HPLC法测定柏栀祛湿洗液中绿原酸和黄芩苷的含量
栀子药材中栀子苷的含量测定
1.2.7 样品的含量测定 精密称取干燥、粉碎的栀 子粉末适量，加甲醇 - 水（1 1 1）50 mI，超声振荡提取 30 min，过滤，滤液定容到 100 mI，精密稀释至与对照 品溶液相 近 浓 度，按“ 1 . 2 . 1”项 方 法 测 定 栀 子 苷 含 量，结果见表 1。
Table 1 The contents of sample（s ! = 3）
栀子药材不同部位栀子苷的含量不同［2］，故选 择药材不同药用部位可能有含量的差异。
参考文献
1 中华人民共和国国家药典委员会，中国药典［S］. 一部 . 北京： 化学工业出版社，2000 . 201
2 唐盈 . 栀子及其炮制品京尼平苷的 含 量 测定［J］. 中 药通 报， 1988，1（3 6）：18
Fructus Gardeniae .
Key ords：Fructus Gardeniae；Geniposide；RP - HPLC
CLC number：R917
Document code：A
Article ID：1006 - 010（3 2003）05 - 0374 - 02
栀子来源于茜草科植物栀子属的栀子（ Gardenia jasminoides Ellis）及其同属多种植物的果实，为常用 中药材，具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒的功效， 其主要有效成分为多种环烯醚萜苷类化合物。中国 药典规定［1］：按干燥品计算，含栀子苷（geniposide）不 少于 1.8% 。由于药材栀子来源于多种植物，其品种 的产地不同，质量优劣差异很大，现选择不同品种和产 地的 12 批栀子，用反相高效液相色谱法测定栀子苷含 量，为栀子的优选提供科学依据。
制方法。
关键词：栀子；栀子苷；RP - HPLC
HPLC法测定银黄口服液中绿原酸、黄芩苷和木犀草苷的含量
HPLC法测定银黄口服液中绿原酸、黄芩苷和木犀草苷的含量张静;刘文翔;韩艳婷;岳宣峰;梁延华【期刊名称】《西北药学杂志》【年(卷),期】2011(26)4【摘要】目的建立HPLC法同时测定银黄口服液(金银花、黄芩)中绿原酸、黄芩苷和木犀草苷的方法.方法采用Agilent Eclipse XDB-C18柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm),甲醇-5 mL·L-1磷酸水溶液为流动相的梯度洗脱模式分离各测定组分,根据其在350 nm波长处的峰面积计算样品含量.结果绿原酸、黄芩苷、木犀草苷测定方法的线性范围分别为质量浓度1.6～80.0,4.2～208.0 和0.08～44.0μg·mL-1.样品中各组分含量分别为1.25,9.25和0.2 mg·mL-1.结论该方法简便、快速、准确,适用于该制剂的质量控制.%Objective To develop an HPLC method for determining chlorogenic acid, baicalin and luteolin-7-O-glucoside in Yinhuang Oral Liquid ( Consisting of Flos lonicerae ,Radix scutellariae ). Methods Three active components were separated on an Agilent Eclipse XDB-C15 column ( 250 mm × 4.6 mm, 5 μm ) with a gradient elution mode. The analytes were quantified according to their peak area detected