微生物来源的昆虫几丁质酶抑制剂的筛选与分离纯化
微生物新药物的筛选流程
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产几丁质酶的筛选及活力测定
产几丁质酶的筛选及活力测定一、实验材料1.菌种：白僵菌，或其他菌种及土壤采样等(菌种接种于PDA斜面上，28℃，80％RH 培养14 d后分别置于4℃和20℃备用。
)2.试剂：DNS试剂:（称取3，5-二硝基水杨酸3．15 g，加水500 mL。
，搅拌5 s，水浴至45。
然后逐步加入100 mL 0．2g/mL的氢氧化钠溶液，同时不断搅拌。
直到溶液清澈透明(注意：在加入氢氧化钠过程中，溶液温度不要超过48℃)。
再逐步加入四水酒石酸钾钠91．0 g苯酚2．5 g和无水亚硫酸钠2．5 g。
继续45"C水浴加热，同时补加水300 mL，不断搅拌，直到加入的物质完全溶解。
停止加热，冷却至室温后，用水定容至1000 mL。
用烧结玻璃过滤器过滤，取滤液，储存在棕色瓶中，避光保存。
室温下存放7 d后可以使用。
) 几丁质酶基础培养基(g／L)：葡萄糖5．09，蛋白胨5．09，KH2P04、KCI、MgS04·7H20各0．59，FeS04·2H20 0．1 g，pH 7．0。
几丁质酶诱导培养基(g／L)：蛋白胨5．09，KH2P04、KCI、MgS04·7H20各0．59，ZnS04·7H202 0．01 g，胶体几丁质10 ml，pH 7．0。
（胶体几丁质固体培养基。
0.5 g K2HPO4，0.5 gKH2PO4，0.5 g MgSO4·H2O，0.1 g FeSO4·7H2O，0.1 gZnSO4·7H2O 500 ml 1%胶体几丁质，500 ml蒸馏水，15 g 琼脂，pH7.2，121℃灭菌15 min，冷却至50℃左右倒平板）马铃薯培养基(PDA)；去皮的马铃薯200 g切块，沸水煮30 min，纱布过滤，20 g蔗糖，209琼脂，加热至全部溶解，定容至1 L。
二、筛选1.初筛采用平板透明圈法。
用0．1 mL孢子悬液(1×107／mL)滴于几丁质平板的中央(每个样品重复3次)，28℃培养7d，其菌落周围有透明圈出现。
微生物药物学试题及答案
微生物药物学试题及答案一、单项选择题（每题2分，共40分）1. 微生物药物学是研究（）的科学。
A. 微生物的分类和鉴定B. 微生物的生理和生态C. 微生物的致病性和防治D. 微生物来源的药物答案：D2. 下列哪项不是微生物药物的特点（）。
A. 生物活性强B. 来源广泛C. 化学结构简单D. 作用机制多样答案：C3. 微生物药物学的主要研究内容包括（）。
A. 微生物药物的筛选B. 微生物药物的制备C. 微生物药物的药理作用D. 以上都是答案：D4. 微生物药物的筛选不包括（）。
A. 菌种的分离和鉴定B. 菌种的培养和发酵C. 菌种的基因工程改造D. 药物的临床试验答案：D5. 下列哪项不是微生物药物的制备过程（）。
A. 菌种的筛选B. 发酵过程的控制C. 药物的提取和纯化D. 药物的临床试验答案：D6. 微生物药物的药理作用研究不包括（）。
A. 药物的体内外活性评价B. 药物的作用机制研究C. 药物的毒理学研究D. 药物的生产工艺研究答案：D7. 下列哪项不是微生物药物的分类（）。
A. 抗生素B. 免疫调节剂C. 激素类药物D. 抗肿瘤药物答案：C8. 抗生素是一类具有（）的微生物次级代谢产物。
A. 抗菌活性B. 抗病毒活性C. 抗肿瘤活性D. 免疫调节活性答案：A9. 下列哪项不是抗生素的特点（）。
A. 低毒B. 高效C. 广谱D. 耐药性答案：D10. 下列哪项不是抗生素的作用机制（）。
A. 抑制细菌细胞壁合成B. 干扰细菌蛋白质合成C. 破坏细菌核酸结构D. 促进细菌生长答案：D11. 免疫调节剂是一类具有（）的药物。
A. 抗菌活性B. 抗病毒活性C. 调节免疫反应活性D. 抗肿瘤活性答案：C12. 下列哪项不是免疫调节剂的作用机制（）。
A. 增强机体免疫功能B. 抑制机体免疫功能C. 调节细胞因子的产生D. 促进细胞分裂答案：D13. 抗肿瘤药物是一类具有（）的药物。
A. 抗菌活性B. 抗病毒活性C. 抗肿瘤活性D. 免疫调节活性答案：C14. 下列哪项不是抗肿瘤药物的作用机制（）。
几丁质合酶抑制剂作为抗真菌药物的研究进展
几丁质合酶抑制剂作为抗真菌药物的研究进展
代猛;裘娟萍;汪琨
