12 第十三章 DNA生物合成作业及答案
第十三章蛋白质的生物合成与修饰

第十三章蛋白质的生物合成与修饰1.假定阅读框开始于下列每个核苷酸序列的头三个碱基,预计以它们为mRNA模板在蛋白质合成中所形成肽链的氨基酸顺序。
(a)GGUCAGUCGCUCCUCCUGAUU(b)UUGGAUGCGCCAUAAUUUGCU(C)CAUGAUGCCUGUUGCUAC(d)AUGGACGAA2.定出所有能够为简单三肽片断Leu-Met-Tyr编码mRNA顺序。
你的答案将给你什么启示?3.如果阅读框固定,一条给定mRNA的碱基顺序仅为一条肽链的氨基酸顺序编码。
从象细胞色素C这样的蛋白质的一个特定氨基酸顺序,你能预计出一条具特定碱基顺序的mR NA 为它编码吗?说明原因。
4.一个双螺旋DNA片断的模板链含有顺序:(5')GTTAACACCCCTGACTTCGCGCCGTCG (a)写出从这条链转录产生的mRNA的碱基顺序;(b)从(a)中的mRNA的5'末端开始翻译产生的肽链的氨基酸顺序是什么;(c)如果这条DNA的互补链被转录和翻译,产生的氨基酸顺序和(b)中的一样吗?解释你的答案的生物学重要性。
5.甲硫氨酸是两个仅有一个密码子的氨基酸之一,这单一的密码子是如何在大肠杆菌中既为起始残基编码又能为多肽链内部的Met残基编码?6.遗传密码是用酶法或化学法合成的多核苷酸破译的,假定我们预先知道遗传密码,你怎样能合成一条多核苷酸链作为mRNA使它大部分编码Phe残基,一小部分编码Leu和Ser 残基?这条多核苷酸链还能编码着极小量的什么氨基酸?7.根据高能磷酸键的消耗计算生物合成血红蛋白产链(14个残基)的最低能量消耗,把计算结果与生物合成一个146葡萄糖残基(αl--> 4)的线形糖原的直接能量消耗作比较。
根据你的计算,合成蛋白质比起糖原多消耗多少能量?除了合成蛋白时直接的能量消耗,还有非直接的能量消耗,细胞必须合成蛋白质合成所需的各种酶。
根据酶法机制比较真核细胞生物合成α l -->4直链糖原和生物合成多肽链的非直接能量消耗的数量差别。
第12章 DNA生物合成

复制起始点,复制叉(replication fork)
(2)真核生物的多点双向复制特性
分子生物学技术简介1
3.半不连续复制(semi-discontinuous replication)
小结【本节基本概念】中心法则、复制(replication)、半保留复制(semiconservative replication)、复制叉(replication fork)、半不连续复制、岡崎片段(Okazaki fragments)、领头链和随从链、引发体
从DNA polI,到介绍工具酶:Klenow fragment,限制性内切酶
图示DNA polIII的组成结构
亚基形成核心酶,合成DNA,3’到5’外切酶,组装;固定核心酶在模板上;使两核心酶二聚化,分别负责领头链和随从链;控制钳开合
列表比较原核、真核生物DNA聚合酶的种类和功能
表12-1,表12-2讲述原核、真核生物各类聚合酶的性能
列表小结:参与DNA复制的主要成员
插入介复制衍生的技术:PCR反应,简介PCR的组分
20min
分解讲述有关原核生物的DNA生物合成的过程
列表展示原核生物起始的相关蛋白
图解方式讲解复制起始点的组成和概念,以及串联重复序列、反向重复序列的识别
用复制叉图示讲解起始过程
【第3学时结束】
40min
图示领头链连续延伸、随从链断续合成的异同以及延伸方向
教案首页
授课时间:2010.11.15~11.19
课程名称
生物化学
年级
2008
专业、层次
检验本科
授课教师
李莉萍
职称
课型(大、小)
大
学时
生化第十三章

第十三章RNA的生物合成一、填空题1.基因转录的方向是从端到端。
2.大肠杆菌RNA聚合酶由和因子组成,其中前者由亚基、____亚基和____亚基组成,活性中心位于_____亚基上。
3.使用_____可将真核细胞的三种RNA聚合酶区分开来。
