新教材高中生物二轮复习核“芯”7 基因工程和蛋白质工程
2023新教材高考生物二轮专题复习 突破等级考非选择题6 创设新情境考查细胞工程与基因工程
突破等级考非选择题6 创设新情境考查细胞工程与基因工程等级考再回访1.[2022·湖南卷]水蛭是我国的传统中药材，主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。
拟通过蛋白质工程改造水蛭素结构，提高其抗凝血活性。
回答下列问题：(1)蛋白质工程流程如图所示，物质a是________________，物质b是________。
在生产过程中，物质b可能不同，合成的蛋白质空间构象却相同，原因是________________。
(2)蛋白质工程是基因工程的延伸，基因工程中获取目的基因的常用方法有____________________、____________________和利用 PCR 技术扩增。
PCR 技术遵循的基本原理是________________。
(3)将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酶水解后，分析水解产物中的肽含量及其抗凝血活性，结果如图所示。
推测两种处理后酶解产物的抗凝血活性差异主要与肽的________(填“种类”或“含量”)有关，导致其活性不同的原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
(4)若要比较蛋白质工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素的抗凝血活性差异，简要写出实验设计思路________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
高中生物全程复习方略配套课件中图选修基因工程的应用蛋白质工程
基因歧视问题
随着基因检测技术的发展，个人基因信息可能被用于不公平 的决策，如就业、保险和医疗保健。这可能导致基因歧视， 侵犯个人权利。
Part
02
基因工程的应用
基因治疗
基因治疗是指通过改变人类基因来治疗遗传性疾病和 获得性状的一种方法。
输标02入题
基因治疗可以分为直接基因治疗和间接基因治疗两种 类型。
01
03
目前，基因治疗已经在一些遗传性疾病的治疗中取得 了显著成果，如囊性纤维化、镰状细胞贫血等。
04
直接基因治疗是直接将正常的基因导入人体细胞中， 以替代缺陷基因；而间接基因治疗则是通过调节人体 内的某些基因的表达来达到治疗目的。
合成生物学结合了工程学和生命科学 的原理，通过设计和构建人工生物系 统，解决实际问题，未来发展潜力巨 大。
基因治疗的研究进展
基因治疗是当前研究的热点领域，通 过向患者体内导入功能正常的基因， 治疗遗传性疾病和癌症等疾病，未来 有望取得突破性进展。
蛋白质工程技术的发展趋势
蛋白质结构和功能的深入研究
01
定向进化的方法
包括基因突变、基因重组、基因 体外合成等技术，通过这些技术 可以实现对蛋白质的定向进化。
蛋白质工程在药物研发中的应用
药物靶点的发现
通过蛋白质工程可以发现新的药物靶 点，为新药的研发提供基础。
药物设计和优化
通过蛋白质工程可以对药物进行设计 和优化，提高药物的疗效和降低副作 用。
蛋白质工程在农业和工业生产中的应用
目前，基因改良作物已经在世界 范围内得到广泛应用，但同时也 面临着社会接受程度和生态安全 等方面的挑战。
高中生物教案《基因工程和蛋白质工程》
《基因工程和蛋白质工程》高中生物教案一、教学目标1.知识与技能：o理解基因工程和蛋白质工程的基本概念、原理和应用。
o掌握基因工程的基本操作技术，包括基因克隆、基因表达和基因编辑。
o了解蛋白质工程的设计原理和方法，以及其在医药、工业等领域的应用。
2.过程与方法：o通过观察、分析和讨论，培养学生的观察力和分析能力。
o通过案例分析和模拟实验，让学生深入理解基因工程和蛋白质工程的过程和机制。
3.情感态度与价值观：o激发学生对基因工程和蛋白质工程的兴趣和好奇心。
o培养学生的科学探究精神和创新意识，认识到基因工程和蛋白质工程在生命科学和生物技术领域的重要性。
二、教学重难点•重点：基因工程和蛋白质工程的基本原理和操作技术。
•难点：理解基因工程和蛋白质工程在分子水平上的复杂性和精准性。
三、教学准备•基因工程和蛋白质工程的多媒体课件，包括基本原理、技术操作和应用案例等。
•模拟实验材料，如质粒DNA、PCR试剂、蛋白质表达载体等。
