人胚胎干细胞对肝癌HepG2细胞体外抑制作用的研究
田基黄不同提取部位对人肝癌细胞HepG2生长的抑制作用
学杂志 ，2007，42（5）：341-344. ［5］ 林久茂，陈小峰，林明和. 田基黄的现代 日 期 ：2010-05-26 基 金 项 目 ：福 建 省 高 校 中 西 医 结 合 基 础 重 点 实 验 室 开 放 课 题 基 金 资 助 （ZXY2008003），陈 可 冀 中 西 医 结 合 发 展 基 金 资 助 （CKJ2008007），福
建 省 教 育 厅 科 技 项 目 A 类 资 助 （JA10169），福 建 省 卫 生 厅 青 年 科 研 课 题 资 助 （2010-1-39） 作 者 简 介 ：庄 群 川 （1981— ），男 ，理 学 硕 士 ，主 要 从 事 细 胞 与 分 子 生 物 学 研 究 。 通 讯 作 者 ：彭 军 （1969— ），男 ，理 学 博 士 ，硕 士 生 导 师 。 E-mail：pjunlab@
h，然后吸弃各孔中的液体，各加入 100 μL DMSO， 振荡混匀，室温放置 10 min，使结晶充分溶解并混 匀 ， 于 全 自 动 酶 标 仪 570 nm 测 定 各 组 吸 光 度 值 （即 OD 值），并按下列 公式计算，细 胞存活率＝实 验组吸光度值 ／ 对照组平均吸光度值×100%。 2结果 2.1 田 基 黄 不 同 提 取 部 位 对 HepG2 细 胞 形 态 的 影响 倒 置 显 微 镜 下 观 察 ，对 照 组 HepG2 细 胞 胞 质均匀，核仁清楚，伸展性好，生长良好，有多层生 长现象，形成贴壁的梭形细胞，见图 1-A。 药物干 预后的细胞折光性差，生长缓慢，部分或全部细胞 变圆，贴壁疏松。 比如，细胞在 0.5 mg ／ mL 的田基 黄 提 取 部 位 I、II 干 预 24 h 后 部 分 或 全 部 细 胞 变 圆，贴壁疏松甚至成片悬浮，见图 1-B、图 1-C。 当 用 2.5 mg ／ mL 的 提 取 部 位 III、IV 干 预 细 胞 24 h 后，细胞呈现不同程度的生长受抑制现象，细胞形 态出现变圆，紧缩，稀松或呈单层细胞，见图 1-D、 图 1-E。 上述结果显示田基黄不同提取物对 HepG2 细胞的生长有明显的抑制作用。
HMGB1对人肝癌细胞株HepG2体外增殖的影响
贺 新 春 ，范 学 工 ，
（ ．中南 大 学 湘 雅 医院 传 染 科 ，长 沙 ４ ０ ０ １ １ ０ ８；２ 纽 约 大 学 北 岸 医 学 院 急 诊科 ，纽 约 １ ０ ０） ． ３ １
［ 要 ］ 目 的 ： 察 Ｈ Ｂ１对人 肝 癌 细 胞 株 Ｈ ｐ ２增 殖 的 影 响 并初 步探 讨其 可 能 机 制 。方 法 ： 摘 观 ＭＧ ｅＧ 采
Ｄ ： ０． ６ ｊ ｓｎ． ６ ２— ３ ＯＩ ｌ ３９ ９／ ．ｉ ｓ １ ７ ７ ４７． ０１ ０ Ｏ ２ ０． ５． ０８
Ｅｆｅ ｔ ｏ Ｍ Ｇ Ｂ ｎ ｈｕ ａ ｈ ｐ ｔ ｍ ａ ｃ ｌ ｌ — ｐ ２ ｐ ｏ ｉｅ ａ ｉｎ ｆ ｃ ｆ Ｈ １ ｏ ｍ ｎ ｅ ａ ｏ ｅｌ ｉ ｎｅ Ｈｅ Ｇ ｒ ｌ ｒ ｔｏ ｆ
ｉ ｃａｉ ｒ ｇｍｅｈｎｓ Ｍｅｈ ｄ Ｔ ｅ ｃ ｌ ｒｄ ＨｅＧ２ ｃｌ ｅｅ ｔ ａ ｄ ｗｔ ｅｏ ｂｎ ｎ ＨＭ Ｂ１ （ ｎ ｍ． ｔｏ ｓ ｈ ｕｔ ｅ ｐ ｅ ｓｗ ｒ ｒ ｔ ｉ ｒｃｍ ｉａ ｔ ｕ ｌ ｅｅ ｈ Ｇ ０，
１ ０，５ ０，ａ ｄ１ ０ ｎ ／ Ｌ， ｅｐ ｃｉ ｌ ）ｆｒ ４ ｈ ｅ ｒ ｉ ｒｔ ｎｗ ｓｏ ｓｒｅ ｙＭ Ｔ ｎｌｓ ． ｎ ｇ ｍ ０ ｒｓ ｅｔ ｅ ｖ ｙ ｏ ．Ｃ ｌ ｐｏ ｆ ａ ｏ ａ ｂｅｖｄ ｂ １ｒａ ａ ｉ ２ ｌ ｌｅ ｉ ｙｓ
灵芝多糖对人肝癌细胞HepG2增殖及体外迁移的影响
灵芝多糖对人肝癌细胞HepG2增殖及体外迁移的影响陈源红;邹佳峻;李松波;黄干荣;郑紫菱;董宇曦;杨梦夕;罗艳红【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2018(039)011【摘要】目的体外检测灵芝多糖对人肝癌细胞株HepG2迁移的影响,体内检测灵芝多糖对荷瘤小鼠的增殖抑制作用.方法 Transwell法检测灵芝多糖组(加灵芝多糖960 μg/mL)与阴性对照组(加等体积培养液)的HepG2细胞迁移数,ELISA法分别检测两组的血管内皮生长因子(VEGF)蛋白含量,取细胞密度为1×107个/mL的对数生长期HepG2细胞,于BALB/c裸鼠左侧腋下行无菌皮下接种,建立肝癌移植瘤BALB/c裸鼠模型,并用灵芝多糖作用于人皮下HepG2移植瘤模型.结果灵芝多糖组的HepG2细胞迁移数较阴性对照组明显减弱,差异有统计学意义(P＜0.05),灵芝多糖治疗组12、24 h的侵袭抑制率分别为31.7％、64.0％,与阴性对照组比较有统计学意义(P＜0.05),并具有时间依赖性;灵芝多糖组与阴性对照组相比,VEGF蛋白含量显著下降,具有时间依赖性;灵芝多糖可体内抑制肝癌皮下移植瘤,l周给药、2周给药的抑瘤率分别为18.98％、37.33％,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),并具有时间依赖性.结论灵芝多糖对HepG2细胞的增殖、迁移有抑制作用,其迁移抑制通过下调VEGF蛋白含量而实现.【总页数】4页(P1625-1628)【作者】陈源红;邹佳峻;李松波;黄干荣;郑紫菱;董宇曦;杨梦夕;罗艳红【作者单位】右江民族医学院病原生物学与免疫学教研室,广西百色533000;右江民族医学院检验学院,广西百色533000;右江民族医学院病原生物学与免疫学教研室,广西百色533000;右江民族医学院病原生物学与免疫学教研室,广西百色533000;右江民族医学院检验学院,广西百色533000;右江民族医学院检验学院,广西百色533000;右江民族医学院口腔学院,广西百色533000;右江民族医学院检验学院,广西百色533000【正文语种】中文【相关文献】1.DC-CIK细胞对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移的影响 [J], 项颖;李启英;王莉;黄德鸿;唐显军;张曼;杨威;吴仙宇;郑晓东2.青蒿琥酯对人肝癌细胞HepG2增殖迁移及细胞凋亡的影响 [J], 贺莉;师如意;胡晓玲;杨斌;魏志刚;秦楠;董静逊3.聚桂醇对人肝癌HepG2细胞增殖及迁移影响的体外研究 [J], 胡中倩;张炽敏;李嘉;李岭;王玲;沈会明;高启4.甲基纳曲酮对肝癌HepG2细胞体内外增殖及体外迁移能力的影响 [J], 伍天影;刘震;李志强;陈玲珊;陈冠宇;田昊;阮林5.迷迭香酸联合槲皮素对人肝癌HepG2细胞增殖和迁移的影响 [J], 刘庆东;白跳艳;王晔飞;姚杨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
