蟾蜍的坐骨神经—腓肠肌标本的制备
蟾蜍的坐骨神经—腓肠肌标本的制备
及神经干的性质实验报告
实验名称蛙的坐骨神经—腓肠肌标本的制备及神经干的性质实验
目的要求
学习并掌握坐骨神经—腓肠肌标本以及腓肠肌标本制备的方法；
学习生理学实验基本的组织分离技术；
观察刺激强度，刺激频率与肌肉收缩反应的关系；
掌握引导神经干复合动作电位和测定其传导速度的基本原理和方法。
实验材料，仪器，试剂
蟾蜍、常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、玻璃分针等）、烧杯、培养皿、纱布、棉线、粗剪刀、蛙板、污物缸、滴管、生理信号采集系统、张力传感器、铁架台、计算机、任氏液等。
实验原理
两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织所需要的生活条件比较简单，易于控制和掌握。
因此在生理实验中常用蟾蜍的神经肌肉标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的规律以及骨骼肌收缩的特点等。
任氏液是—种比较接近两栖动物内环境的液体，可以用来延长青蛙心脏在体外跳动时间、保持两栖类其他离体组织器官生理活性等。
腓肠肌由许多的纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。
当刺激强度过小时，不应期肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。
而能引起肌肉发生收缩的最小刺激强度，为阈刺激，但全部肌纤维同时收缩时，则出
现最大的收缩反应。
这时，即使再加大刺激强度，肌肉的收缩强度也不会随之而增大。
可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为最适刺激。
肌肉组织对于一个阈上强度的刺激，发生一次迅速地收缩反应，即单收缩。
单收缩的过程分为三个时期，潜伏期、收缩期、舒张期。
刺激坐骨神经能引起腓肠肌产生收缩。
在其他条件不变情况下，不断增大刺激频率可引起肌肉收缩形式发生改变。
若刺激频率较小，两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩和舒张所持续的时间（即单收缩）时，肌肉收缩表现为一连串的单收缩；若增大刺激频率，使两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩的收缩期时间，而小于单收缩时，肌肉呈现不完全强直收缩；若继续增加刺激频率，使两次刺激间隔时间小于一次肌肉收缩的收缩期时间，肌肉则表现出完全强直收缩。
如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面，兴奋波先后通过两个电极处，便引导出两个方向相反的电位波形，称为双相动作电位。
如果两个引导电极之间的神经纤维完全损伤，兴奋波只通过第一个引导电极，不能传至第二个引导电极，则只能引导出一个方向的电位偏转波形，称为单相动作电位。
神经干由许多神经纤维组成，故神经干动作电位与单根神经纤维的动作电位不同，神经干动作电位是由许多不同直径和类型的神经纤维动作电位叠加而成的综合性电位变化，称复合动作电位，神经干动作电位幅度在一定范围内可随刺激强度的变化而变化。
动作电位在神经干上传导有一定的速度。
不同类型的神经纤维传导速度不同，神经纤维越粗则传导速度越快。
测定神经冲动在神经干上传导的距离（s）与通过这段距离所需时间（t），可根据n＝s/t求出神经冲动的传导速度
实验方法
1.破坏脑和脊髓左手持蟾蜍，用食指压其头部前端，使头前俯。
右手持探针
由头端沿正中线向后划，触到凹陷即为枕骨大孔，将探针由此垂直刺入。
再将探针折向前方，插入颅腔内并左右搅动捣毁脑组织。
再将探针退回至进针处，针尖转向后方，刺入椎管捣毁脊髓。
此时蟾蜍四肢瘫软，表明脑脊髓已完全破坏。
2.剪除躯干上部及内脏用粗剪刀在骶髂关节水平以上1cm处剪断脊柱。
左手握住后肢，右手持剪刀沿脊柱的断口向下剪开两侧的皮肤及肌肉，再剪除已下垂的躯干上部及内脏。
3.剥皮剪掉肛门周围的皮肤，左手捏脊柱断端（勿触碰神经），右手捏住断端边缘的皮肤，向下剥掉两后肢皮肤。
将标本背位放于表面有少许任氏液的蛙板上，洗净双手及用过的器械。
4.游离坐骨神经沿脊柱两侧用玻璃分针分离坐骨神经，沿中线将脊柱剪成两半。
