培养硝化细菌的方法
实验硝化细菌实验报告
一、实验目的1. 了解硝化细菌的基本特性及其在水质净化中的作用。
2. 掌握硝化细菌的培养方法及观察指标。
3. 探讨硝化细菌在不同环境条件下的生长情况。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：硝化细菌菌种、纯净水、氨水、亚硝酸钠、硝酸钾、氯化钠、葡萄糖、琼脂、pH试纸等。
2. 实验仪器：恒温培养箱、培养皿、移液枪、烧杯、试管、显微镜、pH计等。
三、实验方法1. 硝化细菌的分离与纯化（1）取一定量的土壤样品，加入无菌水，搅拌均匀。
（2）取适量土壤悬液，接种于琼脂平板上，加入氨水作为氮源。
（3）将平板放入恒温培养箱中培养，观察菌落生长情况。
（4）挑取单菌落，接种于新的琼脂平板上，重复步骤（3），直至获得纯化硝化细菌。
2. 硝化细菌的生长曲线测定（1）将纯化后的硝化细菌接种于装有适量纯净水的小试管中。
（2）分别加入不同浓度的氨水作为氮源，设置对照组（不加氨水）。
（3）将试管放入恒温培养箱中培养，定期取样，测定硝化细菌的OD值。
（4）以培养时间为横坐标，OD值为纵坐标，绘制硝化细菌的生长曲线。
3. 硝化细菌在不同环境条件下的生长情况观察（1）将纯化后的硝化细菌接种于装有适量纯净水的小试管中。
（2）分别加入不同浓度的亚硝酸钠、硝酸钾、氯化钠等物质，模拟不同环境条件。
（3）将试管放入恒温培养箱中培养，定期取样，观察硝化细菌的生长情况。
四、实验结果与分析1. 硝化细菌的分离与纯化实验过程中，成功分离出纯化硝化细菌，菌落呈白色，表面光滑。
2. 硝化细菌的生长曲线测定实验结果显示，硝化细菌在氨水浓度为0.5mg/L时生长速度最快，OD值达到最大值。
生长曲线呈典型的S型，表明硝化细菌在适宜的条件下具有较好的生长性能。
3. 硝化细菌在不同环境条件下的生长情况观察实验结果表明，硝化细菌在亚硝酸钠浓度为0.1mg/L、硝酸钾浓度为0.5mg/L、氯化钠浓度为0.5mg/L时生长情况较好，生长速度较快。
在较高浓度的亚硝酸钠、硝酸钾、氯化钠等物质下，硝化细菌生长受到抑制。
硝化菌的培养方法
硝化菌的培养方法硝化反应影响因素：1、温度在生物硝化系统中，硝化细菌对温度的变化非常敏感，在5～35℃的范围内，硝化菌能进行正常的生理代谢活动。
当废水温度低于15℃时，硝化速率会明显下降，当温度低于10℃时已启动的硝化系统可以勉强维持，硝化速率只有30℃时的硝化硝化速率的25%[1]。
尽管温度的升高，生物活性增大，硝化速率也升高，但温度过高将使硝化菌大量死亡，实际运行中要求硝化反应温度低于３８℃[2]。
2、pH值硝化菌对pH值变化非常敏感，最佳pH值是8.0～8.4，在这一最佳pH值条件下，硝化速度，硝化菌最大的比值速度可达最大值。
Anthonison认为pH对硝化反应的影响只是表观现象，实际起作用是两个平衡H++NH3 = NH4+和H++NO2-= HNO2中的NH3（FA）和HNO2（FNA），pH通过这两个平衡影响FA 和FNA的浓度起作用的。
3、溶解氧氧是硝化反应过程中的电子受体，反应器内溶解氧高低，必将影响硝化反应得进程。
在活性污泥法系统中，大多数学者认为溶解氧应该控制在1.5～2.0mg/L内，低于0.5mg/L则硝化作用趋于停止。
当前，有许多学者认为在低DO（1.5mg/L）下可出现SND现象。
