细胞ROS测定试剂盒说明书1
Annexin-V-FITC细胞凋亡检测试剂盒

2. Yang L, Zhou X, Yang J, Yin X, Han L, Zhao D. Aspirin inhibits cytotoxicity of prion peptide PrP106-126 to neuronal cells associated with microglia activation in vitro. J Neuroimmunol. 2008 Aug 13;199(1-2):10-7.
分钟,收集细胞,用50-100μl Annexin V-FITC结合液轻轻重悬细胞,涂片后,荧光显微镜下观察。 2. 对于贴壁细胞:
A. 把细胞培养液吸出至一合适离心管内,PBS洗涤贴壁细胞一次,加入适量胰酶细胞消化液(可含有EDTA)消化细胞。 室温孵育至轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶细胞消化液。需避免胰酶的过度消化。
使用说明:
1. 对于悬浮细胞: A. 在进行完细胞凋亡刺激后,1000g (约1000-2000rpm)离心5分钟,弃上清,收集细胞,用PBS轻轻重悬细胞并计数。 注意:PBS重悬不能省略,PBS重悬的过程同时也起到了洗涤细胞的作用,可以保证后续Annexin V-FITC的结合。
B. 取5-10万重悬的细胞,1000g离心5分钟,弃上清,加入195μl Annexin V-FITC结合液轻轻重悬细胞。 C. 加入5μl Annexin V-FITC,轻轻混匀。 D. 室温(20-25℃)避光孵育10分钟。可以使用铝箔进行避光。 E. 1000g离心5分钟,弃上清,加入190μl Annexin V-FITC结合液轻轻重悬细胞。 F. 加入10μl碘化丙啶染色液,轻轻混匀,冰浴避光放置。 G. 随即进行流式细胞仪检测,Annexin V-FITC为绿色荧光,PI为红色荧光。如果用于荧光显微镜下检测,1000g离心5
谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB法)说明书

谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB 法)产品简介:谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB 法) (Glutathione Reductase Assay Kit with DTNB)是一种简单易行的通过比色法来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase, GR)活性的试剂盒。
谷胱甘肽还原酶在许多组织中都有分布,可以维持细胞内充足的还原型谷胱甘肽(GSH)水平。
GSH 可以清除自由基和一些有机过氧化物,或作为谷胱甘肽氧化酶(Glutathione peroxidase)的底物来清除一些过氧化物。
谷胱甘肽还原酶可以还原氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成还原型谷胱甘肽(GSH),而GSH 可以和生色底物DTNB 反应产生黄色的TNB 和GSSG ,并可以通过测定A 412来检测TNB 的生成量。
适当设置应体系,前后两个反应合并起来后,GSSG/GSH 过量而GR 相对不足时,该反应体系中谷胱甘肽还原酶就成为整个反应体系的限速因素,此时黄色的TNB 生成量和谷胱甘肽还原酶的活性呈线性正相关。
从而通过测定A 412就可以计算出谷胱甘肽还原酶的活性水平。
本试剂盒的具体反应原理如下:两个反应相合并:本试剂盒检测肝脏样品的检测效果如图1所示。
图中可见,对于肝脏样品可以检测到比较强的谷胱甘肽还原酶的活性并且有很好的剂量效应。
图1. 谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB 法)用于肝脏裂解样品的实测效果图。
本试剂盒可以检测组织匀浆液上清、细胞裂解液上清等生物样品中的谷胱甘肽还原酶的活性。
一个试剂盒共可以进行100次检测。
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线: 400-1683301或800-8283301 订货e-mail :****************** 技术咨询: ***************** 网址: 碧云天网站 微信公众号保存条件:-20ºC保存,一年有效。
Elabscience 一氧化氮(NO)比色法测试盒说明书