捏住两侧下肢带骨用力向两侧掰，使耻骨联合处脱臼，再从耻骨联合中央剪开两后肢，一后肢放入盛有任氏液的平皿中备用，一后肢用玻璃分针划开梨状肌及其附近的结缔组织，循坐骨神经沟（股二头肌与半膜肌之间的裂隙处）找出坐骨神经的大腿部分，用玻璃分针将腹部的坐骨神经小心勾出来，手执结扎神经的线，剪断坐骨神经的所有分支，一直游离至膝关节。
5.完成坐骨神经腓肠肌标本的制备将分离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀将股骨刮干净，在股骨中部剪去上段股骨。
再在跟腱处以线结扎，剪断并游离腓肠肌至膝关节处，在膝关节以下将小腿其余部分剪掉。
这样即制得附着于股骨上、具有坐骨神经支配的腓肠肌标本。
6.用标本进行刺激实验把标本通过张力传感器与生理信号采集系统相连，观察刺激强度，刺激频率与肌肉收缩反应的关系以及神经干的相关性质。
实验结果
1.蟾蜍腓肠肌刺激强度与肌肉收缩反应实验
图1 蟾蜍腓肠肌刺激强度与肌肉收缩反应的关系
如图1所示，在一定范围内随着刺激强度的增加，肌肉收缩反应强度逐渐增大，但在增大到一定值时肌肉收缩反应的强度不再受刺激强度的影响而发生变化。
从图中我们可以看出该标本的阈值是0.050V，阈上刺激范围为0.050V-0.110V。
当刺激为0.110V时，肌肉收缩反应强度也达到最大，也即该实验标本的最适刺激强度为0.110V。
2. 蟾蜍腓肠肌刺激频率与肌肉收缩反应实验
图2 蟾蜍腓肠肌刺激频率与肌肉收缩反应的关系
如图2所示，在刺激电压固定在0.50V时，分别以不同频率的刺激去刺激标本，肌肉收缩反应有很大不同。
在刺激频率为1.0Hz时,肌肉标本的收缩形式为单收缩；当刺激频率在8.0Hz-20Hz时，收缩形式为不完全强直收缩；当刺激频率大于20Hz 时，肌肉收缩为完全强直收缩。
3.神经干复合动作电位的测定实验
图3 蟾蜍坐骨神经神经干的复合动作电位
如图3所示，复合动作电位的波形图呈现出一个先升后降的波形图，复合动作电位的最大值为4.83mV,最小值为-1mV。
当神经纤维未受刺激时，膜外与电极所接触的两点之间没有电位差，所以两电极之间也无电位差存在，扫描线为一水平基线。
在神经干左端给予电刺激后，则产生一个向右传导的冲动（负电位），当冲动传到1电极（负电极）下方时，此处电位较2处为低，产生了电位差，扫描线向上偏转，记录出一个向上的波形（在电生理实验中，为了便于观察，习惯上规定负波向上）。
随后，冲动继续向右侧传导，离开1电极传向2电极处。
当它到达2电极（正电极）
下方时，因1电极处神经差不多已恢复到原来的状态，于是2电极处又较1电极处为负，引起扫描线向下偏转，记录出一个向下的波形。
这样，在神经冲动向右传导的过程中，就记录出了一个先升后降的双相动作电位。
4.神经干兴奋传导速度的测定实验
图4 蟾蜍坐骨神经神经冲动传导速度的测定如图4所示，红色代表第一电极，绿色代表第二电极。
每刺激一次，第二个刺激即按照“间隔”所设定的时间向第一个刺激靠近一次，从而使第二个动作电位向图形向第一个动作电位相应靠近。
当在刺激6.5ms时，第二个动作电位的图形幅值开始比第一个减小时，说明第二个刺激落入到第一次兴奋后的相对不应期。
第二个刺激越是靠近第一个刺激，其动作电位的幅值就越小。
测得神经干兴奋传导速度约为24.0m/s。
分析讨论
由实验结果可知，实验中蟾蜍腓肠肌受刺激的阈值是0.050V，阈上刺激范围为0.050V-0.110V。
神经细胞的兴奋传递是由于膜内外的Na+和K+离子浓度变化儿引起的，膜上存在着许多的Na+和K+离子通道，它们都受一定电压门控系统控制着通道的开与闭。
在刺激的强度低于阈值时，不足以使门控通道开放，相对离子浓度不会发生变化。
故无法引起神经细胞兴奋，只有在强度足够大的时候，神经细胞才会兴奋并传导至肌肉。
细胞膜上的Na+和K+离子通道是有限的，给予一个最适刺激强度，Na+和K+离子通道将全部开放，神经达到最大兴奋。
若给予神经细胞更大的刺激强度，因为离子通道的限制，神经细胞也不可能出现更大的兴奋性。
单收缩可分为3个阶段：①潜伏期是指从发生刺激打刚开始发生张力变化之间的时期；②收缩期是指从收缩开始到收缩效应达到最高点的时期；③舒张期
是指从收缩效应最高点回复到原来静息水平的时期。
当刺激频率低时，肌肉发生一连串互不相连的单收缩，这是因为每个新刺激到来时，前一次刺激引起的单收缩已经结束。
于是，每个刺激都引起一次独立的收缩。