at 350 nm. Results The calibration ranges of chlorogenic acid,baicalin and luteolin-7- O-glucoside were 1.6-80.0,4.2-208.0 and 0.08-44.0 μg · mL-1 ,respectively. And their contents in samples were 1.24,9.25 and 0.2mg · mL-1 ,respectively. Conclusion The proposed method is simple, rapid and accurate. It might be useful in the quality control of the preparation.【总页数】3页(P237-239)【作者】张静;刘文翔;韩艳婷;岳宣峰;梁延华【作者单位】陕西师范大学化学与材料科学学院,陕西,西安,710062;陕西师范大学化学与材料科学学院,陕西,西安,710062;陕西师范大学化学与材料科学学院,陕西,西安,710062;陕西师范大学化学与材料科学学院,陕西,西安,710062;陕西师范大学化学与材料科学学院,陕西,西安,710062【正文语种】中文【中图分类】R927.2【相关文献】1.HPLC同时测定银黄口服液中绿原酸和黄芩苷含量 [J], 桑旭峰;吴海雯;徐奇超2.HPLC法测定银黄口服液中绿原酸和黄芩苷的含量 [J], 钱江3.HPLC法测定明目蒺藜丸中绿原酸和木犀草苷的含量 [J], 赵英奎4.HPLC法测定银黄口服液中绿原酸的含量 [J], 陈志英5.HPLC法测定小儿感冒颗粒中绿原酸、木犀草苷3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、连翘苷的含量 [J], 任菲菲;张静;刘德丽;闫雪;郑艳青因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HPLC法测定银黄片中绿原酸与黄芩苷含量
HPLC法测定银黄片中绿原酸与黄芩苷含量
袁浩;刘永利;李冬梅
【期刊名称】《中国民族民间医药》
【年(卷),期】2011(020)001
【摘要】目的:建立银黄片中绿原酸与黄芩苷的含量测定方法.方法:C18柱
(4.6×150mm,5μm,shim-pack,Shimadzu),流动相:乙腈与0.1%磷酸溶液进行梯度洗脱,检测波长为318nm,流速为1ml·min-1,柱温为室温.结果:绿原酸加样回收率为100.22%,RSD为1.49%;黄芩苷加样回收率为100.45%,RSD为1.16%.结论:方法简便、准确,可用于银黄片的质量控制.
【总页数】2页(P61-62)
【作者】袁浩;刘永利;李冬梅
【作者单位】河北省药品检验所,河北,石家庄,050011;河北省药品检验所,河北,石家庄,050011;河北省药品检验所,河北,石家庄,050011
【正文语种】中文
【中图分类】R927.1
【相关文献】
1.HPLC法测定银黄片中黄芩苷和绿原酸的溶出度 [J], 王敏;贺蕊;龚慕辛;关怀;于萍;贾富霞
2.HPLC-DAD法同时测定银黄含片中黄芩苷和绿原酸的含量 [J], 陈越;蔡小玲;胡频;何洁
3.RP-HPLC测定银黄咀嚼片中绿原酸和黄芩苷的含量 [J], 吕凌;路小东;戴萍萍;刘
光敏
4.HPLC法测定银黄含化片中绿原酸和黄芩苷含量 [J], 钟加成;程金来;刘传峰
5.HPLC法测定银黄含片中绿原酸和黄芩苷的含量 [J], 李坚;冯焕村;杜璐
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HPLC(液相色谱)-绿原酸检测方法
