首次分离出人肠道干细胞_
生物医学工程与临床2013年5月第17卷第3期BME ＆Clin Med,May 2013,Vol．17,No .3
氏骨折治疗方法的选择[J].中国骨与关节损伤杂志，2006，21（7）：518-520.]
[2]LI Ze-lu,LIANG Bing-sheng.Progress on treatment of missed
Monteggia fracture in children[J].International Journal of Or -thopedics,2011,32(3):173-175.[李泽璐，梁炳生.儿童陈
旧性孟氏骨折治疗进展[J].国际骨科学杂志，2011，32（3）：
173-175.]
[3]ZENG Pei,YANG Jian-ping.Missed Monteggia fracture in chil -dren:pathological mechanism and surgical treatment[J].Chine -se Journal of Orthopedics,2012,32(5):457-461.[曾裴，杨建平.
儿童陈旧性孟氏骨折的手术治疗[J].中华骨科杂志，2012，32（5）：457-461.]
[4]YI Shen-de,WANG Bao-li.Treatment of old Monteggia frac -ture in children[J].Practical Clinical Medicine,2010,11(7):68-69.[易申德，王保利.儿童陈旧性孟氏骨折治疗体会[J].
实用临床医学，2010，11（7）：68-69.]
[5]LIAO Su-ping,KAN Wu,YANG Zhong-hua,et al .Operative
treatment of old Monteggia fracture [J].Orthopedic Journal of China,2003,11(14):966-967.[廖苏平，勘武，杨中华，等.陈
旧性孟氏骨折的手术治疗[J].中国矫形外科杂志，2003，11（14）：966-967.]
[6]L 覿dermann A,Cerinoi D,Lef èvre Y,et al .Surgical treatment
of missed Monteggia lesions in children[J].J Child Orthop,2007,1(4):237-242.
[7]TANG Wei,MU Ming-zhang,TAN Jiang-wei,et al .Down -ward shift of the interposed annular ligament after capsular re -lease for the treatment of pediatric old Monteggia fracture[J].Chinese Journal of Pediatric Surgery,2011,32(9):682-685.[唐伟，慕明章，谭江威，等.关节囊松解被卡环状韧带下移
治疗儿童陈旧性孟氏骨折[J].中华小儿外科杂志，2011，32（9）：682-685.]
[8]E Jian-cuo,GUO Li-ping,ZHANG Jian-ning.Treatment of 16
cases of old Monteggia fracture in children[J].Qinghai Medical Journal,2009,39(7):36-37.[阿尖措，郭立平，张建宁.手术治
疗儿童陈旧性孟氏骨折16例临床体会[J].青海医药杂志，
2009，39（7）：36-37.]
[9]CHEN Yuan-ping,LIU Lan-zhi.The effect of ulnar lengthen -ing internal fixation for treatment in old Monteggia fracture in children of 38cases[J].Journal of Practical Orthopedics,2008,14(5):311-312.[陈元平，刘兰芝.尺骨延长内固定术治疗
儿童陈旧孟氏骨折38例[J].实用骨科杂志，2008，14（5）：
311-312.]
[10]ZHOU Qin-po,WANG Ming-chun,HUANG Jian-guo,et al .
Treatment of 30cases of old Monteggia fracture in children[J].Ningxia Medical Journal,2009,31(5):451-452.[周勤坡，王
铭春，黄建国，等.手术治疗儿童陈旧性孟氏骨折30例体会[J].宁夏医学杂志，2009，31（5）：451-452.]
首次分离出人肠道干细胞
据Gracz AD 2013年4月4日（Stem Cells ，2013Apr 4.doi ：10.1002/stem.1391.）报道，美国北卡罗来纳大学教堂山分校的研究人员首次从人肠道组织中分离出成体干细胞。这一发现给科学家们提供急需的资源以便揭示出人类干细胞的确切生物学机制。它也能够让科学家们探索新的策略来治疗炎症性肠病或缓解因化学治疗和放射治疗经常导致肠道损伤而带来的副作用。
研究这些干细胞的一大障碍就是不能获得它们。在此之前，研究者一直没有技术来分离和研究这些干细胞。如今，有方法解决其中的很多问题。
多年以来，科学家们不得不寻求来自小鼠的干细胞进行实验。尽管利用小鼠模型进行研究已取得重大进展，但是小鼠与人类之间的干细胞生物学特征上存在的差别一直不能让研究人员开发出新的方法来治疗人类疾病。尽管研究者从小鼠那里获得的信息是解释这种肠道组织如何工作的较好的基础机制性数据，但是除非在人类组织中开展过类似的实验，否则仍然有可能不能深入认识这种组织的作用机制。
Magness 实验室在美国曾经首次从小鼠体内分离出和培养单个肠道干细胞，因此当在人类组织中寻求类似的干细胞时，他们
有这方面的优势。此外，研究人员也能够获得人小肠组织切片来开展实验，其中小肠组织是在胃分流术（gastric bypass surgery ）中被切除下来的，并且通常被抛弃掉。
为了开发这种技术，研究人员研究了他们在小鼠体内采取的方法是否会在人类组织中起作用。他们首先观察在小鼠肠道干细胞表面上发现的分子是否同样在人肠道干细胞中存在。他们发现这些被称作CD24和CD44的特异性分子确实在小鼠和人体内是一样的。他们然后将荧光标记附着到这些分子上，并利用一种特殊的被称作荧光激活细胞分选仪（fluorescence activated cell sorter ）的机器鉴定和分离出来自人小肠样品中的干细胞。