4.所有真核细胞的RNA聚合酶Ⅱ的最大亚基的C端都含有一段高度保守的重复序列,这段重复序列是_____,它的功能可能是____。
5.第一个被转录的核苷酸一般是_____。
6.原核细胞启动子-10区的序列通常被称为_____,其一致序列是_____。
7.tRNA基因的启动子最重要的特征是______。
8.真核细胞转录因子的功能是_____和______。
9.逆转录酶通常以_____为引物,具有______、_____和______三种酶的活性,使用该酶在体外合成cDNA时常用_____为引物。
10.真核细胞的热鸡蛋白(HSP)上游除了启动子序列以外,还应具有_____、______、____和_____序列。
11.真核细胞Pre-mRNA的后加工方式主要_____、_____、_____、_____、和_____5种。
12.大肠杆菌RNaseP由_____和_____组成,其中_____能独立完成催化,该酶参与_____的后加工。
13.四膜虫Pre-RNA的剪接需要______作为辅助因子。
14.存在于真核细胞Pre-mRNA上的加尾信号是_____,剪接信号是_____。
15.原核细胞基因转录的终止有两种机制,一种是______,另一种是______。
16.核不均一RNA(hnRNA)实际上就是______。
17.使用______技术可以确定一个蛋白质基因是不是断裂基因。
18.所有的反转录病毒的基因都含有______ 、______和______三种基因。
19.HIV的宿主细胞是______。
20.真核细胞三种RNA聚合酶共有的转录因子是______。
21.RNA病毒的进化速度远高于它的宿主细胞是因为_______。
生物化学(11.2)--作业DNA的生物合成(附答案)

CDK(cyclin-dependent kinase) [答案] 即细胞周期蛋白依赖激酶。它是细胞周期调节蛋白的催化亚基,与细胞周期蛋白结合 后,促进细胞周期的运转。
问答题 1. 简述 DNA 复制的基本规律 2. 参与原核生物 DNA 的复制的酶类和蛋白质因子有哪些? 3. 端粒酶的分子组成有何特点?有什么功能? 4. 简述原核生物 DNA 复制的基本过程 5. 简述突变的类型及 DNA 损伤修复类型 6. 试述参与原核生物 DNA 复制过程所需的物质及其作用。 7. 比较 DNA 复制与转录的异同点 8. 列表比较原核生物三种 DNA 聚合酶的特点 9. 催化磷酸二酯键形成的酶有哪些?比较它们的作用特点。 10. 原核生物复制起始的相关蛋白质有哪些?各有何功能 11. 讨论复制保真性的机制 12. 什么是冈崎片段?合成结束时,是如何连接的? 13. 试述细胞周期的调控机制。 14. 简述逆转录的基本过程,逆转录现象的发现在生命科学研究中有何重大研究价值?
Klenow 片段(Klenow fragment) [答案] 是原核生物 DNA-polⅠ 经特异的蛋白质酶水解后产生的大片段,具有 5’→3’核酸外切 酶活性和聚合活性,实验室合成 DNA 及分子生物学研究上,常用 Klenow 片段代替 DNA 聚合酶。
引发体(primosome) [答案] 含有解螺旋酶(DnaB)、DnaC 蛋白、引物酶(即 DnaG 蛋白)和 DNA 的起始复制区域的复 合结构称为引发体。
(简化)第十二章 DNA的生物合成

顺解链方向的子链—前导链的复制是连续进行的; 而滞后链的复制方向与解链方向相反,合成的是不 连续的冈崎片段(okazaki fragment)。 3 5 3
前导链 (leading strand)
解链方向
滞后链 (lagging strand)
5
(三)DNA复制的起点和方向(The starting
Dna B、 Dna C Dna A 5 3
3
DNA拓扑异构酶 SSB 5
前导链的引物一般约为10~60 nt,风崎片段的引物 通常为几个~10多个nt。
2.DNA链的延伸
