注射用脂质体的药学研究

地方批注射用卵磷脂标准 黄色块状物
< 410 60～70 1170% ～1195% 315% ～411% 无要求 无要求 无要求 无要求 无要求 无要求
进口注射用卵磷脂标准 类白色或淡黄色 7～10 65～73 1175% ～1195% 315% ～411% 有 ≤315%
质量分数 ≤50 ×10 - 6 ≤6 EU·g - 1
7210% ～8510% 510% ～1010%
由表 1可知 ,目前地方批准的注射用磷脂标准
中 ,对于可能涉及产品安全性的指标的指标磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的比例 ,均未 进行控制 。溶血磷脂是磷脂通过脱酯化反应脱去 1 或 2位的脂肪酸链 [ 2 ]后的主要产物 ,见图 1,超过一
[作者简介 ] 张宁 ( 1977 - ) ,女 ,主管药师 ,主要从事新药 审评工作 。联系电话 : ( 010) 68585566 - 532, E2mail: flyzxg@ sina. com。
此外 ,粒径设定还必须考虑工业化生产中的可 行性和可重现性 。目前申报过程中出现较多的问题 是 ,试制样品的粒径比较均匀 ,分布范围比较窄 ,但 质量标准中设定的粒径分布限度又比较宽 。理论上 粒径分布窄的脂质体制剂更为理想 ,但实际生产中 常常遇到的一个问题是 :平均粒径越小的产品 ,其粒 度分布越宽 ;而平均粒径较大的产品 ,粒径分布则相 对较窄 。因此 ,笔者建议根据脂质体制剂稳定性考 察结果以及多批产品的实际检测结果 ,设定平均粒 径以及粒径分布限度 ,并通过体外释放度 、包封率等 参数佐证粒径对制剂质量可能产生的影响 。如粒径 范围较宽 ,应验证上下限之间的产品是否生物等效 。 314 体外释放度 脂质体作为一种新的药物输送 系统 ,对其进行释放度的研究 ,对于评估过程控制是 否合理 、产品的质量是否符合要求以及制备过程中 的微小变化对产品质量的影响具有一定意义 。因此 建议对脂质体制剂进行体外释放度的研究 。 315 其他 鉴于制剂生产过程中 ,溶血磷脂以及过 氧化物都有可能增加 ,故对终产品也需进行这 2 项 指标的检查 。
关键辅料的质量控制 作为形成脂质体双分子膜的基本材料 ,磷脂的
质量密切影响脂质体产品的安全性 、稳定性和药物 输送性能 。为保证终产品的质量 ,首先需关注对关 键辅料磷脂的质量控制 ,完善控制项目 ,确定合适的 检验方法以及合理的限度要求 。
目前国内批准用于注射用的磷脂包括卵磷脂 和豆磷脂 ,来源有国产的 ,也有进口的 。研究过程 中也有采用国外生产的合成磷脂 ,但目前尚无合 成磷脂获准进口 。考虑到辅料的可获得性以及成 本价格等问题 ,国内脂质体的研发一般是选用国 产卵磷脂 。
稳定性研究 除制剂稳定性考察的常规要求外 ,还需要对按
照临床用法稀释后的脂质体制剂进行稳定性考察 。
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由于稀释倍数不同 ,产品的稳定性可能有所不同 ,因 此 ,要尽量按照临床用法进行稀释 。除常规指标外 , 重点观察粒径和泄漏率的变化 。对于长期留样终点 的样品 ,也建议进行如上考察 ,以反映有效期末的样 品是否仍能保证临床用药的稳定性和安全性 。
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100～230 nm;而 Doxil 作为一种“隐形 ”脂质体 ,利 用肿瘤部位新生血管易于渗漏的特点 ,使药物靶向 性地分布到肿瘤部位而达到治疗效果 ,因此 ,为避免 RES的摄取 ,其平均粒径为 80 nm 左右 。
结语 脂质体作为一种新型药物输送系统 ,为改善药
物的治疗效果提供了可能 。同时 ,积极有效地进行 脂质体制剂研究 ,也有助于推动我国制剂技术的创 新和提升 。在这一过程中 ,从药品研发的角度 、从可 实现工业化生产及可得到安全有效 、质量可控的药 品角度出发 ,还需要高度关注脂质体前期研究工作 的全面性和深入性 。
定限量可能会引起溶血反应 ;过氧化物主要是由于 磷脂中的不饱和脂肪酸发生氧化反应产生 ,超过一
定限量也会对人体产生危害 。由于脂质体的制备过
程中通常都不包含常规注射液采用药用炭吸附去除
热原的步骤 ,故为保证终产品的质量 ,有必要控制所 用辅料中细菌内毒素的限度 。磷脂酰胆碱和磷脂酰
乙醇胺的比例不同 ,可能会影响到脂质体制剂中药
卵磷脂和豆磷脂均为混合物 ,其主要成分为二 油酸酰磷脂酰胆碱和二棕榈酰磷脂酰胆碱 ,并含有 部分磷脂酰乙醇胺 。表 1列出了某一进口注射用卵 磷脂同国产卵磷脂在质量控制上的差异 。
表 1 某一进口注射用卵磷脂同国产卵磷脂质量控制比较
检测项目 性 状 酸 值 碘 值 氮 磷 过氧化物 溶血性磷脂酰胆碱 重金属 细菌内毒素 磷脂酰胆碱 磷脂酰乙醇胺