(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)Elabscience®一氧化氮(NO)比色法测试盒Nitric Oxide (NO) Colorimetric Assay Kit产品货号:E-BC-K035-S产品规格:50 assays(48 samples)/100 assays(96 samples)检测仪器:紫外-可见光分光光度计(550 nm)使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测血清、血浆、及动植物组织样本中的NO含量。
检测原理NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2-,与显色剂生成淡红色偶氮化合物(如下图),生成偶氮化合物的浓度与NO的浓度具有线性关系,通过比色可以间接计算NO的浓度。
试剂一和试剂二的作用,为除去样本有色物质的干扰。
本试剂盒检测组织样本时,需测定总蛋白浓度,推荐使用本公司BCA试剂盒(货号E-BC-K318-M)进行测定。
提供试剂和物品说明:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂,使用前请先离心,以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器:紫外-可见光分光光度计(550nm)、涡旋混匀仪、磁力搅拌器、分析天平、微量移液器(1000 μL,200 μL,100 μL,10 μL)、离心机、烧杯(50 mL,25 mL)。
耗材:枪头(1000 μL,200 μL,10 μL)、EP管(5 mL,2 mL)、吸水纸、擦镜纸、磁力搅拌子。
试剂:双蒸水、生理盐水(0.9% NaCl)或PBS(0.01 M,pH 7.4)。
试剂准备①试剂盒中的试剂平衡至室温。
②试剂四工作液:将试剂四加入37.5 mL双蒸水溶解,混匀即可,2-8℃避光保存2个月。
线粒体复合体Ⅰ活性检测试剂盒说明书 微量法

线粒体复合体Ⅰ活性检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0515规格:100T/96S产品内容:提取液:液体75mL×2瓶,4℃保存;试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1支,4℃保存;临用前加入1mL丙酮。
试剂三:粉剂×1支,-20℃保存;溶于1mL丙酮,可分装后-20℃保存。
临用前再用丙酮100倍稀释后使用,现用现配。
试剂四:粉剂×1支,-20℃保存;临用前加入2mL蒸馏水,现配现用;工作液的配制:临用前将试剂二和试剂三1:1混合,现配现用。
产品说明:复合体Ⅰ(EC1.6.5.3)又称NADH-CoQ还原酶或NADH脱氢酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,是线粒体内膜中最大的蛋白复合物。
该酶催化一对电子从NADH传递给CoQ,同时可使还原生成O2-,是呼吸电子传递链上产生O2.-的主要部位。
测定该酶活性,不仅可以反映呼吸电子传递链(ETC)O2状态,而且可以反映活性氧(ROS)生成状态。
复合体Ⅰ能够催化NADH脱氢生成NAD+,在340nm下测定NADH的氧化速率计算出该酶活性的大小。
试验中所需的仪器和试剂:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/石英96孔板、研钵/匀浆器、丙酮、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、复合体的提取:(1)称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1.0mL提取液,用匀浆器或研钵于冰上匀浆。
(2)4℃600g离心10min。
(3)将上清液移至另一离心管中,4℃11000g离心15min。
(4)上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做,可以判断线粒体提取效果)。
(5)在沉淀中加入400μL提取液,超声波破碎(功率20%,超声5秒,间隔10秒,重复15次),用于复合体Ⅰ酶活性测定,并且用于蛋白含量测定。
自己翻译的罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书

罗氏tunel检测细胞凋亡试剂盒说明书注意:Label溶液含有甲次砷酸盐和二氯化钴,严禁吸入和食入。
反应悬浮物收集于密闭、不易碎、有明确标识的容器中,按有毒废物处理。
除上表所列试剂外,还需准备以下溶液。
下表列出每步所需物品概览:特异性:TUNEL反应优先标记凋亡产生的DNA链断裂,从而辨别凋亡与坏死、以及由抑制细胞生长的药物或放射线产生的primary DNA链断裂实验干扰:假阴性:在某些型式的凋亡细胞中DNA链断裂可能缺失或不完全。