研究人员发现，不仅能够从人肠道组织中分离出人类干细胞，而且也能够分离出不同类型的肠道干细胞。对干细胞研究人员而言，两类肠道干细胞———活跃肠道干细胞和储备肠道干细胞———是一个热门话题。为此，干细胞研究人员仍然一直试图找出储备干细胞如何周期性地激活从而弥补因损伤、化学治疗或放射治疗而遭受损伤的活跃干细胞。
研究者下一步就是仔细地描述这些干细胞群体的特征来评估它们的潜力。解决能够在体外增殖这些细胞从而潜在地提供一种细胞来源，或者特别地、能够对这些细胞基因修饰来治疗先天性遗传病或炎症性肠病。这些在未来是将要研究的问题。
。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。
·信息动态·
265--
干细胞治疗工作流程图
干细胞治疗工作流程 脐带血临床采集流程 干细胞是一种未分化的细胞，具有自我更新、分化、发育再生各种组织器官和人体的潜在功能。 脐带血广泛的应用前景备受关注，脐带血本属于废弃物，但是医学技术的进步使得它的价值得到了空前的提升。1989年，法国的鲁克罗曼教授用HLA 相合的同胞脐带血干细胞进行移植，成功地治疗了一例遗传性疾病—可尼贫血症，之后短短的15年的时间，医学界利用脐带血干细胞已成功治愈和改善了多种疾病，包括:血液系统疾病、免疫系统疾病、神经和血管系统疾病、脑部疾病、肿瘤、糖尿病等。现在在儿童的干细胞移植方面，由于可以存在1-2个HLA位点的不配型，免疫排斥反应小等原因，脐带血干细胞已成为治疗一些重大疾病的有效手段。同时，干细胞的进一步开发，还可用于抗衰老、器官修复、美容等保健领域。干细胞技术和临床应用的飞速发展，给人类的健康带来了新的希望和保障。但是作为采集脐带血最主要的工作人员，我们所需要的操作是非常简单的，但是对于术中操作之外，我们还是会遇到以下的问题。解决这些问题，我们才能放心的采集，存储，备用。但是真正合法，安全，便捷的让脐带血的干细胞移植到有需要的患者体，需要按以下流程操作： 脐带血采集条件： 以初产妇、年龄在45岁以或35岁以经产妇，身体健康者为宜。 脐带血安全流程
1、传染病检查：孕妇在产前要做好身体检查。这些检查包括:肝功能是否正常，有无梅毒螺旋体，艾滋病病毒(HIV )、乙型肝炎病毒(HBV )、丙型肝炎病毒(HCV)等病原体检测。如果其中有一样是阳性的话，就不要再进行采集了。 2、采集和储存的无菌观念：在自然分娩的情况下，一定要注意消毒。被厌氧菌和需氧菌污染，检测为阳性时都不能储存和使用。在脐血被采集后，应该尽快保存在2-8℃的恒温箱中，并远离辐射源，不要让X射线照到。这样的脐带血经科学实验证实，放置24小时或在-23℃以下48小时，其中的干细胞的活性是没有明显影响的，但最长不应该超过72小时。 采集流程 何种方法采集脐带血更好些呢？Solves[5]等证实了剖宫产情况下，以下两种采集方法体采集法对得到的脐带血除血细胞比容及血小板外，其他各项没有明显不同。 体采集法：产妇施行常规的子宫横切术，将胎儿取出后，立即用两把止血钳夹住脐带，将其与胎儿分离，然后用碘酒和70%酒精消毒脐带，做脐静脉穿刺后，脐带血通过重力的作用流人含抗凝剂的无菌采集袋，采集完将其放入4℃冰箱中保存。 体外采集法：同样对产妇行子宫横切术，待胎盘自然或人工剥离后，立即将其置于采集区，胎盘取出与进行采集之间时间尽可能缩短，将胎盘放在一个中间有孔的可供脐带自然垂下的采集台上，对脐带进行严格消毒后行脐静脉穿刺，血液在重力的作用下流人采集袋中，将其放人4℃冰箱保存。 脐带血贮存 因为脐血的采集、运输、储存和应用事实上有别于一般血液，国际上通行的管理法规都将血液和组织细胞分别管理，而我国目前的法规对脐血干细胞库
人体各部位常见的致病菌
人体各部位常见的致病菌 一、人体中的常见的致病菌： 1、葡萄球菌： 属革兰氏阳性球菌。是人体皮肤上寄居最多的致病菌，也见于鼻咽等处。金黄色葡萄球菌致病力最强，主要产生溶血素、杀白细胞素和血浆凝固酶等，造成许多种感染，如疖、痈、脓肿和伤口感染等。金黄色葡萄球菌感染的特点是局限性组织坏死，脓液稠厚、黄色、不臭。也能引起全身性感染。 2、链球菌： 属革兰氏染色阳性球菌。存在于口、鼻、咽和肠腔内。链球菌的种类很多，溶血性链球菌、绿色链球菌和粪链球菌是常见的致病菌。溶血性链球菌能产生溶血素和透明质酸酶、链激酶等，溶解破坏细胞间质中的透明质酸、纤维蛋白和其他蛋白质，使炎症易扩散而缺乏局限化的倾向。脓液特点是比较稀薄，淡红色，量较多。典型的感染是急性蜂窝织炎、淋巴管炎等。绿色链球菌是一些胆道感染和亚急性心内膜炎的致病菌。粪链球菌属厌氧菌，常和大肠杆菌一同引起混合感染。 3、大肠杆菌： 革兰氏染色阴性。寄居于肠道内。对维生素K的合成有重要作用。它的单独致病力不大，若和其他致病菌在一起时，可造成严重的混合感染，如大面积烧伤感染、阑尾脓肿、急性胆囊炎等，产生的脓液稠厚，有粪臭。 4、绿脓杆菌： 革兰氏染色阴性。常寄居于肠道和皮肤上，它对大多数抗菌药物不敏感，故成为继发感染中的重要致病菌，特别是大面积烧伤感染时，可引起难以控制的绿脓杆菌败血症。绿脓杆菌感染的伤口常不易愈合，其脓液呈淡绿色，有腥臭味。 5、变形杆菌： 革兰氏染色阴性。存在于肠道和前尿道，为尿路感染、急性腹膜炎和大面积烧伤感染的致病菌之一。变形杆菌对大多数抗菌药物有耐药性。脓液具有特殊的恶臭。 6、无芽胞厌氧菌： 革兰氏染色阴性的专性厌氧菌。在一般外科感染中，此类细菌为重要的病原体之一。具有临床意义的有脆弱类杆菌、核梭形菌、消化球菌和消化链球菌等多种。这些无芽胞厌氧菌寄生在人体内的腔道，特别是胃肠道（结肠内的数量最多）、口腔、阴道等处。它们与需氧菌共同构成机体的正常菌群。正常情况下保持菌群相对平衡，对人体无害。其致病条件是：当某些原因（如血液供应障碍、组织坏死、需氧菌共生等）造成局部组织的氧化还原电势降低，便有利于无芽胞厌氧菌的繁殖。在机体许多封闭部位，单纯厌氧菌可造成感染，但多数厌氧菌是与其他需氧菌共生而引起感染的。厌氧菌感染脓液有恶臭。目前有效的治疗药是甲硝哒哇（灭滴灵）。 二、食品中常见的致病菌： 1、肉毒杆菌： 偏爱高蛋白食物。肉毒杆菌是自然界广泛存在的一种细菌，在土壤、动物粪便等地方经常可以见到它。它尤其喜欢肉肠、火腿等富含蛋白质的食品，同时在豆制品和煮熟的黄豆、豆酱类食品中也可能含有。在我国的新疆、青海等少数民族地区，几乎每年都会出现因自制发酵肉制品而导致中毒甚至死亡的事件。 2、沙门氏菌： 多在动物性食品中出现。它是导致我国食物中毒的主要元凶之一，通常寄居在人或动物肠道内。它主要污染动物性食品，包括禽畜类、蛋类、奶类及其制品，如果没有彻底加热，则可能感染。美国曾多次出现大规模沙门氏菌污染事件，包括鸡蛋等。
干细胞研究发展历程.