HPLC-绿原酸检测方法2020版本药典有效成分测定参考2020版《中国药典》金银花项下绿原酸和木犀草苷测定的方法，采用高效液相色谱法测定其含量。
2.3.4.1 供试品溶液制备取本品粉末（过四号筛）约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率35kHz)30min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液4ml，置5ml离心管中，摇匀，即得。
2.3.4.2 绿原酸的高效液相色谱检测方法(1) 标准品溶液的配制取绿原酸对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1ml含50µg的溶液，即得对照品溶液10℃以下保存。
(2) 检测条件色谱条件：色谱柱为安捷伦SB-C18柱（250mm×4.6mm，5µm）；流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液（13:87）；检测器为安捷伦G1314B可变波长紫外检测器；流速为1.0ml/min；柱温为25℃；检测波长为327nm；进样量为10µl。
用外标法进行定量。
(3) 标准曲线的绘制分别吸取绿原酸对照品溶液2、4、6、8、10、20µl注入高效液相色谱仪，记录峰面积，以进样量为横坐标X，色谱峰峰面积为纵坐标Y，绘制标准曲线，得回归方程Y = 830.69X -16.516(R2=1)。
(4) 精密度实验取同一浓度的对照品溶液每次进样10µl，连续进样6次，按上述色谱条件测定绿原酸含量，根据检测结果计算相对标准偏差（RSD）。
(5) 稳定性考察分别取同一浓度的对照品溶液10µl，每隔两小时进样一次，连续进样检测６次，根据结果计算相应的相对标准偏差（RSD），检测10小时之内绿原酸的稳定性。
(6) 重现性实验取同一批次的提取样品，在设定的HPLC条件下连续进样6次，测定绿原酸含量，计算标准偏差（RSD）。
HPLC法测定金芩芍注射液中绿原酸·黄芩苷和芍药苷的含量
HPLC法测定金芩芍注射液中绿原酸黄芩苷和芍药苷的含量刘发全;宋亚伟;吴昊;张莉;丁在亮【摘要】[目的]建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定金芩芍注射液中绿原酸、黄芩苷和芍药苷的含量.[方法]色谱柱为Waters公司Symmetry C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A为乙腈,B为0.025 mol/L磷酸溶液,采用梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,测定波长为230 nm,柱温30℃,进样量10μL.[结果]绿原酸、芍药苷和黄芩苷分离度良好,分别在2.52～126.05、1.47～73.78、4.81～250.55μg/mL有良好的线性关系.[结论]该方法精密度高、重复性好、操作简便,适用于金芩芍注射液中绿原酸、芍药苷和黄芩苷的含量测定.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2018(046)024【总页数】3页(P160-161,219)【关键词】金芩芍注射液;绿原酸;黄芩苷;芍药苷;HPLC【作者】刘发全;宋亚伟;吴昊;张莉;丁在亮【作者单位】安徽省兽药饲料监察所,安徽合肥230091;安徽省兽药饲料监察所,安徽合肥230091;安徽省兽药饲料监察所,安徽合肥230091;安徽省兽药饲料监察所,安徽合肥230091;安徽省兽药饲料监察所,安徽合肥230091【正文语种】中文【中图分类】R284.1金芩芍注射液收载于《兽药质量标准》2017年版(中药卷)[1]，主要有金银花、黄芩、白芍3味中药材。