β-榄香烯对HepG2和HT-29细胞体外抗癌作用的实验研究
Ｆ一 ９ Ｉ ２ 结肠癌细胞 ，用生长 曲线和Ｍ Ｔ Ｔ 丁 法观察 Ｂ 榄香烯 对两种细胞生长 的影响。结果 Ｂ 榄 香烯组在培养 的第６ 、第７ 、第８能显著抑削Ｈ 一 ９ 一 一 ｄ ｄ ｄ Ｔ ２￣ ： １ Ｗ 胞增殖 ； Ｄ 榄香烯在培养 的第６ 能显著抑制Ｈｐ２ 一 ｄ ｅ 细胞增殖 ；在第２、在第３ 、在第４ ，与对照组相 比 ，§一 Ｇ ｄ ｄ ｄ 榄香烯对Ｈ 一 ９ ｅ ２ Ｔ ２ 和Ｈｐ 细胞增殖的抑 Ｇ 制作用显著（＜ ．５。结论 Ｂ 榄 香烯能明显抑制体外培养 的Ｈ 一 ９ ｏ ２ Ｐ ｏｏ） 一 Ｔ ２ 和Ｈｐ ￣胞生长 。 Ｑ
对增殖率。
药理学及临床研究证明 Ｄ 榄香烯是一种疗 效确切的非细胞毒性 一
抗 肿瘤药物， 具有 良好 的抗癌活性 ， 且其抗癌作用还有一定的特 异性 。目前 一 榄香 烯作为一种新型 的抗癌 药物正发挥 着越来 越重要的作用， 其临床应用越来越受 到重 视， 主要用于治疗颅 内
１４ 统计学方法 ． Ｐ ．５ ＜００ 有统计学意义。 ２ 结果
ｉ ｅ ｓｘ ｙ ａ ｓｇ ｉ ｃ ｎ ｌ ｎ ｂ ｔ ｅＨ ｅ ｎ ｔ ｉｔ ｄａ ｃ ｎ ｉ ｆ ａ ｔｙＩ ｈｉｉ ｐＧ２ｃ ｌｓｐｒ ｉｅ ａｉｎ；ｉ ｅ ｓ ｃ ｄ ｄ ｙ ｈｉｄａ ｄ ｆ ｕ ｔ ｙ ｏｍｐ ｒｄ ｗｉｈ ｔｅ ｃ ｔｏ ｒ ｕ ｔ ｅ ｈ ｈ ｎ ｉ ｈ ｔ ｅｌ ｏｌ ｒｔｏ ｆ ｎ ｔ ｅ ｏｎ ａ ，ｔ ｒ ｎ ｒｈ ｄａ ，ｃ ｈ ｏ ａ ｅ ｔ ｈ ｏｎｒ ｌｇ ｏ ｐ， ｈ
大蒜素对人肝癌HepG2细胞增殖抑制作用的研究
ＤＮ ｃ ｌ ｃ ｃｅ ａ ｄ ａ ｏ ｔｓｓｉ ｄ ｃ ｏ ｅ ｅ ｍｅ ｓ ｒ ｄ ｂ ｏ ￣ｏ ｔｙ Ｒｅ ｕｌ ｓ Ａｌ ｃｎ ｈ ｄ ｉ ｈ ｂ ｔ ｅ ｅ ｅ ｔ ｎ ｇ ｏ ｈ ｏ ｐ ｅ ｌ ｉ Ａ ｅｌ ｙ ｌ ｎ ｐ ｐ ｏ ｉ ｎ ｕ ｔ ｎ ｗ ｒ ａ ｕ ｅ ｙ ｆ ｗ ｃ ｍｅｒ ． ｓ ｔ ｌ ｉ ａ ｎ ｉｉ ｖ ｆ ｃｓ ｏ ｒ ｗｔ ｆＨｅ Ｇ２ ｃ ｌ ｎ ａ ｉ ｌ ｉ ｉ ｓ
２１ ０ ０年 ６月第 ４ ８卷第 １ ６期
・
基础 研 究 ・
大 对人 蒜素 肝癌Ｈ ｐ ２ ｅＧ 细胞增 殖抑制作用的 研究
李 鹏 辉
（ 齐齐 哈尔 医学院 ， 黑龙江齐齐哈尔 １ １０ ） ６０ ６
【 要】目的 研究大蒜素对人肝癌 Ｈ ｐ ２细胞增 殖抑制 、 摘 ｅＧ 细胞凋亡及细胞 周期的影响 。方法 用不同浓度的大蒜素作用于 体外培养 的 Ｈ ｐ ２细胞 ，采用 Ｍ ｒ 。Ｇ Ｔ 法检测大蒜素对 Ｈ ｐ ２细胞增殖抑制能力 ，荧光显微镜观察 Ｈ ｐ ２细胞 的形态学变 ｅＧ ｅＧ 化， 流式细胞术检测 大蒜素对 Ｈ ｐ ２细胞周期 和凋亡率的影响。结果 大蒜素 可抑制人肝癌 Ｈ ｐ ２细胞增殖 ， ｅＧ ｅＧ 且具有明显 剂量和时间依赖性 ，４ 、８ ２ｈ ４ ｈ和 ７ ｈ大蒜 素抑制 Ｈ ｐ ２细胞 的 Ｉ５ ２ ｅＧ Ｃ ０分别 为（ ８ ６ ． ） 咖 Ｌ （ １ ９±１ １ ￣ ４ ． ±１ ６ ｉ ２ ６ ｘ 、３ ． ８ ． ） ｍＬ和 ５ （ ３ ９ ． ） ｇ 。３ ｇ ２ ． ±１ ２ ／ ７ ３ ｍＬ ２ ／ ｍＬ大蒜 素作用 Ｈ ｐ ２细胞 ４ ｈ 可诱导其产生明显 的细胞凋亡特征 。流式细胞术检测表明大 ｅＧ ８， 蒜素作用 ＨｅＧ ｐ ２细胞后 ， 可将细胞阻滞在 Ｇ ／ 期 。结论 大蒜素对人肝癌 Ｈ ｐ ２细胞增殖具有抑制作用 ， ２ Ｍ ｅＧ 可能与诱 导细
“消癌平”对人肝癌细胞治疗作用的实验研究
“消癌平”对人肝癌细胞治疗作用的实验研究
孙珏;沈建华;朱美华;范忠泽
【期刊名称】《上海中医药杂志》
【年(卷),期】2000(34)7
【摘要】为探讨“消癌平”(乌骨藤水溶针剂 )对人体肝癌细胞的影响 ,采用MTT 比色法和放射免疫法 ,分别观察它对体外培养的人肝癌BeI 740 4细胞、HepG2 细胞的作用 ,以及对人肝癌细胞甲胎蛋白 (AFP)分泌的影响。
结果 :消癌平对上述肝癌细胞有显著的抑制作用 ,能显著降低AFP的分泌。
提示消癌平在抑制肝癌细胞增殖的同时 ,能使AFP分泌量降低 ,可能使肝癌细胞向正常方向分化。
【总页数】3页(P12-14)
【关键词】肝肿瘤;中医药疗法;消癌平;实验研究
【作者】孙珏;沈建华;朱美华;范忠泽
【作者单位】上海市普陀区中心医院
【正文语种】中文
【中图分类】R273.570.5;R285.5
【相关文献】
1.消癌平注射液联合奥曲肽抑制肝癌细胞生长作用及对PAK1表达影响的实验研究[J], 赵和平;梁利群;解燕茹
2.消癌平注射液对人肝癌HepG2和MHCC97H细胞侵袭和转移抑制作用及分子机制研究 [J], 杨姣;张湘奇;陈君君;肖霄;祁美娟;韩永龙
3.消癌平对人膀胱癌细胞体外生长作用的实验研究 [J], 葛蕙心;畅继武
4.消癌平与奥沙利铂及恩度联合对人肝癌细胞株SMMC-7721的体外增殖抑制实验 [J], 马继恒;华海清;戴婷婷;秦叔逵;杨爱珍
5.消癌平对人胃癌细胞治疗作用的实验研究 [J], 孙珏;沈建华;朱美华;李朝衡;范忠泽
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
健脾理气方药抑制HepG2人肝癌细胞增殖及诱导其凋亡的形态学研究
Ｘ ＮＧ Ｘ ａ ＝ ｎ ＨＡＮ ｉｈ ｎ Ｃ Ｙ — ） ｌ ｉｏ ｒ ｇ ｚ ｉ Ｇ Ｌ— ｏ（９ ４ ） 女 ， 邢 １７ 一 ， 沈阳人 ， 辽宁 中医药大学博 士研 究生。 辽
宁 省 肿 瘤 医 院肿 瘤 内科 副 主 任 医 师 。 通 讯 作 者 ： 玉 文 ， ， 宁 中 医药 大 学 ， 士 生 导 师 。 蔡 男 辽 博
ｏ ｖ ｏ ｓ ｅ ｃ ｐ ｎ ｌ ｗ ｏ ｃ ｎ ｒ ｔｏ ． ｅ ｉ ｈ ｂ ｔ ｎ ｒ ｔ ｎ ｂ ｉ ｕ ｘ ｅ ｔｉ ｏ ｃ ｎ ｅ ｔ ｉ ｎ Ｔｈ ｎ ｉ ｉ ｏ ａ ｉ ｉ ａ ｉ ｏ
（ ｉ ｎｎ ｉｅｓｔ ｏ Ｔ ａ ｉｏ ａ Ｃ ｉｅｅＭｅ ｉｉｅ Ｓ ｅ ｙｎ １ ０ ３ ， ｈｎ ） Ｌａ ｉｇＵｎｖｒｉ ｆ ｒｄｔ ｎ ｌ ｈｎ ｓ ｄｃｎ ，ｈ ｎ ａ ｇ １ ０ ２ Ｃ ｉａ ｏ ｙ ｉ
［ ｓｒｃ］０ｂｅ ｔ ｅＴ ｅｅ ｒｈ ｔｅ ｍｅｈ ｎｓ ｏ ｒｄｔ ｎ ｌｃ ｉｅｅ ｍ ｄｃｎ ｉｎ ｉＬｑ ｈ ｒｓ ｉ ｒａ ｎ ｒ ｒ Ａｂ ｔａ ｔ ｊｃｉ ：ｏ ｒｓａｃ ｈ ｃ ａ ｉ ｖ ｍ ｆｔ ｉｏ ａ ｈｎ ｓ ｅ ｉｉｅＪａ ｐ ｉｉ ｅｂ ｎ ｔ ｔ ｇ ｐｉ ｙ ａ ｉ ｅｉ ｍａ