在DO＞2.0mg/L，溶解氧浓度对硝化过程影响可不予考虑。
但DO浓度不宜太高，因为溶解氧过高能够导致有机物分解过快，从而使微生物缺乏营养，活性污泥易于老化，结构松散。
此外溶解氧过高，过量能耗，在经济上也是不适宜的。
4、生物固体平均停留时间（污泥龄）为了使硝化菌群能够在连续流反应器系统存活，微生物在反应器内的停留时间（θc）N必须大于自养型硝化菌最小的世代时间（θc）minN，否则硝化菌的流失率将大于净增率，将使硝化菌从系统中流失殆尽。
一般对（θc）N的取值，至少应为硝化菌最小世代时间的2倍以上，即安全系数应大于2。
5、重金属及有毒物质除了重金属外，对硝化反应产生抑制作用的物质还有：高浓度氨氮、高浓度硝酸盐有机物及络合阳离子等。
新开缸硝化细菌怎么加，硝化细菌有什么作用
新开缸硝化细菌怎么加，硝化细菌有什么作用
新开缸的鱼缸，通常在第一个月，每周都要添加一次硝化细菌。
说是硝化细菌，其实主要是培养用的原料，可以倒在鱼缸里，也可以倒入滤盒内，然后开启过滤就可以了。
由于硝化细菌属于好氧性细菌，而且很怕光，所以培养期间要注意关灯爆氧，这样就能建立起硝化系统。
一、新开缸硝化细菌怎么加
新开缸的鱼缸，通常在第一个月，每周都要添加一次硝化细菌。
说是硝化细菌，其实主要是培养用的原料，可以倒在鱼缸里，也可以倒入滤盒内，然后开启过滤就可以了。
由于硝化细菌属于好氧性细菌，而且很怕光，所以培养期间要注意关灯爆氧，这样就能建立起硝化系统。
二、硝化细菌有什么作用
1、降低氨浓度：硝化细菌的首要作用是降低水体中的氨浓度，氨是鱼缸中的残饵和粪便分解后的产物，对鱼儿有一定的毒害，也是鱼缸中腥臭味的来源，而硝化细菌可以将其吸收转化为亚硝酸盐，进一步转化为硝酸盐，从而避免影响鱼儿的健康。
2、分解有机物：硝化细菌是可以分解有机物的，但这并不是它的主要作用，因此效果也比较微弱，通常不会起到什么作用，除非缸内其它的异养菌含量比较低，它才会发挥分解的功效。
3、调整微生物平衡：硝化细菌是生态循环中必不可少的一部分，它可以调节微生物的平衡，一个稳定的细菌群对此很有帮助，从而也能稳定水质。
没想到吧？活性炭培养硝化细菌最快只需1天，比细菌屋快数倍
没想到吧？活性炭培养硝化细菌最快只需1天，比细菌屋快数倍最近疯疯的一位朋友，专门搞研究的，通过他的研究发现，活性炭培养硝化细菌的能力竟然是细菌屋的10倍以上！并且发现，在我们圈子内，做水产方面养殖的人都懂的，为什么我们还一直在水族店里面买细菌屋呢？有那么一瞬间，感觉自己陷入了深深的懊恼当中，似乎自己是被忽悠了，各位朋友，有没有这样的感觉呢？简单对比疯疯人了解了一下，确实在网上关于活性炭培养硝化细菌的论文，2011年的时候就有了，那时候是用于水产养殖，或者是处理被氨氮污染严重的水质的。
因为硝化细菌主要就是处理氨氮和亚硝酸盐的。
那么问题来了，为什么商家们会说细菌屋好呢？很简单的原因，利益驱动。
细菌屋的材料五花八门，而活性炭的原材料都比较贵啊！其实，细菌屋确实是可以用来培养硝化细菌。
因为硝化细菌的培养原理就是依附在有水流流过的多孔基质上面，而细菌屋就是人造出来的多孔结构的物质，至于不同颜色的细菌屋，常常被说成有含各种矿物质，实际上有没有，我们也不知道。
但是我们可以简单推算一下，答案是否定的，也就是没有！为什么呢？还是利益驱动，要知道，加入矿物元素得花多少成本呀！所以细菌屋呢！就是一个多孔结构的物质，生产成本极低，但是大家也不用担心，毕竟还是对生物没什么危害的，就是功能被稍微夸大了一些。