空间位阻,如细胞外元件可能阻止TdT到达DNA断裂处。
两种情况均能产生假阴性。
假阳性:在坏死晚期,可能产生大量的DNA片段DNA链断裂也可能在具有高增殖和代谢活动的细胞中出现。
两种情况均能产生假阳性。
为确认细胞死亡的凋亡型式,应认真进行每种细胞的形态学检查凋亡过程中产生的形态学改变尤其特征形式,因此,对于可以结果进行解释时,细胞形态评估是一项重要的参数样本:细胞离心涂片和细胞涂片在chamber slides上培养的黏附细胞冰冻或福尔马林固定、石蜡包埋样本分析时间:2-3小时,除外培养、固定和渗透检测次数:一个试剂盒50T试剂盒存储/稳定性:未开封试剂盒储存于-15~-25℃可稳定至标签上标明的效期。
1 流程图:2 样品准备2.1 黏附细胞、细胞涂片和细胞离心涂片需准备的其他试剂:Washing buffer:磷酸盐缓冲液(PBS)Blocking buffer封闭溶液:甲醇稀释的3% H2O2Fixation solution固定溶液:PBS配制的4%多聚甲醛,ph 7.4,新鲜配制Permeabilisation solution 渗透液:0.1%Triton1)X-100溶于0.1%柠檬酸钠溶液中,新鲜配制步骤:下表描述了细胞固定、内源性过氧化物酶封闭和细胞渗透过程。
2.2 组织部分2.2.1 福尔马林-包埋组织福尔马林包埋组织的预处理:可按4种不同的方式预处理。
Vero 细胞 HCP(宿主残留蛋白)ELISA试剂盒说明书

Vero 细胞HCP(宿主细胞蛋白)Vero细胞宿主蛋白酶联免疫检测目录#F500预期用途该试剂盒用于检测用Vero 细胞.生产的制品中是否有宿主蛋白残留。
仅供研究和工业生产,不能用于人和动物的诊断。
总结与说明病毒疫苗或其他治疗用蛋白在Vero细胞中表达使商业用大量生产药物原料产品的经济简便方法。
生产和纯化这些产品的过程中会残留Vero细胞中的一些蛋白质(称为宿主细胞蛋白,HCPs)而造成污染。
这种污染可以减少药物的疗效,引发毒副反应和免疫学反应,因此最好在实际生产制品过程中将HCPs降低到最低水平。
一些利用抗体来除HCPs的免疫学方法,如Western Blot 和ELISA被广泛使用。
虽然Western blot是一种检测HCPs的有效方法,但它受到了一些限制。
因为它过程复杂且技术依赖性强,需要操作者对结果进行分析解释。
而且,它在本质上是一种定性检测,不能定量分析。
Western blot的敏感性易受被检测样品量的影响,也受目的产品浓度的干扰。
因此Western blot可用来检测纯化上游的蛋白质,而对纯化下游或终产品的检测灵敏度与特异性较低。
本试剂盒中用到的ELISA方法克服了Western Blot的缺点,将敏感度提高了100倍。
ELISA操作简单、客观、可获得半定量的结果,是纯化工艺,过程控制,常规质量检测的最佳选择。
这个试剂盒可与纯化过程中残留的可独立污染产品的所有HCPs反应,就这个意义上来说,这个试剂盒是通用的。
用Vero细胞轻度裂解物获得抗体并经亲和纯化,得到的最终抗体可以与用于生产各种病毒疫苗和蛋白质产品的四种商用细胞系反应。
这一分析表明,绝大多数HCP存在于各种Vero细胞系和纯化过程中。
如果你需要一个更为敏感和特异性的方法去检测样品中的HCP量,Cygnus Technologies公司为你推荐一个优于2D Western blot的方法,我们将这个方法称为2D HPLC-ELISA。
小鼠IL-10 ELISA试剂盒说明书
小鼠IL-10ELISA试剂盒Mouse IL-10ELISA kitCat#:EMC005尊敬的客户,感谢您选用本公司QuantiCyto®ELISA系列产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业体外诊断试剂生产技术制造,仅供科研使用。
本产品可检测血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等多种类型样本中天然和重组小鼠IL-10浓度,具体适用样本请咨询。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分。
如有疑问,请联系欣博盛生物科技有限公司。
Email:**********************,全国服务热线: 4006800892。
QuantiCyto ®EMC005Mouse IL-102试剂盒组成:名称48T 96T 抗体预包被酶标板8×68×12冻干标准品0.5ng /支×2支0.5ng /支×3支标准品&标本通用稀释液12ml×1瓶20ml×1瓶浓缩生物素化抗体1支(规格见标签)1支(规格见标签)生物素化抗体稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩酶结合物1支(规格见标签)1支(规格见标签)酶结合物稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩洗涤液20×25ml×1瓶50ml×1瓶显色底物(TMB )6ml×1瓶12ml×1瓶反应终止液具腐蚀性6ml×1瓶12ml×1瓶封板胶纸3张6张产品说明书1份1份储存条件:未开封完整试剂盒4℃保存,请在保质期内使用。