发生不完全强直收缩时，每次新的收缩都发生在前次收缩的舒张期中，肌肉则在自身尚处于一定程度的缩短或张力存在的情况下进行新的收缩，即发生了收缩总和。
我们便观察到了锯齿形肌肉收缩曲线图。
当刺激频率增大到一定的较高程度时，出现完全强直收缩，这是因为连续刺激时，后来的每个刺激都可能总是落在前一次收缩的缩短期结束之前，造成相继发生的肌肉收缩有可能在前一次收缩的缩短期结束之前或其顶点开始，于是各次收缩的张力或长度变化发生融合而叠加起来。
正常体内骨骼肌的收缩都是强直收缩。
神经干复合电位的传导速度受到多种因素的影响，首先是神经纤维的粗细，其次是纤维本身的性质，还有就是实验中标本的制备过程是否规范，神经是否受到严重损伤。
分离坐骨神经时，为避免过度牵拉神经，绝对不允许用手或金属镊子钳夹神经。
神经纤维尽可能分得长一些。
为防止神经干燥，失去生物活性，一段时间后，应该用滴管滴加任氏液使其保持湿润状态。
实验坐骨神经腓肠肌标本制备参考PPT
实验坐骨神经腓肠肌标本制备 • 周围的组织和神经的小分枝，可用分针纯
性分离或用剪刀逐步剪掉。
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备 • 3.所用的器械要洁净，接触蛙皮肤，4
实验坐骨神经腓肠肌标本制备 • 4.应经常用任氏液湿润标本，防止干燥。
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
• 6、分离腓肠肌 • 用玻璃分针或镊子将腓肠肌跟腱分离，并
穿线结扎。在结扎远端用粗剪刀剪断跟腱， 左手执线提起腓肠肌，以手术剪刀剪去其 周围联系的组织，但保留腓肠肌起始点与 骨的联系，唯须注意勿损伤支配该肌的神 经分支。
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
• 其各部连接关系如下：
• 脊柱小块→坐骨神经→膝关节→腓肠 肌→跟腱→线（连接张力换能器）
•
↓
• 股骨小段（固定于肌肉槽内的侧孔）
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备 • 【注意事项】 • 1.沿脊柱中央把下半身剪为左右两大半时，
要正中，否则会损伤坐骨神经。
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
• • 2.神经分离需用玻璃分针，分离过程中操
作必须精细，避免用金属器械碰夹神经， 以免损伤。同时要注意持针分离方向应由 中心向外周，以免将神经上段撕伤。坐骨 神经
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实验坐骨神经腓肠肌标本制备
实验三 蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制备ppt实用资料
蟾蜍的神经实验报告
一、实验目的1. 观察蟾蜍神经系统的基本结构和功能。
2. 掌握蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
3. 学习神经兴奋传导和反射弧的实验技术。
4. 了解神经肌肉接头兴奋传递的机制。
二、实验原理蟾蜍作为两栖类动物，其神经系统结构与哺乳动物有相似之处，且其离体组织生活条件简单，易于控制和掌握。
本实验通过制备蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本，观察神经兴奋传导和反射弧的实验技术，了解神经肌肉接头兴奋传递的机制。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、任氏液、生理盐水、剪刀、镊子、大头针、蛙板、玻璃分针、锌铜弓等。
2. 实验仪器：显微镜、刺激器、张力换能器、示波器、记录仪等。
四、实验方法1. 制备蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本- 用剪刀剪去蟾蜍的躯干和上肢，暴露腰骶丛神经。
- 游离大腿肌肉之间的坐骨神经及小腿的腓肠肌。
- 注意不要将胫神经与腓神经分离，神经端结扎后，剪去无关分支。
- 肌肉端结扎在肌腱上，将腓神经也一起结扎，结扎线留长。
- 保留膝关节，剪去腿骨，将标本离体。
- 将标本放入任氏液中，保持湿润。