金银花性寒，味甘，入肺、心、胃经，具有清热解毒、疏散风热、凉血止痢、降血降火、消咽利膈之功效，所含有绿原酸为主要药理活性成分[2]，主治畜禽风热感冒、热毒血痢、痈疽疔毒，对多种致病细菌、病毒有抑制作用，具有增强免疫力、护肝、消炎、解热、止血，用于预防和治疗呼吸道感染、肺炎、痢疾、肿溃疡、丹毒等症。
黄芩性寒，味苦，入心、肺、胆、大肠经，具有清热燥湿、凉血安胎、解毒的功效，所含有黄芩苷为主要药理活性成分[3]，主治畜禽温热病，具有抗菌、解热、镇静、利胆、抗炎抗变态反应，用于上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、痈肿疖疮等症。
HPLC法同时测定双黄连注射液中绿原酸、连翘苷、黄芩苷的含量
ＸＢ Ｃ８ （５ ｍ Ｄ ］柱 ２ ０ ｍ×４６ ｍ ５ ｍ）流动相 ： ．ｍ ， ； 甲醇 一 ． ％磷 酸溶液 ， Ｏ２ 线性梯度 洗脱 ， 速为 １０ ｍ ／ ｉ， 测波长为 ３ ４ 流 ． Ｌｍ ｎ 检 ２ ｎ 、８ ｎ ， 温 ３ 。。结果 ： ｍ ２０ ｍ 柱 ０ Ｃ 绿原 酸、 连翘苷 、 黄芩苷 的线性 范围分别 为 Ｏ０ ３ ．６ 、．２ ～Ｏ４ ０ Ｏ３ ８ ．６ ｇ ．９ ～１８ ０ ００ ２ ．４ 、 ． ～６５ ０ ， ２ 三种成分 的含量分别为绿原酸 ０ ４ ｍ ／Ｌ 连翘苷 Ｏ１ ｍ ／ Ｌ黄芩苷 ７ ０ ｇｍ 。结论 ： ． ３ ｇｍ 、 ０ ．３ ｇｍ 、 ． ｍ／Ｌ ９ 该方法简便 、 快速 、 准确 ， 可作 为
技 ｊ 《 ．
司 ） 。
科 技 经 济 市 场
２５ 精 密度试 验 ．
绿 原 酸 （ 号 １０５ — ０４ ３ 、连 翘 苷 （ 号 批 １７ ３２ ０ １ ） 批 １０ ２— ０ ７ １ 、 芩 苷 （ 号 １０ １—０ ０６ 对 照 １８ １２０ １ ）黄 批 １７５ ２ １１ ）
双 黄 连 注 射 液 的质 量 控 制 方 法 。 关键词 ： 双黄连 注射液； 高效液相色谱法 ； 绿原酸 ； 翘苷 ； 连 黄芩苷
双 黄 连注 射液 由金 银 花 、 芩及 连 翘 三 味 中药 提 黄
较 复 杂 的流 动 相体 系测 定 ３种成 分 【 ２ ～。本 文采 用 线
取精制而成 ， 具有清热解毒 、 疏风解表的功效 。 用于外 感风热所致 的感 冒、 上呼吸道感染 、 轻型肺炎 、 扁桃体 炎等【 中国药典（００版） ３ １ ｌ 。 ２１ 对 种成分的测定都采用
级。
立上还需要进一步完善 ， 特别是客户的满意度评价指 标 的建立 。现有 方法 只能 是定 性 的说 能否满 足 客户需 求 ，而依据往往是客户简单的满意或不满意 的反馈 ， 不 能定 量 的进 行评 价 ， 主要 难 点 是 ：１根据 服 务 的对 （）
HPLC测定清火退热口服液中绿原酸、黄芩苷的含量
HPLC测定清火退热口服液中绿原酸、黄芩苷的含量
张国勇;梁晓美;刘帅英
【期刊名称】《中国中医药科技》
【年(卷),期】2015(022)006
【摘要】目的:建立同时测定清火退热口服液中绿原酸、黄芩苷的方法.方法:应用高效液相色谱法测定,色谱柱为Agilent XDB-C18色谱拄(4.6mm×250 mm,5um);流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液,梯度洗脱;流速为0.9 mL·min-,柱温为30℃,检测波长为305 nm.结果:绿原酸、黄芩苷的线性范围分别为6.12～102.4 nmg·L-1(r
=0.9992)、25.95～103.9 mg·L-1(r =0.9996);平均加样回收率分别为96.9％(RSD=1.25％)、97.2％(RSD=1.08％).结论:该方法简便易行、准确、重复性好,可用于清火退热口服液的质量控制.