在DNA聚合酶Ш的催化下,以四种 dNTP为底物,在RNA引物的3’-OH端以磷酸 二酯键连接上dNTP并释放出焦磷酸。随 着母本DNA的解链,新生的DNA链在领头 链和随后链上不断的合成和延伸。两条 子链的合成方向相反。
(二)真核生物的DNA聚合酶
定位 5‘→3’聚合 α β γ δ ε 细胞核 细胞核 线粒体 细胞核 细胞核 + + + + +
5‘→3’外切
3‘→5’外切 功能
-
-
+
线粒体 DNA复制
+
+
核DNA复制 核DNA 的引物合成 修复
核DNA 校读、修复 复制 和填补缺口
真核与原核DNA复制主要酶的区别
DNA复制时,DNA聚合酶必须在RNA引物基础上 从5’→3’方向延伸,而5’端RNA引物去除后因 无引物的存在而不能复制末端序列。
3’ 5’ 5’ 5’ 3’ 5’
5’引物 被切除 后不能 合成
5’引物 被切除 后不能 合成
端粒的合成主要依靠端粒酶(telomerase)来 催化。端粒酶是含RNA的逆转录酶,它以其自 身的RNA为模板, 通过逆转录过程对末端DNA 链进行延长。
第十二章 生物化学DNA合成

复制叉
复制泡的两个复制叉向相反方向移动,双链不断解开, 复制不断向两侧推进。新合成的子代链与亲本链互补,并 形成双螺旋结构的子代DNA。
复制叉会合 处复制终点
连续合成
复制起点
复制起点
亲代 亲代 DNA DNA
不连续合成
复 制
三、DNA是半不连续复制的
3′
5′
新链合成是从5′→3′端进行 的其中一条链从起始点开始连 续合成,并与复制叉前进方向 一致——前导链
DNA复制起始必须精确受到调控,因为每个生命周期复制只 发生一次。现已知,复制起始的时序受到DNA甲基化和细菌 细胞质膜相互作用的影响。
E.Coli 的 oriC DNA是由Dam甲基化酶甲基化的,而甲基化
发 生在回文顺序(5′)GATC的腺嘌呤N6 (m6A),大肠杆菌的
oriC区密布GATC顺序(在245bp的DNA链中含有11个GATC)
P ~ P ~ P
5′
A
5′→3′聚合酶活性
3′ 5′
P P P P P P P P P P P
PPi
P P P P P P
A G C A T C G T A G C A T C G T T C G T A 3′-OH
P P P P
5′
聚合酶催化形成3′磷酸酯键使
单核苷酸随即被添加到3′端
Ⅰ型DNA聚合酶用胰蛋白酶温和处理,可以把5′→3′核
亚基数
1 6(同亚基) 1
功能
识别原点,在特异位点打开DNA双链 DNA解螺旋酶 辅助DnaB与原点结合
HU
引物酶(DnaG) SSB RNA聚合酶 TopoⅡ Dam甲基化酶
19
60 75.6 454 400 32
(完整版)DNA和RNA生物合成习题

《DNA和RNA生物生物合成习题及答案》一、单选题1.σ亚基作为RNA聚合酶全酶组分在转录起始时结合在DNA模板上。
转录延长中,σ亚基( D )。
A. 随全酶在模板上前移 B . 作为终止因子在转录终止时再起作用 C. 在转录延长时发生构象改变 D . 转录延长时脱落E较松弛地结合在模板上2.原核生物DNA指导的RNA聚合酶由数个亚基组成,其核心酶的组成是(A )(A)α2 ββ′(B)ααβ′δ(C)ααβ′(D).ασβ.(E)ααβ′3.识别转录起始点的是(D )(A)ρ因子(B)核心酶(C)RNA聚合酶的α亚基(D)σ因子4.RNA聚合酶催化转录,其底物是(D )(A)ATP、GTP、TTP、CTP (B)AMP、GMP、TMP、CMP(C)dATP、dGTP、dUTP、dCTP (D)A TP、GTP、UTP、CTP5.内含子是指(D )(A)合成蛋白质的模板(B)hnRNA (C)成熟mRNA (D)非编码序列6.外显子是(D )(A)基因突变的表现(B)DNA被水解断裂片段(C)转录模板链(D)真核生物的编码序列7.不对称转录是指(C )(A)双向复制后的转录(B)同一DNA模板转录可以是从5′至3′延长和从3′至5′延长(C)同一单链DNA,转录时可以交替作有义链和反义链(D)没有规律的转录二、填空题1.DNA双链中,可作模板转录生成RNA的一股称为______,其对应的另一股单链称为_____2.DNA的生物合成包括两种方法,即______和______。