1950：将骨髓细胞移植到遭受致死剂量辐射的动物，发现能够挽救生命，重建骨髓造血免疫系统 1960：真正认识和了解人和哺乳动物干细胞始于20世纪60年代 1961：Till 和Mc Culloch 提出多能干细胞概念 1967：多纳尔–托马斯完成第一例骨髓移植，后于1990年获得诺贝尔医学和生理学奖 1980：造血干细胞移植成为治疗多种疾病的重要手段 1981：Evans等首次成功建立小鼠胚胎干细胞系 1981：胚胎干细胞（embryonic stem cell，ES细胞）的分离和培养首先在小鼠中获得成功 1988：美国科学家James Thomson分离出人类胚胎干细胞 1998：美国两个科研小组分别报告从胚胎和生殖脊成功建立人类胚胎干细胞系，使人类胚胎干细胞能在体外生长和增殖 同年，美国科学家在《美国科学院院刊》上报告：小鼠肌肉组织的成体干细胞可以“横向分化为血液细胞”。此后，世界各国科学家相继证实，包括人类的成体干细胞具有可塑性，从而掀起了全球成体干细胞研究高潮。干细胞研究进展被《科学》杂志评选为该年度世界十大科学成就之首。人类ES (hES)细胞建系获得成功，由此推动了干细胞研究的兴起。 2000： 日本把以干细胞工程为核心技术的再生医疗列为“千年世纪工程”之一，当年投资108亿日元；同年，全世界有10622例造血干细胞移植。 成体干细胞移植使糖尿病大鼠恢复正常 神经干细胞能够进入脑组织并修复脑损伤 角膜干细胞有助于恢复视力 发现成人骨髓干细胞形成肝细胞 成人骨髓干细胞可以在合适的条件下转化为神经细胞 成人骨髓干细胞可以在体外大规模培养 证实成人骨髓干细胞可以形成多种类型组织
骨髓移植后肝排异症状
骨髓移植后肝排异症状 文章目录*一、骨髓移植后肝排异症状1. 骨髓移植后肝排异症状2. 骨髓移植的成功率3. 骨髓移植后能活多久*二、骨髓移植的条件*三、骨髓移植的注意事项 骨髓移植后肝排异症状 1、骨髓移植后肝排异症状骨髓移植后发生肝排异症状是早期的,肝排异症状是肝静脉闭塞病(VOD ) :平均发生时间为移植后巧天,早期表现为肝区疼痛、体重增加,继之有肝大、黄疽、腹水。早期抗凝和溶栓治疗尤其重要。 早期排异症状同时还有其他并发症产生,如出血性膀胱炎、血栓性微血管病、感染、急性移植物抗宿主病如皮疹、胃肠道功能和肝功能异常。后期排异症状有间质性肺炎、甲状腺功能低下、对生殖系统的影响、白内障、恶性肿瘤、累及多器官的综合征等等,出现排异症状要在医生指导下用药控制的。 2、骨髓移植的成功率骨髓移植要经历五个关卡,首先移植化疗关卡;其次是移植关卡;第三是移植后是否出现免疫排斥关卡;第四感染关卡;第五移植后化疗关卡,如果依次能顺利通过以上 关卡的话,那么说明骨髓移植已经成功了大半,接下来就要接受 时间的考验,如果半年内经过基因检查,在患者体内发现供髓者 的基因表达,且骨髓、血象及重要脏器检查指标正常,没有出现明
显异常,那么就算骨髓移植百分百成功。 3、骨髓移植后能活多久约60%的成人急性白血病患者,异基因或异基因骨髓移植后可以达到3年以上的生存期,其中一些已经达到6至5年。在慢性粒细胞白血病慢性期,约80%的病人可存活3年以上,部分已存活5～6年以上,但仍有部分患者骨髓移植后短期内复发或产生严重的排他反应而死亡。 骨髓移植的条件1、必须找到合适的配型。因为HLA(人类白血球抗原)配型完全相符的概率非常低,即便是同胞兄弟姐妹也仅为1/4,所以国际上虽然通常采用建立骨髓库,在非血缘关系人群中寻找相匹配供者,但相合几率在千分之一到数万分之一。其实绝大多数患者是找不到合适的配体的,病情却因此延误。 2、如果患者幸运地找到了合适的配体,那么下一关是至少30万元的手术费。这对中国许多患者来说是一个天文数字。他们因为筹不到这笔巨款,也只得放弃手术。据有关统计,在中国的中西部地区,因为看不起病、住不起医院,因病在家里死亡的人数估计在60%～80%。虽然也有人通过媒体获得了社会救助,但毕竟是少数。 3、患者如果万幸具备上述条件,闯过前两关,还要面对三个难题,即放化疗的打击、病原微生物的感染、身体的排异反应。
肠道致病菌(本科)
第7章肠道杆菌(Enteric bacilli) 第一节概述 肠道杆菌是指寄生在人和动物肠道中的大群革兰氏阴性杆菌, 它们为兼性厌氧菌, 属于肠杆菌科。本科细菌不产生芽孢, 形态相似,? 但含有多种酶类, 故生化反应繁多, 根据它们的特殊构造、生化特性和抗原结构等方面的特点, 可将肠杆菌科的细菌分为6族13属。志贺氏菌属、沙门氏菌属及部分埃希氏菌属是人类的重要致病菌。其它各属细菌大多是肠内常居菌或机会致病菌。 一、生物学性状 (一)形态肠杆菌科的细菌皆为革兰氏阴性的短小杆菌, 多数有周鞭毛, 有些菌株有性菌毛可传递质粒。 (二)生化特性生化反应活泼, 能分解多种糖类和蛋白质, 形成不同的代谢产物, 这都可作为鉴别细菌的依据。一般说来非致病性的埃希氏菌属和肠杆菌属细菌具有β-半乳糖甘酶,而致病性的志贺氏菌属和沙门氏菌属细菌无此酶, 可利用乳糖发酵试验作为鉴别肠道致病菌与非致病菌的重要依据。 (三)抗原构造与血清学分型 1.抗原构造复杂: 有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(K)抗原三和种。 (1)O抗原: 脂多糖分子最外层, 由重复的低聚糖所组成的聚合体 (2)H抗原: 是组成细菌鞭毛的蛋白质成分, ?按多肽链的氨基酸排列顺序及空间构型决定鞭毛抗原的特异性。 (3)K抗原: 是多糖质, 它存在于荚膜或微荚膜中。 2.血清学分型是用血清学方法检查待测菌株细菌表面的特异性群或型抗原, 这需要单因子血清做凝集试验。 (四)抵抗力 肠杆菌科的细菌无芽孢, 对热力和一般消毒剂的抵抗力都不强。雾化器,是医院感染中重要的传染来源。 二、微生物学诊断原则 粪便是最常采取的标本, 初次分离时, 一般采用具有选择和鉴别性质的培养基, 如S.S.琼脂和中国兰培基。对肠科细菌的鉴定, 主要是根据生化反应。 第二节埃希氏菌属(Escherichia) 大肠埃希氏菌可分为致病性和非致病性两大类,非致病菌是人和哺乳动物肠道中的正常菌群,且可帮助机体合成维生素B、K和大肠菌素(colicins)等, ?甚至在一定程度上还能阻止外来的病原体生长、繁殖及引起疾病。生物间若失去平衡或因机体过度虚弱或外伤而其它无菌部位时,它们也会乘机侵害, ?成为机会致病菌。 一、致病性 (一)致病物质： 1.定居因子（或称粘附素）：为大肠杆菌一种特殊菌毛，抗原性强，可粘附于宿主体肠壁。 2.肠毒素分耐热不耐热两种。 a 不耐热肠毒素（heat labile enterotoxin,LT）60C时30分钟灭活。与霍乱弧菌外