已开封试剂盒抗体包被板条未用完的板条放回带拉链铝箔袋,封好口。
4℃条件下可储存1个月左右。
标准品冻干粉-20℃可储存6个月左右。
稀释后的标准品使用后请丢弃。
浓缩生物素化抗体浓缩液4℃可储存1个月左右,稀释后即用即弃。
PH0630 活性氧检测试剂盒实验操作手册 Phygene
PH0630|活性氧检测试剂盒Reactive Oxygen Species Assay KitCatalog No:PH0603Size:☐100~500Tests Store at-20℃活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit)是一种基于荧光染料DCFH-DA(2,7-Dichlorodi-hydrofluorescein diacetate)的荧光强度变化,定量检测细胞内活性氧水平的最常用方法。
DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜。
进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。
而DCFH不会通透细胞膜,因此探针很容易被积聚在细胞内。
细胞内的活性氧能够氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。
绿色荧光强度与活性氧的水平成正比。
在最大激发波长480nm,最大发射波长525nm处,使用荧光显微镜,流式细胞仪或激光共聚焦显微镜等检测荧光信号。
Rosup为活性氧阳性诱导药物,根据其荧光信号强度,可分析活性氧的真正水平。
根据检测体系和检测方法的不同,本试剂盒可测定100~500次。
试剂存储冰袋运输。
-20℃干燥避光保存,有效期一年。
试剂组分编号组分规格保存方法PH0630-A DCFH-DA(10mM)0.1mL-20℃,避光保存PH0630-B活性氧阳性对照(Rosup,100mM) 1.0mL-20℃,避光保存使用说明检测步骤1.装载探针1.1原位装载探针(仅适用于贴壁细胞)①细胞准备:检测前一天进行细胞铺板,确保检测时细胞汇合度达到50~70%。
【注】:必须保证细胞状态健康,且检测时不会过度生长。
②药物诱导:去除细胞培养液,加入适量经合适的缓冲液或无血清培养基稀释到工作浓度的药物,于37℃细胞培养箱内避光孵育,具体诱导时间根据药物本身特性,以及细胞类型来决定。
(可选)阳性对照:先用无血清培养基等稀释阳性对照(Rosup,100mM)到常用工作浓度100μM,加入细胞,一般37℃避光孵育30min-4h 可显著看到活性氧水平提高,但依细胞类型会有比较明显差异。
cellsearch循环肿瘤细胞ctc试剂盒说明书自译中文版
790000116人份试剂盒Cell Search循环肿瘤细胞检测试剂盒(上皮细胞)IVD使用须知本试剂盒仅用于体外诊断CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒用于外周血中循环肿瘤细胞(CTC)的计数,这些细胞来源于上皮细胞,即表现为CD45阴性(CD45-),EpCAM阳性(EpCAM+),细胞角蛋白8,18阳性(CK8,18+)和(或者)CK19阳性(CK19+)的细胞。
用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒检测的CTC,存在于外周血中,这类细胞与乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌*转移患者的无进展生存期和总生存期相关。
因此,CTC可以用来监控乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌患者的肿瘤细胞是否发生转移。
CTC应该进行持续检测,并与其他临床诊断方式联合起来监控上述肿瘤细胞的转移。
在肿瘤发生过程中的任何时间段,对CTC数量进行评估,可以预估肿瘤患者治疗后的无进展生存期和总生存期。
*在该研究中,转移性前列腺癌患者定义为血清标志物PSA在标准激素基准上,高于参考水平具有两次连续增加。
这些患者通常描述为具有非雄激素依赖性,激素抗性,或去势抗性的前列腺癌。
摘要说明肿瘤转移是指当肿瘤细胞从原发灶或转移灶剥落后,这些肿瘤细胞进入循环系统并在机体的远端定植生长的情况。
血液循环中的肿瘤细胞源自于上皮细胞,而这类细胞在血液循环系统中是极罕见的。