RNA的生物合成也包括两种方法,即______和______。
3.参与DNA复制的DNA聚合酶有三种功能,即______、______和______。
4.与解除DNA高级结构有关的酶有______和______,分别起______和______的功能,还涉及一种蛋白因子______,有______和______的功能。
5.DNA复制包括三个阶段______、______和______。
生化·第13章·DNA的生物合成

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生物化学
第十一章 DNA的复制
(一). 原核生物的DNA聚合酶。
现在已知的原核生物DNA聚合酶有三种: 1 . DNA聚合酶Ⅰ 2 . DNA聚合酶Ⅱ 3 . DNA聚合酶Ⅲ
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第十一章 DNA的复制
1 、DNA聚合酶Ⅰ
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第十一章 DNA的复制
(三)、 DNA复制的保真性
DNA复制的保真性至少依赖 三种机理。 1、遵守严格的碱基配对规律。 2、DNA-pol Ⅲ 对碱基的选择功能。 3、复制中出现错误时,DNA-pol Ⅰ 有即时的校读功能。
第一节 第二节 第三节 第四节 第五节
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第十一章 DNA的复制
连接酶的作用
5' 3'
ATP 3'
3' 把连接的缺口放大,示其化学反应。 O ' 5 5' OH 3' + O¯ P 3' O
ATP
P HO
ADP 5'
5' 连接酶
3' 5'
DNA连接酶
ADP
–O
5'
O
O P O
–O
3'
DNA连接酶的作用方式
+ ppi
或 n1dATP n2dCTP n1dTTP + DNA n2dGTP (模板) +2(n1+n2)PPi
DNA聚合酶 Mg 2+,引物
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D.真核生物的DNA复制有多个起点E.以上都是
13关于原核生物DNA聚合酶的叙述,下列哪些说法是正确的
A.DNA聚合酶Ⅰ不是主要的复制酶B.DNA聚合酶Ⅱ是主要的聚合酶
C.DNA聚合酶Ⅲ是主要的聚合酶D.DNA聚合酶Ⅰ能从缺口开始合成新的DNA链
18下列关于端粒与端粒酶的叙述正确的是
A.端粒酶是由RNA与蛋白质两部分组成B.端粒酶是由DNA与蛋白质两部分组成
C.端粒酶是一种反转录酶D.端粒是真核生物染色体DNA的末端结构
C.PolⅡ是主要的复制酶D.PolⅡ具有3’→5’聚合酶活性
E.PolⅠ同时有3’→5’及5’→3’外切酶活性
11关于DNA复制的叙述,下列说法哪些是正确的
A.有固定的复制起始点B.需引物RNA C.真核生物的冈崎片段较原核生物的短
D.催化子链延伸方向为5’→3’E.是连续等速复制
12关于DNA复制起点的叙述,下列哪些是正确的
C.有3’→5’核酸外切酶活性D.以dNTP为底物E.有5’→3’核酸内切酶活性
6 DNA连接酶作用是
A.催化DNA两条链间形成磷酸二酯键B.将螺旋解链
C.催化DNA链两段间形成磷酸二酯键D.去除引物,填补空缺E.催化DNA两条链间形成氢键
7下列哪种过程需要RNA引物A.RNA复制B.DNA复制C.RNA转录D.逆转录E.RNA翻译
A.引物长度较短B.合成方向是5’→3’C.冈崎片段长度短