干细胞专业词汇
干细胞,无疑是当今生物医学研究领域中的重中之重,国内外很多生物医学研究机构都在开展着这方面的工作,与此同时,一些干细胞研究的专用术语也大量出现在相关文献中,为了使大家更好地理解这些术语的含义,李志琴博士,章静波教授从美国国立卫生院(NIH) 有关干细胞的报告中摘取了部分专有名词,并把它们译成中文,以供参考。 Adipocyte ———脂肪细胞。 Adult stem cell ———成体干细胞,存在于已分化组织中的未分化细胞,它可以自我更新,同时在一定的局限性条件下也可分化,产生其来源组织的各种特异的细胞类型。 Allogenic ———同种异体的,两个或两个以上的个体(或细胞系) ,当其在1 个或多个位点上的基因序列不相同时,则互称为同种异型的机体。 Amnion ———羊膜,最内的一层子宫内膜,包绕着胎儿和羊水。 Anterior visceral endoderm ( AVE) ———前脏内胚层,起源于早期胚胎的特异性组织结构,有助于建立起机体的前后轴向。 Antibody ———抗体,B 细胞对抗原反应而分泌的一种Y型蛋白质,抗体可与诱导其产生的抗原呈特异性结合。针对感染性生物体表面抗原产生的抗体有助于消灭体内的该生物体。
Antigen ———抗原,可以诱导抗体形成的物质,常是蛋白质。抗原通常存在于感染性生物体,输血血细胞和移植器官的表面。 Antigen presenting cells (APCs ) ———抗原递呈细胞,体内多种细胞类型中的一种,可以对抗原进行加工,并以一种可被T 细胞识别的形式展现于其表面。 Apoptosis ———细胞凋亡,遗传性的程序性细胞死亡。 Astrocyte ———星型胶质细胞,神经组织中的一种较大的神经胶质细胞。 Autoantibody ———自身抗体,一种与机体自身细胞和组织产生的抗原发生反应的抗体,自身抗体可引起自身免疫性疾病。 Autoimmune disease ———自身免疫性疾病,由于T 细胞和P或某种抗体攻击个体自身细胞或组织而引起的一种疾病。 Autologous transplant ———自身移植物,移植组织来自于接受移植的个体,这种移植可避免免疫排斥并发症。 Axis ———轴、纵轴,通过球体两极的直线;机体或其任一部分的中心线;脊柱;中枢神经系统。一条动脉当其发生并立即分为许多分枝时也可称为轴。
衰老代谢与肠道
衰老，代谢与肠道 自从2009年Hans Clevers 实验室发明肠道类器官以来，肠道的研究如同插上了翅膀，在各个领域的研究都取得了令人瞩目的进展。 如今肠道类器官在国内的应用，也是遍地开花，甚至有专门的热心肠研究会。近期大神Hans Clevers 写了一篇Comments综述了类器官在病毒和covid-19中的应用（插入链接）。 今天给大家介绍一篇关于《衰老，代谢与肠道》的综述。顾名思义，本文主要综述代谢和衰老如何控制肠道干细胞的功能和上皮细胞的稳态。近期以果蝇和mouse为模式生物取得新的见解，本文聚焦衰老过程中代谢信号是如何导致肠道干细胞失去干细胞的可塑性和上皮细胞稳态的，以及最终如何影响机体的复原能力和寿命。同时比较了果蝇和mouse 之间的异同点。 民以食为天，消化食物的主要器官就是肠和胃。肠道上皮不但是外界环境的一个动态的屏障，同时也整合了多种信号，包括代谢产物，共生微生物，免疫反应和衰老压力。肠道每天都接收多种多样的生理和病理的刺激信号，这些刺激信号包括代谢物，免疫系统和肠道细菌的交流信号。所有的这些刺激信号都会影响小肠的对环境或者机体挑战的反应。而衰老又对肠道的自我更新和保护功能提出了额外的挑战。后果包括肠道干细胞增殖和分化的适应，干细胞耗竭，细胞衰老，免疫和炎症反应和上皮屏障功能的加强。重要的是这些因素影响了上皮的稳态与肠道的屏障功能，这些因素的异常调控可以导致上皮屏障功能的缺陷和对整个机体的损害。
肠道稳态，代谢和衰老的基本概念 肠道的稳态 上皮的稳态依赖于肠道干细胞的自我更新和分化，细胞的脱落和凋亡。mouse的肠道细胞3-5天就会更新一遍，维持mouse这种高速增殖的是潘氏细胞分泌的Wnt配体，在果蝇中内脏肌肉产生类似的Wnt 配体wingless(wg)。果蝇和小鼠的肠道组织平衡基于肠道干细胞分裂时两个对称分裂的子代细胞的中立的竞争，在分化的过程中，Notch信号抑制分泌细胞促进肠细胞的分化。 肠道的代谢
实验方案-细胞表型检测
细胞表型检测 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 供试品 名称：人胎盘间充质干细胞、猴胎盘间充质干细胞的P4、P6、P8细胞1.1.2 主要试剂 B液自配天津昂赛细胞基因工程有限公司 D液自配天津昂赛细胞基因工程有限公司 血清新西兰胎牛血清(特级) 上海依科赛生物制品有限公司 IgG-FITC BD公司货号：555748 CD19-FITC BD公司货号：555412 CD34-FITC BD公司货号：555821 CD44- FITC BD公司货号： CD31- FITC BD公司货号： IgG-PE BD公司货号：555749 CD11b-PE BD公司货号：555483 CD45-PE BD公司货号：555388 CD73-PE BD公司货号：550257 CD90-PE BD公司货号：555596 CD105-PE Serotec公司货号：MCA1557PE HLA-DR-PE BD公司货号：555812 CD29-PE BD公司货号： 1.1.3 主要仪器 CO2培养箱 离心机 超净工作台 显微镜