基于此,本公司推出的细胞自动化捕获仪(CELLTRACKS○R AUTOPREP○R System)通过预设程序并配合使用CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒(CELLSEARCH○R Kit)可以对样本进行标准化和自动化检测。
用CELLTRACKS II分析仪或者CellSpotter分析仪,一种半自动荧光显微镜,可以对肿瘤细胞进行分析和计数。
这种方法只计具有上皮细胞特性(EpCAM+, CK8,18+,和/或者CK19+)的细胞数量。
检测原理CellSearch循环肿瘤细胞检测试剂盒包括磁流体捕获试剂和荧光免疫试剂。
索莱宝 BC0515 线粒体呼吸链复合体Ⅰ NADH-CoQ 还原酶活性检测试剂盒说明书
微量法注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0515规格:100T/96S溶液的配制:1、 试剂二:临用前取一支加入1 mL 丙酮,充分溶解,2-8℃可保存1个月(1瓶粉剂即可做100T ,为延长试剂盒使用时间,故此产品多给一支);2、 试剂三:临用前加入0.1mL 丙酮,丙酮易挥发,使用完毕后注意封口,-20℃可保存2个月;3、 试剂三工作液:临用前根据用量将试剂三:丙酮=5μL :0.5mL (约50T )混合备用,现用现配;4、 试剂四:临用前取一支加入1.6mL 蒸馏水(约100T ),充分溶解,-20℃可保存1个月,避免反复冻融(1瓶粉剂即可做100T ,为延长试剂盒使用时间,故此产品多给一支);5、 工作液的配制:根据用量将丙酮:试剂二:试剂三工作液=250μL :250μL :500μL (约50T )混合备用,现配现用。
产品说明:复合体Ⅰ(EC 1.6.5.3)又称NADH-CoQ 还原酶或NADH 脱氢酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,是线粒体内膜中最大的蛋白复合物。
该酶催化一对电子从NADH 传递给CoQ ,同时可使O 2还原生成O 2-,是呼吸电子传递链上产生O 2-的主要部位。
测定该酶活性,不仅可以反映呼吸电子传递链(ETC )状态,而且可以反映活性氧(ROS )生成状态。
复合体Ⅰ能够催化NADH 脱氢生成NAD +,在340nm 下测定NADH 的氧化速率计算出该酶活性的大小。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量石英比色皿/ 96孔UV 板、研钵/匀浆器、细胞超声破碎仪、丙酮、冰和蒸馏水。
NAD + + CoQH 2 NADH (340nm ) + H + + CoQ Mitochondrial Complex I操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1.称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1.0 mL提取液一,用匀浆器或研钵于冰上快速匀浆(约30次)。
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用户自备
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(GMS12024):用于细胞脱离 完全细胞培养液(GMS12052):用于细胞操作所需的培养基 15 毫升锥形离心管:用于细胞操作的容器 1.5 毫升离心管:用于细胞染色的容器 血细胞计数仪:用于细胞计数 台式离心机:用于沉淀细胞 细胞流式仪:用于细胞荧光分析 (共聚焦)荧光显微镜:用于观察荧光细胞
5
c) 或使用荧光分光光度仪检测(定量检测):
1)移取 400 微升上述细胞悬液到 1 毫升比色杯
2)加入
微升 GENMED 保存液(Reagent D)
3)上下倾倒混匀数次
4)放进荧光分光光度仪:激发波长 540nm,散发波长 590nm――
RFU 增高,表明活性氧族(ROS)含量高
2
二、 直接法
活体组织氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)高质荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒 细胞内氧化应激活性氧(ROS)比色法定量检测试剂盒
细胞内氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂盒
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A
GMS10111.1 v.A
GENMED 细胞内氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