2. 连接实验装置- 用大头针将标本的膝关节固定于标本盒R2和R3两记录电极之间的石蜡凹槽内。
- 神经中枢端接触刺激电极S1和S2，肌肉接触记录电极R3和R4，之间接触接地电极。
- 肌肉的结扎线从标本盒中穿出，连接张力换能器。
3. 观察神经兴奋传导- 用刺激器对坐骨神经进行电刺激，观察腓肠肌的收缩反应。
- 改变刺激强度和频率，观察腓肠肌收缩的变化。
4. 观察反射弧- 制备脊蛙，观察反射弧的结构和功能。
- 分别刺激感受器、传入神经、反射中枢、传出神经和效应器，观察反射活动的变化。
5. 观察神经肌肉接头兴奋传递- 在神经肌肉接头处滴加药物，观察肌肉收缩的变化。
五、实验结果与分析1. 观察到蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本在电刺激下产生收缩反应。
2. 随着刺激强度的增加，腓肠肌收缩力量逐渐增大。
3. 随着刺激频率的增加，腓肠肌收缩频率逐渐增大。
实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备
实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备、分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响【课程名称】【实验名称】【实验性质】【器材】蟾蜍或蛙；任氏液；二道生理记录仪、双脉冲刺激器、肌槽、常规手术器械、玻璃分针、毁髓针、锌铜弓、解剖盘、烧杯、滴灌、任氏液等。
【实验目的】1.学习坐骨神经–腓肠肌标本的制备方法。
2.分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响。
【实验原理】刺激坐骨神经能引起腓肠肌产生收缩。
在其他条件不变情况下，不断增大刺激频率可引起肌肉收缩形式发生改变。
若刺激频率较小，两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩和舒张所持续的时间（即单收缩）时，肌肉收缩表现为一连串的单收缩；若增大刺激频率，使两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩的收缩期时间，而小于单收缩时，肌肉呈现不完全强直收缩；若继续增加刺激频率，使两次刺激间隔时间小于一次肌肉收缩的收缩期时间，肌肉则表现出完全强直收缩。
【实验步骤】1、双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上。
用食指按压其头部前端，拇指压住躯干的背部，使头向前俯；右手持毁髓针，由两眼之间中线向后方划触，触及两耳后腺之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。
将毁髓针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，然后针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以毁脑组织。
再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。
脊髓彻底捣毁时，可看到蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软，此时的动物为双毁髓动物。
2、剥制后肢标本：左手持手术镊提起两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横向剪断皮肤，然后往后肢方向撕剥皮肤。
剪开腹壁肌肉，用手术镊提起内脏，翻向头部，在看清支配后肢的脊神经发出部位后，于其前方剪断脊柱。
3、分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上，右手持金冠剪纵向剪开脊柱，再剪开耻骨联合，使两后肢完全分离。
4、分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱端腹面向上，用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经，股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，找出坐骨神经，剪断盖在上方的梨状肌，完全暴露坐骨神经，剪去支配腓肠肌之外的分支，再剪去脊柱及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。