1.1.4 主要耗材 50ml离心管、5ml/10ml移液管、1.5ml EP管。 1.1.5 实验设计依据 通过传代培养，我们可以得到相对纯的间充质干细胞，参考国际细胞治疗协会提出的间充质干细胞表型方面的标准，CD73、CD90和CD105阳性率不低于95％；CD45、CD34、CD11b、CD19 和HLA-DR阳性率不高于2％[1]。检测在传代过程中的细胞的表型是否会发生变化。我们设计检测P4代、P6和P8代细胞表型。1.2 实验方法 1.2.1细胞消化 1、将原培养液倒净,用移液管取D液10ml冲洗细胞，倒净,此操作重复洗2 次； 2、用移液管吸取加入B液2ml,盖上培养瓶盖子,摇晃使B液均匀覆盖瓶底,待细胞从培养壁脱落下来； 3、用移液管吸取加入C液0.5ml, 终止消化，再加D液10ml，吹打细胞制成细胞悬液，将细胞悬液收集至离心管中； 1.2.2 流式检测方法 1、收集细胞，1000rpm离心5min，用D液洗一次，过滤； 2、用适量D液将细胞重悬，100μl每管分装到1.5mlEP管中，每管细胞不少于用1×105，在每管中加入4μl要检测表型的抗体,室温避光放置30min；加入1mlD液混匀，离心弃上清，再用1mlD液混匀，离心弃上清，每管加入 350-500μl D液重悬，移入流式管待测即可； 3、用流式细胞仪检测荧光值,每管计数3000-10000个细胞； 4、分析数据。 1.3 C6操作步骤 （一）开机 1、启动控制计算机，进入软件，此时信号灯为红灯，显示还没有与C6连接。 2、检查四个液体容器，如有需要，则先充满液体或清空废液。
干细胞移植的饮食护理
血干细胞移植后的饮食准备 七月19,2013//干细胞移植 造血重建期：0天～16天 免疫重建期：20天～8个月 病毒活化期：20天～75天 子饺子、馄炖、豆包等带馅食品、豆制品、鲜奶、含乳糖奶粉、奶酪、生菜、生水果、生冷饮料。 四阶段饮食设计适用于HSCT后临床表现中-重度肠道GVHD病人。症状的严重程度决定病人进入下述哪一阶段的饮食设计。 血便消失后开始进食。 腹泻病人早期进食有利于营养补充和促进肠道修复。进食准备是基于最低消化能力以及通过进食行为逐渐增加病人消化吸收能力的考虑。 乳糖、脂肪、以及纤维素属于限制摄入之列，直到腹泻改善以后方可考虑给予。 生的新鲜水果和蔬菜禁止食用。在第一，第二阶段，熟制蔬菜也是禁食的，直到第三、第四阶段方可开始食用。
注意：由于第一、二阶段的饮食所含营养素是不充分的，所以第一、二阶段饮食设计仅适用于暂时的、胃肠耐受性差的病人。然后尽快过渡至第三第四阶段（含高蛋白的饮食）饮食。有的病人需要液体的或者必需营养素支持。有的病人可能需要完全的肠外营养。直到能够耐受适宜的肠内营养。 原则：GVHD膳食应当明确按照以下阶段进行安排。严重腹泻病人初始选择易消化吸收的食物。随着病情改善食物逐渐由简到繁，过渡到多样化。 第一阶段（GVHD-1）：适用于因肠道排异（GI-GVHD）所致的严重腹泻。所对应的饮食是“完全液体饮食”。营养液或营养素使结肠内物质最少化。液体食物在室温下，进食后基本吸收消化殆尽，无残留。所需消化能力最小。无奶制品或咖啡因饮料。 GVHD-1膳食主要含水和碳水化合物，所以只适用于短时间使用。一旦情况改善，应尽早加用必需营养素。 汤：米汤、无脂肉汤、清炖肉汤、牛肉清汤。 经滤过的果汁（李子汁和桃汁除外）。 饮料：不含咖啡因和奶 如果能够耐受，加用口服营养素 第二阶段（GVHD-2）：? 除了用于GVHD腹泻以外，GVHD-2饮食也可用于了解病人对于固体食物的耐受性。此时，脂肪的消化吸收仍然是紊乱的。 第二阶段添加少量的固体食物—混合的碳水化合物。：低脂、低纤维、低乳糖，在上述食物列表的基础上，添加面包、麦片（谷类）、面食、牛奶、奶制品等。 营养适宜：
干细胞储存的流程介绍
中美奥奇干细胞库为您提供干细胞储存费用详解： 对于干细胞储存的费用需要多少钱，下面我们将给您做出详细的解答，让您了解整个干细胞储存的过程。 中美奥奇作为专注生命科学领域的高新技术企业，拥有广阔的国际化背景，专业致力于干细胞、免疫细胞、基因诊断等领域的基础研究，并从事临床研究与应用、干细胞储存等业务。 中美奥奇目前已经在中国北京、河北、河南、美国加利福尼亚州等地建立了总面积近万平米的数个符合国家GMP标准的万级净化实验室及细胞库，可提供每年10万份的细胞制备和保管储存服务。 中美奥奇与斯坦福大学、南加州大学、清华大学、军事医学科学院等国内外知名研究机构建立了密切的合作关系。拥有美国、英国院士领航的科学家团队，先后参加国家自然科学基金，国家863计划项目、国家973项目重大专项及省部级课题等20余项的研究工作。 中美奥奇用严谨、务实、创新的态度和国内领先的核心技术，希望通过不断的发展，探索生命奥秘，创造健康奇迹，用科技致力于人类健康的改善。 干细胞储存 所谓的干细胞储存就是：将干细胞从不同的人体组织中分离培养出来后，再经过检测鉴定，然后将其冻存于-196℃的深低温中，以便于在临床需要时可以将干细胞复苏用于给病人回输，达到治疗疾病的目的。 干细胞储存流程： 1、客户咨询 客户咨询 通过中美奥奇奥奇生物网站或、妇产科医生咨询、奥奇生物的咨询医生、奥奇
生物宣传资料等方式了解中美奥奇生物，了解干细胞和保存干细胞的意义。客户同时可以随时拨打中美奥奇生物24小时免费客服电话4000-761-561咨询中美奥奇生物干细胞保存业务，约见客户代表以及预约参观奥奇生物干细胞库。 2、客户签约 客户签约 当您最终选择了中美奥奇生物保存宝宝的干细胞时，便可联系您的客户代表，与中美奥奇生物签订干细胞保存协议。恭喜您，您和您的宝宝便成为了中美奥奇生物大家庭的一员，您做出了一个对您和您的宝宝一生有益的重要决定，您给您的宝宝做了一次生命的备份，给了他(她)第二次生命的机会。 请在预产期前最少一周与中美奥奇生物签订保存协议，办理登记手续。手续简单，只需联系客户代表或直接至客户中心进行业务登记手续。登记后，客户无需做任何准备工作，只需在预产期产生变化等特殊情况下联系中美奥奇生物客户代表或拨打客户服务热线4000-761-561我们将为您联系主治医生进行脐血/脐带/胎盘采集准备。 3、脐带/胎盘收集盒 脐带/胎盘收集盒 客户完成与奥奇生物的合同签署后，在客户生产当天，我们的客户代表会派发一个印有条形码的奥奇生物采集盒给客户。盒内有医生收集脐带/脐血/胎盘所需的用具，包括：采血袋(已消毒及存有抗凝血剂)、抽取母血的真空采血管、胎盘采集盒(已消毒)、保存液、消毒用品及其他辅助工具等;另外备有一份出生报告单及相关文件。 4、产前准备 产前准备
(TOC约束理论)干细胞常用实验技术
