对蟾蜍坐骨神经的刺激强度和改变电脉冲刺激频率，观察记录腓肠肌收缩张力。
结果：刺激波宽0.1ms的单刺激，阈刺激强度为0.25±0.09V最大刺激强度为0.39±0.24V阈强度刺激时的肌肉收缩力1.56±1.50g显著低于最大刺激强度刺激时的肌肉收缩力19.09±14.50g，两者有显性差异（p<0.01)；刺激波宽0.1ms，最大刺激强度时，单收缩的刺激频率为4.22±1.09Hz，不完全强直收缩的刺激频率为4.22±1.09至24.89±6.25Hz 、完全强直收缩的刺激频率为35.44±10.86Hz，不完全强直最大收缩力88.55±38.18g和完全强直最大收缩力111.41±36.24g 显著高于单收缩的最大收缩力为20.45±16.24g（p<0.01）。
结论:刺激波宽一定时，骨骼肌收缩张力在一定范围内随刺激强度的增加而增加；刺激波宽一定，刺激强度为最大刺激时，骨骼肌收缩张力在一定范围内随刺激频率的增加而增加；刺激波宽一定，刺激强度为最大刺激时，骨骼肌在一次兴奋之后，在一定时间内处于不应期，对刺激无反应；当过了不应期后，肌肉组织才能对刺激做出反应而产生动作电位。
【关键词】强度频率收缩张力坐骨神经肌肉、神经和腺体组织称为可兴奋组织，它们有较大的兴奋性。
不同组织、细胞的兴奋表现各不相同，神经组织的兴奋表现为动作电位，肌肉组织的兴奋主要表现为收缩活动。
因此，观察肌肉是否收缩可以判断它是否产生了兴奋。
一个刺激是否能使组织发生兴奋，不仅与刺激形式有关，还与刺激时间、刺激强度、强度-时间变化率三要素有关，用方形电脉冲刺激组织，则组织兴奋只与刺激强度、刺激时间有关[1]。
实验一坐骨神经腓肠肌标本的制备、刺激强度和刺激频率与骨骼肌收缩反应的关系
二、动物与器材：
蟾蜍、常用手术器械、蛙板、锌铜弓、娃
钉(或大头针)、培养皿、纱布、玻璃分针、 万能支架（或铁架台）、粗棉线、任氏液、 张力换能器、BL-420F生物实验机能系统
三、方法与步骤
（一）标本的制备
1．双毁髓左手握蟾蜍背向上，食指按其头 部，拇指压住躯干背部，右手拿解剖针由 两眼之间沿中线象后方划触至两眼后腺之 间的凹隙处观察——即枕骨大孔的位置。 针刺入颅腔，捣毁脑组织，针转向后后方 捣毁脊髓。
2．在荐椎上方剪断皮肤和脊柱，弃其 头部和内脏，然后左手握住断开的脊柱 后部，右手向后撕裂皮肤，接着将两后 肢一分为二，即剪断耻骨联合（尾杆骨 留在一侧）纵向剪开脊柱。
辨认蛙后肢主要肌肉，找出腓肠肌。
3．分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱 端腹面向上，趾端向外侧翻转，使其 足底朝上。用娃钉（大头针）将标本 固定，在蛙板上用玻璃分针分离坐骨 神经。 4．分离股骨
每改变一次刺激频率后，应休息0.5-1 min, 每次刺激 不要超过3-4 秒，以免标本疲劳。 选择刺激时，选程控刺激 刺激时注意观察肌肉的反应
实验结果
1. 记录肌肉与神经的阈强度、最适刺激强度，并比较
二者的兴奋性；
实验结果
2.记录在最适刺激强度下，刺激频率与肌肉收缩的关系
思考题
1. 2.