表面积对比而活性炭为什么能更快培养硝化细菌，甚至方法对了，指需要1天就可以呢？因为活性炭的孔状结构，或者说是内部空间，是由于本身原材料就决定了的，无需人为加工，所以更加好用，大家可以通过文章中的附图，应该可以很直观地了解到吧？！内部空隙横截面对比所以如果有机会的话，把家里的细菌屋，陶瓷环，换成活性炭吧！效果更好，而且更加健康。
希望这篇文章对大家有所启发，如果也有不同的观点，欢迎在评论区下方留言，我们一起来探讨，活性炭好，还是细菌屋、陶瓷环比较好。
试验数据对比。
硝化细菌的富集培养,分离纯化
硝化细菌的富集培养,分离纯化硝化细菌将氨氧化为硝酸的过程。
19世纪以前，人们把硝酸盐看作是化学作用的产物，即空气中的氧和氨经土壤催化形成。
1862年L.巴斯德首先指出硝酸盐的形成可能是微生物作用的结果。
1877年，德国化学家T.施勒辛和A.明茨用消毒土壤的办法，证实了氨被氧化为硝酸的确是生物学过程。
1891年，С.Н.维诺格拉茨基用无机盐培养基成功地获得了硝化细菌的纯培养，最终证实了硝化作用是由两群化能自养细菌进行的。
先是亚硝化单胞菌将铵氧化为亚硝酸；然后硝化杆菌再将亚硝酸氧化为硝酸。
这两群细菌统称硝化细菌。
其作用过程如下：硝化细菌从铵或亚硝酸的氧化过程中获得能量用以固定二氧化碳，但它们利用能量的效率很低，亚硝酸菌只利用自由能的5～14％；硝酸细菌也只利用自由能的5～10％。
因此,它们在同化二氧化碳时，需要氧化大量的无机氮化合物。
土壤中硝化细菌的数量首先受铵盐含量的影响，一般耕地里，每克土中只有几千至几万个。
添加铵盐即可使其数量增至几千万个。
土壤中性偏碱，通气良好，水分为田间持水量的50～70％，温度为10～30℃时，最适宜硝化细菌的生长繁殖，铵盐也能迅速被转化为硝酸盐。
自然界中,除自养硝化细菌外,还有些异养细菌、真菌和放线菌能将铵盐氧化成亚硝酸和硝酸，异养微生物对铵的氧化效率远不如自养细菌高，但其耐酸，并对不良环境的抵抗能力较强，所以在自然界的硝化作用过程中，也起着一定的作用。
--------------------------------------------------------------------------------氨在微生物作用下氧化为硝酸的过程。
通常发生在通气良好的土壤、厩肥、堆肥和活性污泥中。
作用机理硝化作用由自养型细菌分阶段完成：第一阶段为亚硝化，即氨氧化为亚硝酸的阶段。
参与这个阶段活动的亚硝酸细菌主要有5个属：亚硝化毛杆菌属(Nitrosomonas) ；亚硝化囊杆菌属(Nitrosocystis)；亚硝化球菌属(Nitrosococcus)；亚硝化螺菌属(Nitrosospira)和亚硝化肢杆菌属(Nitrosogloea)。
硝化菌的培养方法
硝化菌的培养方法硝化反应影响因素：1、温度在生物硝化系统中，硝化细菌对温度的变化非常敏感，在5～35℃的范围内，硝化菌能进行正常的生理代谢活动。
当废水温度低于15℃时，硝化速率会明显下降，当温度低于10℃时已启动的硝化系统可以勉强维持，硝化速率只有30℃时的硝化硝化速率的25%[1]。
尽管温度的升高，生物活性增大，硝化速率也升高，但温度过高将使硝化菌大量死亡，实际运行中要求硝化反应温度低于３８℃[2]。