二坐骨神经—腓肠肌标本与坐骨神经标本的制备骨骼肌的收缩
实验二坐骨神经—腓肠肌标本与坐骨神经标本的制备、骨骼肌的收缩一、目的要求1、掌握蛙类动物单毁髓和双毁髓的方法。
2、掌握坐骨神经-腓肠肌标本和坐骨神经干标本的制备方法。
3、学习肌肉收缩的记录方法。
4、观察与分析肌肉单收缩的三个时相，分析骨骼肌收缩形式与刺激频率之间的关系。
二、实验原理蛙类动物的某些基本生命活动，如神经的生物电活动、肌肉收缩等与哺乳动物相似。
其离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握，而且动物来源丰富，因此在生理学实验中常用蟾蜍的坐骨神经—腓肠肌标本和坐骨神经标本来观察组织的兴奋性、刺激与反应的规律以及骨骼肌收缩的特点。
肌肉受到一次阈上刺激而产生的一次收缩为单收缩，其过程可分为三个时相，即潜伏期、缩短期与舒张期。
肌肉受到连续的阈上刺激时，如果刺激间隔小于单收缩的过程，相邻两单收缩的时相会出现融合，表现为强直收缩现象。
如果后一次收缩的开始发生在上次收缩的舒张期，称不完全强直收缩；如果后一次收缩的开始发生在上次收缩的缩短期，称完全强直收缩。
三、材料与器械•蟾蜍或蛙，蛙类手术器械（手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、金冠剪、毁髓针、固定针），蛙板，锌铜弓，小烧杯，滴管，纱布，细棉线，任氏液。
BL—420生物机能实验系统，肌槽，张力换能器。
四、实验步骤（一）神经肌肉标本的制备1、毁髓（1）单毁髓一手握蟾蜍，食指按压头部前端，拇指压住躯干背部，令其背部向上，头向前俯；另一手持毁髓针在左右耳后腺之间，背部的凹陷处（枕骨大孔的位置，此处与两眼的连线约成等边三角形）将毁髓针垂直刺入，然后将针尖向前刺入颅腔，搅动以捣毁脑组织，此为单毁髓。
（2）双毁髓将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。
毁髓成功的标志：蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软。
2、剥制后肢标本（1）金冠剪横向剪断脊柱（骶髂关节前1cm)。
（2）延脊柱两侧向下剪开体壁，剪除头、上肢及内脏。
（3）右手向后方剥去皮肤。
（4）将后肢标本放入任氏液中，清洗器械。
生物实验报告坐骨神经腓肠肌标本制备(干货)
生物实验报告坐骨神经腓肠肌标本制备坐骨神经腓肠肌标本的制备和神经干动作电位的观察与传导速度的测定一、实验目的：1.学习蛙类动物双毁髓的实验方法。
2。
学习并掌握坐骨神经—腓肠肌标本的制备方法。
3。
观察蛙坐骨神经干复合动作电位的基本波形，并了解其产生的原理。
4.学习蛙和蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度的方法和原理。
二、实验材料:1．实验对象：蟾蜍2.实验器材：常规手术器械（粗剪刀、手术剪、眼科剪、手术镊、眼科镊）蛙板、蛙钉、探针、锌铜弓、玻璃分针、培养皿、任氏液、滴管、手术线、PC机、信号采集处理系统、神经屏蔽盒等。
三、实验原理：神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位，标志着神经发生兴奋.如果在离体神经干的一段施加刺激,从另一端引导传来的神兴奋冲动，可以记录出双相电位，加入在引导的两个电极之间将神经干麻醉或损伤，阻断其兴奋传导能力，这时候记录出的动作电位就成为单相电位.神经细胞的动作电位是以全或无的方式产生的.但是，复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的增加而增大的。
......感谢聆听如果在远离刺激点的不同距离处分别引导离体神经干动作电位,两引导点之间的距离为m,在两引导点分别引导出的动作电位的时相差为s。
即可按照公式v=m／s来计算出兴奋的传导速度。
蛙类的坐骨神经干属于混合性神经，其中包含有粗细不等的各种纤维，其直径一般为３-29um,其中直径最粗的有髓纤维为A类纤维,传导速度在正常室温下为35-40 ｍ／s。