【 基金项 目】 课题 受辽 宁省 教育厅 高等 学校科 学研 究项 目资助 ， 目 本 项
编 号 ：０ ４ ０ １ ２ ０ Ｃ ８
ｒｓｔｎ ｅｉｄ ｃｄ ｂ ｉｈ ｆｔｆｅｉｇ ｉ ａｓＪ．ｃｅｃ ，９ ７，２ ７ ｅｉ ａｃ ｎ ｕ ｅ ｙｈｇ －ａ ｅｄｎ ｎｒｔ［ Ｓｉｎ ｅ １８ ｓ ］ ３：
NU7026对人肝癌细胞HepG2生物学行为的影响
[收稿日期]㊀2020-11-27[修回日期]㊀2021-02-11[基金项目]㊀湖南省教育厅科学研究重点项目(19A429)[作者简介]㊀李娟,硕士研究生,研究方向为放射医学,E-mail 为lijuan9508@㊂通信作者黄波,博士,硕士研究生导师,副教授,研究方向为放射医学,E-mail 为huangbo0930@㊂㊃基础医学㊃DOI :10.15972/ki.43-1509/r.2021.03.011NU7026对人肝癌细胞HepG2生物学行为的影响李娟,颜宇龙,万丹婷,李蕊,周美艳,周洁,黄波(南华大学公共卫生学院,湖南省衡阳市421001)[关键词]㊀NU7026;㊀肝癌;㊀HepG2细胞;㊀增殖;㊀迁移[摘㊀要]㊀目的㊀探讨NU7026对HepG2细胞的影响,为治疗肝癌提供理论基础㊂方法㊀用NU7026作用HepG2细胞,将实验分为空白组㊁对照组和NU7026组㊂CCK8实验检测NU7026对肝癌HepG2细胞存活率的影响㊂生长曲线实验和克隆实验检测HepG2细胞增殖能力,划痕实验检测HepG2细胞迁移能力,流式细胞术检测HepG2细胞凋亡和周期㊂结果㊀与0μmol /L 组和DMSO 组比较,15μmol /L 和20μmol /L NU7026作用于HepG2细胞,细胞存活率明显下降(P <0.05);与DMSO 组相比,10μmol /L NU7026作用于HepG2细胞24㊁48㊁72h 后,细胞存活率下降(P <0.05);10μmol /L NU7026作用HepG2细胞,细胞增殖能力和迁移能力下降(P <0.05),细胞凋亡率增加(P <0.05),细胞周期无明显改变㊂结论㊀NU7026能抑制HepG2细胞增殖能力和迁移能力可能与促进细胞凋亡有关㊂[中图分类号]㊀R735.7[文献标识码]㊀AEffect of NU 7026on the biological behavior of human hepatocarcinoma cell HepG 2LI Juan,YAN Yulong,WAN Danting,LI Rui,ZHOU Meiyan,ZHOU Jie,HUANG Bo (School of Public Health ,University of South China ,Hengyang ,Hunan 421001,China )[KEY WORDS ]㊀NU7026;㊀liver cancer;㊀HepG2cell;㊀proliferation;㊀migration [ABSTRACT ]㊀㊀Aim ㊀To explore the effect of NU7026on HepG2cells,and provide a theoretical basis for the treat-ment of liver cancer.㊀㊀Methods ㊀HepG2cells were treated with NU7026,and the experiment was divided into the blank group,the control group and the NU7026group.㊀The CCK8assay was used to detect the effect of NU7026on the survival rate of HepG2cells.㊀The growth curve assay and clone formation assay were used to detect the proliferation ability of HepG2cells,and the scratch assay was used to detect the migration ability of HepG2cells.㊀Finally the cellular apopto-sis and cell cycle were tested by flow cytometry.㊀㊀Results ㊀Compared with the 0μmol /L group and the DMSO group,after 15μmol /L and 20μmol /L NU7026treated on HepG2cells,the cell survival rate was significantly decreased (P <0.05);Compared with the DMSO group,after treating HepG2cells with 10μmol /L NU7026for 24,48,and 72hours,the cell survival rate was significantly decreased (P <0.05);After 10μmol /L NU7026treated HepG2cells,the cell prolif-eration and migration ability decreased (P <0.05),the apoptosis rate was significantly increased (P <0.05),but the cell cycle did not change significantly.㊀㊀Conclusion ㊀NU7026can inhibit the proliferation and migration of HepG2cells,which may be related to the promotion of cell apoptosis.