实验室内部的人胚胎干细胞protocol 人类胚胎干细胞H1和H9维持方案 一、试剂配制 饲养层细胞培养基 Fibroblast-DMEM Media (F-DMEM) DMEM (GIBCO 11960-044) 450ml FCS GIBCO 16000-044 50ml 10% Pen/Strep 2.5ml 50IU/ml L-glut GIBCO 25030-081 5ml 2uM/ml 人类胚胎干细胞培养基 HESC-Media KO-DMED GIBCO 10829-018 480ml KOSR GIBCO 10828-028 120ml 20% 10mM NEAA GIBCO 11140-050 6ml 0.1mM L-glut(0.2M) GIBCO 25030-081 6ml 2mM Pen/Strep 3ml 55mM BME GIBCO 21985-023 1.1ml 0.1mM ITS GIBCO 41400-045 6ml 4-80C避光保存。用前每50毫升加200-400ng bFGF 细胞冻存培养基 FBS-DMSO FCS GIBCO 16000-044 9ml 90% DMSO SIGMA D2650 1ml 10% 细胞消化液Trypsin-EDTA 0.25% Trysin-1mM EDTA GIBCO 25200-056 2ml 0.05%,0.2mM PBS(-) 14190-144 8ml MEF细胞有丝分裂终止液Mito C Mitomycin C 0.2mg 0.05mg/ml dd-H2O 15230-162 4ml 避光保存。 Mito C的终浓度为10ug/ml即40吸ul 工作液加到2ml F-DMEM中。. 0.1% Gelatin(用于培养皿的包被) 1% Gelatin 40ml 0.1%
间充质干细胞
间充质干细胞通过大动脉内皮细胞时表现稳定的粘合性，表面分布不均、分散性及跨迁移的特征即；趋化因子与切力效应 作者：Giselle Chamberlain, Helen Smith, G. Ed Rainger, Jim Middleton 摘要 间充质干细胞具有抗炎症，抑制免疫力的性质，或许在如动脉硬化这样的疾病治疗中发挥作用。间充质干细胞能够进入炎症细胞，然而为了在临床上运用，人们需要阐明他们迁移机制。本研究探究了鼠类间充质干细胞与其迁移到小鼠动脉内皮细胞的相互关系，以及趋化因子，剪切压力的效应。通过生理流动条件实验研究鼠类间充质干细胞与MAEC 的相互作用，鼠类间充质干细胞在连续流动条件下没有表现出相互作用。然而，当流动停止十分钟，再开始，鼠类间充质干细胞慢慢的附着在内皮细胞表面，延展成良好的微绒毛过程（丝足）。然后他们以不同方向散布在伸展的丝足。CXCL9显著提高了鼠类间充质干细胞的附着、表面非均匀分散及扩散的比例，剪切压力明显刺激了后两者。间充质干细胞通过鼠类动脉内皮细胞过程中，CXCL9, CXCL16, CCL20 和CCL25 明显增强了跨内皮迁移。小鼠间充质干细胞的跨迁移抑制受体CXCR3，CXCR6, CCR6 和CCR9. 本研究促进了对间充质干细胞内皮跨迁移，趋化因子、剪切压力的效应的了解，这与如动脉硬化的炎症息息相关。 介绍 间充质干细胞分化成许多不同的细胞谱系的能力，如同他们抗炎及免疫方面的特征，都没有伦理上的争议；培养相对容易使得间充质干细胞在许多炎症与损伤的治疗中成为一种理想的干细胞来源[1]。间充质干细胞能够在动脉硬化的抗炎治疗中发挥作用，有报道用培养的间充质干细胞治疗心肌梗塞[2–4]；同样，在像中风，脊椎损伤[5,6]、脑脊髓炎[7]、辐射损伤[8]、皮肤损伤[9]和移植物抗宿主疾病情况[10]，间充质干细胞发挥潜在作用。虽然在治疗像非愈合骨折这样的特点疾病下[11]，间充质干细胞定向移动发挥作用，但是它也与间充质干细胞周身侵泡配合问题有关，如钙化与组织损伤[12]。周身移动带动多向移动，而且可能比定向传递更少发生侵略性的过程。为了通过周身递送直接治疗动脉硬化，间充质干细胞需要横穿动脉内皮进入组织发挥抗炎效应，然而通过这样途径间充质干细胞迁移、移植并不非常有效[13]，还需要了解间充质干细胞从血液到组织是怎样迁移的，以至于这样的补充过程能够减少炎症的发生与增强组织修复。 我们已经非常了解多层附着的白血球及这些细胞是如何从循环中迁移到炎症组织中的[14,15]。白血球在细胞内皮表面进行一系列相互作用，如结合，旋转，激活，捕捉，传递，蠕动，接着进行跨内皮迁移。然而，我们不知道间充质干细胞是否与内皮细胞发生相似的作用，也不知道哪些因子调控跨内皮迁移。除此之外，间充质干细胞与内皮细胞相互作用在循环中产生生理作用即流体剪切压力需要得以解决，因为这队白血球非常重要[16]. 趋化因子受体与配体是重要的组分涉及在白血球细胞移动到炎症位点，最近我们阐明了在标准Boyden-type 小室中，用去掉内皮细胞后，鼠类间充质干细胞上不同趋化因子受体的功能表达。我们和其他人报道了[17–22]在人类间充质干细胞中趋化因子受体表达，其中与一些鼠类相同（如CXCR3,CXCR6 和CCR9因子）。我们了解有许多白血球附着分子参与细胞横穿内皮组织的迁移过程，有报道其中一些在间充质干细胞上表达
11.29造血干细胞移植一些常见问题
造血干细胞移植中一些常见问题 随着独生子女时代的到来，靠兄弟姐妹间配型来选择供者越来越困难，除父母子女间之外,现在主要依靠骨髓库来寻找与受者有人类白细胞抗原(HLA)系统相匹配的供者，并从供者体内采集出一定数量的造血干细胞。下面河南中科的小编就给大家整理了一些在造血干细胞移植过程中的一些常见的问题。 一、造血干细胞移植需要做哪些准备? 造血干细胞移植需要做移植前的预处理。这是为了使受者能够减少本身肿瘤细胞的负荷并为接受外来的造血干细胞腾出“空间”而采取的措施，同时也是为了清除外周血中能够自身反应和对移植后的供者骨髓细胞产生排斥反应的淋巴细胞。 二、造血干细胞移植有哪些类型? 造血干细胞可来自于骨髓、外周血和脐血，因此相应地造血干细胞移植也可以分为骨髓移植、外周血干细胞移植和脐血干细胞移植。同样地按造血干细胞来源分为患者自身还是供者，并且根据供者的基因与患者是否相同可分为自体移植、同基因移植和异基因移植。其中同基因移植是指患者与供者具有完全相同的遗传基因，如同卵孪生兄弟或姐妹间的移植。对急性白血病无合适供者的,在治疗完全缓解后，采取其自身造血干细胞用于移植，称为自体移植。 三、自体造血干细胞移植是怎么回事? 