5．游离腓肠肌 6．用锌铜弓检验标本
7、将坐骨神经-腓肠肌标本固定于蛙板上， 把跟腱端的接线与张力换能器相连，调节 高度与张弛度。
（二）刺激强度与反应关系
① 刺激腓肠肌：调节刺激参数，选择单刺激，改
变刺激强度（从弱到强），观察刺激强度变化
对肌肉收缩的影响；找出意事项
在制备标本时，避免过度牵拉、手或金属器械触碰神经干；
[医学]刺激强度、频率对蟾蜍骨骼肌收缩的影响
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2、掌握阈刺激（阈值或阈强度） 、阈上刺激、 最大刺激（最适强度）的概念和意义。
3、掌握单收缩、不完全强直收缩、 完全强直收缩的概念和意义。
沈阳医学院生理学教研室
沈阳医学院生理学教研室
沈阳医学院生理学教研室
实验对象
蟾蜍：Toad
生理学实验中常用的小型动物，具有价格 低廉、离体器官存活时间相对较长等优点。
常用其坐骨神经腓肠肌标本来观察各种刺 激或药物对周围神经、肌肉、神经肌肉接头的 作用。其心脏离体后，仍可有节律性跳动，可 作心脏离体实验。
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器材药品
BL-420F微机实验系统 张力换能器 肌槽 刺激电极 万能支柱 蛙类手术器械 任氏液等
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蛙类手术器械
1、剪 刀：普通剪刀、手术剪刀、眼科剪刀。 2、镊 子：夹捏软组织和分离神经、血管。 3、金属探针：用于破坏蛙类的脑和脊髓。 4、玻璃分针：用于钝性分离血管和
神经等组织。 5、锌 铜 弓：用于对神经肌肉标本施加刺激，
以检查其兴奋性。 6、蛙 板：用于固定蛙类以便进行实验。
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方法步骤
一、标本制备
1、破坏中枢神经系统 2、剪断躯干上部及内脏 3、剥皮 4、洗手及用过的手术器械 5、分离左右后肢 6、制作坐骨神经—腓肠肌标本 7、标本兴奋性的检查
2、尽量避免用手或金属器件直接接触所 需要的神经和肌肉，特别要留心不使蟾蜍 皮肤毒腺分泌的蟾蜍素粘到神经肌肉标本 上，以免标本受损。
3、刺激强度及频率应从小到大逐渐增加。
沈阳医学院生理学教研室
思考题
1、骨骼肌收缩为什么会出现阈刺激 （阈值或阈强度）、阈上刺激、 最大刺激（最适强度）？
2、骨骼肌收缩为什么会出现单收缩、 不完全强直收缩、完全强直收缩？
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蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制作及不同强度肌肉收缩的影响
一`蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制作
1．目的
掌握制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠肌标本基本操作技术，掌握蛙类手术器械的使用方法．
2.材料
蟾蜍或蛙，任氏液，锌铜弓
3.方法
１．捣毁脑髓取一只，用左手握住，以食指压其头部前端使其尽量前俯，右手持探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎骨，即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧，捻动探针使逐渐刺入整个椎管内，捣毁脊髓。
此时蟾蜍下颌呼吸消失，四肢松软，即成为一捣毁脊髓的蟾蜍，否则须按上法再行捣毁。
２．剪除驱干上部及内脏用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱。
左手握住蟾蜍脊柱，右手讲粗剪刀沿两侧剪开腹壁。
此时躯干上部及内脏即全部下垂。
剪除全部躯干上部及内脏组织，弃于盆内
３．剥皮避开神经，用右手拇指和食指夹住脊柱，左手捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。
拉至大腿时，如阻力较大，可先剥下一侧，再剥另一侧。
将全部皮肤剥除后，讲标本置于盛有任氏液的培养皿中
４．洗净双手和用过的全部手术器械
５．分离两腿避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧部剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两瓣，再从耻骨联合中央剪开，讲以分离的标本浸于任氏液中
６．游离坐骨神经取腿一只，先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后用大头针将标本背固定于干净蛙板上。