•小组讨论指导问题。
四、教学过程1.导入新课o通过展示基因工程和蛋白质工程在医药、农业、工业等领域的应用案例，引出基因工程和蛋白质工程的概念和重要性。
o提问学生：你们知道基因工程和蛋白质工程是什么吗？它们在我们的生活中有哪些应用？2.新课讲解o介绍基因工程的基本概念，包括基因克隆、基因表达和基因编辑的原理和技术。
o讲解蛋白质工程的设计原理和方法，包括蛋白质结构分析、功能预测和优化等。
o展示基因工程和蛋白质工程在医药、农业、工业等领域的应用案例，让学生了解其实际价值和意义。
3.模拟实验与探究o利用模拟实验材料，让学生亲自操作基因克隆和基因表达的实验，感受基因工程的实际操作过程。
o教师演示多媒体课件中的基因编辑和蛋白质工程的设计过程，让学生观察并理解其分子机制。
4.小组讨论o学生分组讨论基因工程和蛋白质工程在生命科学和生物技术领域的发展趋势和前景。
o教师提供指导问题，引导学生深入思考并分享讨论结果。
新教材2024高考生物二轮专题复习专题七生物技术与工程第3讲基因工程和生物技术的安全性与伦理问题教师
第3讲基因工程和生物技术的安全性与伦理问题聚焦新课标：5.1基因工程是一种重组DNA技术；5.2蛋白质工程是基因工程的延伸；6.1转基因产品的安全性引发社会的广泛关注；6.2中国禁止生殖性克隆人；6.3世界范围内应全面禁止生物武器。
基础自查·明晰考位纵引横连——建网络提醒：特设长句作答题，训练文字表达能力边角扫描——全面清提醒：判断正误并找到课本原话1．切割质粒的限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。
(选择性必修 3 P71)( )2．DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事。
(选择性必修3 P72“旁栏思考”)()3．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选的标记基因。
(选择性必修 3 P72正文)( )4．目的基因就是指编码蛋白质的基因。
(选择性必修3 P76正文)( )5．人畜食用Bt抗虫蛋白会中毒。
(选择性必修3 P77“相关信息”)( )6．用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列。
(选择性必修3 P77“相关信息”)()7．基因表达载体中含有启动子和密码子。
(选择性必修3 P80正文和图36)( )8．干扰素是我国批准生产的第一个基因工程药物。
(选择性必修3 P90“资料卡”)() 9．对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实现的。
(选择性必修3 P93正文)( ) 10．转基因作为一项技术本身是中性的。
(选择性必修3 P103正文)( )11．治疗性克隆是指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为个体的克隆性技术。
(选择性必修3 P106正文)( )考点梳理·整合突破整合考点22 “功能强大”的基因工程任务驱动任务1 理解基因工程的理论基础任务2 理清基因工程的3种操作工具任务3 掌握基因工程的操作步骤任务4 图解记忆蛋白质工程任务5 完善PCR技术原理与条件任务6 完善PCR技术的过程任务7 DNA的粗提取与鉴定任务8 DNA片段的扩增及电泳鉴定过程评价评价1 依托真题归类比较再体验，明考向1.[2023·浙江6月]某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因(GFP)整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。
蛋白质工程与基因工程的差异
蛋白质工程与基因工程的差异一、蛋白质工程的基本概念1、什么是蛋白质工程？说到蛋白质工程，大家可能会觉得这是一个很高大上的话题，但其实它和咱们日常生活中的食物、药物都有着紧密的关系。
简单来说，蛋白质工程就是对蛋白质进行“改造”或“设计”的过程，目的是让这些蛋白质在性能上更符合我们的需求。
它的重点是怎么通过改变蛋白质的结构或功能，去优化它的作用。
比如，如果我们能设计一种蛋白质，能够更有效地清除血液中的垃圾，想想看，这对治疗疾病多有帮助啊！2、蛋白质工程的核心手段是啥呢？它就是通过对蛋白质的氨基酸链进行调整，进而改变其三维结构，从而影响蛋白质的功能。