2、pH值硝化菌对pH值变化非常敏感，最佳pH值是8.0～8.4，在这一最佳pH值条件下，硝化速度，硝化菌最大的比值速度可达最大值。
Anthonison认为pH对硝化反应的影响只是表观现象，实际起作用是两个平衡H++NH3 = NH4+和H++NO2-= HNO2中的NH3（FA）和HNO2（FNA），pH通过这两个平衡影响FA 和FNA的浓度起作用的。
3、溶解氧氧是硝化反应过程中的电子受体，反应器内溶解氧高低，必将影响硝化反应得进程。
在活性污泥法系统中，大多数学者认为溶解氧应该控制在1.5～2.0mg/L内，低于0.5mg/L则硝化作用趋于停止。
当前，有许多学者认为在低DO（1.5mg/L）下可出现SND现象。
在DO＞2.0mg/L，溶解氧浓度对硝化过程影响可不予考虑。
但DO浓度不宜太高，因为溶解氧过高能够导致有机物分解过快，从而使微生物缺乏营养，活性污泥易于老化，结构松散。
此外溶解氧过高，过量能耗，在经济上也是不适宜的。
4、生物固体平均停留时间（污泥龄）为了使硝化菌群能够在连续流反应器系统存活，微生物在反应器内的停留时间（θc）N必须大于自养型硝化菌最小的世代时间（θc）minN，否则硝化菌的流失率将大于净增率，将使硝化菌从系统中流失殆尽。
一般对（θc）N的取值，至少应为硝化菌最小世代时间的2倍以上，即安全系数应大于2。
5、重金属及有毒物质除了重金属外，对硝化反应产生抑制作用的物质还有：高浓度氨氮、高浓度硝酸盐有机物及络合阳离子等。
培养硝化菌
培养硝化菌了，关键条件就是3个：1、氧气；2温度；3、场所氧气，这个就比较繁琐一些，因为硝化菌要吸附在固体表面，并不随波逐流，如果鱼缸里的水是静止的，硝化菌可能会消耗完自己周围氧气之后就死亡，所以为了给硝化菌提供充足的氧气，必须让水流动起来，一定要让富含氧气的水冲刷硝化菌栖息的场所，以此为它们提供氧气，换句话说就是“水中造流”。
这就需要水泵了，水泵的种类非常多，这个后面再说吧!温度，可能比较好解决，因为饲养热带鱼的话都会对水进行加热，这个可以通过加热棒进行维持就好了。
场所，场所就是鱼缸里的固体表面，鱼缸的玻璃内壁可以算是，但是这么点面积是远远不够的，必须人为增加一些固体表面，比较廉价的方式是底砂。
砂子的颗粒非常小，沙粒之间的空隙就是固体表面，可以吸附不少硝化菌，制造水流冲刷底砂表面可以培养硝化菌，但是底砂有个缺陷——不透水，因为水流冲刷底砂表面，只有表层底砂可以过氧，深层的底砂则比较难，而且底砂的表面积也是比较有限的，还是推荐一个人造材料——陶瓷环。
陶瓷环可能是很多没养过鱼的朋友没听说过的玩意，陶瓷环确实是陶瓷烧制成的，利用发泡工艺，在烧制过程中形成了许多许多的小空隙，其表面积非常丰富，是硝化菌理想的栖息场所，陶瓷环可以放置在水流经过的任何地方。
但是这东西并不大美观，所以一般大家都是把陶瓷环放在过滤槽里，鱼缸内通常是不放的，如果不怕影响美观，市面上能够提供场所的滤材很多，比如生化棉\科技环\细菌屋等等，但是理论都是一样的，谁的表面积越大效果自然越好。
好了，已经为硝化菌提供了温度、氧气和场所，是不是算大功告成了呢?当然不是，提供的是硝化菌的生存条件，还需的就是硝化菌食物——阿摩尼亚。
是的，就是这个造成观赏鱼死亡的罪魁祸首!如果是一个新鱼缸，新缸新水肯定是没有阿摩尼亚的，那么就得自己制造一些，最简单的办法就是放一条鱼进来，让它吃喝拉撒几天。