【总页数】2页(P650-651)
【作者】张国勇;梁晓美;刘帅英
【作者单位】浙江省丽水市人民医院丽水323000;浙江省丽水市人民医院丽水323000;浙江省丽水市食品药品检验所丽水323000
【正文语种】中文
【相关文献】
1.HPLC测定小儿退热口服液中绿原酸与黄芩苷含量 [J], 范全民
2.HPLC法测定小儿退热口服液中绿原酸的含量 [J], 魏尊喜
3.HPLC法测定小儿退热口服液中绿原酸和丹皮酚含量 [J], 柯鹏颉
4.HPLC法测定银黄口服液中绿原酸、黄芩苷和木犀草苷的含量 [J], 张静;刘文翔;
韩艳婷;岳宣峰;梁延华
5.HPLC法同时测定金黄连口服液中绿原酸和黄芩苷的含量 [J], 莫迎;徐东来因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
实验八高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量
实验八高效液相色谱法测定双黄连口服液中黄芩苷的含量一、目的要求1．练习使用高效液相色谱仪2．学会用外标法定量分析二、实验原理外标法可分为外标一点法、外标二点法及标准曲线法。
当标准曲线截距为零时，可用外标一点法进行定量。
利用高效液相色谱法进行分离双黄连口服液中的黄芩苷，在λmax274nm 处进行检测。
在药物分析中，为了减小实验条件波动对分析结果的影响，采用随行外标一点法定量，即每次测定都同时进对照品与供试品溶液。
三、仪器与试药1．仪器高效液相色谱仪、超声波提取器、分析天平、微量注射器、ODS-C18反相色谱柱、容量瓶（25ml，50ml）2．试药黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所）、双黄连口服液（三精制药）、甲醇（色谱纯）、冰醋酸（A·R）、双蒸水。
四、实验内容与步骤1．色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇－水－冰醋酸（50：50：1）为流动相；检测波长为274nm。
理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于1500。
2．对照品溶液的制备精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加50%甲醇制成每1ml含0.1mg 的溶液，0. 45μm滤膜滤过，即得（浓度为0.1216mg/ml）。
3．供试品溶液的制备精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理20分钟，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，0. 45μm滤膜滤过，即得。
4．样品测定分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每1ml含黄芩以黄芩苷计不得少于8mg。
五、思考题1、HPLC中常用的定量方法有几种？外标一点法有何优缺点？2、紫外检测器的优缺点是什么？教你如何用WORD文档(2012-06-27 192246)转载▼标签：杂谈1. 问：WORD 里边怎样设置每页不同的页眉？如何使不同的章节显示的页眉不同？答：分节，每节可以设置不同的页眉。
文件――页面设置――版式――页眉和页脚――首页不同。
银黄颗粒中黄芩苷和绿原酸的含量测定实验报告
实验主题：银黄颗粒中黄芩苷和绿原酸的含量测定实验报告实验目的：1.测定银黄颗粒中黄芩苷和绿原酸的含量，为其质量控制提供依据。
2.研究分析银黄颗粒中黄芩苷和绿原酸的含量变化规律。
实验方法：1.试验仪器及设备：1）超高效液相色谱仪（UHPLC）2）准确电子天平3）0.45um微孔滤膜4）色谱仪色谱柱2.试验材料：1）银黄颗粒样品2）黄芩苷和绿原酸标准品3）甲醇4）乙腈5）超纯水3.试验步骤：1）样品制备：取适量银黄颗粒样品，加入适量甲醇与乙腈混合溶解，过滤收集溶液。
2）色谱条件设置：色谱柱为C18色谱柱，流动相为甲醇-0.1甲酸溶液，梯度洗脱。
3）检测参数：流速1.0ml/min，波长分别为330nm和280nm。
4）标准曲线绘制：用黄芩苷和绿原酸标准品分别制作标准曲线。
5）样品测定：将样品溶液注入色谱仪进行测定，记录浓度数据。
实验结果与分析：1. 黄芩苷和绿原酸的含量测定结果如下：-黄芩苷含量：XX mg/g-绿原酸含量：XX mg/g2. 分析结果表明，银黄颗粒中黄芩苷和绿原酸的含量符合国家药典规定标准，达到了临床应用要求。
结论与建议：1. 通过本次实验，成功测定了银黄颗粒中黄芩苷和绿原酸的含量，为其质量控制提供了可靠依据。
2. 建议在今后的生产过程中严格按照国家药典规定标准进行生产，确保银黄颗粒的质量稳定可靠。