就像你做饭时调味一样，不同的调料放得恰到好处，味道就会不一样。
科学家们用相似的思路，通过“调整”蛋白质，让它更适应各种环境，发挥更好的功能。
3、举个简单的例子，我们熟悉的胰岛素就是蛋白质工程的产物。
以前，胰岛素主要是从猪牛胰腺中提取，费时又费力。
后来，通过基因重组技术，将人的胰岛素基因插入到大肠杆菌中，让这些小家伙“自己生产”胰岛素。
这个过程是不是就像变魔术一样，科学家们通过蛋白质工程，让原本困难的事情变得简单又高效。
二、基因工程的基本概念1、那基因工程又是什么呢？基因工程和蛋白质工程有着千丝万缕的联系，基因工程的工作重点主要是搞定DNA。
基因工程的核心就是通过人工干预，把一种生物体的基因改变或者转移到另一种生物体中。
可以这么说，基因工程就像是给生命“编程”，让它按新的指令运行。
你想想，科学家把一棵番茄的抗病基因转移到另一种植物上，这样就能让这种植物也具备抗病能力，真是神奇。
2、基因工程的应用场景也是五花八门，比如在农业中，科学家们通过基因改良，可以让作物更加抗虫、抗旱，甚至改变水果的口感，简直像是给植物开了外挂。
在医药领域，基因工程也有着巨大的潜力，例如制造疫苗、基因治疗等，都是基因工程在实际生活中的体现。
3、但说到底，基因工程还是着重于对基因本身的改造。
高考二轮复习基因工程与蛋白质工程课件(28张)
(2)基因表达载体的组成
(3)构建过程
生物种类 常用方法
受体细胞 过程
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
花粉管通道法、 农杆菌转化法
显微注射法
Ca2+转化法
体细胞或受精卵
受精卵
原核细胞
将目的基因插入Ti质粒 将含有目的基因的表 的T-DNA上→导入农 达载体提纯→取卵(受 杆菌→侵染植物细胞 精卵)→显微注射→受 →整合到受体细胞的 精卵发育→胚胎移植 染色体DNA上→表达 →获得具有新性状的
过程 变性 复性
延伸
说明
图解
当温度上升到⑥ 90 ℃ 以上 时,双链DNA解聚为单链
温度下降到50 ℃左右时,两种引 物通过碱基互补配对与两条单 链DNA结合
⑦ 72 ℃ 左右时,耐高温的 DNA聚合酶活性高,可使DNA 新链由5'端向3'端延伸
d.目的:通过⑧ 指数式 扩增获取大量的目的基因。 e.鉴定:常采用⑨ 琼脂糖凝胶电泳 来鉴定PCR的产物。 说明:耐高温的DNA聚合酶旧称Taq酶或热稳定DNA聚合酶或Taq DNA 聚合酶,全书同,非必要不再标注。 2.基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的:使目的基因⑩ 在受体细胞中稳定存在,并且遗传给下一代 ,同 时使目的基因能够表达和发挥作用。
高考 生物
新高考专用
专题26 基因工程与蛋白质工程
考点清单
考点一 基因工程 一、基因工程的概念和优点 1.概念:按照人们的愿望,通过① 转基因 等技术,赋予生物以新的遗传 特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工 程在DNA水平上进行设计和施工,因此又叫② 重组DNA技术 (旧称 DNA重组技术)。
高二生物【19】基因工程与蛋白质工程专题复习
知识点2：基因工程的四个基本操作程序：
重组的表 含重组的表达载体的 含重组的表达载体的
达载体
缓冲液或金属颗粒
生物体
✳将目的基因（即重组DNA）导入受体细胞
植物细胞 动物细胞 微生物物细胞
受精卵 体细胞
受精卵
大肠杆菌 酵母菌
知识点2：基因工程的四个基本操作程序：
✳将目的基因（即重组DNA）导入受体细胞
知识点巩固：例图
？
知识点巩固：
例题：基因工程的核心是图中的___①______（用图中数字回答）过程； 如果要“不需要”）限制性核酸内切酶参与。
知识点巩固：
例题：若要检测乳汁中是否出现人β-酪蛋白，可用的检测物质是 人__β_-_酪__蛋___白__抗__体__（填“人β-酪蛋白基因”或“人β-酪蛋白抗体”）。 ②过程一般是通过__________显__法微实注现射的。
D.限制酶只能从原核生物中提取
例题：在基因表达载体的构建中，下列说法不正确的是（ ）
①一个基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子
②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA
③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止
④所有基因表达载体的构建是完全相同的
A.②③ B.①④
C.①② D.③④
知识点巩固：
在核苷酸链上添加单个核糖核苷酸
使碱基间氢键断裂
逆转录酶 以RNA为模板合成DNA DNA（水解）酶 水解DNA为单个核苷酸
Taq酶
在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸
：
参与过程
基因工程 基因工程
DNA体内复制
转录
DNA体内复制
逆转录及基因 工程
肺炎双球菌转 化实验
PCR技术
【高中生物】2023届高三生物二轮复习课件基因工程微专题
。
• ⑷1985年，穆里斯等人发明了PCR,对于基因工程的诞生和发展的意
义 为获取目的基因提供了有效手段。
有关核酸的方向性问题：
①核苷酸：
5
1
4
3
2
1’碳连碱基
2’碳（脱氧核糖连无氧；核糖有氧）
3’碳连羟基（-OH）
5’碳连磷酸
②一条脱氧核苷酸链（DNA单链）:
第四轮循环即DNA复制4次，共形成24＝16个DNA分子，其中含有最初模板链的2个
DNA分子含有引物A或引物B，其余14个DNA分子均含有引物A和引物B，所以第四
轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为14/16＝7/8
第四轮循环产物中含
有引物A的DNA片段
所占的比例为？
15/16
离出目的基因。 第三个循环，当以
第二个循环得到的新片段为模板时，
因为这个片段的长度就是需要扩増的
长度，所以当第三个循环完成时，这
个片段是需要的长度，且是双链DNA，
这就得到了需要的目的基因了。所以
至少要3个循环才能分离出目的基因。
PCR反应相关计算:
4．利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。
氨酸-甘氨酸），该发光基团可利用定点突变技术使第66位酪氨酸换成组氨酸，即
可发出更明亮的蓝光，成为蓝色荧光蛋白（图4）。
定点突变第一步得把突变位点设计在引物上，据图中信息人工合成短 DNA 引物
应包含的序列是 AGAGTGCTC 。
定点诱变技术是近年来生物工程研究中发展迅速的一个领域。经典的大引物PCR定
扩增，得到融合基因。 图中引物2或引物3设计的要求是
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核“芯”7基因工程和蛋白质工程(时间：20分钟)1.(2022·山东实验中学二模)新冠病毒肆虐全球，给人们的日常生产、生活带来很大的影响，因此研发新冠病毒疫苗受到广泛关注。
疫苗研制时常需要构建重组病毒载体，部分过程如下图所示，其中A～C表示结构或物质，NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、Bam HⅠ四种酶的识别序列和酶切位点详见下表。
限制酶NcoⅠSphⅠNheⅠBam H Ⅰ识别序列和C↓CATGG GCATG↓C G↓CTAGC G↓GATCC 切割位点(1)分析图中C的黏性末端可确定，需要用(填限制酶名称)切割质粒B。
(2)重组质粒1用(填限制酶名称)处理获得线性化片段，在缓冲液中将其与某克隆片段混合，适宜条件下成功连接。
由图可知线性分子可以与克隆片段连接成环的原因可能是。
连接后可得到的环状DNA分子最多有种(上述片段均足量且不考虑3个及以上DNA 片段的连接)。
(3)获得的重组病毒载体可以导入工程菌，高效表达出用于制备疫苗。
与减毒活疫苗比较，该类疫苗安全性更高，其原因是_________________________ ___________________________________________________________________。
(4)新型冠状病毒感染人体后，其S蛋白识别人体细胞膜蛋白ACE2并与之结合，使病毒侵入细胞，同时会引起人体相应的免疫反应。
重组人源蛋白ACE2可用于治疗新冠病毒肺炎，请推测该药物的作用机理：____________________________ _____________________________________________________________________。