......感谢聆听神经每兴奋一次极其在兴奋以后的回复过程中，其兴奋性都要经历一次周期性的变化，其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个时期.为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生的周期性变化，首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋，然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激，用于检查神经的兴奋阈值和所引起的动作电位的幅度，以判定神经兴奋性的变化。
蛙的实验
实验一坐骨神经腓肠肌标本制备目的学习坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。
原理两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织所需要的生活条件比较简单，易于控制和掌握。
因此在生理实验中常用蟾蜍的神经肌肉标本来观察兴奋性、兴奋过程、刺激的规律以及骨骼肌收缩的特点等。
实验对象蟾蜍实验用品蛙类手术器械、烧杯、培养皿、棉球、纱布、细丝线、任氏液、粗剪刀、蛙板等。
实验步骤1.破坏脑和脊髓左手持蛙，用食指压其头部前端，使头前俯。
右手持探针由头端沿正中线向后划，触到凹陷即为枕骨大孔，将探针由此垂直刺入。
再将探针折向前方，插入颅腔内并左右搅动捣毁脑组织。
再将探针退回至进针处，针尖转向后方，刺入椎管捣毁脊髓。
此时蟾蜍四肢瘫软，表明脑脊髓已完全破坏。
2.剪除躯干上部及内脏用粗剪刀在骶髂关节水平以上1cm处剪断脊柱。
左手握住后肢，右手持剪刀沿脊柱的断口向下剪开两侧的皮肤及肌肉，再剪除已下垂的躯干上部及内脏。
3.剥皮剪掉肛门周围的皮肤，左手捏脊柱断端（勿触碰神经），右手捏住断端边缘的皮肤，向下剥掉两后肢皮肤。
将标本背位放于表面有少许任氏液的蛙板上，洗净双手及用过的器械。
4.游离坐骨神经沿脊柱两侧用玻璃分针分离坐骨神经，用线在坐骨神经靠近脊柱处结扎并剪断。
左手捏住脊柱，右手持剪刀从背面剪去向上突出的尾骨。
然后从腹面沿中线将脊柱剪成两半。
捏住两侧下肢带骨用力向两侧掰，使耻骨联合处脱臼，再从耻骨联合中央剪开两后肢，一后肢放入盛有任氏液的平皿中备用，一后肢用玻璃分针划开梨状肌及其附近的结缔组织，循坐骨神经沟（股二头肌与半膜肌之间的裂隙处）找出坐骨神经的大腿部分，用玻璃分针将腹部的坐骨神经小心勾出来，手执结扎神经的线，剪断坐骨神经的所有分支，一直游离至膝关节。
5.完成坐骨神经腓肠肌标本的制备将分离干净的坐骨神经搭于腓肠肌上，在膝关节周围剪掉全部大腿肌肉，并用普通剪刀将股骨刮干净，在股骨中部剪去`上段股骨。
再在跟腱处以线结扎，剪断并游离腓肠肌至膝关节处，在膝关节以下将小腿其余部分剪掉。
实验1坐骨神经腓肠肌标本制备【实验目的】掌握蛙类的捉拿和破坏脑
实验1 坐骨神经腓肠肌标本制备【实验目的】掌握蛙类的捉拿和破坏脑脊髓的方法，掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备技术、获得兴奋性良好的标本。
【实验原理】蟾蜍及蛙类的一些基本生命活动与哺乳动物相似，又因其离体组织在短时间内所需的生活条件简单，易于控制和掌握，因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋和兴奋性、刺激与反应及肌肉收缩等基本生理现象。
因而制备坐骨神经腓肠肌标本是生理学实验中必须掌握的一项基本技能。
【实验对象】蟾蜍或青蛙。
【实验用品】蛙类手术器械一套，（普通剪刀、手术剪刀、眼科剪、组织镊子、眼科镊子、探针、锌铜弓、玻璃分针、蛙板、玻璃板、蛙钉）任氏液、方瓷盘、培养皿、棉线、纱布、滴管等。
【实验步骤】1.破坏脑和脊髓取蟾蜍一只，用左手握住蟾蜍，食指按压头部前端，拇指按压背部，使头部前俯；右手持金属探针由头端沿中线向尾方划触、触及凹陷处即枕骨大孔的所在。
将探针由凹陷处垂直刺入2~3mm，刺破皮肤即入枕骨大孔，这时将探针尖端水平转向头方，向前探入颅腔内，然后向各方搅动探针，以捣毁脑组织。
脑组织捣毁后，将探针退出；再由枕骨大孔刺入，并水平转向尾方，与脊髓平行刺入椎管，来回抽动探针以彻底破坏脊髓。
当动物四肢肌肉的紧张性完全消失时，提示脑和脊髓完全破坏（见图2-1）。
2.剪除躯干上部及内脏在骶髂关节水平以上1～1.5cm处剪断脊柱。