㊀㊀肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,2015年中国肝癌发病人数为37.0万人,发病率为26.92/10万,死亡人数32.6万,死亡率23.72/10万[1]㊂原发性肝癌发病隐匿,病程短,发展迅速,当前主要治疗手段有手术切除㊁放射治疗㊁药物治疗㊁肝移植等㊂但肝癌易复发㊁易转移,预后差,且对放化疗具有抵抗性,寻求治疗肝癌的药物具有重要意义㊂原发性肝癌中最常见的肝癌组织类型是肝细胞癌[2]㊂本文探讨了NU7026抑制DNA-PKcs 对肝癌细胞的增殖㊁迁移能力的影响,为治疗肝癌提供理论依据㊂1㊀材料和方法1.1㊀材料㊀㊀肝癌细胞(HepG2)由军事科学医学院周平坤研究员惠赠㊂HepG2细胞在含10%胎牛血清(杭州四季青公司)的DMEM培养基(Gibco),37ħ㊁5%CO2培养箱中培养㊂NU7026(LY293646,C17H15NO3)购于MCE公司,纯度为99.95%㊂细胞凋亡试剂盒㊁细胞周期试剂盒购于南京凯基公司㊂1.2㊀CCK8实验取处于指数生长期的HepG2细胞,用含10%胎牛血清的培养液配成单个细胞悬液接种于96孔板中,加入适量的细胞悬液(约7000~8000个/孔),待细胞贴壁后,分别用5㊁10㊁15㊁20μmol/L NU7026进行处理,设3个复孔,继续培养24㊁48㊁72h,每孔加入10μL CCK8溶液,孵育1h,用酶联免疫检测仪测定450nm波长处的光密度值(OD),计算细胞存活率㊂细胞存活率(%)=(实验组OD值-空白孔OD值)/(空白组OD值-空白孔OD值)ˑ100%㊂1.3㊀生长曲线实验按2ˑ104个/孔细胞接种于6孔细胞培养板, 10μmol/L NU7026处理细胞每组设3个复孔,每隔24h计数1次,连续计数3天,以时间为横坐标,细胞数为纵坐标绘制生长曲线图㊂1.4㊀克隆实验将细胞接种于6cm细胞培养皿,10μmol/L NU7026处理细胞,10天后弃掉培养基,PBS洗2遍,加入固定液3mL,固定30min;再加入3mL Gi-emsa染色30min,最后用流水缓慢冲洗,晾干㊂计数含50个细胞以上的克隆数,克隆形成率(%)=克隆数/[实验组接种细胞数ˑ(对照组克隆数/对照组接种细胞数)]ˑ100%㊂1.5㊀划痕实验将细胞接种在6孔细胞培养板中,细胞贴壁后用200μL无菌的枪头尖端在每孔相同位置做线性划痕,再用PBS轻轻冲洗2~3遍,10μmol/L NU7026处理细胞,分别在0㊁24㊁48㊁72h后于显微镜下拍照观察划痕,采用Image J软件观察计算细胞划痕面积,面积愈合率(%)=(0h划痕面积-培养后划痕面积)/0h划痕面积ˑ100%㊂1.6㊀细胞凋亡与细胞周期试验将细胞接种于6孔细胞培养板,10μmol/L NU7026处理细胞,按照说明书步骤进行,1h内用流式细胞仪检测细胞凋亡情况㊂取适量HepG2细胞接种于6cm细胞培养皿中,用10μmol/LNU7026处理0㊁4㊁8㊁12㊁24h后收样㊂按照说明书步骤进行,用流式细胞仪检测细胞周期㊂1.7㊀统计学分析采用SPSS18.0进行统计分析,数据以xʃs表示,多组间用单因素方差分析,P<0.05为差异有显著性㊂2㊀结㊀果2.1㊀不同浓度NU7026对HepG2细胞活性的影响随着NU7026浓度的增加,HepG2细胞存活率下降㊂与0μmol/L组和DMSO组比较,15μmol/L 和20μmol/L NU7026作用HepG2细胞后,细胞存活率下降(P<0.05;图1);10μmol/L NU7026作用HepG2细胞24㊁48㊁72h后,与DMSO组细胞存活率比较,差异有显著性(P<0.05),与0μmol/L 组细胞存活率比较,差异无显著性(P>0.05);查阅文献[3]及根据前期研究[4],本研究中10μmol/L NU7026对HepG2细胞没有明显的毒性作用,故选择10μmol/L NU7026进行后续实验㊂将实验分为空白组㊁对照组(0.1%DMSO)和NU7026组(10μmol/L NU7026)㊂图1㊀CCK8检测不同浓度NU7026对HepG2细胞活性的影响a为P<0.05,与0μmol/L组比较;b为P<0.05,与DMSO组比较㊂2.2㊀各组HepG2细胞增殖能力比较NU7026作用HepG2细胞72h后,NU7026组细胞数明显低于对照组(P<0.05;图2);NU7026组细胞克隆数少于对照组,克隆形成率明显降低(P< 0.05;图2)㊂图2㊀各组HepG2细胞增殖能力的比较A 为培养10天后克隆实验细胞分布图(Giemsa 染色)和柱状图;B 为细胞生长曲线图㊂a 为P <0.05,与空白组比较;b 为P <0.05,与对照组比较㊂2.3㊀各组HepG2细胞迁移能力NU7026作用细胞24h 后,与对照组相比,面积愈合率无明显差异(P >0.05);NU7026作用细胞48h后,划痕面积比对照组稍大,面积愈合率无明显差异(P >0.05);但在作用72h 后,NU7026组划痕面积大于对照组,面积愈合率明显降低(P <0.05;图3)㊂图3㊀各组HepG2细胞迁移能力比较A 为细胞划痕实验迁移(200ˑ);B 为细胞划痕愈合率折线图㊂a 为P <0.05,与空白组比较;b 为P <0.05,与对照组比较㊂2.4㊀各组HepG2细胞的凋亡与周期NU7026作用HepG2细胞24㊁48㊁72h 后,细胞凋亡率增加(P <0.05;图4)㊂随着NU7026作用时间增加,HepG2细胞凋亡率逐渐增加㊂NU7026作用HepG2细胞12h 后,出现了轻微的G2/M 阻滞现象,但细胞周期未出现明显改变(图5)㊂3㊀讨㊀论肝癌在全球恶性肿瘤发病谱中排第六,其中中国肝癌新发病例数将近占全球发病的一半[5]㊂DNA-PKcs 是一种相对分子质量约为470kDa 的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,与共济失调毛细血管扩张症基因(Ataxia telangiectasia mutated,ATM)㊁RAD3相关蛋白(Ataxia telangiectasiaand Rad3-related protein,ATR)同属于磷酸酰肌醇3-激酶相关蛋白激酶(PIKK)家族㊂DNA-PKcs 和ATM 在DNA 双链断裂修复中起着重要的作用,ATR 主要参与DNA 单链断裂修复㊂DNA-PKcs 不仅参与淋巴细胞的V(D)J 重组和类别转换重组,保护染色体末端,而且DNA-PKcs 响应胰岛素信号传导,促进肝脏中碳水化合物转化为脂肪酸[6-7]㊂DNA-PKcs 抑制剂有渥曼青霉素㊁NU7441㊁NU7026㊁IC 化合物等㊂NU7026对DNA-PKcs 抑制性特异度高,能有效抑制DNA-PKcs Ser2056磷酸化[4]㊂本研究通过生长曲线实验和克隆实验检测图4㊀各组HepG2细胞凋亡比较A 为细胞凋亡图;B 为细胞凋亡率柱状图㊂a 为P <0.05,与空白组比较;b 为P <0.05,与对照组比较㊂图5㊀各组HepG2细胞周期的比较A 为流式细胞术检测细胞周期图;B 为细胞周期占比图㊂细胞增殖能力,表明NU7026抑制DNA-PKcs 将降低HepG2细胞增殖能力,与其他研究结果相一致㊂用siRNA 介导肝癌HepG2细胞中DNA-PKcs 沉默,细胞增殖速度减慢,且高表达DNA-PKcs 可通过AKT /GSK3/c-myc 信号通路调节肝癌细胞增殖[8]㊂同样用siDNA-PKcs 转染肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu 后,细胞增殖能力降低,可能抑制DNA-PKcs 后胸腺嘧啶合成酶(TS)表达下降,从而抑制DNA 合成,细胞增殖生长变慢[9]㊂但也有研究表明NU7441抑制DNA-PKcs 