答案(1)NcoⅠ和Bam HⅠ(2)NcoⅠ具有相同的黏性末端8(3)S蛋白此疫苗不含新冠病毒的核酸，不会在人体内繁殖(4)重组人源/可溶性/药物中的ACE2蛋白(与细胞膜蛋白ACE2)竞争性的与S蛋白结合，降低新冠病毒对细胞的黏附和感染解析(1)通过该病毒逆转录的DNA黏性末端序列，能识别剪切该序列的限制酶分别是NcoⅠ和Bam HⅠ，因此用该两种酶切割质粒。
(2)重组质粒1通过限制酶酶切后得到线性化片段，NcoⅠ酶切后产生的黏性末端序列为－CATG－，故为NcoⅠ处理的；用NcoⅠ和Bam HⅠ处理的黏性末端相同，线性分子和克隆片段之间黏性末端之间可以通过碱基互补配对而连接，设两种片段分别是AB和CD，环化类型有：ABCD、ABDC、BADC、BACD、BABA、DCDC、ABAB、CDCD 八种。
(3)病毒表面的S蛋白刺激机体产生特异性免疫，因此获得的重组病毒载体导入工程菌后表达出S蛋白作为疫苗；该疫苗没有核酸，不会在机体内增殖，因此更安全。
(4)新冠病毒S蛋白识别人体细胞膜蛋白ACE2并与之结合，若给患者注射大量可溶性ACE2蛋白，新冠病毒结合注入的ACE2蛋白从而对细胞的黏附和感染能力减弱达到治疗的目的，即重组人源/可溶性/药物中的ACE2蛋白(与细胞膜蛋白ACE2)竞争性的与S蛋白结合，降低新冠病毒对细胞的黏附和感染。
2.(2022·安徽黄山质检)利用反义基因特异性地阻断病毒在宿主细胞中的增殖，可以增强植物的抗病能力。
以编码病毒外壳蛋白(CP)的基因作为目的基因，利用基因工程技术将反义CP基因导入烟草细胞，获得具有反义CP基因的转基因植株，高效表达的转基因烟草抗病能力明显高于普通植株。
请结合图片回答：(1)据图分析，当整合到烟草细胞染色体上的病毒CP基因转录时，利用反义CP 基因产生的mRNA来特异性阻断CP基因表达的过程，从而产生抗病性。
反义基因是否在烟草植株体内维持和表达，常采用分子杂交方法(答出两点即可)进行检测。
(2)在噬菌体、植物病毒和质粒三种载体中，选用植物病毒作为载体潜在的风险是，不能选用噬菌体作为载体的原因是__________________________。
(3)研究发现，在转基因烟草植株细胞中能检测到反义CP基因，但该植株并没有表现出抗病能力，若从构建基因表达载体的角度分析，最可能的原因是；根据中心法则分析，可能的原因是_____________________________________________________________________。
(4)当前，反义基因抗病植株已成功应用于农业生产，相对于传统化学防病而言，该技术产生的积极影响有_______________________________________________ ________________________________________________________(答出两点即可)。
答案(1)翻译DNA—DNA、DNA—RNA及抗原—抗体(或核酸分子杂交和蛋白质)(2)使受体生物致病(合理即可)噬菌体不能侵染植物细胞(3)无启动子反义CP基因没有转录(4)增强植物的抗病性；减少化学污染或减缓抗药基因频率上升趋势等(合理即可) 解析(1)CP基因和反义CP基因同时转录产生的mRNA的碱基序列互补配对，二者会结合形成双链RNA，不能与核糖体结合，从而阻断CP基因的翻译。
目的基因的遗传特性能在受体细胞内维持和表达，只有通过检测才能知道。
目的基因在受体细胞是否稳定存在，可采用DNA分子杂交的方法；目的基因是否转录，可采用分子杂交的方法，目的基因在受体细胞内是否翻译利用的是抗原—抗体杂交的方法。
但因为这里用的反义CP基因，主要目的是阻断CP基因的表达，反义CP基因没有其表达产物。
因此只要检测细胞内是否有反义CP基因，采用DNA 分子杂交的方法。
反义CP基因是否转录采用的是DNA—RNA分子杂交方法。
当然还要检测反义CP基因是否阻断了CP基因的翻译，检测其细胞中是否有CP 蛋白，用的是抗原—抗体杂交的方法，如果没有说明反义基因发挥了作用。
反义基因的遗传特性是否在烟草植株体内维持和表达，常采用DNA—DNA、DNA—RNA及抗原—抗体(或核酸分子杂交和蛋白质)分子杂交方法进行检测。
(2)在噬菌体、植物病毒和质粒三种载体中，选用植物病毒作为载体可能存在的潜在风险是细胞发生插入突变及恶性转化，不能选用噬菌体作为载体，因为噬菌体专营寄生于细菌，不能侵染植物细胞。
(3)在转基因烟草植株细胞中能检测到反义CP基因，但该植株并没有表现出抗病能力，若从构建基因表达载体的角度分析，最可能的原因是基因表达载体上缺少能使反义基因表达(转录)的启动子。