左手握止蟾蜍后肢、用拇指压止骶骨，使蟾蜍头与内脏自然下垂，右手持普通剪刀（严禁用手术剪剪骨骼），沿脊柱两侧剪除一切内脏及头胸部，留下后肢、骶骨、脊柱以及紧贴于脊柱两侧的坐骨神经。
剪除过程中注意勿损伤坐骨神经。
3.剥皮左手握紧脊柱断端（注意不要握住或压迫神经），右手捏住其上的皮肤边缘、用力向下剥掉全部后肢的皮肤（图2-2 ）4.清洗把剥皮后的标本放在盛有任氏液的培养皿中。
将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净，再继续下面步骤。
注意剥皮后的标本不能用自来水冲洗。
5.分离两腿用镊子夹住脊柱标本背面朝上，剪去向上突起的尾骨（注意勿损伤坐骨神经）。
坐骨神经腓肠肌标本制备步骤
坐骨神经腓肠肌标本制备步骤《坐骨神经腓肠肌标本制备步骤坐骨神经腓肠肌标本制备步骤》嘿，朋友！今天咱们来聊聊坐骨神经腓肠肌标本的制备步骤。
这事儿啊，说起来还挺有趣的，您可得听我慢慢道来。
呢，咱们得准备好一些工具和材料。
像是蛙类动物，常用的是蟾蜍，还有一些手术器械，像解剖刀、镊子、剪刀之类的，当然还少不了一些生理盐水，这可是保持标本活性的关键哦。
准备好这些，咱们就可以开始动手啦！把蟾蜍捉来，先得让它安静下来。
这时候可以给它来一下“温柔的抚摸”，让它放松放松。
然后，用大头针把蟾蜍的四肢固定在解剖盘上。
这一步可得小心点，别弄疼了它。
找到脊柱后，在它的两侧找到坐骨神经，这两条神经就像是藏在深处的宝贝，得仔细找才能发现。
找到后，用镊子轻轻把周围的组织清理干净，让坐骨神经完全暴露出来。
然后，顺着坐骨神经往下，就能找到腓肠肌。
这腓肠肌就像是一个小肌肉块，连着坐骨神经。
用剪刀把坐骨神经和腓肠肌周围的其他组织剪掉，但要注意，千万别把神经和肌肉剪断了，这可需要点耐心和细心。
不过，还没完呢！把取下的标本放在盛有生理盐水的培养皿里，让它好好泡个澡，保持湿润和活力。
经过这一系列的操作，咱们的坐骨神经腓肠肌标本就制备好啦！是不是感觉还挺有意思的？这当中每一步都需要咱们小心谨慎，就像对待一件珍贵的宝贝一样。
朋友，您要是自己动手做这个标本，一定要按照这些步骤慢慢来，相信您一定能成功的！。
实验二 坐骨神经-腓肠肌标本的制备
实验二坐骨神经－腓肠肌标本的制备一．目的和要求1．学习蛙类动物双毁髓的实验方法2．学习掌握坐骨神经－腓肠肌标本的制备方法3．了解急性离体器官，组织实验二．动物与器材1．动物：蟾蜍2．器材：常用手术器械（手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针）、辣盘、锌铜弓、培养皿、蛙钉、滴管、烧杯、棉线3．试剂：任氏液――提供母液，需按1：10稀释三．原理把蟾蜍的腓肠肌和连同它相连的坐骨神经从体内剥离出来，制成“神经－肌肉”标本；如果在神经的游离端一侧轻轻的触动神经，或者通以适当的电流作为刺激，那么在经过一个极短的时间后，可以看到肌肉出现一次快速的缩收和舒张。
而且，只要刺激不造成组织的损伤，上述反应可以重复出现。
这说明，神经或肌肉表面受到刺激的点，一定产生了某种信号，他们沿着神经纤维或肌细胞传导，最后导致整个肌肉发生受挫。
按该信号的传导速度和可重复性分析，只能是电信号。
用近代精密的电测量设备，即可确定在神经被刺激的点产生了一个微弱的电信号，它以一定的速度传向肌肉，而肌肉的收缩则发生在这种电反应之后。
上述神经－肌肉标本实际是整个体内反射弧的一部分，后者在进行正常活动时，先由感受器细胞对外在环境变化进行跨膜信号传导，随后才发生电信号在传入和传出神经纤维上的传导和细胞间的信息传递。
而肌肉运动主要时由于产生的动作电位。
四．方法与步骤1．双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上，用无名指和小指夹在其后肢，中指抵制前肢，食指按压其头部前端，拇指压住躯干背部，使头向前俯；右手持毁髓针，找到两耳后腺之间的凹陷处即枕骨大孔位置，垂直刺入约1～2mm，然后将针尖向前刺入颅腔，搅动数下，捣毁脑组织（可感觉针触及颅骨）。
此时为单毁髓动物。
再将毁髓针退回垂直刺入状态，扔留1～2mm的针尖位于枕骨大孔处，将针尖转向右方，与脊椎平行刺入椎管，捣毁脊髓。
只蟾蜍后肢瘫痪，不再动弹。
2．剥制后肢标本：将双毁髓的蟾蜍背面向上放于蜡盘上，左手拿眼科镊轻提起两前肢间背部的皮肤，右手持眼科剪横向剪开皮肤，暴露耳后腺后缘水平的脊柱。