【期刊名称】《科技通报》
【年(卷),期】2017(33)3
【摘要】近几十年来,致病真菌的种类越来越多,对人类的威胁越来越大。
随着抗真菌药物的不断发展,几丁质合酶作为一个安全有效的作用靶点也进行了深入研究,虽然几丁质合酶抑制剂作为抗真菌药物并未有效地应用于临床,但是前景巨大。
目前国内外对几丁质合酶抑制剂的筛选、鉴定都十分重视,并对其作为抗真菌药物的发展及可行性做出了很多努力。
【总页数】6页(P71-76)
【关键词】几丁质合酶抑制剂;抗真菌;筛选;合成
【作者】代猛;裘娟萍;汪琨
【作者单位】浙江工业大学生物工程学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q939.9
【相关文献】
1.药学——药物化学——芳基β-二酮酸类HIV-1整合酶抑制剂研究进展 [J], 王超;赵桂森
2.环氧合酶/5-脂氧合酶双效抑制剂研究进展 [J], 任小姗;陈志涛;陈刚
3.环氧合酶/5-脂氧合酶双重抑制剂的研究进展 [J], 李海涛;仲伯华
4.环氧合酶-2抑制剂类抗肿瘤药物研究进展 [J], 黄晓静;姚和权;吴晓明;除进宜
5.抗真菌药物靶标及其抑制剂的研究进展 [J], 徐波;蒋琰;张万年;盛春泉
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中国鲎几丁质酶的酶学性质研究
中国鲎几丁质酶的酶学性质研究林建城;王丽英;林娟娟【摘要】以中国鲎为材料,自内脏中提取几丁质酶(EC3.2.1.14),研究其酶学性质.结果表明,中国鲎几丁质酶的最适pH为5.4,最适温度为55℃;酶在pH4.6～6.0区域较为稳定,在20～60℃内具有较好的热稳定性.以胶体几丁质为底物测得中国鲎几丁质酶的米氏常数为2.175 m g/m L,最大反应速度为1.456μmol/(mL·min).金属离子Li+、Na+、K+、Mg2+和Fe2+对几丁质酶活力无影响;Ca2+和Ba2+对酶有微弱的激活作用;Co2+、Cu2+和Fe3+在低浓度时对酶有激活作用,随浓度增大则表现为抑制作用;Ni2+、Mn2+、Al3+、Cd2+、Pb2+、Zn2+和Hg2+对酶均具有不同程度的抑制作用,以Hg2+的抑制作用最显著,10 mmol/L Hg2+会使几丁质酶失活83.0％.甲醇、乙醇、异丙醇和正丙醇对几丁质酶的抑制作用均呈浓度效应,甲醇对酶的抑制作用较强;丙酮对酶有激活作用,而二氧六环和二甲亚砜在低浓度下对酶有微弱的激活作用,随浓度升高则表现为抑制作用.说明中国鲎几丁质酶活力易受环境中酸碱度、金属离子和有机溶剂的调控.【期刊名称】《水产科学》【年(卷),期】2019(038)005【总页数】8页(P702-709)【关键词】中国鲎;几丁质酶;酶学性质;金属离子;有机溶剂【作者】林建城;王丽英;林娟娟【作者单位】莆田学院环境与生物工程学院 ,福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室 ,福建莆田351100;莆田学院环境与生物工程学院 ,福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室 ,福建莆田351100;莆田学院环境与生物工程学院 ,福建省新型污染物生态毒理效应与控制重点实验室 ,福建莆田351100【正文语种】中文【中图分类】S917Broadway等[1]根据几丁质酶作用机理不同，认为其至少包含内切几丁质酶(EC3.2.1.14)、外切几丁质酶和具外切酶性质的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52，NAGase)等3种组分。
几丁质合成与水解酶的抑制剂及抑制机理
几丁质合成与水解酶的抑制剂及抑制机理农业虫害和病害威胁着农业生产与食品安全。
高效且环境友好的农药是治理农业病虫害的必然选择。
几丁质是植物致病真菌、寄生线虫和农业害虫在生长发育过程中所必需的结构多糖,但是几丁质不存在于高等植物和哺乳动物体内。
如果通过小分子化合物抑制几丁质合成或水解过程中的关键酶,可以干扰病虫害的几丁质代谢,但是不影响高等植物和哺乳动物,从而实现对农作物的保护。
几丁质的合成与水解需要β-N-乙酰己糖胺酶、几丁质酶和几丁质合酶等一系列几丁质代谢关键酶参与。