D.有多个复制起始点E.DNA复制的速度较慢(50dNTP/s)
35着色性干皮病是人类的一种遗传性皮肤病,患者皮肤经阳光照射后易发展为皮肤癌,该病的分子机理是
A.细胞膜通透性缺陷引起迅速失水B.在阳光下使温度敏感性转移酶类失活
C.因紫外线照射诱导了有毒力的前病毒D.细胞不能合成类胡萝卜素型化合物
A.7LH/1HH B.6LL/2LH C.1LL/7LH D.7HH/1LH E.2HH/6LH
2115N标记DNA双链分子,以NH4Cl作为氮源复制,用提取的第1代子代DNA分子做密度梯度离心分析,其密度应位于
A.普通DNA带B.普通DNA带下方C.普通DNA带上方D.“重”DNA带E.普通与“重”DNA带之间
4 DNA复制时,与核苷酸链5’-dTpApGpAp-3’互补的链是
A.5’—dTpCpTpAp-3’B.5’—dUpCpUpAp-3’C.5’—dGpTpGpAp-3’
D.5’—dApTpCpTp-3’E.5’—dGpCpGpAp-3’
5关于大肠杆菌DNA聚合酶I下列说法错误的是
A.对复制及修复过程中的空隙进行填补B.有5’→3’核酸外切酶活性
10在DNA复制中,关于RNA引物错误的说法是
A.由引物酶合成B.合成方向5’→3’C.提供3’-OH末端作为合成新DNA链的起点
D.RNA酶将引物水解去除E.提供5’-P末端作为合成新DNA链的起点
11单链DNA结合蛋白的作用是
A.解开双链B.松弛DNA超螺旋C.稳定和保护单链模板D.合成冈崎片段E.合成RNA引物
逆转录是RNA病毒复制方式,逆转录是以RNA为模板合成DNA,需逆转录酶催化。DNA复制过程中出现错误是突变发生的原因,突变除了自发发生的外,还可因各种物理、化学因素而诱发。物理因素诱发突变如常见的嘧啶二聚体。化学诱变剂种类繁多,而且往往与致癌作用有关。细胞内存在各种修复措施,使损伤的DNA得以复原。主要的修复方式有光修复、切除修复、重组修复和SOS修复等。
E.都具有5’→3’外切酶活性
14 DNA损伤的光修复需A.DNA聚合酶B.糖基化酶C.光修复酶D.转甲基酶E.核酸内切酶
15下列关于DNA聚合酶正确说法是
A.真核生物的DNA-polε与原核生物的DNA-polⅠ作用相似
B.在原核生物细胞内真正起复制作用的酶是DNA-polⅢ
C.α和δ-DNA聚合酶是真核生物DNA复制中起主要作用的酶
D.LexA类蛋白缺乏E.XP类基因缺陷
30关于逆转录酶的叙述,错误的是
A.以单链RNA为模板B.以单链DNA为模板C.水解杂化双链中的RNA
D.促使新合成DNA转入宿主细胞E.能生成cDNA双链
31亚硝酸盐引起分子的突变是
A.形成嘧啶二聚体B.Glu→Gln C.A→G D.C→U E.碱基甲基化
C.DNA→RNA→蛋白质D.RNA→RNA→DNA E.DNA→DNA→蛋白质
17 H.Temin对中心法则的补充内容是
A.RNA→蛋白质B.DNA→rRNA C.DNA→DNA D.RNA→DNA E.DNA→mRNA
18 M.Messelson和F.W.Stahl用15NH4Cl证明的机制是
A.DNA混合式复制B.DNA转录为mRNA C.mRNA翻译为蛋白质
32胸腺嘧啶二聚体阻碍DNA合成的机制是
A.DNA的合成将停止在二聚体处并使其合成受阻B.使DNA聚合酶失活
C.使DNA模板链断裂D.使两股DNA链间形成负超螺旋E.使dNTP无法进入DNA合成链
33镰刀状红细胞贫血与β链有关的突变是A.插入B.断裂C.缺失D.交联E.点突变
34比较真核生物与原核生物的DNA复制,二者的相同之处是
24DNA复制时,合成5’-TAGATCC-3’的互补序列是
A.5’-GGATCTA-3’B.5’-CCTAGAT-3’
C.5’-GGAUCUA-3’D.5’-GGAUAGA-3’E.5’-ATCTAGG-3’
25模板链DNA序列5’-ACGCATTA-3’对应的mRNA序列是
A.5’-ACGCAUUA-3’B.5’-TAATGCGT-3’