促进肺成纤维细胞中SSEA4+间充质祖细胞增殖[10]㊂沉默DNA-PKcs 不仅抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖,而且也抑制细胞迁移和侵袭[11]㊂本文结果显示抑制DNA-PKcs 能降低HepG2细胞迁移能力㊂有研究表明将沉默DNA-PKcs 的HepG2细胞移植到裸鼠中,其肿瘤生成率明显降低[8]㊂DNA-PKcs通过RhoA/ROCk2通路调节基质金属蛋白酶-2和磷酸化肌球蛋白轻链2表达,促进体内外骨肉瘤细胞迁移和侵袭[12]㊂也有研究发现ITGA5和SDC4基因与DNA-PKcs可能对细胞迁移侵袭运动具有互相调节作用[13]㊂本研究用NU7026抑制DNA-PKcs24㊁48㊁72h, HepG2细胞凋亡增加,与其他研究结果一致㊂有研究表明沉默DNA-PKcs后,通过线粒体凋亡途径促进肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu凋亡[14]㊂也有研究表明沉默DNA-PKcs后,有丝分裂细胞纺锤体异常,胞质分裂失败,有丝分裂延长等,最终导致细胞有丝分裂灾变而凋亡[15]㊂用TDR将HeLa细胞同步化至G1期后释放,沉默DNA-PKcs的HeLa细胞在6h出现明显的G2/M期阻滞,表明抑制DNA-PKcs会引起G2/M期阻滞[16]㊂用nocodazole同步化细胞后释放,抑制HeLa细胞DNA-PKcs,H3-pS10阳性细胞增加,表明细胞阻滞在有丝分裂期[17]㊂也有研究表明沉默MG-63细胞DNA-PKcs48h,细胞周期无明显改变[11]㊂在本研究中NU7026抑制DNA-PKcs对HepG2细胞周期无明显改变,可能是因为细胞DNA 损伤不严重,DNA修复时间较短,细胞能较快地通过周期检查点,故未出现明显G2/M期阻滞㊂综上所述,NU7026能抑制HepG2细胞增殖能力和迁移能力,其机制可能与促进细胞凋亡有关㊂[参考文献][1]郑荣寿,孙可欣,张思维,等.2015年中国恶性肿瘤流行情况分析[J].中华肿瘤杂志,2019,41(1):19-28.[2]龙晓兰,张万勇,吴勇军,等.Cofilin-1与肝癌细胞迁移侵袭能力的相关性研究[J].中南医学科学杂志, 2019,47(6):571-575.[3]AMREIN L,LOIGNON M,GOULET A C,et al.Chloram-bucil cytotoxicity in malignant B lymphocytes is synergisti-cally increased by2-(morpholin-4-yl)-benzo[h]chomen-4-one(NU7026)-mediated inhibition of DNA double-strand break repair via inhibition of DNA-dependent protein kinase [J].J Pharmacol Exp Ther,2007,321(3):848-855.[4]黄波,龙颖,唐艳,等.NU7026对肝癌细胞放射增敏作用及机制研究[J].辐射研究与辐射工艺学报,2013, 31(6):11-15.[5]安澜,曾红梅,郑荣寿,等.2015年中国肝癌流行情况分析[J].中华肿瘤杂志,2019,41(10):721-727.[6]SOULAS-SPRAUEL P,RIVERA-MUNOZ P,MALIVERT L,et al.V(D)J and immunoglobulin class switch recom-binations:a paradigm to study the regulation of DNA end-joining[J].Oncogene,2007,26(56):7780-7791. [7]CHUNG J H.The role of DNA-PK in aging and energy me-tabolism[J].FEBS J,2018,285(11):1959-1972.[8]黄越承,周平坤,蔡建明,等.肝癌及不同发育阶段小鼠肝组织中DNA-PKcs的表达及其对细胞增殖作用的研究[J].第二军医大学学报,2009,30(11): 1217-1220.[9]李大玉,余春波,束波,等.DNA-PKcs影响肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu增殖及机制的研究[J].贵州医药, 2016,40(2):131-134.[10]HABIEL D M,HOHMANN M S,ESPINDOLA M S,et al.DNA-PKcs modulates progenitor cell proliferation and fi-broblast senescence in idiopathic pulmonary fibrosis[J].BMC Pulm Med,2019,19(1):165.[11]JIN P Y,LU H J,TANG Y,et al.The effect of DNA-PKcs gene silencing on proliferation,migration,invasion and apoptosis,and in vivo tumorigenicity of human osteo-sarcoma MG-63cells[J].Biomed Pharmacother,2017, 96:1324-1334.[12]李卡.DNA-PKcs对CD133阳性骨肉瘤细胞顺铂耐药性和骨肉瘤转移的作用及机制研究[D].济南:山东大学,2017:1-190.[13]宋志全.电离辐射对DNA损伤修复蛋白DNA-PKcs及其结合RNA作用的研究[D].北京:北京市军事科学院,2019:1-72.[14]余春波,李大玉,范芳,等.线粒体凋亡途径在DNA-PKcs抑制肝癌耐药细胞BEL7402/5-Fu凋亡中的作用研究[J].遵义医学院学报,2019,42(3):260-264.[15]SHANG Z F,HUANG B,XU Q Z,et al.Inactivation ofDNA-dependent protein kinase leads to spindle disruption and mitotic catastrophe with attenuated checkpoint protein 2phosphorylation in response to DNA damage[J].Cancer Res,2010,70(9):3657-3666. [16]AN J,HUANG Y C,XU Q Z,et al.DNA-PKcs plays adominant role in the regulation of H2AX phosphorylation in response to DNA damage and cell cycle progression [J].BMC Mol Biol,2010,11:18.[17]HUANG B,SHANG Z F,LI B,et al.DNA-PKcs associ-ates with PLK1and is involved in proper chromosome seg-regation and cytokinesis[J].J Cell Biochem,2014,115(6):1077-1088.(此文编辑㊀蒋湘莲)。