GENMED 细胞内氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氢溴化乙啶, 在细胞氧化条件下,产生红色荧光,来定量检测细胞内活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。 该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养 学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,活体检测,性能稳定。
500 微升
12 孔培养板
1 毫升
6 孔培养板
2 毫升
25cm2 细胞培养瓶
3 毫升
6. 根据细胞类型,调整 GENMED 染色工作液使用剂量(1:200 至 1:1000 容量比),避免过度染色 7. 建议细胞染色完成后,即刻进行细胞荧光分析
3
8. 本公司提供阳性对照甲萘醌溶液,观察细胞荧光增强现象
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关于订购详情或技术支持,欢迎来电、来函、传真或电邮―― GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A 大中华区分公司 上海杰美基因医药科技有限公司 上海市浦东新区张江高科技园区哈雷路 1011 号 301 室 邮编:201203
技术部电话:+86(021)58559577 X 101; 13661801385 市场部电话:+86(021)58559577 X 102; 13311661756
名称 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒 超氧化物歧化酶(SOD)细胞裂解样品制备试剂盒 超氧化物歧化酶(SOD)组织裂解样品制备试剂盒 超氧化物歧化酶(SOD)红细胞裂解样品制备试剂盒 胞浆超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)分离试剂盒 线粒体超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分离试剂盒 超氧化物歧化酶(SOD)标准曲线测定试剂盒 细胞内氧化应激活性氧(ROS)高质荧光测定试剂盒 细胞内氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒 活体组织氧化应激活性氧(ROS)高质荧光测定试剂盒
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的 GENMED 染色液(Reagent B)置入冰槽里融化,GENMED 稀释液
(Reagent C)放进 37℃恒温水槽里预热。然后移出
微升 GENMED 染色液(Reagent B)到新的 1.5
毫升离心管,加入
微升 GENMED 稀释液(Reagent C),混匀后,标记为 GENMED 染色工作液,置入暗
细胞总抗氧化能力(TAC)化学发光定量检测试剂盒 组织总抗氧化能力(TAC)化学发光定量检测试剂盒 食物总抗氧化能力(TAC)化学发光定量检测试剂盒 体液总抗氧化能力(TAC)化学发光定量检测试剂盒
线粒体损伤/氧化(NAO)荧光测定试剂盒 细胞超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒
40/100 次 50 次 50 次 100 次 20 次 50 次 50 次 50 次 50 次 50 次 20 次 20 次
6. 置入 37℃培养箱 1 分种
7. 振动培养瓶,使细胞脱落
8. 加入 4 毫升用户自备的完全细胞培养液
9. 移入 15 毫升锥形离心管,充分混匀(注意:悬浮细胞直接从这一步骤开始)
10.移取 10 微升在血细胞计数仪上进行细胞计数
11.移出 1 X 106 细胞到新的 15 毫升锥形离心管
12.放入台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g
1
实验步骤
一、 间接法
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的 GENMED 染色液(Reagent B)置入冰槽里融化,GENMED 稀释液
(Reagent C)放进 37℃恒温水槽里预热。然后移出
微升 GENMED 染色液(Reagent B)到新的 1.5
毫升离心管,加入
微升 GENMED 稀释液(Reagent C),混匀后,标记为 GENMED 染色工作液,置入暗
3. 操作时,须戴手套
4. 孵育时,必须避免光照