D.原核生物的三种DNA聚合酶都有3’→5’核酸外切酶活性
E.DNA-pol II只有3’→5’外切酶活性
16下列叙述与逆(反)转录有关的是
A.以RNA为模板合成DNA的过程B.以RNA为模板合成RNA的过程C.需逆(反)转录酶催化
D.必须有引物存在才能合成E.dNTP是合成原料
17 DNA损伤修复机制包括A.切除修复B.SOS修复C.光修复D.重组修复E.嘧啶二聚体修复
C.5’-UGCGUAAU-3’D.5’-UAATGCGT-3’E.5’-UAAUGCGU-3’
26合成真核生物线粒体DNA的DNA-pol是
A.DNA-polαB.DNA-polβC.DNA-polγD.DNA-polδE.DNA-polε
27关于DNA解螺旋酶的叙述,错误的是
A.rep蛋白是解螺旋酶B.DnaB蛋白是解螺旋酶C.rep蛋白作用时需ATP供能
D.DNA指导的RNA聚合酶E.细胞色素氧化酶
3有关DNA的半保留复制,若将两条链均有同位素标记的DNA分子置于无放射性标记的溶液中复制两代,试问所产生的4个DNA分子的放射性情况如何
A.四个分子均有放射性B.四个分子中,分别有一条链含有放射性
C.两个分子有放射性,两个分子无放射性D.四个分子均无放射性
D.Klenow片段是分子生物学研究中常用的工具酶E.填补合成片段间的空隙
9 DNA聚合酶Ⅰ具有
A.3’→5’外切酶活性B.5’→3’外切酶活性C.5’→3’聚合酶活性
D.3’→5’聚合酶活性E.连接酶活性
10关于DNA聚合酶作用的叙述,下列哪项是正确的
A.PolⅠ在DNA损伤的修复中发挥作用B.PolⅢ是主要的复制酶
22 DNA半保留复制使子代保留了亲代DNA的全部遗传信息,其表现形式是
A.有规律间隔的碱基序列一致性B.代与代之间DNA碱基序列的一致性
C.互补链DNA碱基序列的一致性D.隔代DNA碱基序列的一致性
E.每代都有一条链碱基序列是一样的
23 DNA复制起始复合物引发体的成分不包括A.SSB B.DnaB C.DnaC D.引物酶E.DNA复制起始区
8关于DNA聚合酶I,错误的说法是
A.催化合成的方向是5’→3’B.具有修复损伤的能力C.催化冈崎片段的形成
D.具有核酸外切酶活性E.是原核生物细胞内含量最多的DNA聚合酶
9 DNA拓扑异构酶的作用是
A.将DNA双螺旋解链B.合成RNA引物C.稳定分开的双螺旋
D.将复制中不连续的两段链连接起来E.使DNA解链旋转时不致打结
C.以4种脱氧核苷作底物D.都有核酸外切酶活性E.有α、β、γ、δ和ε5种
4在DNA复制的延长过程中,可以出现的现象有
A.形成复制叉B.形成RNA引物C.形成冈崎片段D.RNA引物水解E.生成磷酸二酯键
5点突变包括A.转换B.颠换C.插入D.缺失E.倒位
6嘧啶二聚体A.由紫外线照射引起B.由相邻的两个核苷酸组成C.是一种点突变
C.均为不连续复制D.新链合成的方向是5’→3’E.最后切去引物,由连接酶连接
2关于DNA复制,下列说法错误的是
A.有RNA指导的DNA聚合酶参加B.为半保留复制C.以四种NTP为原料
D.有DNA指导的DNA聚合酶参加E.有引物酶参加
3关于原核生物的DNA聚合酶,下列说法正确的是
A.DNA聚合酶Ⅲ由10种亚基组成B.DNA聚合酶Ⅱ是真正起复制作用的酶
一、选择题
(单选)
1DNA在复制中所需的底物是
A.AMP、GMP、CMP、UMPB.ADP、GDP、CDP、TDP
C.dAMP、dGMP、dCMP、dUMP D.dADP、dGDP、dCDP、dTDP
E.dATP、dGTP、dCTP、dTTP
2催化DNA半保留复制的酶是
A.DNA指导的DNA聚合酶B.RNA指导的RNA聚合酶C.RNA指导的DNA聚合酶
班级学号姓名
12第十三章DNA生物合成作业及参考答案
通过复制将亲代的遗传信息传到子代,转录和翻译是将遗传物质表达为执行各种生物功能的生物大分子。生物细胞内的DNA复制方式为半保留复制,是遗传信息准确传代的保证。