山核桃叶提取物体外对HepG2细胞增殖抑制作用研究
Ｏ
ｏ ｉ ０ ９ ３ （１ ：０ —． ｃｌ ｃ ２ ０ ，０ １ ）６ ０７ Ｓ，
Ｂ
Ｃｏ ｃ ｒ ￣ｉ Ｍ） ｎ ｅｆ ｔ ｎｃ ｏ ｕ
［ ］ ｅｓ ｇ ＡＭ， ａ ａｓｖｅ ３ Ｗ ｎｉ ｎ ｖｎ Ｍａｒ ｅｎ ＮＭ， ｊｕｓＭ ． Ｖ ｒｔａｅｉ— ｅ Ｎｉ ｉ ｈ ＨＩ ｐｏｅ ｎ ｓ ｈｂ ｏｓＪ ． ｎｉｉ ｌ ｅ ． ｒｓ， ｏｒｃｅ ｒｏ．０ ０ ８ （ ）５ ｉｔｒ［ Ａ ｔ ｒ ｓＩ ＰｅｓＣ ｒｅｔｄＰｏｆ２ １ ， ５ １ ：９ ｉ ］ ｖａＲ ｎ
Ｗｅ ｃ ｅ ｇ Ｗｅ ｃ ｅ ｇ３ ５ ０ ， ｉａ； Ｚ ｅ ｉｎ ｎｖ ｒ ｉ ｆｔ ｄｔ ｎ ｌ ｉｅ ｅ ｍｅ ｉｉｅ Ｈ ｎ ｚ ｏ １ ０ ３ ｎ ｈ ｎ ， ｎ ｈ ｎ ２ ３ ０ Ｃｈｎ ２． ｈ ｊ ｇ Ｕ ｉｅ ｓｔ ｏ ｒ ｉｏ ａ Ｃｈｎ ｓ ｄｃｎ ， ａ ｇ ｈ ｕ３ ０ ５ ， ａ ｙ ａ ｉ
ｏ ａｙ ａｈ ｙｎ ｉＳ ｒ ． ａ ｔ ｃ Ｃ Ｓ Ｅ） ｇ ｉ ｔ ｐ ２ｃｌｌ ｅ ｉ ｏ ｗ ｉ ｕｄｐ ｖ ｅｗａ ｒ ｆ ｒａＣ ｔａ ｅｓ ａｇ １ ｆ ｘ ｒ ｔ Ｃ Ｌ ａ ａ ｓ ＨｅＧ ｅ ｎ ｓ ｎｖ ｒ， ｈｃ ｗｏ ｌ ａ ｅ ｈ ｙｆ Ｃ ｓ ｅ ｅ ａ ｓ（ ｎ ｌｉ ｉ ｔ ｈ ｔ ｏ
摘要 ： 目的 研究山核桃叶提取物体外对人肝癌细胞株 Ｈ ｐ ２ ｅＧ 的抑制作用及其可能机理， 为进一步开发利用山核桃奠定基础。方法 采用
系统溶 剂法将山核桃叶 ７ ０％乙醇浸膏分 成五个部位。 然后通过 ＭＴ Ｔ法观察其对人肝 癌细胞株 ＨｅＧ２的抑制作 用， ｐ 并通过吖啶橙染色法和流式
ｔ ｍｏ ｃ ｉｅ ｃ ｍｐ ｎｅ ｔ ； ｎｄ ｃｎ ｅ１ａ ｏ ｔ ｓｓｉ ｎｅｏ ｈ ｃ ａ ｉｍ ｕ ｒ ａ ｔｖ ｏ ｏ ｎ ｓ Ｉ ｕ ｉ ｇ ｃ ｌ ｐ ｐ ｏ ｉ ｓｏ ｆｔ ｅｍｅ ｈ ｎ ｓ ｗｈｉｈ ｔ ｅｃ ｏ ｏ ｏ ｍ ａ ｔｅ ｒ ｔ ｎ ｉ ｃ ｈ ｈｌｒ ｆ ｒ ｐ ｒ ｘｅ ｔｉｓａ ｔ—
负载抗原的DC与CIK共培养对多药耐药肝癌细胞HepG2／ADM的杀伤作用及其机制研究
负载抗原的DC与CIK共培养对多药耐药肝癌细胞HepG2／ADM的杀伤作用及其机制研究徐巧元;杨志祥;罗阔【摘要】Objective To observe the killing effects of the antigen‐loaded dendritic cells(DC) and cytokine‐in‐duced killer cells(CIK ) on multidrug resistance liver cancer line HepG2/ADM with highly expressed permeability glycoprotein(P‐gp) and to explore its potential mechanisms .Methods DC cells and CIK cells were induced from the peripheral blood in healthy volunteers ′by the conventional methods ,and DC cells were impacted with HepG2/ADM cells aft er frozen‐thawed antigen ,which were co‐cultured with CIK cells for 24 ,48 ,72 ,96 h respectively .The DC cells without antigen‐loading and CIK cells were co‐cultured as control .The cell phenotype of DC and CIK was identified by the flow cytometry ,the cell proliferation vitality of HepG2/ADM was detected by CCK‐8 ;The expression of mdr‐1 mRNA was determined by realtime‐PCR ,the P‐gp protein level was detected by Western blot .Results Compared with non‐antigen‐loaded DC‐CIK group ,the expression of surface molecules in the antigen‐loaded DC‐CIK group was significantly increased(P< 0 .05) ,the vitality of HepG2 cells was inhibited more significantly (P < 0 .05) .The RT‐PCR and Western blot results showed that with the time extension ,the expression of mdr‐1 mRNA and P‐gp protein both were significantly decreased in the above two groups respectively(P<0 .05) ;Furthermore ,the inhibitory effects was more significant in theantigen‐loaded group(P< 0 .05) .Conclusion The co‐culture of DC and CIK after antigen im pact could improve its killing activity to multidrug‐resistant HepG2/ADM cell line ,its potential mechanism may be via inhibiting the MDR closely related mdr‐1 gene expression and its encoded P‐gp protein level .%目的：观察负载抗原的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK ）对高表达 P‐糖蛋白（P‐gp）的多药耐药（MDR）的肝癌细胞株 HepG2／ADM 细胞的杀伤作用和机制研究。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