参考文献：[1] 张三，李四. 银黄颗粒中黄芩苷和绿原酸的含量测定. 我国药学杂志，2019，31（3）：102-105.[2] 王五，赵六. 超高效液相色谱法测定药材中黄芩苷和绿原酸的含量. 药物分析，2018，28（6）：32-35.实验结果与分析：银黄颗粒是一种常见的中药材料，被广泛用于治疗感冒、咽喉肿痛等疾病。
作为中药材料的主要成分之一，黄芩苷和绿原酸的含量直接关系到银黄颗粒的药效和质量。
本次实验使用超高效液相色谱仪（UHPLC）对银黄颗粒中黄芩苷和绿原酸的含量进行了测定，结果如下：1. 黄芩苷含量测定结果为XX mg/g2. 绿原酸含量测定结果为XX mg/g从测定结果来看，银黄颗粒中黄芩苷和绿原酸的含量均在国家药典规定标准范围内，符合临床应用要求。
关于高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸黄芩苷连翘苷汉黄芩苷的含量
关于高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷的含量【摘要】：目的建立同时测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素含量的高效液相色谱法。
方法采用VP-ODS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液梯度洗脱；流速：1.0 mL/min；检测波长：278 nm。
结果绿原酸在0.44～6.60 μg范围内线性关系良好(r＝0.999 1)，平均回收率为97.0%；黄芩苷在0.52～6.18 μg范围内线性关系良好(r＝0.999 1)，平均回收率为98.98%；连翘苷在0.20～2.04 μg范围内线性关系良好(r＝0.999 3)，平均回收率为103.55%；汉黄芩素在0.13～1.76 μg范围内线性关系良好(r＝0.999 1)，平均回收率为96.49%。
结论本方法简便可行、准确、快速，可用于双黄连口服液中上述4种成分的含量测定。
【关键词】双黄连口服液绿原酸黄芩苷连翘苷汉黄芩素高效液相色谱法含量测定Abstract：Objective To establish a HPLC method for the determination of chlorogenic acid， baicaliin， forsythin and wogonin in Shuanghuanglian oral liquid. Methods The column was VP-ODS C18 (250mm×4.6 mm， 5 μm). The mobile phase consisted of acetonitrile-0.2% phosphoric acid with gradient elution. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength was at 278 nm. Results The calibration curves were linear within the range of 0.44～6.60 μg (r＝0.999 1) for chlorogenic acid， 0.52～6.18 μg (r＝0.999 1) for baicaliin， 0.20～2.04 μg (r＝0.999 3) for forsythin (r＝0.999 3) and 0.13～1.76 μg (r＝0.999 1) for wogonin， respectively. The average recovery of them were 97.0% (RSD＝1.1%)， 98.98% (RSD＝1.1%)， 103.55% (RSD＝1.1%) and 96.49% (RSD＝1.1%)， respectively. Conclusion The method is simple，practicable， accurate and rapid. It can be applied to content determination of chlorogenic acid， baicaliin， forsythin and wogonin in Shuanghuanglian oral liquid.Key words：Shuanghuanglian oral liquid；chlorogenic acid；baicaliin；forsythin；wogonin；HPLC双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘经提取精制而成，具有辛凉解表、清热解毒功效，对于上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌和病毒感染性疾病有一定疗效。
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HPLC
法测定柏栀祛湿洗液中绿原酸和黄芩苷的含量
发表时间：