自体造血干细胞移植顾名思义就是把自己的造血干细胞从体内抽出后又回输给自体，这样“一出一进”就能治自己的病吗?或许有些人会有此疑问。其实这不是简单的“一出一进”，这“出”指的是在患者缓解期骨髓或外周血中恶性细胞极少的特定时期采集的自体造血干细胞，采集后还要在体外进行净化和转基因扩增处理，使自己“不干净”的自体造血干细胞变成“干净的”，并且通过扩增使这种“干净的”造血干细胞的量增加，再回输给自体以促进造血恢复和造血重建。 四、造血干细胞移植有哪些相关并发症? 移植后，早期的并发症有： 1、感染，包括细菌、真菌、病毒感染和卡氏肺囊虫肺炎，其中又以巨细胞病毒(CMV)引起的间质性肺炎(IP)为最严重。 2、肝静脉闭塞病(VOD)，其临床症状为不明原因的体重增加、黄疸、右上腹痛、肝大和腹水。 3、移植物抗宿主病(GVHD)，即移植的排斥反应。 晚期的并发症有： 1、白内障，主要与全身照射有关，糖皮质激素和环孢菌素等药物的运用也可促其发生。 2、白质脑病，主要见于合并中枢神经系统白血病(CNSL)而又接受反复鞘内化疗和全身高剂量放、化疗者。 3、内分泌紊乱，表现为甲状腺和性腺功能降低。 4、继发肿瘤，少数患者数年后继发淋巴瘤或其他实体瘤。 五、造血干细胞移植的排斥反应指什么? 人体本身的免疫功能，都有一个“识己排他”的作用，自己体内的东西都可以和平共处，不是自己身体里面的东西都要千方百计的排斥出去。造血干细胞的移植，如果配型是全相合，则机体可以把这个“他”当作“己”而不予排斥，但供受双方即使HLA全相合，也是目前检测的6个位点相合，没有检测的其他次要位点有不合的，所以移植排斥或多或少都存在。那么就要应对这一排斥现象作出预防和处理，预防就是尽可能地寻找全相合的供者，处理就是用一些药物降低机体的“识己排他”的作用，然而一旦这种作用降低了也给病原菌的入侵
干细胞治疗工作流程范文
干细胞治疗工作流 程
干细胞治疗工作流程 脐带血临床采集流程 干细胞是一种未分化的细胞，具有自我更新、分化、发育再生各种组织器官和人体的潜在功能。 脐带血广泛的应用前景备受关注，脐带血本属于废弃物，可是医学技术的进步使得它的价值得到了空前的提升。1989年，法国的鲁克罗曼教授用HLA相合的同胞脐带血干细胞进行移植，成功地治疗了一例遗传性疾病—范可尼贫血症，之后短短的的时间内，医学界利用脐带血干细胞已成功治愈和改进了多种疾病，包括:血液系统疾病、免疫系统疾病、神经和血管系统疾病、脑部疾病、肿瘤、糖尿病等。现在在儿童的干细胞移植方面，由于能够存在1-2个HLA位点的不配型，免疫排斥反应小等原因，脐带血干细胞已成为治疗一些重大疾病的有效手段。同时，干细胞的进一步开发，还可用于抗衰老、器官修复、美容等保健领域。干细胞技术和临床应用的飞速发展，给人类的健康带来了新的希望和保障。可是作为采集脐带血最主要的工作人员，我们所需要的操作是非常简单的，可是对于术中操作之外，我们还是会遇到以下的问题。解决这些问题，我们才能放心的采集，存储，备用。可是真正合法，安全，便捷的让脐带血内的干细胞移植到有需要的患者体内，需要按以下流程操作： 脐带血采集条件： 以初产妇、年龄在45岁以内或35岁以内经产妇，身体健康者为宜。 脐带血安全流程
1、传染病检查：孕妇在产前要做好身体检查。这些检查包括:肝功能是否正常，有无梅毒螺旋体，艾滋病病毒(HIV )、乙型肝炎病毒(HBV )、丙型肝炎病毒(HCV)等病原体检测。如果其中有一样是阳性的话，就不要再进行采集了。 2、采集和储存的无菌观念：在自然分娩的情况下，一定要注意消毒。被厌氧菌和需氧菌污染，检测为阳性时都不能储存和使用。在脐血被采集后，应该尽快保存在2-8℃的恒温箱中，并远离辐射源，不要让X射线照到。这样的脐带血经科学实验证实，放置24小时或在-23℃以下48小时，其中的干细胞的活性是没有明显影响的，但最长不应该超过72小时。 采集流程 何种方法采集脐带血更好些呢？Solves[5]等证实了剖宫产情况下，以下两种采集方法体内采集法对得到的脐带血除血细胞比容及血小板外，其它各项没有明显不同。 体内采集法：产妇施行常规的子宫横切术，将胎儿取出后，立即用两把止血钳夹住脐带，将其与胎儿分离，然后用碘酒和70%酒精消毒脐带，做脐静脉穿刺后，脐带血经过重力的作用流人内含抗凝剂的无菌采集袋，采集完将其放入4℃冰箱中保存。 体外采集法：同样对产妇行子宫横切术，待胎盘自然或人工剥离后，立即将其置于采集区，胎盘取出与进行采集之间时间尽可能缩短，将胎盘放在一个中间有孔的可供脐带自然垂下的采集台上，对脐带进行严格消毒后行脐静脉穿刺，血液在重力的作用下流人采集袋中，将其放人4℃冰箱保存。 脐带血贮存
常见肠道传染病基本知识
常见肠道传染病基本知识 一、常见肠道传染病的类型 肠道传染病是由相应的肠道致病菌引起的急性肠道传染病。以发病急，传播快，波及范围广为特征。它可以引起散发、流行、暴发、甚至世界性大流行，不仅危害人民健康，而且影响人民正常的生活、生产、旅游、经贸、交通运输，甚至社会安定。肠道传染病全年均可发生，但多发生在夏秋季。 1、细菌性痢疾 细菌性痢疾是指由痢疾杆菌引起的肠道传染病，简称菌痢。 传染源是痢疾患者和带菌者。主要通过肠道传播。病原菌随病人粪便排出，污染食物、水、生活用品或手，经口使人感染。儿童发病率最高，其次为中青年。 主要临床表现：腹痛、腹泻、里急后重和粘液脓血便，可伴有发热及全身毒血症，严重者可出现感染性休克和（或）中毒性脑病。 2、伤寒和副伤寒 伤寒和副伤寒是分别由伤寒杆菌和副伤寒杆菌甲、乙、丙引起的急性肠道传染病。 传染源是伤寒或副伤寒患者和带菌者。主要通过肠道传播。伤寒杆菌和副伤寒杆菌通过病人或带菌者的粪便排出，污染水、食物，经口使人感染；还可通过日常生活接触、苍蝇与蟑螂等传递病原菌而传播。伤寒杆菌在水中不仅可以存活并保持毒力，而且还可以繁殖，因此，水源被污染后，易造成伤寒和副伤寒的流行。人群普遍易感，以儿童和青壮年发病率最高。病后免疫力持久。 主要临床表现：持续发热，相对缓脉，有腹胀、便秘、腹泻等肠道症状，还可出现精神恍惚、表情淡漠等神经系统症状，部分病人全身可出现玫瑰色皮疹。 3、急性胃肠炎 多由被细菌及其毒素或病毒污染的食物引起，致病菌主要为致病性大肠杆菌群、空肠弯曲菌、沙门氏菌等。其媒介食物主要为肉类、蛋类、水产品、凉拌菜等。患者可出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻、发热等症状 4、甲型肝炎 甲型肝炎是由甲型肝炎病毒引起的一种病毒性肝炎。 传染源是甲型肝炎患者和病毒携带者。主要传播途径以粪便排出，经口使人