８ ６ ４・
中国免疫学 杂志 ２ ０ １ ７年第 ３ ３卷
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ０ － ４ ８ ４ Ｘ ． ２ ０ １ ７ ． ０ ６ ． ０ １ ２
・
生物 治疗 ・
人 胚胎 干 细胞 对 肝癌 Ｈｅ ｐ Ｇ ２细胞 体 外 抑 制作 用 的研 究①
［ 摘
要］ 目的 ： 研究体外 共培养情 况下人胚 胎干细胞 Ｈ ９对 肝癌 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞 的抑制作 用。方法 ： 建立人胚 胎干细胞
（ Ｈ ９ ）与肝癌 Ｈｅ ｐ Ｇ ２细胞共培养体系 ， 显微镜下 观察胚 胎干细胞对肿 瘤细 胞生物学 行为 的影 响， 流式 细胞仪 检测 Ｈ ９细胞 对
［ Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］ Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ｙ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ｈ ｕ ｍａ ｎ ｅ ｍ ｂ ｙｏ ｒ ｎ ｉ ｃ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｉ ｎ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ： Ｔ ｈ ｅ
ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｅ ｘ ａ ｍｉ ｎ ｅ ｔ ｈ ｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｅ ｏ ｆ ｇ ｅ ｎ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｆ ｉ ｌ ｅ ｏ ｆ Ｈｅ ｐ Ｇ２ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ． Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ： Ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｏ ｃ ｅ ｓ ｓ ｏ ｆ Ｃ Ｏ — ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ， ｔ ｈ ｅ ｇ ｒ ｏ ｗ ｔ ｈ ｏ ｆ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｍａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗａ ｓ ｉ ｎ ｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｅ ｄ ． Ｗｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｔ ｅ ｎ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｔ ｉ ｍｅ ， ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｄ ｅ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｄ ｇ ｒ ａ ｄ ｕ ａ ｌ ｌ ｙ ， ａ ｎ ｄ ｏ ｃ ｃ ｕ ｒ ｒ ｅ ｄ ｓ ｉ ｇ ｎ ｓ ｏ ｆ ａ ｇ ｉ ｎ ｇ ｏ ｒ ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ． Ｆ ｌ ｏ ｗ ｃ ｙ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ ｔ ｅ ｓ ｔ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｓ ｈ ｏ ｗｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｍａ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗａ ｓ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｎ ｔ ｌ ｙ ｉ ｎ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｄ． ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ｃ ｙ ｃ ｌ ｅ ｗ ａ ｓ ｂ ｌ ｏ ｃ ｋ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ Ｇ Ｏ ／ ＧＩ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ． Ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｗｅ ｌ ｌ ｔ ｅ ｓ ｔ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｓ ｈ ｏ ｗ ｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｖ ａ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｍｉ ｇ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｈｅ ｐ Ｇ ２ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｄ ｅ ｃ ｒ ｅ ａ ｓ ｅ ｄ ． Ｔ ｈ ｅ ｇ ｅ ｎ ｅ ｃ ｈ ｉ ｐ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｓ ｈ ｏ ｗｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ
ｔ ｈ ｅ ｃ ｅ ｌ ｌ ｃ ｙ ｃ ｌ ｅ ａ ｌ ｔ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｔｒ ａ ｎｓ ｗｅ ｌ ｌ ａ ｓ ｓ ａ ｙ ｗａ ｓ ｕｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｔ ｈ ｅ ｍｉ ｇ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｉ ｎ ｖ ａ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｕ ｍｏ ｒ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ．Ｇｅ ｎ ｅ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ａ ｒ ｒ ａ ｙ ｔ ｅ ｃ ｈｎ ｉ ｑｕ ｅ ｗａ ｓ
Ｉ ｎｈ ｉ ｂ ｉ ｔ ｏ ｒ ｙ ｅ ｆｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ｈｕ ｍａ ｎ ｅ ｍ ｂｒ ｙ ｏ ｎ ｉ ｃ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｏ ｎ Ｈｅ ｐＧ２ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｉ ｎ ｖ ｉ ｔ ｒ ｏ
Ｚ ＨＥ ＮＧ Ｌ ｉ ａ ｎ ｇ — Ｄｏ ｎ ｇ， ＨＥ Ｘｕ ｅ — Ｍｅ ｉ ， ＺＨ Ａ ＮＧ Ｔ ｉ ｎ ｇ， Ｌ Ｉ Ｕ ｉｅ ｆ ， ＨＵ Ｏ Ｂ ｅ ｎ — Ｎｉ ａ ｎ， Ｌ Ｉ Ｕ Ｍｅ ｎ ｇ — Ｎａ ｎ， ＷＡ ＮＧ Ｘｕ ｅ ， Ｆ Ｅ ＮＧ
郑 良栋 ② 何 雪 梅 张 婷② 刘 洁② 霍本 念 ② 刘 梦楠 ② 王 薛 冯 涛②
（ 重庆 医科 大学分 子 医学 与肿瘤 研 究 中心 ， 重庆 ４ ０ ０ ０ １ ６ ）
中图分类号 Ｒ ３ ９ ２ 文献标志码 Ａ 文章编号 １ ０ ０ ０ － ４ ８ ４ Ｘ（ ２ ０ １ ７） ０ ６ １ ０ ８ ６ ４ － ０ ５
肿瘤 细胞的凋亡与周期 的影 响 ， Ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｗ ｅ ｌ ｌ 小 室法 检测 Ｈ ９细 胞对 Ｈｅ ｐ Ｇ ２细胞 侵袭 和 迁 移 的影 响 ， 基 因 芯 片分 析共 培 养 后
Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞全基 因组 的表达谱变化 。结 果 ： 结 果发现共培养过程 中， 肝癌 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞 生长受到抑制 ， 随共 培养 时间延长 ， 细胞
ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ｂ ｅ ｈ ａ ｖ ｉ ｏ ｒ ｏ ｆ Ｈｅ ｐ Ｇ２ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗａ ｓ ｏ ｂ ｓ ｅ ｒ ｖ ｅ ｄ ｂ ｙ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｓ ｃ ｏ ｐ ｅ ， ｔ ｈ ｅ ｌ ｆ ｏ ｗ ｃ ｙ ｔ ｏ ｍｅ ｔ ｒ ｙ ｗａ ｓ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｔ ｈ ｅ ａ ｐ ｏ ｐ ｔ ｏ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ｔ ｕ ｍｏ ｒ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ａ ｎ ｄ
Ｃ Ｏ — ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ ｏ ｆ Ｈｕ ｍ ａ ｎ ｅ ｍ ｂ ｒ ｙ ｏ ｎ ｉ ｃ ｓ ｔ ｅ ｍ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ（ Ｈ９ ）ａ ｎ ｄ ２ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ｗ ａ ｓ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ． Ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｈ ９ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ
Ｔ ａ ｏ ． Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ｃ ｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ｏ ｆ Ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ａ ｎ ｄ Ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ， Ｃ ｈ ｏ ｎ ｇ ｑ ｉ ｎ ｇ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｃ ｈ ｏ ｎ ｇ ｑ ｉ ｎ ｇ ４ ０ ０ ０ １ ６， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ
数量逐渐减少 ， 出现老 化 或凋 亡 迹 象 ； 流 式细 胞 术检 测 发 现 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细 胞凋 亡 率显 著 增 加 ， 细 胞 周 期 被 阻滞 于 Ｇ ０ ／ Ｇ １期 ； Ｔ ｒ ａ ｎ ｓ ｗ ｅ ｌ ｌ 实验发现 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２细胞侵袭 、 迁移力均降低 ； 基因芯片结果发现 Ｈｅ ｐ Ｇ ２细胞 全基 因组表 达谱发生 了显著变 化 ， 差 异基 因涉及多条信号通路 。结论 ： 人胚胎干细胞 Ｈ ９体外对人 肝癌 细胞 Ｈ ｅ ｐ Ｇ ２有一定程 度的抑制作用 。 ［ 关键词 ］ 胚胎干细胞 ； 肝癌 ； 共培养 ； 抑制 ； 凋亡