5. 本产品适合各种规格的培养细胞:载玻片,载玻片培养皿,35mm 培养皿,和各种培养孔板,须相应调
整操作用量:
操作容器
操作用量
载玻片
100 微升
载玻片培养皿
1 毫升
35mm 培养皿
1 毫升
96 孔培养板
100 微升
48 孔培养板
200 微升
24 孔培养板
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical; O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基(hydroxyl radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多, 将导致细胞衰老或凋亡。二氢溴化乙啶(Dihydroethidium bromide;Hydroethidine;DHE)是一种完全自由 通过细胞膜,并在细胞内长期滞留而不外漏的染色剂。一旦被超氧自由基阴离子氧化,二氢溴化乙啶转化 为溴化乙啶,进入细胞核,与DNA紧密结合,便产生荧光。据此测定细胞内活性氧族的浓度。
染色工作液到 1 个细胞培养孔,覆盖培养孔表面
4.放进 37℃细胞培养箱里孵育 20 分钟
5.小心抽去含有 GENMED 染色工作液的细胞培养液
6.小心沿着孔壁加入 500 微升 37℃预热的 GENMED 保存液(Reagent D)到细胞培养孔
7.选择下列方式之一进行操作:
(A)使用倒置荧光显微镜观察(定性检测):
产品内容
GENMED 清理液(Reagent A) GENMED 染色液(Reagent B) GENMED 稀释液(Reagent C) GENMED 保存液(Reagent D) 产品说明书
毫升 微升 毫升 毫升 1份
保存方式
保存 GENMED 染色液(Reagent B)在-20℃冰箱里,严格避免光照;其余的保存在 4℃冰箱里,有效保 证 12 月
13.小心抽去上清液
14.加入
毫升含有 GENMED 染色液(Reagent B)和 GENMED 稀释液(Reagent C)的 GENMED 染色工作
液,轻柔混匀
15.放进 37℃恒温水槽孵育 20 分钟,避免光照
16.放入台式离心机离心 5 分钟,速度为 300g室里。然后进行下列操作。
1. 准备 1 瓶 25cm2 细胞培养瓶的待测细胞
2. 小心抽去细胞培养液
3. 加入
毫升 GENMED 清理液(Reagent A)到细胞培养瓶,覆盖培养瓶表面
4. 小心抽去 GENMED 清理液(Reagent A)
5. 加入 1 毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液,铺满整个培养平面
规格 50 次 100 次 100 次 100 次 50 次 50 次 5次 20 次 100 次 8/20 次
4
GMS10016.4 GMS10016.5 GMS10016.6 GMS10067 GMS10074.1 GMS10074.2 GMS10053.1 GMS10053.2 GMS10053.3 GMS10053.4 GMS10017 GMS10096
微升 GENMED 保存液(Reagent D),轻柔混匀细胞颗粒群
19.放进冰槽里
20.选择下列方式之一进行操作:
a) 即刻进行细胞流式仪分析:波长 540nm 氩离子激光,观察 50000 个细胞以上――
波峰右移,表明活性氧族(ROS)含量高
b) 或使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测): 1)移取 10 微升上述细胞悬液到载波片上,盖上盖玻片 2)激发波长 540nm,散发波长 590nm―― 红色荧光增强,表明活性氧族(ROS)含量高
9. 本公司同时提供系列活性氧检测试剂产品 10.本公司提供细胞流式仪分析外包服务
质量标准
1. 本产品经鉴定性能长期稳定 2. 本产品经鉴定荧光显色清晰
使用承诺
杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货 后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定, 保证说明书所述的使用效果。在货到后 10 天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报 告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误 操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
GENMED DMEM 完全细胞培养液
规格 20 次 500 毫升 1 毫升 100 毫升 100 毫升 100/500 毫升 50 毫升 500 毫升