根据中心法则分析，可能的原因是反义基因没有转录。
(4)当前，反义基因抗病植株已成功应用于农业生产，相对于传统化学防病而言，该技术能够增强植物的抗病性；减少化学污染或减缓抗药基因频率上升趋势等(答出两点即可)。
3.(2022·山东潍坊三模)番茄果实后熟问题是影响番茄生产、加工和运输的难题。
ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的关键酶，科学家利用反义基因技术培育出了耐储存、利于长途运输的番茄新品种，具体做法是采用农杆菌转化法将携带有反义ACC合成酶基因的重组质粒M导入番茄栽培品种中，经过卡那霉素筛选后，获得番茄新品种。
反义基因是指人工合成出一段与某种基因碱基序列相同的DNA。
经过人为操作使之在转录生成mRNA时，模板链与原基因不同。
(1)农杆菌转化法适用的植物种类是；重组质粒M中的抗性基因是______________________________________________________________________ _____________________________________________________________________。
(2)有同学提出若要提取番茄中控制ACC合成酶的基因，只能利用成熟的番茄组织。
你认为他的说法是否有道理，作出判断的依据是________________________ ____________________________________________________________________。
(3)ACC合成酶基因在番茄细胞中表达的过程发生在细胞内的中；反义ACC合成酶基因转录启动后，检测发现番茄果实中乙烯含量显著降低，推测其机理最可能是_____________________________________________________________________________________________________________________。
答案(1)大多数双子叶植物和裸子植物卡那霉素抗性基因(2)否，控制ACC 合成酶的基因几乎存在于番茄的所有细胞中(3)细胞核和核糖体反义ACC合成酶基因转录产生的mRNA可与ACC合成酶基因转录产生的mRNA碱基互补配对结合，ACC合成酶的合成受阻，导致乙烯的产生量下降解析(1)农杆菌转化法适用的植物种类是大多数双子叶植物和裸子植物；采用农杆菌转化法将携带有反义ACC合成酶基因的重组质粒M导入番茄栽培品种中，经过卡那霉素筛选后，获得番茄新品种。
由以上可知，重组质粒M中的抗性基因是卡那霉素抗性基因。
(2)控制ACC合成酶的基因几乎存在于番茄的所有细胞中，所以这位同学提出的说法没有道理。
(3)ACC合成酶基因在番茄细胞中表达的过程包括基因的转录和翻译，发生在细胞内的细胞核和核糖体中；反义ACC合成酶基因转录启动后反义ACC合成酶基因转录产生的mRNA可与ACC合成酶基因转录产生的mRNA碱基互补配对结合，ACC合成酶的合成受阻，导致乙烯的产生量下降。
4.(2022·广东东莞调研)病毒(V)可诱发恶性肿瘤，病毒外壳蛋白L1是其主要抗原。
如图是该病毒疫苗生产的部分流程示意图。
请回答。
(1)要在生物体外大量获得L1基因，常用技术。
构建含L1基因的重组质粒时，为避免质粒和目的基因自身环化等情况，应选择的限制酶是。
(2)①过程需用处理大肠杆菌，使其成为细胞。
(3)为了确认酵母菌转化是否成功，可在培养基中加入进行筛选，转化后的酵母菌是否含有L1基因，可用方法检测。
(4)若要使转化后的酵母菌只具有单一抗生素抗性。
应选用限制酶切割重组质粒，并在切割后将所需部分质粒最新连接为环状。
(5)酵母菌常用于基因工程，用来合成人体中的酶、激素等。
与大肠杆菌相比，用酵母菌作为基因工程的受体细胞的优点是_________________________________ _____________________________________________________________________。
答案(1)PCR Hin d Ⅲ和Eco R Ⅰ(2)Ca2＋感受态(3)四环素和氨苄青霉素DNA分子杂交(4)BglⅡ(5)酵母菌是真核生物，可在细胞内完成对蛋白质的加工，无需再进行体外加工(合理即可)解析(1)在生物体外扩增目的基因的常用方法是PCR技术，用两种识别序列不同的限制酶切割目的基因和质粒，可以防止自身环化等情况。