随着时间推进，大概2-3天它的排泄物就会成为阿摩尼亚，如果缸小的话会很容易观察到水质已经不如第一天那么透亮了，说明已经起效了。
新缸如何培养硝化菌
新缸如何培养硝化菌新手新缸如何培养硝化菌，必须买来放缸里吗不想买也可以，打开过滤，一直正常运转，放点食物残渣，最好是鱼虾类的，在缸里一段时间后水清了放生物进去，隔几天放一种，鱼虾不死水不混，说明硝化系统基本建立了新缸这个过程很慢，新手的话建议最少两周加硝化细菌只是加快这个速度而已，整体环境不行加进去也会死的养水比较重要，加硝化细菌也是为了养水草缸开缸之后如何培养硝化细菌百科的说法是：硝化细菌完全无需专门购买，鱼缸中氧含量和有机物多达到正常水平后，1周左右就可以建立起稳定的菌落。
硝化细菌也不是药物，一旦稳定之后，只要环境不发生剧烈变化（如放入杀菌剂、或开水倒入），就可以长期不断繁殖，完全无需添加。
个人总结如下：如果仅靠空气和水中的自有的硝化细菌，达到稳定饱和状态可能需要1至2个月的时间，使用人工添加的硝化细菌可加快这个进程，但务必购买优质产品；构建良好的硝化细菌生存繁殖的环境比定期添加硝化细菌更重要，环境不到位加多少硝化细菌下去都是浪费。
硝化细菌工作需要下述基本条件：（1）温度适宜，最佳工作温度在24-26度，生存温度大概在23-29度；（2）缸内无杀菌的药剂，无杀菌灯（缸内菌群稳定后，不照射滤材和鱼类的前提下可以使用杀菌灯）。
另外，余氯高的自来水也是有影响的，所以要困水，能晒更好；（3）要有可供硝化细菌吸附的微孔滤材，常用的有陶瓷环、细菌屋、生物环、珊瑚石之类的；（4）滤材需有水流经过，而且过滤的水流一定要是先经过过滤棉后经过滤材；（5）滤材需避光，滤材放在避光盒内（不必十分严格，稍透一点光影响不大），否则细菌难以繁殖；（6）氧气，水中溶氧要充足；（7）缸里要有鱼类等生物，硝化细菌也要有食物来源才能存活。
新手如何在开缸时培养硝化菌？罗汉鱼(详情介绍)硝化菌是水族箱中比较重要的一个标志，影响到观赏鱼的健康。
其实在为水族箱开缸时就需要注意硝化菌的培养了，这样才能让观赏鱼适应水质环境。
那么应该如何在开缸时做好硝化菌的培养呢？1、建议开缸盖或用气泵24小时打气（如室内无暖气又养热带鱼，会耗很多电）同时过滤24小时开，1个月后鱼无事，硝化90％以上建立了。
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培养硝化细菌的方法
培养硝化细菌的方法有以下几种：
1. 液体培养方法：将硝化细菌接种到含有合适营养物质的液体培养基中，如含有氨、硝酸盐等物质的液体培养基。
然后放在适宜的温度和pH下培养，提供氧气，维持适宜的搅拌速度，促进硝化细菌生长和代谢。
2. 固体培养方法：将硝化细菌接种在含有营养物质的固体培养基上，如琼脂平板。
然后放在适宜的温度和pH下培养，提供氧气，促进硝化细菌在固体培养基上的生长和代谢。
3. 微生物接种方法：在硝化污水处理系统中，可以通过在进水口处添加硝化细菌接种物，将硝化细菌引入系统中进行自然生长和繁殖。
接种物可以采集自其他硝化污水处理系统或者通过纯培养的方法获得。
4. 环境分离方法：从硝化细菌的自然生境中，如土壤、水体等样品中，通过分离提取的方法，将硝化细菌分离出来，并进行单菌株培养。
无论采用哪种方法，都需要注意营养物质的浓度、温度、pH、气体供应等条件的控制，以促进硝化细菌的生长和代谢。