2014-04-14T14:38:56.310Z 来源：《医药前沿》2014年第2期供稿 作者： 温昌泓1 左宏笛2
[导读] 柏栀祛湿洗液由黄柏、黄芩、大黄、栀子、金银花等20味药物组成，具有清热解毒、祛湿止带之功效。
温昌泓
1 左宏笛2（通讯作者）
（1贵州省食品药品检验所 贵州贵阳 550004）
（2贵阳市食品药品检验检测中心 贵州贵阳 550004）
【摘要】目的 建立测定柏栀祛湿洗液中绿原酸和黄芩苷含量的方法。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil ODS2C18柱，
流动相为乙腈
-0.4%磷酸水溶液(梯度洗脱)，流速为1.0ml/min，柱温为35℃，检测波长为318nm。结果 绿原酸的进样量在0.06512～
0.5861μg
范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系（r=1.000 0）；黄芩苷的进样量在0.1246～1.121μg范围内与其峰面积积分值呈良好
的线性关系（
r=1.000 0）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD均≤1.6%。平均加样回收率：绿原酸为98.71%，RSD=1.2%（n=6），黄
芩苷为
102.84%，RSD=1.5%（n=6）。结论 本方法便捷、准确、重复性好，适用于柏栀祛湿洗液的质量控制。
【关键词】 柏栀祛湿洗液 绿原酸 黄芩苷 高效液相色谱法 含量测定
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2014）02-0343-02
柏栀祛湿洗液由黄柏、黄芩、大黄、栀子、金银花等20味药物组成，具有清热解毒、祛湿止带之功效，用于霉菌性阴道炎，滴虫性阴
道炎证见带下量多，色黄，阴痒等的治疗，方中金银花具有清热解毒，疏散风热的功能，其中绿原酸为其主要有效成分，被证明具有抗
菌、抗病毒等多种作用
[1];黄芩具有清热燥湿，泻火解毒的功效，其中黄芩苷被发现具有抗菌、抗病毒等多种作用[2]。柏栀祛湿洗液现行标
准
[3]中无含量测定控制。为了更好有效地控制本品质量，保证临床用药安全、有效，本实验参考有关文献[4-7]，选用HPLC法对制剂中绿
原酸和黄芩苷的含量测定研究，建立了分离效果好，便捷可行的含量测定方法，可用于该制剂的质量控制。
1 材料
1.1 仪器、
Agilent 1100型高效液相色谱仪(二极管阵列检测器)及其色谱工作站数据处理系统;XS205型双量程电子天平（瑞士梅特勒-托利多公
司）。
1.2 药品与试剂
绿原酸、黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110753-200012、715-200010，供含量测定用）；柏栀祛湿洗液（贵州浩
诚药业有限公司，批号：
20070601、20070602、20070603）：乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为重蒸馏水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性
色谱柱：Hypersil ODS2C18柱(4.6mm×200mm,5μm);流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.4%磷酸水溶液,梯度洗脱程序见表1；流
速：
1.0ml/min;柱温：35℃；检测波长：318nm；进样量：10μl。在上述色谱条件下，样品中绿原酸色谱峰、黄芩苷色谱峰与其他成分的色
谱峰能达到较好的基线分离，分离度大于
1.5，理论板数以绿原酸峰和黄芩苷峰计算应不低于5000。
表1 梯度洗脱程序
Tab1 Gradient elution process
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品16.28mg、黄芩苷对照品15.57mg，分别置于100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
度，摇匀，即得储备溶液（绿原酸浓度
0.1628mg/ml,黄芩苷浓度0.1557mg/ml),并于10℃以下保存。分别精密量取上述对照品储备溶液10ml
与
20ml，置于一50ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（绿原酸浓度0.03256mg/ml,黄芩苷浓度0.06228mg/ml)。
2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取样品10ml,置50ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45?m）滤过，作为供试
品溶液。
2.2.3 阴性对照溶液的制备 贵州浩诚药业有限公司提供，照“2.2.2”项下方法制备阴性对照溶液。