本论文分别针对昆虫β-N-乙酰己糖胺酶、线虫几丁质酶和真菌几丁质合酶进行了抑制剂的筛选与抑制机理研究,并取得以下主要成果:1)真菌几丁质合酶抑制剂及抑制机理:真菌是重要的植物致病微生物。
论文以模式真菌酿酒酵母几丁质合酶为对象,建立了真菌几丁质合酶抑制剂筛选的方法,筛选得到了一系列新型几丁质合酶抑制剂。
其中,化合物S-16对酿酒酵母几丁质合酶较经典几丁质合酶抑制剂尼克霉素Z的抑制活性高出了 2.5倍。
并且,这些几丁质合酶抑制剂在100 μg/mL浓度下均表现出了对禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)、灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)和葫芦科刺盘孢菌(Colletotrichum lagenarium)等植物致病真菌的抑制活性。
接着,根据同源蛋白纤维素合酶BcsA/B与UDP的复合物晶体结构,本论文建立了酿酒酵母几丁质合酶ScCHS1与UDP的结构模型。
进而,基于几丁质合酶抑制剂与几丁质合酶底物UDP-GlcNAc的结构相似性,推测了抑制剂与几丁质合酶活性中心的结合方式,即构成抑制剂骨架结构的尿苷-酰腙基团、GlcNAc模拟基团和疏水烷基基团三个基团,分别作用于几丁质合酶催化中心的UDP结合位点、GlcNAc结合位点和受体寡糖结合通道的疏水入口。
2)昆虫β-N-乙酰己糖胺酶抑制剂及抑制机理:亚洲玉米螟(Ostrinia furnacalis)是重要的农业害虫。
昆虫微生物分离方法
昆虫微生物分离方法
昆虫微生物分离方法主要包括以下步骤：
1. 选择适当的培养基：根据需要分离的微生物的特性，选择适合该微生物生长的培养基。
2. 采集昆虫样品：从昆虫体表、肠道等部位采集样品。
3. 制备昆虫微生物悬液：将采集的昆虫样品放入无菌的容器中，加入适量的无菌水或生理盐水，用玻璃棒搅拌均匀，制备成悬液。
4. 分离微生物：将悬液倒入适宜的培养基中，培养一段时间后，观察是否有微生物生长。
若微生物生长，则进行下一步纯化。
5. 纯化微生物：在分离出初步的微生物后，可以通过划线分离法、涂布分离法等方法进行纯化，使微生物的纯度提高。
6. 鉴定微生物：通过形态观察、生理生化实验、分子生物学等方法对分离得到的微生物进行鉴定，确定其种类和特性。
7. 保存微生物：将分离纯化得到的微生物在适宜的培养基中培养，并进行低温或冷冻保存，以备后续的研究或生产使用。
需要注意的是，昆虫体表的微生物种类和数量较多，分离过程需要注意无菌操作，避免污染。
同时，不同种类的昆虫可能携带不同的微生物，因此在进行昆虫微生物分离时，需要根据具体的昆虫种类和实验目的进行操作。
昆虫Ⅱ家族几丁质酶的生理功能、结构特征及其抑制剂研究进展
昆虫Ⅱ家族几丁质酶的生理功能、结构特征及其抑制剂研究进
展
谢慧杰;丁艺;胡雪;杨青;刘田
【期刊名称】《农药学学报》
【年(卷),期】2024(26)2
【摘要】昆虫几丁质酶可以降解昆虫体壁和围食膜中的几丁质,在昆虫蜕皮等生命活动中发挥重要功能。
作为参与昆虫几丁质降解系统的关键酶,Ⅱ家族几丁质酶(ChtII)是少见的多结构域、性质复杂的几丁质酶。
对昆虫中编码ChtⅡ的基因沉默会导致昆虫蜕皮失败及死亡率增加。
对ChtⅡ的生化性质及晶体结构分析表明,其在几丁质降解系统中起到了“先锋及攻坚”的作用。
因此,ChtⅡ有望成为新的杀虫剂靶标。
本文综述了近年来关于ChtⅡ的生理功能、结构特征及其抑制剂的研究成果,可为基于昆虫几丁质酶的新杀虫剂创制提供参考。
【总页数】10页(P224-233)
【作者】谢慧杰;丁艺;胡雪;杨青;刘田
【作者单位】大连理工大学生物工程学院;中国农业科学院农业基因组研究所农业农村部基因组分析实验室;中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】TQ453
【相关文献】
1.微生物来源的昆虫几丁质酶抑制剂的筛选与分离纯化
2.由真菌产生的大分子昆虫几丁质酶抑制剂的筛选和活性鉴定
3.昆虫几丁质酶基因家族功能研究进展
4.昆虫几丁质合成酶及其抑制剂
5.几丁质脱乙酰酶的生物学功能、三维结构及其抑制剂的研究进展
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矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。