用玻璃分针循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分，直至分离至腘窝胫神经分叉处。
然后剪断股二头肌腱，自上而下剪断所有坐骨神经分支。
将连着3~4节椎骨的坐骨神经分离出来
７．完成坐骨神经小腿标本将已分离的坐骨神经搭在腓肠肌上。
用粗剪刀自膝关节周围向上剪除并刮干净所有大腿肌肉，在距膝关节约1cm处剪断股骨。
弃去上段股骨，保留部分即为坐骨神经小腿标本
８．完成坐骨神经腓肠肌标本用尖头镊子在上述坐骨神经腓肠肌标本的肌腱下方穿孔，穿线结扎之，提起结扎线，在结扎线下方剪断跟腱，并逐步游离腓肠肌至膝关节处，左手握住标本的股骨部分，使已游离的坐骨神经和腓肠肌下垂，右手持粗剪刀水平方向伸进腓肠肌与小腿之间，在膝关节处剪断，与小腿其余部分游离。
左手保留部分即为附着于股骨之上的，具有坐骨神经支配的腓肠肌标本。
将标本浸入盛有新鲜任氏液的培养皿中待用
９．观察捣毁脊髓前后四肢肌张力的变化；用锌铜弓分别刺激坐骨神经和腓肠肌，观察肌肉反映．
4.结果
捣毁脊髓后四肢肌张力消失，用锌铜弓刺激坐骨神经和腓肠肌，可观察到肌肉收缩．
5.讨论
捣毁脊髓后蟾蜍强直，任氏液有是浸润神经的，维持神经的生理活性的作用。
锌铜弓金属类物质可导电，当刺激浸润在任氏液的腓肠肌，是肌肉产生兴奋而发生收缩，实验是应注意制备神经肌肉标本过程中，要不断滴加任氏液，以防标本干燥，丧失正常生理活性，还需注意捣鬼脊髓是，防止蟾蜍分泌的蟾蜍毒液摄入眼睛．
6.参考文献
[1] 陆源，林国华，杨午明。
机能学实验教程。
第二版。
北京：科学出版社，2010年6月。
[2] 朱大年，吴博威，樊小力。
生理学。
第七版。
北京：人民卫生出版社，1979年2月。
[3]杨宝峰，苏定冯，周宏灏。
药理学。
第七版。
北京：人民卫生出版社，1979年6月。
二.不同频率的刺激对肌肉收缩的影响
1.目的
观察在刺激时间，强度变化率恒定的条件下，不同强度和频率的电刺激对肌肉收缩的影响。
学习微机生物采集处理系统和换能器的使用。
2.材料
蟾蜍或蛙；任氏液；微调固定器，张力换能器，微机生物信号采集处理系统。
3.方法
１·实验系统连接和参考设置；
２·离体蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制作；
３·在体蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制作；捣毁脊髓。
剥去一侧下肢自大腿部起的全部皮肤，然后将蟾蜍俯卧位固定于蛙板上。
在大腿背内侧的股二头肌与半膜肌之间，纵向分离坐骨神经至腘窝处，并在神经下穿线备用。
然后分离腓肠肌的跟腱，穿线结扎，并连同扎线将跟腱剪下，一直讲腓肠肌分离至膝关节。
在膝关节旁钉一大头针，折弯压住膝关节，标本完成4.将腓肠肌跟腱的扎线固定于张力换能器悬梁上，不宜太紧，
5·把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，应保证神经与刺激电极接触良好；６·分别观察不同刺激频率对实验的影响
4.结果
5.讨论
当肌肉受到阈上刺激时，肌肉发生一次收缩反映即单收缩，如果在短间隔时间内刺激会出现收缩重叠的情况为复合收缩，如果后一个收缩发生在前一个舒张期，出现持续的锯齿状的收缩曲线为不完全强直收缩，如果后一收缩发生在前一个收缩期内，则完全看不到舒张期形迹，为完全强直收缩。
每次连续刺激时间不宜太长，且每辆次刺激之间应让标本休息半分钟，以防肌肉疲劳；需不时浸润标本，以保持良好的兴奋性；固定的松紧要适宜。
6.实验结论
蛙的坐骨神经肌肉标本单收缩的总时程约为0.11 s，其中潜伏期、缩短期共占0,05 s，舒张期占0.06 s。
若给予标本相继两个最适刺激，使两次刺激的间隔小于该肌肉收缩的总时程时，则会出现一连续的收缩，叫复合收缩（或收缩总和）。
若两个刺激的时间间隔短于肌肉收缩总时程，而长于肌肉收缩的潜伏期和缩短期时程，使后一刺激落在前一刺激引起肌肉收缩的舒张期内，则出现一次收缩尚未完全舒张又引起一次收缩；若两次刺激的间隔短于肌肉收缩的缩短期，使后一刺激落在前一次刺激引起收缩的缩短期内，则出现一次收缩正在进行接着又产生一次收缩，收缩的幅度高于单收缩的幅度。
根据这个原理，若给予标本一连串的最适刺激，则因刺激频率不同会得到一连串的单收缩、不完全强直收缩或完全强直收缩的复合收
7.参考文献
[1] 陆源，林国华，杨午明。
机能学实验教程。
第二版。
北京：科学出版社，2010年6月。
[2] 朱大年，吴博威，樊小力。
生理学。
第七版。
北京：人民卫生出版社，1979年2月。
[3]杨宝峰，苏定冯，周宏灏。
药理学。
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北京：人民卫生出版社，1979年6月。