2.3 专属性试验
精密吸取上述对照品溶液、供试品溶液与阴性对照溶液各10μl，分别注入HPLC仪进样，记录色谱图。结果表明，供试品色谱中呈现与
对照品色谱保留时间一致的色谱峰，阴性对照对测定无干扰。色谱见图
1。
图1 高效液相色谱图
A．对照品；B.供试品；C.阴性对照(缺金银花);D.阴性对照(缺黄芩);1.绿原酸 2.黄芩苷
2.4 线性关系考察
分别精密吸取“2.2.1”项下的对照品溶液2、6、10、14、18μl，按“2.1”项下色谱条件进行测定。以进样量（x,μg）为横坐标，相应峰面
积
(y)为纵坐标，进行线性回归。得绿原酸回归方程Y=2719.28X-2.28（r=1.000 0），黄芩苷回归方程Y=2020.40X-2.47（r=1.000 0）。结
果表明，绿原酸的进样量在
0.06512～0.5861μg范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系，黄芩苷的进样量在0.1246～1.121μg范围内与
其峰面积积分值呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验
精密吸取“2.2.1”项下的对照品溶液适量，按“2.1”项下色谱条件进样重复测定6次。结果，绿原酸RSD=1.1%，黄芩苷RSD=1.4%，表明
仪器精密度良好。
2.6 稳定性试验
精密吸取“2.2.2”项下同一供试品溶液（批号：20070601）适量，按“2.1”项下色谱条件分别于配制后0,4,8,14,24,36h依次进样测定。结
果，绿原酸峰面积与黄芩苷峰面积基本不变，
RSD分别为1.6%和1.2%，表明供试品溶液在36h内基本稳定。
2.7 重复性试验
精密吸取同一批号样品（批号：20070601）适量，共6份，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，再按“2.1”项下色谱条件进样测定和计
算。结果，绿原酸平均含量为
0.163mg/ml(RSD=1.5%),黄芩苷平均含0.290mg/ml(RSD=1.1%)，表明本方法重复性良好。
2.8 加样回收率试验
精密吸取已知含量的本品内容物5.00ml，共6份，分别置于50ml量瓶中，分别加入绿原酸对照品储备溶液5ml与黄芩苷对照品储备溶液
10ml
，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，并按“2.1”项下色谱条件进样测定，计算加样回收率，结果见表2、表3。
表2 绿原酸的加样回收率试验结果（n=6）
Tab2 Results of recovery tests of chlorogenic acid（n=6）
2.9 样品含量测定结果
分别取3批样品适量，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，并按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，计算含量。结果见表4。
表4 样品含量测定结果（n=3）
Tab4 Results of content determination of samples（n=3）
图2 紫外光谱图
A. 黄芩苷;B. 绿原酸
3.2 色谱流动相的选择
绿原酸与黄芩苷均显弱酸性，但极性有较大差异，试验发现，采用等度洗脱无法同时测定二者含量，参考有关文献[4-7]，分别考察了
以甲醇
-0.2%磷酸水溶液、甲醇-0.4%磷酸水溶、乙腈-0.1%磷酸水溶、乙腈-0.4%磷酸水溶等系统作为流动相，梯度洗脱的试验结果，发现
以甲醇
-0.2%磷酸水溶及乙腈-0.1%磷酸水溶为流动相时，分离度差且基线较明显漂移，以乙腈-0.1%磷酸水溶为流动相时，分离度较差，
以乙腈
-0.4%磷酸水溶为流动相能实现完全分离且基线无明显漂移。
参考文献
[1] 吴卫华，康桢，欧阳冬生等．绿原酸的药理学研究进展[J]．天然产物研究与开发，2006，18:691－694.
[2] 初正云，初明，滕宇.黄芩苷体内抗流感病毒作用[J]．中国中药杂志，2007，32(22):2413－2415.
[3] 柏栀祛湿洗液.国家药品监督管理局标准（试行）：WS-5886(B-0886)-2002.
[4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].2010年版.北京：中国医药科技出版社.2010:205-206.282-283.
[5] 胡春湘，陈忠梁，张正光.HPLC法测定银黄片中绿原酸和黄芩苷的含量[J]．中成药，2003,25（5）：418.
[6] 钱江.HPLC法测定银黄口服液中绿原酸和黄芩苷的含量[J]．中成药，2003,25（2）：116.
[7] 杨秀娟，王坤.高效液相色谱法测定银黄冲剂中绿原酸和黄芩苷的含量[J].中国药事，2004,18（12）：752.