细胞冻存与复苏步骤原理及注意事项
培养细胞的冷冻保存与复苏 ?概述?冻存过程 ?冷冻保存与复苏的原理?冻存结果 ?冷冻速率?讨论 ?冷冻保存温度?冻存细胞的复苏 ?复温速率?非玻璃化冻存细胞的复 苏 ?冷冻保护剂?主要材料 ?冷冻保存方法?复苏过程 ?非玻璃化冻存方法?结果 ?主要材料?讨论 ?冻存过程?玻璃化冻存细胞的复苏 ?冻存结果?主要材料 ?讨论?复苏过程 ?玻璃化冻存方法?结果 ?主要材料?讨论
? Ｐolge等人(１9４9)发现了甘油对低温下贮存的细胞具有保护作用,她们仍 然以精子进行研究发现,加入甘油能够大大提高贮存于-７９0C下精子的存活率。接下来的重大进展就是Luyｅｔ(１9５1)与Ｌoveｌock(1953)等多位学者发现了电解质浓度对贮存细胞的损伤作用。她们的结论就是,电解质浓度增大就是造成贮存细胞损伤的主要原因。冷冻理论后来得到Ｍerryman(１９5６)、Reｙ(195７)以及Ｓmｉtｈ(1９61)等学者的继续与发展。 １94９年至1９６0年这一段时间可以称为冷冻保存的“甘油时期”,这一时期对生物材料的冷冻保存一般都就是以甘油作为保护剂。Lovｅｌock(１95９)等人发现了一种新的化学保护剂,这就就是人们熟悉的二甲基亚砜(ＤMSＯ)。而且,用于冷冻保存的仪器也有明显的发展。目前,无论就是冷冻保存理论、各种保护剂、冷冻用品与设备以及各种生物材料的保存与复苏技术都已十分成熟与完备。 返回页首 ?冷冻保存与复苏原理 在低于-70０C的超低温条件下,有机体细胞内部的生化反应极其缓慢,甚至终止。水在低于零度的条件下会结冰。如果将细胞悬浮在纯水中,随着温度的降低,细胞内外的水分都会结冰,所形成的冰晶会造成细胞膜与细胞器的破坏而引起细胞死亡。这种因细胞内部结冰而导致的细胞损伤称为细胞内冰晶的损伤。如果将细胞悬浮在溶液中,随着温度的降低,细胞外部的水分会首先结冰,从而使得未结 冰的溶液中电解质浓度升高。如果将细胞暴露在这样高溶质的溶液中且时间过长,
肠道益生菌常见种类
肠道益生菌常见种类 Document serial number【NL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108】
益生菌种类：到目前为止，已有芽孢杆菌属、乳杆菌属、弧菌属、假单孢菌属的众多种类及硝化细菌、光合细菌等应用于水产养殖业。 根据中国农业部2013年发布的《饲料添加剂品种目录（2013）（征求意见稿）》，可用于养殖动物的饲料级微生物添加剂菌种有：地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、两歧双歧杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、乳酸肠球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、乳酸乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、产朊假丝酵母、酿酒酵母、沼泽红假单胞 菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、嗜热链球菌、罗伊氏乳杆菌、动物双歧杆菌、黑曲霉、米曲霉、迟缓芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、纤维二糖乳杆菌、发酵乳杆菌、保加利亚乳杆菌等。 1.乳酸菌 乳酸菌是最早用作微生物饲料添加剂的益生菌，种类繁多。从微生物特性来说，乳酸菌为革兰阳性、分解糖类产生乳酸、无芽胞; 通常在厌氧或者兼性厌氧条件下生长; 耐酸，在pH 3． 0 ～ 4． 5 下仍能够生存; 不耐高温，经80 ℃处理5 min，损失达70% ～ 80%; 包括乳杆菌属、链球菌属、明串珠菌属、片球菌属［15］。作为微生物饲料添加剂，乳酸菌在动物体内发挥的作用主要有: ①维持肠道微生态平衡，阻止和抑制致病菌，降解消化道内的有害物质; ②产生超氧化物歧化酶，增强动物的非特异性免疫; ③产生淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶等消化酶; ④产生细菌素，抑制致病菌的生长。 2.芽胞杆菌 芽胞杆菌是应用很广泛的一类微生物饲料添加剂，如枯草芽胞杆菌和地衣芽胞杆菌，属于需氧菌，以内孢子的形式零星存在于动物肠道的微生物群落中［1］。与乳酸菌相比，由于芽胞杆菌能够耐受高温、高压，经过饲料制粒等过程依然可保持良好的活性，更加适宜在饲料加工过程中添加应用，在饲料中比较稳定。芽胞杆菌在一定条件下产生芽胞，作为微生物饲料添加剂，具有以下优点: ①抗性强，耐高温、酸碱、高压，对颗粒饲料加工具有良好的耐受力; ②贮藏过程中以孢子形式存在，不消耗饲料的营养成分; ③在肠道上部迅速 复活，复活率接近100%; ④可产生多种氨基酸及淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶等多种消化酶; ⑤消耗肠道内的氧，维持厌氧环境，抑制致病菌生长。2013饲料添加剂目录中允许使用的芽胞杆菌有枯草芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌、短小芽胞杆菌、迟缓芽胞杆菌、凝结芽胞杆菌、侧孢短芽胞杆菌等。 3.酵母菌 饲料添加剂目录( 2013) 中，作为微生物饲料添加剂使用的酵母主要有产朊假丝酵母、酿酒酵母等。酵母在动物肠道的作用包括: ①改善肠道微生态环境; ②提高动物体免疫功能，增强抗病力; ③可直接和肠道病原体结合，中和肠道中毒素; ④促进动物生长。 4.光合细菌 光合细菌作为微生物饲料添加剂主要应用于水产方面。该类细菌是一类能够进行光合作用的微生物，在厌氧条件下利用光能同化二氧化碳。光合细菌作为微生物饲料添加剂，在水产养殖方面发挥的作用主要有: ①净化水质条件，提高水产动物生产性能; ②菌体蛋白中含有多种必需氨基酸，为水产动物提供丰富的营养物质; ③产生生物活性物质，增强动物的免疫力。