与普通制剂相比 ,脂质体制剂对制备条件的变 化更为敏感 ,如何进行工业化生产仍是一个有待改 进的问题 。因此 ,尽管早在 20世纪 60年代初 ,国外 就开始了脂质体的研究 ,但目前真正上市的脂质体 产品仍较少 ,放大生产方面可供借鉴的经验也不多 。 为保证脂质体制剂最终可由实验室研究顺利过渡到 大生产 ,在早期研究阶段就必须打好坚实的基础 ,对 可能影响产品质量和放大过程的各种因素进行全面 考察和分析 。例如 ,根据国内外多年来对脂质体制 备的研究经验 [ 3 ] ,可以采用避免高温 、在无氧条件 下制备 、处方中加入抗氧剂 、充氮条件下保存等措施 减少制备过程中磷脂的氧化 ,那么早期研究中就有 必要详细考察制备温度 、处方中抗氧剂用量等对最 终产品中氧化产物含量的影响 。同时 ,对于关键的 工艺条件和工艺步骤应进行验证 ,考证工艺的重现 性以及放大的可行性 。例如 ,目前申报的产品制备 工艺多采用旋转蒸发成膜水化法制备脂质体 。根据 现有经验 ,采用这一方法制备的产品 ,尤其是在大规 模生产的情况下 ,粒径分布一般都比较宽 ,尚需要进 一步经过匀质化处理 (如超声 、高压乳匀 ) 。因此 , 对匀质化处理中具体参数的确定以及匀质效果需进
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综述与专论
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注射用脂质体的药学研究
张 宁 1 ,魏晓慧 2 (1 国家食品药品监督管理局药品审评中心 ,北京 100038; 2 上海交通大学药学院 ,上海 200240)
[关键词 ] 脂质体 ;注射用 ;药学研究 [中图分类号 ] R94419; R95 [文献标识码 ] C [文章编号 ] 1003 - 3734 (2007) 14 - 1065 - 03
自 1961年 B angham 等 [ 1 ]首次报道脂质体结构 以来 ,脂质体得到了越来越多的重视 ,从最初的细胞 膜模型迅速发展为新型的药物输送系统 。目前 ,采 用脂质体进行靶向输送的药物主要集中于治疗恶性 疾病 ,如抗肿瘤药物 (多柔比星 、柔红霉素 、阿糖胞 苷等 )和抗感染药物 (两性霉素 B 等 ) ,在局部麻醉 药的开发中也有涉足 。国内脂质体药物输送系统 的研究起步相对较晚 ,但发展迅速 ,已经有越来越 多的制药企业和研究机构致力于脂质体制剂的研 究及工业化生产 。近年来 ,脂质体产品的注册申 报量已由前几年的每年 2 ～3 个增加至 8 ～10 个 。 在申报数量增加的同时 ,也反映出脂质体制剂研 究中存在的一些问题 。因此 ,笔者结合几次脂质 体专家咨询会情况 、国外上市脂质体研究情况调 研以及国内注册申报中普遍存在的问题 ,就注射 用脂质体药学研究中需要关注的一些事项提出自 己的浅见 。
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行细致研究和验证 。 质量研究及控制 除注射用药品质量控制的一般考虑外 ,结合脂
质体的制剂学特点 ,质量控制中的关键项目应包括 粒径及其分布 、包封率 、含量测定 、体外释放度 ;结合 脂质体制备关键辅料磷脂的稳定性 ,终产品的质量 标准中尚需关注过氧化物和溶血磷脂的检查 。 311 包封率的测定 包封率是指脂质体中包封的 药物同脂质体中药物总量的比例 ,一般采用葡聚糖 凝胶 、超速离心法 、透析法等分离方法进行测定 。为 保证测定结果的准确 ,首先需要进行方法学验证 。 例如 ,对于葡聚糖凝胶柱测定包封率而言 ,方法学验 证应包括洗脱曲线的绘制 、包封于脂质体中的药物 和游离药物的界定 ,以及柱回收率的考察 。其中 ,柱 回收率的考察是研究中容易忽视的问题 。柱回收率 是指柱分离后测得的游离药物及脂质体中药物总和 同上柱前所测样品中的药物总量的比例 ,通常需保 证柱回收率达到 9510% ～10510% ,并且应在质量 标准中明确规定柱回收率的限度 。 312 含量测定 目前有些申报单位将投药量同最 终制剂中测定结果的比例做为含量测定方法的回收 率 ,但此种设计方式未扣除制备过程中可能的药物 损耗 ,故结果一般偏低 。对于脂质体而言 ,含量测定 方法回收率的验证原则同其他普通制剂一致 ,即将 主药和高 、中 、低 3 种比例的辅料混合 ,重点考察在 辅料存在的情况下药物是否提取完全 ,辅料对药物 的测定是否有干扰 。可以将所用辅料直接和药物混 合 ,也可将辅料制成空白脂质体后与药物混合 。在 测定的过程中 ,需关注所用脂质体破坏溶液能否将 脂质体完全破坏 ,药物是否可以完全释放出来 ,可采 用适当的方法对破膜效果进行观察 ,含量测定结果 也会对此有一定反映 。 313 粒径范围的确定 目前药典中对多室脂质体 的粒径范围确定为 1 ～5μm[ 4 ] ,粒径上限的确定主 要是考虑制剂注射后的安全性 。对于脂质体制剂而 言 ,粒径对产品的体内分布可能有较大的影响 ,并直 接影响药物的疗效和不良反应 。因此 ,需要根据所 携带药物的治疗需要 ,特别是药动学和药效学特征 , 设置脂质体粒径范围 ,同时考虑工业生产的可行性 和可重复性 。以 2种多柔比星脂质体产品 M yocet 和 Doxil 为例 ,尽管携带的是同一种药物 ,但是 ,由 于制剂设计思路的不同 ,两者的粒径设定并不相同 。 M yocet 以网状内皮系统为药物储库 ,将药物缓慢释 放进入血液而达到治疗效果 ,因此 ,其平均粒径为